88 Microorganismos productores de amilasas PDF
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88 Microorganismos productores de amilasas PDF
PRODUCTORES DE AMILASAS EL ORIGEN DE LOS MICROORGANISMOS INDUSTRIALES Los microorganismos industriales pueden ser aislados de la naturaleza o comprados como líneas puras, genéticamente estables y aptas para el cultivo en gran escala, en Bancos y Colecciones de cultivos. Por tratarse de un grupo muy diversificado y, todavía poco conocido, existen aún muchas expectativas en relación con la búsqueda de líneas microbianas para la industria. Las fuentes más frecuentes son el suelo y el lodo de los lagos y ríos: un gramo de suelo puede contener hasta 10 billones de microorganismos. El método clásico involucra la selección de microorganismos en diversos medios de enriquecimiento selectivos, con el objetivo de encontrar líneas productoras de enzimas, metabolitos diversos, antibióticos, etc. Esta etapa es previa a la obtención de cultivos puros de líneas microbianas de interés. Actualmente, los avances en el área de la genómica contribuyen a ampliar nuestro conocimiento de las comunidades microbianas del ambiente. BIBLIOGRAFÍA BU’LOCK J. & KRISTIANSEN B. Basic Biotechnology. London, Academic Press,1989 MAIGAN M. ET AL. Microbiologia de Brock. São Paulo, Pearson Prentice Hall, 2004. MALAJOVICH, M.A.M. de. Biotecnología, 2ª edición actualizada. Bernal, Editorial de la Universidad Nacional de Quilmes, 2012. MALAJOVICH M.A. Actividades prácticas: trabajar con seguridad. Guía Nº 67, 2013. En www.bteduc.bio.br Guía 88 María Antonia Malajovich / Guías de actividades Biotecnología: enseñanza y divulgación http://www.bteduc.bio.br PRODUCTORES DE AMILASAS / ORIGEN DE LOS MICROORGANISMOS INDUSTRIALES ACTIVIDAD PRÁCTICA OBJETIVO Identificar microorganismos productores de amilasas, en un ambiente natural. MATERIALES 1 espátula, 1 tubo de dilución con 5 ml de solución salina estéril o con agua destilada, 1 placa con medio agar de almidón (Ver la preparación en la Guía Nº 78), 1 hisopo, solución de Lugol, 1 pipeta, formol, cinta adhesiva. PROCEDIMIENTO 1. Tomar una punta de espátula de tierra y transferirla a un tubo de dilución. Mezclar bien. 2. Mojar un hisopo en la suspensión de tierra y distribuir el líquido en la superficie del agar nutritivo, formando un césped, como indicado en la Guía Nº 82: El método del césped. 3. Cerrar la placa con un pedacito de cinta adhesiva. 4. Incubar a temperatura ambiente hasta visualizar el crecimiento microbiano. Dado que en esta etapa es prácticamente imposible identificar la presencia o ausencia de patógenos, se recomienda antes de proceder al próximo punto invertir la placa, colocar unas gotas de formol en la tapa y dejar por 24 horas antes de abrir la placa (Ver Guía Nº 67: Trabajar en condiciones seguras). El aislamiento de líneas solo puede ser realizado por personas entrenadas, en laboratorios adecuados. 5. Abrir la placa y colocar la solución de Lugol en la superficie del medio. En el lugar donde crecen microorganismos productores de amilasas se formará un halo incoloro, en el lugar donde el almidón no fue digerido el agar presentará una coloración azul característica. Guía 88 María Antonia Malajovich / Guías de actividades Biotecnología: enseñanza y divulgación http://www.bteduc.bio.br PRODUCTORES DE AMILASAS / ORIGEN DE LOS MICROORGANISMOS INDUSTRIALES NUESTRO COMENTARIO Esta actividad tiene que desarrollarse en campo, dando a los alumnos la posibilidad de analizar las características del ambiente, antes de escoger el lugar de donde será tomada la muestra. La figura 1 muestra una placa control, donde la coloración azul es visible y dos placas con microorganismos productores de amilasas, provenientes del NEDEA (Núcleo Experimental de Estudos Ambientais, Petrópolis, RJ) ¿CÓMO MONTAR UN PROYECTO? Investigar el uso de amilasas en la industria. Utilizando esta técnica, estudiar la presencia de microorganismos productos de amilasas en diversos ambientes. Figura 1. Microorganismos productores de amilasas A. PLACA CONTROL Guía 88 María Antonia Malajovich / Guías de actividades Biotecnología: enseñanza y divulgación http://www.bteduc.bio.br PRODUCTORES DE AMILASAS / ORIGEN DE LOS MICROORGANISMOS INDUSTRIALES B. PLACAS CON MICROORGANISMOS PRODUCTORES DE AMILASAS Guía 88 María Antonia Malajovich / Guías de actividades Biotecnología: enseñanza y divulgación http://www.bteduc.bio.br