gu ía grad il laparadeterm in arant ig enosyanticuerposen in

gu ía grad il laparadeterm in arant ig enosyanticuerposen in

G u í a : G r a d illa p a r a d e t e r m in a r a n t í g e n o s y a n t ic u e r p o s e n in m u n o h e m a t o lo g i a
E S C U E LA D E S A LU D
G U ÍA
G R A D IL L A P A R A D E T E R M IN A R
A N T IG E N O S Y A N T IC U E R P O S E N
IN M U N O H E M A T O L O G IA
D IR IG I D O A :
A lu m n o s d e la c a r r e r a d e T é c n ic o d e L a b o r a t o r io C lí n ic o y B a n c o d e S a n g r e e n
la a s ig n a t u r a d e “ B a n c o d e S a n g r e I II ”
P R E - R E Q U IS IT O :
H a b e r R e a l iz a d o t a lle r “ D e t e r m in a c ió n d e a n t í g e n o d e l s is t e m a A B O
A u to re s : F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U . E lia n a E s c u d e r o Z
D uocU C
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
IN T R O D U C C IÓ N
T a n to
banco
de
s is t e m a
lo s r e c e p t o r e s ( p a c ie n t e s ) c o m o
s a n g re
A B 0,
a n t ic u e r p o s
son
e s tu d ia d o s p a ra
s is t e m a
del
R h
s is t e m a
lo s d o n a n t e s q u e
d e t e r m in a r p r e s e n c ia
( e s p e c í f ic a m e n t e
A B 0
y
de
o tro s
al
a n tíg e n o
s is t e m a s
de
D ),
in g r e s a n
a
u n
a n tíg e n o s d e l
p r e s e n c ia
a n t ig é n ic o s
d e
im p o r t a n c i a
c lí n ic a .
E s t o s e s t u d io s s o n
de cada
b á s ic o s p u e s c o n s t it u y e n
la
id e n t if ic a c ió n a n t ig é n ic a
in d iv id u o y s o n r e la c io n a d o s a l m o m e n t o d e t r a n s f u n d ir ( r e c e p t o r c o n
la s u n id a d e s t r a n s f u n d id a s ) .
O B J E T IV O S
A l f in a liz a r e l t a lle r e l a lu m n o s e r á c a p a z d e :
P re p a ra r u n a
g r a d illa
p a ra
la
d e t e r m in a c ió n
de
a n t í g e n o s y a n t ic u e r p o s
d e lo s s is t e m a s A B 0 , R h y o t r o s d e im p o r t a n c ia c lí n ic a
E je c u t a r la
c e n t r if u g a c ió n
de
tu b o s
de
p ru e b a , s e g ú n
la
d e t e r m in a c ió n
q u e s e r e a liz a
R e g is t r a r
la s
d e t e r m in a c io n e s
r e a liz a d a s
por
el
T e c n ó lo g o
M e d ic o
( a n t í g e n o s y a n t ic u e r p o s d e lo s s is t e m a s A B 0 , R h y o t r o s d e im p o r t a n c ia
c lí n ic a ) e n u n a p la t illa t ip o d e lo s b a n c o s d e s a n g r e .
R E A L IZ A D O P O R
:
T e c n ó lo g o M é d ic o d e b a n c o d e s a n g r e , o p r o f e s io n a l d e l á r e a
D U R A C IÓ N :
9 0 m in u t o s
N U M E R O D E A LU M N O S P O R D O C E N TE :
M á x im o 1 0 a lu m n o s
A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
2
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
M A R C O T E O R IC O
E l s is t e m a A B 0 f u e d e s c r it o p o r L a n d s t e i n e r e n e l a ñ o 1 9 0 0 . E s c o n s id e r a d o e l
s is t e m a
a n t ig é n ic o
m ás
im p o r t a n t e
d e l g ló b u lo
r o jo , p o r s u
g ra n
im p o r t a n c i a
c lí n ic a .
D e
a c u e rd o
a
la
p r e s e n c ia
de
a n t ig e n o s
A
y
B
en
lo s
g ló b u lo s
r o jo s ,
lo s
in d iv id u o s s e c la s if ic a n e n c u a t r o g r u p o s A , B , A B y 0 .
Los
a n t ic u e r p o s
n a t u r a le s
A
y
p re s e n te
B
en
a p a re c e n
e l
s u e ro
a
lo s
de
tre s
m eses
in d iv id u o s
de
que
v id a , s o n
no
poseen
a n t ic u e r p o s
el
a n t ig e n o
c o r r e s p o n d ie n t e ; g e n e r a lm e n t e s o n d e t ip o I g M .
E l s is t e m a R h f u e d e m o s t r a d o p o r L e v i n e y S t e t s o n e n 1 9 3 9 , e n
la m e m b r a n a
d e l g ló b u lo r o j o , c o r r e s p o n d e a u n m o s a ic o d e a n t ig e n o s d e lo s c u a le s e l m á s
im p o r t a n t e e s e l a n t ig e n o D , q u e r e s u lt a s e r e l e s t u d ia d o e n lo s in d iv id u o s .
E l s is t e m a
R h
no
p re s e n ta
a n t ig e n o s n a t u r a le s , p o r lo
que
s o lo
se
e s t u d ia
la
p r e s e n c ia d e l a n t ig e n o .
B á s ic a m e n t e
son
el
s is t e m a
A B 0
y
el
s is t e m a
R h
d e
g ra n
im p o r t a n c ia
a l
m o m e n t o d e c o n s id e r a r la t r a n s f u s ió n d e c u a lq u ie r h e m o c o m p o n e n t e .
L o s in d iv id u o s t r a n s f u n d id o s
a n t ic u e r p o s
L e w is ,
c o n tra
M N S ,
p e r m it e
s it u a c ió n
en
P )
de
a n t ig e n o s
id e n t if ic a r
el caso
que
y a lg u n a s m u je r e s d u r a n t e
de
u na
o c u r r ir
de
o tro s
e s to s
t r a n s f u s ió n
puede
s is t e m a s
a n t ic u e r p o s ,
no
su
(R h e s u s ,
e m b a ra z o
K e l l,
p r in c ip a lm e n t e
e x p o n e r lo s
des encadenar
una
de
D u ffy ,
en
nuev o
re s p u e s ta
fo rm a n
K id d ,
re c e p to re s ,
a l a n t ig e n o ,
in m u n e
co n
c o n s e c u e n c ia s p a r a e l r e c e p t o r .
F R EC U E N C IA S
T ip o
d e
D E LO S
T IP O S
S a n g re
D E S A N G R E
F r e c u e n c ia
O
R h
P o s it iv o
5 5 %
A
R h
P o s it iv o
2 4 %
B
R h
P o s itiv o
1 0 %
O
R h
N e g a t iv o
5 %
A
R h
N e g a tiv o
3 %
A B
B
A B
R h
R h
R h
P o s itiv o
2 %
N e g a tiv o
0 ,7 %
N e g at iv o
0 ,3
A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
3
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
D E S C R IP C IO N D E L P R O C E D IM IE N T O
1 . - G r a d i ll a p a r a d e t e r m i n a r A n tí g e n o s d e l S i s t e m a A B 0 – R h D e n t u b o .
1 . 1 D e ja r la p r im e r a c o lu m n a d e la p r im e r a g r a d illa d e t u b o s v a c í a , la s e g u n d a
g r a d illa c o lo q u e lo s t u b o s d e s d e la p r im e r a c o lu m n a . E s t a f o r m a d e o r d e n a r la s
m u e s t r a s y t u b o s s e c o r r e s p o n d e c o n u n m é t o d o d e le c t u r a q u e p r e t e n d e e v it a r
e q u iv o c a c i o n e s . ( e l T M
cada
vez
que
le a
e l r e s u lt a d o
de
una
d e t e r m in a c ió n
c a m b ia r á d e lu g a r lo s t u b o s , p a r a a s í s e ñ a la r lo q u e h a h e c h o . )
1 . 2 C o lo c a r t u b o s e n s e n t id o v e r t ic a l e n u n a g r a d i lla , d e s d e la f i la 2
da
a la 1 1
va
,
p o r c a d a m u e s t r a q u e c o n s id e r a s e r e s t u d ia d a ( v e r t a b la 1 ) , c o n e s t a c a n t id a d
de
tu b o s
es
p o s ib le
p r e p a r a r la s
tre s
d e t e r m in a c io n e s
c o n s id e r a d a s
en
e s ta
g u ía .
1 .3
R o t u la r lo s t u b o s p a r a la s p r u e b a s a r e a liz a r ( v e r t a b la 1 ) . P a r a v e r e je m p lo
d ir ig ir s e a I lu s t r a c ió n 1 .
1 .4
A g re g a r a
cada
tu b o
lo s
r e a c t iv o s
c o n s ig n a d o s
p a ra
la s
f ila s
2
da
a
la
5
ta
( s u e r o a n t i A , B , A B y D ) , d e a c u e r d o a l n u m e r o d e m u e s t r a s , s ie m p r e d e
iz q u ie r d a a d e r e c h a .
va
1 .5
U b ic a r la m u e s t r a a e s t u d ia r e n la 1 2
f ila
1 .6
S e p a r a r s u e r o d e c a d a m u e s t r a a e s t u d ia r a l t u b o u b ic a d o la 1 1
A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
va
f ila .
4
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
T a b la 1 G ra d illa c o n d is p o s ic ió n d e lo s tu b o s p a ra u n a d e te rm in a c ió n A B 0 R h .
P ru e b a a
R e a c t iv o
R e a liz a r
F ila
1
R o t u lo
2
3
4
5
S u s p e n s ió n d e
g ló b u lo s R o jo s
1°
2 – 4 %
D e t e rm in a c i ó n
a n t ig e n o A
S u e r o a n ti A
2°
A
S u e r o a n ti B
3°
B
S u e r o a n ti A B
4°
A B
S u e r o A n ti D
5°
D
6°
a
7°
b
P anel I
8°
I
P a n e l II
9°
II
10°
PA
D e t e rm in a c i ó n
A n t ig e n o B
D e t e rm in a c i ó n
*
A n t ig e n o s A B
D e t e rm in a c i ó n
A n t ig e n o D
(R h )
C o n t ra P ru e b a
G R
g ló b u lo s R o jo s
A **
T e s t ig o s A
C o n t ra P ru e b a
G R
B
g ló b u lo s R o jo s
**
T e s t ig o s B
E s t u d io d e
A n t ic u e rp o s d e
I m p o rt a n c ia
c lí n ic a
C o n t ro l
A u t o lo g o
A p e llid o s y
S u e r o o p la s m a
n om b re
11°
p a c ie n te
M u e s t ra
12°
* C u a n d o s e u s a n s u e r o s a n ti A y a n ti B m u y p o te n te s ( p o r e je m p lo a n tic u e r p o s m o n o c lo n a le s )
no
se
p r e c is a n
a n tic u e r p o s
r e a c tiv o s
p o lic lo n a le s
a n ti
d e
A ,
B .
A hora
d o n a n te s )
es
con
r e a c tiv o s
e s e n c ia l
de
e m p le a r
m e nos
s ueros
p o te n c ia
a n ti A ,
B ,
(por
ya
e je m p l o
q ue
de
lo
c o n tr a r io lo s s u b g r u p o s A o B m á s d é b ile s p a s a r a n d e s a p e r c ib id o s .
**L o s r e c ié n n a c id o s n o p r e s e n ta n a n tic u e r p o s n a tu r a le s a n ti A y /o a n ti B e n e l s u e r o o p la s m a ,
p o r e s te m o tiv o n o s o n c la s ific a d o s c o n g ló b u lo s r o jo s te s tig o s .
A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
5
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
Ilu s tra c ió n 1
T u b o p a r a e n s a y o m u e s tra
lu g a r p a ra re a liza r ro tu la ció n
1 .7
R e a l iz a r u n a s u s p e n s ió n d e e r it r o c it o s d e c a d a m u e s t r a a e s t u d ia r ( S i u n a
m u e s t r a d e c o r d ó n u m b il ic a l s e r á e s t u d ia d a , p r e v io a
s u s p e n s ió n
s o lu c ió n
de
g l ó b u lo s
s a lin a , p a r a
r o jo s
deb e
e lim in a r la
ser
g e la t in a
la v a d a
d e
d e t e r m in a c ió n . ) , fr e n t e e l t u b o u b ic a d o e n la 1
2 – 4%
que
en
la
a b u n d a n te
in t e r v ie n e
en
la
f ila , a u n a c o n c e n t r a c ió n d e
a l o s t u b o s u b ic a d o s e n t r e la f il a 6
ta
y
, lu e g o a g r e g a r a u n a g o t a d e la s u s p e n s ió n p r e p a r a d a e n e l p u n t o 1 . 7 a lo s
t u b o s u b ic a d o s e n t r e la s f ila s 2
2
veces
de
( p a r a s e ñ a la r a l T e c n ó lo g o M e d ic o t a m b ié n s e u s a n la s
le t r a s T M . ) a g r e g a r á u n a g o t a d e s u e r o
10
ra
p r e p a r a c ió n
e n s u p r o p io s u e r o o p la s m a .
E l T e c n ó lo g o M e d ic o
m a
4
W h a rto n
la
da
y 5
ta
y a l t u b o u b ic a d o e n la f ila 1 0
m a
.
G r a d i ll a p a r a d e t e r m i n a r a n ti c u e r p o s d e l S i s t e m a A B 0 e n t u b o .
2 .1 A g re g a r
a
lo s
tu b o s
u b ic a d o s
en
la
6
tu b o s
u b ic a d o s
en
la
7
ta
f i la
una
g o ta
de
g ló b u lo s
r o jo s
g o ta
de
g ló b u lo s
r o jo s
T e s t ig o s A .
2 .2
A g re g a r
a
lo s
m a
f i la
una
T e s t ig o s B .
3
3 .1
G r a d i ll a p a r a d e t e r m i n a r a n ti c u e r p o s d e i m p o r t a n c i a C l í n i c a e n t u b o .
A g r e g a r a lo s t u b o s u b ic a d o s e n la 8
va
f ila u n a g o t a d e g ló b u lo s r o jo s p a n e l
I.
3 . 2 A g r e g a r a lo s t u b o s u b ic a d o s e n la 9
na
f ila u n a g o t a d e g ló b u lo s r o jo s p a n e l
II.
3 .3
M e z c la r y c e n tr if u g a r . L a c e n t r if u g a c ió n p u e d e s e r in m e d ia t a e n e l c a s o d e
u r g e n c ia , p e r o
e l tu b o a
en
c o n d ic io n e s n o r m a le s c o n v ie n e
in c u b a r la s m u e s t r a s e n
la t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 5 m in u t o s a n t e s d e p r o c e d e r a
la c e n t r if u g a c ió n . L a v e lo c id a d y la d u r a c ió n
d e e s t a d e p e n d e r á d e l e q u ip o
d is p o n ib le .
A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
6
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
3 . 4 R e g is t r o d e la s le c t u r a s .
E l T e c n ó lo g o M é d ic o p r o c e d e a l e e r e l r e s u lt a d o d e c a d a d e t e r m in a c ió n , e s
r e c o m e n d a b le
p la n t il la
t ip o
que
com o
u na
la
p e rs o n a
que
d is t in t a
m u e s tra
al TM
r e g is t r e
m a s a b a jo , f u n c ió n
lo s r e s u lt a d o s , e n
p o s ib le
de
un a
desem peñar
p o r e l T é c n ic o d e N iv e l S u p e r io r .
D e te r m in a c ió n d e G r u p o S a n g u ín e o , R h y A c . D e i m p o r ta n c ia C l ín ic a
A c I
N ro .
Fecha
A B 0
A g
c lin ic a l
Id .
Z a m o ra n o A ra n c ib ia J a v ie r a
P A
R h
A
0 1 /0 4 /0 5
A c
A p e llid o s y n o m b r e
B
A B
D
a
b
I
II
O b s e r v a c io n e s
200 01
P az
Z a m o ra n o A ra n c ib ia P a b l o
0 1 /0 4 /0 5
200 02
E rn e s t o
3 .5
E n e l m is m o o r d e n e n q u e s e u b ic a n la s m u e s t r a s d e iz q u ie r d a a d e r e c h a ,
s e d e b e n r e g is t r a r lo s d a t o s d e c a d a in d iv id u o s o m e t id o a p r u e b a .
3 .6
P r im e r o
se
s e ñ a la
la
id e n t if ic a c ió n
de
cada
in d iv id u o , lu e g o
se
r e a l iz a
la
le c t u r a p o r d e t e r m in a c ió n , p a r a t o d a s la s m u e s t r a s .
3 .6 .1
L e c t u r a d e 2 d a , 3 r a y 4 t a f ila p a r a t o d a s la s m u e s tr a s .
3 .6 .2
L e c t u r a d e 5 t a , 6 t a y 7 t a f ila p a r a t o d a s la s m u e s t r a s .
3 .6 .3
L e c t u r a d e 8 a v a , 9 e n a y 1 0 m a f ila p a r a t o d a s la s m u e s t r a s .
D e te r m in a c ió n d e G r u p o S a n g u ín e o , R h y A c . D e i m p o r ta n c ia C l ín ic a
A c I
N ro .
Fecha
Z a m o ra n o A ra n c ib ia J a v ie r a
A
B
A B
200 01
-
-
-
Z a m o ra n o A ra n c ib ia P a b l o
200 02
-
-
-
E rn e s t o
3 .6 .4
A c
P A
R h
P az
0 1 /0 4 /0 5
A g
c lín ic a
Id .
0 1 /0 4 /0 5
A B 0
A p e llid o s y n o m b r e
D
a
b
I
II
O b s e r v a c io n e s
D u n e g a t iv o
U n a in t e r p r e t a c ió n d e l r e s u lt a d o s e r á r e a liz a d a p o r e l T M .
D e te r m in a c ió n d e G r u p o S a n g u ín e o , R h y A c . D e i m p o r ta n c ia C l ín ic a
A c I
N ro .
Fecha
Z a m o ra n o A ra n c ib ia J a v ie r a
0 1 /0 4 /0 5
A g
A c
c lin ic a
Id .
0 1 /0 4 /0 5
A B 0
A p e llid o s y n o m b r e
E rn e s t o
0
200 01
P az
Z a m o ra n o A ra n c ib ia P a b l o
200 02
P A
R h
neg
0
pos
A
B
A B
D
a
b
I
II
O b s e r v a c io n e s
-
-
-
-
+
+
-
-
D u n e g a t iv o
-
-
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A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
7
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
IN S U M O S Y E Q U IP O S N E C E S A R IO S P A R A E L T A L L E R
1
S u e r o s c la s if ic a d o r e s A B 0 y R h D
2
L á p iz in d e le b le p a r a t u b o s
3
T u b o s d e v id r io o p lá s t ic o d e 1 0 x 7 5 m n o 1 2 x 7 5 m n
4
G ló b u lo s r o jo s t e s t ig o s A y B
5
P a n e l d e c é lu la s I y I I
6
P B S
7
G r a d illa p a r a t u b o s d e K a h n
8
P la n t il la d e R e g is t r o
9
C e n t r if u g a d e T u b o s
10
M u e s t r a d e s a n g r e s in o c o n a n t ic o a g u la n t e
L o s tu b o s d e p lá stico s o n m ás ec o n ó m ic o s q u e lo s d e v id rio p ero v ale n p ara u n a so lo v ez . L o s tu b o s d e
v id rio se d eb e n lav a r m in u cio s am e n te y se car en u n h o rn o an te s d e v o lv er a u sarlo .
B IB L IO G R A F Í A D E M A R C O
T E O R IC O .
P a u t a s p a r a la O r g a n iz a c ió n d e u n S e r v ic io d e t r a n s f u s ió n d e S a n g r e .
O r g a n iz a c ió n M u n d ia l d e la S a lu d . A ñ o 1 9 9 3 .
M a n u a l T é c n ic o . A s o c ia c ió n A r g e n t in a d e H e m o t e r a p ia e I n m u n o lo g í a . 1 2 °
E d ic ió n . A ñ o 1 9 9 7 .
M a n u a l d e L a b o r a t o r io d e I n m u n o h e m a t o lo g ia . U n iv e r s id a d d e T a lc a . A ñ o
1984.
M a n u a l d e P r o c e d im ie n t o s B a n c o d e S a n g r e d e T a lc a . A ñ o 2 0 0 1 .
D E S C R IP C IO N D E L P R O C E D IM IE N T O
A C T IV ID A D 1
E l d o c e n t e d e m u e s t r a c o m o s e r e a liz a e l p r o c e d im ie n t o y m o d e lo d e r e g is t r o s
A C T IV ID A D 2
E l a lu m n o r e a l iz a lo s p r o c e d im ie n t o s h a s t a lo g r a r d e s t r e z a e n p r e p a r a c ió n d e la
g r a d illa y r e a liz a c ió n d e lo s r e g is t r o s .
M E T O D O L O G ÍA D E E V A L U A C IÓ N
L a a c t iv id a d s e r á e v a lu a d a p o r e l D o c e n t e d u r a n t e s u r e a liz a c ió n , m e d ia n t e la r
d e v o lu c ió n d e lo s p r o c e d im ie n t o s q u e le in d iq u e e l d o c e n t e c a s o s c lí n ic o s .
A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
8
G u í a : P r e p a r a c ió n d e l M a t e r ia l d e L a b o r a t o r io
N o m b r e d e l a lu m n o : . . .. .. .. . .. .. .. .. . .. .. .. .. . .. .. .. .. . .. .. .. .. . ..
F e c h a : . . .. .. . .. .. .. .. . .. .. .. .. . .. .. .. .. . .. .. .. .. . . N o t a . .. . .. .. .. .. . .. .. .. .. ..
A CCIO N ES
1
C
M C
N o C
P r e p a r a u n id a d d e t r a b a jo
2
R o t u la lo s t u b o s s e g ú n la s d e t e r m in a c io n e s a r e a liz a r
e n e llo s .
3
D is t r ib u y e lo s t u b o s e n la g r a d illa s e g ú n l a s
d e t e r m in a c io n e s q u e s e r e a liz a r a n .
4
A g r e g a lo s r e a c t iv o s d e a c u e r d o a la d e t e r m in a c ió n y
a l r o t u lo d e c a d a t u b o
5
M a n e ja f lu id o s b io ló g ic o s s in c o n t a m in a r s e
6
x
R e g is t r a
L e c t u r a s r e a liz a d a s p o r e l T M e d ic o e n la p la n t illa
R e g is t r a e n e l s it io c o r r e s p o n d ie n t e
V e r if ic a id e n t id a d d e m u e s t r a c o n n o m b r e e n la
p la n t il la
C : c o m p e te n te
M C : m e d ia n a m e n t e c o m p e t e n t e
N C : n o c o m p e te n te
X
n o s e e v a lú a
A u to re s : T M . F e rn a n d o Z a m o ra n o
E U E l ia n a E s c u d e r o
D uocU C
9