Información de pedido Analizadores adecuados para el

Información de pedido Analizadores adecuados para el

0005841283190c701V2.0
DIGIT
Digitoxin
Información de pedido
CONTENT
REF
05841283 190 ONLINE TDM Digitoxin 200 tests
Preciset TDM II Calibrators
03375781 190 CAL A-F (6 x 5 mL)
Diluent (1 x 10 mL)
Roche‑TDM OnLine Digitoxin Controls
I (2 x 5 mL)
20766658 322 Nivel
Nivel II (2 x 5 mL)
Nivel III (2 x 5 mL)
Analizadores adecuados para el cobas c pack
ID del
sistema 01 5359 9
Códigos 743‑748
Código 104
Código 105
Código 106
Español
Información del sistema
DIGIT: ACN 8430
Uso previsto
Test in vitro para la determinación cuantitativa de la digitoxina en suero y
plasma en los sistemas Roche/Hitachi cobas c.
Características
La digitoxina es un glucósido obtenido de la digitalis lanata que ejerce un
efecto inotrópico positivo incrementando la respuesta contráctil de las fibras
miocárdicas en pacientes con insuficiencia cardíaca congestiva. Los
glucósidos cardíacos también pueden producir numerosos efectos
electrofisiológicos que repercuten en un cronotropismo negativo en el
corazón humano. Estos efectos tienden a reducir y regular el ritmo rápido e
irregular de latidos de los pacientes que sufren de arritmias cardíacas.1
Principio del test
Interacción cinética de micropartículas en solución (KIMS), medida a través
de los cambios producidos en la transmisión de la luz.
El test Digitoxin constituye un inmunoensayo homogéneo que se basa en el
principio de medición de los cambios producidos en la absorbancia o
cantidad de luz que atraviesa la muestra resultantes de la formación de
agregados de micropartículas. Las micropartículas, revestidas con
digitoxina, forman rápidamente agregados en presencia de una solución de
anticuerpos de digitoxina. Al añadir una muestra que contiene digitoxina, la
formación de agregados se inhibe parcialmente, reduciendo la velocidad
del proceso de agregación. Cuando los anticuerpos se unen al fármaco de
la muestra dejan de inducir la agregación de micropartículas, inhibiéndose
así la formación de retículos de partículas. Con ello se obtiene una curva
clásica de inhibición para la concentración de digitoxina, en la cual la
velocidad máxima de agregación corresponde a la concentración mínima
de digitoxina. Controlando los cambios producidos en la dispersión de la
luz o absorbancia se obtiene una curva dependiente de la concentración.
Reactivos - Soluciones de trabajo
R1
Anticuerpo monoclonal anti‑digitoxina (ratón) en tampón con
conservante
R3
Micropartículas conjugadas de derivados de digitoxina, material de
origen humano, conservante
R1 está en la posición B y R3 en la posición C.
Medidas de precaución y advertencias
Sólo para el uso diagnóstico in vitro.
Observe las medidas de precaución usuales para la manipulación de
reactivos.
Elimine los residuos según las normas locales vigentes.
Ficha de datos de seguridad a la disposición del usuario profesional que la
solicite.
El material de origen humano debe considerarse como potencialmente
infeccioso. Los hemoderivados han sido preparados exclusivamente con
sangre de donantes analizada individualmente y libre de HBsAg o de
anticuerpos anti-HCV y anti-HIV.
Los métodos analíticos aplicados fueron aprobados por la FDA o se
encuentran en comprobada conformidad con la Directiva Europea
98/79/CE, Anexo II, Lista A.
Sin embargo, dado que nunca puede excluirse con total seguridad el riesgo
de infección, se recomienda tratar este producto con el mismo cuidado que
una muestra de paciente. En caso de exposición, proceda según las
instrucciones de las autoridades sanitarias competentes.2,3
2014-02, V 2.0 Español
Roche/Hitachi cobas c 701/702
Preparación de los reactivos
Los reactivos están listos para el uso.
Mezclar los reactivos invirtiendo suavemente varias veces antes de
colocarlos en el analizador.
Conservación y estabilidad
Sin abrir, a 2‑8 °C:
véase la fecha de caducidad
impresa en la etiqueta del
cobas c pack
En uso y refrigerado en el analizador:
6 semanas
En el gestor de reactivos:
24 horas
No congelar.
Obtención y preparación de las muestras
Emplear únicamente tubos o recipientes adecuados para recoger y
preparar las muestras.
Si las muestras se procesan en tubos primarios, seguir las instrucciones
del fabricante de los tubos.
Recoger las muestras dentro del lapso de 6 a 12 horas tras la
administración de la última dosis oral de digitoxina.4 En ese momento, los
niveles séricos de digitoxina normalmente corresponden a las
concentraciones tisulares y deberían correlacionar con los efectos
farmacológicos.
Sólo se han analizado y encontrado aptos los tipos de muestras aquí
mencionados.
Suero: Recoger las muestras de suero en tubos estándar.
Plasma: tratado con heparina de litio.
Estabilidad:5
en frasco tapado, 24 horas a 2‑8 °C
en frasco tapado, 1‑2 semanas a -20 °C
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el
ensayo.
No congelar y descongelar las muestras repetidas veces.
Invertir las muestras descongeladas varias veces antes de analizar.
Material suministrado
Consultar la sección "Reactivos - Soluciones de trabajo" en cuanto a los
reactivos suministrados.
Material requerido adicionalmente (no suministrado)
Consultar la sección “Información de pedido”
Equipo usual de laboratorio
Realización del test
Para garantizar el funcionamiento óptimo del test, observe las instrucciones
de la presente metódica referentes al analizador empleado. Consulte el
manual del operador apropiado para obtener las instrucciones de ensayo
específicas del analizador.
Roche no se responsabiliza del funcionamiento de las aplicaciones no
validadas por la empresa. En su caso, el usuario se hace cargo de su
definición.
Aplicación para suero y plasma
Para las presentes aplicaciones, desactive la opción "Repet. Automática"
del menú "Utilidades" bajo "Aplicación", "Rango".
Definición del test en los analizadores cobas c 701/702
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DIGIT
Digitoxin
Tipo de medición
2 puntos finales
Tiempo de reacción / Puntos
de medición
10 / 22‑38
Longitud de onda (sub/princ)
– /700 nm
Dirección de reacción
Aumentando
Unidad
ng/mL (nmol/L)
Pipeteo de reactivo
Diluyente (H2O)
R1
105 µL
–
R3
38 µL
20 µL
Volúmenes de muestra
Muestra
Dilución de muestra
Muestra
Diluyente (H2O)
Normal
4.5 µL
–
–
Disminuido
4.5 µL
–
–
Aumentado
4.5 µL
–
–
Calibración
Calibradores
S1‑6: Calibradores Preciset TDM II
Modo de calibración
RCM
Intervalo de calibraciones
Calibración a 6 puntos
- con cada lote de reactivos
- si fuera necesario según los
procedimientos de control de calidad
Trazabilidad: El presente método fue estandarizado frente a estándares de
referencia de la USP. Los calibradores están preparados con cantidades
conocidas de digitoxina en suero humano normal.
Control de calidad
Para el control de calidad, emplear los controles indicados en la sección
“Información de pedido”.
Adicionalmente pueden emplearse otros controles apropiados.
Adaptar los intervalos y límites de control a los requisitos individuales del
laboratorio. Los resultados deben hallarse dentro de los límites definidos.
Cada laboratorio debería establecer medidas correctivas a seguir en caso
de que los valores se sitúen fuera de los límites definidos.
Cumplir con las regulaciones gubernamentales y las normas locales de
control de calidad pertinentes.
Cálculo
Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automáticamente la
concentración de analito de cada muestra.
Factor de conversión:6 ng/mL x 1.31 = nmol/L
Limitaciones del análisis - interferencias
Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial con una
concentración de digitoxina de aproximadamente 15 ng/mL (19.5 nmol/L).
Ictericia:7 Sin interferencias significativas hasta un índice I de 45 para
bilirrubina conjugada y sin conjugar (concentración de bilirrubina conjugada
y sin conjugar: aproximadamente 45 mg/dL o 770 µmol/L).
Hemólisis:7 Sin interferencias significativas hasta un índice H de 1000
(concentración de hemoglobina: aproximadamente 1000 mg/dL o
621 µmol/L).
Lipemia (Intralipid):7 Sin interferencias significativas hasta el índice L
de 1000. No existe una correlación satisfactoria entre el índice L (que
corresponde a la turbidez) y la concentración de triglicéridos.
Fármacos: No se han registrado interferencias con paneles de fármacos de
uso común en concentraciones terapéuticas.8,9
Factores reumatoides: No se han observado interferencias por factores
reumatoides hasta una concentración de 100 UI/mL.
Proteína total: Sin interferencia por proteínas totales hasta 10 g/dL.
Existe la posibilidad de que otras sustancias y/o factores interfieran con el
presente test y causen resultados poco fiables.
En casos aislados (< 1 %), algunas muestras pueden contener
componentes indefinidos que causen una aglutinación no específica en el
test. Estas muestras proporcionarán valores falsos disminuidos de
digitoxina.10 Si el valor obtenido no concuerda con el cuadro clínico del
paciente, se recomienda consultar al Servicio de Asistencia Técnica al
Cliente.
De forma semejante a muchos inmunoensayos a base de anticuerpos
monoclonales de ratón, pueden producirse interferencias entre este test y
muestras que contengan anticuerpos humanos anti‑ratón (HAMA). Se
recomienda analizar las muestras sospechosas de contener HAMA (como
por ejemplo las muestras de pacientes que hayan estados expuestos a
anticuerpos monoclonales de ratón) con un método de test alternativo.
Para el diagnóstico, los resultados del test siempre deben interpretarse
teniendo en cuenta la anamnesis del paciente, el análisis clínico así como
los resultados de otros exámenes.
ACCIÓN REQUERIDA
Programa especial de lavado: Se requieren ciclos de lavado especial en
caso de combinar ciertos tests en los sistemas Roche/Hitachi cobas c.
Todos los pasos de lavado necesarios para evitar la contaminación por
arrastre están disponibles a través de cobas link de modo que no se
requiere la entrada manual de los datos. La lista de las contaminaciones
por arrastre también puede encontrarse en la versión más actual de la
metódica NaOHD/SMS/SmpCln1+2/SCCS. Para más detalles, sírvase
consultar el manual del operador.
En caso de que sea necesario, implemente el lavado especial
destinado a evitar la contaminación por arrastre antes de comunicar
los resultados del test.
Límites e intervalos
Intervalo de medición
5‑65 ng/mL o 6.6‑85.2 nmol/L (definido por el Límite de Detección y el
límite superior de la linealidad).
Diluir manualmente de 1 + 1 las muestras con valores superiores al
intervalo de medición con Preciset TDM II Diluent (0 ng/mL) y repetir el
análisis. Multiplicar el resultado por 2 para obtener el valor de la muestra.
Límites inferiores de medición
Límite del blanco (LdB), límite de detección (LdD) y Límite de
Cuantificación/sensibilidad funcional (LdC)
LdB = 3 ng/mL (3.9 nmol/L)
LdD = 5 ng/mL (6.6 nmol/L)
LdC = 6 ng/mL (7.9 nmol/L)
Tanto el Límite del Blanco como el Límite de Detección fueron
determinados cumpliendo con los requerimientos establecidos en el
protocolo EP17‑A del CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute).
El Límite de Cuantificación fue determinado utilizando el resultado del
análisis de la sensibilidad funcional.
El Límite del Blanco es el valor del percentil 95 obtenido a partir de
n ≥ 60 mediciones de muestras libres de analito en varias series
independientes. El Límite del Blanco corresponde a la concentración
debajo de la cual se encuentran, con una probabilidad del 95 %, las
muestras sin analito.
El Límite de Detección se determina basándose en el Límite del Blanco y la
desviación estándar de muestras de baja concentración.
El Límite de Detección corresponde a la menor concentración de analito
detectable (valor superior al Límite del Blanco con una probabilidad del
95 %).
El Límite de Cuantificación es la menor concentración de digitoxina cuya
medición puede reproducirse con un coeficiente de variación interserie de
≤ 20 %.
Los valores inferiores al Límite de Detección (< 5.0 ng/mL) no son
marcados por el analizador.
Valores teóricos
Se recomienda determinar exactamente la concentración de digitoxina de
las muestras de pacientes, ya que el intervalo terapéutico del fármaco es
estrecho. Además, ya que la respuesta del paciente varía
significativamente aún bajo regímenes de dosis similares, las
concentraciones séricas de digitoxina son impredecibles.
Se dispone de amplia información que documenta la interrelación entre las
concentraciones séricas de la digitoxina y su efectividad terapéutica.11 Se
observan efectos terapéuticos con concentraciones entre 10 y 30 ng/mL
(13 y 39 nmol/L), aproximadamente. Las concentraciones séricas de
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2014-02, V 2.0 Español
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DIGIT
Digitoxin
digitoxina que superan los 35 ng/mL (46 nmol/L) están asociadas a
síntomas de toxicidad, mientras que las concentraciones inferiores a
10 ng/mL (13 nmol/L) en general no son eficaces.11,12,13 Sin embargo, el
análisis exclusivo de las concentraciones séricas no sirve para optimizar el
tratamiento con digitoxina. A este efecto deben considerarse otros factores
como la edad, el estado tiroideo, el equilibrio de electrólitos, las funciones
hepática y renal, así como otros síntomas clínicos.14
Cada laboratorio debería comprobar si los intervalos de referencia pueden
aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus
propios valores.
Datos específicos de funcionamiento del test10
A continuación, se indican los datos representativos de funcionamiento de
los analizadores. Los resultados de cada laboratorio en particular pueden
diferir de estos valores.
Digitoxigenina
Precisión
La precisión ha sido determinada empleando muestras humanas y
controles según un protocolo interno (repetibilidad n = 21, precisión
intermedia n = 63). Se han obtenido los siguientes resultados:
Repetibilidad
Media
DE
CV
ng/mL (nmol/L)
ng/mL (nmol/L)
%
14.9 (19.5)
0.4 (0.5)
2.8
Control de digitoxina,
nivel 2
30.5 (40.0)
0.3 (0.4)
1.0
Control de digitoxina,
nivel 3
45.3 (59.3)
0.3 (0.4)
0.6
Suero humano A
10.7 (14.0)
0.4 (0.5)
3.7
Suero humano B
20.9 (27.4)
0.3 (0.4)
1.4
Suero humano C
56.7 (74.3)
0.3 (0.4)
0.6
Media
DE
CV
ng/mL (nmol/L)
ng/mL (nmol/L)
%
Control de digitoxina,
nivel 1
13.4 (17.4)
0.49 (0.6)
3.7
Control de digitoxina,
nivel 2
28.3 (36.8)
0.67 (0.9)
2.4
Control de digitoxina,
nivel 3
42.6 (55.4)
0.85 (1.1)
2.0
Suero humano 1
19.6 (25.5)
0.45 (0.6)
2.3
Suero humano 2
50.8 (66.0)
0.77 (1.0)
1.5
Los resultados de la precisión intermedia se obtuvieron del analizador
cobas c 501 como sistema de referencia.
Comparación de métodos
Se han comparado los valores de digitoxina en muestras de suero y
plasma humanos obtenidos en un analizador
Roche/Hitachi cobas c 701 (y) con los obtenidos con el mismo reactivo en
un analizador Roche/Hitachi cobas c 501 (x).
Número de muestras (n) = 71
Passing/Bablok15
Regresión lineal
y = 0.964 x – 0.284 ng/mL
y = 0.956x + 0.122 ng/mL
τ = 0.945
r = 0.995
258
25
156
Digitoxigenina‑bis‑digitoxósido
25
113
Digoxigenina‑mono‑digitoxósido
25
ND
Dihidrodigitoxigenina
25
27.2
Ouabaína
1000
0.4
Digoxina
25
ND
Digoxigenina
5
ND
Digoxigenina‑bis‑digitoxósido
5
ND
Dihidrodigoxigenina
25
ND
Testosterona
25
ND
Prednisona
25
ND
ND = No detectado
Control de digitoxina,
nivel 1
Precisión intermedia
12.5
Digitoxigenina‑mono‑digitoxósido
La concentración de las muestras se situó entre 5.40 y 61.6 ng/mL
(7.07-80.7 nmol/L).
Referencias bibliográficas
1 Moe GK, Farah AE. In: Goodman LS, Gilman A, eds. The
Pharmacologist Basis of Therapeutics. New York, NY: MacMillan
Company 1970.
2 Occupational Safety and Health Standards: bloodborne pathogens.
(29 CFR Part 1910.1030). Fed. Register.
3 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of
18 September 2000 on the protection of workers from risks related to
exposure to biological agents at work.
4 Jacobs DS, Kasten BL, DeMott WR, et al. eds. Laboratory Test
Handbook. Stow, Ohio: Lexi-Comp Inc 1990.
5 Valdes R Jr, Jortani S, Gheorghiade M. Standards of laboratory
practice: cardiac drug monitoring. Clin Chem 1998;44(5):1096-1109.
6 Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, Pa:
WB Saunders Co 1995:826.
7 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem
1986;32:470-475.
8 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
9 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
10 Data on file at Roche Diagnostics.
11 Smith TW. Pharmacokinetics, bioavailability and serum levels of
cardiac glycosides. J Am Coll Cardiol 1985;5:43A-50A.
12 Doherty JE. Digitalis glycosides. Pharmacokinetics and their clinical
implications. Ann Internal Med 1973;79:229-238.
13 Perrier D, Mayerson M, Marcus FI. Clinical pharmacokinetics of
digitoxin. Clin Pharmacokin 1977;2:292-311.
14 Physicians’ Desk Reference 48th Edition Montvale, NJ: Medical
Economics Data Production Inc 1994;1215-1216.
15 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
for method transformation. Application of linear regression procedures
for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin
Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
En la presente metódica se emplea como separador decimal un punto para
distinguir la parte entera de la parte fraccionaria de un número decimal. No
se utilizan separadores de millares.
Especificidad analítica
Se analizó la reactividad cruzada de los siguientes compuestos:
Símbolos
Roche Diagnostics emplea los siguientes símbolos y signos adicionalmente
a los indicados en la norma ISO 15223‑1.
Compuesto
CONTENT
2014-02, V 2.0 Español
Concentración
analizada
(ng/mL)
Reactividad
cruzada
(en %)
Contenido del estuche
Volumen tras reconstitución o mezcla
3/4
0005841283190c701V2.0
DIGIT
Digitoxin
La barra del margen indica cambios o suplementos significativos.
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