Descubriendo el microscopio

Transcripción

Descubriendo el microscopio
Ing. Carlos Javier Martinez Castro
Fomento tecnológico y Vinculación
TEMAS DEL TALLER:
DESCUBRIENDO EL MICROSCOPIO
Principios básicos , clasificación y funcionamiento de un microscopio.
La historia del microscopio.
Clasificación del microscopio.
Tipos de microscopios.
Ventajas y desventajas.
EL MICROSCOPIO EN LA ACTUALIDAD
Terminología práctica de la microscopía óptica y caracterizar correctamente un microscopio.
Las partes del microscopio.
Pruebas en uso.
Óptica ICS.
Revolver portaobjetivos.
Procedimientos de valoración.
Selección de equipo.
Oculares.
Objetivos.
Sistema de iluminación.
MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO
Técnicas de mantenimiento preventivo y correctivo a equipos microscópicos
y seleccion accesorios y refacciones adecuados para cada equipo.
Mantenimiento preventivo.
Errores en la práctica.
Selección de refacciones y accesorios.
DESCUBRIENDO EL MICROSCOPIO
INTRODUCCIÓN

El Microscopio siempre ha contribuido en el desarrollo
de la ciencia .
 Desde su invención siempre ha sido la punta de flecha
que ha guiado a la civilización en sus avances científicos.
 Sin el microscopio hubiera sido imposible saber de los secretos
de la naturaleza, no existiría la ciencia médica, ni el análisis de
materiales en la industria.



Veremos sus progresos hasta llegar a la perfección que a adquirido durante los siglos, así mismo se dará una
descripción lo más clara y detallada de todas sus partes y lo delicado de cada una de sus componentes.
Sabremos que partes podemos remover y cuales se recomienda no quitar, para lograr un mejor
aprovechamiento de este instrumento, además de la prevención de futuros problemas en su
mantenimiento y cuidado.
Daremos una información clara, sencilla y sin complicadas formulas ópticas, con lo que se pretende dar una
guía tanto de la operatividad del microscopio como para futuras adquisiciones.
LA HISTORIA DEL MICROSCOPIO
¿Quién fue el genio que invento el Microscopio?
Sir John Layard descubrió una lente plana convexa de cristal de roca durante sus excavaciones
en Ninive, en el periodo de 705 a 721 a.C. observó sus propiedades para quemar materiales
suaves tales como hojas de papel, piel de insectos etc.
El Microscopio se invento, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en
opinión de los holandeses.
La palabra microscopio comenzó a usarse por los componentes de la "Accademia dei Lince",
sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron un trabajo sobre la
observación microscópica del aspecto de una abeja.
El primero en utilizar la palabra microscopium fue Atanasio Kircher (1601-1680), en su libro
"Ars magna Lucis et Umbra".
Galileo participó en el desarrollo de espejuelos y espejos convexos. Campini descubrió que era
posible pulir lentes a dimensiones determinadas.
Boreli, en Italia fue el primero que uso el microscopio para estudiar tejido animal.
Las primeras publicaciones dela microscopia aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi
prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al observar al microscopio los
capilares sanguíneos y El ingles Robert Hooke, publicó su “Micrographia” describiendo la
estructura de los tejidos, secciones de arterias y venas y muchos otros objetos y formas.
LA HISTORIA DEL MICROSCOPIO
Antonio Van Leeuwenhoek (holandés), a mediados del siglo XVII, utilizando microscopios
simples de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias,
espermatozoides y glóbulos rojos.
Leeuwenhoc; Observó y escribió acerca de innumerables cosas, pequeños pedazos de fruta
o legumbres, la perfección de la cabeza de una mosca, el pie de una pulga, ojos de algunos
insectos etc. En 1723., descubrió pequeñísimos organismos en una gota de agua como
también en saliva humana y en casi todos los objetos que estudiaba, que más tarde guió a
las famosas investigaciones de Pasteur y de Koch e indudablemente fue el comienzo sobre
el cual se fundo la ciencia de la medicina moderna.
En el siglo XVIII el microscopio sufrió diversos adelantos mecánicos que aumentaron su
estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras ópticas.
Ha principios del siglo XIX, el microscopio compuesto, con objetivo y oculares ofrecía más
posibilidades para la solución de los problemas que estaban siendo investigados por los
científicos.
En 1825 el Dr. C.L. Chevalier en Francia, crea la primera firma de manufactura de
microscopios Chavalier e Hijo en París.
La casa Carl Zeiss de Jena, Alemania, fue fundada en 1846, y por poco más o menos 50
años, su principal producto fue el microscopio.
En 1886 el famoso profesor Abbe, de la Universidad de Jena, se asocio con Zeiss, y dedico
su gran talento a la teoría de diseño científico óptico. En su “teoría de la forma de la
imagen microscópica” demostró la importancia de considerar los efectos de difracción al
usar el microscopio.
LA HISTORIA DEL MICROSCOPIO
En 1877 el profesor Abbe, publicó la “Teoría de la forma de la imagen microscópica” y por
encargo de Carl Zeiss mejoró la microscopía de inmersión.
A principios de los años 30 se alcanzo el limite teórico para los microscopios ópticos no
consiguiendo estos, aumentos superiores a 500X o 1000X.
Los primeros años del siglo XX trajeron un rápido cambio. Los trabajos de Pasteur, Lister, Koch y
otros volvían de Europa sabiendo algo de la nueva ciencia de bacteorología.
El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) fue el primer tipo de microscopio electrónico,
utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de
100.000 X. Fue desarrollada por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931.
Posteriormente, en 1942 surge el microscopio electrónico de barrido (SEM), tan necesarios en
medicina, botánica y zoología. Universidades, hospitales y centros de investigaciones, empezaron
a solicitar microscopios cada vez más exactos y más complejos.
Los progresos en las ciencias medicas farmacéuticas alimentos metalurgia y desarrollos
científicos de las diferentes áreas se deben en gran parte al perfeccionamiento del microscopio,
por su calidad en sus materiales ópticos y mecánicos, ahora con adaptadores para sistemas de
cámaras y en amplificaciones en computadoras podemos lograr día a día una mejor calidad y
veracidad en el avance del desarrollo científico de la microscopia.
CLASIFICACIÓN DEL MICROSCOPIO
Actualmente existe una gran diversidad de equipos, los requisitos que se plantean a los
microscopios de investigación evolucionan vertiginosamente en el campo de la microscopia.
Todos los elementos de los microscopios son de acceso y manejo fácil. Los tubos binoculares
complementan el tipo de construcción ergonómicamente ventajosa del microscopio, gracias a
la altura regulable y separación interpupilar de los oculares, al ángulo de observación
individualmente graduable al campo visual para un trabajo eficiente y libre de cansancio.
TIPOS DE MICROSCOPIOS

Existen microscopios monoculares, microscopios binoculares, microscopios estereoscópicos,
microscopios con sistema invertido, (metalográfico), microscopios con sistema de captura
digital de imágenes, microscopios para cirugía.

Es necesario preparar las muestras debidamente antes de poder estudiarlas, el objeto tiene
que ser muy delgado para que este suficientemente transparente y así permita el paso de
luz, de lo contrario la observación del objeto no será la correcta.

En otros análisis algunos objetos no son suficientemente transparentes y en tal caso
solamente se podrá estudiar su superficie, y esto se logrará con un microscopio
estereoscópico.
TIPOS DE MICROSCOPIOS

Las preparaciones secas tienen posibilidad muy limitada para sus estudios, generalmente
se estudia con aumentos bajos iluminándolos desde arriba, es decir como objetos opacos,
de nuevo se recomienda los microscopios estereoscópicos.

Preparaciones temporales, revelan mas detalle si se montan en una gota de agua y se
cubre con un cubre objetos, el cubre objetos es necesario para que el agua no toque la
lente frontal del objetivo, y también para que se tenga una superficie plana y así entrará la
luz al objetivo, aquí empieza a tenerse mucho cuidado en nuestra óptica ya que podemos
humedecer las lentes de los objetivos y deberemos de estar secando con un cotonete la
parte de contacto de nuestro objetivo.

Preparaciones permanentes, se monta el objeto en un material transparente sobre la
lamina porta objetos y después se cubrirá con otra lamina más delgada de vidrio cubre
objetos. Esto requiere que la preparación sea deshidratada por medio de alcohol o alguna
otra substancia química.

La microscopia metalúrgica difiere tanto de la convencional que ha sido necesario la
construcción de un microscopio especial para esta clase de trabajo.

En el caso del microscopio estereoscopio esta diseñado fundamentalmente para darnos la
tercera dimensión de un objeto, es decir para que se pueda observar su profundidad.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
MARCAS DISPONIBLES EN EL MERCADO
habrá que tomar en cuenta algunos aspectos muy importantes en la adquisición de un
equipo microscópico, como el servicio postventa y la garantía que deberá brindar el
proveedor, sea accesible y atienda las necesidades inmediatas del cliente. En las pruebas
sobre todo ópticas, no es posible engañar la calidad de las imágenes, por la parte de
iluminación también es muy importante conocer que tipo de iluminación que se tiene y
por último y no menos importante la mecánica que debe de ser suave, rígida y segura en
cada uno de los movimientos.
El proveedor de microscopios deberá saber cual será la aplicación del equipo y así
ofrecer el producto adecuado a su cliente, en caso de ser de enseñanza, de laboratorio
de investigación, quirúrgico entre otros.
Es muy importante verificar la capacidad del soporte técnico de la casa vendedora, para
el posible crecimiento del microscopio, ya que ahora existen estas ventajas de ir
adaptando los equipos y complementándolos de acuerdo a las necesidades.
A continuación se mencionan algunas marcas reconocidas por años en el mercado
nacional de microscopios, las cuales cuentan con un gran respaldo en la fabricación de
los mismos: Carl Zeiss de México, Olimpus, American Óptica, Rossbach de México. Motic
y Leica. Se tendrá que verificar si el proveedor cuenta con accesorios y asistencia técnica
inmediata.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Cuando se adquiere un microscopio es muy importante conocer lo que nos ofrece el
proveedor de microscopios y las ventajas del equipo, ya que esto será un beneficio en las
largas jornadas de trabajo.
Es muy común escuchar que la iluminación es flexible según Kohler, que se cuentan con
objetivos ICS, que algunos objetivos son compatibles con otros microscopios, otros nos
dicen que son totalmente automatizados para algunas aplicaciones, objetivos
apocromaticos y de campo plano, cosas que de verdad son posibles solo que algunos las
dicen en sus manuales pero no las cumplen, y esto es algo que sobre todo en cuestiones
de la óptica si es difícil de probar que el equipo lo este cumpliendo.
No es necesaria la experticia en la clasificación de la óptica, más sin embargo será de
mucha utilidad identificar con facilidad algunos problemas sencillos de los oculares,
objetivos condensadores, desviaciones de los prismas, que nos ayudarán a tener en
buenas condiciones nuestro equipo de trabajo.
Se identificará la causa del problema al observar algo de color en los bordes de las
imágenes que se analizan, o al no enfocar bien con un ocular y con el otro si, o en ambos
oculares a la vez; ya que está problemática suele suceder frecuentemente en los equipos.
EL MICROSCOPIO EN LA ACTUALIDAD
LAS PARTES DEL MICROSCOPIO
El microscopio ha venido evolucionando día a día en sus
avances ópticos electrónicos y mecánicos. Hoy en día con la
aparición de nuevos modelos en el mercado, en algunos casos
resulta difícil para el usuario decidirse a dar un mantenimiento
preventivo al equipo, ya que la falta de conocimiento
adecuado de las partes del microscopio pronuncian el abismo
entre las generaciones de microscopios.
El conocimiento de la estructura fundamental de un
microscopio y las partes que lo componen así como su función,
ayudarán al usuario en su interrelación con el equipo
microscópico para tomar las decisiones adecuadas sobre los
cuidados necesarios del mismo.
PARTES DE UN MICROSC0PIO
UN MICROSCOPIO SE CONFORMA POR LAS PARTES
QUE SE OBSERVAN EN LA SIGUIENTE FIGURA.
PRUEBAS EN USO
Óptica ICS
La óptica ICS (Infinity Color-corrected System) quiere decir: Imágenes luminosas, con corrección cromática y
contrastes fuertes. Por esta razón, los objetivos ICS forman una parte muy importante en el microscopio para
el trabajo diario de laboratorio.
Revolver portaobjetivos
El revolver portaobjetivos debe garantizar la visión libre y clara de las muestras de observación así como
una marcha suave y se enclave con precisión con cada uno de los objetivos.
Procedimientos de valoración
Procedimientos para valorar objetivos plan acromático 4 ò 5X, 10X, 40X y 100X. Los objetivos
plano acromáticos serán sometidos a la prueba de la “Estrella” para observar.
a) Campo plano
1.- Tomar un substrato con pin-holes.
Este substrato puede ser fabricado depositando polvo o mejor pequeñas micro esferitas en un porta objeto
y luego aluminisarse en una campana de vacío, o utilizar polvo blanco como objetos corpusculares en el
porta objeto. El tamaño de estas micro estructuras deben de ser tal que no puedan ser resueltas por
cuestiones de difracción por el objetivo a evaluar de un microscopio.
2.- Enfocar los pin-holes con el objetivo de evaluar y seleccionar de estos los que presenten un patrón de
difracción más cercano al de un disco de Airy y por lo tanto que el objetivo no pueda resolver su estructura.
Es necesario comprobar que los pin-holes seleccionados sean lo mas circulares posibles por lo que es
necesario verlos con un instrumento que garantice que lo son. (Puede ser utilizando otro microscopio que
se este seguro de su calidad de imagen).
3.- Realizar una observación de todo el campo visual.
4.- La presencia de un campo plano estará dada por un enfoque uniforme y obtención de nitidez total en
todo el campo visual, sin necesidad de hacer continuos ajustes con el mando micrométrico.
5.- Para que presente campo plano los pin-holes de las orillas y del centro deben de estar ambos
enfocados.
PRUEBAS EN USO
b) Acromatismo (corrección de color, ausencia de color en las imágenes del microscopio)
1.- Utilizar el mismo substrato con pin-holes e la prueba de campo plano.
2.- Colocar sobre la platina el substrato.
3.- Seleccionar y enfocar en eje y fuera de eje un pin-hole con patrón de disco de airy.
4.- Observar si en eje existe aberración cromática al estar enfocado y al desenfocar ligeramente dentro
y fuera de foco el patrón de airy.
5.- Enfocar fuera de eje un pin-hole.
6.- Observar si en eje existe aberración cromática al estar enfocado y al desenfocar ligeramente dentro
y fuera de foco el patrón de airy.
7.- Si se genera una descomposición de haz de luz blanca mostrando una serie de halos de colores,
se estará produciendo el fenómeno de aberración cromática.
Esta prueba se realiza sin colocar filtro adicional alguno al microscopio, es decir con luz blanca.
Por lo tanto, esta prueba recibe el nombre de prueba de la estrella, ya que el campo oscuro obtenido
en el campo de observación, así como los puntos de luz observados semeja la bóveda celeste. 3.-Realizar
una observación de todo el campo visual.
La prueba de la estrella es particularmente utilizada para lentes de objetivos de microscopios y lentes
de telescopios.
PRUEBAS EN USO
c) Aberraciones (imágenes distorsionadas o borrosas).
1.- Tomar el substrato con pin-holes de las pruebas anteriores.
2.- Enfocar en eje un pin-hole para observar su patrón de airy.
3.- En ausencia de aberraciones geométricas de primer orden el patrón de airy no debe
ser sustancialmente distorsionado. Por lo que se debe mostrar simetría y uniformidad en sus
discos de airy.
4.- Desenfocar ligeramente el patrón de airy. dentro y fuera de foco.
5.- En ausencia de aberraciones el patrón se desenfocara simétricamente en más de un sentido
que en otro. En caso de que exista distorsión, esta presenta algún tipo de aberración
geométrica.
6.- Repetir paso 2, 3 y 4 para pin-holes fuera de eje.
7.- Observar la distorsión del patrón de airy. enfocado y desenfocado dentro y fuera de eje,
para detectar presencia de aberraciones geométricas.
Nota: Es conveniente utilizar filtros de luz en esta prueba, en caso de que existan
aberraciones cromáticas, con el fin de evaluar las aberraciones geométricas, para una longitud
de onda.
8.- Estas pruebas son cualitativas, más no subjetivas. La prueba de la estrella es adecuada
para determinar si existe o no aberraciones en un sistema óptico.
CARACTERIZACIÓN DE UN MICROSCOPIO
Oculares
Su función es magnificar más el aumento del objetivo, y colocar las imágenes
que ha formado el juego óptico en un punto focalde poco más o menos tres o
cuatro milímetros del lente superior del ocular.
Existen varios tipos de oculares, los Huygens, los Ramsden los de punto focal
largo, los de campo ancho (especiales para patología).
El microscopio compuesto forma una imagen real amplificada del objeto por
medio de una lente llamada objetivo y luego se observa esta imagen por
medio de una lupa a la que se le llama ocular.
La imagen se observa invertida debido a la inversión del objetivo. Como la
pupila del ojo tiene un diámetro pequeño, es necesario colocarla sobre el
plano en que todos los rayos cruzan el área circular mínima, a fin de que todos
los rayos penetren en el. Esta área es una imagen real de la abertura del
objetivo, y se domina pupila de salida.
Este sistema tiene dos desventajas: la pupila de salida esta muy alejada del
ocular, y el ocular debe tener un diámetro mayor que el de la imagen real.
Se pueden evitar mediante el uso de una lente convergente sobre el plano de
la imagen, a la que llaman lente de campo. Esta lente dobla el haz
acercándolo al eje óptico sin cambiar la imagen, conservando así la misma
amplificación el microscopio. Al conjunto formado por el ocular y la lente de
campo se le llama en forma general simplemente ocular.
CARACTERIZACIÓN DE UN MICROSCOPIO
Objetivos
La amplificación de un microscopio se obtiene multiplicando la ampliación del objetivo por la
amplificación del ocular.
Existen cuatro tipos de objetivos, según su poder amplificador. Para bajas amplificaciones el diseño
es un doblete simple o un par de dobletes formando el sistema de Lister, para amplificaciones
intermedias se añade al frente del doblete una lente plano-convexa gruesa a fin de disminuir la
distancia focal del objetivo. En esta forma se obtiene el diseño
de amici.
Para altas amplificaciones es necesario disminuir aun mas la distancia focal del objetivo sin
introducir aberraciones. Esto se logra añadiendo al frente del objetivo un sistema de dos lentes al
que sé acostumbra llamar dúplex frontal; se obtiene así, el llamado objetivo sumergible o de
inmersión.
El dúplex frontal del objetivo sumergible, hace uso de las propiedades de los puntos aplanaticos
de Abbe.
CARACTERIZACIÓN DE UN MICROSCOPIO
Sistema de Iluminación
El sistema de iluminación básico de un microscopio consta de un lente
condensadora que forma una imagen del filamento de la fuente
luminosa sobre el diafragma de abertura. Esta imagen se vuelve a
formar sobre la pupila de entrada del objetivo del microscopio por
medio de la lente condensadora.
El diafragma de la abertura efectiva del objetivo y la lente condensadora
forman también una imagen del diafragma de campo sobre el objeto.
Este diafragma controla el diámetro del área iluminada del objeto a
observar.
Selección de equipo
Para una correcta selección de equipo, que satisfaga las necesidades de
las observaciones a realizar es recomendable tomar en cuenta los
siguientes incisos:
a) De las partes más delicadas es la adquisición de equipos de
microscopia que actualmente se tienen que licitar por ley en algunas
instituciones y dependencias gubernamentales sobre todo si es una
compra de más de 10 equipos, es importante saber y conocer los
diferentes modelos que se ofrecen en el mercado pero no son siempre los
mas adecuados por ejemplo, para que se ocuparan, ya que el usuario o
comprador decidirá cual de los equipos es el mejor o mas adecuado para
lo que se usara. Si es de laboratorio o de experimentación o de cirugía o
quizás simplemente de educación o enseñanza.
CARACTERIZACIÓN DE UN MICROSCOPIO
b) Por seguridad de los equipos algunos fabricantes adaptan en los
oculares, objetivos, lentes condensadoras y filtros de color algunos
sistemas de seguridad los cuales son pequeños tornillos que no permiten
sacar al ocular o al objetivo, y esto es seguridad tanto de limpieza como
para evitar extravíos de alguna parte del microscopio ya que el extravío de
cualquier parte del mismo es costoso para cualquier persona o
institución.
c) En la selección de equipos ya se tienen algunas bases que las mismas
instituciones han desarrollado para estar lo mas seguros de tener lo que
se necesita para un buen trabajo ya sea de educación enseñanza o
investigación y desarrollo científico estas bases son simples y por
supuesto no es mas que involucrar a los interesados en este trabajo y
ponerse a escribir para así llegar a un común acuerdo de lo que se
necesita y asía adonde se quiere llegar. Para que cuando hagan la
invitación a los proveedores de microscopios ellos sepan que es lo que
esperamos de los equipos por ofertar y por supuesto la calidad de los
elementos que lo compones será un factor importante para una final y
acertada decisión.
MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
El microscopio es un instrumento de precisión construido de valiosos y delicados materiales, con
un buen mantenimiento y cuidado tal instrumento durara muchos años, pero solo bastara un
descuido en la perdida
de cualquiera de sus elementos puede arruinarlo y dejarlo inservible, si vamos a mover
constantemente
nuestro equipo es conveniente tomarlo de las partes que nos indica el proveedor generalmente
es del brazo o cuello del microscopio, estando frío por supuesto esto evitara que se fundan los
focos de iluminación, el lugar de almacén del deberá ser lo mas limpio del polvo, humedad, o
exceso de calor en anaqueles estables y fijos.
Al iniciar el mantenimiento de un microscopio es muy importante tener las herramientas y los
materiales adecuados, como soluciones líquidas preparadas para la limpieza; y por supuesto una
área destinada para el mantenimiento.
Las herramientas y materiales necesarios son:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Se requiere jeringa pera del # 5 o aire comprimido
Despachador con 60% de acetona y 40% de éter
Algodón y palillos para cotonetes
Desarmador de cruz o estrella
Desarmador plano
Juego de llaves allen
Thinner
Estopa
Silicón líquido
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
Cuando no se tiene la práctica es importante seguir las siguientes
indicaciones:
a)
Se comienza removiendo los oculares ya que son los que generalmente siempre
están más sucios, es necesario iniciar una buena limpieza empezando con aire, ya
sea con la jeringa pera o aire comprimido y luego con un cotonete humedecido
de la solución de 60% de acetona y 40% de éter en un despachador de solventes
para que este no se evapore, sé dará una pasada sobre la lente ocular y en un
sentido tratando de pasar por toda la lente se tira el cotonete y se toma otro y se
realiza la misma operación viendo que quede limpia la superficie, cuando la grasa
y polvo adherido desaparecen. Se inspeccionara la parte posterior del ocular,
siempre sin desarmar ya que el ensamble de los oculares de fábrica vienen libres
de impurezas internas y es Imposible que se penetre el polvo a menos que lo
dejemos en lugares húmedos por lo pronto NO se deberá abrir nunca un
componente óptico que sabemos que esta sellado ya que se puede perder la
alineación óptica de nuestras lentes.
b)
Se revisará que el cabezal del microscopio gire los 360° alrededor del cuerpo y
ver que tenga un ajuste de giro. Revisando el tornillo opresor que sé vera en el
cuello de giro.
c)
Los objetivos también sé removerán de su lugar, estos cuentan con un sistema
de rosca en el revolver del microscopio y se destornillaran cada uno de ellos para
poder limpiar las caras de mayor contacto con las muestras de análisis de trabajo;
se hará la misma aplicación que con el ocular limpiando con cotonetes y aire a
presión por la parte posterior del objetivo, NO se deberán violar, sacar, sumergir
en soluciones de limpieza a los objetivos, ya que estas prácticas dañaran
permanentemente al objetivo, en la parte posterior se inyectará el aire a presión
para su limpieza, la cual será suficiente.
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
d) La platina del microscopio es un lugar en donde se escurren diferentes materiales
y es la parte que soporta las muestras de análisis; esta cuenta con una regleta de
desplazamiento y pinzas de sujeción de el portaobjetos; en la mayoría de los
microscopios la regleta y la pinza se pueden remover de la platina para lograr una
mejor limpieza y un engrasado a las cremalleras de desplazamiento X, Y.
La platina al igual que la regleta se limpiarán con solvente thinner, para remover
cualquier sedimento de análisis, pero teniendo cuidado de no tocar otra parte
del cuerpo del microscopio con el thinner, ya que está sustancia puede resultar
muy agresiva para otras partes.
Un buen espacio acondicionado para el mantenimiento será lo más adecuado
para ir poniendo con orden cada pieza que se retira y limpia del microscopio.
e)
El condensador y del diafragma son partes muy delicadas, subiendo el
condensador hasta la parte mas alta o sea cerca de la platina, se afloja el tornillo
opresor que sé encuentra a un costado del diafragma y con las dos manos
sujetamos el condensador que generalmente esta integrado el diafragma, con la
precaución de no lastimar la óptica de amplificación o difusión de la fuente de
iluminación que esta en la base del microscopio, ya afuera se limpiará primero la
base o soporte de la óptica del condensador la cual generalmente tendrá
muchos residuos ya secos de viejas muestras y quizás pequeñas astillas de vidrio,
ya que con frecuencia los portaobjetos se fracturan y en este lugar se depositan
pequeños fragmentos de vidrio, con loas cuales habrá de tenerse cuidado. Se
puede usar thiner para Limpiar la parte mecánica de desplazamiento del
condensador y en donde se hayan depositado residuos de gilol o de muestra de
análisis. Pasando a la aplicará como en las anteriores (ocular y objetivo) el
mismo procedimiento de aire, cotonete y la solución de acetona con éter tanto
en la lente superior como en la interior. NO se deberá desarmar el condensador
y diafragma, ya que no es necesario, solo en caso de que el diafragma presente
daño.
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
f)
Finalmente en la parte inferior del microscopio, se observa la lente difusora de luz, la
cual es convexa, se le aplicará primero aire comprimido y luego la solución de limpieza
de acetona con éter por la parte superior, si lente esta muy polvosa o sucia por dentro
será necesario remover la tapa de la base del microscopio. Algunos microscopios tienen
un diafragma el cual se opera desde afuera o desde la base de los microscopio, esta
tapa se remueve solo que sea necesario tanto por la limpieza óptica como para el
cambio de foco o algún desperfecto electrónico, que pudieran ser cables quemados
por un alto voltaje, cambio del potenciometro de luz o soldado de alguna parte del
cable de alimentación de luz.
g)
Una vez que el microscopio esta sin sus partes ópticas principales quedará el cuerpo
del microscopio, el cual también deberá ser limpiado, se comienza verificando el mando
de enfoque que traslada la portaplatina, la cual esta situado de manera funcional, se
manejará fácilmente, mientras que las manos están apoyadas en la mesa de trabajo.
El mando con engranaje de rodamiento permite enfocar todas las preparaciones de
manera exacta y segura sin requerir mantenimiento y reajustándose automáticamente.
En el caso de aumentos bajos, la muestra se enfoca fácilmente, con el mando
macrométrico. El mando micrométrico recorre toda la carrera.
Los componentes del mando están protegidos por limitadores en las posiciones finales.
Mando micrométrico equivale 1 vuelta= a 0,2mm de desplazamiento. Mando
macrométrico equivale a 1 vuelta= a 2mm de desplazamiento , la carrera total es de
25mm que los mandos macro y micro deberán estar operando suave y sin ningún
problema de vibración externa, para detectar si el equipo necesita grasa el tipo de grasa
es de silicona esta dura varios años sin que sea necesario remover ya que por sus
propiedades no-suelta absolutamente nada de escurrimientos de aceites o de otros
materiales y se adhiere en las cremalleras de avance por lo que es inmediato ya que el
movimiento macro o micro se endurece y esto nos indica que algo anda mal ya que
siempre estos movimientos son suaves y cómodos de operar.
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
En la mayoría de los mandos micro y macro de los microscopios se cuenta con un
sistema de freno o de pocicionador del macro y con el micro se puede mover y ajustar
mejor el enfoque, es frecuente que este sistema de freno o de ajuste se dañe, para
esto se tiene que iniciar un proceso de desarmado mecánico de las perillas de avance
del micro y macro ya sea de tornillo o de opresores aleen, es muy importante antes de
iniciar un desensamble sea óptico, electrónico o mecánico siempre contar con las
herramientas apropiadas y justas a los tornillos u opresores a remover, así mismo
tener un orden tanto de que pieza se quita primero hasta la posición de la misma, la
tornilleria de los microscopios es muy frágil por lo que no se tiene que hacer fuertes
Presiones al apretar esto pueden causar un rompimiento del tornillo si se diera
presión mas fuerza de lo necesario.
h)
En algunas ocasiones se llega a dañar la cremallera de avance de de los mandos micro
y macro y es necesario hacer un ajuste mecánico en donde existen unos tornillos de
acercamiento en roce de la cremallera y el piñón estos están en algunos microscopios
en la parte donde esta el condensador que al removerlo veremos algunos tornillos de
ajuste y así mismo se verá en que condiciones esta la cremallera de avance del sistema
del condensador. Se evaluará si es necesario lubricarla, el ajuste logrará con suavidad y
extremada atención y cuidado, si son cuatro tornillos se hará un primero
dando un cuarto de vuelta en sistema de apriete en cruz, ya que el apretar demasiado
podrá romper un engrane del piñón o algunos dientes de la cremallera, si se esta
seguro de dejarlo bien, será preferible llamar al técnico de la casa vendedora para que
el ajuste esta parte, ya que es muy fácil dañar al sistema mecánico
permanentemente.
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
i)
La limpieza del cuerpo del microscopio ya libre de todas sus partes
podremos pasarle una franela humedecida de silicon líquido para limpiar
muebles, este se vende en los supermercados para huso en el hogar, por lo
que sé removerán todos los residuos de grasa o de otros agentes que
hallan causado suciedad en el cuerpo del microscopio, esto se hará con
cuidado tratando de llegar a todos los ángulos y esquinas donde se
acumule polvo y residuos. El silicón líquido por se libre de grasa y no nos
dejara nada de vestigios de escurrimientos o de decoloración en el cuerpo
del microscopio.
j)
Una vez terminado este proceso se ensambla el microscopio de una
manera ordenada, comenzando por la última pieza que removimos hasta
terminar, como la tapa del microscopio base de iluminación, condensador,
pinzas de platina y así sucesivamente, cada una de las partes en su lugar
quedaran ajustadas y alineadas. Y de esta forma se podrán iniciar
nuevamente las pruebas de observación con algunas muestras. En las
primeras observaciones se podrá ver el cambio en la calidad de las
imágenes, y en la suavidad de sus movimientos que serán como cuando
adquirimos el equipo de nuevo.
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
ERRORES EN LA PRÁCTICA
Algunas de las recomendaciones básicas se describen en los siguientes incisos:
a)
Cuando se inicia un buen mantenimiento NO es necesario desensamblar todas sus
partes: ópticas, mecánicas y electrónicas, porque todos ellos están provistos de sellos
del fabricante y con la garantía de seguridad de que no se penetrará nada nunca en
condiciones normales de trabajo, además se corre el riesgo de confundir una cara de
cualquier lente interna ya sea del ocular o del objetivo. Por lo que se recomienda
únicamente limpiar con aire comprimido o con una jeringa pera del #5, si aun la
lente esta manchada se deberá limpiar con algodón en forma de cotonete
humedecido en la solución de acetona con éter, limpiando suavemente sobre la
superficie a limpiar. Nunca se debe limpiar con alcohol puro ya que se puede dañar la
película antirreflectora que tiene la lente, el alcohol por el agua que contiene produce
con el tiempo pequeños hongos en la película y esto va deteriorando la calidad de la
misma.
b)
El usuario del microscopio nunca deberá usar maquillaje en los ojos ni mucho menos
máscara de pestañas durante la operación, esto deteriora en gran medida la lente
ocular del sistema, ya que se trabaja demasiado cerca de la misma y esto con el
tiempo puede provocar rayas en la película antirreflectora.
c)
Con los objetivos se debe tener extremo cuidado ya que algunos microscopios no
tienen un tope de seguridad, el cual para evita lastimar la lente del objetivo, al subir
al máximo la platina del objeto a observar.
Se recomienda buscar el tope de seguridad del microscopio que se encuentra en la
parte interior del cuello del microscopio cerca del revolver de oculares y fijarlo, pero si
no se encontrará este tope en el microscopio se deberá tener mucho cuidado cuando
se acerca el objetivo a la platina, no lastimar al objetivo.
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
El objetivo que en la mayoría de los casos será 100x, y el de inmersión, deberán limpiarse con el
algodón en forma de cotonete humedecido en la solución de acetona con éter, si por alguna razón se
llegará a rayar la superficie del ocular, se podrá pulir levemente la superficie con fieltro para pulir
óptica y con pulidor de 3 micras que puede ser Cerite, Barnesita o Opalin, estos son pulidores para
óptica de precisión, con lo que fueron seguramente fabricados las ópticas del microscopio.
d)
El condensador tiene como misión condensar la luz que viene del foco a un punto más o
menos de un milímetro y medio arriba de la superficie (de la platina del microscopio) es decir,
aproximadamente en el lugar donde va a ser puesto el objeto el cual esta colocado sobre el
porta objetos que tiene un espesor de 9 décimas de milímetro.
Algunos condensadores están provistos de un diafragma iris para controlar la cantidad de luz
que va a emitir, como también el ángulo de los rayos de iluminación.
e)
Es muy importante recordar de ciertas aplicaciones del diafragma, si se cierra el diafragma
este punto resulta menor al ángulo que esta calculado el objetivo para su abertura numérica, la
habilidad del objetivo para resolver ciertos detalles va a ser reducida pero la visión será más
clara.
f)
También algunos condensadores están marcados con el ángulo de abertura numérica que nos
marcara diferentes aberturas del diafragma iris, de manera es fácil de saber de no cerrarlo a un
punto menor de la abertura numérica con el cual este marcado el objetivo que se este usando.
Si aun entra demasiada luz para ver el objeto claramente, esta luz de sobra deberá eliminarse
por medio de filtros de color colocados en los porta filtros del microscopio.
g)
En algunas ocasiones se llega a dañar el diafragma, en la mayoría de los casos es posible
repararlo si no se a perdido ninguna de las obleas que lo componen, solo será un trabajo de
paciencia y se lograra el armado sin problema poniendo los pernos en sus cavidades y el brazo
de abertura en el espacio marcado de la montura, para evitar que se abra el diafragma se
recomienda unas gotas de cemento para plásticos en el borde del diafragma y quedara en
operación normal.
Selección de refacciones y accesorios
Anteriormente se ha recomendado verificar que el proveedor de
microscopios este establecido en el país, desde que se inicia una licitación o
la compra de microscopios ya que de aquí en adelante estaremos
solicitando los servicios de la compañía fabricante de microscopios, tanto
para la asesoría técnica, como el ir adquiriendo partes complementarias al
equipo existente. Si se llegará a tener que remplazar alguna pieza óptica,
mecánica o electrónica será mucho mas fácil instalarla sin tener que hacer
adaptaciones que ocasionarán una serie de problemas inimaginables.
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