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SELECCIÓN DE CEPAS
 SE ESTIMA QUE EXISTE ENTRE 30.000 Y MÁS DE 200.000
ESPECIES.
Bacilloriophyceae
Chlorarachiophyceae
Chloromonadochyceae
Bacilloriophyceae
Chlorarachiophyceae
Chloromonadochyceae
Chlorophyceae
Chrysophyceae
Cryptophyceae
Chlorophyceae
Chrysophyceae
Cryptophyceae
Cyanichophyceae
Cyanophyceae
Desmophyceae
Cyanichophyceae
Cyanophyceae
Desmophyceae
Dinophyceae
Euglenophyceae
Eustigmatophyceae
Dinophyceae
Euglenophyceae
Eustigmatophyceae
Glaucophyceae
Pelagophyceae
Phaeophyceae
Glaucophyceae
Pelagophyceae
Phaeophyceae
Prymnesophyceae
Rhodophyceae
Xanthophyceae
Prymnesophyceae
Rhodophyceae
Xanthophyceae
Phaeophyceae 15%
Phaeophyceae
15%
Phaeophyceae
15%
Dinophyceae
15%
Dinophyceae 15%
Dinophyceae Cyanophyceae
15%
12%
Rhodophyceae
11%
Bacilloriophyceae
29%
Chlorophyceae
15%
Chlorophyceae
15%
Cyanophyceae
12%
Cyanophyceae 12%
ALGABASE
Chlorophyceae 15%
Bacilloriophyceae
27%
Cyanophyceae
15%
Chlorophyceae
32%
UTEX
SELECCIÓN DE CEPAS
 SE ESTIMA QUE EXISTE ENTRE 30.000 Y MÁS DE 200.000
ESPECIES.
Ochrofitas
10%
Cianofitas
3%
Clorofitas
Phaeophyceae 15%
Phaeophyceae
22%
15%
Dinophyceae
15%
Dinophyceae 15%
Cyanophyceae
12%
Cyanophyceae 12%
Diatomeas
65%
Chlorophyceae
15%
Chlorophyceae 15%
SELECCIÓN DE CEPAS
 NO MÁS DEL 10% DE ESTAS ESPECIES HAN SIDO SOMETIDAS A
TRABAJOS DE “SCREENING”
- Definir el objetivo de “screening”
ALTOS RENDIMIENTOS EN BIODIESEL
- Definir material biológico o áreas de muestreo
CEPAS TIPO/CEPAS NATIVAS
- Vincular el objeto de “screening” a parámetros biológios
TASA DE CRECIMIENTO CELULAR
DENSIDADES CELULARES MÁXIMAS EN
CULTIVO Y SOSTENIBILIDAD
RENDIMIENTOS POTENCIALES
CONTENIDOS EN LÍPIDOS (ÁCIDOS GRASOS)
COMPOSICIÓN EN ÁCIDOS GRASOS
SELECCIÓN DE CEPAS
 DIFICULTADES:
- Tasa de crecimiento versus lipogénesis
- Indefinición de las condiciones y sistemas de cultivo
- Dificultad de procesabilidad de muestras (precisión y
cantidad, velocidad)
- Escalabilidad de cepas seleccionadas y resultados
- Insuficiencia de parámetros (procesado de
biomasa, composición en ácidos grasos, etc)
- Mantenimiento de colecciones
- Reversión de mutantes
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
 Taxonomía confusa
 Inexistencia de colecciones
 Depósitos cerrados o inaccesibles
 Depósitos no tipificados (no cepas tipo)
 Inconsistencia de los datos
 Ausencia de normalización de los estudios y ensayos
 Ausencia de normalización en la presentación e interpretación de datos
Chlorophyceae 15%
Cyanophyceae 12%
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
Especies y cepas (códigos de colección
propia)
Proteina peso
seco(%)
Carbohydratos
peso seco(%)
Lipidos peso
seco(%)
Tipo de agua
AU-1
Phaeodactylum tricornutum
30
8,4
14
marina
AU-2
Dunaliella tertiolecta
20
12,2
15
marina
AU-3
Chlorella pyrenoidosa
57
26
2
marina
AU-4
Porfiridium cruentum
AU-5
Nannochloropsis salina
AU-6
Tetraselmis chui
AU-7
Neochloris oleoabundas
AU-8
Isochrysis aff. Galbana
23
(T-iso)
Chlorophyceae 15%
AU-9
Scenedesmus sp
AU-10
marina
35
7,8
18
marina
31
12,1
17
marina
dulceacuícola
6
20
marina
marima
Cyanophyceae 12%
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
dulceacuícola
Alto contenido en xantofilas
17
-
dulceacuícola
35
dulceacuícola
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
propia)
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
AU-4
AU-5
Nannochloropsis salina
AU-6
Tetraselmis chui
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
Scenedesmus sp
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
Cyanophyceae 12%
Chlorophyceae 15%
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
Revisión bibliográfica:
propia)
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
AU-4
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
Scenedesmus sp
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
Cyanophyceae 12%
Búsquedas en ISI (cruce de palabras claves, Web of
Science®):
Género-especie; lípidos; biodiesel
Chlorophyceae 15%
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
propia)
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
Science®):
12000
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
10000
8000
Citas ISI
AU-4
6000
4000
Chlorophyceae
15%
Scenedesmus sp
Cyanophyceae 12%
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
2000
0
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
propia)
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
Science®):
12000
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
10000
8000
Citas ISI
AU-4
6000
4000
Chlorophyceae
15%
Scenedesmus sp
Cyanophyceae 12%
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
2000
0
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
AU-4
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
Scenedesmus sp
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
Science®):
250
200
Citas ISI (líìdos)
propia)
150
100
Chlorophyceae 15%
50
Cyanophyceae 12%
0
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
AU-4
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
Scenedesmus sp
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
Cyanophyceae 12%
Science®):
14
12
Citas ISI (biodiesel)
propia)
10
8
6
Chlorophyceae 15%
4
2
0
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
propia)
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
AU-4
Science®):
0,600
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
Scenedesmus sp
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
Cyanophyceae 12%
Citas ISI (biodiesel/lípidos)
0,500
0,400
0,300
Chlorophyceae 15%
0,200
0,100
0,000
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
AU-4
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
Scenedesmus sp
Cyanophyceae 12%
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
AU-11
Selenastrum minutum
Science®):
Melinda et al. (2009) J. Appl. Phycol. (DOI 10.1007/s10811-008-9392-7)
45
Citas ISI (lípidos Melinda et al, 2009)
% MS
propia)
40
35
30
25
20
Chlorophyceae 15%
15
10
5
0
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas tipo:
AU-1
Phaeodactylum
tricornutum
AU-2
AU-3
AU-4
AU-5
Nannochloropsis sp
AU-6
Tetraselmis sp
AU-7
AU-8
(T-iso)
AU-9
Scenedesmus sp
Cyanophyceae 12%
AU-10
Chlamydomonas sp
ITC-06
Haematococcus sp
Science®):
Melinda et al. (2009) J. Appl. Phycol. (DOI 10.1007/s10811-008-9392-7)
80
Citas ISI (lípidos Melinda et al, 2009)
mg/L/día
propia)
70
60
50
40
Chlorophyceae 15%
30
20
10
0
AU-11
Selenastrum minutum
SELECCIÓN DE CEPAS
Screening primario
El screening primario es preponderante en el cultivo masivo de microalgas
 Sistemas de cultivo abiertos (alta exposición e inestabilidad)
 Fuerte dependencia de la irradiación
 Riesgos ambientales no definidos
Cepas salvajes:
Medios artificiales o altamente antropizados
 Cultivos hidropónicos
 Fuentes ornamentales
 Lagunas de depuración
Fuentes ornamentales públicas
Cyanophyceae 12%
SELECCIÓN DE CEPAS
Cepas salvajes:
 Crecimientos forzados
(F/2; BBM; BBMSi) a 25 o C a 200 µmoles/m2 s con burbujeo
Continuo de aire enriquecido 3% (v/v) de CO2
Chlorophyceae 15%
 Diluciones seriadas, siembra en
placa, micromanipulación
Cyanophyceae 12%
Cociente de aislamiento: 1/80 diluciones – 1/33 siembras ~ 20-40 colonias por aislamiento
SELECCIÓN DE CEPAS
Screening de cepas:
 Procesabilidad (capacidad de procesado de muestra, medidas in situ)
 Precisión
 Escalabilidad / correspondencia
 Microcultivos (en cámara multiparamétrica con secuencias de luz, temperatura y burbujeo de 24 horas)
 Análisis multiparamétrico por citometría de flujo y analítica convencional
PARÁMETROS DE ANÁLISIS
(div/día)
(ug/ml/día)
(ug/ml)
(pg/cel.)
(cel./ml)
Tasa media
Product. Max
Peso seco
Peso/cel.
Densidad max
TN/TC
CITOMETRÍA
Tamaño
Complejidad
FSC
SSC
FSC*SSC
480-575 nmChlorophyceae 15%
480-620 nm
FL2
FL3
FL2+FL3
FL2/FL3
Cyanophyceae 12%
(FL2+FL3)*densidad max
FL2+FL3/SSC
Clorofila (FL4)
Clorofila (FL4)/SSC*FSC
480-675 nm
Del la Jara et al. (2003) J. Appl. Phycol.
(SSC+FSC*Densidad máxima)/dias
SSC+FSC*Tasa de crecimiento
Mendoza et al. (2008) E. J. Biotech.
producción citom.*FL2*FL3
Mendoza et al. (2009) Acuacul. Int.
FL4/FL2
FL4/(SSC*FSC)2
Escalabilidad:
30
1400
28
1200
1000
Temperature oC
26
800
24
600
22
400
20
200
18
0
16
-200
0
5
10
15
Times in hours
Cyanophyceae 12%
20
25
mmol photon · m-2 · s-1
SELECCIÓN DE CEPAS
SELECCIÓN DE CEPAS
18S rRNA
Nº
ID ITC
ID (Blast) Macrogen
ITS (internal transcribed spacer: ITS1, 5.8S rRNA, ITS2) Goff et al. 1999
ID (Blast) corrigido
ID (Blast) Macrogen
ID (Blast) corrigido
CHLO 1
Chlorella sorokiniana
Chlorella sorokiniana, C. vulgaris, Didymogenes anomala, Micractinium sp., Micractinium Chlorella sorokiniana
pusillum, Dictyosphaerium pulchellum (QC:100%, ID: 100%)
Chlorella sorokiniana (QC:100%, ID: 100%)
CHLO 2
Chlorella Hidroponia (ITC 01-D-08)
CHLO 3
HFVI (ITC 10 (00)-D-0209)
Chlorella sorokiniana, C. vulgaris, Didymogenes anomala, Micractinium sp., Micractinium Micractinium sp.
Micractinium sp. (QC:91%, ID: 86%)
CHLO 4
FILM (ITC 09 (00)-D-0209)
Chlamydomonad sp.
Chlamydomonad sp., Chlamydomonas debaryana (QC:100%, ID: 99%)
Chlamydomonas debaryana (QC:99%, ID: 99%)
CHLO 5
ITC 06 (00)-D-0209
CHLO 6
ITC 08 (00)-D-0209
Scenedesmaceae sp.
Scenedesmus deserticola, S. bajacalifornicus, S. acuminatus, S. obliquus (QC:100%, ID:
100%)
Scenedesmus sp. (posible Obliquus)
Scenedesmus obliquus, (QC:100%, ID: 99%) MAX SCORE, S. acutus, S. naegelii (QC:100%,
ID: 99%)
CHLO 7
ITC 05 (00)-D-0209
Micractinium sp.
Micractinium sp. , Chlorella sp. (QC:100%, ID: 100%)
Micractinium sp.
Micractinium sp. (QC:100%, ID: 98%), Auxenochlorella protothecoides (QC:100%, ID: 95%),
Chlorella pyrenoidosa (QC:100%, ID: 95%), Micractinium pusillum (QC:94%, ID: 86%)
CHLO 8
ITC 07 (00)-D-0209
Graesiella emersonii
Graesiella emersonii, Asterarcys quadricellulare, Coelastrella saipanensis, Scenedesmus
vacuolatus, Eimeriidae environmental sample (QC:100%, ID: 99%) MAX SCORE
sin amplificación
CHLO 9
Chlamydomonas debaryana
ITC 03 (00)-S-0109 PLACA
Eimeriidae environmental sample
Eimeriidae environmental sample , Scenedesmus littoralis, S.rubescens (QC:100%, ID:
100%) MAX SCORE
Scenedesmus deserticola (MAX SCORE), S. obliquos, S. acutus S.naegelis (QC:100%, ID:
87%)
CHLO 10
ITC 04 (00)-D-0209
Chlorella sp.
Chlorella sorokiniana, Micractinium pusillum, Didymogenes anomala, Chlorella vulgaris, Chlorella sorokiniana
Dictyosphaerium pulchellum (QC:100%, ID: 100%) MAX SCORE
secuenciación mala
CHLO 11
ITC 12 (00)-D-0209
Chlorella sp.
Chlorella sorokiniana, Micractinium pusillum, Didymogenes anomala, Chlorella vulgaris, Micractinium sp.
secuenciación mala
CHLO 12
ITC 01 (00)-S-0109
Chlorococcum sp.
Chlorococcum sp. Chlorococcum littorale, Chlorococcum dorsiventrale, Chlamydomonas Chlamydomonas hedleyi
hedleyi (QC:100%, ID: 100%)
Chlamydomonas hedleyi (QC:100%, ID: 98%)
CHLO 13
CHLO 14
ITC 16 (00)-S-0209
ITC 18 (00)-S-0209
Chlorella sp.
secuenciación mala ¿mezcla de microalgas?
Chlorella sorokiniana, Micractinium pusillum, Didymogenes anomala, Chlorella vulgaris,
secuenciación mala ¿mezcla de microalgas?
sin amplificación
CHLO 15
ITC 17 (00)-S-0209
Picochlorum sp.
Picochlorum sp., Nannochloris maculata (QC:100%, ID: 100%) Picochlorum oculatum ,
Picochlorum oklahomensis, Nanochlorum eucaryotum (QC:100%, ID: 100%) MAX SCORE
sin amplificación
CHLO 16
ITC 13 (00)-S-0209
Chlorococcum sp.
Chlorococcum sp. Chlorococcum littorale, Chlorococcum dorsiventrale, Chlamydomonas Chlamydomonas hedleyi
hedleyi (QC:100%, ID: 100%)
Chlamydomonas hedleyi (QC:100%, ID: 98%)
CHLO 17
ITC 14 (00)-S-0209
Chlamydopodium sp.
Chlamydopodium sp. (QC:100%, ID: 100%) MAX SCORE, Chlamydomonad sp. ,
Chlorococcum oleofaciens, Pleurastrum insigne, Chlorococcum robustum, Characium
saccatum, Characium vacuolatum, (QC:100%, ID: 100%)
secuenciación mala
CHLO 18
ITC 15 (01)-S-0209
Eimeriidae
100%)
sin amplificación
CHLO 19
ITC 14 (01)-S-0209
Chlamydopodium sp.
Chlamydopodium sp. (QC:100%, ID: 99%) MAX SCORE, Chlamydomonad sp. ,
Chlorococcum oleofaciens, Pleurastrum insigne, Chlorococcum robustum, Characium
saccatum, Characium vacuolatum, (QC:100%, ID: 99%)
sin amplificación
CHLO 20
ITC 15 (00)-S-0209
100%)
sin amplificación
CHLO 21
ITC 15 (02)-S-0209
100%)
sin amplificación
C23
C24
C25
C26
C27
C28
C29
C30
C31
C32
C33
C34
UCA-11-D-08-0909
UCA-12-D-09-1009
UCA-05-(01)-D-10-0909
UCA-05-D-02-0709
UCA-04-D-01-0409
UCA-01-S-01-0409
UCA-07-D-04-0709
UCA-09-D-06-0809
UCA-05-(00)-S-04-0909
UCA-08-D-05-0708
UCA-02-S-02-0409
UCA-09-D-06-0809
Monoraphidium sp.
S.abundans
Scenedesmus sp.
Scenedesmaceae sp.
Dunaliella sp.
Dunaliella sp.
Chlamydomonadaceae sp.
Scenedesmaceae sp.
Dunaliella sp.
Chlorella sp.
Chlamydomonadaceae sp.
Monoraphidium sp. (QC:100%, ID: 100%)
Scenedesmus sp.(QC:100%, ID: 99%)
Dunaliella sp. (QC:94%, ID: 100%)
Chlorella sp. (QC:100%, ID: 100%)
Chlamydomonadaceae sp. Chlamydomonad sp. (QC:100%, ID: 100%)
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
C35
ITC 23 (00)-M-0210 CIANOFITA
Chlorella sp.
Chlorella sp., Micractinium sp. (QC:94%, ID: 99%) ¿mezcla de microalgas?
C36
ITC 24 (01)-D-0310
S.abundans
S.abundans (QC:93%, ID: 100%) Scenedesmus sp.(QC:93%, ID: 99%)
Desmodesmus sp.
Desmodesmus sp. (QC:93%, ID: 99%)
C37
ITC 24 (00)-D-0310
S.abundans
S.abundans, Scenedesmus sp.(QC:94%, ID: 99%)
Desmodesmus sp.
Desmodesmus sp. (QC:93%, ID: 99%)
C38
C39
ITC 25 (00)-D-0310
ITC 26 (00)-M-0310 DIATOMEA
Chlamydomonas moewusii
Tetraselmis sp.
Chlamydomonas sp. (QC:93%, ID: 99%)
secuenciación mala
Navicula salinicola
sin amplificación
secuenciación mala
C41
C42
C43
C44
ITC 27 (00)-D-0310
ITC 28 (00)-D-0410
ITC 29 (00)-D-0410
ITC 30 (00)-D-0410
Uncultured fungus
Scenedesmaceae sp.
Bracteacoccus sp.
Nannochloris bacillaris
secuenciación mala
secuenciación mala
secuenciación mala
Cyanophyceae 12%
M.glaucescens
sin amplificación
Chlorella saccharophila
Chlorella saccharophila (QC:100%, ID: 99%)
sin amplificación
sin amplificación
sin amplificación
SELECCIÓN DE CEPAS
1,5
150
r² = 0.43
1,0
100
0,5
50
0,0
0
0
1
2
3
0
200
Tasa de crecimiento celular (div/d)
1500
500
0
0
500
1000
1500
Tamaño celular (FSC)
400
600
200
400
600
Complejidad celular (SSC)
400
r² = 0.58
300
200
Cyanophyceae
10012%
0
0
200
Clorofila (FL4)
r² = 0.47
1000
500
0
0
500
0
1000
Peso seco / Cel.
r² = 0.85
0
1500
r² = 0.941
Productividad
400
300
200
100
0
r² = 0.64
1000
800
600
400
200
0
r² = 0.42
Densidad celular máxima
1500
800
600
400
200
0
r² = 0.71
r² = 0.85
1000
500
0
0
0
1000
2000
r² = 0.34
0,05
0,00
0,05
TN / TC
2000
Lípidos polares (FL2)
0,10
0
1000
3000
Lípidos neutros (FL2)
0,15
400
1000 2000 3000
0,1
3000
SELECCIÓN DE CEPAS
% de diferencia cámara-outdoor
Cyanophyceae 12%
52.76
16.87
47.24
31.98
Tasa de crecimeinto
34.45
22.20
65.55
64.46
Producción máxima
102.50
55.61
0.87
54.26
Peso seco/cel
237.00
407.26
149.37
171.84
Densidad máxima
79.44
20.31
20.56
25.57
FSC
72.35
33.03
27.65
45.66
SCC
72.96
47.41
27.04
64.98
FL2
96.03
89.36
3.97
93.05
FL3
155.17
76.69
48.92
49.43
Clorofila
159.24
54.61
60.24
34.29
TN/TC
54.76
18.84
34.40
Tasa de cre max
Mayor en fotobiorreactor
Similarr
Menor en fotobiorreactor
SELECCIÓN DE CEPAS
UN PARÁMETRO DE SELECCIÓN IN
Cyanophyceae 12%
SITU………………………...
SELECCIÓN DE CEPAS
SITU………………………..
POR FAVOR
Cyanophyceae 12%
SELECCIÓN DE CEPAS
SITU………………………..
POR FAVOR
PRODUCTIVIDAD:
Tasa de crecimiento celular versus contenido en lípidos
Cyanophyceae 12%
SELECCIÓN DE CEPAS
Maximal production (mg·L-1·d-1)
300
y = 85.089x - 1.4756
r² = 0.47
250
200
150
100
50
0
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
growth rate (cell div·d-1)
Cyanophyceae 12%
2,50
3,00
SELECCIÓN DE CEPAS
300
y = 85.089x - 1.4756
r² = 0.47
250
200
150
100
50
0
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
Lípid production mg/L/d
120
y = 0.5451x - 15.358
r² = 0.76
100
80
60
40
Cyanophyceae 12%
20
0
0
200
400
M. Production (mg / L / d)
600
2,50
3,00
SELECCIÓN DE CEPAS
300
y = 85.089x - 1.4756
r² = 0.47
250
200
150
100
50
0
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
y = 0.5451x - 15.358
r² = 0.76
100
80
Lípid mg/L/d
120
60
40
Cyanophyceae 12%
20
0
0
200
400
600
100
90
80
y = 0.1382x + 32.853
70
r² = 0.18
60
50
40
30
20
10
0
0
50
100
% lipid/ps
150
3,00
SELECCIÓN DE CEPAS
300
y = 85.089x - 1.4756
r² = 0.47
250
200
150
100
50
0
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
3,00
100
80
60
40
Cyanophyceae 12%
20
0
0
200
400
600
100
90
80
y = 0.1382x + 32.853
70
r² = 0.18
60
50
40
30
20
10
0
0
50
3,0
2,5
Lípid mg/L/d
y = 0.5451x - 15.358
r² = 0.76
Lípid mg/L/d
120
y = 0.0054x + 0.6113
r² = 0.52
2,0
1,5
1,0
0,5
100
% lipid/ps
150
0,0
0
200
400
Div/day
600
SELECCIÓN DE CEPAS
300
y = 85.089x - 1.4756
r² = 0.47
250
200
150
100
50
0
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
3,00
100
80
60
40
Cyanophyceae 12%
20
0
0
200
400
600
100
90
80
y = 0.1382x + 32.853
70
r² = 0.18
60
50
40
30
20
10
0
0
50
3,0
Milagro…..
2,5
Lípid mg/L/d
y = 0.5451x - 15.358
r² = 0.76
Lípid mg/L/d
120
y = 0.0054x + 0.6113
r² = 0.52
2,0
1,5
1,0
0,5
100
% lipid/ps
150
0,0
0
200
400
Div/day
600
SELECCIÓN DE CEPAS
300
y = 85.089x - 1.4756
r² = 0.47
250
200
150
100
50
0
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
2,50
3,00
100
80
60
40
Cyanophyceae 12%
20
0
0
200
400
600
100
90
80
y = 0.1382x + 32.853
70
r² = 0.18
60
50
40
30
20
10
0
0
50
3,0
Milagro…..Pero aún
y = 0.0054x + 0.6113
no……La
tasa de
r² = 0.52
crecimiento no es un
parámetro in situ…
2,5
Lípid mg/L/d
y = 0.5451x - 15.358
r² = 0.76
Lípid mg/L/d
120
2,0
1,5
1,0
0,5
100
% lipid/ps
150
0,0
0
200
400
Div/day
600
SELECCIÓN DE CEPAS
Cultivos en cámara
Growth rate (cell div.·d-1)
3,00
y = 0.8686x + 0.933
r² = 0.32
2,50
2,00
1,50
1,00
0,50
0,00
0,00
0,20
0,40
0,60
0,80
1,00
1,20
1,40
Contenido en clorofila (citometría)/Complejidad celular (SCC)
Cyanophyceae 12%
1,60
SELECCIÓN DE CEPAS
Cultivos en cámara
3,00
y = 0.8686x + 0.933
r² = 0.32
2,50
2,00
1,50
1,00
0,50
0,00
0,00
0,20
0,40
0,60
0,80
1,00
1,20
1,40
1,60
Contenido en clorofila (citometría FL4)/Complejidad celular (SCC)
Cultivos en fotobiorreactor
1,40
y = 0.3127x + 0.295
r² = 0.55
1,20
1,00
0,80 12%
Cyanophyceae
0,60
0,40
0,20
0,00
0,00
0,50
1,00
1,50
FL4/SCC
2,00
2,50
3,00
SELECCIÓN DE CEPAS
Cyanophyceae 12%
SELECCIÓN DE CEPAS
Y la seleccionada es…………….
Cyanophyceae 12%
SELECCIÓN DE CEPAS
70,0
Producción de lípidos neutros (mg/L/d)
60,0
50,0
40,0
30,0
20,0
10,0
Cyanophyceae 12%
0,0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
SELECCIÓN DE CEPAS
70,0
Producción de lípidos neutros (mg/L/d)
60,0
50,0
40,0
30,0
20,0
10,0
Cyanophyceae 12%
0,0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18

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