Diagnostico HP (Helicobacter Pylori)
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Diagnostico HP (Helicobacter Pylori)
XIV Jornadas Internacional de Gastroenterología, Endoscopía y Hepatología La Plata 2010 TEMA:DIAGNÓSTICO HP Dr. Juan Seiguerman Epidemiología La bacteria es de fácil contagio y el 80% de la población de países en vías de desarrollo está infectado por ésta, siendo comúnmente asintomática. En la población infantil crece a una tasa del 10% anual entre los 2 y 8 años de edad. Es recurrente en las personas mayores de 60 años. Diagnóstico Invasivos Endoscopía c/ biopsia 1)Test de ureasa 2) Histología 3) Cultivo No Invasivos En sangre anticuerpos En aire espirado En m fecal (antigeno) PCR Prueba Serológica Para la detección temprana de la infección, se ha utilizado una prueba serológica que detecta la IgG Hp específica, cuya sensibilidad y especificidad es cercana a 90%. No obstante, esta prueba no es útil para valorar la erradicación de Hp, pues los niveles de IgG permanecen altos aún después de un tratamiento adecuado. Endoscopía Gástrica Determina el tipo de enfermedad gastroduodenal producida por la bacteria, y además permite tomas de biopsia para examen histológico, cultivo microbiológico con estudio de sensibilidad a antibióticos. Antigeno en mat fecal Las pruebas de detección de antígenos en materia fecal representan una alternativa para el test de la urea con una sensibilidad del 89-98% y una especificidad mayor al 90%. Son apropiadas para realizar seguimiento, siempre que se realice con un intervalo de 8 semanas después de realizado el tratamiento. Diagnosis of Helicobacter pylori infection with a new non-invasive antigen-bassed assay. Dino Vaira et als. LANCET, Saturday 3 July 1999. Vol. 354No. 9172. Pags. 30-33. Resultados Individuales Antígeno en heces Test del Aliento Positivos verdaderos 256 266 Falsos negativos 16 13 Falsos positivos 18 5 Negativos verdaderos 201 217 Resultados en performance (IC 95%) Sensibilidad 94.1 95.3 Especificidad 91.8 97.7 Valor predictivo positivo Valor predictivo negativo Correlación 93.4 98.2 92.6 94.3 93.1 96.4 Test de aliento En esta prueba, se administra por vía oral una solución de Urea marcada con 14-C (radioactivo) y más tarde se procede a tomar una muestra de aliento. Técnica Sencilla que utiliza un isótopo Radiactivo. Reacción en cadena de la polimerasa La PCR es un método de alta sensibilidad y especificidad, capaz de detectar cantidades tan bajas como una sola bacteria. Es por esto que se ha sugerido como patrón de oro, pero experimental. Tiene varias limitaciones: es costosa, el resultado no es inmediato, requiere una solución buffer especial para depositar la muestra de tejido y congelarla hasta su determinación y exige un laboratorio de alta tecnología. A su favor cuenta con la ventaja de poderla utilizar también con muestras de jugo gástrico, saliva, placa dentaria y heces, conviertiéndola en una prueba no invasiva Product Helicobacter pylori PCR detection Kit A qualitative diagnostic kit for detection of H. pylori DNA in clinical samples like biopsy. Kit contains reagents for Polymerase Chain Reaction technique. Ready to use PCR mix, Descrip positive control and other qualified reagents along with an easy to follow protocol are tion included. Specific primers amplify conserved region in H. pylori genome. Using this kit, as low as 10 copies/ml of bacterial genome can be detected. Storage -20°C Order this product... Isótopos del Carbono A X ZA X Z A: Número másico Z: Número atómico 12 6 C Isótopo natural 13 6 C Isótopo estable 14 6 C Radioisótopo (13C) Tests del Aire Espirado Tejido 13C-Sustrato Órgano Microorganismo Actividad enzimática 13CO 2 Aire espirado Dosis oral del sustrato marcado con 13C Páncreas: 13C triglicéridos 13C trioleína Almidón de maíz (biomarcado) 13/12CO 2 Estómago: 13C-urea Hígado: 13CMetacetina 13C Cafeína Intestino delgado: 13C Lactosa 13C Glucosa 13C-Test del Aire Espirado (13C-UBT) para determinación de colonización por Urea Breath Test Helicobacter pylori Estómago Pulmón (aire espirado) NH2 O = 13C Urea NH2 Ureasa (H. pylori) NH3 + 13CO 2 GS-MS 13C-UBT para determinación de colonización por Helicobacter pylori Fundamento La prueba está basada en la fuerte actividad ureasa del Helicobacter pylori. Cuando la 13C-Urea llega al estómago, la enzima ureasa de Helicobacter pylori la hidroliza en amonio y dióxido de carbono marcado (13CO2). Este dióxido de carbono marcado será absorbido por el sistema sanguíneo, difundido a los pulmones y finalmente espirado. La urea (13C-Urea) administrada oralmente se metaboliza a dióxido de carbono y amoniaco, o se integra en el propio ciclo corporal de la urea. 13C-UBT para determinación de colonización por Helicobacter pylori Fundamento 13C-UBT para determinación de colonización por Helicobacter pylori Fundamento Cualquier incremento de isotópico. 13CO 2 será medido por análisis La administración de 100 mg de urea marcada, produce un incremento significativo de 13CO2 en la muestra de aire espirado de pacientes infectados dentro de los primeros 30 minutos. Esto ocurre en pacientes Helicobacter pylori positivos. 13C-UBT para determinación de colonización por Helicobacter pylori Fundamento Las muestras de aliento, tomadas en los tubos de muestras se analizan por espectometría de masas específico para la detección del 13C 13C-UBT Materiales y reactivos Solución rica en ácido cítrico Sorbete 13C-Urea Tubos Método de Administración: •Se administra al paciente una Solución rica en ácido cítrico •Luego de 10 minutos se recogen las muestras basales. •La urea marcada con C13, es administrada al paciente •La Urea será hidrolizada por la ureasa y producirá amonio y bicarbonato que se exhalará como CO2 marcado •El DOB (delta over base) se calcula como la diferencia entre la relación 13C/12C a los 30 minutos respecto del valor basal. •Las muestras recogidas serán leídas por un espectómetro de masas específico para 13C. •DOB 13CO2 igual o superior a 3,5 (‰), el paciente se considera infectado por H. pylori Medición de muestras en el Espectrómetro de Masa (GC-MS) 13C-UBT: Medición de muestras 13C-UBT: Medición de muestras 13C-UBT: Procesamiento de datos Procesamiento de datos - Informe Técnica diagnóstica de gran utilidad como comprobación de la erradicación de la Bacteria, Post Tratamiento •Estudio sencillo y No Radiactivo, el cual esta indicado para cualquier paciente, especialmente en niños, embarazadas. En esta prueba, se administra por vía oral un comprimido disuelto especialmente desarrollado para la detección de Helicobacter pylori y unos minutos más tarde se procede a tomar una muestra de aliento. Este método es sencillo, confiable, rápido y altamente eficaz. 13C-UBT es... •Cómodo… Técnica no invasiva. •Seguro… Utiliza 13C, isótopo estable del carbono (no radiactivo). •Rápido… El procedimiento para la toma de muestra se realiza en 40 minutos. •Fiable… Refleja la colonización en toda la mucosa gástrica. •Adecuado… Apto para niños, embarazadas y madres lactantes. MÉTODOS PARA DETECTAR H. PYLORI Método Sensibilidad/especificidad, % Comentarios Invasor (se necesita endoscopia y toma de material de biopsia) Ureasa rápida 80-95/95100Método sencillo; resultados negativos falsos si en fecha reciente se usaron PPI, antibióticos o compuestos de bismuto. Estudio histológico80-90/>95Requiere preparación histopatológica y tinción; aporta datos histológicos Cultivo —/— Técnica lenta, costosa y que depende de la experiencia; permite conocer la susceptibilidad a los antibióticos Método no invasor Serología >80/>90Método económico y cómodo; no es útil para la vigilancia temprana Detección de urea en el aliento>90/>90Técnica sencilla y rápida; útil para la vigilancia temprana; produce resultados negativos falsos con la terapia reciente (véase el método de ureasa rápida); exposición a radiación en bajas dosis con el método con 14C Antígeno en heces>90/>90Económico, cómodo; no se ha definido su utilidad en la erradicación, pero es promisorio