Hacia dónde vamos en el laboratorio de embriología
Transcripción
Hacia dónde vamos en el laboratorio de embriología
Co ng re so Na Haciaci dónde vamos en el on al de embriología laboratorio de lL ab or ato Alcalá Jose Antonio Castilla r UGC Laboratorio Clinico y UGC de Obstetriciaio y Ginecologia HU Virgen de las Nieves, Granada C lín MasVida Reproducción, Sevilla ico 20 CEIFER, Granada 14 Co ng futuro impresionante Un re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ngUn Futuro decepcionante re so Ron &NGo VisteCheap ac ion al de lL ab or ato rio Cl íni co 20 14 Co ng re so Na cio n Objetivo al de lL ab or ¿Hacia donde vamos? ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng • • • • Objetivos re so Sistemas N de Calidad – Formación,acompetencia certificación c – Indicadores io na – Trazabilidad l de Automatización lL – Cultivo ab – Evaluación embrionaria or – Vitrificación ato Estandarización rio Seguridad – Transferencia de embrion únio – DGP: CGH y Blasto – Screening genetico donantes y parejas • Globalizacion Cl ín ico 20 14 Co ng re so Na cio n RD 1301/2006 Ley 14/2006 DIRECTIVA 2006/17/CE DE LA COMISIÓN al de 8 de febrero de 2006 por la que se aplica la Directiva 2004/23/CE del Parlamento Europeo y del Consejo en lo relativo a determinados requisitos técnicos para la donación, la obtención y la evaluación de células y tejidos humanos de lL ab or ato Norma PNE 179007 rio SISTEMAS DE GESTION DE CALIDAD EN EL LRHA Cl ín ico 20 14 Co ng re so Na cio n al de PNE 179007: Servicios Sanitarios. Sistema de gestión de la calidad para laboratorios de reproducción asistida. lL ab or ato rio Cl ín Publicación ico oficial de la norma2UNE: 01 año 2013 4 Co ng NORMA UNE 179007:2013 re so Na UNIDADES DE cioRHA na ld el NORMATIVA UNE: Sistema L de gestión de la calidad para ab asistida. laboratorios de reproducción humana or atdeo RHA • Normativa específica del laboratorio • Amplia la Norma ISO 9001. r • Recoge las inquietudes manifestadas porio los profesionales Cl dedicados al LRHA íni • Avales: Sociedades Científicas, Unidades de RHA, co administración, universidades… 20 14 Documento final, fruto del consenso Co ng NORMA UNE 179007:2013 re so Na cio n GT9 ASEBIR: Manuel Ardoy (Coordinador) AENOR: Cristina Hernán (Secretario) AENOR: Luis Enrique Carretero y Anselmo Martín (Dirección Técnica de Certificación) ASEBIR-SEF: Nereyda Ortiz (Coordinador) al ASEBIR: Antonia Expósito ASEBIR: Antonio González Utor ASESA. Luis Bassas CEIFER Control y Calidad: Abel Carmona CEIFER Control y Calidad: Sandra Ortiz Centro Médico Téknon: Mark Grossmann Clínica Tambre: Marta Gago Colegio Biólogos de Cataluña: Marta Luna García Grupo Anacer: Fernando Marina y Pedro Delgado Grupo Hospitalario Quirón: Eva López Grupo IVI: María José de los Santos Centro de Medicina Embrionaria: Silvia Fernández Instituto Bernabéu: Jorge Ten Instituto Universitario de Evaluación Sanitaria: José Simón Instituto Universitario Dexeus: Montserrat Boada SEF: Isabel Pons SEF: José Antonio Castilla SEF: Nagore Uriarte Soc. Española de Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Carmen Mar Soc. Española de Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Silvia Izquierdo Universidad Politécnica de Valencia: Inmaculada Molina de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 NORMA UNE 179007:2013 Co ngSistema de Gestión y Medición del Proceso: re Indicadores Comunes de Calidad so N 8.2 Seguimiento yamedición cio 8.2.3 Seguimiento y medición de los procesos na l d DEBE: La organización (el laboratorio) el La bo ra tor los procesos • Definir y establecer indicadores de calidad, para io operativos. Cl íni co 20 14 NORMA UNE 179007:2013 Co ngSistema de Gestión y Medición del Proceso: re Indicadores Comunes de Calidad so LRHA debe establecer, Na como mínimo, los siguientes indicadores de proceso: cio FIV/ICSI: na ld el La bo ra tor Transferencia preembriones descrioconservados: io Cl íni co 20 14 Porcentaje de supervivencia ovocitos descrioconservados. • Porcentaje de fecundación ovocitaria. • Tasa de implantación. Ovocitos propios/donados y fresco/descrioconservados • Número preembriones transferidos por embarazo. • Porcentaje de embriones utilizados. Ovocitos propios/donados • Porcentaje de supervivencia. Ovocitos propios/donados y preembriones/blastocistos • Porcentaje de gestación clínica por transferencia. • Tasa de implantación. Ovocitos propios/donados Ovocitos propios/donados Co UGC Laboratorio Clínico, HU Virgen de las Nieves, Granada ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ESPECIFICACIONES DE CALIDAD ng re so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni co 20 14 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng Registro SEF y MSPSI re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Porcentaje fecundación normal (ICSI) Co 2009 SEF Nivel n Con ovocitos propios gr Deseable es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Porcentaje fecundación normal (ICSI) Co 2009 SEF Nivel n Con ovoc.donados g Deseable re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Especificacion calidad: nivel deseable ng % Fecundacion ovocitaria 2009-2012 r es oN ac ion al de lL ab or [email protected] ato rio ESTABLE Cl ín Cambios técnicos NO significativos ico 20 14 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Especificacion calidad: nivel deseable Supervivencia embrionaria crioconservacion ng re 2009-2012 s oN ac ion al de lL ab oNO ra ESTABLE t or tecnicos significativos: Cambios iovitrificacion Cl íni co 20 14 [email protected] Co ng re so Na cio n RD 1301/2006 Ley 14/2006 DIRECTIVA 2006/17/CE DE LA COMISIÓN al de 8 de febrero de 2006 por la que se aplica la Directiva 2004/23/CE del Parlamento Europeo y del Consejo en lo relativo a determinados requisitos técnicos para la donación, la obtención y la evaluación de células y tejidos humanos de lL ab or ato Norma PNE 179007 rio SISTEMAS DE GESTION DE CALIDAD EN EL LRHA Cl ín ico 20 14 Co ng EUROCET re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Futuras Directivas Europeas ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng Codigo Unico Europeo (40 digitos) r es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng Codigo Unico Europeo (40 digitos) r es oN ac ion al SEMEN de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 CoSistema de etiquetado en Embriología ng re so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni co 20 14 CoSistema de etiquetado en Embriología ng Etiqueta Radiofrecuencia re so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni co 20 14 CoSistema de etiquetado en Embriología ng Etiqueta Radiofrecuencia re so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni co 20 14 Co ng RFID a -196°C re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 CoSistema de etiquetado en Embriología ng Chip de sílice re so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni co 20 14 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Seguridad crioconservación: ng re esterilización Nitrogeno líquido s oN ac ion al Vitrificación de lL ab or ato rio Cl ínTanques ico almacenamiento 20 14 Co Medios de cultivo nFuturo: gr es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl íni co 20 14 Co Futuro: Sistemas de cultivo ng re so Na Presente cio n al Futuro de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Microfluidos: C on FIV gr es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Microfluidos: C on Cultivo embrionario gr es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl íni c o2 01 4 AUTOMATIZACION: selección embrionaria Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng ¿Qué hacíamos antes? re s oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Page 39 Co ¿Qué hace la morfocinética ng re embrionaria? s oN ac > 1500 imágenes en 3 dias de cultivo ion al de lL ab or ato rio Cl íni co 20 14 40 Co ng re time-lapse para evaluar la Sistemas so calidad deNalos embriones cio n al de lL ab or ato rio EmbryoScope® de Unisense Fertilitech http://www.fertilitech.com/ Cl ín ico 20 Primo Vision de Vitrolife Eeva™ de Auxogyn http://www.vitrolife.com/en/Fertili ty/Products/Primo-Vision-TimeLapse-System/ http://www.auxogyn.com/eeva. php 14 41 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Montag et al., 2014 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 Montag et al., 2014 14 UTILIDAD C on MORFOCINETICA Elegidas según criterios de inclusión (n = 90) gr es oN ac ion ESGRE Grupo control Rechazan eSET (n=6) al Analizadas eSET (n=84) de Pérdidas lL ab or ato rio n= 57 57 pacientes que se realizaron eSET con criterios de selección morfológicos n= 27 Cl ín • Gestación espontánea (n= 9) • 2 ciclos cancelados (n= 1) • Riesgo de SHO (n= 3) • Sólo 1 embrión para TE (n= 12) • No ovocitos maduros (n= 1) • Motivos personales (n= 1) ico 20 14 Co RESULTADOS ng TE ge st ac /c rio % % ge st /f re sc o ESG re RE so Morfología Morfocinética Na cio 50 43,8 nal Aumento relativo en fresco 36,4 de (eSET)= 20,3% 40 l23,7 La 30 bo 17,6 ra ¿Elegimos mejor el primer 20 t oembrión? 10 rio Cl 0 íni co 20 14 CRESULTADOS on gr es Grupo Morfocinética o N Grupo Morfología No a 52,9 ci50 significativo 60 on al 50 de lL 40 ab or 30 ESG RE Aumento relativo en tasa de gestación acumulada = 5,8% ato rio 20 10 0 Tasa gestación acumulada/punción Cl ín ico 20 14 Co ng Automatización selección embrionaria re so Técnica Na cio n Donde aplicarlo al •Genómica •Transcriptómica •Proteómica •Metabolómica de • Liquido folicular l L • Célula Granulosa ab • oMedio de cultivo ra tor embrionaria io Cl ín Bioinformática ico 20 14 Co ng Automatización: selección embrionaria re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 congelación semen CAUTOMATIZACION: on gr es Pajuela Semen oN • Rellenaac i on • Sella al de • Etiqueta lL ab or ato rio Cl íni co 20 14 AUTOMATIZACION: ICSI Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng Automatización ICSI re s oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng Automatización ICSI re s oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 AUTOMATIZACION: ICSI Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 vitrificación embrionaria CAUTOMATIZACION: on gr es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl íni co 20 14 Co Diagnóstico genetico ng rePreimplantacional (DGP) s oN ac ion al d el • Momento de Biopsia embrionaria La bo ra tor • Técnica de análisis genético io Cl íni co • Material a estudiar 2 01 4 Co Momento de Biopsia embrionaria ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Momento de Biopsia embrionaria ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Diagnóstico genetico ng rePreimplantacional (DGP) s oN ac ion al d el • Momento de Biopsia embrionaria La bo ra tor • Técnica de análisis genético io Cl íni co • Material a estudiar 2 01 4 Co ng Hibridación Genómica comparada (CGH) re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 CoCGH elimina el efecto adverso de la ng re edad materna so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni co 20 14 Munné et la., 2013 CBar-coding + Secuenciación genomica on gr completa (NGS) es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl íni co 20 14 Secuenciacion genómica completa Different platforms Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio 1º generación 2º generac. 3º Cl ín ico 20 14 Co Nanopore sequencing ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Diagnóstico genetico ng rePreimplantacional (DGP) s oN ac ion al d el • Momento de Biopsia embrionaria La bo ra tor • Técnica de análisis genético io Cl íni co • Material a estudiar 2 01 4 Co DGP sin biopsia (no invasivo) n gr es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Globalización: Donantes n gr es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co Globalización: Donantes n gr es máximo de hijos por donante • Numero oN • ¿Dónde aesta el limite? cio na ld el La bo ra tor io Cl íni co 20 14 Janssens et al., 2015 Availability of donors Weight Operational considerations Ethical considerations Psychological considerations Genetics Legal considerations 0 50 100 150 200 Number of offspring for a sperm donor 250 Co ng Globalización: Ètica re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Globalización: Laboratorio FIV Co ng en paises en desarrollo re so PeroN¿y Africa? ac ion al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 www.nightearth.com 70 Co Asiangr Infection-related tubal block es Tubal factor : why ? oN transmitted diseases 39 % ac Sexually infections ion Post-partum abortions al Illegal - mobility dUrbanisation Polygamy el Resistant La micro-organisms … b or Latin America Africa ato rio Cl 44 % ín65 ico- 85 % 20 14 Co Compton Foundation ng What about funding ?? re so Na cio n al de lL ab or http://nnadofoundation.webs.com/ ato rio Cl ín ico 20 14 Co ngStep 1: Set-up and equilibration re so Na cio na ld el- 7.1 % CO 6.3 12 L - 13% O ab or ato rio Cl íni co 20 2 2 Citric acid + sodium bicarbonate + water produces carbondioxide to equilibrate culture medium to pH 7.25- 7.35 14 Co ng re Step 2: Insemination so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl ín QuickTime™ een QuickTime™ enen een -decompressor -decompressor zijn vereist deze afbeel ding weer geven. zijn vereist omom deze afbeel ding weer te te geven. Day 0 Insertion of oocytes and sperm cells: 1 oocyte per tube with 1000-5000 good motile sperm cells ico 20 14 Co ng re Step 3: Fertilisation check so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl í nic check through Fertilisation o wall the glass tube 20 14 Day 1 Co ng Step 4: Embryo visualisation re so Na cio na ld el La bo ra tor Day 2 ioDay 3 Day 2 Day 3C lín ico 2 01 Embryo transfer 4 Co ng Conclusiones re so • CalidadNa cio n • • • • Seguridad a ld Estandarizacionel La bo Innovación ra tor Globalización io Cl ín ico 20 14 Co ng Futuro: Profesionales re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng re so Ron &NGo ac ion VisteCheap al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14 Co ng re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 14