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Residuos de Medicamentos
Veterinarios en Sub productos
de Origen Animal
Dra. Javiera Cornejo Kelly, M.V., PhD,
Profesor Asistente
Universidad de Chile
Uso de antimicrobianos
• Uso producción animal
• Quinolonas,
macrólidos,
penicilinas,
tetraciclinas.
• En
Chile
se
encuentran
disponibles
formulaciones permitidas para el uso en aves de
engorda.
• Registro de medicamentos veterinarios del
SAG.
Potencial fuente de ingreso de antibióticos a la
cadena alimentaria
Ingreso a través de
tratamiento o piensos
contaminados
Residuos de AM en
productos y subproductos
de origen animal.
Riesgo para la Salud
Pública
Residuos: Efectos
Efectos inmunológicos
Mutagénesis, carcinogénesis y teratogénesis
Efectos toxicológicos directos: Ej. Cloranfenicol
Residuos: Efectos
Efectos en flora intestinal: elevando la presencia de bacterias
antibiótico-resistentes presión selectiva de poblaciones
resistentes.
Importante problema para la Salud
Pública (OMS, 2014).
Pérdida de efectividad del tratamiento  mayores tasas de
hospitalización y muertes
Tejidos comestibles
Límite máximo residual (LMR): Contenido máximo de
residuos resultante de la utilización de un
medicamento veterinario (mg/kg o en g/kg)
reconocida como admisible en un producto alimenticio
.
Periodo de resguardo (PR): Tiempo entre el término
del tratamiento farmacológico con medicamentos de
uso veterinario, y la obtención del producto animal
destinado a consumo humano (días), respetando el
LMR establecido.
Tejidos no comestibles
No existe regulación: subproductos de origen animal sin LMR
establecidos.
Plumas  Harina de pluma para la alimentación de otros animales:
bovinos, porcinos y peces.
Incorporación residuos a la cadena alimenticia.
El año 2008, Estados Unidos produjo 604 mil toneladas de harina de
plumas de las cuales se exportaron 74 mil toneladas (Swisher, 2008).
Estudios: escasa información sobre depleción de residuos farmacológicos
veterinarios.
Subproductos
Materia prima o productos de mayor valor
agregado.
Harinas (de vísceras, huesos, plumas y/o
sangre), cama de broiler (deyecciones,
sustrato, restos de alimentos y plumas) y, las
garras de aves.
Subproductos
Se ha calculado que del peso total de los pollos producidos,
aproximadamente el 37% no se consume directamente por los seres
humanos ( Meeker y Hamilton 2006).
Esta fracción no comestible que consta de cabezas, huesos , vísceras y
plumas , se convierte en una fuente de materia prima para piensos que se
reincorpora en la cadena alimentaria , principalmente en forma de harina de
plumas y subproductos .
En 2008 , la industria de EE.UU. de subproductos reciclados produjo 604
millones de kilos de harina de plumas , de las cuales más del 90 % se utilizó
en ese país ( Swisher 2008 ).
Subproductos
Plumas
•Fertilizante, materia prima para biodiesel,
ingrediente de bioplásticos, ingrediente de piensos
Deyecciones
•Alimento de ganado
•Fertilizante agrícola
Garras
•Consumo directo o rendering
Plumas
• Utilizadas en alimentación de otras especies
productivas
• Sin LMR/PR establecidos
• Escasa información sobre la
bioacumulación de RMV en estos
subproductos.
EVIDENCIA CIENTÍFICA DEL TRASPASO DE RMV A
PLUMAS
Estudios depleción
en Plumas y Tejidos
de Pollos Broiler
San Martin, et al.
(2007)
Cornejo, et al. (2010)
Cornejo, et al. (2012)
Antimicrobianos en
Pollos Broiler
Heinrich, et al. (2013)
Estudio en Plumas
Berendsen, et al.
(2013)
Residuos en Harina
de Plumas
Love, et al. (2012)
•
•
•
•
•
San Martin, et al. (2007) Depletion Study of Enrofloxacin and Its
Metabolite Ciprofloxacin in Edible Tissues and Feathers of White
Leghorn Hens by Liquid Chromatography Coupled with Tandem
Mass Spectrometry
Cornejo, et al. (2010) Depletion study of three formulations of
flumequine in edible tissues and drug transfer into chicken feathers
Cornejo, et al. (2012) Transfer and depletion of enrofloxacin and its
metabolite ciprofloxacin in feathers of treated broiler chickens
Heinrich, et al. (2013) Can the unauthorised use of ceftiofur be
detected in poultry?
Berendsen, et al. (2013) The disposition of oxytetracycline to
feathers after poultry treatment.
Love, et al. (2012) Feather Meal: A Previously Unrecognized Route for
Reentry into the Food Supply of Multiple Pharmaceuticals and
Personal Care Products (PPCPs).
Muestrearon harinas de plumas de diferentes orígenes:
Arkansas, Carolina del Norte, Oregon, California, Idaho, Tennessee y China
(n=12)
Familias de antimicrobianos analizadas más recurrentes:
Sulfonamidas, macrólidos, fluoroquinolonas, streptograminas y tetraciclinas.
GARRAS DE AVES
Incremento del consumo directo en países
asiáticos.
Constante demanda de harina de subproductos
para alimentación animal.
Potencial fuente de reingreso a la cadena
alimentaria ya sea por consumo directo o por
rendering (harinas de carne y hueso)
Exportaciones aumentaron en un 5,6%
alcanzando 2,72 millones de toneladas
métricas (USA PEEC, 2014).
Se exportaron 14.990 toneladas vara de
garras de pollo avaluadas en FOB
US$19.194 millones (APA, 2015).
No existen a la fecha investigaciones en este subproducto y por lo tanto no se ha
estudiado la depleción de fármacos o el comportamiento de estos en la matriz.
EVIDENCIA CIENTÍFICA DEL TRASPASO DE RMV A
GARRAS DE AVES
Körner et al. (2001).
• Compuestas principalmente por hueso y
cartílago
• Muestreó harinas de carne y hueso encontrando
TC en el 100% de ellas, siendo las
concentraciones de OTC las más altas (de hasta
2.295 µg/kg).
Medina et al. (2008) y García-Álvarez (2010).
• Presunción de mayor persistencia debido a la
afinidad de las tetraciclinas por el calcio.
• Altas concentraciones de TC pueden permanecer
en huesos de aves de corral incluso después de
dosis subterapéuticas.
GARRAS DE AVES
Heinrich et al. (2013).
• Analizó un compósito de matrices que incluía garras
para estudiar la presencia de Ceftiofur en pollitos
enteros, detectándose residuos de este
antimicrobiano.
• Presencia de Ceftiofur en compósito que incluyó
garras.
Odore et al. (2015).
• Analizó muestras de hueso de pollos broiler (esterón,
fémur, tibia y fíbula) tratados de forma terapéutica,
encontrando niveles promedio de OTC y epi-OTC de
1.286 µg/kg.
• Presencia de OTC en huesos de pollos broiler tratados.
Deyecciones de pollos
30 al 90% de la dosis dada es excretada en su forma no metabolizada o como
metabolitos activos  altos niveles de estos compuestos se espera estén
presentes en heces
Berendsen et al (2014)
• Heces de cerdos y vacas se encontraron cantidades de antibióticos elevadas.
• En el 55% de las muestras de heces de cerdos y en el 75% de las muestras de heces de vacas al
menos un compuesto de antibiótico fue detectado.
• También se encontraron mezclas de antibióticos (hasta ocho en un solo animal)
Heinrich et al., (2013)  tejidos comestibles (músculo e hígado) y tejidos no
comestibles (plumas y heces) en pollitos de un día, demostraron que si bien
no era posible encontrar residuos de antibióticos en tejidos comestibles
después del tratamiento, en plumas y heces si se encontraban presentes.
Deyecciones de pollos
Cama broiler, constituida por heces de aves, material absorbente o cama
propiamente tal, que generalmente es viruta de madera, paja de trigo o
capotillo de arroz, plumas y restos del alimento suministrado a las aves.
• Esta, es una buena opción alimenticia, sobre todo para rumiantes, que por
sus características digestivas pueden hacer mejor uso de sus nutrientes.
• Así mismo, es una fuente favorable de proteína, energía y minerales,
especialmente en la cría y engorda de vacunos.
Además, debido a que el estiércol es utilizado para optimizar el crecimiento y
cosecha en la agricultura, los antibióticos pueden ser diseminados de manera
preocupante en todo su entorno.
• efectos ecotoxicológicos adversos
• emergencia de resistencia bacteriana
Antimicrobianos actualmente en estudio





Tetraciclinas
Florfenicol
Sulfonamidas
Tilosina
Lincomisina
Estudio Tetraciclinas
Obtención de muestras
Sacrificio
Material obtenido
Procesamiento de muestras
Extracción de tetraciclina
Tampón EDTA McIlvaine
Acetona grado HPLC
Clean up o limpieza de las muestras
Secado bajo flujo
de nitrógeno
Análisis instrumental
• Cromatografía liquida acoplada
a detector de masa triple
cuádruplo (LC MS/MS) API 3200
mass espectometer de ABSciex
• Implementación
de
metodologías confirmatorias
• Fragmentación de la molécula
Masas
Analito
Ion
precursor
Primer
ion
Segundo
ion
OTC
461,0
426,0
381,0
epi-OTC
461,0
426,0
381,0
Estudio de depleción
500
Todas las observaciones deben
encontrarse bajo el LD
450
Con 95% de confianza
400
Concentración (µg/kg)
350
LMR hígado
300
250
200
150
LMR músculo
100
LD
50
0
Día 1
Día 2
Día 3
Día 4
Día 5
Periodo de resguardo (días)
Día 6
Día 7
Día 8
Plumas
Dia de
Edad
Día post
muestre
pollos
tratamiento
o
(días)
N° de
obs.
PLUMAS
OTC
4epi-OTC
(µg/kg)
MUSCULO
OTC
4epiOTC
(µg/kg)
HÍGADO
OTC 4epi-OTC
(µg/kg)
1
3
34
8
2947,7
2662
8,82
11,04
22,4
10,5
2
5
36
8
556,6
492,8
8,82
3,67
10,2
7,2
3
7
38
8
451,8
675,5
9,68
4,69
4,7
6,3
4
13
44
8
276,3
227,5
0,66
3,17
X
X
5
19
50
7
100,9
89,7
X
X
X
X
6
22
53
7
27
15,9
X
X
X
X
Altos niveles de OTC se encontraron en plumas de aves tratadas,
Los niveles de OTC fueron en general más altos que los alcanzados por su
epímero, lo cual es esperable ya que este último corresponde a un
metabolito de la Oxitetraciclina.
Plumas
PERÍODO DE RESGUARDO OXITETRACICLINA 10%
EN PLUMAS DE POLLO BROILER (LD 20 µg/kg)
Concentración (LN µg/kg)
6,00
LogN LD – Intercepto
Pendiente
5,00
4,00
y = -0,0865x + 5,2599
R² = 0,828
3,00
Periodo de
Resguardo 95%:
46 días
2,00
1,00
y = -0,0833x + 3,3554
R² = 0,7841
0,00
0
10
conc. OTC plumas
Lineal (conc. OTC plumas)
Lineal (LD)
20
Tiempo (días)
30
40
LD
Lineal (conc. OTC plumas 95%)
50
Músculo
PERÍODO DE RESGUARDO OXITETRACICLINA 10%
EN MÚSCULO DE POLLO BROILER (200 µg/kg)
concentración (LN µg/kg)
3,50
3,00
LogN LMR – Intercepto
Pendiente
y = -0,0706x + 3,1443
R² = 0,2913
2,50
2,00
Periodo de
Resguardo 95%:
12 días
1,50
y = -0,0485x + 1,0111
R² = 0,1336
1,00
0,50
0,00
-0,50
2
4
6
8
10
12
Tiempo (días)
conc. otc musc.
Lineal (conc. otc musc.)
Lineal (LMR)
LMR
Lineal (conc. otc musc. 95%)
14
Hígado
PERÍODO DE RESGUARDO OXITETRACICLINA 10%
EN HÍGADO DE POLLO BROILER (600 µg/kg)
4,00
concentración (LN µg/kg)
3,50
LogN LMR – Intercepto
Pendiente
y = -0,142x + 3,5622
R² = 0,4452
3,00
2,50
2,00
1,50
Periodo de
Resguardo 95%:
6 días
y = -0,1933x + 1,9102
R² = 0,5973
1,00
0,50
0,00
-0,50
2
3
4
5
6
7
Tiempo (días)
conc. otc hígado
Lineal (conc. otc hígado)
Lineal (LMR)
LMR
Lineal (conc. Otc hígado 95%)
8
Resumen
Matriz
Período de Resguardo (días)
OTC
4epi-OTC
Plumas
46
42
Músculo
12
11
Hígado
6
3
→ Casi 7 veces el período de resguardo
calculado para la formulación
farmacéutica comercial utilizada
Garras
Extracción de OTC desde la matriz
Tampón
EDTA
McIlvaine
Clean up o limpieza de las muestras
Secado bajo
flujo de
nitrógeno
suave
RESULTADOS
OTC en Garras de pollos broiler
Muestreo
Días post
tratamiento
Días de vida
Número de
Concentración promedio
observaciones
OTC (µg/kg)
M1
3
24
8
1835
M2
9
30
6
984
M3
15
36
7
157
M4
19
40
7
20
RESULTADOS
epi-OTC en Garras de pollos broiler
Muestreo
Días post
tratamiento
Días de vida
Número de
observaciones
Concentración promedio
epi-OTC
(µg/kg)
M1
3
24
8
1162
M2
9
30
7
370
M3
15
36
7
154
M4
19
40
7
84
PERIODO DE RESGUARDO PARA OXITETRACICLINA 10% EN GARRAS DE
POLLOS BROILER (LD 20 µg/kg)
Concentración (LN ug/kg)
6,00
5,00
4,00
y = -0,1101x + 5,5508
R² = 0,871
3,00
2,00
1,00
y = -0,1283x + 3,7901
R² = 0,905
0,00
0
5
10
15
20
25
30
38,6 días
35
-1,00
39 días de periodo de resguardo para OTC
-2,00
Tiempo (días)
Oxitetraciclina 10%
LD 20 ug/kg
Lineal (95% tol limit with 95% confidence)
95% tol limit with 95% confidence
Lineal (Oxitetraciclina 10%)
Lineal (LD 20 ug/kg)
40
Deyecciones
LC-MS/MS
CTC/444.0
Epi-CTC/444.0
CTC en Deyecciones de pollos broiler
Muestreo
Días post
tratamiento
Número de
Días de vida
observaciones
(homogenizadas)
Concentración promedio
CTC (µg/kg)
M1
5
36
8
455
M2
9
40
8
284
M3
11
42
8
270
M4
15
46
8
151
Epi-CTC en Deyecciones de pollos broiler
Muestreo
Días post
tratamiento
Número de
Días de vida
observaciones
(homogenizadas)
Concentración promedio
Epi - CTC (µg/kg)
M1
5
36
8
1180
M2
9
40
8
463
M3
11
42
8
378
M4
15
46
8
260
Screening Microbiológico
1,2-1,6 cm  positiva
GTe:
Presencia Involuntaria de
medicamentos en los alimentos a
través de la contaminación cruzada
en piensos
• Se incorporaron los antecedentes mencionados
• Señalándose que queda evidenciado que al cumplir los periodos de resguardo para
tejidos comestibles, estos no aseguran que los subproductos de estos animales lo estén,
transformándose en una importante fuente de reincorporación de estos residuos a la
cadena alimentaria, a través de los piensos.
• Se debiera fiscalizar la presencia de RMV en piensos para evitar de esta forma su
incorporación en la cadena alimentaria.
• En relación a la contaminación involuntaria por medicamentos veterinarios provenientes
de subproductos de la industrias productivas, como es el caso de las aves, se hace
necesario evaluar mediante estudios de depleción de medicamentos veterinarios, según
los fármacos comúnmente utilizados, para estimar la ausencia o límites permitidos de los
medicamentos veterinarios en la utilización de estos como materias primas, asegurando
de esta manera la inocuidad en el consumidor final.
Gracias
Dra. Javiera Cornejo Kelly, M.V., PhD,
Profesor Asistente
Universidad de Chile