Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
(Antibiograma por difusión con discos - CIM/CBM –
Curvas de muerte - PIS/PBS- VBS – Dosaje de Antimicrobianos)
Mirta G. Quinteros
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
 Orientan tratamiento empírico inicial.
 Influencian decisiones sobre el
tratamiento específico individual.
 Desarrollo del vademecum hospitalario.
 Aplicación de políticas de control de
infecciones.
Pruebas para evaluar “in vitro” la
sensibilidad a los antimicrobianos
 Método de Difusión con discos
 Método Difusión cuantitativa (Etest)
 Método Dilución (automatizados y no automatizados)
 Pruebas de screening (detección fenotípica)
 Detección enzimática directa
 Detección genotípica de resistencia
 Curvas de cinética de muerte bacteriana
 Pruebas para evaluar bactericidia
Prueba de sensibilidad a los
antimicrobianos: Método de Dilución
Fundamento
 Se basa en los estudios colaborativos de Ericsson y
Sherris
 Se preparan diferentes concentraciones del
antimicrobiano, en el medio de cultivo (caldo o agar),
y se enfrentan con el microorganismo en estudio
 Se obtienen resultados cuantitativos de
concentración de antimicrobiano capaz de inhibir, o
no, el crecimiento visible de un determinado
microorganismo
Prueba de sensibilidad a los
antimicrobianos: Método de Dilución
El resultado que se obtiene al realizar las pruebas de
sensibilidad a los antimicrobianos utilizando esta
metodología se denomina con la sigla CIM
C: Concentración
I: Inhibitoria
M: Mínima
La CIM es la Mínima Concentración del
antimicrobiano ensayado capaz de Inhibir el
crecimiento visible del microorganismo en estudio.
(MIC: Minimal Inhibitory Concentration)
Esquema de la metodología utilizada para realizar el
método de dilución en medio líquido (macrodilución)
ANTIBIOGRAMAS
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
Criterios de Interpretación
1. Farmacológico.
2. Epidemiológico.
3. Clínico.
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
HISTOGRAMAS: Distribución de microorganismos Vs CIM
F. Nicola:Módulo 4- ATM2007
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
INTERPRETACIÓN E INFORME
64 –
Resistante
Intermedio
Susceptible
32 –
MIC (µg/ml)
16 –
8–
4–
2–
1.0 –
0.5 –
I
I
I
I
I
I
I
6
10
15
20
25
30
35
(mm)
Pruebas de Sensibilidad
a los Antimicrobianos
1. Antibiograma por difusión con discos o tabletas
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
ANTIBIOGRAMAS POR DIFUSIÓN
DISCOS de
PAPEL
TABLETAS
Tiras E-test
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
ESCATEGRAMA: CIM [µg/ml] Vs Ө [mm]
F. Nicola:Módulo 4- ATM2007
RESISTENCIA
INTRINSECA Y NATURAL
NATURAL: GRAM (+) : R a polimixina
INTRINSECA:
Bacilos GRAM (-): R a glucopéptidos,eritromicina
Proteae: R a nitrofuranos-polimixina.
Serratia spp: R a polimixina
Enterobacter spp: R a cefalotina
Klebsiella spp: R a ampicilina
Enterococcus spp: R a Cef.1ºG- R de bajo nivel AG.
R a imipenem: S. malthopilia, E.faecium, E.raffinosus
R a vancomicina: E.gallinarum, E.casseliflavus
D-Test
Pruebas de Sensibilidad
a los Antimicrobianos
Positivo
Fenotipo iMLSB
Negativo
Fenotipo M (Eflujo)
Consenso grampositivoa- RAM2003
Resistencia a los
antimicrobianos (Argentina n:350)
Ampicilina 20%
Cloranfenicol: 5%
Cefaclor: 5%
Cefuroxima. 3%
todas las cepas R a Amp fueron R a
CMP
 AMS / AMC: 0%
•Whonet 2004
 Rifampicina: 0%





PRODUCCIÓN DE BLACTAMASAS GRAM (+)
Haemophilus influenzae
Mecanismo de R:
R a ampicilina βlasa
Vigilancia de R.
R a ampi cromosómica /CEC)
R a quinolonas ( Ac. Nal)
ß-LACTAMASAS
PLASMIDICAS
•ß-lactamasas de espectro
extendido (BLEE):
TEMderiv
SHVderiv
PER1-2
CTXMderiv
Citrobacter freundii (AmpC + BLEE)
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
Métodos para confirmar fenotípicamente
la presencia de BLEE
 Utilización de los discos CTX-AMC-CAZ
 Discos de C3G con y sin ácido clavulánico (CAZ, CTX, CPO)
Halo de inhibición de C3G /Clav
5 mm C3G sola
CTC
CTX
 Enterobacterias productoras de Amp C inducible
FEC
Cefepima-AMC
FEP
BGN
Pruebas de Sensibilidad
a los Antimicrobianos
Detección de la presencia de carbapenemasas
Ácido clavulánico
carbapenemasas de clase A
Curso a Distancia sobre Bacteriología Clínica 2010 – Col. Bioq. Pcia. Bs. As. y Univ. Kennedy –
Mirta Quinteros y Marcelo Marín
Perfiles de resistencia
Stapylococcus aureus
Penicilinasa Meticilino resistente (SMR)
(+)
Penicilina
Amoxicilina
Ampicilina
Ampicilina-sulbactam
(AMS)
Amoxilina-clavulanico
CEF 1G (cefalotina)
Oxacilina
Vancomicina
R
R
R
S
S
S
S
S
R
R
R
R
R
R
R
S
Perfiles de resistencia
Bacteroides fragilis
(anaerobios)
Gentamicina, amicacina (AG)
Nitrofuranos
Metronidazol
Amoxicilina-clavulánico
clindamicina
R
R
S
S
S
Perfiles de resistencia
Escherichia coli
BLEA
BLEE
AmpC
Ampicilina
Cefalotina (CEF1ºG
Amoxicilina/clavulanico (AMC)
Ampicilina /sulbactam (AMS)
Ceftriaxona, cefatacidima, cefotaxima (CEF·ºG)
Cefepime (CEF4ºG)
Cefoxitina (cefamicina)
Ertapenem, Meropenem, imipenem
(carbapenemes)
R
R
S
S
S
S
S
S
R
R
S
S
R
R
S
S
R
R
R
R
S
R
S
Ciprofloxacina, levofloxacina (FQ)
SóR
SóR
SóR
Colistina (polipeptidos)
S
S
S
Gentamicina, amicacina (aminiglocòsidos)
SóR
SóR
SóR
Resistencia a los antibióticos
Amenaza vigente para la
Salud pública