Productos derivados de la uva, aguardientes y sidras

Transcripción

D O S
A N A L I T I C O S
M E T O D O S
E N
O F I C I A L E S
A L I M E N T A R I A
D E
A N A L I S I S
Productos
derivados de
la uva,
aguardientes
y sidras
PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nueva
edición de sus folletos de Métodos Analíticos en Alimentaria, en la que podrán apreciar a simple vista
un cambio de formato respecto a las anteriores.
M E T O D O S
A N A L I T I C O S
E N
A L I M E N T A R I A
Esta nueva imagen, pretende ser una expresión de
los cambios que con el tiempo hemos experimentado
en nuestros campos de actividad, puesto que si continuamos manteniendo una importante implantación en el sector alimentario como fabricantes de
reactivos para análisis PANREAC y de los aditivos
alimentarios ADITIO, actualmente hemos aumentado nuestra aportación de productos para el análisis
alimentario con nuestras líneas de Cromatografía en
Capa Fina PANREAC-TLC y Medios de Cultivo
Deshidratados para Microbiología CULTIMED.
La colección Métodos Analíticos en Alimentaria se
compone de 6 folletos monográficos, por campos de
alimentos, que recogen una transcripción íntegra
de los métodos oficiales de análisis en España, que
a su vez son publicados en los correspondientes
B.O.E. mencionados en el índice de cada
monografía incorporando los reactivos y productos
auxiliares PANREAC en la calidad considerada
más idónea, así como los medios de cultivo
CULTIMED.
M
Los títulos de las 6 monografías son:
Aceites y grasas
Aguas potables
de consumo público
y aguas de bebida envasadas
Carne y productos cárnicos
Cereales, derivados de cereales
y cerveza
Leche y productos lácteos
Productos derivados de la uva,
aguardientes y sidras
Obviamente esta edición ha sido actualizada con las
disposiciones publicadas hasta el momento, que
establecen nuevos procedimientos o que modifican
notablemente características anteriormente establecidas.
Por último, comentarles que están a su disposición
además de esta colección, nuestros:
Catálogo General de Reactivos PANREAC
Catálogo ADITIO de Aditivos Alimentarios
Catálogo CULTIMED de Medios de Cultivo Deshidratados
Catálogo PANREAC-TLC de Placas, Folios y
Accesorios para Cromatografía en Capa Fina.
I N D I C E
Productos derivados
de la uva:
Vinos
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,
25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,
30-8-1979 Y 14-10-1981)
123a3b4a4b5a5b67a7b7c8910a10b1112131415161718192021222324a24b2526-
Examen organoléptico
(B.O.E. 22-7-1977) ............................
Ensayos previos de conservación .......
Color (B.O.E. 14-10-1981) ..................
Color de los vinos (aplicable a vinos
tintos y rosados (B.O.E. 22-7-1977) ...
Masa volúmica y densidad relativa
(método picnométrico) ........................
Masa volúmica y densidad relativa
(método areométrico) .........................
Título alcohométrico (método
picnométrico)......................................
Título alcohométrico (método
areométrico) (B.O.E. 23-7-1977) .........
Extracto seco total .............................
Azúcares reductores (defecación
plúmbica) (provisional) ........................
Azúcares reductores (defecación
mercúrica) (provisional) .......................
Azúcares reductores (valoración)
(B.O.E. 30-8-1979) .............................
Glicerol (Glicerina) (B.O.E. 23-7-1977)..
2,3-Butanodiol ...................................
Sacarosa (método cualitativo
colorimétrico)......................................
Sacarosa (método cuantitativo) ...........
Cenizas .............................................
Alcalinidad de cenizas ........................
Fosfatos .............................................
Calcio (método complexométrico) .......
Magnesio ...........................................
Hierro (método colorimétrico del
sulfocianuro) .......................................
Cobre ................................................
Potasio (fotometría de llama) ..............
Sodio (fotometría de llama) .................
Acidez total ........................................
Acidez volátil ......................................
Acido Sórbico en el destilado para
acidez volátil ......................................
Acidez fija (B.O.E. 25-7-1977) ............
Acido Tartárico total (método del calcio
racemato)...........................................
Acido Tartárico total (método
complexométrico) ...............................
Acido Láctico .....................................
Acido Cítrico ......................................
9
9
10
14
14
15
22
29
31
34
36
37
38
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43
43
44
44
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48
49
49
50
51
52
53
53
54
54
56
M
2728a28b293031323334-
3536a-
36b-
373839a39b4041-
42-
43444546474849505152-
Sulfatos (B.O.E. 26-7-1977) ...............
Anhídrido Sulfuroso (método Paul) .........
Anhídrido Sulfuroso (método Ripper doble)
Acido Sórbico ....................................
Cloruros (B.O.E. 30-8-1979) ...............
Acido Benzoico (B.O.E. 26-7-1977) ....
Bromo total .......................................
Bromo orgánico .................................
Acidos Monobromoacético y
Monocloroacético de origen orgánico
(método cualitativo) (provisional) .........
Indice de Permanganato
(B.O.E. 27-7-1977) ............................
Determinación de presencia de vino
procedente de “híbridos productores
directos” (método cualitativo) .............
Determinación de presencia de vino
procedente de “híbridos productores
directos” (provisional) ........................
Metanol (Alcohol metílico) (método del
ácido cromotrópico) ..........................
Nitrógeno (método Kjeldhal) ..............
Flúor (provisional) ..............................
Flúor (B.O.E. 30-8-1979) ...................
Hidroximetilfurfural (provisional)
(B.O.E. 27-7-1977) ............................
Determinación cualitativa de Acido
Sórbico, Benzoico, p-Clorobenzoico,
Salicílico, p-Hidroxibenzoico y su éster
etílico ................................................
Investigación de derivados
monohalogenados del Acido Acético
(B.O.E. 30-8-1979) ............................
Grado alcohólico en potencia ............
Grado alcohólico total .......................
Colorantes sintéticos .........................
Mercurio ............................................
Plomo ................................................
Relación P/a .....................................
Anhídrido Carbónico (método aprobado
pero no publicado en el B.O.E.) .........
Etanal (método aprobado pero no
publicado en el B.O.E.) ......................
Presión del Anhídrido Carbónico
(B.O.E. 14-10-1981) ..........................
Antisépticos y Antifermentos (método
microbiológico) ..................................
58
59
60
61
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66
67
68
68
69
70
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73
Vinagres
75
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 27-7-1977, 30-8-1979
Y 14-10-1981)
77
78
78
78
79
81
82
82
84
85
85
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 7-5-1988)
Grado Brix ........................................
Densidad ..........................................
pH ....................................................
Acidez total ......................................
Acidez volátil .....................................
Sólidos solubles .................................
1920212223242526272829-
Azúcares totales y reductores ............
Acido Ascórbico ................................
Relación glucosa/fructosa .................
Nitrógeno total ..................................
Etanol ...............................................
Indice de formol ................................
Prolina ..............................................
Acido Sórbico ....................................
Acido Benzoico .................................
Hidroximetilfurfural .............................
Cenizas .............................................
Material mineral insoluble en Acido
Clorhídrico al 10% ............................
Fósforo total ......................................
Sulfatos .............................................
Anhídrido Sulfuroso ...........................
Potasio ..............................................
Sodio ................................................
Arsénico ............................................
Hierro ................................................
Plomo ...............................................
Estaño ...............................................
Cobre ...............................................
Zinc ...................................................
74
Zumos de Uva
123456-
789101112131415161718-
89
98
99
99
100
101
12345678910a10b11121314151617-
Extracto total (B.O.E. 27-7-1977) .......
Acidez total (grado acético) ................
Acidez fija .........................................
Acidez volátil .....................................
Sulfatos .............................................
Acetilmetilcarbinol (Acetoína)
(B.O.E. 30-8-1979) ............................
Cenizas (B.O.E. 27-7-1977) ...............
Indice de oxidación ...........................
Metanol (Alcohol Metílico), método del
Acido Cromotrópico (B.O.E. 30-8-1979).
Acido Tartárico (método cualitativo) ....
Acido Tartárico (método cuantitativo) ..
Cobre ...............................................
Cloruros ............................................
Grado alcohólico ................................
Arsénico ............................................
Zinc ...................................................
Prolina ..............................................
Acido Acético de síntesis
(B.O.E. 14-10-1981) ..........................
103
104
105
105
106
107
107
108
108
109
109
110
110
111
112
112
113
113
114
115
115
116
116
119
119
119
120
120
121
121
122
123
123
124
125
126
126
127
128
129
129
Orujos, Heces y Lías
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 30-8-1979)
1-
Contenido alcohólico en orujos, heces
y lías .................................................
133
Aguardientes
compuestos:
Whisky
8Sacarosa ...........................................
9Acidez total .......................................
10- Materias reductoras
(Azúcares reductores) ........................
11- Plomo ................................................
12- Zinc ...................................................
13- Cobre ................................................
14- Arsénico ............................................
METODOS DE ANALISIS (Anexo I de la
Orden 3-4-1985, B.O.E. 13-4-1985)
1234567891011121314-
Obtención del destilado .....................
Furfurol .............................................
Extracto seco ....................................
Esteres ..............................................
Alcoholes superiores ..........................
Metanol .............................................
Grado alcohólico ...............................
Aldehídos ..........................................
Acidez volátil ......................................
Cenizas (materia mineral total) ............
Plomo ................................................
Zinc ...................................................
Cobre ................................................
Arsénico ............................................
135
135
136
136
137
138
138
139
140
140
141
142
142
142
Ron
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 24-10-1985)
123456789101112131415-
Obtención del destilado ......................
Furfurol (Furfuraldehído) ......................
Extracto seco reducido ......................
Esteres ..............................................
Metanol (Alcohol Metílico) ..................
Aldehídos ..........................................
Acidez volátil .....................................
Azúcares reductores ..........................
Plomo ...............................................
Zinc ...................................................
Cobre ................................................
Arsénico ............................................
Sacarosa ..........................................
145
145
146
147
148
148
149
149
150
150
153
153
154
154
155
Ginebra
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 25-10-1985)
1234567-
Furfurol (Furfuraldehído) .....................
Extracto seco ....................................
Bases nitrogenadas ...........................
Metanol (Alcohol Metílico) ..................
157
157
158
158
158
159
160
160
161
161
163
163
164
164
Anís
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 13-5-1987)
1234567891011121314-
Peso específico del aceite esencial
natural (en materia prima) ...................
Punto de fusión del aceite esencial
natural (en materia prima) ...................
Azúcares totales ...............................
Anetol ...............................................
Metanol .............................................
Bases nitrogenadas ...........................
Aceites esenciales .............................
Hidroximetilfurfural y furfural ...............
Arsénico ............................................
Plomo ...............................................
Zinc ...................................................
Cobre ................................................
167
167
168
169
169
170
171
172
173
174
174
176
176
177
Sidras:
Sidra y otras bebidas
derivadas de la
manzana
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 28-7-1980)
1-
Eliminación del Anhídrido
Carbónico ..........................................
2Grado alcohólico adquirido ................
3Azúcares reductores ..........................
4Anhídrido Sulfuroso ............................
5Metanol (Alcohol Metílico) ..................
6Acidez volátil .....................................
7Extrato seco total ..............................
8Cenizas .............................................
9Hierro ................................................
10- Etanal ................................................
11- Anhídrido Carbónico ..........................
179
179
179
179
179
179
179
179
179
179
180
M
Relación de reactivos
y productos auxiliares
que se utilizan en los
métodos analíticos,
Productos derivados de
la Uva, Aguardientes
y Sidras ....................................... 184
Aditivos y
coadyuvantes
tecnológicos para
uso alimentario
industrial .................................
190
Productos derivados
de la uva:
Vinos
NOTA: Se han consignado todos los métodos
oficiales de análisis de vinos publicados en el
B.O.E., pero no los prescritos por el Reglamento
2676/90 de la C.E., por no estar suficientemente
extendidos en nuestro país y, por tanto, no tener
una aplicación generalizada.
M
METODOS DE ANALISIS
(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,
25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,
30-8-1979 Y 14-10-1981)
1. EXAMEN ORGANOLEPTICO
1.1. Examen del color.
Determinar mediante apreciación visual las
características, bien definidas, del color del vino.
Observar el vino colocado en copas de cristal fino
e incoloro, o bien en tazas de plata o de fondo
plateado, el cual presentará diferentes formas
convexas o abolladas, para apreciar el vino en
diferentes espesores y sobre fondo brillante.
Utilizar las siguientes calificaciones del color
para vinos tintos: rojo rubí, rojo violáceo o morado, viraje a tono cebolla o amarillento.
Según la intensidad del color, el vino tinto puede calificarse en: vino tinto, rosado, clarete, y si
tiene mucho o poco color dentro de estos tipos,
se dirá que tiene mucha o poca capa.
En vinos blancos, utilizar las calificaciones de
tono verdoso, casi incoloro, amarillo, amarillo-oro,
ambarino, pajizo claro u oscuro (rancia), etc., y en
todos los tipos, si el color es blanco, o si azulea,
pardea o ennegrece.
1.2. Formación de espuma.
Observar el aspecto de la espuma que se forma al agitar el vino en la copa y determinar si es o
no abundante, si desaparece rápidamente o, en
caso de vinos tintos, si persiste unos momentos
el color más o menos intenso. El vino de mucha
capa o el vino enyesado produce espuma que tarda mucho en desaparecer.
1.3. Presencia de gas carbónico.
Verter vino en una copa. La formación de burbujas indica la presencia de gas carbónico en el
vino. Este gas carbónico debe eliminarse para
continuar el examen de la muestra, agitando o en
la forma que se indica en los métodos analíticos.
1.4. Limpieza.
Apreciar en copa o en taza de plata, al mismo
tiempo que el color, si el vino está turbio, claro o
brillante.
Observar también si hay depósito y si al agitar
tiene aspecto cristalino o pulverulento que enturbie el vino.
1.5. Degustación o cata.
Proceder a la degustación recién destapada la
botella, consignando datos, referentes a la calidad, origen, edad y posibles alteraciones del vino.
Coger una copa de cristal ovoide por su platillo
con los dedos pulgar, índice y central de la mano
derecha, quedando la copa libre para examinar el
vino. Llenar con vino sólo 1/3 o 1/4 de la copa,
para poder agitar bien y tener un espacio vacío
donde se concentren los aromas. Agitar haciendo
girar el vino y apreciar el aroma.
Apreciar y caracterizar el olor a “vinoso”, que
acusa vino nuevo, el “afrutado”, el del vino que
comenzó la “crianza”, la riqueza alcohólica, olores
ácidos volátiles, olores que acusen defectos de
elaboración, etc., y la presencia de enfermedades
y alteraciones.
En degustación de más precisión, como será
la necesaria para definir características de un tipo
de vino y que han de servir de referencia, es necesario reunir un grupo determinado de buenos
catadores, y realizar un nú-mero de catas suficientes para obtener resultados satisfactorios
estadísticamente según las normas específicas
existentes.
1.6. Referencia.
1.6.1. Amerine, M.A., y Feduchy, E.: “Los
resultados de la cata del vino y del análisis químico”. Boletín I.N.I.A., 31, 353-375, 1956.
2. ENSAYOS PREVIOS DE
CONSERVACION
2.1. Prueba del aire.
2.1.1. “Quiebras” tánico-férricas o fosfatoférricas.- Dejar el vino en contacto con el aire (en una
copa mediada), en sitio fresco y al resguardo de la
luz. Observar al cabo de 12 o más horas. El enturbiamiento o el ennegrecimiento pone de manifiesto la posibilidad de “quiebras” tánico-férricas o
fosfato-férricas.
2.1.2. “Quiebra oxidásica”.- Proceder como en
2.1.1., utilizando dos muestras de vino, una pasterizada, para destruir la oxidasa, y la otra sin
pasterizar. La formación de color pardo y precipitado pulverulento oscuro son señales características de la “quiebra oxidásica”.
2.1.3. “Quiebra cuprosa”.- Poner la muestra
en botella cerrada, calentar en baño de agua a
357, y exponer a la luz. Si la riqueza en cobre es
suficiente, aparece enturbiamiento característico
de la “quiebra cuprosa”.
2.2. Prueba del frío.
Enfriar el vino a la temperatura que normalmente se suponga va a estar expuesto, y comprobar si se produce precipitación de bitartrato.
2.3. Prueba de la estufa.
Mantener una muestra de vino en estufa a 22-257
durante 3-4 días. Examinar al microscopio el posible
desarrollo microbiano distinguiendo si se trata de
levaduras o de bacterias. Si es necesario, proceder al
conteo y la identificación de los microorganismos.
2.4. Examen microscópico.
Realizar el examen microscópico sobre preparación del poso de la muestra, que puede aparecer después de reposo en estufa o a temperatura
ambiente.
9
Si el vino se presenta turbio en el envase original, hacer una preparación directamente del vino
o del poso obtenido por centrifugación de ese
vino. Si no se presenta depósito y el vino está
poco turbio, hacer una preparación del poso
obtenido por centrifugación.
Determinar en el examen microscópico si el
depósito es microbiano, distinguiendo levaduras y
bacterias.
3(a). COLOR
3.(a).1. Principio.
El color de los vinos se determina por transparencia como se percibe por la vista, pero por
un procedimiento independiente de la apreciación personal, valiéndose de métodos espectrofométricos triestimulares de ordenadas seleccionadas de Hardy, fundado en el sistema de la
Commisión Internationale de l’Echairage (C.I.E.),
con relación a la luz producida por un cielo nublado (fuente C).
3(a).2.1. Espectrofotómetro para medida en
el espectro visible. Los valores de transmitancia
correspondientes a una misma muestra, no
deben acusar diferencias superiores a 0,005 y
cuando la escala del aparato esté graduada en
valores de transmitancia multiplicados por 100,
no debe haber diferencias superiores a 0,5.
Las cubetas de cuarzo o de vidrio de índice de
refracción máximo 1,5, de paredes paralelas y
espesor interno b que se expresa en centímetros y con una aproximación de ± 0,002.b.
Conviene disponer de cuatro pares de cubetas
en las que los espesores b, sean de 0,1 cm;
0,2 cm; 0,5 cm y 1 cm.
Según la intensidad del color se escogerán un
par de cubetas de tal forma que la absorbancia A
quede comprendida entre 0,3-0,7 (transmitancia
0,5-0,2).
10
3(a).3. Procedimiento.
Si el vino no está limpio centrifugar previamente. Eliminar el gas carbónico, si es necesario, por
agitación con vacío parcial.
Medir directamente con el espectrofotómetro
las transmitancias del vino a las cuatro longitudes
de onda = 625, 550, 495 y 445 mm, empleando
la cubeta de espesor conveniente, según intensidad del color del vino.
3(a).4. Cálculo.
Utilizar 131074 Agua PA-ACS como líquido de
referencia.
3(a).4.1. Calcular las coordenadas (x, y) del
punto representativo del color del vino en el diagrama tricromático de la C.I.E.
X
x = —————
X+Y+Z
Y
y = —————
X+Y+Z
X = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445
Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T495
Z = 0,24 T495 + 0,94 T445
Los valores triestimulares X, Y, Z, expresan las
proporciones de colores rojos, verdes y azules
que dan por mezcla el color del vino.
Cuando el espesor b de la cubeta sea inferior
a 1 cm, referir la transmitancia a 1 cm en la
siguiente forma T = T’1/b y si la transmitancia viene
expresada en porcentaje.
1/b
T’
T = ————–—
1/b -1
100 ( )
T = transmitancia referida a 1 cm de espesor
de cubeta.
T’ = transmitancia obtenida para b cm de
espesor de cubeta.
b = espesor en cm de la cubeta utilizada.
Como los espectrofotómetros están generalmente graduados tanto en transmitancia T como
en absorbancia A, se puede también calcular la
transmitancia en 1 cm de espesor del vino a partir de la absorbancia observada en el espesor b, si
la medida se ha hecho en cubeta de espesor inferior a 1 cm, teniendo en cuenta que:
1
A = log ———
T
Con este fin, se calculan las absorbancias A en
un cm de espesor multiplicando respectivamente
por 2,5 y 10 las absorbancias leídas en un espesor b de 0,5; 0,2 y 0,1 cm. Se obtienen después
los valores correspondientes de transmitancia
bien por aplicación de la relación anterior, bien
refiriéndose a la tabla calculada a partir de esa
misma relación.
3(a).4.2. Luminosidad relativa.- Es el valor de
Y, expresado en porcentaje (siendo el negro y = 0
y el incoloro y = 100).
3(a).4.3. Cromaticidad.- Para expresar la cromaticidad (longitud de onda dominante y pureza)
se recurre al diagrama de cromaticidad, que
representa el “locus” de todos los colores del
espectro, considerando que a 400 nm, corresponde el azul, a 520 nm corresponde el verde y
a 700 nm el rojo. El punto 0 corresponde a la
fuente luminosa utilizada, que, en este caso, es
el iluminante estándar Q, que representa la luz
M
de un día medianamente claro y cuyas coordenadas son:
xo = 0,3101
e
y o = 0,3163
3(a).4.4. Longitud de onda dominante.
Conocidas las coordenadas x e y del color, se
une el punto de esas coordenadas C al punto 0.
En el punto en el que esta recta corta al “Spectrum Locus” se encuentra la longitud de onda
dominante que corresponde al matiz de este
color. Así en el caso de vinos de tono teja, la longitud de onda dominante se sitúa entre 585 y 598
nm aproximadamente. Para los vinos de un color
tinto franco, se sitúa entre 599 y 650 nm, mientras que para los vinos de tono rojo púrpura está
caracterizada por la longitud de onda dominante
del color complementario. Se obtiene el valor de
esta longitud de onda prolongando la recta en la
dirección de C hacia 0 para que ella corte el
“Spectrum Locus” como hemos visto antes.
Este color complementario en el caso de vinos
de tono rojo púrpura se sitúa en el verde. Se anota el valor de esta longitud de onda seguida de c
(complementario), por ejemplo 495 c.
3(a).4.5. Pureza.
La pureza se calcula determinando la distancia
relativa del punto C que representa el color del
vino examinado y del punto S que corresponde al
“Spectrum Locus” al punto 0 que representa al
iluminante.
Se expresa la pureza en porcentaje por la relación:
Distancia del punto C al punto 0
100 x —————————————––———
Distancia del punto 0 al punto S
11
Figura 3(a).I. Diagrama de cromaticidad de la C.I.E.
3(a).5. Observaciones.
3(a).5.1. El color de un vino queda completamente definido por la luminosidad relativa Y en
porcentaje y las coordenadas tricromáticas x e y.
Se pueden preveer las características cromáticas de una mezcla de varios vinos cuando se
conocen las características cromáticas de las
mismas. Los valores triestimulares X, Y, Z de la
mezcla se obtienen por la suma de esos valores
multiplicando por su proporción para cada constituyente.
TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS
12
%
trans
,0
,1
,2
,3
,4
,5
,6
,7
,8
,9
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
2,00
1,70
1,52
1,40
1,30
1,22
1,15
1,10
1,05
1,00
0,96
0,92
0,89
0,85
0,82
0,80
0,77
0,74
0,72
0,70
0,68
0,66
0,64
0,62
0,60
0,58
0,57
0,55
0,54
0,52
0,51
0,49
0,48
0,47
0,46
0,44
0,43
0,42
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
3,00
1,96
1,68
1,51
1,39
1,29
1,21
1,15
1,09
1,04
1,00
0,95
0,92
0,88
0,85
0,82
0,79
0,77
0,74
0,72
0,70
0,68
0,66
0,64
0,62
0,60
0,58
0,57
0,55
0,54
0,52
0,51
0,49
0,48
0,47
0,45
0,44
0,43
0,42
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
2,70
1,92
1,66
1,50
1,38
1,28
1,21
1,14
1,09
1,04
0,99
0,95
0,91
0,88
0,85
0,82
0,79
0,76
0,74
0,72
0,69
0,67
0,65
0,63
0,62
0,60
0,58
0,57
0,55
0,53
0,52
0,51
0,49
0,48
0,47
0,45
0,44
0,43
0,42
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,35
2,52
1,89
1,64
1,48
1,37
1,28
1,20
1,14
1,08
1,03
0,99
0,95
0,91
0,88
0,84
0,82
0,79
0,76
0,74
0,71
0,69
0,67
0,65
0,63
0,61
0,60
0,58
0,57
0,55
0,53
0,52
0,50
0,49
0,48
0,46
0,45
0,44
0,43
0,42
0,41
0,40
0,38
0,37
0,36
0,35
2,40
1,85
1,62
1,47
1,36
1,27
1,19
1,13
1,08
1,03
0,98
0,94
0,91
0,87
0,84
0,81
0,78
0,76
0,73
0,71
0,69
0,67
0,65
0,63
0,61
0,59
0,58
0,56
0,55
0,53
0,52
0,50
0,49
0,48
0,46
0,45
0,44
0,43
0,42
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
0,35
2,30
1,82
1,60
1,46
1,35
1,26
1,19
1,13
1,07
1,02
0,98
0,94
0,90
0,87
0,84
0,81
0,78
0,76
0,73
0,71
0,69
0,67
0,65
0,63
0,61
0,59
0,58
0,56
0,54
0,53
0,52
0,50
0,49
0,47
0,46
0,45
0,44
0,43
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
0,35
2,22
1,80
1,59
1,44
1,34
1,25
1,18
1,12
1,07
1,02
0,97
0,93
0,90
0,87
0,84
0,81
0,78
0,75
0,73
0,71
0,69
0,67
0,65
0,63
0,61
0,59
0,57
0,56
0,54
0,53
0,51
0,50
0,49
0,47
0,46
0,45
0,44
0,42
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
0,35
2,15
1,77
1,57
1,43
1,33
1,24
1,17
1,11
1,06
1,01
0,97
0,93
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0,75
0,73
0,71
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0,59
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0,51
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0,45
0,44
0,42
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
0,35
2,10
1,74
1,55
1,42
1,32
1,24
1,17
1,11
1,06
1,01
0,97
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0,73
0,70
0,68
0,66
0,64
0,62
0,60
0,59
0,57
0,56
0,54
0,53
0,51
0,50
0,48
0,47
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0,45
0,43
0,42
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
0,35
2,05
1,72
1,54
1,41
1,31
1,23
1,16
1,10
1,05
1.00
0,96
0,92
0,89
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0,83
0,80
0,77
0,75
0,72
0,70
0,68
0,66
0,64
0,62
0,60
0,59
0,57
0,56
0,54
0,52
0,51
0,50
0,48
0,47
0,46
0,44
0,43
0,42
0,41
0,40
0,39
0,38
0,37
0,36
0,35
M
TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS
%
trans
,0
,1
,2
,3
,4
,5
,6
,7
,8
,9
45
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64
65
66
67
68
69
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71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
0,35
0,34
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,28
0,28
0,27
0,26
0,25
0,24
0,24
0,23
0,22
0,21
0,21
0,20
0,19
0,19
0,18
0,17
0,17
0,16
0,15
0,15
0,14
0,14
0,13
0,12
0,12
0,11
0,11
0,10
0,10
0,09
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,00
0,00
0,35
0,34
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,28
0,28
0,27
0,26
0,25
0,24
0,24
0,23
0,22
0,21
0,21
0,20
0,19
0,19
0,18
0,17
0,17
0,16
0,15
0,15
0,14
0,14
0,13
0,12
0,12
0,11
0,11
0,10
0,10
0,09
0,09
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,28
0,27
0,27
0,26
0,25
0,24
0,24
0,23
0,22
0,21
0,21
0,20
0,19
0,19
0,18
0,17
0,17
0,16
0,15
0,15
0,14
0,14
0,13
0,12
0,12
0,11
0,11
0,10
0,10
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,32
0,32
0,31
0,30
0,29
0,28
0,27
0,27
0,26
0,25
0,24
0,23
0,23
0,22
0,21
0,21
0,20
0,19
0,19
0,18
0,17
0,17
0,16
0,15
0,15
0,14
0,13
0,13
0,12
0,12
0,11
0,11
0,10
0,10
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,03
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,32
0,32
0,31
0,30
0,29
0,28
0,27
0,26
0,26
0,25
0,24
0,23
0,23
0,22
0,21
0,20
0,20
0,19
0,18
0,18
0,17
0,16
0,16
0,15
0,15
0,14
0,13
0,13
0,12
0,12
0,11
0,11
0,10
0,09
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,02
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,32
0,31
0,31
0,30
0,29
0,28
0,27
0,26
0,25
0,25
0,24
0,23
0,23
0,22
0,21
0,20
0,20
0,19
0,18
0,18
0,17
0,16
0,16
0,15
0,15
0,14
0,13
0,13
0,12
0,12
0,11
0,10
0,10
0,09
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,02
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,29
0,28
0,27
0,26
0,25
0,25
0,24
0,23
0,22
0,22
0,21
0,20
0,20
0,19
0,18
0,18
0,17
0,16
0,16
0,15
0,14
0,14
0,13
0,13
0,12
0,12
0,11
0,10
0,10
0,09
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,29
0,28
0,27
0,26
0,25
0,25
0,24
0,23
0,22
0,22
0,21
0,20
0,20
0,19
0,18
0,18
0,17
0,16
0,16
0,15
0,14
0,14
0,13
0,13
0,12
0,11
0,11
0,10
0,10
0,09
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,29
0,28
0,27
0,26
0,25
0,25
0,24
0,23
0,22
0,22
0,21
0,20
0,19
0,19
0,18
0,17
0,17
0,16
0,16
0,15
0,14
0,14
0,13
0,13
0,12
0,11
0,11
0,10
0,10
0,09
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0,04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,01
0,00
0,00
0,34
0,33
0,32
0,31
0,30
0,29
0,28
0,28
0,27
0,26
0,25
0,24
0,24
0,23
0,22
0,22
0,21
0,20
0,19
0,19
0,18
0,17
0,17
0,16
0,16
0,15
0,14
0,14
0,13
0,13
0,12
0,11
0,11
0,10
0,10
0,09
0,09
0,08
0,08
0,07
0,07
0,06
0,06
0,05
0,05
0,04
0.04
0,03
0,03
0,02
0,02
0,01
0,01
0,00
0,00
0,00
13
3(b). COLOR DE LOS VINOS
(Aplicable a vinos tintos y rosados)
3(b).1. Principio.
La intensidad de color se mide por la suma de
las absorbancias del vino para un espesor de 1
cm correspondientes a las longitudes de onda de
absorbancia mínima (420 nm) del vino tinto.
La tonalidad se expresa por el ángulo que forma con el eje de longitudes de onda la cuerda
que une los puntos de la curva espectrofotométrica representativos de las absorbancias correspondientes a las longitudes de onda de 420 y
520 nm.
3(b).2. Material y aparatos.
Como en 3(a).2.
3(b).3. Procedimiento.
Como en 3(a).3, excepto que las longitudes de
onda utilizadas serán de 420 nm y 520 nm.
3(b).4. Cálculo.
Calcular la intensidad colorante y la tonalidad.
3(b).4.1. Intensidad colorante:
1
I = (A420 + A520) –––––
b
A420 = absorbancia a 420 nm.
A520 = absorbancia a 520 nm.
b = espesor en cm de la cubeta.
3(b).4.2. Tonalidad.- La tonalidad se mide por
el ángulo cuya tangente es igual a la diferencia del
valor numérico de las dos absorbancias A 520-A420.
Conocido este valor, se puede determinar el valor
del ángulo por tablas expresadas en grados sexagesimales.
3(b).5. Observaciones.
Con este método no se determina el color,
sino la intensidad y la tonalidad del color, que son
características cromáticas convencionales. Por su
rapidez y sencillez, es muy práctico para comprobar la evolución de la materia colorante durante
su “crianza” o añejamiento.
14
3(b).6. Referencias.
3(b).6.1. Determinación triestimular del color
de los vinos, método simplificado por C.Stella.
Comunicación al O.I.V. núm. 282 (2 febrero 1968).
3(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V. AO, 1-14. 1969.
4(a). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD
RELATIVA
(Método picnométrico)
4(a).1. Principio.
La masa volúmica es el cociente de la masa de
un cierto volumen de vino o de mosto por este
volumen, Se expresa en g por ml y su símbolo es
r20.
La densidad relativa es el cociente de la masa
volúmica del vino por la masa volúmica del agua.
Su símbolo es d ó simplemente d, cuando no
haya posibilidad de confusión.
La masa volúmica y la densidad relativa de un
vino se determinan a 20°C.
El método picnométrico consiste en la determinación ponderal del contenido en alcohol de un
destilado por medio de un picnómetro.
4(a).2. Material y aparatos.
4(a).2.1. Picnómetro de vidrio de 50 ml de
capacidad, de cuello con diámetro interior de
3,5 mm. Embudo y sifón para picnómetros.
4(a).2.2. Termómetro contrastado dividido en
1/5-1/10 de grado Celsius graduado de 10 a
307C.
4(a).2.3. Termostato regulado a 207C ± 0,27.
4(a).2.4. Balanza con aproximación de 0,1 mg.
20
Lavar bien el picnómetro y enjuagarlo después
con 131085 Etanol 96% v/v PA y luego con Eter
Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PAACS-ISO, escurrir bien y secar cuidadosamente
con paño de hilo o papel filtro el exterior, y con
corriente de aire seco el interior, tapar, dejar en
reposo en la caja de la balanza durante 30 minutos aproximadamente, y pesar.
Llenar después con agua a 207 recién destilada, con cuidado de evitar burbujas de aire en el
interior del picnómetro. Sumergir en el agua a la
temperatura comprobada de 207.
Mantener el picnómetro en el termostato
durante 30 minutos, y enrasar el nivel del agua
con la marca del cuello. Tapar el picnómetro,
secar exteriormente con las precauciones
expuestas, dejar nuevamente 30 minutos en la
caja de la balanza y después pesar.
Vaciar el picnómetro, enjuagar nuevamente,
primero con agua y después con Etanol 96% v/v
PA y Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO, y secar como anteriormente,
llenar con el vino a temperatura de 207C, aproximadamente, cuidando que no quede ninguna
burbuja de aire (en caso de que el vino tenga gas
carbónico, se eliminará previamente como luego
se indica). Dejar el picnómetro con el vino en el
termostato a 207C ± 0,27 durante 30 minutos, llenar hasta volumen con el vino y pesar.
M
4(a).4. Cálculo.
4(a).4.1. Cálculo de la densidad relativa a
207C.
d20
20
P” - P
= ––––––––
P’ - P
P = peso en g del picnómetro vacío.
P’ = peso en g del picnómetro más agua a
207C.
P” = peso en g del picnómetro más vino a
207C.
un volumen de unos 250 ml del vino, en matraz
de 1.000 ml.
Si el vino está turbio, se filtrará por papel de filtración rápida, de pliegues y procurando airear lo
menos posible, tapando también el embudo con
vidrio de reloj.
Si el enturbiamiento es por suspensión de
levadura, la filtración corriente aludida no lo aclarará, siendo conveniente en este caso, dejar
decantar el vino en probeta tapada, durante dos o
tres días en sitio fresco.
4(a).6. Referencia.
4(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V., A1, 11-26. 1969.
4(a).4.2. Cálculo de la masa volúmica r20.
r20 = 0,998203 d20
20
o bien
r20 =
d20
20
4(b). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD
RELATIVA
(Método areométrico)
c
- ––––––––
1.000
El valor de c se encuentra en las tablas 4(a).I y
4(a).II.
La aproximación de los resultados será de
0,0003. Para mayor precisión, se tendrá en cuenta el empuje del aire como en 5(a).5.
Si el vino contiene cantidad sensible de gas
carbónico, se eliminará todo lo posible agitando
4(b).1. Principio.
Determinación de la masa volúmica a partir de
la lectura del areómetro que flota introducido
en el vino.
4(b).2.1. Areómetro. Los areómetros empleados
deben responder a las siguientes normas (I.S.O.):
Parte cilíndrica sumergible y tallo de sección
circular de 3 mm de diámetro como mínimo. Para
TABLA 4(a). I
Cálculo de la masa volúmica (r20) a partir de la densidad
relativa 20/20 y recíprocamente
Densidades
Correcciones c
Densidades
Correcciones c
Densidades
Correcciones c
0,960
1,73
1,120
2,02
0,980
1,76
1,140
2,05
1,280
2,30
1,000
1,80
1,160
2,09
1,300
2,34
1,020
1,84
1,180
2,12
1,320
2,38
1,040
1,87
1,200
2,16
1,340
2,41
1,060
1,91
1,220
2,20
1,360
2,45
1,080
1,94
1,240
2,23
1,380
2,48
1,100
1,98
1,260
2,27
1,400
2,52
1,080
0,97
1,240
1,12
1,380
1,24
1,100
0,99
1,260
1,13
1,400
1,25
TABLA 4(a). II
Cálculo de la masa volúmica (r15) a partir de la densidad
relativa 15/15 y recíprocamente
Densidades
Correcciones c
Densidades
Correcciones c
Densidades
Correcciones c
0,960
0,86
1,120
1,01
0,980
0,88
1,140
1,03
1,280
1,15
1,000
0,90
1,160
1,04
1,300
1,17
1,020
0,92
1,180
1,06
1,320
1,19
1,040
0,94
1,200
1,08
1,340
1,21
1,060
0,95
1,220
1,10
1,360
1,22
15
r = lectura del tallo graduado del areómetro.
c = valor de la corrección correspondiente a la
temperatura del vino en el momento de la lectura.
Este valor se encuentra en las tablas 4(b). I y 4(b).
II.
t = temperatura del vino en el momento de la
lectura.
Los resultados se obtendrán con una precisión
de 0,0003.
vinos secos, la graduación será de 0,983 a 1,003
en milésimas y 0,2 milésimas. Las divisiones de
milésimas deben ser de 5 mm como mínimo. Para
vinos desalcoholizados y vinos dulces, y eventualmente para mostos, se recomienda un juego de 5
areómetros graduados de 1,000-1,030; 1,0301,060; 1,060-1,090; 1,090-1,120; 1,120-1,150.
Estos aparatos estarán graduados en masas
volúmicas a 207C, en milésimas y 0,5 milésimas
por lo menos. Cada división de una milésima será
de 3mm como mínimo. En los aparatos se indicará que las lecturas deben hacerse por la parte
superior del menisco.
4(b).2.2. Termómetro contrastado, graduado
por lo menos en 1/2 grados.
4(b).2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diámetro interior y 320 mm de altura.
4(b).2.4. Plataforma con tornillos de nivelación,
para mantener vertical la probeta sobre ella colocada.
t
20
Si se utilizan areómetros que den d15
4 o d 20,
hay que corregir la lectura en las tablas correspondientes, y después expresar los resultados en
d 20
20 o r 20 , empleando las fórmulas y tablas siguientes:
C
15
d20
20 = d 4 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). III.
1.000
Colocar en la probeta descrita 250 ml del vino
e introducir el areómetro y el termómetro.
El areómetro y especialmente el tallo graduado
deberán estar limpios y desengrasados.
Agitar para uniformar la temperatura. Un minuto después, hacer la lectura del termómetro. Retirar el termómetro y hacer la lectura de la masa
aparente sobre el tallo del areómetro, después de
un minuto de reposo.
C
15
d20
20 = d15 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). IV.
1.000
C
15
r20
20 = d 4 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). V.
1.000
C
15
r20
20 = d15 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). VI.
1.000
4(b).4. Cálculo.
Calcular la masa volúmica referida a 207C.
d’Analyse des Vins. O.I.V. A1, 11-26.
4(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de
correspondance entre les diverses tables Alcoométriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,
111-141, 1966.
c (_ si t es inferior a 207C)
r20 = rt ± ––––––
1.000 (+ si t es superior a 207C)
r20= masa volúmica referida a 207.
TABLA 4(b). I
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207
16
Temperaturas
0
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
10º
1,45
1,51
1,55
1,58
1,64
1,70
1,78
1,88
1,98
2,09
2,21
2,34
11º
12º
13º
14º
1,35
1,24
1,12
0,99
1,40
1,28
1,16
1,03
1,43
1,31
1,18
1,05
1,47
1,34
1,21
1,07
1,52
1,39
1,25
1,11
1,58
1,44
1,30
1,14
1,65
1,50
1,35
1,19
1,73
1,58
1,42
1,24
1,83
1,66
1,49
1,31
1,93
1,75
1,56
1,37
2,03
1,84
1,64
1,44
2,15
1,94
1,73
1,52
15º
0,86
0,89
0,90
0,92
0,95
0,98
1,02
1,07
1,12
1,17
1,23
1,29
16º
17º
0,71
0,55
0,73
0,57
0,74
0,57
0,76
0,59
0,78
0,60
0,81
0,62
0,84
0,65
0,87
0,67
0,91
0,70
0,93
0,74
0,99
0,77
1,05
0,81
GRADOS ALCOHOLICOS
M
TABLA 4(b). I
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207
GRADOS ALCOHOLICOS
Temperaturas
0
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
18º
19º
0,38
0,19
0,39
0,20
0,39
0,20
0,40
0,21
0,41
0,21
0,43
0,22
0,44
0,23
0,46
0,24
0,48
0,25
0,50
0,26
0,52
0,27
0,55
0,28
21º
22º
23º
24º
0,21
0,43
0,67
0,91
0,22
0,45
0,69
0,93
0,22
0,45
0,70
0,95
0,23
0,46
0,71
0,97
0,23
0,47
0,72
0,99
0,24
0,49
0,74
1,01
0,25
0,50
0,77
1,04
0,25
0,52
0,79
1,07
0,26
0,54
0,82
1,11
0,27
0,56
0,85
1,15
0,29
0,58
0,88
1,20
0,29
0,60
0,91
1,24
25º
1.16
1,19
1,21
1,23
1,26
1,29
1,33
1,37
1,42
1,47
1,52
1,57
26º
27º
28º
29º
1,42
1,69
1,97
2,26
1,46
1,74
2,03
2,33
1,49
1,77
2,06
2,37
1,51
1,80
2,09
2,40
1,54
1,83
2,14
2,45
1,58
1,88
2,19
2,50
1,62
1,93
2,24
2,57
1,67
1,98
2,31
2,64
1,73
2,05
2,38
2,73
1,79
2,12
2,46
2,82
1,85
2,20
2,55
2,91
1,92
2,27
2,63
2,99
30º
2,56
2,64
2,67
2,72
2,77
2,83
2,90
2,98
3,08
3,18
3,28
3,38
20º
GRADOS ALCOHOLICOS
Temperaturas
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
10º
11º
12º
13º
14º
2,47
2,26
2,04
1,82
1,59
2,60
2,38
2,15
1,91
1,67
2,75
2,51
2,26
2,01
1,75
2,90
2,65
2,38
2,11
1,84
3,06
2,78
2,51
2,22
1,93
3,22
2,93
2,63
2,33
2,03
3,39
3,08
2,77
2,45
2,13
3,57
3,24
2,91
2,57
2,23
3,75
3,40
3,05
2,69
2,33
3,93
3,57
3,19
2,81
2,44
4,12
3,73
3,34
2,95
2,55
4,31
3,90
3,49
3,07
2,66
15º
1,35
1,42
1,49
1,56
1,63
1,71
1,80
1,88
1,96
2,05
2,14
2,23
16º
17º
18º
19º
1,10
0,84
0,57
0,29
1,15
0,88
0,60
0,30
1,21
0,92
0,62
0,32
1,27
0,96
0,65
0,33
1,33
1,01
0,68
0,35
1,39
1,05
0,71
0,36
1,45
1,11
0,74
0,38
1,52
1,15
0,78
0,39
1,59
1,20
0,81
0,41
1,66
1,26
0,85
0,43
1,73
1,31
0,88
0,44
1,80
1,36
0,91
0,46
21º
22º
23º
24º
0,31
0,63
0,95
1,29
0,32
0,65
0,99
1,34
0,34
0,68
1,03
1,39
0,35
0,71
1,07
1,45
0,36
0,73
1,12
1,50
0,38
0,77
1,16
1,56
0,39
0,80
1,21
1,62
0,41
0,83
1,25
1,69
0,43
0,86
1,30
1,76
0,44
0,89
1,35
1,82
0,46
0,93
1,40
1,88
0,48
0,96
1,45
1,95
25º
1,63
1,70
1,76
1,83
1,90
1,97
2,05
2,13
2,21
2,29
2,37
2,45
26º
27º
28º
29º
1,99
2,35
2,73
3,11
2,07
2,44
2,83
3,22
2,14
2,53
2,93
3,34
2,22
2,63
3,03
3,45
2,31
2,72
3,14
3,58
2,40
2,82
3,26
3,70
2,49
2,93
3,38
3,84
2,58
3,04
3,50
3,97
2,67
3,14
3,62
4,11
2,77
3,25
3,75
4,25
2,86
3,37
3,85
4,39
2,96
3,48
4,00
4,54
30º
3,40
3,62
3,75
3,88
4,02
4,16
4,30
4,46
4,61
4,76
4,92
5,07
20º
17
TABLA 4(b). II
Correcciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207
Temperaturas
MASAS VOLUMICAS VINOS DE 137
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
10º
2,24
2,58
2,93
3,27
3,59
3,89
4,18
11º
12º
13º
14º
2,06
1,87
1,69
1,49
2,37
2,14
1,93
1,70
2,69
2,42
2,14
1,90
2,97
2,67
2,37
2,09
3,26
2,94
2,59
2,27
3,53
3,17
2,80
2,44
3,78
3,40
3,00
2,61
15º
1,25
1,42
1,59
1,75
1,90
2,05
2,19
16º
17º
18º
19º
1,03
0,80
0,54
0,29
1,17
0,90
0,61
0,33
1,30
1,00
0,68
0,36
1,43
1,09
0,75
0,39
1,55
1,17
0,81
0,42
1,67
1,27
0,86
0,45
1,78
1,36
0,92
0,48
21º
22º
23º
24º
0,29
0,57
0,89
1,22
0,32
0,64
0,98
1,34
0,35
0,70
1,08
1,44
0,39
0,76
1,17
1,56
0,42
0,82
1,26
1,68
0,45
0,88
1,34
1,79
0,47
0,93
1,43
1,90
25º
1,61
1,68
1,83
1,98
2,12
2,26
2,40
26º
27º
28º
29º
1,87
2,21
2,56
2,93
2,05
2,42
2,80
3,19
2,22
2,60
3,02
3,43
2,40
2,80
3,25
3,66
2,56
3,00
3,47
3,91
2,71
3,18
3,67
4,14
2,87
3,35
3,89
4,37
30º
3,31
3,57
3,86
4,15
4,41
4,66
4,92
20º
TABLA 4(b). II
Temperaturas
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
10º
2,51
2,85
3,20
3,54
3,86
4,02
4,46
11º
12º
13º
14º
2,31
2,09
1,88
1,67
2,61
2,36
2,12
1,86
2,93
2,64
2,34
2,06
3,21
2,90
2,56
2,25
3,51
3,16
2,78
2,45
3,64
3,27
2,88
2,51
4,02
3,61
3,19
2,77
15º
1,39
1,56
1,72
1,88
2,03
2,11
2,32
16º
17º
18º
19º
1,06
0,87
0,60
0,32
1,27
0,98
0,66
0,36
1,40
1,08
0,73
0,39
1,53
1,17
0,80
0,42
1,65
1,26
0,86
0,45
1,77
1,35
0,91
0,48
1,88
1,44
0,97
0,51
21º
22º
23º
24º
0,32
0,63
0,97
1,32
0,35
0,69
1,06
1,44
0,38
0,75
1,16
1.54
0,42
0,81
1,25
1,66
0,45
0,87
1,34
1,78
0,48
0,93
1,42
1,89
0,50
0,98
1,51
2,00
25º
1,66
1,81
1,96
2,11
2,25
2,39
2,52
26º
27º
28º
29º
2,02
2,39
2,75
3,16
2,20
2,59
2,89
3,41
2,37
2,78
3,22
3,65
2,54
2,98
3,44
3,89
2,70
3,17
3,66
4,13
2,85
3,35
3,86
4,36
3,01
3,52
4,07
4,59
30º
3,55
3,81
4,10
4,38
4,66
4,90
5,16
20º
18
M
TABLA 4(b). II
Temperaturas
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
10º
2,81
3,15
3,50
3,84
4,15
4,45
4,74
11º
12º
13º
14º
2,57
2,32
2,09
1,83
2,89
2,60
2,33
2,03
3,20
2,87
2,55
2,23
3,49
3,13
2,77
2,42
3,77
3,39
2,98
2,61
4,03
3,63
3,19
2,77
4,28
3,84
3,39
2,94
15º
1,54
1,71
1,87
2,03
2,18
2,32
2,47
16º
17º
18º
19º
1,25
0,96
0,66
0,35
1,39
1,06
0,72
0,38
1,52
1,16
0,79
0,41
1,65
1,26
0,86
0,45
1,77
1,35
0,92
0,48
1,89
1,44
0,97
0,51
2,00
1,52
1,03
0,53
21º
22º
23º
24º
0,34
0,68
1,06
1,43
0,38
0,75
1,15
1,55
0,41
0,81
1,25
1,65
0,44
0,87
1,34
1,77
0,47
0,93
1,42
1,89
0,50
0,99
1,51
2,00
0,53
1,04
1,59
2,11
25º
1,80
1,94
2,09
2,24
2,39
2,52
2,66
26º
27º
28º
29º
2,18
2,58
2,97
3,40
2,36
2,78
3,21
3,66
2,53
2,97
3,44
3,89
2,71
3,17
3,66
4,13
2,86
3,36
3,88
4,38
3,02
3,54
4,09
4,61
3,17
3,71
4,30
4,82
30º
3,82
4,08
4,37
4,65
4,93
5,17
5,42
20º
TABLA 4(b). II
Temperaturas
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
10º
3,14
3,48
3,83
4,17
4,48
4,78
5,07
11º
12º
13º
14º
2,87
2,58
2,31
2,03
3,18
2,86
2,55
2,23
3,49
3,13
2,77
2,43
3,78
3,39
2,99
2,61
4,06
3,65
3,20
2,80
4,32
3,88
3,41
2,96
4,57
4,10
3,61
3,13
15º
1,69
1,86
2,02
2,18
2,33
2,48
2,62
16º
17º
18º
19º
1,38
1,06
0,73
0,38
1,52
1,16
0,79
0,41
1,65
1,26
0,85
0,44
1,78
1,35
0,92
0,48
1,90
1,44
0,98
0,51
2,02
1,53
1,03
0,52
2,13
1,62
1,09
0,56
21º
22º
23º
24º
0,37
0,75
1,15
1,55
0,41
0,81
1,30
1,67
0,44
0,87
1,34
1,77
0,47
0,93
1,43
1,89
0,50
0,99
1,51
2,00
0,53
1,04
1,60
2,11
0,56
1,10
1,68
2,23
25º
1,95
2,09
2,24
2,39
2,53
2,67
2,71
26º
27º
28º
29º
2,36
2,79
3,20
3,66
2,54
2,99
3,44
3,92
2,71
3,18
3,66
4,15
2,89
3,38
3,89
4,40
3,04
3,57
4,11
4,64
3,20
3,75
4,32
4,87
3,35
3,92
4,53
5,08
30º
4,11
4,37
4,66
4,94
5,22
5,46
5,71
20º
19
TABLA 4(b). II
Temperaturas
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
10º
3,50
3,84
4,19
4,52
4,83
5,12
5,41
11º
12º
13º
14º
3,18
2,86
2,56
2,23
3,49
3,13
2,79
2,43
3,80
3,41
3,01
2,63
4,09
3,67
3,23
2,81
4,34
3,92
3,44
3,00
4,63
4,15
3,65
3,16
4,88
4,37
3,85
3,33
15º
1,86
2,03
2,19
2,35
2,50
2,65
2,80
16º
17º
18º
19º
1,51
1,15
0,79
0,41
1,65
1,25
0,85
0,44
1,78
1,35
0,92
0,47
1,91
1,45
0,98
0,51
2,03
1,54
1,05
0,54
2,15
1,63
1,10
0,57
2,26
1,71
1,15
0,59
21º
22º
23º
24º
0,41
0,81
1,25
1,68
0,44
0,88
1,34
1,80
0,47
0,94
1,44
1,90
0,51
1,00
1,53
2,02
0,54
1,06
1,61
2,13
0,57
1,10
1,70
2,25
0,59
1,17
1,78
2,36
25º
2,11
2,25
2,40
2,55
2,69
2,83
2,97
26º
27º
28º
29º
2,55
3,01
3,46
3,95
2,73
3,20
3,69
4,20
2,90
3,40
3,93
4,43
3,07
3,59
4,15
4,68
3,22
3,78
4,36
4,92
3,38
3,96
4,58
5,15
3,54
4,13
4,77
5,36
30º
4,42
4,68
4,97
5,25
5,53
5,77
6,02
20º
TABLA 4(b). III
Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/4
Vinos secos (d15
4 comprendida entre 0,97 y 1,03)
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
5,1
0,9
12,1
0,6
19,1
0,2
6,1
0,8
13,1
0,6
20,1
0,1
7,1
0,8
14,1
0,5
21,1
0,0
8,1
0,8
15,1
0,5
22,1
0,0
9,1
0,7
16,1
0,4
23,1
-0,1
10,1
0,7
17,1
0,3
24,1
-0,2
11,1
0,7
18,1
0,3
25,1
-0,3
Vinos dulces
Densidades
20
Grados
Alcohólicos
{
107
137
157
177
197
217
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
0,7
0,6
0,5
0,4
0,2
0,0
0,5
0,4
0,2
0,1
-0,1
-0,2
0,3
0,2
0,0
-0,1
-0,3
-0,4
0,1
0,0
-0,2
-0,3
-0,5
-0,6
0,0
-0,1
-0,3
-0,4
-0,6
-0,7
-0,2
-0,3
-0,5
-0,6
-0,8
-0,9
-0,3
-0,4
-0,6
-0,7
-0,9
-1,0
M
TABLA 4(b). IV
Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/15
Vinos secos
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
5,1
0,1
12,1
0,3
19,1
0,9
6,1
0,1
13,1
0,4
20,1
0,9
7,1
0,1
14,1
0,4
21,1
1,0
8,1
0,2
15,1
0,5
22,1
1,0
9,1
0,2
16,1
0,6
23,1
1,1
10,1
0,2
17,1
0,6
24,1
1,2
11,1
0,3
18,1
0,7
25,1
1,2
Vinos dulces
Densidades
Grados
Alcohólicos
{
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
0,2
0,3
0,5
0,6
0,8
1,0
0,4
0,5
0,7
0,8
1,0
1,1
0,5
0,6
0,8
0,9
1,1
1,2
0,7
0,8
1,0
1,1
1,3
1,4
0,8
0,9
1,1
1,2
1,4
1,5
1,0
1,1
1,3
1,4
1,6
1,7
1,1
1,2
1,4
1,5
1,7
1,8
107
137
157
177
197
217
TABLA 4(b). V
Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/4
Vinos secos
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
5,1
0,9
12,1
1,2
19,1
1,6
6,1
1,0
13,1
1,2
20,1
1,7
7,1
1,0
14,1
1,3
21,1
1,8
8,1
1,0
15,1
1,3
22,1
1,8
9,1
1,1
16,1
1,4
23,1
1,9
10,1
1,1
17,1
1,5
24,1
2,0
11,1
1,1
18,1
1,5
25,1
2,1
Vinos dulces
Densidades
Grados
Alcohólicos
{
107
137
157
177
197
217
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
1,1
1,2
1,3
1,4
1,6
1,8
1,3
1,4
1,6
1,7
1,9
2,0
1,5
1,6
1,8
1,9
2,1
2,2
1,7
1,8
2,0
2,1
2,3
2,4
1,8
1,9
2,1
2,2
2,4
2,5
2,0
2,1
2,3
2,4
2,6
2,7
2,1
2,2
2,4
2,5
2,7
2,8
21
TABLA 4(b). VI
Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/15
15
Vinos secos (d 15 comprendida entre 0,97 y 1,03)
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
Grados alcohólicos
Correcciones c
5,11
1,81
12,11
2,11
19,11
2,65
6,1
1,9
13,1
2,1
20,1
2,6
7,1
1,9
14,1
2,2
21,1
2,7
8,1
1,9
15,1
2,2
22,1
2,7
9,1
2,0
16,1
2,3
23,1
2,8
10,1
2,0
17,1
2,4
24,1
2,9
11,1
2,0
18,1
2,4
25,1
3,0
Vinos dulces
Densidades
Grados
Alcohólicos
{
107
137
157
177
197
217
1,000
1,020
1,040
1,060
1,080
1,100
1,120
2,0
2,1
2,2
2,3
2,5
2,7
2,2
2,3
2,5
2,6
2,8
2,9
2,4
2,5
2,7
2,8
3,0
3,1
2,6
2,7
2,9
3,0
3,2
3,3
2,7
2,8
3,0
3,1
3,3
3,4
2,9
3,1
3,3
3,4
3,6
3,7
3,1
3,2
3,4
3,5
3,7
3,8
5(a). TITULO ALCOHOMETRICO (1)
(Método picnométrico)
5(a).1. Principio.
El título alcohométrico es igual al número de
litros de etanol contenidos en 100 l de vino, medidos ambos volúmenes a 207C, y se expresa en
grados alcohólicos volumétricos, con una precisión de 0,17C.
Se determina por destilación simple de líquido
alcalinizado y medida de la densidad del destilado
por picnometría.
22
5(a).2.1. Aparato de destilación.- Consta de
las siguientes partes:
5(a).2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml
con rodaje esmerilado.
5(a).2.1.2. Columna rectificadora de 20 cm de
largo.
5(a).2.1.3. Disco metálico o de amianto con un
orificio de 8 cm de diámetro.
5(a).2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de
longitud, con circulación rápida de agua y dispuesto verticalmente.
5(a).2.2. Picnómetro.- Como en 4(a).2.1, de
vidrio pyrex.
5(a).2.3. Tara del picnómetro.- Recipiente de
vidrio del mismo volumen exterior que el picnómetro.
Se llena casi por completo con una solución de sodio
cloruro, de densidad tal que la masa de esta tara sea
igual a la masa del picnómetro lleno de un líquido de
densidad 1,01. Este recipiente cierra a la llama. Su
capacidad exterior debe ser igual a la del picnómetro
lleno, con una aproximación de 1 ml de diferencia.
5(a).2.4. Termostato y accesorios, descritos en
4(a).2.
5(a).2.5. Balanza analítica de 0,1 mg y 100 g
de carga.
5(a).3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural,
escoriforme QP
131325 Fenolftaleína PA-ACS
211835 Piedra Pómez gránulos QP
5(a).3.1. Lechada de cal. Solución de 120 g
de Calcio Oxido natural escoriforme QP en 1.000 ml
de Agua PA-ACS.
(1).- Denominación adoptada para el grado alcohólico por la Oficina Internacional del Vino (O.I.V.).
M
Para vinos jóvenes o espumosos, eliminar
previamente el gas carbónico. Agitar 250 ml de vino
en un matraz de 500 ml previamente siliconado el
interior del matraz por tres gotas de solución al 1%,
de silicona soluble en agua, y después de bien seco,
añadir el vino.
5(a).4.1. Destilación.- Medir 250 ml de vino en un
matraz aforado con cuello de 12 mm de diámetro
interior como máximo, y anotar la temperatura.
Introducir el vino en un matraz de destilación que
contenga una docena de fragmentos de materia
porosa Piedra Pómez gránulos QP. Lavar el matraz
cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. Añadir
10 ml de la Lechada de cal. La materia colorante del
vino debe virar a la alcalinidad. En el caso de vinos
muy ácidos, puede comprobarse por toques externos el viraje de la Fenolftaleína PA-ACS. Recoger el
destilado en el mismo matraz de 250 ml, conteniendo
unos 10 ml de Agua PA-ACS, en la que debe sumergirse el pico del tubo afilado, prolongación del refrigerante. Destilar por lo menos 200 ml. Después agitar y
llenar hasta volumen con Agua PA-ACS, a la misma
temperatura que se midió el vino inicialmente.
5(a).4.2. Tarado del picnómetro vacío.- Poner en
un platillo de la balanza la tara y en el otro el picnómetro vacío, limpio y seco, y a su lado, las masas necesarias p, para entre ambos equlibrar la balanza.
La masa equivalente a la de la tara será:
Masa del picnómetro + m + p
m = 0,0012 V.
m = masa en g del aire contenido en el picnómetro vacío.
V = volumen en ml del picnómetro.
0,0012 g/ml = masa volúmica del aire.
El volumen del picnómetro se considera, con suficiente aproximación, que es numéricamente igual a la
masa de Agua PA-ACS que llene el picnómetro.
Para calcular esta masa, colocar el picnómetro
lleno de Agua PA-ACS en el platillo de la balanza, si p’
es la masa que hay que colocar a su lado para equilibrar la de la tara, la masa m será:
m = (p - p’) . 0,0012
Operar siempre a 207 exactamente para realizar el
enrase, utilizando el termostato. Si se opera a t7, para
conocer el volumen del picnómetro a 207, hay que
multiplicar (p - p’) por un factor F, que da la tabla 5 (a). I
para picnómetro del vidrio pyrex.
Repetir estas operaciones de tara tres veces
seguidas. Al cabo de un año, volver a comprobar la
tara del picnómetro.
Con balanza monoplato, proceder análogamente.
Primero poner la tara, hacer la lectura correspondiente en la escala de pesos y después poner el picnómetro vacío. Anotar los pesos p que hay que añadir
hasta marcar la pesada que alcanzó la tara.
Tara = picnómetro + aire + p
5(a).4.3. Determinación picnométrica.- Llenar el
picnómetro lavado y seco con las precauciones
expuestas en 4(a). 3 con el destilado alcohólico a la
temperatura ambiente, llevar después al termostato, agitar el líquido haciendo girar el picnómetro por
dos o tres veces, hasta que la temperatura que
marca el termómetro del picnómetro sea constante.
Enrasar con el borde superior del tubo lateral, secar
éste, colocarlo sobre el tapón receptor (para pequeños rebordes) y anotar la temperatura tº utilizando
una lupa. Secar con el mismo cuidado el exterior
del picnómetro y llevarlo al platillo de la balanza.
Equilibrar la tara del picnómetro colocada en el otro
platillo.
5(a).5. Cálculo.
Calcular el título alcohométrico expresado en grados alcohólicos volumétricos.
5(a).5.1. Cálculo de la masa volúmica aparente.
p + m - p’
r t = ——————————————
volumen del picnómetro a 20º
r t = masa volúmica aparente.
m = masa del aire contenido en el picnómetro
vacío.
p = diferencia de masa entre la tara y el picnómetro lleno con destilado alcohólico.
5(a).5.2. Cálculo de grado alcohométrico.
Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V. a
207C utilizando la tabla 5(a). I de masa volúmicas a t7
corregidas del empuje del aire.
Buscar sobre la línea horizontal correspondiente a
la cifra de la parte entera de la temperatura, t, la cifra
de la masa volumen inmediatamente superior a rt. El
grado alcohólico que encabeza la columna donde se
encuentra esta cifra será la parte entera del grado
alcohólico a 207C.
Determinar la masa volúmica r correspondiente a
la parte entera de la temperatura, t, utilizando la diferencia tabular que se lee por debajo de la masa
volúmica inmediatamente superior a rt antes encontrada, y la cifra decimal t, r = rt + (diferencia tabular x
parte decimal de t) 10-5.
Hallar la parte decimal del grado alcohólico a 207,
buscando en las tablas sobre la línea horizontal que
comienza con la cifra de los enteros de la temperatura, t, la masa volúmica r‘ que sea inmediatamente
superior a r, y dividiendo la diferencia r‘ - r por la
diferencia tabular que está a la derecha de la cifra de
la masa volúmica r‘.
5(a).6. Referencias.
5(a).6.1 Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V. A2,1-25. 1969.
5(a).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de correspondance entre les diverses tables alcoométriques”.
Société Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111-141. 1966.
23
30º
29º
28º
27º
26º
25º
24º
23º
22º
21º
20º
19º
18º
17º
16º
15º
14º
13º
12º
11º
10º
Temperaturas
0
999 61
9
999 52
10
999 42
11
999 31
12
999 19
14
999 05
14
998 91
16
998 75
17
998 58
18
998 40
19
998 21
20
998 01
21
997 80
22
997 58
24
997 34
24
997 10
25
996 85
26
996 59
27
966 32
28
996 04
29
995 75
24
1 50
1 50
1 50
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 49
1 50
1
998 11
8
998 03
10
997 93
11
997 82
12
997 70
14
997 56
14
997 42
16
997 26
17
997 09
18
996 91
19
996 72
20
996 52
21
996 31
22
996 09
24
995 85
24
995 61
25
995 36
26
995 10
28
994 82
28
994 54
29
994 25
1 47
1 47
1 47
1 48
1 47
1 47
1 47
1 47
1 47
1 47
1 47
1 46
1 46
1 46
1 47
1 46
1 47
1 46
1 46
1 46
1 46
2
996 65
8
996 57
10
996 47
11
996 36
13
996 23
13
996 10
15
995 95
15
995 80
17
995 63
18
995 45
20
995 25
20
995 05
21
994 84
22
994 62
24
994 38
24
994 14
25
993 89
27
993 62
27
993 35
28
993 07
29
992 78
1 46
1 46
1 45
1 45
1 45
1 45
1 44
1 45
1 44
1 44
1 44
1 44
1 44
1 44
1 43
1 44
1 43
1 44
1 44
1 44
1 43
995 22
9
995 13
10
995 03
11
994 92
12
994 80
14
994 66
14
994 52
16
994 36
17
994 19
18
994 01
20
993 81
20
993 61
21
993 40
23
993 17
23
992 94
25
992 69
25
992 44
27
992 17
27
991 90
29
991 61
29
991 32
3
GRADOS ALCOHOLICOS
1 43
1 42
1 43
1 42
1 42
1 42
1 42
1 41
1 41
1 41
1 40
1 41
1 41
1 40
1 40
1 40
1 40
1 39
1 39
1 39
1 39
993 83
9
993 74
10
993 64
11
993 53
13
993 40
14
993 26
14
993 12
16
992 96
18
992 78
18
992 60
19
992 41
21
992 20
21
991 99
23
991 76
24
991 52
25
991 27
25
991 02
27
990 75
28
990 47
28
990 19
30
989 89
4
TABLA 5 (a). I
Masas volúmicas aparentes de mezclas hidroalcohólicas (picnómetro Pyrex)
1 39
1 39
1 39
1 39
1 39
1 38
1 38
1 38
1 38
1 37
1 37
1 37
1 36
1 36
1 36
1 35
1 35
1 35
1 35
1 35
1 34
5
992 49
10
992 39
10
992 29
11
992 18
13
992 05
14
991 91
15
991 76
16
991 60
18
991 42
19
991 23
19
991 04
21
990 83
22
990 61
23
990 38
24
990 14
25
989 89
26
989 63
27
989 36
28
989 08
28
988 80
30
988 50
1 36
1 36
1 35
1 35
1 34
1 34
1 34
1 33
1 33
1 33
1 33
1 32
1 32
1 32
1 32
1 31
1 31
1 31
1 30
1 29
1 30
6
991 19
9
991 10
1
990 99
12
990 87
13
990 74
14
990 60
16
990 44
16
990 28
18
990 10
19
989 91
20
989 71
21
989 50
22
989 28
23
989 05
25
988 80
25
988 55
26
988 29
28
988 01
28
987 73
29
987 44
30
987 14
1 34
1 33
1 33
1 32
1 32
1 31
1 31
1 31
1 30
1 30
1 29
1 29
1 28
1 28
1 27
1 27
1 26
1 26
1 26
1 26
1 25
7
989
989
989
989
989
989
989
989
988
988
988
988
987
987
987
987
986
986
986
986
985
Temperaturas
10º
11º
12º
13º
14º
15º
16º
17º
18º
19º
20º
21º
22º
23º
24º
25º
26º
27º
28º
29º
30º
94
10
84
11
73
12
61
13
48
15
33
16
17
17
00
18
82
20
62
20
42
22
20
22
98
24
74
25
49
25
24
27
97
28
96
29
40
29
11
31
80
1 30
1 30
1 29
1 29
1 28
1 28
1 27
1 27
1 26
1 25
1 25
1 24
1 24
1 24
1 23
1 23
1 22
1 21
1 21
1 20
1 19
988 75
11
988 64
12
988 52
12
988 40
14
988 26
16
988 10
16
987 94
18
987 76
18
987 58
20
987 38
21
987 17
22
986 95
23
986 72
25
986 47
25
986 22
26
985 96
27
985 69
29
985 40
29
985 11
30
984 81
31
984 50
8
1 28
1 28
1 27
1 26
1 26
1 26
1 25
1 24
1 24
1 23
1 23
1 22
1 21
1 20
1 20
1 19
1 19
1 18
1 16
1 16
1 16
987 59
11
987 48
12
987 36
14
987 22
15
987 07
16
986 91
17
986 74
18
986 56
19
986 37
21
986 16
22
985 94
22
985 72
24
985 48
25
985 23
26
984 97
27
984 70
27
984 43
29
984 14
30
983 84
31
983 53
31
983 22
9
1 28
1 27
1 27
1 26
1 26
1 24
1 24
1 23
1 22
1 22
1 21
1 20
1 20
1 19
1 18
1 17
1 16
1 16
1 15
1 14
1 13
986 46
12
986 34
13
986 21
15
986 06
15
985 91
17
985 74
18
985 56
19
985 37
20
985 17
21
984 96
23
984 73
23
984 50
24
984 26
16
984 00
27
983 73
27
983 46
29
983 15
29
982 88
31
982 57
31
982 26
32
981 94
10
GRADOS ALCOHOLICOS
TABLA 5 (a). I
(Continuación)
1 29
1 28
1 27
1 27
1 25
1 25
1 23
1 23
1 23
1 21
1 20
1 20
1 19
1 18
1 17
1 16
1 15
1 14
1 14
1 12
1 11
985 35
13
985 22
15
985 07
15
984 92
16
984 76
18
984 58
19
984 39
20
984 19
21
983 98
22
983 76
23
983 53
24
983 29
26
983 03
26
982 77
27
982 50
29
982 21
29
981 92
31
981 61
31
981 30
32
980 98
33
980 65
11
1 28
1 27
1 26
1 24
1 24
1 23
1 22
1 21
1 20
1 19
1 18
1 17
1 16
1 15
1 14
1 13
1 12
1 11
1 09
1 08
1 08
984 27
14
984 13
15
983 98
17
983 81
17
983 64
19
983 45
20
983 25
21
983 04
22
982 82
23
982 59
34
982 35
25
982 10
27
981 23
27
981 56
28
981 28
30
980 98
30
980 68
31
980 37
33
980 04
33
979 71
34
979 37
12
1 25
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TABLA 5 (a). I
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TABLA 5 (a). I
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28
GRADOS ALCOHOLICOS
TABLA 5 (a). I
(Continuación)
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48
964 70
48
964 22
49
963 73
50
963 23
50
962 73
51
962 22
52
961 70
52
961 18
53
960 65
53
960 12
55
959 57
54
959 03
55
959 58
56
957 92
57
957 35
57
956 78
30
1 40
1 40
1 38
1 36
1 36
1 33
1 32
1 31
1 29
1 27
1 26
1 25
1 23
1 20
1 20
1 17
1 16
1 14
1 12
1 09
1 08
M
5(b).4.2. Determinación areométrica.- Como
en 4(b).3, teniendo en cuenta que se utiliza destilado en vez de vino, y que el tallo del areómetro
viene graduado en grados alcohólicos aparentes.
Hacer al menos tres lecturas del grado alcohólico
aparente, sirviéndose si es preciso de una lupa.
5(b). TITULO ALCOHOMETRICO
(Método areométrico)
5(b). 1.Principio.
Como en 5(a).1.
5(b).2.1. Aparatos de destilación.- Como en
5(a).2.1.
5(b).2.2. Aparatos de areometría.
5(b).2.2.1. Alcohómetro.
5(b).2.2.2. Termómetro.
5(b).2.2.3. Probeta.
5(b).5. Cálculo.
Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V.
a 207C, utilizando la tabla 5(b).I, añadiendo o restando al grado alcohólico aparente a t7 la corrección correspondiente.
d’Analyse des Vins. O.I.V. A2, 1-25. 1969.
5(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de
correspondance entre les diverses tables alcoométriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,
111, 141, 1966.
5(b).3. Reactivos.
Como en 5(a).3.
Las generalidades como en 5(a).4.
5(b).4.1. Destilación.- Como en 5(a).4.1.
TABLA 5 (b). I
Correcciones a efectuar sobre el grado alcohólico aparente
para corregir la acción de la temperatura
Grados alcohólicos aparentes
Temperaturas
1
2
3
4
5
6
7
8
10º
0,84
0,87
0,88
0,92
0,96
1,01
1,08
1,16
1,24
11º
12º
13º
14º
0,80
0,74
0,67
0,60
0,81
0,76
0,69
0,61
0,83
0,78
0,70
0,62
0,86
0,80
0,73
0,65
0,90
0,84
0,76
0,68
0,96
0,88
0,80
0,71
1,01
0,94
0,85
0,75
1,08
1,00
0,90
0,79
1,16
1,07
0,95
0,85
0,51
0,52
0,54
0,56
0,58
0,61
0,64
0,68
0,72
16º
17º
18º
19º
0,42
0,32
0,23
0,11
0,43
0,33
0,24
0,12
0,45
0,34
0,24
0,12
0,46
0,35
0,25
0,13
0,48
0,37
0,26
0,13
0,50
0,39
0,27
0,13
0,53
0,41
0,28
0,14
0,55
0,43
0,30
0,15
0,58
0,46
0,31
0,16
20º
-
-
-
-
-
-
-
-
-
21º
22º
23º
24º
-
0,13
0,26
0,41
0,56
0,13
0,27
0,42
0,57
0,13
0,28
0,43
0,58
0,14
0,28
0,44
0,59
0,14
0,29
0,45
0,61
0,15
0,30
0,47
0,64
0,15
0,32
0,49
0,67
0,16
0,34
0,51
0,70
25º
-
0,71
0,72
0,73
0,75
0,78
0,81
0,84
0,89
-
0,86
-
0,88
1,05
1,22
1,40
0,91
1,08
1,25
1,44
0,93
1,10
1,28
1,48
0,96
1,14
1,33
1,52
1,00
1,18
1,38
1,58
1,04
1,23
1,44
1,64
1,09
1,28
1,50
1,71
-
-
1,59
1,62
1,66
1,71
1,77
1,85
1,93
26º
27º
28º
29º
30º
RESTAR
15º
SUMAR
0
29
30
Temperaturas
10º
11º
12º
13º
14º
15º
16º
17º
18º
19º
20º
21º
22º
23º
24º
25º
26º
27º
28º
29º
30º
26º
27º
28º
29º
25º
21º
22º
23º
24º
20º
16º
17º
18º
19º
15º
11º
12º
13º
14º
10º
Temperaturas
30º
SUMAR
RESTAR
SUMAR
RESTAR
TABLA 5 (b). I (continuación)
1,25
1,15
1,02
0,90
1,34
9
0,82
1,34
1,23
1,10
0,96
1,44
10
0,87
1,46
1,32
1,18
1,03
1,58
11
0,94
1,59
1,43
1,28
1,11
1,73
12
1,01
1,73
1,55
1,38
1,19
1,89
13
1,09
1,88
1,68
1,48
1,28
2,06
14
-
0,94
0,71
0,47
0,24
1,17
2,04
1,82
1,60
1,39
2,24
15
-
1,01
0,76
0,50
0,26
1,26
2,21
1,97
1,72
1,49
2,43
16
-
1,08
0,81
0,53
0,28
1,34
2,38
2,13
1,85
1,59
2,63
17
0,77
0,28
0,54
0,82
1,09
0,88
0,67
0,45
0,23
0,26
0,51
0,78
1,04
1,38
0,24
0,48
0,74
0,99
1,32
1,65
1,93
2,21
2,50
0,82
0,63
0,42
0,21
0,23
0,46
0,71
0,94
1,24
1,57
1,85
2,11
2,39
2,79
0,21
0,44
0,67
0,89
1,18
1,51
1,76
2,02
2,28
2,67
0,76
0,58
0,39
0,20
0,20
0,42
0,63
0,85
1,12
1,43
1,68
1,92
2,17
2,55
0,19
0,40
0,60
0,81
1,07
1,36
1,60
1,83
2,08
2,45
0,71
0,55
0,36
0,18
0,18
0,37
0,56
0,77
1,02
1,30
1,53
1,75
2,00
2,33
-
0,17
0,35
0,54
0,73
0,98
1,24
1,46
1,68
1,92
2,23
0,66
0,51
0,34
0,17
0,93
1,19
1,40
1,62
1,85
2,15
-
1,14
1,34
1,56
1,78
2,07
0,62
0,48
0,33
0,16
2,00
1,73
2,02
2,31
2,62
1,44
0,30
0,57
0,86
1,14
-
1,15
0,85
0,56
0,29
1,44
2,56
2,27
1,99
1,71
2,84
18
3,04
1,82
2,12
2,43
2,73
1,51
0,31
0,60
0,90
1,21
-
1,20
0,90
0,60
0,30
1,51
2,71
2,40
2,11
1,81
3,01
19
3,16
1,90
2,22
2,54
2,85
1,60
0,32
0,62
0,94
1,27
-
1,26
0,95
0,63
0,31
1,58
2,84
2,51
2,20
1,89
3,15
20
3,28
1,97
2,30
2,63
2,96
1,65
0,33
0,65
0,98
1,31
-
1,31
0,99
0,65
0,32
1,64
2,95
2,63
2,29
1,96
3,29
21
3,38
2,02
2,36
2,70
3,05
1,69
0,34
0,67
1,00
1,35
-
1,36
1,02
0,68
0,33
1,71
3,08
2,73
2,38
2,03
3,44
22
3,38
2,06
2,42
2,76
3,11
1,72
0,35
0,69
1,03
1,38
-
1,40
1,06
0,70
0,34
1,77
3,21
2,84
2,47
2,11
3,58
23
3,46
2,12
2,47
2,83
3,18
1,76
0,36
0,71
1,06
1,42
-
1,45
1,09
0,72
0,35
1,82
3,32
2,93
2,57
2,19
3,70
24
3,54
2,18
2,53
2,90
3,25
1,81
0,37
0,73
1,08
1,46
-
1,49
1,12
0,75
0,36
1,87
3,42
3,02
2,64
2,25
3,82
25
3,61
2,23
2,59
2,96
3,32
1,86
0,38
0,74
1,11
1,50
-
1,53
1,15
0,76
0,37
1,91
3,52
3,10
2,71
2,30
3,93
26
2,91
M
27
28
29
30
10º
4,04
4,14
4,24
4,43
11º
12º
13º
14º
3,61
3,18
2,78
2,36
3,69
3,25
2,84
2,42
3,78
3,32
2,89
2,47
3,86
3,39
2,94
2,52
1,96
2,01
2,05
2,09
16º
17º
18º
19º
1,56
1,17
0,77
0,38
1,59
1,19
0,79
0,40
1,62
1,21
0,81
0,41
1,64
1,23
0,82
0,42
20º
-
-
-
-
21º
22º
23º
24º
0,38
0,76
1,14
1,53
0,39
0,78
1,16
1,56
0,39
0,79
1,19
1,58
0,40
0,81
1,21
1,60
25º
1,90
1,94
1,97
2,00
26º
27º
28º
29º
2,28
2,64
3,02
3,39
2,31
2,70
3,07
3,45
2,35
2,74
3,12
3,51
2,39
2,78
3,16
3,56
3,76
3,83
3,89
3,95
30º
RESTAR
15º
SUMAR
Temperaturas
6. EXTRACTO SECO TOTAL
6.1. Principio.
El extracto seco total o materias secas totales
es el conjunto de todas las sustancias que, en
condiciones físicas determinadas, no se volatilizan. Estas condiciones físicas deben fijarse de tal
manera que las sustancias componentes de este
extracto sufran el mínimo de alteración.
El extracto seco total se calcula indirectamente conociendo la densidad del “residuo sin alcohol”, que es el vino cuyo alcohol ha sido evaporado y después se ha restablecido el volumen primitivo por adición de agua.
6.2. Procedimiento.
Llevar el residuo de la destilación del alcohol del
vino (sin previa neutralización) al matraz en donde
se midió el vino. Lavar el matraz en donde se destiló el vino con varias porciones de agua, y llenar
con estas aguas hasta volumen, el matraz con el
residuo de la destilación, a la misma temperatura a
la que se enrasó el vino. Mezclar bien, verter en una
probeta y determinar la densidad como en 4(a).
6.3. Cálculo.
Calcular el extracto seco expresado en g/l a
partir de la densidad del residuo sin alcohol utilizando la tabla 6.I.
6.3.1. Determinar la densidad del residuo sin
alcohol como en 6.2.
6.3.2. Calcular la densidad 20/20 del residuo
sin alcohol según la fórmula de Tabarié:
dr = dv - da +1
d = densidad 20/20 del residuo sin alcohol.
dv = densidad del vino a 207.
da = densidad a 207 de la mezcla hidroalcohólica
del mismo grado que el vino.
6.3.3. Calcular la densidad del residuo sin
alcohol a partir de las masas volúmicas.
r
dr = 1,0018 (rv - ra) + 1
rv = masa volúmica del vino a 20º.
ra = masa volúmica a 207 de la mezcla hidroalcohólica del mismo grado que el vino.
Para valores de rv menores a 1,05 puede
tomarse 1 en vez de 1,0018.
31
6.4. Observaciones.
El extracto seco se expresa por la cantidad de
sacarosa que, disuelta en agua hasta 1 l, da una
solución de la misma densidad que el residuo sin
alcohol. En la tabla 6. I se encuentra la equivalencia de esta densidad, en extracto, expresada en
sacarosa.
6.5. Referencia.
6.5.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’ Analyse des Vins. O.I.V. A3, 1-6. 1969.
TABLA 6. I
Contenido en extracto seco (g/l)
Densidad
con dos
decimales
Tercer decimal de la densidad
0
1
2
3
4
5
Gramos de extracto por litro
32
1,00
0
2,6
5,1
7,7
10,3
12,9
1,01
1,02
1,03
1,04
25,8
51,7
77,7
103,7
28,4
54,3
80,3
106,3
31,0
56,9
82,9
109,0
33,6
59,5
85,5
111,6
36,2
62,1
88,1
114,2
38,8
64,7
90,7
116,8
1,05
129,8
132,4
135,0
137,6
140,3
142,9
1,06
1,07
1,08
1,09
155,9
182,1
208,4
234,7
158,6
184,8
211,0
237,3
161,2
187,4
213,6
239,9
163,8
190,0
216,2
242,5
166,4
192,6
218,9
245,2
169,0
195,2
221,5
247,8
1,10
261,0
263,6
266,3
268,9
271,5
274,2
1,11
1,12
1,13
1,14
287,4
313,9
340,4
366,9
290,0
316,5
343,0
369,6
292,7
319,2
345,7
372,3
295,3
321,8
348,3
375,0
298,0
324,5
351,0
377,6
300,6
327,1
353,7
380,3
1,15
393,6
396,2
398,9
401,6
404,3
406,9
1,16
1,17
1,18
1,19
420,3
447,1
473,9
500,9
423,0
449,8
476,6
503,5
425,7
452,4
479,3
506,2
428,3
455,2
482,0
508,9
431,0
457,8
484,7
511,6
433,7
460,5
487,4
514,3
1,20
527,8
-
-
-
-
-
M
TABLA 6. I
(Continuación)
Densidad
con dos
decimales
Tercer decimal de la densidad
6
7
8
9
Gramos de extracto por litro
1,00
15,4
18,0
20,6
23,2
1,01
1,02
1,03
1,04
41,3
67,3
93,3
119,4
43,9
69,9
95,9
122,0
46,5
72,5
98,5
124,6
49,1
75,1
101,1
127,2
1,05
145,5
148,1
150,7
153,3
1,06
1,07
1,08
1,09
171,6
197,8
224,1
250,4
174,3
200,5
226,8
253,1
176,9
203,1
229,4
255,7
179,5
205,8
232,0
258,4
1,10
276,8
279,5
282,1
284,8
1,11
1,12
1,13
1,14
303,3
329,8
356,3
382,9
305,9
332,4
359,0
385,6
308,6
335,1
361,6
388,3
311,2
337,8
364,3
390,9
1,15
409,6
412,3
415,0
417,6
1,16
1,17
1,18
1,19
436,4
463,2
490,1
517,0
439,0
465,9
492,8
519,7
441,7
468,6
495,5
522,4
444,4
471,3
498,2
525,1
1,20
-
-
-
-
TABLA INTERCALAR
4º decimal
de la densidad
Extracto g/l
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,3
0,5
0,8
1,0
1,3
1,6
1,8
2,1
2,3
33
7 (a). AZUCARES REDUCTORES
(Defecación plúmbica)
(Provisional)
7(a).1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reductoras distintas de los azúcares por defecación con
plomo acetato neutro, y valoración basada en la
acción reductora sobre solución cupro-alcalina.
Aplicable a vinos blancos y tintos de color no muy
intenso.
7(a).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de reflujo.
7(a).2.2. Filtro de vidrio G3 con capa fina de
amianto de fibra fina y lavado con agua hirviendo.
7(a).2.3. Kitasatos de 500 ml con frasco de
seguridad intermedio.
7(a).3. Reactivos.
131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
121212 Calcio Carbonato precipitado PA
131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS
121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA
121360 Hierro III Sulfato x-hidrato PA
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato
PA-ACS-ISO
181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l
(0,1N) SV
(o preparar con 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO)
131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO
182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS
34
7(a).3.1. Solución de Plomo II Acetato (aproximadamente saturada). Añadir a 250 g de Plomo II
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS
caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolución completa.
7(a). 3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
7(a).3.3. Calcio Carbonato precipitado PA
7(a).3.4. Solución Cúprica A. Mezclar 40 g de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO con 2 ml
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua
PA-ACS hasta 1 l.
7(a).3.5. Solución Tartrato-Alcalina B. Mezclar
200 g de Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACSISO con 150 g de Sodio Hidróxido lentejas 97%
PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta 1 l.
7(a).3.6. Solución de Hierro III C. Mezclar 50 g
de Hierro III Sulfato x-hidrato PA con 20 g de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua PA-
ACS hasta 1.000 ml. Comprobar esta solución
poniendo en un vaso de vidrio 30 ml de solución
C, 100 ml de Agua PA-ACS y una gota de Hierro
II-1, 10 Fenantrolina. La coloración amarillo-verdosa de esta mezcla debe virar a verde puro con
una sola gota de Potasio Permanganato 0,02
mol/l (0,1N) SV. En caso contrario, añadir Potasio
Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV a la solución
hasta conseguir el viraje descrito. Generalmente
es necesario añadir 1-3 ml de Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV por l de solución C.
7(a).3.7. Solución de Hierro II-1,10 Fenantrolina. Mezclar 0,695 g de Hierro II Sulfato p2-hidrato PA , 100 ml de Agua PA-ACS y 1,485 g de
1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS.
7(a).3.8. Potasio Permanganato 0,02 mol/l
(0,1N) SV. En su defecto preparar disolviendo 3,16 g
de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en Agua
PA-ACS hasta 1 l. Comprobar esta solución por
valoración con una solución de di-Sodio Oxalato
PA-ACS
7(a).4.1. Vinos secos.- Llevar 100 ml de vino a
un matraz aforado de 125 ml, añadir (V-0,5) ml de
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volumen de solución N/10 utilizada para valorar la
acidez total de 10 ml de vino, como en 20.4. Añadir agitando 5 ml de solución saturada de Plomo
II Acetato y 1g de Calcio Carbonato precipitado
PA, agitar varias veces y dejar sedimentar por lo
menos 15 minutos, enrasar con Agua PA-ACS,
añadir 0,6 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.
7(a).4.2. Vinos dulces.- En un matraz aforado
de 100 ml colocar un volumen de vino variable
según su riqueza en azúcar. Para vinos dulces con
masa volúmica comprendida entre 1,005 y 1,038,
tomar 20 ml de líquido a analizar, diluido al 20%.
Para vinos abocados con masa volúmica entre
0,997 y 1,006, tomar 20 ml de vino no diluido.
Añadir 0,5 g. de Calcio Carbonato precipitado
PA, unos 60 ml de Agua PA-ACS y cantidad (0,52,0 ml) de solución saturada de Plomo II Acetato
hasta el límite del enturbiamiento, agitar y dejar
reposar durante 15 minutos por lo menos, agitando de cuando en cuando. Enrasar, añadir
0,2 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.
Un ml del filtrado corresponde a 0,04 ml de
vino dulce y 0,20 ml de vino abocado.
En el Erlenmeyer de 300 ml, poner 20 ml de
solución Cúprica A, 20 ml de solución TartratoAlcalina B, 20 ml de solución azucarada conteniendo de 10 a 100 mg de azúcar reductor. Hacer
hervir con reflujo (o con la boca del matraz tapada
con un pequeño embudo) durante 3 minutos,
enfriar inmediatamente bajo una corriente de
Agua PA-ACS hasta refrigeración completa, dejar
posar el Cobre I Oxido (inclinando el Erlenmeyer
en un cristalizador con algodón y descansando el
M
cuello en el borde), filtrar después por el filtro G3
con la capa de amianto, ayudando la filtración con
la trompa de vacío. Tener la precaución de que, en
lo posible, haya una capa de líquido sobre el precipitado adherido al fondo, tanto en el filtro como
en el Erlenmeyer, para evitar que se oxide. Lavar
el precipitado del Erlenmeyer con Agua PA-ACS
hirviendo y verter en el filtro, repitiendo tres veces
la operación, agitar cada vez con precacución de
operar rápidamente para no dejar al descubierto
el precipitado de Cobre I Oxido. Cambiar el Kitasato y proceder a la disolución del Cobre I Oxido,
añadiendo primero al Erlenmeyer unos 10 ml de
solución C de Hierro III Sulfato, que disuelve rápidamente el precipitado y verter la solución en el filtro. Disolver el precipitado que queda en el filtro,
agitando con varilla de vidrio para facilitar la disolución. Repetir tres veces estas adiciones y lavar
Erlenmeyer y filtro cinco veces con unos 20 ml de
Agua PA-ACS fría cada vez.
Valorar el Hierro II Sulfato formado, que se
encuentra en el líquido del Kitasato, con Potasio
Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV, añadiendo
previamente una gota de solución de Hierro II1,10-Fenantrolina. Dar por terminada la valoración
cuando el color pase de verde-naranja a verde
franco.
7(a).5. Cálculo.
La cantidad de azúcar contenida en la solución
azucarada utilizada se obtiene en la tabla 7(a).I.
d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 8-10, 1969.
7(a).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, págs.
170-171, 1951.
TABLA 7 (a). I
KMn04
N/10
ml
Azúcar
invertido
mg
KMn04
N/10
ml
Azúcar
invertido
mg
KMn04
N/10
ml
Azúcar
invertido
mg
4,0
4,2
4,4
4,6
4,8
5,0
5,2
5,4
5,6
5,8
6,0
6,2
6,4
6,6
6,8
7,0
7,2
7,4
7,6
7,8
8,0
8,2
8,4
8,6
8,8
9,0
9,2
9,4
9,6
9,8
10,0
10,2
10,4
10,6
10,8
11,0
11,2
11,4
11,6
11,8
12,4
13,0
13,6
14,3
14,9
15,5
16,2
16,8
17,5
18,1
18,8
19,4
20,1
20,7
21,4
22,0
22,7
23,4
24,1
24,7
25,5
26,1
26,8
27,5
28,1
28,8
29,5
30,1
30,8
31,5
32,2
32,9
33,6
34,3
35,0
35,6
36,4
37,0
37,7
38,4
12,0
12,2
12,4
12,6
12,8
13,0
13,2
13,4
13,6
13,8
14,0
14,2
14,4
14,6
14,8
15,0
15,2
15,4
15,6
15,8
16,0
16,2
16,4
16,6
16,8
17,0
17,2
17,4
17,6
17,8
18,0
18,2
18,4
18,6
18,8
19,0
19,2
19,4
19,6
19,8
39,1
39,7
40,5
41,2
42,0
42,6
43,3
44,1
44,7
45,5
46,3
47,0
47,6
48,4
49,1
49,8
50,5
51,3
52,1
52,7
53,5
54,2
55,0
55,7
56,4
57,2
57,9
58,7
59,4
60,1
61,0
61,6
62,4
63,2
64,0
64,8
65,4
66,2
67,1
67,8
20,0
20,2
20,4
20,6
20,8
21,0
21,2
21,4
21,6
21,8
22,0
22,2
22,4
22,6
22,8
23,0
23,2
23,4
23,6
23,8
24,0
24,2
24,4
24,6
24,8
25,0
25,2
25,4
25,6
25,8
26,0
26,2
26,4
26,6
26,8
27,0
27,2
27,4
27,6
27,8
68,7
69,3
70,1
70,9
71,6
72,4
73,2
74,1
74,9
75,6
76,4
77,2
78,0
78,7
79,5
80,3
81,1
81,9
82,7
83,5
84,4
85,2
86,0
86,7
87,5
88,4
89,2
90,0
90,9
91,6
92,5
93,3
94,1
95,0
95,8
96,6
97,3
98,2
99,1
99,9
35
7(b). AZUCARES REDUCTORES
(Defecación mercúrica)
(Provisional)
7(b).1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reductoras distintas de los azúcares por defecación con
mercurio II acetato, y valoración por la acción
reductora de los azúcares sobre la solución
cupro-alcalina. Aplicable a vinos jóvenes, de color
intenso y ricos en azúcar, o cuando se va a realizar una valoración polarimétrica. Este método
proporciona la menor pérdida de azúcares reductores.
7(b).2.1. Aparato generador de ácido sulfhídrico. Filtrar el gas producido por la acción del ácido
clorhídrico diluido sobre el hierro II sulfuro por
paso a través de lana de vidrio y lavado en un
frasco lavador con agua.
7(b).2.2. Dispositivo para eliminar el exceso de
ácido sulfhídrico. Eliminar el ácido sulfhídrico en
exceso después de la precipitación del exceso de
mercurio, mediante aspiración conectada al tubo
lateral de un Kitasato, en el que se encuentra el
líquido a tratar. Tapar el matraz con un tapón atravesado por un tubo que se sumerge en el líquido.
Humedecer el aire aspirado que entra en el tubo
por borboteo en un matraz de un litro lleno hasta
la mitad de agua.
36
7(b).3. Reactivos.
131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
171321 1,10 -Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS
131426 Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS
(0,1N) SV
(o preparar con 131527 Potasio Permanganato
PA-ACS-ISO
PA-ACS-ISO
PA-ACS-ISO
181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS
141783 Zinc metal, polvo PRS
7(b).3.1. Solución de Mercurio II. Mezclar 240 g
de Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS con 240 ml
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y añadir
Agua PA-ACS hasta 1 litro. Hervir hasta disolución
completa, enfriar y añadir Agua PA-ACS hasta 1
litro.
7(b).3.2. Solución de Sodio Hidróxido 4N aproximadamente. Tomar Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N)
SV y diluir convenientemente. Esta solución debe
poder neutralizar exactamente un volumen igual al
suyo, de la solución de Mercurio II en presencia de
Fenolftaleína PA-ACS. Se debe comprobar esta
correspondencia antes de su empleo, en particular si se observa un depósito en la solución de
Mercurio II y si es necesario diluir la solución sódica.
7(b).3.3. Zinc metal, polvo PRS. Para eliminar
el exceso de Mercurio.
7(b).3 (4,5,6,7,y 8). Como 7 (a). 3 (4,5,6,7 y 8).
7(b).4.1. Vinos secos y dulces, en los que se
propone determinar el azúcar y la desviación polarimétrica. Colocar 100 ml de vino en una cápsula
de 10-12 cm de diámetro y adicionar (V-0,5) ml de
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volumen de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
empleado para valorar la acidez total de 10 ml de
vino, como en 20.4. Evaporar en baño de agua
hirviendo con corriente de aire caliente sobre la
superficie del líquido, hasta reducir el volumen a
50 ml, aproximadamente. Llevar a un matraz de
100 ml, lavar tres veces la cápsula con Agua PAACS, añadir 5 ml de solución de Mercurio II y, agitando, 5 ml de solución de Sodio Hidróxido que
se corresponde, volumen a volumen, con la de
Mercurio II (solución de Sodio Hidróxido 4N aproximadamente), dejar reaccionar 5 minutos por lo
menos; añadir 2 ml de solución de Mercurio II
Acetato y enrasar a 100 ml. Filtrar y recoger el filtrado en un Kitasato de 500 ml.
Tratar el filtrado con una corriente de Acido
Sulfhídrico para precipitar el Mercurio en forma de
Sulfuro negro (este tratamiento puede detenerse
cuando el precipitado tome color negro). Después
se hace barbotar aire (previamente saturado de
vapor de agua) a través del líquido, hasta que
haya perdido todo su olor a Acido Sulfhídrico
(5-10 minutos) y se filtra. Un ml del filtrado corresponde a 1 ml de vino. Este líquido se emplea sin
dilución cuando se trata de vino seco o con unos
5 g/l de azúcar.
Con vino más rico en azúcar conviene diluir
después del examen polarimétrico y antes del
análisis químico.
7(b).4.2. Vinos secos y dulces en los que solamente se va a realizar el análisis del azúcar por el
método químico y no por polarografía. Tomar
20 ml de vino sin diluir o diluido según norma
anterior, añadir 20 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de
solución de Mercurio II Acetato y añadir, agitando,
1 ml de la solución sódica.
Dejar actuar 5 minutos por lo menos, añadir
M
posterior valoración basada en la acción reductora de los azúcares sobre una solución cupro-alcalina.
1 ml de solución de Mercurio II, enrasar con agua
y filtrar. Tratar con Acido Sulfhídrico y aire húmedo
barbotando en la forma antes expuesta, y filtrar.
Continuar como en 7(a). 4 después de la defecación.
7(c).2. Material y aparatos.
7(c).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de reflujo.
7(c).2.2. Material necesario para volumetría.
7(c).2.3. Baño de agua.
En los análisis de azúcar por el método químico, para vinos no muy ricos en azúcar, en vez de
eliminar el exceso de mercurio por el ácido sulfhídrico, es más práctico eliminarlo mediante la adición de Zinc metal, polvo PRS, de la siguiente
forma: Añadir 1 g de Zinc metal, polvo PRS al
líquido filtrado, agitar durante 2 horas de cuando
en cuando, y filtrar.
7(c).3. Reactivos.
131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón soluble RE
131542 Potasio Yoduro PA-ISO
131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 6-8. 1969.
7(b).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, pág.
176, 1951.
7(c).3.1. Solución Cupro-Alcalina:
Disolver por separado: 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PAACS; 50 g de Acido Cítrico anhidro PA-ACS en
300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO en 300-400 ml de Agua
7(c). AZUCARES REDUCTORES
(Valoración)
7(c).1. Principio.
Eliminación de las materias reductoras distintas de los azúcares reductores por defecación, y
TABLA 7(c).I
Azúcares reductores, expresados en mg
Primera cifra decimal
ml sodio
tiosulfato
0,1N
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
0,0
3,2
6,4
9,7
13,0
16,4
19,8
23,2
26,6
30,0
33,4
36,8
40,3
43,8
47,3
50,8
54,3
58,0
61,8
65,5
69,4
73,3
77,2
81,2
85,2
89,2
0,3
3,5
6,7
10,0
13,3
16,7
20,1
23,5
26,9
30,3
33,7
37,2
40,7
44,2
47,7
51,2
54,7
58,4
62,2
65,9
69,8
73,7
77,6
81,6
85,6
89,6
0,6
3,8
7,1
10,4
13,7
17,1
20,5
23,9
27,3
30,7
34,1
37,5
41,0
44,5
48,0
51,5
55,0
58,8
62,5
66,3
70,2
74,1
78,0
82,0
86,0
90,0
1,0
4,2
7,4
10,7
14,0
17,4
20,8
24,2
27,6
31,0
34,4
37,9
41,4
44,9
48,4
51,9
55,4
59,1
62,9
66,7
70,6
74,5
78,4
82,4
86,4
90,4
1,3
4,5
7,7
11,0
14,4
17,8
21,2
24,6
28,0
31,3
34,8
38,2
41,7
45,2
48,7
52,2
55,8
59,5
63,3
67,1
71,0
74,9
78,8
82,8
86,8
90,8
1,6
4,8
8,1
11,4
14,7
18,1
21,5
24,9
28,3
31,7
35,1
38,6
42,1
45,6
49,1
52,6
56,2
59,9
63,7
67,5
71,4
75,3
79,2
83,2
87,2
91,2
1,9
5,1
8,4
11,7
15,0
18,4
21,8
25,2
28,6
32,0
35,4
38,9
42,4
45,9
49,4
52,9
56,5
60,3
64,0
67,8
71,7
75,6
79,6
83,6
87,6
91,6
2,2
5,4
8,7
12,0
15,4
18,8
22,2
25,6
29,0
32,4
35,8
39,3
42,8
46,3
49,8
53,3
56,9
60,7
64,4
68,2
72,1
76,0
80,0
84,0
88,0
92,0
2,6
5,7
9,0
12,3
15,7
19,1
22,5
25,9
29,3
32,7
36,1
39,6
43,1
46,6
50,1
53,6
57,3
61,0
64,8
68,6
72,5
76,4
80,4
84,4
88,4
92,4
2,9
6,1
9,4
12,7
16,1
19,5
22,9
26,3
29,7
33,0
36,5
40,0
43,5
47,0
50,5
54,0
57,6
61,4
65,1
69,0
72,9
76,8
80,8
84,8
88,8
92,8
37
PA-ACS caliente. Mezclar la solución de Acido
Cítrico y la de Sodio Carbonato. Añadir a continuación la solución de Cobre II Sulfato y completar el
volumen con Agua PA-ACS hasta un litro.
7(c).3.2. Solución de Potasio Yoduro al 30%.
Conservar en frasco topacio.
7(c).3.3. Solución de Acido Sulfúrico al 25% en
volumen.
7(c).3.4. Solución de Engrudo de Almidón de
5 g/l; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro PAACS-ISO para asegurar su conservación. Esta
solución debe ser mantenida diez minutos en ebullición en el momento de su preparación.
7(c).3.5. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.
7(c).4. Procedimiento.
Poner en el Erlenmeyer de 300 ml, 25 ml de la
solución Cupro-Alcalina y 25 ml del vino previamente defecado según 7(a) o 7(b). Este volumen
añadido no debe contener más de 60 mg de azúcares reductores.
Añadir algunos granos de Piedra Pómez gránulos QP, y llevar a ebullición, que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptando el Erlenmeyer al
refrigerante de reflujo y mantener exactamente
durante diez minutos la ebullición.
Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico
al 25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación, valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l
(0,1N) SV.
Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo
los 25 ml del vino previamente defecados por
igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se
ha indicado antes para la muestra.
7(c).5. Cálculo.
La cantidad de azúcar, expresada en azúcar
invertido contenida en la muestra analizada, se
obtiene en la tabla 7(c).1 en función del n’ - n de
ml de tiosulfato utilizado.
Siendo:
n = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N
utilizados en la valoración de la muestra.
n’ = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N
utilizados en la prueba en blanco.
Expresar el contenido del vino en g de azúcar
invertido por litro, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas en el curso de la defecación del
volumen de la muestra analizada.
38
7(c).6. Referencia.
7(c).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O.I.V. A 4e 29-31.
8. GLICEROL (Glicerina)
8.1. Principio.
La glicerina separada del vino, previa defecación, por extracción con acetona, se oxida con
ácido peryódico a formaldehído. La reacción
coloreada del formaldehído con la fluoroglucina
permite la determinación espectrofotométrica a
480 nm. La presencia de sorbitol y de manitol
son causa de error en la determinación de glicerina.
8.2. Material y aparatos.
8.2.1. Aparato de destilación. Compuesto de
las siguientes partes:
8.2.1.1. Matraz esférico de 500 ml.
8.2.1.2. Columna rectificadora.
8.2.1.3. Columna Widmer con camisa de aislamiento.
8.2.1.4. Termómetro con escala de 0-1107 C.
8.2.1.5. Refrigerante.
8.2.2. Frascos con tapón esmerilado de 1 l y de
60 ml.
8.2.3. Matraz aforado de 50 ml.
8.2.5. Matraces con tapón esmerilado de 60 ml.
8.2.6. Matraces aforados de 100 ml.
8.2.7. Kitasato o recipiente para vacío de 250 ml.
8.2.8. Filtro de porosidad número 4.
8.2.9. Filtros de papel Schleicher et Schull 1574
de 12,5 cm de diámetro o similar.
8.2.10 Espectrofotómetro con cubetas de 1 cm
de espesor interior.
8.3. Reactivos.
131007 Acetona PA-ACS-ISO
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV
131074 Agua PA-ACS
211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP
131188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO
Fluoroglucina 0,2%
141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
121523 Potasio meta-Peryodato PA
8.3.1. Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO.
8.3.2. Arena de Mar lavada, grano fino QP
8.3.3. Acetona PA-ACS-ISO
8.3.4. Sodio Hidróxido 1N SV.
8.3.5. Piedra Pómez gránulos QP
8.3.6. Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (IN) SV
8.3.7. Solución 0,05 M de Acido Peryódico. En un
matraz aforado de 1 l, introducir 11,5 g de Potasio
meta-Peryodato (KIO4) y aproximadamente unos 800
a 850 ml de Agua PA-ACS. Si la sal utilizada es
K2H3IO6 se pesan 15,2 g. Añadir en seguida 15 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y calentar muy ligeramen-
M
te en baño de agua hasta disolución completa. Enfriar
a la temperatura ordinaria y llenar hasta volumen.
8.3.8. Solución de Fluoroglucina 0,2%. Esta
solución debe ser renovada cada 15 días.
8.3.9. Solución madre de Glicerina. Diluir unos
20 ml de Glicerina PRS-CODEX a 100 ml. Determinar después la concentración exacta de esta solución midiendo su índice de refracción, y después,
por diluciones convenientes y sucesivas, llevar su
concentración a 0,1 g por l.
8.4. Procedimiento.
Extraer los polioles y valorar la glicerina.
8.4.1. Separación de polioles.- Introducir en un
matraz de 100 ml, de tapón esmerilado, 5 g de
Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO (no pulverizar), 5 g
de Arena de Mar lavada, grano fino QP y 10 ml de
vino, que se deja deslizar por la pared del matraz.
Si el vino contiene más de 120 g de azúcar por
litro, se opera sólo con 5 ml.
Agitar enérgicamente durante 30 segundos y
dejar en reposo, agitando de cuando en cuando.
Añadir después 50 ml de Acetona PA-ACS-ISO y
agitar otra vez durante 30 segundos. Llevar el
matraz a un termostato a 45ºC durante 5 minutos,
agitando enérgicamente cada minuto.
Filtrar la solución caliente por un crisol filtrante de
porosidad número 4 dispuesto sobre Kitasato de
vidrio en el que se han puesto 40 ml de Agua PAACS y 5 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
Lavar el residuo tres veces con Acetona PA-ACSISO, removiendo el precipitado con una espátula.
Escurrir después el precipitado lo más posible. Trasvasar después este precipitado al matraz del aparato destilador, enjuagando bien el Kitasato con Acetona PA-ACS-ISO.
Destilar la Acetona con llama fuerte, hasta que el
termómetro marque 100ºC, y destilar después
20 ml más de Agua PA-ACS.
Añadir al residuo de la destilación aún caliente,
5 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV, dejar
enfriar y trasvasar a matraz aforado de 50 ml. Se
enrasa con las aguas de lavado del matraz, agitar y
filtrar por filtro de papel.
8.4.2. Valoración de la glicerina.- Esta operación
hay que realizarla antes de las 2 o 3 horas siguientes a la separación de los polioles.
Llevar una alícuota de 5 ml del filtrado anterior a
matraz aforado de 100 ml y enrasar con Agua PAACS.
Introducir 20 ml de esta dilución en un matraz de
60 ml con tapón esmerilado. Añadir 10 ml de solución de Acido Peryódico 0,05 M. Agitar y dejar en
reposo 5 minutos.
Añadir después sucesiva y rápidamente, deslizando a lo largo de la pared, las siguientes soluciones: 10 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y
10 ml de solución de Fluoroglucina. Agitar después
de la adición de cada una de las soluciones.
Llevar rápidamente la mezcla de soluciones a la
cubeta del espectrofotómetro y medir la absorbancia a 480 nm en un minuto, porque la coloración
violeta que se obtiene es muy fugaz.
Ajustar el espectrofotómetro de forma que la
solución obtenida, al sustituir en las operaciones
anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PAACS, dé una densidad óptica 0.
8.4.3. Obtención de la curva patrón.
Diluir 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ml de solución
inicial de glicerina de 0,1 g por l, a 200 ml.
Tomar después 20 ml de cada una de estas diluciones y 20 ml de la solución inicial, y llevar a fras-
TABLA 8.I
FACTORES DE CORRECCION PARA EL CONTENIDO EN GLICERINA
DE VINOS QUE CONTENGAN AZUCARES
Contenido en
azúcar g/l
Factor
Contenido en
azúcar g/l
Factor
5
10
20
30
40
50
60
70
1,020
1,030
1,045
1,060
1,073
1,086
1,099
1,111
80
90
100
110
120
130
140
150
1,123
1,134
1,145
1,156
1,168
1,180
1,191
1,202
39
cos de 60 ml con tapón esmerilado y tratar como en
8.4.2 para los 20 ml de la dilución del filtrado. Medir
después las densidades ópticas correspondientes,
ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.
Esta escala corresponde a riquezas en glicerina
en 0,2 ml de vino, que varían de 0 a 2 mg
8.5. Cálculo.
Calcular el contenido en glicerina expresado en g/l.
P
Glicerina = 50 —— f g/l
V
P = peso en g de glicerina obtenido de la curva
patrón.
V = volumen en ml de la muestra de vino.
f = 1 para contenido de azúcar en vinos inferiores a
5 g/l.
f = valor del factor de corrección según la tabla 8.I
para contenidos de azúcar en vinos superiores a
5 g/l.
8.6. Referencia.
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9, 1969.
9. 2,3-BUTANODIOL
9.1. Principio.
El 2,3-butanodiol separado del vino, previa defecación, por extracción con acetona, se oxida con
ácido peryódico a acetaldehído. La reacción coloreada del acetaldehído con el sodio nitroprusiato y
la piperidina permite la determinación espectrofotométrica a 570 nm.
9.2. (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10), como 8.2. (1,
2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10).
40
9.3. Reactivos.
Acido Peryodico 0,05 M
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV
131074 Agua PA-ACS
211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP
121188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA
124551 2,3-Butanodiol PA
211456 Piedra pómez granulos QP
162377 Piperidina PS
121523 Potasio meta-Peryodato PA
131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS
181691 Sodio Hidroxido 1 mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA
9.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7), como 8.3. (1; 2; 3; 4; 5;
6 y 7).
9.3.8. Solución de Sodio Acetato al 27%.
9.3.9. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.
Conservar en la oscuridad y renovar semanalmente.
9.3.10. Solución de Piperidina al 10%. Renovar
cada 15 días.
9.3.11. Solución madre de 2,3-Butanodiol. Utilizar 2,3-Butanodiol rectificado, desechando el primero y el último tercio. Pesar con exactitud 2 g y
disolverlos en 1.000 ml. Diluir esta solución hasta
1/10.
9.4. Procedimiento.
Extraer los polioles y valorar el 2,3-Butanodiol.
9.4.1. Separación de polioles. Como en 8.4.1.
9.4.2. Valoración del 2,3-Butanodiol.
Esta operación hay que realizarla antes de las 2
o 3 horas siguientes a la separación de los polioles.
Llevar a un matraz de 60 ml con tapón esmerilado 5 ml del filtrado, 5 ml de solución de Sodio Acetato al 27% y 10 ml de solución de Acido Peryódico
0,05M.
Agitar y dejar 2 minutos en contacto. Añadir
deslizando por las paredes del frasco: 5 ml de
solución de Sodio Nitroprusiato al 2% y 5 ml de la
solución de Piperidina al 10%. Agitar después de
la adición de cada una de las soluciones. Llevar
inmediatamente la solución a la cubeta de 1 cm
y hacer la lectura en el espectrofotómetro a
570 nm. La coloración violeta que se obtiene con
la reacción alcanza el máximo de intensidad a los
30-40 segundos y después disminuye rápidamente.
Ajustar el espectrofotómetro de forma que la
solución obtenida al sustituir en las operaciones
anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PAACS dé una densidad óptica 0.
9.4.3. Obtención de la curva patrón.
Diluir 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ml de la solución inicial hasta 100 ml. Tomar 5 ml de cada una de
estas diluciones y tratarlas como en 9.4.2 para los
5 ml del filtrado inicial. Determinar inmediatamente
las densidades ópticas máximas correspondientes,
ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.
Esta curva proporciona valores de contenido en
2,3-Butanodiol en 5 ml de vino que varían de 0 a
0,7 mg.
9.5. Cálculo.
9.5.1. Vinos con contenido en azúcar inferior a
5 g/l. La cantidad de 2,3-butanodiol en g/l de vino
es igual a la cantidad de 2,3-butanodiol en mg contenido en 5 ml del filtrado.
9.5.2. Vinos cuyo contenido en azúcar está
comprendido entre 5 y 120 g/l.
La cantidad calculada según 9.5.1 se corrige
sumando o restando el factor encontrado en la tabla
9.I.
9.5.3. Vinos con contenidos en azúcar superiores a 120 g/l.- (La defecación se realiza sobre 5 ml
de vino). La cantidad calculada según 9.5.1 se corri-
M
ge como en 9.5.2, utilizando sólo la mitad del contenido en azúcar. El resultado multiplicado por 2 es
el contenido en 2,3-butanodiol en g/l de vino.
9.6. Referencia.
9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9. 1969.
TABLA 9.I
Correcciones a realizar para expresar el contenido en
2,3-butanodiol de vinos con azúcares
Butanodiol
g/l
0- 0,2
0,3
0,4
Contenido en azúcar, g/l
10
20
30
40
50
60
70
80
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,03
0,5
-0,03
-0,03
-0,03
-0,03
-0,02
-0,02
-0,02
-0,02
0,6
0,7
0,8
0,9
-0,03
-0,03
-0,03
-0,02
-0,03
-0,02
-0,02
-0,02
-0,02
-0,02
-0,02
-0,01
-0,02
-0,02
-0,01
-0,01
-0,02
-0,01
-0,01
0,00
-0,02
-0,01
-0,01
0,00
-0,02
-0,01
0,00
+0,01
-0,02
-0,01
0,00
+0,01
1,0
-0,02
-0,01
0,00
0,00
+0,01
+0,01
+0,01
+0,02
1,1
1,2
1,3
1,4
-0,01
-0,01
-0,01
0,00
-0,01
-0,01
0,00
+0,01
0,00
0,00
+0,01
+0,02
0,00
+0,01
+0,02
+0,03
+0,01
+0,02
+0,03
+0,04
+0,02
+0,03
+0,04
+0,05
+0,02
+0,03
+0,05
+0,06
+0,03
+0,04
+0,05
+0,07
1,5
0,00
+0,01
+0,02
+0,04
+0,05
+0,06
+0,07
+0,08
1,6
1,7
1,8
1,9
+0,01
+0,01
+0,02
+0,02
+0,02
+0,03
+0,03
+0,04
+0,03
+0,04
+0,05
+0,06
+0,05
+0,06
+0,07
+0,08
+0,06
+0,07
+0,09
+0,10
+0,07
+0,09
+0,10
+0,12
+0,09
+0,10
+0,12
+0,14
+0,10
+0,12
+0,13
+0,15
2,0
+0,02
+0,05
+0,07
+0,10
+0,12
+0,14
+0,15
+0,17
41
TABLA 9.I
Correcciones a realizar para expresar el contenido en
2,3-butanodiol de vinos con azúcares
Contenido en azúcar, g/l
Butanodiol
g/l
100
110
120
130
140
150
-0,035
-0,03
-0,03
-0,035
-0,03
-0,02
-0,035
-0,03
-0,02
-0,035
-0,03
-0,02
-0,035
-0,03
-0,02
-0,035
-0,03
-0,02
-0,035
-0,03
-0,02
0,5
-0,02
-0,02
-0,02
-0,01
-0,01
-0,02
-0,01
0,6
0,7
0,8
0,9
-0,01
-0,01
0,00
+0,01
-0,01
-0,01
0,00
+0,01
-0,01
0,00
0,00
+0,01
0,00
0,00
+0,01
+0,02
0,00
0,00
+0,01
+0,02
0,00
0,00
+0,01
+0,03
0,00
+0,01
+0,02
+0,03
1,0
+0,02
+0,03
+0,03
+0,03
+0,03
+0,04
+0,05
1,1
1,2
1,3
1,4
+0,04
+0,05
+0,06
+0,08
+0,04
+0,05
+0,07
+0,09
+0,04
+0,05
+0,07
+0,09
+0,05
+0,06
+0,08
+0,10
+0,05
+0,07
+0,09
+0,11
+0,06
+0,07
+0,09
+0,11
+0,07
+0,08
+0,10
+0,12
1,5
+0,09
+0,10
+0,11
+0,12
+0,13
+0,13
+0,14
1,6
1,7
1,8
1,9
+0,11
+0,13
+0,15
+0,17
+0,12
+0,14
+0,16
+0,18
+0,13
+0,15
+0,18
+0,20
+0,14
+0,16
+0,19
+0,21
+0,15
+0,17
+0,20
+0,23
+0,16
+0,18
+0,21
+0,24
+0 17
+0 19
+0,22
+0,25
2,0
+0,19
+0,20
+0,22
+0,24
+0,26
+0,27
+0,28
0 - 0,2
0,3
0,4
90
10(a). SACAROSA
(Método cualitativo colorimétrico)
42
10(a).1. Principio.
El vino se defeca por plomo acetato, magnesio y
potasio permanganato a pH = 8-9. Se trata el defecado a 100°C con difenilamina en medio clorhídrico
y acético. El producto de condensación obtenido en
presencia de sacarosa se extrae por cloroformo que
se colorea de azul.
10(a).2.1. Baño de agua con temperatura controlada.
10(a).3. Reactivos.
131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
121828 Difenilamina PA
121086
211276
131466
131527
131716
131252
Etanol absoluto PA
Magnesio Oxido QP
Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO
10(a).3.1. Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACSISO.
10(a).3.2. Magnesio Oxido QP.
10(a).3.3. Potasio Permanganato al 2%.
10(a).3.4. Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO.
10(a).3.5. Reactivo de Difenilamina. A 10 ml de
solución de Difenilamina PA al 10% en Etanol absoluto PA, añadir 20 ml de Acido Acético glacial PA-ACSISO y 70 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
M
Para comprobar la pureza de este reactivo añadir 2 ml de reactivo de Difenilamina y 2 ml de Agua
PA-ACS, calentar en baño de agua hirviendo durante 5 minutos. Enfriar la solución bruscamente por inmersión en agua fría y extraer con 1 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO, no
debiendo presentar el líquido extraído coloración
azul.
Disolver en 10 ml de Agua PA-ACS 100 a 200 mg
de Magnesio Oxido QP y unos 200 mg de Plomo II
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO.
Llevar al baño de agua que se mantiene a 90-95°C
durante 3 a 5 minutos. Añadir 2 ml del vino que
debe estar limpio y con una riqueza en azúcar inferior al 1%.
Diluir la muestra si la riqueza en azúcar es superior a la indicada como límite.
Comprobar si la dosis de Plomo II Acetato
3-hidrato PA-ACS-ISO es suficiente y no excesiva,
lo que disminuiría la sensibilidad de la reacción. Para
ello añadir gota a gota, al líquido que sobrenada,
una solución concentrada de Plomo II Acetato,
hasta que no se acuse enturbiamiento al caer la
gota sobre el líquido. Añadir entonces solución
saturada de Sodio Sulfato para eliminar el exceso
de Plomo.
Añadir 0,5 ml de la solución de Potasio Permanganato y mantener la mezcla en el baño de agua a
90-95° durante 10 minutos.
Enfriar bruscamente por inmersión en agua fría,
y filtrar.
Puede aparecer una débil coloración amarilla,
pero no influye en la reacción.
Poner en un tubo de ensayo 2 ml del líquido filtrado, añadir 2 ml del reactivo de Difenilamina; mantener en baño de agua hirviendo, durante 5 minutos
exactamente. Enfriar por inmersión en agua fría,
añadir 1 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO y observar la coloración que se
forma.
10(a).5. Expresión de los resultados.
Los vinos secos no adicionados con sacarosa
pueden dar una coloración gris-azulada muy ligera,
pero, en presencia de sacarosa, aparece una franca
coloración azul.
Los vinos ricos en azúcar dan una coloración
amarillo oro en ausencia de sacarosa, pero en presencia de ésta, la coloración es verde franco.
Los resultados son sensibles para riquezas de
sacarosa desde 0,2 mg.
10(a).6. Referencia.
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A-S, 1-2. 1969.
10(b). SACAROSA
(Método cuantitativo)
10(b).l. Principio.
La sacarosa se determina por la diferencia de los
poderes reductores antes y después de la hidrólisis
clorhídrica del líquido procedente de la defecación
del vino.
10(b).2. Reactivos.
131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
PA-ACS-ISO
10(b).2.1. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.
Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml
cada uno el mismo volumen del líquido de defecación, según las normas indicadas para el análisis de
azúcares. La defecación se realiza como en 7(b) con
eliminación previa del alcohol.
Añadir a cada matraz un volumen de Acido Clorhídrico 35% PA-ISO a razón de 0,3 ml por 10 ml de
líquido azucarado.
En uno de los matraces añadir inmediatamente
0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N (disolver Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS y
ajustar a la concentración indicada), por cada
10 ml de líquido azucarado procediendo a la valoración de los azúcares reductores.
Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizar a baño de agua hirviendo durante 2 minutos.
Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido 12N que al otro matraz y valorar.
10(b).4. Cálculo.
La diferencia entre las cantidades de azúcares
reductores encontrada en los resultados de estas
dos valoraciones, multiplicada por 0,95 da la riqueza
en sacarosa de la muestra en estudio.
Este resultado se expresa en g por l de vino,
teniendo presentes las diluciones efectuadas eventualmente en el curso de la defecación y del volumen
de la muestra de vino que se sometió a la defecación.
10(b).5. Referencia.
10(b).5.l. Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A5, 4, 1969.-80
11. CENIZAS
11.1. Principio.
Se denominan cenizas de un vino, al conjunto de
los productos de incineración del residuo de evaporación de un volumen conocido del vino, realizada
de manera que se puedan obtener todos los cationes (excepto amonio) en forma de carbonatos y
otras sales minerales anhidras.
43
11.2. Materiales y aparatos.
11.2.1. Horno eléctrico regulable.
11.2.2. Baño de agua y baño de arena.
11.2.3. Lámpara de infrarrojo.
11.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de
70 mm de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.
11.3. Procedimiento.
Colocar 20 ml de vino en una cápsula tarada en
balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con precaución en baño de agua, después de evaporar
hasta consistencia siruposa, continuar el calentamiento sobre baño de arena con moderación y
durante una media hora. Es conveniente ayudar a la
evaporación con la aplicación de rayos infrarrojos
hasta carbonización. Cuando ya no se desprendan
vapores, llevar la cápsula al horno eléctrico a 525°C
± 25° y con aireación continua.
Después de 5 minutos de carbonización completa, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y añadir 5 ml de agua que se evaporan en baño de agua,
y llevar de nuevo al horno a 525°C.
Si la combustión de las partes carbonosas no se
consigue en 15 minutos, volver a comenzar la operación de adición de agua, evaporación y recalcinación.
Cuando se trate de un vino rico en azúcares, se
recomienda adicionar unas gotas de aceite puro
vegetal al extracto, antes de comenzar la calcinación para impedir el desbordamiento de la masa del
contenido. La duración de la primera carbonización
deberá ser en este caso 15 minutos.
Después de enfriar en el desecador cápsula y
cenizas, se pesan.
11.4. Cálculo.
Calcular el contenido en cenizas expresado en g/l.
Cenizas = 50 P g/l
P = peso en g de las cenizas contenidas en 20 ml
de vino.
Dar los resultados con una aproximación de
0,03 g/l.
11.5. Referencias.
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A6, 1. 1969.
11.5.2. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”,
pág. 106. Ministerio de Agricultura, 1956.
12. ALCALINIDAD DE CENIZAS
44
12.1. Principio.
Se denomina alcalinidad total de cenizas la suma
de los cationes, diferentes del amonio, combinados
con los ácidos orgánicos del vino.
La valoración se funda en la volumetría con
ácido sulfúrico, valorando en retorno después de
disolver en el mismo y en caliente, las cenizas, y
empleando el anaranjado de metilo como indicador.
12.2.1. Baño de agua.
12.2.2. Pipeta de 10 ml.
12.2.3. Varilla de vidrio.
12.2.4. Bureta de valoraciones.
12.3. Reactivos.
181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV
171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE
181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV
12.3.1. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.
12.3.2. Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE.
12.3.3. Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV.
Añadir a las cenizas ya pesadas, 10 ml de Acido
Sulfúrico 0,05mol/l (0,1N) SV y llevar la cápsula a un
baño de agua hirviendo durante un cuarto de hora,
frotando varias veces el fondo de la cápsula con una
varilla de vidrio para activar la disolución de las partículas difíciles de disolver. Añadir en seguida dos
gotas de Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE y
valorar el exceso de Acido Sulfúrico con Sodio
Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV, hasta que el indicador
vire a amarillo.
12.5. Cálculo.
Calcular la alcalinidad de las cenizas expresadas
en meq/l o en g/l de potasio carbonato.
Alcalinidad de las cenizas = 5 (10 - V) meq/l
Alcalinidad de las cenizas = 0,345 (10 - V) g/l de
potasio carbonato.
V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N utilizados.
0,5 g por l en potasio carbonato.
12.6. Referencia.
13. FOSFATOS
13.1. Principio.
Oxidación del vino, evaporación e incineración.
Pre-cipitación del ácido fosfórico en ácido nítrico al
estado de amonio fosfomolibdato. Esta sal se
disuelve por acción de un exceso de sodio hidróxido 0,5N en presencia de formaldehído. Valoración
del exceso de sodio hidróxido por ácido clorhídrico
0,5N en presencia de fenolftaleína.
M
13.2.1. Cápsula de sílice de 70 mm de diámetro.
13.2.2. Baño de arena.
13.2.3. Horno de mufla.
13.2.4. Erlenmeyer de 500 ml.
13.2.5. Vasos de precipitados y elementos para
volumetría.
13.2.6. Agitador mecánico.
13.3. Reactivos.
181022 Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV
121737 Acido Nítrico 53% PA
131074 Agua PA-ACS
131134 Amonio Molibdato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
131135 Amonio Nitrato PA-ACS-ISO
171327 Fenolftaleína solución 1% RE
131328 Formaldehído 36,5-38% p/v estabilizado con metanol PA-ACS
13.3.1. Solución de Acido Nítrico al 25% (d
1,153). Añadir a 440 ml de Acido Nítrico 53% PA
Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
13.3.2. Solución de Amonio Nitrato. Añadir, a
340 g de Amonio Nitrato PA-ACS-ISO, Agua PAACS hasta 1.000 ml.
13.3.3. Solución de Amonio Molibdato. Añadir, a
30 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO,
13.3.4. Solución de lavado. 50 g de Amonio
Nitrato PA-ACS-ISO, 40 ml de Acido Nítrico al 25%
y Agua PA-ACS hasta 1 l.
Evaporar a sequedad 100 ml de vino en cápsula de cuarzo en sucesivas adiciones. Añadir después 4 ml de Acido Nítrico 53% PA y calentar progresivamente en el baño de arena y después en el
horno de mufla.
Añadir a las cenizas 2 ml de Acido Nítrico 53%
PA y evaporar a sequedad en el baño de agua para
insolubilizar la sílice. Añadir 10 ml de Acido Nítrico al
25%; remover y arrastrar las cenizas a un filtro; lavar
la cápsula y filtro con 5 ml del mismo ácido y después con 20-30 ml de Agua PA-ACS. Recoger el filtrado en un Erlenmeyer de unos 500 ml, adicionar
25 ml de solución de Amonio Nitrato de 340 g por l
y agitar.
Después añadir de una vez 80 ml de solución de
Amonio Molibdato 3% y agitar mecánicamente
durante 12 minutos a razón de 200 sacudidas por
minuto. Decantar y filtrar por papel. Lavar luego el
precipitado con 75 ml de líquido de lavado dos
veces. Cada lavado no debe durar más de 10 minutos. Lavar 8 veces más con Agua PA-ACS.
Colocar el filtro y el precipitado en un vaso con
50 ml de Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. Añadir 12,5 ml de Formaldehído 36,5-38% p/v, estabilizado con metanol PA-ACS neutralizado en presen-
cia de Fenolftaleína solución 1% RE, para disolver el
precipitado de Fosfomolibdato. Escurrir el filtro y
extender sobre la pared del vaso, por encima del
líquido de la solución. Valorar el exceso de sodio
hidróxido con Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV,
hasta decoloración de la Fenolftaleína, habiendo
sumergido al final nuevamente el filtro.
13.5. Cálculo.
Calcular el contenido en fosfatos expresado en
meq de ácido fosfórico (considerado como triácido),
o en g de P 0 por l de vino.
Fosfatos = 0,577 (50 - V) meq de ácido fosfórico.
Fosfatos = 0,01365 (50 - V) g de P205 por l de
vino.
V = volumen en ml de solución de ácido clorhídrico 0,5N.
0,01 g/l.
2
5
13.6. Referencia.
d’Analyse des Vins. 0. I. V. A16, 1-2 1969.
14. CALCIO
(Método complexométrico)
14.1. Principio.
Valoración del calcio por complexometría sobre la
solución nítrica o clorhídrica de las cenizas del vino.
14.2. (1, 2, 3 y 4) como 11.2. (1, 2, 3 y 4).
14.2.5. Matraces Erlenmeyer de 1.000 ml.
14.2.6. Matraces Erlenmeyer de 100 ml.
14.3. Reactivos.
182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV (Acido
EDTA Na 2) (o preparar con 131669
Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO)
Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Naftalensulfónico, Sal Sódica
(CALCON)
131074 Agua PA-ACS
182241 Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV
(o preparar con 121212 Calcio Carbonato precipitado PA)
131687 Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO
14.3.1. Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV.
14.3.2. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto añadir
a 18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACS
hasta 1.000 ml y disolver.
45
14.3.3. Lejía de Sodio Hidróxido al 40%. Añadir
a 40 g de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO
Agua PA-ACS hasta 100 ml.
14.3.4. Indicador de Calcon. Mezclar 1 g de
Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Naftalensulfónico, Sal Sódica con 100 g de Sodio Cloruro PA.
14.3.5. Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. En
su defecto disolver 5,05 g de Calcio Carbonato precipitado PA en la cantidad necesaria de Acido Clorhídrico diluido y completar a 1 litro. Valorar esta
solución por medio de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en presencia de Calcon en la forma que luego se describe.
Evaporar a sequedad en baño de agua hirviendo
50 ml de vino colocados en cápsulas preferentemente de platino. Incinerar el residuo como en 11.
Disolver las cenizas en 8 ml de Acido Clorhídrico
0,25 mol/l (0,25N) SV, llevar a un matraz aforado de
50 ml; lavar varias veces la cápsula con Agua
PA-ACS vertiéndola en el matraz. Enrasar y agitar.
Tomar 20 ml de la solución de cenizas y calentar
hasta ebullición, en un Erlenmeyer de unos 100 ml.
Dejar enfriar y después añadir 0,5 ml de solución de
Sodio Hidróxido al 40%, 10 ml de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
y 100 mg aproximadamente de indicador Calcon.
Si el color de la mezcla es rojo-vinoso, añadir
Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05
mol/l (0,05M) SV en exceso hasta aparición de color
azul-violeta.
Evitar una cantidad de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en exceso relativamente grande, que enmascara el punto
de viraje.
Valorar el exceso de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV añadiendo Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. El indicador Calcon virará de azul violeta a rojo-vinoso al final
de la reacción.
14.5. Cálculo.
Calcular el contenido en calcio como iones Ca
en meq/l, o como iones Ca expresados en g/l.
Calcio = (10 - V) 5 meq/l de ion Ca.
Calcio = (10 - V) 0,1 g/l de ion Ca.
46
V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M.
14.6. Referencias.
14.6.1. Castino, M. “Determinazione complessometrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista
de Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.
15. MAGNESIO
15.1. Principio.
Valoración del magnesio por complexometría
sobre la solución nítrica o clorhídrica de las cenizas
del vino.
15.2. (1, 2, 3 y 4), como 11.2. (1, 2, 3 y 4).
15.2. (5 y 6), como en 14.2. (5 y 6).
15.3. Reactivos.
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
181397 Magnesio Cloruro 0,l mol/l (0,1M) SV
(diluir o preparar como se indica en 15.3.4)
211276 Magnesio Oxido QP (*)
171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS
171730 Solución Tampón pH 10 RE
(o preparar con 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO,
121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA y 131074 Agua
PA-ACS)
15.3.1 Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. Como en 14.3.2.
15.3.2. Solución Tampón pH 10 RE. En su
defecto preparar disolviendo 50 g de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en 350 g de Amoníaco 25% (en
NH3) PA y añadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
15.3.3. Indicador Negro de Eriocromo T. Mezclar
1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS,
con 100 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.
15.3.4. Solución de Magnesio Cloruro 0,05M. En
un matraz aforado de 1 l introducir 500 ml de Magnesio Cloruro 0,1mol/l (0,1M) SV, diluir y enrasar con
Agua PA-ACS o preparar disolviendo 2,25 g de
Magnesio Oxido QP en la cantidad necesaria de
Acido Clorhídrico diluido y llevar después el volumen
a 1 litro. Valorar esta solución con Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
(15.3.1) en presencia de Negro de Eriocromo T
(15.3.3) como se indica a continuación.
Tomar 20 ml de la solución de cenizas antes preparada, llevar a ebullición en un Erlenmeyer de unos
100 ml, dejar enfriar y añadir 10 ml de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M)
SV, 5 ml de Solución Tampón pH 10 RE, 50 mg
aproximadamente de indicador Negro de Eriocromo T.
Valorar después el exceso de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
M
con la solución de Magnesio Cloruro 0,05M. El indicador vira del azul al rojo vinoso.
15.5. Cálculo.
Calcular el contenido en magnesio expresado en
meq/l o en g/l de iones Mg.
Magnesio = (V - V’) x 5 meq/l
Magnesio = (V - V’) x 0,06075 g/l de iones Mg.
V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M utilizado para valorar el exceso de ácido EDTA Na2
0,05M en la determinación del calcio (14.4).
V’ = volumen en ml de solución de magnesio
cloruro 0,05M.
(*) El magnesio óxido del comercio está generalmente carbonatado, aun puro, por lo que debe calcinarse. Tomar 5 g en cápsulas de platino; llevar al
rojo durante más de 30 minutos. Dejar enfriar y
pesar los 2,25 g.
15.6. Referencias.
15.6.1. Castino, M. “Determinazione complessometrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista di
Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A26, 2-3, 1969.
16. HIERRO
(Método colorimétrico del
sulfocianuro)
16.1. Principio.
El hierro oxidado por el agua oxigenada se combina con el ion sulfociánico en medio clorhídrico. El
color rojo se compara con escala patrón o se mide
por espectrofotometría. Para los vinos tintos, el hierro sulfocianuro se extrae con éter. Para valorar
solamente el hierro trivalente, se suprime la adición
del agua oxigenada.
16.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro para
lectura a 508 nm de longitud de onda.
16.2.2. Tubos de 200 x 20 mm.
16.2.3. Bola de decantación de 50 ml.
16.3. Reactivos.
131036 Acido Nitrico 60% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO
131365 Amonio Hierro lll Sulfato 12-hidrato
PA-ACS-ISO
121085 Etanol 96% v/v PA
132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BTH PA-ACS-ISO
141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS
211934 Hierro metal, granulado fino QP
121534 Potasio Tiocianato PA
141699 Sodio metal, barras PRS
(o 121237 Carbón Activo polvo PA o
142367 Manganeso IV Oxido 85%
precipitado PRS)
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA
16.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.
16.3.2. Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
Usese Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.) PRS y
diluir convenientemente.
16.3.3. Eter Dietílico. Destilar el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO antes de su
empleo o bien mantenerlo en presencia de Sodio metal,
barras PRS o Carbón Activo polvo PA o Manganeso IV
Oxido 85% precipitado PRS.
16.3.4. Solución de Potasio Tiocianato. Añadir a
200 g de Potasio Tiocianato PA Agua PA-ACS hasta
1litro, y disolver.
16.3.5. Solución de Hierro III Cloruro de 0,1 g de
Hierro metal, granulado fino QP por litro. Disolver 0,1 g
de Hierro metal, granulado fino QP en 10 ml de Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y 30 ml de Agua PA-ACS.
Añadir 1 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO y hervir. Enfriar
y añadir Agua PA-ACS hasta 1 litro.
También puede prepararse la siguiente solución de
Hierro. Disolver 0,863 g de Amonio Hierro III Sulfato
12-hidrato PA-ACS-ISO, 0,863 g de Amonio Cloruro PAACS-ISO (*) y 10 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACSISO en 100 ml de Agua PA-ACS y diluir hasta 1.000 ml.
(*). En el original indica “amonio”, entendemos se
trata de Amonio Cloruro.
16.3.6. Etanol de 20º. Usese Etanol 96% v/v PA y
diluir convenientemente.
16.4.1. Determinación del hierro total. (Férrico +
ferroso).
16.4.1.1. Vinos blancos o poco coloreados. Colocar
10 ml de vino en un tubo de 200 x 20 mm, añadir 1 ml
de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, 5 gotas de
Hidrógeno Peróxido y 1 ml de solucion de Potasio Tiocianato.
A la aparición del color añadir 20 ml de Eter Dietílico, agitar para mezclar las dos fases sin emulsionar y
dejar decantar 5 minutos. Determinar la absorbancia del
líquido decantado en espectrofotómetro colorímetro a
508 nm. Ajustar el espectrofotómetro a cero, utilizando
como prueba en blanco 10 ml de vino acidulados con
1 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluidos
con 1 ml de Agua PA-ACS. De esta forma se compen-
47
sa la influencia del color del vino y de la posible aparición de color o del reavivado del vino, ambas coloraciones debidas a la acidez añadida al vino.
Obtener una curva, procediendo en la forma
anteriormente descrita y utilizando en vez de 10 ml
de vino mezclas de 5 ml de alcohol de 20° y porciones de 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 ml, completadas
hasta 5 ml con Agua PA-ACS. Estas mezclas contendrán, respectivamente, 5,10, 15, 20 y 25 mg/l de
hierro.
16.4.1.2. Vinos tintos.- Como en 16.4.1.1, pero
utilizando sólo 0,2 ml de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO. El exceso de acidez dificulta la extracción
del hierro sulfocianuro por el éter.
16.4.2. Determinación del hierro trivalente.
Como en 16.4.1, pero sin adicionar Hidrógeno
Peróxido.
16.5. Cálculo.
Calcular el contenido en hierro expresado en
mg/l por comparación de la absorbancia con la
curva patrón.
16.6. Observaciones.
En lugar del éter algunos autores (16.7.2) recomiendan el empleo del etilo acetato, que no tiene el
inconveniente de la posible presencia de peróxidos;
sin embargo, en algunos vinos de intenso color de
nuestro país se ha observado extracción de parte
de la materia colorante con el etilo acetato, lo que
no sucede con el éter.
16.7. Referencias.
16.7.1. Ribereau-Gayon, J., y Peynaud, E.
“Analyse et Controle des Vins”, pág. 194, 1958.
16.7.2. Jaulmes, P.; Brun, S.; Tour, C.; Cabanis,
J.C. “Dosage direct du fer dans les vins”. Société
Pharmacie Montpellier, 24:2, 1964.
17. COBRE
17.1. Principio.
48
El sodio dietilditiocarbamato reacciona con el
cobre (reacción de Delepine), dando la sal correspondiente a este metal y coloración amarilla oro,
cuya intensidad se mide por colorimetría o espectrofotometría.
Para evitar interferencias debidas a la presencia
de hierro y otros cationes polivalentes presentes en
el vino se emplea la sal disódica del ácido etilendiaminotetraacético, que forma complejos solubles y
muy estables a pH = 8. También puede utilizarse el
amonio citrato para evitar la interferencia del hierro.
17.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro con filtro para longitud de onda de 420 nm.
17.2.2. Bola de decantación de unos 100 ml.
17.3. Reactivos.
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
(Acido EDTA Na2 2-hidrato) (o 131120
di-Amonio Hidrógeno Citrato PA-ACS)
131074 Agua PA-ACS
121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA
131245 Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO
131091 Metanol PA-ACS-ISO
131668 Sodio Dietilditiocarbamato 3-hidrato
PA-ACS
17.3.1. Solución acuosa al 0,1% de Sodio Dietilditiocarbamato.
17.3.2. Suspensión de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica al 20%, o bien solución acuosa de Amonio Citrato al 20%.
17.3.3. Solución amoniacal al 15%. Diluir convenietemente el Amoníaco 25% (en NH3) PA con Agua
PA-ACS.
17.3.4. Metanol PA-ACS-ISO.
17.3.5. Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO.
17.3.6. Agua bidestilada en vidrio. Utilizarla también para la preparación de reactivos.
Poner en una bola de decantación 10 ml del
vino, añadir 5 ml de una suspensión del Acido EDTA
Na2 2-hidrato (o 5 ml de soluciónde Amonio Citrato)
y llevar a pH 8 con la solución amoniacal. Añadir
1 ml de reactivo de Sodio Dietilditiocarbamato y
5 ml de Metanol PA-ACS-ISO (para evitar emulsión),
y agitar durante 1 minuto.
Extraer varias veces con Carbono Tetracloruro
PA-ACS-ISO (agitando cada vez durante 1 minuto)
hasta recoger 20 ml, cuidando que no pasen restos
de agua, pues éstos dan enturbiamiento con el Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO. Si pasa alguna
gota, filtrar por papel de filtro puro, quedando las
trazas de agua en el papel.
Determinar la absorbancia en el espectrofotómetro a 420 nm de longitud de onda.
Para la prueba en blanco utilizar los mismos
reactivos en las mismas proporciones, sustituyendo
el volumen de vino por otro igual de Agua bidestilada en aparato de vidrio.
La curva que previamente será construida a
partir de lecturas correspondientes a escala de
diferentes riquezas de cobre es una línea recta,
por obedecer a la ley de Lamber-Beer. En el intervalo en que se opera con 1 ml de reactivo pueden
valorarse 10 ppm de cobre; para valores superiores, se añadirán 2 ml o se toma menor volumen
de muestra.
17.5. Cálculo.
El valor obtenido para la absorbancia a 420 nm
M
se lleva a la curva patrón y se expresa el correspondiente contenido en cobre en ppm.
17.6. Referencia.
17.6.1. Garoglio, P. G., y Stella, C. “Methodi ufficiali di analisi per i mosti, i vini e gli aceti”, pág. 75,
1958.
18. POTASIO
(Fotometría de llama)
18.1. Principio.
Se utiliza una solución de referencia con 100 mg
de potasio por litro y con diversos aniones, cationes
y materia orgánica en proporciones tales que den
un compuesto similar a un vino diluido a 1/10 con
agua.
18.2.1. Fotómetro de llama y accesorios.
18.2.2. Pipetas de 10 ml.
18.2.3. Matraces aforados de 1.000 ml.
18.3. Reactivos.
131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
Alilo Isotiocianato
121221 Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA
141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
211794 Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP
121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA
131621 Sacarosa PA-ACS
131965 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato
PA-ACS
141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
18.3.1. Solución de referencia. Disolver 481,3 mg
de Potasio Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml de
Agua PA-ACS muy caliente y mezclar con una solución de 10 ml de Etanol 96% v/v PA, 700 mg de
Aido Cítrico anhidro PA-ACS, 300 mg de Sacarosa
PA-ACS, 1.000 mg de Glicerina (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX, 20 mg de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS, 10 mg de Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA y 10 mg de Magnesio Cloruro
p50% MgCl2 polvo QP en 400 ml de Agua PA-ACS.
Completar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
Añadir dos gotas de Alilo Isotiocianato para conservación más segura de la solución.
18.3.2. Solución de dilución. Igual que la anterior, cambiando el Potasio Hidrógeno Tartrato PA
por 383 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.
Para preparar la solución de referencia, comenzar por disolver 481,3 mg de Potasio Hidrógeno
Tartrato PA en medio litro de Agua PA-ACS muy
caliente y mezclar esta solución con los otros com-
ponentes, previamente disueltos en 400 ml de Agua
PA-ACS; enrasar después a 1 litro exactamente.
Para la conservación más segura de esta solución se añaden 2 gotas de Alilo isotiocianato.
Con vinos dulces, añadir una cantidad de Sacarosa PA-ACS igual a la décima parte de la que contenga el vino.
Añadir a la solución de referencia una cantidad
de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS
equivalente al contenido en sodio del vino cuando
este contenido sea superior al equivalente a 20 mg
de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS.
En el caso del fraude por adición de 1 g/l de
Sodio Salicilato, añadir 100 mg de Sodio Salicilato
(USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX por litro de la solución de referencia y de dilución. El Sodio Salicilato
tiene una influencia muy marcada en el resultado del
análisis.
Regular el aparato y establecer una curva de
calibración con la solución de referencia pura y con
diversas diluciones de la solución de referencia diluida a 1/20, 1/10, 1/5, 1/2, con la solución de dilución.
Diluir el vino a 1/10 con agua y hacer la determinación en el fotómetro.
Si la lectura no queda comprendida entre los
valores 40 y 100 de la escala del galvanómetro,
diluir convenientemente el vino con solución de dilución.
18.5. Cálculo.
Calcular el contenido en potasio expresado en
g/l con una aproximación de ±0,02 g/l.
Potasio = 10 L g/l
L = valor correspondiente a la lectura de la escala del galvanómetro en la curva de calibración.
18.6. Referencia.
19. SODIO
(Fotometría de llama)
19.1. Principio.
Como en 18.1, referido a sodio.
Como en 18.2.
19.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Alilo Isotiocianato
49
121221
121085
141339
211794
131621
131659
141859
Calcio Cloruro anhidro 95%, polvo PA
Etanol 96% v/v PA
Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP
Sacarosa PA-ACS
Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
19.3.1. Solución de referencia.- Como en
18.3.1, sustituyendo los 20 mg de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS por 50,84 mg de
Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.
19.3.2. Solución de dilución.- Como en 18.3.2,
suprimiendo los 50,84 mg de Sodio Cloruro PAACS-ISO.
Como en 18.4. Para la curva de calibración, utilizar la solución de referencia diluida a 1/20, 1/10,
1/2, 3/4.
19.5. Cálculo.
Calcular el contenido en sodio expresado en g/l
con una aproximación de ± 0,05 g/l.
20.5. Cálculo.
Calcular la acidez total expresada en meq/l con
una aproximación de 0,1 meq/l o en g de ácido tartárico.
19.6. Referencia.
V
Acidez total = 10 —— - 0,35 V - 0,25 V” meq/l
2
20. ACIDEZ TOTAL
20.1. Principio.
La acidez total de un vino se considera como la
suma de los ácidos titulables cuando se lleva el vino
a pH = 7 por adición de un licor alcalino valorado. El
ácido carbónico y el anhídrido sulfuroso libre y combinado no se consideran comprendidos en la acidez
total.
El gas carbónico se elimina previamente del vino
por agitación en frío y con vacío parcial.
50
Poner 50 ml de vino en un Kitasato de 1l de
capacidad, conectar al vacío agitando al mismo
tiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 se
aprecia a los pocos momentos. Observar atentamente el momento en que dejan de desprenderse
las burbujas, desconectar del vacío.
Tomar 20 ml del vino sin CO2 y llevar a un vaso
de unos 100 ml de capacidad, introducir el electrodo de vidrio en el vino y el de calomelanos en vaso
lateral con Potasio Cloruro solución saturada RE.
Disponer un puente de la misma solución en tubo
de vidrio con los extremos uno en cada vaso estableciendo contacto.
Poner en marcha el agitador y añadir desde
bureta Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE al vino
hasta que la aguja del potenciómetro marque pH =
7, manteniendo el agitador en marcha durante la
operación, que no debe durar más de cinco minutos.
20.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.
20.2.2. Agitador magnético.
20.2.3. Puente con solución saturada de ClK
para evitar la introducción del electrodo de calomelanos en el vino.
20.2.4. Kitasato de un litro.
20.2.5. Pipeta de 20 ml.
20.2.6. Vaso de 100 ml de capacidad.
20.2.7. Bureta de 50 ml.
20.3. Reactivos.
171495 Potasio Cloruro solución saturada RE
171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE
20.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE.
V
Acidez total = 0,75 ( —— - 0,035 V’ - 0,025 V”) g/l
2
de ácido tartárico.
V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.
V’ = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para
la oxidación de anhídrido sulfuroso libre (21.-).
V” = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para
la oxidación del anhídrido sulfuroso combinado (21.-).
20.6. Referencias.
20.6.2. Jaulmes, P. ”La mesure de l’acidité total
des vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,
556, 1955.
NOTA: Organismos como la American Society of
Enologist y la Association of Official Analytical Chemist, aconsejan que el punto de viraje sea a pH 8,2
en lugar de 7,0 por tratarse de una valoración de
ácidos débiles con una base fuerte.
M
21. ACIDEZ VOLATIL
21.1. Principio.
La acidez volátil está constituida por la parte de
ácidos grasos pertenecientes a la serie acética que
se encuentra en los vinos, ya sea en estado libre o
de sal. Se determina mediante la separación de los
ácidos volátiles por arrastre con vapor de agua y
rectificación de los vapores. Se debe evitar con precaución la presencia de gas carbónico en el destilado. La acidez del anhídrido sulfuroso libre y combinado arrastrados con el destilado no deben comprenderse en la acidez volátil, por lo que hay que
restar la equivalencia de su acidez de la del destilado, así como la del ácido sórbico eventualmente
presente. Para estas correcciones se sigue la norma
Jaulmes (21.7.2), en la que se considera como
completa la influencia de SO2 libre y sólo la mitad de
la del combinado.
21.2.1. Aparato para destilación aislada (fig.21.I).
21.2.1.1. Matraz de generador de vapor de
3.500 ml.
El agua condensada en el tubo de unión del
matraz con el barbotador se purga por el purgador
(c).
21.2.1.2. Barbotador (b).- Tubo cilíndrico de
3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo reposa sobre un disco de amianto de 15 cm de diámetro, con un orificio central de 29 mm. El tubo (d) por
el que entra el vapor en el barbotador debe llegar a
1 cm del fondo.
21.2.1.3. Columna rectificadora (e) .- Constituida
por un tubo cilíndrico de 20 mm de diámetro y
50 cm de altura, conteniendo una hélice de tela de
acero inoxidable número 100 plegada, con 15 mm
de paso.
21.2.1.4. Refrigerante de West (f).- De 40 cm de
longitud activa, colocado verticalmente.
21.3. Reactivos.
131066 Acido L (+)-Tartárico PA-ACS-ISO
171073 Agua de Cal solución saturada RE
(o 171071 Agua de Barita solución saturada RE)
131074 Agua PA-ACS
131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato
PA-ACS-ISO
181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
21.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
21.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Etanol
96% v/v PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluir
convenientemente.
21.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo
0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y
determinar el factor.
21.3.4. Almidón soluble RE.
Alimentar el generador de vapor con Agua de
Cal solución saturada RE o Agua de Barita solución
saturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta unos
2/3 de su volumen. Poner en el barbotador 20 ml
del vino exento de gas carbónico como en 20.4.
Añadir al vino unos 0,5 g de Acido L(+)-Tartárico PAACS-ISO, poner en marcha el generador de vapor,
manteniendo abierta la salida del tubo purgador del
vapor; después de cerrar ésta, calentar el barbotador. Durante la operación se regula el calentamiento de forma que el volumen de líquido en el barbotador no pase sensiblemente de los 20 ml iniciales.
Destilar en unos 12-15 minutos 250 ml.
Valorar con Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
en presencia de dos gotas de Fenolftaleína como
indicador.
Valorar el sulfuroso libre en este destilado, añadiendo al terminar la anterior valoración una gota de
Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, para acidular
nuevamente y valorar el SO2 libre con solución de
Yodo 0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón
soluble RE como indicador y un cristal de Potasio
Yoduro PA-ISO.
Para determinar el Acido Sulfuroso combinado
con el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución saturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACSISO (el líquido toma un color rosa pálido) y valorar
nuevamente con solución de Yodo 0,01N.
21.5. Cálculo.
Calcular la acidez volátil expresada en meq/l,
con una aproximación de 0,2 ml, o en g/l de ácido
sulfúrico o de ácido acético, con una aproximación
de 0,1 g/l.
Acidez volátil = 5 (V - V’/10 - V”/20) meq/l
0,49
Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de
2
ácido sulfúrico.
0,6
Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de
2
ácido acético.
V’= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la
oxidación del anhídrido sulfuroso libre.
V”= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la
51
oxidación del anhídrido sulfuroso combinado con el
acetaldehído.
22. ACIDO SORBICO EN EL DESTILADO
PARA ACIDEZ VOLATIL
En la destilación del vino para la determinación
de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en su
totalidad al destilado, junto con el ácido acético, falseando el resultado del análisis. Para corregir el
resultado, determinar el ácido sórbico en el destilado como en 29, procediendo en la siguiente forma
simplificada: tomar 0,5 ml del destilado de la acidez
volátil, llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, añadir 1,5 ml de la solución (a), dejar la cubeta
al aire durante unos minutos y medir después la
absorbancia en el espectrofotómetro a 256 nm.
Graduar el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solución (b) y 1,5 ml de la solución (a).
22.1. Principio.
En la destilación del vino para la determinación
de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en su
totalidad al destilado junto con el ácido acético, falseando el resultado del analísis. Para valorar este
ácido sórbico se parte de una muestra de 0,5 ml de
destilado (lo que no supone un error sensible) y se
valora por espectrofotometría en el ultravioleta.
21.7. Referencias.
d’Analyse des Vins. 0. I. V. All, 1-4, 1969.
21.7.2. Jaulmes, P. Analyse des Vins, 2a. ed.,
1951.
22.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta.
22.2.2. Cubetas de cuarzo de 1 cm.
22.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.
22.3. Reactivos.
141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
131074 Agua PA-ACS
121531 Potasio Sorbato PA
121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA
52
Figura 21.I.- Aparato para destilación aislada
M
22.3.1. Solución a): Mezclar 0,5 g de Sodio
Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de Cobre II
Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir Agua PAACS hasta un litro.
22.3.2. Solución b): Llevar 20 mg de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX a matraz de un litro que
contenga 900 ml de Agua PA-ACS caliente, agitar,
dejar enfriar y enrasar a un litro. En vez de Acido
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX puede emplearse
26,8 g de Potasio Sorbato PA.
Tomar 0,5 ml del destilado de la acidez volátil,
llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, añadir 1,5 ml de la solución a), dejar la cubeta al aire
durante unos minutos y medir después la absorbancia en el espectrofotómetro a 256 nm. Graduar
el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solución b) y
1,5 ml de la solución a).
22.5. Cálculo.
Un gramo de ácido sórbico corresponde a
8,92 ml de solución normal y a 0,438 g de ácido sulfúrico. Para todo vino adicionado con 200 mg de
ácido sórbico por litro la corrección sustractiva que
corresponde hacer a la acidez volátil es de 1,7 meq
o 0,088 g del ácido sulfúrico o 0,107 g de ácido
acético por litro de vino.
22.6. Referencia.
22.6.1.Recueil des Méthodes Internationales
d’Analyse des Vins. O. I. V. All, 3.
23. ACIDEZ FIJA
23.1. Principio.
Se considera convencionalmente como acidez
fija la diferencia entre acidez total y acidez volátil,
ambas expresadas en ácido tartárico.
No es necesario hacer las correcciones por
eventual presencia de anhídrido sulfuroso combinado y libre.
24(a). ACIDO TARTARICO TOTAL
(Método del calcio racemato)
24(a).1. Principio.
Adición al vino de ácido tartárico levógiro que en
unión con el ácido tartárico dextrógiro del vino y en
presencia de solución de calcio, forman en condiciones determinadas calcio racemato insoluble.
En el método adoptado se determinan las condiciones de precipitación del calcio racemato, fijando la solubilidad del calcio tartrato levógiro (que
también se forma) y las del calcio racemato en función del pH y de la riqueza en iones de calcio. Con
estos datos se ha fijado un pH conveniente para
que precipite el calcio racemato y se solubilice el
tartrato levógiro.
24(a).2.1. Vaso cilíndrico de 600 ml.
24(a).2.2. Filtros de porosidades números 4 y 2.
24(a).2.3. Kitasato y trompa de agua para vacío.
24(a).2.4. Material accesorio para una volumetría.
24(a).3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Amonio D(-)-Tartrato
24(a).3.1. Solución de Calcio Acetato de 10 g de
Calcio por litro. Mezclar en matraz aforado de
1.000 ml 25 g de Calcio Carbonato precipitado PA
con 40 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y
enrasar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.
24(a).3.2. Calcio Racemato cristalizado. En un
vaso, introducir 20 ml de una solución de Acido
L(+)-Tartárico de 5 g por litro, 100 ml de Agua PAACS, 20 ml de una solución de Amonio Tartrato
levógiro de 6,126 g por litro y 6 ml de la solución de
Calcio Acetato.
Dejar precipitar durante dos horas. Recoger el
precipitado sobre un filtro de porosidad número 4,
lavando y arrastrando cuatro veces. Secar en estufa a 70° hasta peso constante. Se obtienen unos
340 mg de Calcio Racemato cristalizado.
Conservar en frasco tapado.
24(a).3.3. Licor de precipitación. Introducir en
matraz aforado de 1.000 ml 150 g de Amonio D(-)Tartrato levógiro, 8,8 ml de solución de Calcio de
10 g/l y enrasar con Agua PA-ACS.
Por ser el Calcio Racemato ligeramente soluble
en este licor, conviene saturarlo antes de su empleo,
añadiendo 5 g de Calcio Racemato a un litro de este
licor. Agitar durante 12 horas y filtrar.
24(a).4.1. Precipitación del Racemato.- En un
vaso cilíndrico de 600 ml introducir 500 ml de licor
de precipitación y 10 ml de vino. Mezclar y dejar
precipitar durante 24 horas.
24(a) 4.2. Valoración gravimétrica.- Filtrar sobre
filtro poroso número 2, tarado y puesto sobre el
Kitasato, recogiendo el precipitado. Lavar el vaso en
el que se ha efectuado la precipitación y arrastrar las
últimas partículas de precipitado con el líquido ya filtrado.
Secar en estufa a 70° hasta peso constante.
24(a).5. Cálculo.
Calcular el ácido tartárico expresado en g/l de
vino o en g de potasio bitartrato.
Acido tartárico = 28,84 x P g/l
53
Acido tartárico = 36,15 x P g de potasio bitartrato.
P = peso en g del calcio racemato, cristalizado
con cuatro moléculas de agua.
24(b).3.5. Acido Clorhídrico diluido a 1/5 (v/v).
Diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PAACS.
24(b).3.6. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
24(a).6.1. Jaulmes, P.; Brum, S.; Cabanis, J.
“Comunicación número 304 de Métodos de Análisis
de Vinos”. 0. I. V., 1969.
Disolver en 10 ml de Acido Clorhídrico diluido el
precipitado de Racemato recogido sobre el crisol filtrante. Lavar el crisol filtrante con unos 50 ml de
Agua PA-ACS. Añadir un volumen de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV suficiente para neutralizar la
solución (unos 20-22 ml). Añadir después 5 ml de
Solución Tampón pH = 9, 5 ml de sal de magnesio
0,05M y 50 mg de indicador Negro de Eriocromo T.
Valorar con Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV.
24(b). ACIDO TARTARICO TOTAL
(Método complexométrico)
24(b).1. Principio.
Como en 24(a).1.
24(b).2. (1, 2, 3, 4) como 24 (a) .2. (1, 2, 3, 4).
24(b).3. Reactivos.
Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV
(Acido EDTA Na2 0,05M SV) (o preparar con 131669 Acido EDTA Na2
2-hidrato PA-ACS-ISO)
131074 Agua PA-ACS
211276 Magnesio Oxido QP
171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS
272172 Tampón, Solución pH 9,00 ±0,02 (20ºC) ST
(o preparar con 131121 Amonio Cloruro
PA-ACS-ISO, 121129 Amoníaco 25% (en NH3)
PA y Agua PA-ACS)
54
24(b).3.1. Solución Tampón pH 9,00 ±0,02
(20ºC) ST, o preparar mezclando 54 g de Amonio
Cloruro PA-ACS-ISO, 350 ml de Amoníaco 25% (en
NH3) PA y completar con Agua PA-ACS hasta un
litro.
24(b).3.2. Indicador de Negro de Eriocromo T.
Mezclar 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645)
RE-ACS con 100 g de Sodió Cloruro PA-ACS-ISO.
24(b).3.3. Solución de Magnesio 0,05M. Disolver
2,25 g de Magnesio Oxido QP (para asegurar que
no esté carbonatado se recomienda calcinar 5 g de
Magnesio Oxido QP al rojo en horno eléctrico
durante 30 minutos, enfriar y pesar 2,25 g). Hacer la
disolución en cantidad necesaria de Acido Clorhídrico diluido (10%) y luego se enrasa a un litro.
Valorar esta solución con Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en
presencia de Negro de Eriocromo T.
24(b).3.4. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto disolver
18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica
2-hidrato PA-ACS-ISO en 1 litro de Agua PA-ACS.
24(b).5. Cálculo.
Acido tartárico en g/l de vino = (V - 5) 3,75.
Acido tartárico expresado en g/l de potasio bitartrato = (V - 5) 4,70.
V = volumen en ml de ácido EDTA Na2 0,05M.
La expresión de los resultados será en potasio
bitartrato y con una aproximación de 0,5 miliequivalentes por litro, o de 0,05 g / l.
25. ACIDO LACTICO
25.1. Principio.
Aislamiento del ácido láctico mediante columna
de resinas cambiadoras de aniones, oxidación a
acetaldehído y valoración colorimétrica por la reacción coloreada del acetaldehído con la piperidina.
25.2.1. Espectrofotómetro y accesorios.
25.2.2. Tubo de vidrio o bureta de 10-11 mm de
diámetro y 30 cm de longitud con llave en la parte
inferior.
25.2.3. Lana de Vidrio, lavada QP.
25.2.4. Resina Lewatit ® MP 600 (*) (aniónica fuerte l)
25.3. Reactivos.
131034 Acido L(+)-Lactico 85% PA-ACS
182105 Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
121248 Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA
211376 Lana de Vidrio lavada QP
Resina Lewatit ® MP 600
(aniónica fuerte I)
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
181691 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA
131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
141717 Sodio Sulfito anhidro PRS
M
25.3.1. Solución de Cerio IV Sulfato 0,1M en
Acido Sulfúrico 0,7N. Disolver en frío 40,431 g de
Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA en 350 ml de Acido
Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV exactamente valorado. No
calentar, pues se formaría un cerio IV óxido insoluble. Llevar la solución a 1.000 ml con Agua PA-ACS.
25.3.2. Solución valorada de Sodio Hidróxido
2,5N. Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACSISO en Agua PA-ACS, ajustar a la concentración
indicada y determinar el factor.
25.3.3. Solución de Sodio Acetato al 27%. Disolver 270 g de Sodio Acetato anhidro PA-ACS en
Agua PA-ACS y completar 1.000 ml.
25.3.4. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.
25.3.5. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.
Disolver 2 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA en
Agua PA-ACS, después completar a 100 ml. Conservar tapado en la oscuridad. La solución no debe
tener más de ocho días.
25.3.6. Solución de Piperidina al 10%. Llevar a
un matraz de 100 ml, 10 ml de Piperidina PS y enrasar a 100 ml con Agua PA-ACS.
(*). En el original indica “resina cambiadora de aniones”. Consideramos apropiada la aniónica fuerte I.
25.4.1. Preparación de la columna de resinas
aniónicas. Colocar Lana de Vidrio lavada QP en el
fondo del tubo o bureta 25.2.2, formando tapón de
2-3 mm de altura proximadamente, añadir Agua PAACS hasta una altura de unos 5 mm sobre el tapón
de Lana de Vidrio, lavada QP. Añadir después la
Resina Lewatit ® MP 600, que estará conservada en
Acido Acético glacial al 30%, agitar esta suspensión
y añadir rápidamente un volumen de unos 10 ml.
Dejar sedimentar y después depositar en la superficie un tapón de Lana de Vidrio lavada QP que se
conduce a través del líquido sin resinas con una
varilla de vidrio.
La Resina Lewatit ® MP 600 no sirve más que
para una sola vez.
25.4.2. Aislamiento del Acido Láctico. Abrir la
llave inferior de la columna y dar salida al Acido Acético diluido hasta unos 2-3 ml por encima del tapón
de lana superior. Añadir unos 10 ml de Acido Acético al 0,5%, vaciar hasta igual altura y repetir estos
lavados cuatro veces.
Después del último lavado, y con llave cerrada,
adicionar 10 ml del vino y señalar la altura alcanzada, con lápiz graso. Dejar salir goteando el vino
a razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por
minuto). Vaciar hasta el nivel del tapón de Lana de
Vidrio lavada QP superior. Llenar de nuevo la
columna con Acido Acético al 0,5% hasta la señal
de lápiz graso. Dejar salir a la misma velocidad
que la vez anterior y lavar después en la misma
forma siete veces, cada vez con 10 ml de Agua
PA-ACS.
Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuando el nivel del líquido se encuentre un poco más arriba del tapón de Lana de Vidrio lavada QP superior.
Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml.
Eluir los ácidos fijados en el cambiador de aniones
mediante adiciones de solución de Sodio Sulfito
0,5M (prepararlo disolviendo Sodio Sulfito anhidro
PRS en Agua PA-ACS), hasta la señal trazada en el
tubo.
Resulta práctico, para realizar esta operación,
colocar un frasco con la solución de Sodio Sulfito
unido por el cuello a la columna mediante un manguito de caucho y con unas pinzas para regular la
caída del líquido en la bureta o tubo. Puestos así en
comunicación los dos aparatos (frasco y bureta o
tubo), abrir las pinzas del caucho de unión y la llave
inferior, dejando caer el líquído a la bureta hasta
unos 10 cm de altura, y sin que queden huecos
vacíos. Se regula la salida del líquido a la proporción
de 2-3 gotas por segundo, para llenar el matraz receptor hasta el enrase.
25.4.3. Valoración del Acido Láctico. Introducir
10 ml del eluido en un tubo de ensayo de paredes
que no sean gruesas y de unos 50 ml de capacidad
con tapón. Añadir 10 ml del reactivo de Cerio IV Sulfato. Agitar e introducir el tubo de ensayo en un termostato a 65°C durante 10 minutos exactamente.
Inmediatamente después de la inmersión en el líquido, destapar durante unos segundos, para dar salida al aire dilatado. Cerrar rápidamente con el tapón para evitar pérdidas del Acetaldehído formado.
Después de 10 minutos, retirar y enfriar el tubo con
agua corriente hasta la temperatura de 20°C.
Añadir 5 ml de la solución de Sodio Hidróxido
2,5N, mezclar bien y filtrar.
Tomar 15 ml del filtrado y verterlos en probeta de
tapón esmerilado de 50 ml de capacidad, que contenga 5 ml de solución de Sodio Acetato al 27% y
2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV. Añadir además 5 ml de solución de Sodio Nitroprusiato y mezclar bien. Añadir después 5 ml de solución de Piperidina, mezclar rápidamente, introducir en seguida
en la cubeta del espectrofotómetro de 10 mm
de espesor. Medir la coloración producida, que
varía, de verde a violeta, con relación al aire a la longitud de onda de 570 nm. Esta coloracion aumenta
al principio, pero disminuye en seguida rápidamente. Tomar como valor definitivo el valor máximo de la
lectura de absorbancia.
Si el eluido es muy rico en Acido Láctico y la
densidad óptica es muy elevada, diluir el eluido con
solución de Sodio Sulfato al 7,1%.
25.4.4. Curva patrón. Tomar 10 ml de una solución de Acido Láctico 1N exacta, y añadir 10 ml de
Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y completar a un
litro con solución de Sodio Sulfato al 7,1%. Tomar 5,
10, 15, 20 y 25 ml, respectivamente, e introducir
cada alícuota en un matraz aforado de 100 ml.
Enrasar con solución de Sodio Sulfato al 7,1%.
55
Mezclar bien, tomar 10 ml de las soluciones así
obtenidas y determinar los valores de las absorbancias respectivas.
Las diferentes soluciones corresponden a eluido
del vino conteniendo 0,45; 0,90; 1,35; 1,80 y 2,25
g/l de Acido Láctico.
La representación gráfica de las absorbancias
de estas soluciones en función de la riqueza en
Acido Láctico, es una recta.
25.5. Cálculo.
Llevar los valores de absorbancia obtenidos a la
curva patrón y deducir los correspondientes contenidos en ácido láctico expresados en g/l.
Si el vino tiene más de 250 mg por litro de sulfuroso total, el resultado puede ser erróneo, por la
presencia de ácido aldehído sulfuroso. En determinaciones de precisión, conviene realizar una corrección en la forma siguiente:
Tomar 15 ml de eluido y llevar a probeta de
tapón esmerilado, en la que se habrá añadido 5 ml
de sodio acetato al 27% y 2 ml de ácido sulfúrico
1,55N (77,5 ml de ácido sulfúrico 2N diluidos a
100 ml con agua destilada). Añadir 5 ml de sodio
nitroprusiato al 2% y 5 ml de piperidina al 10%.
Mezclar y hacer la determinación espectrofotométrica a 570 nm que da el factor de corrección:
L = L’ - C x 0,25
L = contenido real de ácido láctico expresado en
g/l.
L’ = contenido aparente de ácido láctico expresado en g/l.
C = factor de corrección en g/l.
25.7. Referencia.
25.7.1. Rebelein, M. “Deutsche Lebens-mittel
Rudshan”, 2: 36-41, 1961, y 59: 131, 1963.
26. ACIDO CITRICO
56
26.1. Principio.
El ácido cítrico es fijado junto con los otros ácidos del vino por una resina cambiadora de aniones.
Después se procede a la elución, la que se realiza
fraccionadamente y separando el ácido citromálico
que es causa de error en la valoración del ácido
cítrico.
El ácido cítrico es transformado por oxidación
cuidadosa en acetona, la que se separa por destilación. El etanal arrastrado se oxida a ácido acético y
se valora sola la acetona por yodometría.
26.2.1. Columna cambiadora de aniones. En
una bureta de llave de 25 ml de capacidad, colocar
un tapón de Lana de Vidrio, lavada QP en el fondo
y verter 20 ml de Resina Dowex 1 x 2.
Someter la Resina a dos ciclos completos de
regeneración con pasos alternos de Acido Clorhídrico 1mol/l (1N) SV y Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.
Lavar después con 50 ml de Agua PA-ACS, agitando la Resina Dowex cuando los primeros ml de
Agua PA-ACS pasan por la columna para despegarla del fondo de la bureta.
Saturar la Resina de iones acetato, mediante el
paso de 250 ml de una solución de Acido Acético
4N. Lavar luego con 100 ml de Agua PA-ACS.
26.2.2. Aparato para la oxidación. Aparato compuesto de matraz de cuello largo, atravesado lateralmente por el tubo afilado de embudo con llave, y
en comunicación con refrigerante, según dimensiones y forma del diseño (fig. 26.I).
26.3. Reactivos.
181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
211376 Lana de Vidrio, lavada QP
131413 Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS
131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO
131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
(0,05N) SV
Resina DOWEX 1 x 2 (50-100 mallas)
181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
26.3.1. Resina Dowex 1 x 2 (50-100 mallas)
26.3.2. Solución de Acido Acético 4N. Diluir
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PAACS a la concentración indicada y determinar el
factor.
26.3.3. Solución de Acido Acético 2,5N. Diluir
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PAACS a la concentración indicada y determinar el
factor.
26.3.4. Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV.
26.3.5. Acido Sulfúrico diluido al 1/5 (v/v). Diluir
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
26.3.6. Solución Tampón pH = 3,2-3,4. En un
matraz aforado de 1 l introducir 150 g de Potasio diHidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido
M
orto-Fosfórico (d = 1,689) y enrasar con Agua PAACS. (Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
con Agua PA-ACS hasta obtener la densidad indicada)
26.3.7. Solución de Manganeso Sulfato de 50 g/l.
Disolver Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS en
Agua PA-ACS.
26.3.8. Piedra Pómez gránulos QP.
26.3.9. Potasio Permanganato 0,01 mol/l
(0,05N) SV.
26.3.10. Acido Sulfúrico diluido a 1 (v/v).
26.3.11. Solución de Potasio Permanganato 2N.
Disolver Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS, ajustar a la concentración indicada y
26.3.12. Solución de Hierro II Sulfato de 40 g por
100.
26.3.14. Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV.
26.3.15. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N.
Diluir exactamente 1:5 de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l
(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor.
26.4.1. Separación de los ácidos cítrico y citromálico. Hacer pasar 25 ml del vino a través de la
columna cambiadora de aniones Dowex 1 x 2 en
forma acética a razón de 3 ml cada dos minutos.
Lavar la columna con 20 ml de Agua PA-ACS en
tres veces. Eluir los ácidos con 200 ml de solución
de Acido Acético 2,5N que se hace pasar por la
columna a la misma velocidad. En esta fracción de
eluido se encuentra, entre otros ácidos, el ácido
citromálico que interesa eliminar.
Eluir los ácidos cítricos y tartáricos haciendo
pasar a través de la columna 100 ml de Sodio
Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y recoger el eluido en el
matraz del aparato de oxidación y destilación descrito
26.4.2. Oxidación. En el matraz que contiene ya
el eluido anterior, añadir Acido Sulfúrico diluido al
1/5 (unos 20 ml) para llevar el pH a 3,2-3,8, 25 ml
de Solución Tampón pH = 3,2-3,4, 1 ml de solución
de Manganeso II Sulfato y algunos gramos de Piedra Pómez gránulos QP. Tapar y conectar el matraz
con el refrigerante, calentando hasta ebullición.
Separar los primeros 50 ml destilados.
Colocar Potasio Permanganato 0,01 mol/l
(0,05N) SV en el embudo lateral de llave, y verter en
el matraz a razón de una gota por segundo, cayendo en el eluido en ebullición. El destilado se recoge
en frasco de 500 ml de tapón esmerilado que contiene unos ml de Agua PA-ACS. Continuar la oxidación hasta que la coloración parda del líquido acuse
un exceso de permanganato.
26.4.3. Separación de la acetona. Si el volumen
del destilado es inferior a 90 ml, completar con
Agua PA-ACS hasta este volumen: añadir después
4,5 ml de Acido Sulfúrico al 1/3 y 5 ml de una solución de Potasio Permanganato 2N.
Si el volumen del destilado excede de los 90 ml,
completar a 180 ml con Agua PA-ACS y utilizar la
dosis doble de reactivos.
En estas condiciones (medio Acido Sulfúrico
0,5N y Potasio Permanganato 0,1N), el alcohol etílico es oxidado a ácido acético y la acetona permanece intacta.
Tapar el frasco, dejar en reposo durante 45
minutos a la temperatura ambiente. Al cabo de este
tiempo se destruye el exceso de permanganato adicionando solución de Hierro II Sulfato.
Destilar después y recoger 50 ml aproximadamente de destilado en un frasco de tapón esmerilado que contenga 5 ml de Sodio Hidróxido 5 mol/l
(5N) SV.
57
Figura 26.l
26.4.4. Valoración de la acetona, añadir al contenido del frasco 25 ml de Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV,
si la dosis de Acido Cítrico es superior a 0,5-0,6 g/l
será necesario añadir más solución de Yodo, hasta
que quede color amarillento que indicará este exceso. Duplicar o triplicar las dosis de Yodo hasta llegar
a este punto, pero si la riqueza en Acido Cítrico es
mayor de 1,5 g, comenzar otra vez el análisis con
sólo 10 ml de vino.
Dejar en contacto el Yodo añadido durante 20
minutos permaneciendo el frasco tapado. Añadir
8 ml de Acido Sulfúrico al 1/5 y valorar el exceso de
yodo con Sodio Tiosulfato 0,02N en presencia de
Almidón soluble RE.
Hacer una valoración en blanco en las mismas
condiciones sustituyendo los 50 ml de destilado por
50 ml de Agua PA-ACS.
26.5. Cálculo.
Calcular el contenido en ácido cítrico expresado
en g/l.
V’ - V”
Acido cítrico = 0,64 ———— g/l
V
V = volumen en ml de la muestra de vino.
V’ = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N utilizado en la valoración en blanco.
V” = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N utilizado en la valoración del yodo en exceso.
26.6. Referencia.
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A29, 1-3, 1969.
27. SULFATOS
27.1. Principio.
Precipitación del bario sulfato en el vino, previamente desprovisto de anhídrido sulfuroso por ebullición al abrigo del aire.
58
27.2.1. Matraz cónico (Erlenmeyer) de 500 ml,
provisto de ampolla con llave de 100 ml y de desprendimiento de vapor, atravesando ambos el
tapón. El matraz se coloca sobre disco metálico de
15 cm de diámetro con abertura circular de 8 cm de
diámetro.
27.2.2. Vaso cilíndrico de 400 ml.
27.2.3. Baño de agua o plancha caliente a 60°C.
27.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO
27.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.
27.3.2. Bario Cloruro, 100 g de Bario Cloruro 2hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS.
27.4.1. Eliminación del anhídrido sulfuroso del
vino. Introducir en el Erlenmeyer del aparato descrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución para eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml del vino
por la ampolla de llave evitando que la ebullición se
pare durante esta adición. Continuar la ebullición
hasta reducir el volumen del líquido a unos 100 ml,
eliminando así todo el SO2.
27.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar el
residuo de la evaporación anterior a un vaso de
400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de
Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total
a 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l
(2N) y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota 10 ml
de solución de Bario Cloruro, con la precaución de
no parar la ebullición y dejar reposar en caliente,
colocando el vaso sobre placa a 60° durante cuatro
horas y en baño de agua hirviendo durante dos
horas. En el caso de pequeñas cantidades de precipitado, se recomienda un segundo reposo en frío
durante 12 horas. Filtrar por filtro sin cenizas, lavar
el vaso y precipitado con Agua PA-ACS caliente
hasta que no dé reacción con Plata Nitrato PAACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente plegado a
crisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, después de enfriar en un desecador, pesar.
27.5. Cálculo.
Calcular el contenido de sulfatos expresado en
meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproximación de ± 0,05 g/l.
Sulfato = 85,68 P meq/l.
Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.
P = peso de las cenizas en g.
27.6. Referencias.
27.6.1. Deibner, P.; Bernard, P. “Industries Alimentaires et Agricoles”, 71: 1, 23 y 5, 427,1954.
d’Analyse des Vins. 0. I. V., A14, 1-4. 1969.
M
28(a). ANHIDRIDO SULFUROSO
(Método Paul)
28(a).1. Principio.
Liberación de sulfuroso “libre” por acidificación
del vino, arrastre por corriente de aire, oxidación por
barboteo en agua oxigenada neutra y valoración
con sodio hidróxido del ácido sulfúrico formado.
Liberación por ebullición moderada del sulfuroso
“combinado”, que queda en el vino después de la
extracción del sulfuroso “libre”, y análogo tratamiento que en la determinación del sulfuroso “libre”. El
sulfuroso “total” es la suma del sulfuroso “libre” y el
sulfuroso “combinado”. Puede determinarse acidificando el vino y calentando y procediendo como en
los dos casos anteriores.
Utilizar el aparato representado en la figura
28(a).I.
28(a).2.1. Matraz de 100 ml o de 250 ml.
28(a).2.2. Tubo barbotador provisto de bola hueca en un extremo con unos 20 orificios de 0,2 mm
de diámetro alrededor del círculo máximo horizontal.
28(a).2.3. Refrigerante que condense vapores y
deje pasar el gas en recorrido seguro.
28(a).2.4. Frasco con agua y con tapón atravesado por el tubo que comunica con el barbotador
para hacer vacío, y otro tubo sumergido en el agua
para acusar la intensidad del vacío por la depresión
de la columna de agua en el interior del tubo,
depresión que debe mantenerse entre 20-30 cm.
El gasto de vapor será de 40 l/h.
28(a).2.5. Baño de agua regulable a 10°C.
28(a).3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC
PRS
171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
28(a).3.1. Acido Fosfórico aI 25% (p/v). Diluir
convenientemente Acido orto-Fosfórico 85% PAACS-ISO con Agua PA-ACS.
28(a).3.2. Hidrógeno Peróxido de 0,3 volúmenes
59
Figura 28(a).I. Las dimensiones están indicadas en mm. Los diámetros interiores de los cuatro tubos concéntricos que constituyen el refrigerante son 45, 34, 27 y 10 mm
por 100. Diluir convenientemente Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.) PRS con Agua PA-ACS.
28(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,01N. En un matraz
aforado diluir a 1:10, Sodio Hidróxido 0,1 mol/l
(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor
de la solución obtenida 0,01N.
28(a).3.4. Indicador. Mezclar 100 mg de Rojo de
Metilo (C.I. 13020) RE-ACS, 50 mg de Azul de Metileno (C.I. 52015) DC y 100 ml de Etanol de 50°.
Diluir convenientemente Etanol 96% v/v PA con
Agua PA-ACS.
60
28(a).4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre.
En el matraz de 100 ml del aparato poner 10 ml del
vino y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al 25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio. Si la riqueza en SO2 del vino es pequeña, se emplea el matraz
de 250 ml y se ponen 20-25 ml de vino.
Sumergir el matraz en un baño de agua a 10°C.
Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3
volúmenes y dos gotas del reactivo Indicador en el
barbotador y neutralizar el Hidrógeno Peróxido con
Sodio Hidróxido 0,01N.
Adaptar el barbotador al aparato y hacer barbotar el aire (o nitrógeno) durante 12-15 minutos.
Arrastrar el anhídrido sulfuroso libre y después oxidar a H2SO4. Retirar el barbotador y valorar el ácido
formado con solución de Sodio Hidróxido 0,01N.
28(a).4.2. Análisis del anhídrido sulfuroso combinado. Después de terminar la valoración del anhídrido sulfuroso libre, colocar en el barbotador ya limpio, los 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado
y con las dos gotas del indicador. Calentar con llama pequeña hasta llevar a la ebullición el vino que
quedó en el matraz despojado del anhídrido sulfuroso libre por la determinación anterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondo del matraz, que descansará sobre chapa metálica perforada con orificio
de 30 mm de diámetro, para evitar la pirogenación
de las materias extractivas del vino sobre las paredes del matraz. Mantener el paso del aire o nitrógeno durante la ebullición, que durará 12-15 minutos,
tiempo que se considera suficiente para arrastrar
todo el sulfuroso combinado, y después oxidarlo.
Continuar como en 28(a).4.1 a partir de “Colocar
2-3 ml de Hidrógeno Peróxido...”.
28(a).4.3. Anhídrido sulfuroso total. Puede
determinarse por la suma anhídrido sulfuroso libre
más anhídrido sulfuroso combinado, pero también puede determinarse directamente, actuando
desde un principio con corriente de aire y con
calor.
28(a).5. Cálculo.
Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso
expresado en mg/l con una aproximación de
10 mg/l.
Anhídrido sulfuroso = 32 V mg/l.
Para vino sensiblemente picado (con más de
2 g/l de acidez acética) puede arrastrarse con el
anhídrido sulfuroso, ácidos volátiles, especialmente
cuando la corriente de aire es intensa.
Corregir determinando la acidez volátil presente
en el líquido del barbotador, operando de la siguiente forma:
Después de la neutralización con el sodio hidróxido al valorar la acidez, añadir un cristal de 131066
Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO y llevar el contenido del barbotador al aparato de determinación de la
acidez volátil por destilación en corriente de vapor.
Restar despues del resultado anterior la parte de
acidez correspondiente a los ácidos volátiles.
28(a).7.1. Paul, F. “Mitteilungen Klosternenberg”,
A: 8, 21, 1958.
d’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 1-8, 1969.
28(b). ANHIDRIDO SULFUROSO
(Método Ripper doble)
28(b).1. Principio.
Valoración yodométrica del SO2 operando directamente con el vino.
Para evitar el error introducido por la recombinacion del sulfuroso liberado de su combinación con
los aldehídos, durante la valoración volumétrica, se
hace una segunda valoración, después de nueva
liberación del SO2 recombinado.
28(b).2.1. Erlenmeyer de 500 ml y material para
una volumetría.
28(b).3. Reactivos.
Acetaldehído
(Acido EDTA Na2 2-hidrato)
131074 Agua PA-ACS
121428 Mercurio II Yoduro rojo PA
182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
28(b).3.1. Sodio Hidróxido 4N. En un matraz
aforado diluir a 4:5, Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solución 4N obtenida.
M
28(b).3.2. Acido Sulfúrico al 1/10 en volumen
(180 g/l). Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
28(b).3.3. Engrudo de almidón preparado de la
siguiente forma:
Pesar 2,5 g de Almidón soluble RE y triturarlo en
un mortero junto con 10 mg de Mercurio II Yoduro
rojo PA. Llevar a un vaso y añadir un volumen de
Agua PA-ACS suficiente para poder hervir la suspensión con fluidez. Llevar después ésta a matraz
con 1 litro de Agua PA-ACS en ebullición, que se
mantiene durante 10 minutos. El líquido obtenido
estará limpio y si es necesario se filtra.
28(b).3.4. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
28(b).3.5. Sodio Tiosulfato 0,01N. En un matraz
aforado diluir a 1:5, Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l
(0,05N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor
de la solución 0,01N obtenida.
28(b).3.6. Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
Colocar en el Erlenmeyer de 500 ml, 50 ml del
vino, 3 ml de Acido Sulfúrico al 1/10, 5 ml de Engrudo de Almidón y 30 mg de Acido Etilendiaminotetraacetico Sal Disodica 2-hidrato PA-ACS-ISO (con
el fin de evitar la oxidación del SO2 libre durante la
valoración).
Homogeneizar la solución y añadir con bureta
Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV hasta coloración azul
del almidón, que primero será fugaz, y netamente
persistente después, durante 10-15 segundos,
considerándola entonces aceptable. Sea V el volumen del yodo empleado.
Añadir 8ml de solución de Sodio Hidróxido 4N,
agitar una sola vez y dejar en contacto durante 5
minutos. Después verter, de un solo golpe y agitando enérgicamente, 10 ml de Acido Sulfúrico a 1/10.
Se valora inmediatamente con Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV el SO2 liberado. Sea V’ el volumen en ml
de solución de yodo empleado.
Se añade después 20 ml de Sodio Hidróxido
4N, se deja en contacto durante 5 minutos después
de haber agitado una sola vez. Se diluye con 200 ml
de Agua PA-ACS bien fría, agitar después enérgicamente y añadir 30 ml de Acido Sulfúrico al 1/10 y
valorar con Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV el SO2 liberado. Sea V” el volumen en ml de la solución de
yodo empleado.
Con estas valoraciones se corrige el error que
puede originarse por la recombinación de parte del
SO2 ya liberado de los aldehídos, con el mismo
aldehído que estará presente en el líquido que se
valora.
También es posible causa de error, y especialmente cuando se trate de vinos tintos ricos en color
y extractos, el consumo de yodo por estas sustancias; para corregir este error se opera de la manera
siguiente:
Adicionar a 50 ml del vino, colocados en un
Erlenmeyer de 300 ml, un exceso de Acetaldehído
para que sea capaz de combinarse con todo el SO2
libre; dicha cantidad puede ser de unos 5 ml de
solución de Acetaldehído, de 7 g por litro. Se tapa
el matraz y después de un reposo de 30 minutos,
como mínimo, se añaden 3 ml de Acido Sulfúrico
diluido al 1/10 y después los de Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV necesarios hasta el viraje de almidón.
Sea V’’’ el volumen en ml necesarios.
La presencia de ácido ascórbico también puede
ser causa de error. Descontar el yodo correspondiente, considerando que 1 ml de Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV es consumido por 4,4 mg de ácido
ascórbico.
28(b).5. Cálculo.
SO2 libre = 32 (V - V’’’) mg/l.
SO2 combinado = 32 (V’ + V”) mg/l.
SO2 total = 32 (V + V’ + V” - V’’’) mg/l.
Con aproximación de 10 mg/l.
Para vinos pobres en SO 2, es conveniente
emplear yodo más diluido, solución 0,02N, reemplazando entonces el coeficiente 32 por el de 12,8
en los cálculos.
En los vinos tintos es conveniente, para apreciar el
viraje, iluminar con luz amarilla el fondo del Erlenmeyer
donde está el vino. Hay dispositivos sencillos a
base de simple bombilla con filtro preparado con
solución de potasio cromato, o bien con luz amarilla
de lámpara de vapor de sodio.
Cuando haya un interés especial en la determinación del SO2 libre, debe dejarse la muestra en
reposo durante 4 días, al abrigo del aire y a temperatura de 20°C. El análisis se realizará también a
20ºC.
28(b).7.1. Jaulmes, P. y Dienziede. “Méthode
Ripper double d’analyse de SO2. Bol.”. O. I. V., 274.
52-54, 1959.
d’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 7. 1969.
29. ACIDO SORBICO
29.1. Principio.
El ácido sórbico arrastrado por el vapor de agua
(constante de volatilidad 0,59), se valora en el destilado por espectrofotometría en el ultravioleta.
29.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta y cubetas
de cuarzo de 1 cm de espesor.
61
29.2.2. Matraces aforados de 20 ml y de 1 litro.
29.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.
29.3. Reactivos.
(o 121531 Potasio Sorbato PA)
131074 Agua PA-ACS
121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA
29.3.1. Solución (a) (destinada a catalizar la oxidación del ácido sulfuroso por el aire). Mezclar 0,5 g
de Sodio Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir
29.3.2. Solución (b) de Acido Sórbico (USP-NF)
PRS-CODEX de 20 mg/l. Introducir 20 mg de Acido
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX en un matraz aforado de 1 litro que contenga 900 ml de Agua PA-ACS
caliente, agitar, dejar enfriar y enrasar a 1 litro.
En vez de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX
puede emplearse 26,8 mg de Potasio Sorbato PA.
Destilar como en 21.4, 20 ml de vino adicionado
de 1-2 g de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.
Recoger 320-330 ml de destilado para conseguir la
más completa extracción del Acido Sórbico (USPNF) PRS-CODEX, que requiere unos 100 ml más
que los necesarios para la acidez volátil.
Tomar 5 ml del destilado, colocar en un matraz
aforado 20 ml y enrasar con la solución (a).
Llenar con esta mezcla una cubeta de cuarzo de
1 cm de espesor. Dejar la cubeta al aire durante
unos minutos. Determinar la absorbancia a 256 nm.
Para la prueba en blanco, sustituir los 5 ml de destilado por 5 ml de Agua PA-ACS.
Para obtener la curva patrón, determinar la
absorbancia de soluciones que contengan 0,5, 1,
2,5 y 5 mg/l de Acido Sórbico (USP-NF) PRSCODEX obtenidas diluyendo con Agua PA-ACS la
solución (b). La gráfica correspondiente a estos
valores es una línea recta.
29.5. Cálculo.
Calcular el ácido sórbico expresado en mg/l.
Acido sórbico = 0,2 . C . V mg/l.
62
C = contenido en mg/l de ácido sórbico determinado por comparación con curva patrón.
V = volumen en ml de destilado.
29.6. Referencias.
29.6.1. Jaulmes, P.; Mestres, R. y Mandrou, B.
“Annales des Falsifications et de l’Expertise Chimique”, 111, 1961.
d’Analyse des Vins. O. I. V., A30, 1-3, 1969.
30. CLORUROS
30.1. Principio.
Determinación directa de cloruros por potenciometría utilizando el electrodo Ag/AgCl.
30.2.1. pH-metro con escala que permita apreciar 2mV.
30.2.3. Electrodo Ag/AgCl, con una solución
saturada de potasio nitrato como electrolito.
30.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
30.3. Reactivos.
131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
30.3.1. Solución patrón de cloruros.- Disolver
2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
puro para análisis (máximo 0,005% de bromo) previamente desecado, en Agua PA-ACS hasta 1 litro.
1 ml de esta solución contiene 1 mg de ion Cloro.
30.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver
4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en una solución al 10% v/v de Etanol 96% v/v PA en Agua PAACS, hasta un litro. 1 ml de esta solución corresponde a 1 mg de ion Cloro.
30.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
30.4.1. Determinación del potencial del punto de
equivalencia.
Introducir 5,0 ml de la solución patrón de cloruros en un vaso de 150 ml.
Diluir aproximadamente a 100 ml con Agua PAACS y acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70%
PA-ACS-ISO (30.3.3). Introducir los electrodos.
Añadir 10 ml de la solución de Plata Nitrato, agitando moderadamente: adicionar los cuatro primeros
ml en fracciones de 1 ml y leer las correspondientes
lecturas en milivoltios; los dos siguientes ml, en
fracciones de 0,2 ml y continuar adicionando en
fracciones de 1 ml hasta que se hayan alcanzado
un total de 10 ml. Después de cada adición esperar
unos treinta segundos antes de hacer la correspondiente lectura en milivoltios. Llevar los valores así
obtenidos sobre un papel milimetrado en función
de los correspondientes ml de solución de Plata
Nitrato y a partir del punto singular de la curva
obtenida determinar el potencial del punto de equivalencia.
Para comprobar el potencial del punto de equivalencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la
M
solución patrón de cloruros, 95 ml de Agua PA-ACS
y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Introducir
el electrodo y valorar agitando, justamente hasta el
potencial del punto de equivalencia.
Repetir esta operación hasta obtener una buena
concordancia de resultados. Este control debe
efectuarse antes de determinar la concentración de
cloruros en cada serie de muestras a analizar.
30.4.2. Determinación.
Llevar a un vaso de 150 ml, 50,0 ml de vino.
Añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 1,0 ml de Acido
Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Valorar a continuación
siguiendo el procedimiento descrito anteriormente
hasta alcanzar el potencial del punto de equivalencia.
30.5. Cálculo.
La cantidad de cloruros se determina mediante
las expresiones:
0,02 n en g de ion cloro.
0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion cloro.
0,0329 n en g de sodio cloruro por litro.
Siendo:
n = volumen, en ml, de solución de plata nitrato
necesario para alcanzar el potencial del punto de
equivalencia.
30.6. Referencia.
d’Analyse des Vins. O. I. V. A 15j.
31. ACIDO BENZOICO
31.1. Principio.
Extracción por el éter del ácido benzoico presente en el vino. Tratamiento del extracto por la
mezcla nitro-sulfúrica y formación del ácido 3,5dinitrobenzoico, que es extraído con éter y después
recogido por la mezcla acetona-alcohol. La adición
de sodio hidróxido da origen a una coloración violeta. Esta reacción es sensible, específica y cuantitativa, siempre que se opere en condiciones que aseguren la transformación del ácido benzoico en
compuesto coloreado medible en el espectrofotómetro a 570 nm.
31.2.1. Espectrofotómetro que permita lecturas
a 570 nm.
31.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.
31.2.3. Matraces de 100 ml aforados.
31.2.4. Cápsulas.
31.3. Reactivos.
121014 Acido Benzoico PA
131074 Agua PA-ACS
121086 Etanol absoluto PA
121085 Etanol 96 v/v PA
de BHT PA-ACS-ISO
131524 Potasio Nitrato PA-ISO
31.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO.
31.3.2. Mezcla Acetona-Etanol: Mezclar 1.000 ml
de Acetona PA-ACS-ISO con 1.000 ml de Etanol
absoluto PA.
31.3.3. Mezcla Nitro-Sulfúrico: Añadir a 10 g de
Potasio Nitrato PA-ISO, 100 ml de Acido Sulfúrico
96% PA-ISO.
31.3.4. Solución Sodio Hidróxido-Etanol al 5%.
Añadir a 5 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACSISO (sin Na2 CO3) 50 ml de Agua PA-ACS.
Después de fría la mezcla se añade Etanol 96%
v/v PA hasta 100 ml.
La solución debe quedar limpia.
Vinos secos o con riqueza en azúcar de 100 g/l.
Añadir a 10 ml de vino puestos en ampolla de
decantación 2 ml de Acido Sulfúrico al 25% y 25 ml
de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO, dos veces seguidas. Decantar y filtrar
el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO, por papel seco, llevarlo a matraz aforado de 50 ml y enrasar.
Poner 20 ml de la solución de Eter Dietílico en
Erlenmeyer de 50 ml, evaporar aspirando los vapores mediante vacío, permaneciendo el Erlenmeyer
sumergido en baño de agua fría. Añadir al residuo
5 ml de la mezcla Nitrosulfúrica cuidando de empapar bien todo el residuo. Llevar después al baño de
agua hirviendo durante 35 minutos y agitando de
cuando en cuando, sobre todo al principio.
Enfriar en agua fría, añadir 5 ml de Agua PAACS, seguir enfriando y verter el contenido en una
ampolla de decantación de 250 ml. Enjuagar el
Erlenmeyer con 5 ml de Agua PA-ACS, volver a verter el contenido en la ampolla y añadir 30 ml de Eter
Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACSISO. Agitar cinco minutos. Eliminar la fase acuosa
después de cuidadosa decantación y lavar el Eter
Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACSISO con 5 ml de Agua PA-ACS. Decantar con cuidado (un lavado más prolongado originaría pérdidas
de dinitrobenzoico en la fase acuosa, por lo que es
preferible decantar bien, que volver a lavar).
Filtrar el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm
63
de BHT PA-ACS-ISO por filtro revestido con Sodio
Sulfato anhidro PA-ACS-ISO, lavar el filtro en seguida con 10 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO. Evaporar el filtrado en
una pequeña cápsula a 35°, arrastrar con tres adiciones de 5 ml de Acetona-Etanol, cada vez (previamente enfriado en nevera). Recoger todos estos
líquidos en un tubo de ensayo de tapón esmerilado
y aforado a 15 ml.
En un tubo de ensayo de tapón esmerilado y
con trazo de aforo a 15 ml, poner de 0,5 a 5 ml de
la anterior solución. Este volumen debe variar con la
riqueza supuesta, para obtener la reacción coloreada con el ácido dinitrobenzoico originado por 0,1 a
0,5 mg de Acido Benzoico PA. El método es válido
entre 0,03 y 1 mg, si se utiliza aparato capaz de
medir absorbancias superiores a 1,5.
Diluir el volumen de líquido puesto en el tubo,
con la mezcla Acetona-Etanol fría, hasta 14,7 ml y
añadir después 0,3 m Sodio Hidróxido lentejas PAACS-ISO diluido al 5% en Agua PA-ACS, agitar y
sumergir en hielo fundente.
Hacer la determinación en cubeta de 1/2-1 cm a
570-580 nm después de 30 minutos y antes de 70
minutos a partir del momento de la mezcla.
Utilizar como solución compensadora para comparación una mezcla de 14,5 de Acetona-Etanol
con 0,3 ml de Sodio Hidróxido al 5%.
Para obtener la curva patrón, preparar una solución valorada de 50 mg de Acido Benzoico PA en
100 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO. Diluir esta solución a 1/10 con
Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PAACS-ISO y tratar 10 ml de esta solución de 50 mg
por litro, como se ha indicado antes para la muestra.
La densidad de óptica varía linealmente con la
cantidad de Acido Benzoico.
31.5. Cálculo.
Llevar la absorbancia obtenida a la curva patrón
y expresar el correspondiente contenido de ácido
benzoico en mg/l.
31.6. Referencia.
31.6.1. Spanyar, E,; Kerel, E. y Kiszel, M.
“Zeitschrift für Lebenmittel Untersuchung und Forschung”, 1958.
32. BROMO TOTAL
64
32.1. Principio.
Saponificación cuidadosa, para evitar pérdidas,
de los ésteres del ácido brómico, eventualmente
presentes en el vino, transformación del rojo de
fenol en azul de bromofenol, y valoración colorimétrica o espectrofotométrica.
32.2.1. Cápsula de sílice de 7 cm de diámetro.
32.2.3. Horno eléctrico, recomendable con
regulador automático, para regular a 525°.
32.2.4. Espectrofotómetro o colorímetro capaces para lectura a 584 nm.
32.3. Reactivos.
182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP
142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
121489 Potasio Bromuro PA
171615 Rojo de Fenol RE-ACS
131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
32.3.1. Solución de Sodio Hidróxido al 50%.
Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS.
32.3.2. Lechada de Cal 4N (224 g de Calcio Oxido
natural escoriforme QP por litro con Agua PA-ACS).
32.3.3. Solución de Rojo de Fenol. Mezclar 0,24 g
de Rojo de Fenol RE-ACS y 24 ml de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. Añadir Agua PA-ACS hasta
1.000 ml.
32.3.4. Solución Tampón pH = 4,65. Mezclar
500 ml de Acido Acético 2 mol/l (2N) SV, 250 ml de
Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y 250 mI de Agua
PA-ACS.
32.3.5. Solución oxidante. A 2 g de Cloramina T
3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX añadir Agua
PA-ACS hasta un litro.
Preparar esta solución 48 horas antes de su
empleo y sólo será válida hasta quince días.
32.3.6. Solución reductora. Añadir a 25 g de
Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO Agua
PA-ACS hasta un litro.
32.3.7. Solución valorada de Potasio Bromuro.
Añadir a 1,489 g de Potasio Bromuro PA Agua PAACS hasta un litro.
Esta solución contiene 1 g de Bromuro por litro.
En el momento de su empleo se hacen dos diluciones sucesivas a 1/10 y se tendrá la solución a emplear que contiene 10 microgramos de Bromo por ml.
Adicionar 0,5 ml de Sodio Hidróxido al 50% y
1 ml de Lechada de Cal 4N a 50 ml del vino colocados en una cápsula de cuarzo de 7 cm de diámetro.
Esta adición proporciona un soporte infusible que
permite una buena combustión del carbón. Si el vino
es muy ácido conviene añadir antes sodio hidróxido
para llevarlo a pH 10 por lo menos.
M
Si el vino contiene compuestos orgánicos de
bromo o antisépticos bromados, dejar por lo menos
24 horas la muestra de vino alcalinizada, tapando la
cápsula con un vidrio de reloj, con el fin de saturar
los ésteres del ácido bromoacético, que son muy
volátiles.
Evaporar el líquido de la cápsula en baño de
agua, calentar el residuo con pequeña llama o en
baño de arena para eliminar las últimas trazas de
agua. Incinerar hasta cenizas blancas en el horno
eléctrico regulado a 525°C, sin pasar de esta temperatura para evitar pérdidas por sublimación.
Para facilitar la obtención de cenizas blancas,
retirar la cápsula después de 15 minutos de incineración, dejar enfriar y humedecer las cenizas aún grisáceas con unas gotas de Agua PA-ACS, evaporar
y volver al horno, repitiendo esta operación las
veces necesarias hasta conseguir cenizas blancas.
Añadir a las cenizas 5 ml de Agua PA-ACS
hirviendo y remover con una varilla, llevar a pH 4,64,5 con Acido Sulfúrico diluido 1:10 y ajustar con
Acido Sulfúrico diluido a 1/100 y completar con
Agua PA-ACS hasta 10 ml.
Para calcular la cantidad de Agua PA-ACS a añadir, tomar el volumen final igual a 10,2 ml, por considerar el aumento de volumen Agua PA-ACS más
Acido Sulfúrico, equivalente a 0,2 ml, que habrá sido
arrastrado en la precipitación de los 334 mg de Calcio Sulfato hidratado, formado al reaccionar parte
del Acido Sulfúrico con la Lechada de Cal 4N añadida.
Las restantes causas de pequeña variación de
volumen (como las del H2SO4 al pasar a Na2SO4 y
K2SO4), se consideran sin sensible influencia.
Triturar con varilla de vidrio el calcio sulfato precipitado y remover bien.
Diluir, si es necesario, la solución de cenizas hasta un contenido en bromo del vino de 1 mg/l, aproximadamente. Para comprobar cualitativamente si el
contenido en bromo del vino es superior o inferior a
1 mg/l, tomar 1 ml de la solución de cenizas del
vino, poner en tubo de ensayo y añadir una gota de
solución tampón pH 4,65, una gota de solución
Rojo de Fenol y una gota de solución Cloramina T.
Después de un minuto exactamente, detener la
reacción añadiendo una gota de solución de Sodio
Tiosulfato. Si la solución es amarilla, amarillo-parda
o amarillo-verdosa, el contenido en bromo es aproximadamente inferior a 1 mg/l, y si es azul, violeta o
violeta fugaz, el contenido en bromo es superior a
1 mg/l, siendo necesario diluir la solución.
Decantar el líquido y trasvasar a un tubo de
ensayo.
Poner en tubo de ensayo 5 ml de la solución de
cenizas y añadir 0,25 ml de Solución Tampón,
0,25 ml de Rojo de Fenol y 0,25 ml de Cloramina T.
Después de un minuto exactamente, paralizar la
reacción con 0,25 ml de solución de Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO. Determinar la absorban-
cia con fotocolorímetro o espectrofotómetro
mediante medida a 584 nm.
Para obtener la curva patrón, tomar la solución
de Potasio Bromuro con 10 mg de Bromo por litro,
alícuotas de 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50; 2,00
y 2,50 ml y llevar a 5 ml con Agua PA-ACS.
El contenido en bromo de estas soluciones es,
respectivamente, 0,5; 1; 1,5; 2,0; 2,5; 3; 4 y 5 mg/l.
Tratar cada una de estas soluciones de 5 ml
como la solución de cenizas y hacer las correspondientes determinaciones en el espectrofotómetro a
584 nm.
32.5. Cálculo.
Calcular el contenido en bromo expresado en
mg/l mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.
32.6. Referencias.
32.6.1. Jaulmes, P., y Bruns, S. “Valoration du
brome dans les vins”. Annales des Falsifications et
de Fraudes. 1952.
32.6.2. Saldoval, J. A., e Hidalgo, T. “Medida
espectrofotométrica de reacciones coloreadas muy
fugaces”. Boletín I. N. I. A. 19, 60, 40.
33. BROMO ORGANICO
33.1. Principio.
El coeficiente de dilución del ácido monobromoacético entre el éter y el agua acidulada con ácido
sulfúrico (que anula la ionización) es próximo a 5.
Los ésteres del ácido monobromoacético son
menos solubles en el agua que el mismo ácido, por
lo que es más fácil su extracción por el éter. Tres
lavados con un volumen de éter igual al del vino son
suficientes para extraer todo el bromo orgánico.
33.2. (1; 2; 3 y 4) como 32.2. (1; 2; 3 y 4).
33.2.5. Ampollas de decantación de 50 y
500 ml.
33.3. Reactivos.
182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP
142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
de BHT PA-ACS-ISO
121489 Potasio Bromuro PA
171615 Rojo de Fenol RE-ACS
PA-ACS-ISO
65
131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACSISO
33.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7) como 32.3. (1; 2; 3; 4;
5; 6 y 7).
33.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Colocar en una ampolla de decantación 20-200 ml
de vino (según la riqueza supuesta), añadir 5 g de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO por litro de vino, se
añade después un volumen de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO igual al
volumen de vino, agitar y decantar cuidadosamente
el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO. Repetir tres veces esta operación. Filtrar el Eter Dietilico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO, evaporar en frío en cápsula de
cuarzo que contenga 0,5 ml de Sodio Hidróxido al
50% y 1 ml de Lechada de Cal 4N. Después de
unas 24 horas de saponificación de los ésteres,
durante las que permanece la cápsula tapada con
un vidrio de reloj, incinerar progresivamente el residuo a la temperatura de 550°C. Arrastrar y disolver
las cenizas como en 32, realizando también en igual
forma la valoración colorimétrica del bromo.
33.5. Cálculo.
Calcular el contenido en bromo expresado en
mg/l a partir de la correspondiente curva patrón.
34. ACIDOS MONOBROMOACETICO Y
MONOCLOROACETICO DE ORIGEN
ORGANICO
(Método cualitativo) (Provisional)
34.1. Principio.
Siendo fraudulenta la presencia de compuestos
orgánicos monohalogenados, es suficiente para
investigar el fraude un análisis cualitativo.
Extracción de compuestos monohalogenados
en medio ácido con éter y transformación por adición de amonio en glicocola y sal de amonio por
combinación del halógeno desplazado. Separación
cromatográfica y revelado con plata nitrato, obteniéndose una mancha blanca para la plata cloruro y
otra negra para la plata bromuro.
66
34.2.1. Frascos de tapón esmerilado que ajuste
perfectamente, de 500 ml de capacidad.
34.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.
34.2.3. Agitador mecánico de unas 150 agitaciones por minuto.
34.2.4. Papel Watman número 1 para cromatografía.
34.2.5. Pipetas, micropipetas de 0,2 ml capilares divididas en milésimas.
34.2.6. Secador de aire.
34.2.7. Campana o recipiente para cromatografía y accesorios.
34.2.8. Pulverizador todo de vidrio y pulverización fina.
34.2.9. Campana de luz infrarroja.
34.3. Reactivos.
121050 Acido Pirogálico PA
131074 Agua PA-ACS
121118 Amonio Bromuro PA
131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO
121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA
de BHT PA-ACS-ISO
de BHT PA-ACS-ISO
34.3.2. Solución de Acido Sulfúrico: solución en
Agua PA-ACS al 1/3 en volumen.
34.3.3. Amoníaco 25% (en NH3) PA (sin cloruros).
34.3.4. Mezcla Acetona PA-ACS-ISO-Agua
PA-ACS en la proporción 100/20 en volumen.
34.3.5. Revelador de Plata Nitrato. Mezclar
85 mg de Plata Nitrato PA-ACS-ISO, 1 ml de Agua
PA-ACS, 5 ml de Amoníaco 25% (en NH3) PA y Etanol 96% v/v PA hasta 200 ml.
34.3.6. Revelador de Acido Pirogálico. Disolver
13 mg de Acido Pirogálico PA en 200 ml de Etanol
96% v/v PA. La solución puede durar tres días si se
conserva fría y al abrigo de la luz.
34.3.7. Solución testigo de Cloro. Disolver 100
mg de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en Agua PAACS y enrasar a 1.000 ml.
34.3.8. Solución testigo de Bromo. Disolver
100 mg de Amonio Bromuro PA en Agua PA-ACS y
enrasar a 1.000 ml.
34.4.1. Extracción del compuesto halogenado.
Tomar 100 ml de vino, llevar el matraz de 500 ml
con tapón esmerilado, añadir 5 ml de Acido Sulfúrico 1/3 y, acto seguido, 100 ml de Eter Dietílico
estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
Agitar brevemente hasta formación de ligera emulsión, destapar unos momentos el frasco y observar
la facilidad de separación.
A veces, como especialmente sucede con vino
de prensa, la separación es difícil, siendo necesario
nueva adición de Acido Sulfúrico 1/3 y de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
Observar si hay facilidad de separación y llevar
el frasco a un agitador mecánico, agitando durante
tres horas. Poner en ampolla de decantación de
M
250 ml de capacidad con el fin de separar el vino de
la fracción etérea; eliminar el Eter Etílico por completo filtrando rápidamente por ligera capa de algodón.
Añadir inmediatamente 10 ml de Amoníaco 25%
(en NH3) PA, agitar fuertemente durante tres minutos, con el fin de iniciar la formación del aminoácido
correspondiente (glicocola) y evitar la de otros compuestos. En este momento se forma la sal de amonio por combinación del halógeno desplazado.
Dejar reposar 24 horas para que la reacción sea
completa y proceder a la cromatografía.
34.4.2. Análisis cromatográfico.- Depositar con
micropipeta sobre papel Whatman número 1 para
cromatografía (28 x 15 cm) a lo largo de una línea
paralela al borde inferior y situada a 2,5 cm de este
borde, 0,02 ml de soluciones testigo de Cl y de Br, y
de 0,02 a 0,06 ml, según el contenido en halogenado, de las muestras de vino, separando cada aplicación 2 cm por lo menos. Enrollar el papel y colocar en el fondo de la cubeta con el disolvente y en la
cámara o campana de cromatografía.
Retirar el papel de la cubeta cuando el frente
del líquido ascendente se encuentre a 1 cm del
borde superior del papel, y dejar secar. Pulverizar
con la solución de Plata Nitrato y, estando húmedo
el papel, pulverizar nuevamente con solución de
Acido Pirogálico. Para mayor uniformidad del revelado, conviene desecar el papel con lámpara infrarroja.
La mancha correspondiente al Cl es de color
blanco y tiene un Rf de 0,29, y la mancha correspondiente al Br es de color marrón y tiene un Rf de
0,59.
34.5. Referencia.
34.5.1. Morales, J., y Vega, R. “Comunicación
de los Métodos Internacionales de Análisis”. O. I. V.,
número 245, 1967.
Los elementos necesarios para una volumetría.
35.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
251246 Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC
121515 Potasio Hidróxido lentejas 85% PA
(0,1N) SV
35.3.1. Solución de Potasio Permanganato
0,01N. Se conserva mal. Preparar a partir de Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En un
matraz aforado diluir a 1:10, Potasio Permanganato
0,02 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solución 0,01N obtenida.
35.3.2. Indicador de Indigo. Preparar una solución de 3 g/l de Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC.
Filtrar, tomar 50 ml de esa solución, añadir 50 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y Agua PA-ACS hasta
1.000 ml. Mezclar bien.
Colocar en un vaso de 50 ml del Indicador de
Indigo antes indicado y añadir 2 ml del vino. Inmediatamente adicionar gota a gota la solución de
Potasio Permanganato 0,01N, y al final, cada vez
más lentamente, hasta desaparición completa del
color azul y aparición de amarillo oro.
En vinos nuevos, el viraje es menos neto, por lo
que conviene tomar sólo 1 ml de muestra.
Hacer la prueba testigo para eliminar el permanganato por sustancias no polifenoles, sustituyendo
los 2 ml de vino por 2 ml de una solución de Acido
L(+)-Tartárico de 5 g/l, neutralizada hasta la mitad
con solución de Potasio Hidróxido y encabezada
hasta 10° de Etanol 96% v/v PA.
35. INDICE DE PERMANGANATO
35.1. Principio.
Valoración con una solución de permanganato
del poder reductor en frío de las sustancias polifenólicas del vino. Como todos los componentes
fenólicos del vino, a igual concentración no reducen
la misma cantidad de permanganato, se trata de
una valoración global que da un índice, al que se
denomina “índice de permanganato”; I Mn.
Constituye una expresión del contenido en sustancias fenólicas que están en relación con los
caracteres gustativos de dureza, astringencia o
aterciopelado sin que la relación sea absoluta. Es
una determinación especial para vinos tintos; en
blancos es poco apreciable y se presta a confusiones por consumo de permanganato por otros componentes del vino, que aquí tiene una influencia
relativa más marcada.
35.5. Cálculo.
Calcular el índice de permanganato o el título de
materias oxidables en frío del vino por permanganato expresado en meq/l.
Indice de permanganato = 5 (V-V’).
Materias oxidables en frío = 5 (V-V’) meq/l.
V = volumen en ml de solución de potasio permanganato 0,01N para oxidar el vino.
V’ = volumen en ml de solución de potasio permanganato 0,01N gastados en la prueba testigo.
35.6. Referencia.
35.6.1. Ribereau-Gayon et Peynaud. “Analyse et
Contrôle des Vins”. página 320, 1958.
67
36(a). DETERMINACION DE PRESENCIA
DE VINO PROCEDENTE DE
“HIBRIDOS PRODUCTORES
DIRECTOS”
(Método cualitativo)
36(a).1. Principio.
Transformación de la malvina, por la acción controlada de un oxidante apropiado, en una sustancia
que a la luz de Wood acusa viva fluorescencia de
color verde muy sensible.
36(a).2.1. Lámpara que emita luz fluorescente
de 366 nm de longitud de onda (luz de Wood).
36(a).2.2. Tubos de ensayo.
36(a).3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Amoníaco (gas)
131703 Sodio Nitrito PA-ACS
36(a).3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.
36(a).3.2. Sodio Nitrito al 1%. Disolver Sodio
Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.
36(a).3.3. Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amoníaco (gas)
36(a).4.1. Vinos tintos.- Para vinos tintos introducir en el tubo de ensayo: 1 ml de vino, una gota
de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV, y 1 ml de
Sodio
Nitrito al 1%. Agitar y esperar dos minutos, después
añadir 6 ml de Etanol 96% v/v PA con el 5% de
Amoníaco (gas). Agitar, esperar cinco minutos, filtrar
y observar el filtrado a la luz de Wood. Si hay malvina se apreciará la fluorescencia color verde.
36(a).4.2. Vinos rosados o claretes.- Introducir
en el tubo de ensayo 5 ml de vino, cinco gotas de
Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV y 1 ml de Sodio
Nitrito al 1%.
Agitar, esperar dos minutos y añadir después
Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amoníaco (gas).
Agitar y observar a la luz de Wood (366 nm).
68
36(a).5. Cálculo.
La intensidad de la fluorescencia verde es muy
sensible y puede acusar netamente la presencia de
una dosis de 0,2% de híbrido Oberlein en el vino,
siendo la tolerancia admitida hasta un 2% de riqueza de híbrido Oberlein.
36(a).6.1. Ribereau-Gayon, J.; Peynaud, E.
“Analyse et Contrôle des Vins”, pág. 320, 1958.
36(b). DETERMINACION DE PRESENCIA
DE VINO PROCEDENTE DE
“HIBRIDOS PRODUCTORES
DIRECTOS”
(Provisional)
36(b).1. Principio.
Determinación de malvina en vinos tintos secos
por cromatografía de papel. La fase móvil es la
solución Britten-Robinson, en las condiciones del
método. Observación del cromatograma a la luz de
Wood de 366 nm.
Como escala de comparación se emplea una
serie de manchas de soluciones de pinacianol, que
da fluorescencia similar a la de la malvina, aunque
con coloración verdosa en vez de la roja ladrillo de
la malvina, pero con intensidades de la fluorescencia proporcionales a las dosis aplicadas, haciendo
comparativos los resultados.
36(b).2.1. Fuente de luz de Wood (366 nm).
36(b).2.2. Cámara o campana para cromatografía y accesorios (soporte, pinzas, etc.).
36(b).2.3. Papel Arches para cromatografía.
36(b).3. Reactivos.
131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
Pinacianol o Azul de Quinaldina
(Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina)
36(b).3.1. Solución Britten-Robinson. Mezclar
3,92 g de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO,
2,40 g de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y
4,48 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO y añadir Agua
PA-ACS hasta 1.000 ml. El pH de esta solución es
1,81.
36(b).3.2. Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina).
36(b).3.3. Etanol 96% v/v PA neutro. Destilar
Etanol 96%v/v PA rectificado en presenia de Sodio
Hidróxido lentejas PA (5 g/l).
Hacer aplicaciones con micropipeta de 50 ul de
vino cada una, sobre papel a 2 cm del borde inferior, de tal forma que aparezcan manchas rectangulares de 2 cm de base por 0,5 cm de los bordes.
Aplicar 12 gotas de 4 ul en cada punto, secando
cada vez con corriente de aire a temperatura no
superior a 30°.
Llenar la cubeta hasta una altura de 2 cm con la
solución Britten-Robinson. Sumergir el papel sólo
1 cm y retirarlo cuando el líquido llegue a 1 cm del
M
borde superior. Ayudar a la desecación con corriente de aire no superior a 30° y terminar la desecación
al ambiente.
Para obtener una escala patrón preparar una
soIución en Etanol 96% v/v PA neutro de Pinacianol
o Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina) de 0,5 g/l y diluir a 1/10. Tomar alícuotas de 0,3; 0,4; 0,6; 0,8; 1,2; 1,7; 2,4; 3,5 y 5 ml
y completar con Etanol 96% v/v PA hasta 5 ml. A
estas mezclas les corresponde un contenido convencional de híbrido de 3; 4; 6; 8; 12; 17; 24; 35 y
50%, respectivamente.
Aplicar cada una de estas mezclas como anteriormente. Secar las manchas, recortar y pegar
mediante una cola celulósica (aplicar en pequeñas
dosis para que no desborde) a lo largo del borde de
una tira de cartulina negra.
Renovar la escala cada 30 o 45 días, pues pierde intensidad, por lo que hay que conservarla al
abrigo de la luz.
Observar las manchas del cromatograma a la luz
de Wood (366 nm) en cámara oscura y hacer rápidamente la comparación con la escala.
Para comprobar la eficacia de la lámpara se
hace el siguiente ensayo: Lavar por capilaridad con
Etanol 96% v/v PA el papel Arches de cromatografía. Aplicar solución alcohólica de Pinacianol de
1 mg/l en cantidad tal que la mancha sea visible y la
misma cantidad diluida a la mitad de una mancha
no visible en las mismas condiciones de observación. Regular la distancia de la lámpara a la hoja
para conseguir este efecto.
36(b).5. Cálculo.
Si al observar el cromatograma del vino a la luz
de Wood en las condiciones expuestas se aprecian
manchas de color rojo ladrillo y fluorescentes de un
Rf = 0,55 ± 0,09 será clara manifestación de presencia de malvina.
Para el análisis cuantitativo, comparar con la
escala patrón.
La intensidad del color de cada mancha de la
escala testigo de solución de pinacianol será valorada por el número de mg de pinacianol por litro de
solución alcohólica con que se ha hecho la mancha
sobre el papel.
Con esta definición convencional de la intensidad del color de las manchas puede establecerse
también, por comparación de estas manchas con
las correspondientes a las de cromatogramas de
vinos con mezcla conocida de “híbrido”, un coeficiente proporcional a la riqueza de éste presente en
los mismos.
La sensibilidad de las manchas pueden acusar
el 1% de híbrido Oberlein (elegido como patrón).
La dosis correspondiente al valor 2 de la escala
convencional, o sea el 2% de híbrido Oberlein, es la
máxima tolerada provisionalmente por la Convención Internacional.
36(b).6.1. Dorier y Verelle. “Comunication a la
Société des Experts-Chemistes de France”. 6 enero
1965.
d’Analyse des Vins. O. I. V. A18, 1-4, 1969.
37. METANOL
(Alcohol Metílíco)
(Método del ácido cromotrópico)
37.1. Principio.
Oxidación del alcohol metílico a formaldehído
por potasio permanganato en presencia de ácido
fosfórico y medida espectrofotométrica de la reacción coloreada del formaldehído con ácido cromotrópico. Coloración violeta específica del formaldehído.
37.2.2. Baño de agua con regulación a 60-75°.
37.2.3. Espectrofotómetro que permita lectura a
575 nm.
37.2.4. Matraz esférico de cuello largo, de
500 ml y refrigerante con alargadera.
37.3. Reactivos.
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica
2-hidrato RE
131074 Agua PA-ACS
131698 Sodio Disulfito PA-ACS
141717 Sodio Sulfito anhidro PRS
37.3.1. Solución de Potasio Permanganato.
Disolver 3 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO
y 15 ml de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
en 100 ml de Agua PA-ACS. Preparar mensualmente.
37.3.2. Solución de Acido Cromotrópico Sal
Disódica 2-hidrato. Solución al 5%. Filtrar si no queda clara. Preparar semanalmente.
37.3.3. Solución al 2% p/v de Sodio Sulfito anhidro PRS.
Diluir o ajustar la muestra hasta una concentración total de alcohol de 5-6% en volumen.
Utilizando 50 ml de muestra, destilar en destilador simple, recogiendo 40 ml de destilado en
baño de hielo. Diluir hasta 50 ml con Agua PAACS (si se ha determinado previamente el alcohol,
el destilado puede ajustarse a 5-6% de concentra-
69
ción de alcohol y utilizarse para esta prueba). Si hay
más de 0,05% de metanol por volumen, diluir hasta
aproximadamente esa concentración con Etanol
96% v/v PA previamente diluido al 5,5% con Agua
PA-ACS. Para muestras que contengan menos de
0,05% de metanol, poner 200 ml de destilador eficiente de fraccionamiento, colocar el sistema de
destilación reflujo total durante 15 minutos y luego
destilar lentamente a elevada proporción de reflujo
(por lo menos 20:1). Recoger 10 ml de destilado y
diluir hasta 160 ml con Agua PA-ACS.
Pipetear 2 ml de solución de Potasio Permanganato en un matraz aforado de 50 ml. Enfriar en
baño de hielo, añadir 1 ml de muestra diluida y fría y
dejar 30 minutos en baño de hielo. Decolorar con un
poco de Sodio Disulfito PA-ACS seco (*) y añadir
1 ml de solución de Acido Cromotrópico. Añadir lentamente con agitado y en baño de hielo 15 ml de
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y colocar 15 minutos
en baño de agua caliente (60-75°). Enfriar, añadir
una cantidad suficiente de Agua PA-ACS para llevar
aproximadamente a la marca de 50 ml, mezclar y
diluir hasta volumen con Agua PA-ACS a la temperatura ambiente. Leer la absorbancia a 575 nm utilizando como reactivo en blanco Etanol al 5,5% tratado análogamente a la forma descrita. Tratar solución
patrón de Metanol PA-ACS-ISO, que contenga
0,025% por volumen de Metanol PA-ACS-ISO, en
Etanol al 5,5% simultáneamente en la misma forma,
y leer la absorbancia (la temperatura del patrón y de
la muestra no debe diferir en más de 1°, ya que la
temperatura afecta a la intensidad del color).
37.5. Cálculo.
Calcular el contenido en metanol expresado en
porcentaje.
A
Metanol = 0,025 —— F
A’
A = absorbancia de la muestra.
A’ = absorbancia de la solución patrón de metanol.
F = factor de dilución de la muestra.
Si el color de la muestra es demasiado intenso,
diluir con reactivo en blanco. No diluir más de tres
veces porque la relación de ácido cromotrópico a
metanol se reduce demasiado.
70
37.7. Referencia.
37.7.1. “Association of Official Agricultural Chemists”. Official Methods of Analysis, pág.138, 1965.
(*). En el original indica NaHSO3 seco. El Sodio
Bisulfito como tal fórmula sólo existe en solución
acuosa y por tanto debe entenderse Sodio Disulfito,
seco, de fórmula Na2S2O5.
38. NITROGENO
(Método Kjeldhal)
38.1. Principio.
Transformación del nitrógeno orgánico en amonio sulfato por ataque con ácido sulfúrico en ebullición en presencia de sustancias catalizadoras que
acortan el tiempo de la mineralización y adición de
sal potásica que eleve el punto de ebullición. Destilación por ebullición de vapor recogiendo el destilado en volumen conocido de solución de ácido sulfúrico.
Valoración con solución de sodio tiosulfato, del
yodo liberado por el ácido sulfúrico al añadir al
destilado solución de potasio yoduro-potasio
yodato.
38.2.1. Aparato micro-Kjeldhal.
38.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
122726 Cobre II Sulfato anhidro PA
Papel Tornasol
131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
131540 Potasio Yodato PA-ISO
141625 Selenio metal, polvo PRS
38.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
38.3.2. Catalizador de Selenio. Mezclar bien pulverizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO,
20 g de Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio
metal, polvo PRS.
38.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel
Tornasol.
38.3.4. Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.
38.3.5. Potasio Yoduro solución al 4%. Disolver
Potasio Yoduro PA en Agua PA-ACS y ajustar a la
concentración indicada.
38.3.6. Potasio Yodato solución al 5%. Disolver
Potasio Yodato PA-ISO en Agua PA-ACS y ajustar a
la concentración indicada.
38.3.7. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N. En
un matraz aforado diluir a 1:5 Sodio Tiosulfato 0,1
mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el
factor de la solución 0,02N obtenida.
38.3.8. Solución concentrada de Almidón soluble RE.
Poner en el matraz Kjeldhal 50 ml de vino, evaporar a ebullición lenta hasta unos 10 ml, añadir
10 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 0,6 g de
M
la mezcla pulverizada y bien uniformada de Cobre
II Sulfato anhidro PA, Selenio metal, polvo PRS y
Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, continuar calentando primero lentamente y después enérgicamente,
hasta decoloración, y proseguir unos minutos
más. Si es necesario se van añadiendo nuevas
dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO de 5 en
5 ml.
Enfriar, pasar el contenido a matraz aforado de
100 ml arrastrando el residuo con pequeñas porciones de Agua PA-ACS para enjuagar varias veces el
matraz, comprobando que los últimos lavados no
dan trazas de reacción ácida al papel de tornasol.
Tomar una alícuota de 20 ml y llevar al matraz
del aparato de destilación, adicionando unas gotas
de Fenolftaleína solución 1% RE. En un vaso cilíndrico de unos 200 ml, se añaden 10 ml de Acido
Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.
Añadir al matraz solución de Sodio Hidróxido 1
mol/l (1N) SV (4%) en cantidad suficiente para viraje
de la Fenolftaleína solución 1% RE y se encaja rápidamente en su sitio. Conectar el aparato de destilación con el generador de vapor de agua y comenzará el arrastre del amoníaco pasando al
refrigerante y recogiendo el destilado en la Solución
Sulfúrica.
Después de 15-20 minutos, comprobar con
papel tornasol si una gota del destilado no acusa
reacción alcalina. En este caso separar el vaso y
proceder a la valoración.
Añadir al vaso con el Acido Sulfúrico 0,01 mol/l
(0,02N) SV 4 ml de Potasio Yoduro al 4% y 2 ml de
Potasio Yodato al 5%. Mezclar con una varilla y
después de 20 minutos valorar el yodo liberado
con solución de Sodio Tiosulfato 0,02N empleando como indicador 5-10 ml de solución de Almidón.
38.5. Cálculo.
Calcular el nitrógeno expresado en meq/l o en
mg/l.
10 - V
Nitrógeno = ——— x 100 meq/l
50
10 - V
Nitrógeno = ——— x 100 x 14 mg/l
50
V = volumen en ml de solución de sodio tiosulfato 0,02N.
39(a). FLUOR
(Provisional)
39(a).1. Principio.
Incineración de 525° del vino en presencia de un
exceso de calcio o magnesio, destilación en
corriente de vapor del ácido fluorhídrico a 135140°, valoración del ácido destilado a pH 3,6 por
solución de torio nitrato en presencia de alizarina
sodio suifonato.
39(a).2.1. Aparato de Truhaut, que consta de
generador de vapor, barbotador de pared doble,
ampolla para la introducción de la solución sulfúrica
de las cenizas magnéticas, refrigerante de retorno y
refrigerante de West para la salida del destilado
(figura 39.I.).
39(a).2.2. Cápsula de platino o níquel para las
cenizas.
39(a).2.3. Horno eléctrico regulable para 525°.
39(a).2.4. Matraz de 250 ml.
39(a).2.5. Dos cápsulas de porcelana iguales, de
unos 10 cm de diámetro.
39(a).2.6. Material para volumetría.
39(a).3. Reactivos.
2-hidrato RE
131057 Acido Sulfanílico PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE
211376 Lana de Vidrio lavada QP
131394 Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS
211276 Magnesio Oxido QP
141801 Plata Sulfato PRS
171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE
Tetracloroetano
Torio Nitrato 4-hidrato
39(a).3.1. Solución Tampón de pH = 3,1. Mezclar 100 ml de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE,
303 ml de Agua PA-ACS y 97 ml de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.
39(a).3.2. Solución de Torio Nitrato 0,01N. Disolver 1,3806 g de Torio Nitrato 4-hidrato, en un litro
de Agua PA-ACS.
39(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.
39(a).3.4. Acido Sulfúrico al 1/10. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua
PA-ACS.
39(a).3.5. Azul de Bromotimol solución 0,04%
RE.
39(a).3.6. Magnesio Oxido al 1/10. Suspensión
de Magnesio Oxido QP en Agua PA-ACS.
71
39(a).3.7. Magnesio Acetato al 1/10. Disolver
Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS en Agua PAACS.
39(a).3.8. Solución Spadns. Añadir a 0,02 g de
Spadns, Agua PA-ACS hasta 100 ml. El Spadns
resulta de la combinación del Acido Sulfanílico PAACS con el Acido Cromotrópico Sal Disódica
2-hidrato RE. Su proceso de preparación es laborioso. Se encuentra preparado por Eastman-Kodak.
39(a).3.9. Plata Sulfato PRS.
REFRIGERANTE LIEBIG-WEST
40 cm, BOCAS 14/23
REFRIGERANTE DE BOLAS
DE REFUERZO 30 CM.
BOCAS 14 / 23
39(a).4.1. Incineración.- Poner 20 ml de vino en
cápsula de platino o de níquel, añadir 2 ml de suspensión de Magnesio Oxido al 1/10 y 4 ml de Magnesio Acetato al 1/10. Evaporar, desecar y calcinar
en el horno a 550°C.
39(a).4.2. Destilación.- Colocar en el barbotador
del aparato Truhaut 20 ml de Acido Sulfúrico 96%
PA-ISO diluido al 50% en Agua PA-ACS, 0,5 g de
Lana de Vidrio lavada QP y 0,5 g de Plata Sulfato
PRS, con el fin de retener el Acido Clorhídrico. Llevar el barbotador a 146°C por ebullición del Tetracloroetano (punto de ebullición 146°) en la doble
pared (A) y forzar la corriente de vapor de agua a la
velocidad de 5 g por minuto. Conviene calentar previamente el Tetracloroetano en la doble pared del
aparato antes de que barbote el vapor en el líquido,
por haberse observado que así se evitan la formación de burbujas de espuma, que son un peligro
por posible desborde y paso al refrigerante de salida.
Se continúa la destilación hasta recoger unos
100 ml de destilado.
Con estas operaciones queda el aparato desprovisto de posible presencia de flúor.
Disolver las cenizas en el menor volumen posible
de Acido Sulfúrico al 1/10 e introducir en el barbota-
Figura 39.I. Aparato de Truhaut
72
El barbotador (C) tiene una pared doble (A) donde se hierve el tetracloroetano a 146°. El tubo de entrada de
vapor de agua rodea (E) la pared interna y penetra en su interior, prolongándose verticalmente hasta casi el fondo.
El refrigerante de retorno para condensar los vapores de tetracloroetano se conecta en (B).
La ampolla (F), con llave y tapón esmerilado, se ajusta a la boca del barbotador y el tubo penetra hasta la
misma altura que el punto de entrada del tubo de vapor de agua. La salida del destilado comunica con refrigerante de West, vertical que se prolonga por alargadera tubular cuyo pico se sumerge en el agua que contiene el matraz receptor.
M
dor, enfriando previamente el líquido del barbotador
antes de verter en él la solución sulfúrica de cenizas. Proseguir la destilación con el barboteo de
vapor, comenzando por calentar previamente,
como se ha indicado, el Tetracloroetano contenido
en la doble pared. Recoger unos 100 ml de destilado en un matraz de 250 ml que contenga 5 ml de
Agua PA-ACS, de forma que quede sumergido el
pico de la alargadera del refrigerante.
39(a).4.3. Valoración.- Descarbonatar el destilado por agitación en frío y con vacío neutralizar con
Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV en presencia de
Azul de Bromotimol solución 0,04% RE como indicador. Llevar después a una cápsula de porcelana
blanca bien limpia, siendo recomendable frotar previamente su interior con pasta silícea y enjuagarla
con Agua PA-ACS.
Añadir a 50 ml del destilado 1 ml de solución
acuosa de Spadns y 1 ml de Solución Tampón de
pH = 3,1. Añadir con microbureta solución de Torio
Nitrato 0,01N hasta viraje a rojo violeta.
Para apreciar el punto del viraje se compara la
tonalidad del color con la de una valoración testigo
hecha en otra cápsula igual y con el mismo volumen
de Solución Tampón, 1 ml de Spadns y 0,05 ml de
solución de Torio Nitrato. Se ha observado que con
0,1 ml de Torio Nitrato es más clara la comparación
de colores.
Restar del volumen de Torio Nitrato gastado en
el líquido problema los 0,05 y 0,1 ml añadidos al
testigo.
39(a).5. Cálculo.
Equivalencia: 1 ml de solución de torio nitrato
0,01N < > 0,19 mg de flúor.
Expresar los resultados en mg de flúor por litro y
con una aproximación de unos 0,5 mg.
39(a).6.1. Fabré, R.; Trumant, A.; Bouquet, A., y
Bernuchon, J. (1960-1965), Cont. Rendu Aca.
Sciences.1965, 240, pág. 211; 1959, 248, pág.
504.
39(b). FLUOR
39(b).1. Principio.
Determinación directa del flúor total por potenciometría utilizando un electrodo iónico específico.
Para eliminar las posibles causas de error se le
adiciona al vino una solución tampón.
39(b).2.1. pH-metro con escala que permita
apreciar 0,1 mV.
39(b).2.2. Electrodo selectivo de flúor.
39(b).2.3. Electrodo de referencia de calomelanos.
39(b).2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
39(b).2.5. Recipientes de plástico de 50-100 ml
de capacidad para mezclas y matraces en material
de plástico para conservar las soluciones patrón.
39(b).2.6. Pipetas de precisión graduadas en
microlitros.
39(b).2.7. Agitador magnético.
39(b).3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131675 Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO
39(b).3.1. Solución patrón de fluoruros 10–2M
–
conteniendo 190 mg de F por litro. Pesar 0,4198 g
de Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO (desecado durante
cuatro horas a 106°C antes de su utilización), disolver y enrasar a un volumen de 1.000 ml.
39(b).3.2. Solución Tampón de Acido orto-Fosfórico 0,75 M. Diluir convenientemente Acido ortoFosfórico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
39(b).4.1. Verificación del electrodo y determinación de su pendiente.
A partir de la solución 3.1 preparar, mediante
diluciones, soluciones de concentraciones conocidasde 10–3M, 10–4M y 10–5M, que contienen, respectivamente, 19; 1,9 y 0,19 mg de F – por litro.
Tomar dos vasos de precipitados; en uno de
–
ellos colocar 25 ml de la disolución 10–3M de F ,
adicionar 5 ml de solución Tampón de Acido ortoFosfórico y determinar su potencial agitando de
forma moderada mientras dure la medida. En el otro
–
vaso, poner 25 ml de disolución 10–4M de F , 5 ml
de solución Tampón de Acido orto-Fosfórico y
determinar su potencial, agitando como anteriormente. La diferencia entre los dos potenciales es la
pendiente del electrodo (S) y cuyo valor debe ser,
aproximadamente, 59 mV.
39(b).4.2. Determinación.
Tomar 25 ml de vino, adicionar 5 ml de la solución Tampón y determinar su potencial (E1). A continuación, y en el mismo vaso, adicionar un ml de
–
disolución 10–3M de F y determinar su potencial (E2)
Si el salto de potencial es pequeño, indica que la
–
concentración de F es muy alta y hay que diluir la
muestra hasta que el salto alcanzado esté comprendido alrededor de 20-40 mV.
Los volúmenes de muestra y solución Tampón
pueden ser modificados en función de la forma y
disposición de los electrodos utilizados.
39(b).5. Cálculo.
La cantidad de flúor, expresada en mg/l, nos
viene determinada por la fórmula:
73
V.C
CF- = ———————————
mE
25 [(antilog —— ) - 1]
S
Siendo:
–
CF- = concentración, en mg/l, de F en el medio.
V = volumen, en ml, de solución patrón de fluoruro añadida.
C = concentración, en mg/l, de la solución
patrón adicionada.
S = pendiente del electrodo.
m E = diferencia de los potenciales E1 y E2 obtenidos en 39(b).4.2.
Este valor se deberá multiplicar por el factor de
dilución correspondiente, en caso de haber sido necesario efectuarla.
39(b).6.1. Todas las soluciones deben conservar
una temperatura próxima a 25°C ±1°C durante la
medida .
39(b).7.1. H. E. Haller y C. H. Junge, 1974, O. I.
V. 317/FV/518 y 133/FV/439.
39(b).7.2. Deschreider, A., y Mme. R. Meaux,
1974. Determination des fluor dans les vins et eaux
minerales naturelles au moyen d’une electrode ionique specifique.
40. HIDROXIMETILFURFURAL
(Provisional)
40.1. Principio.
El hidroximetilfurfural se produce al calentar en
exceso los mostos para su concentración, desulfitación o pasterización. La presencia de hidroximetilfurfural en ciertos vinos dulces se considera como
indicio de la adición de mostos.
Este método está basado en la reacción de
Winckler (formación de un complejo rojo para la
acción del hidroximetilfurfural sobre la p-toluidina y
ácido barbitúrico). Se utiliza para los vinos blancos y
tintos, previa extracción con éter etílico en los
segundos.
74
40.2.1. Espectrofotómetro y accesorios (cubeta
para 1 cm de espesor del líquido).
40.2.2. Matraces aforados.
40.2.3. Embudo de decantación con tapón
esmerilado y de 100 ml de capacidad.
40.2.4. Cápsula de porcelana de unos 10 cm de
diámetro.
40.3. Reactivos.
Acido Barbitúrico
131090 2-Propanol PA-ACS-ISO
de BHT PA-ACS-ISO
162378 P-Toluidina PS
40.3.1. Reactivo de p-Toluidina. Disolver 10 g de
p-Toluidina PS en 50 ml de 2-Propanol PA-ACSISO. Llevar a matraz aforado de 100 ml, añadir
10 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y completar hasta el enrase con 2-Propanol PA-ACS-ISO.
Este reactivo dura 4 días.
40.3.2. Reactivo de Acido Barbitúrico. Se introduce en matraz aforado de 100 ml, 0,5 g de Acido
Barbitúrico desecado a 105°C y unos 70 ml de
Agua PA-ACS. Se calienta ligeramente en baño de
agua, se enfría y enrasa con Agua PA-ACS.
Llevar 10 ml del vino a embudo de decantación
y añadir 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar durante 3 minutos, decantar el Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO a cápsula de porcelana
que contenga 2 ml de Agua PA-ACS, repetir cuatro
veces la extracción del residuo del embudo con
otros 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez y decantar
igualmente a la cápsula. Dejar evaporar el éter en
medio ambiente. Al residuo de evaporación añadir
Agua PA-ACS hasta 10 ml, agitar y tomar 2 ml para
análisis.
Mezclar los 2 ml tomados con 5 ml de Reactivo
de p-Toluidina y un 1 ml de Acido Barbitúrico llevándolos inmediatamente a la cubeta del espectrofotómetro (de un cm de espesor del líquido) y hacer
rápidamente la lectura de la absorbancia a 546 nm.
Emplear como líquido de referencia el Agua
PA-ACS en lugar de Acido Barbitúrico, o sea, 3 ml
de Agua PA-ACS más 5 ml de Reactivo de p-Toluidina.
40.5. Cálculo.
Determinar el contenido en hidroximetilfurfural
expresado en mg/l por comparación con la correspondiente curva patrón teniendo en cuenta el factor
de dilución.
En el caso de vinos turbios centrifugar previamente. Si hay presencia de CO2 eliminarlo agitando
el vino en un matraz.
40.7. Referencias.
40.7.1. Sandoval, J. A.; Hidalgo, T. “Puesta a
punto de un método para análisis cuantitativo
espectrofotométrico de hidroximetilfurfural en los
vinos”. Boletín I. N. I. A., 16: 4. 454-469,1967.
40.7.2. Amerine, M. A. “Hydroximethyl-furfural in
California Wines”. Food Research. 13: 264-269, 1948.
M
41. DETERMINACION CUALITATIVA DE
ACIDO SORBICO, BENZOICO,
p-CLOROBENZOICO, SALICILICO,
p-HIDROXIBENZOICO Y SU
ESTER ETILICO
41.1. Principio.
Extracción con éter etílico de los antisépticos del vino
previamente acidificados. Separación por cromatografía de capa fina. Identificación a la luz ultravioleta y
reveladores específicos.
41.2.1. Extractor en continua de Palkin (figura 41.I)
que comporta un tubo A de 55 cm de longitud y 3,8
cm de diámetro. La parte superior va unida a un refrigerante de bolas mediante boca esmerilada 34-25. A
30 cm de la base y formando un ángulo de 60º se
encuentra un tubo lateral acodado a los 13 cm, formando un ángulo de 120°. Este tubo lateral termina
en una junta esmerilada 24/40 en bisel, lo que permite su unión a un matraz de 50 ml que se calienta
sobre una placa. En el tubo A se introducen bolitas de
vidrio y el tubo interior (B) de 48,5 cm de longitud y
1,2 cm de diámetro, terminando en una placa de
vidrio poroso.
41.2.2. Agitador mecánico (ver 41.6.1).
41.2.3. Erlenmeyer de 500 ml de boca esmerilada.
41.2.4. Baño María.
41.2.5. Estufa eléctrica (200º C).
41.2.6. Embudos de separación de 500 ml.
41.2.7. Cápsulas de porcelana de 70-80 cm de
diámetro.
41.2.8. Equipo de cromatografía de capa fina.
41.2.9. Placas de vidrio de 20 x 20 cm.
41.3. Reactivos.
Acido p-Clorobenzoico
163231 Acido 4-Hidroxibenzoico PS
141045 Acido Salicílico (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
131057 Acido Sulfanílico PA-ACS
Acido Tiobarbitúrico
131074 Agua PA-ACS
BHT PA-ACS-ISO
132063 n-Hexano PA-ACS
131252 Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO
164542 4-Nitroanilina PS
122006 n-Pentano PA
Polvo de Poliamida para Cromatografía
131500 Potasio Dicromato PA-ISO
Revelador F 254
131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO
131703 Sodio Nitrito PA-ACS
de BHT PA-ACS-ISO.
41.3.2. Metanol PA-ACS-ISO.
41.3.3. Etanol 96% v/v PA
41.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO diluido a
20% (v/v) con Agua PA-ACS.
41.3.5. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO.
41.3.6. Polvo de Poliamida para cromatografía
Macherey-Nagel o Merck.
41.3.7. Revelador F 254 Merck o equivalente.
41.3.8. Solventes:
n-Pentano PA: 10 partes.
n-Hexano PA-ACS: 10 partes.
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO: 3 partes.
41.3.9. Soluciones patrones. Preparar soluciones de 0,1 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA con
los Acidos Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX, p-Clorobenzoico, Salicílico (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,
4-Hidroxibenzoico PS y sus ésteres. Preparar una
solución de 0,2 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA
con el Acido Benzoico PA.
41.3.10. Preparación de las placas. 10 g de
Poliamida con el 3% de indicador fluorescente se
homogenizan durante 20 segundos en agitador
mecánico con 35 ml de Metanol PA-ACS-ISO y
25 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PAACS-ISO. Las placas impregnadas se secan durante 1 hora a 80°C.
41.3.11. Solución hidroalcohólica conteniendo
0,15 g por 100 de Potasio Dicromato PA-ISO
(41.6.2).
41.3.12. Solución saturada de Acido Tiobarbitúrico en Etanol 96% v/v PA (0,1% aproximadamente)
(41.6.2).
41.3.13. Solución de 0,5 g de 4-Nitroanilina en
100 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV (41.6.3).
41.3.14. Solución de Sodio Nitrito al 5% (41.6.3).
Disolver Sodio Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS.
41.3.15. Solución de Sodio Acetato al 20%
(41.6.3). Disolver Sodio Acetato anhidro PA-ACS en
Agua PA-ACS.
41.3.16. Solución de Sodio Carbonato al 15%
(41.6.3). Disolver Sodio Carbonato 10-hidrato PAISO en Agua PA-ACS.
41.3.17. Reactivo de Pauly. Disolver 4,5 g de
Acido Sulfanílico PA-ACS en 45 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV (calentando, diluir la solución a
500 ml en Agua PA-ACS, 10 ml de la solución diluida se enfrían con hielo), se le añaden 10 ml de solución acuosa de Sodio Nitrito al 4,5% también fría. El
75
reactivo resultante se mantiene durante 15 minutos
a 0°C (a esta temperatura es estable de 1 a 3 días)
y se le añade un volumen igual de solución acuosa
de Sodio Carbonato al 10% en el momento de pulverizar las placas (41.6.4).
Acidular 100 ml de vino o mosto con 10 ml de
Acido Sulfúrico al 20%.
76
Figura 41.l. Extractor continuo de Palkin
Extraer tres veces con 20 ml de Eter Dietílico
estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO
cada vez, reuniendo las soluciones etéreas; o bien,
durante 6 horas en el extractor continuo de Palkin
con 175 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO a una velocidad de reflujo de 500-600 ml/hora.
Los extractos etéreos se desecan con 6 g de
Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO durante 12
horas. Filtrar y el Eter Dietílico estabilizado con p6
ppm de BHT PA-ACS-ISO se evapora a sequedad
en baño María 40-45°. El residuo se disuelve en un
ml Etanol absoluto PA tomando cantidades de 5 a
10 el para cromatografía. Mediante el tratamiento
de los extractos etéreos con 5 ml de Sodio Hidróxido 2,5N (diluir a 1:1 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV
con Agua PA-ACS) y acidulado de nuevo con 5 ml
de Acido Sulfúrico al 20% se obtendrá en los cromatogramas las manchas correspondientes a los
ácidos liberados por efecto de la saponificación.
Para obtener el desarrollo de los cromatogramas, depositar la muestra en forma de manchas
puntuales de 5-10 el.
El desarrollo se lleva a cabo en cámara saturada
con el eluyente y a temperatura ambiente. Dejar
migrar el solvente hasta una altura de unos 15 cm
(una hora y media a dos horas y media).
Retirar la placa de la cubeta y dejar secar a la
temperatura ordinaria.
41.5. Cálculo.
Observación a la luz ultravioleta (360 nm).
Los conservadores aparecen de abajo arriba en
el siguiente orden: ácido 4-hidroxibenzoico, ésteres del ácido 4-hidroxibenzoico, ácido salicílico,
ácido p-clorobenzoico, ácido benzoico y ácido
sórbico.
Para detectar el ácido sórbico pulverizar primeramente el cromatograma con la solución 41.3.11 y
seguidamente con la 41.3.12. Calentar la placa a
80°C, 5-10 minutos. La mancha de ácido sórbico
aparece de color rojo sobre fondo ocre.
Para detectar los ácidos salicílico y 4-hidroxibenzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoico, pulverizar la placa con una mezcla compuesta de 2 ml de 41.3.13 más 3-5 gotas de 41.3.14
más 8 ml de 41.3.15, añadiéndolos en este
orden. Una vez seca la placa aparecen las manchas correspondientes a los tres componentes
citados de color amarillo. La materia colorante
propia de los vinos toma colores que van del
amarillo al naranja. Pulverizar de nuevo con la
solución 41.3.16. La manchas del ácido 4-hidroxibenzoico toman color rojo; las del éster etílico
del ácido 4-hidroxibenzoico, color rosa, y las del
acido salicílico, amarillo limón. Los distintos componentes de la materia colorante toman colores
que van desde distintos tonos de ocre al pardo y
también verde y azulado.
M
Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoico y
salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoico se utiliza empleando el reactivo 41.3.17.
41.6.1. Para el análisis cualitativo.
41.6.2. Para detectar el ácido sórbico.
41.6.3. Para detectar los ácidos salicílico y 4-hidroxibenzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoico.
41.6.4. Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoico y salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoico.
42. INVESTIGACION DE DERIVADOS
MONOHALOGENADOS DEL
ACIDO ACETICO
42.1. Principio.
Extracción de los derivados monohalogenados
del ácido acético con éter etílico previamente acidificado. Formación de tioindigo, de color rojo, que se
extrae con cloroformo.
El método permite detectar de 1,5 a 2 mg/l de
ácido monocloroacético y las cantidades correspondientes de otros derivados monohalogenados.
42.2. Material, aparatos y reactivos.
Acido Tiosalicílico
131074 Agua PA-ACS
131252 Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO
de BHT PA-ACS-ISO
131503 Potasio Hexacianoferrato lll PA-ACS
de BHT PA-ACS-ISO.
42.2.2. Acido Sulfúrico (1 + 4) (v/v) . Diluir Acido
Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
42.2.3. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO
desecado en estufa a 105°C.
42.2.5. Acido Tiosalicílico (2 Mercaptobenzoico)
al 3% (p/v) en Sodio Hidróxido 1,5N (diluir Sodio
Hidróxido 2 mol/l (2N) SV con Agua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada).
42.2.6. Potasio Ferricianuro al 2% (preparar
inmediatamente antes de usar). Disolver Potasio
Hexacianoferrato lll PA-ACS en Agua PA-ACS.
42.2.7. Triclorometano estabilizado con etanol
PA-ACS-ISO.
42.2.9. Estufa eléctrica.
42.2.10. Embudos de separación.
42.2.11. Cápsulas de porcelana 70-80 mm Ø.
42.2.12. Tubos de 150 x 15 mm con tapón
esmerilado.
42.2.13. Tubos de 150 x 15 mm con llave inferior.
Introducir en un Erlenmeyer de 500 cc y boca
esmerilada 100 ml de vino, 5 ml de Acido Sulfúrico
(1+5) y, agitando, 100 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, continuando
en un agitador durante una hora.
Separar en embudo de decantación y descartar
la capa inferior. Añadir 8-10 g de Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO al extracto éter, agitando vigorosamente. Verter el éter en otro embudo de 500 ml,
agregando sucesivamente: 5,0, 2,5 y 2,5 ml de
Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV, agitando un
minuto cada vez y reuniendo las tres capas inferiores alcalinas obtenidas en un tubo con tapón esmerilado, en el cual se habrá vertido previamente 1 ml
de la solución de Acido Tiosalicílico. Agitar enérgicamente durante treinta segundos y transferir el
contenido del tubo a una cápsula de porcelana,
evaporando durante una hora en baño de agua
(90-100°C), tiempo que habrá de respetarse aun
cuando el agua se evapore mucho antes.
Si se formara una costra sobre la superficie, es
conveniente romperla con una varilla fina de vidrio, lo
que facilitará la evaporación. Pasado este tiempo,
llevar la cápsula con el residuo seco a la estufa mantenida a 200°C durante treinta minutos exactamente, pasados los cuales se retira y se deja enfriar a la
temperatura ambiente. Añadir 2 ml de Agua PA-ACS
que disolverá la mayor parte del extracto y recoger
en un tubo con llave en su parte inferior; agregar
otros 2 ml de Agua PA-ACS para lavar la cápsula y,
por último, 3 ml de solución de Potasio Ferricianuro,
recogiendo todo ello con los primeros, agitando bien
el tubo durante treinta segundos para facilitar la oxidación. Conviene asegurarse de que todo el residuo
se disolvió bien en los 4 ml de Agua PA-ACS antes
de añadir la solución de Potasio Ferricianuro. En presencia de un derivado monohalogenado se desarrollará una coloración rojo-anaranjado (apenas perceptible para contenidos inferiores a 0,1 mg). Agregar
3 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PAACS-ISO; agitar alternativamente tres-cuatro veces y
decantar. Si el extracto clorofórmico inferior se colorea de rojo-fucsia o rosado, indica la presencia de
derivados monohalogenados del ácido acético.
42.4. Referencias.
d’Analyse des Vins. O. I. V. A 35h.
42.4.2. Cabezuco, Gorostiza y Garrido: Determinación de derivados monohalogenados del ácido
acético. Instituto de Fermentaciones (1971, ATA,
vol. II, núm. 1, páginas 145-151).
77
43. GRADO ALCOHOLICO EN
POTENCIA
43.1. Principio.
Es el volumen en litros de alcohol susceptible de
obtenerse por fermentación total de los azúcares
contenidos en 100 litros de vino.
Como en 7(a).2 o 7(b).2.
43.3. Reactivos.
Como en 7(a).3 o 7(b).3.
Como en 7(a) o 7(b).
43.5. Cálculo.
N-1
Grado alcohólico en potencia = ————
17
donde:
N = g/l de azúcares reductores de la muestra.
44. GRADO ALCOHOLICO TOTAL
44.1. Principio.
Se considera el grado alcohólico total como la
suma del grado alcohólico adquirido determinado
según 5(a) o 5(b), y del grado alcohólico potencial,
determinado según 43.
44.2. Cálculo.
Grado alcohólico total = Grado alcohólico adquirido +
+ Grado alcohólico potencial.
45. COLORANTES SINTETICOS
45.1. Principio.
Concentración mediante ebullición, extracción
con éter etílico y fijación de colorantes sintéticos
básicos y ácidos sobre lana y posterior confirmación
por cromatografía en papel.
78
45.2.1. Hebras de lana blanca previamente
desengrasadas con Eter Dietílico estabilizado con
p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.
45.2.2. Hebras de lana blanca mordentadas.
Disolver 1 g de Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme (BP, F. Eur.) PRS-CODEX y 1,2 g de Potasio
Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml de Agua PA-ACS.
Introducir en esta solución 10 g de hebras de lana
blanca, previamente desengrasadas con Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO
y secas, agitar durante una hora y dejar reposar de
dos a tres horas; transcurrido dicho tiempo, secar a
temperatura ambiente.
45.2.3. Papel para cromatografía Whatman
número 1 o similar.
45.2.4. Erlenmeyer de 50 ml de capacidad.
45.2.5. Ampolla de decantación de 200 ml de
capacidad.
45.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131082 1-Butanol PA-ACS-ISO
141101 Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme
(BP, F. Eur.) PRS-CODEX
141128 Amoníaco 20% (en NH3) PRS
de BHT PA-ACS-ISO
121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA
PA-ACS-ISO
de BHT PA-ACS-ISO.
45.3.2. Sodio Hidróxido al 5%. Disolver Sodio
Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
45.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
45.3.4. Acido Acético diluido, 1/18 (v/v). Diluir
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
45.3.5. Acido Clorhídrico diluido 1/10 (v/v). Diluir
Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.
45.3.6. Amoníaco 20% (en NH3) PRS.
45.3.7. Solvente número 1 para cromatografía
de colorantes de carácter básico:
1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml
Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO . . . 10 ml
Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
45.3.8. Solvente número 2 para la cromatografía
de colorantes de carácter ácido:
1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml
Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
Amoníaco 20% (en NH3) . . . . . . . . . . 10 ml
Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml
45.4.1. Determinación de colorantes de carácter
básico.
Poner 200 ml de vino en un Erlenmeyer de 500 ml
y llevar a ebullición hasta que el vino se reduzca a un
tercio de su volumen. Enfriar y neutralizar con la
solución de Sodio Hidróxido al 5% hasta claro viraje del color natural del vino. Extraer dos veces, con
30 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO cada vez, y juntar las dos fases
etéreas; en ellas se encuentran eventualmente los
colorantes básicos; el residuo de la extracción debe
ser conservado con objeto de investigar los colo-
M
rantes ácidos. Lavar dos veces el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO empleado en la extracción con 5 ml de Agua PA-ACS, con
el objeto de eliminar el Sodio Hidróxido; a continuación, añadir 5 ml de Acido Acético diluido a la fase
etérea; la presencia de un colorante básico colorea
la fase ácido-acuosa; la presencia de este colorante puede confirmarse por su fijación sobre lana mordentada.
La fase ácido-acuosa obtenida se alcaliniza con
Amoníaco 20% (en NH3) PRS previamente diluido al
5% con Agua PA-ACS; añadir 0,5 g de lana mordentada y llevar a ebullición durante un minuto;
aclarar la lana bajo el chorro de agua fría; de permanecer coloreada, el vino contiene un colorante
básico.
45.4.1.1. Caracterización por cromatografía de
papel. A partir de la fase acético-acuosa que contiene el colorante básico, concentrar hasta 0,5 ml.
Si el colorante ha sido fijado sobre lana, añadir a
ésta 10 ml de Agua PA-ACS, 10 gotas de Acido
Acético glacial PA-ACS-ISO y llevar a ebullición, y
una vez retirada la lana previamente escurrida, concentrar la solución hasta 0,5 ml.
Depositar sobre papel de cromatografía 20
microlitros de la anterior solución concentrada a
3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior.
Introducir dicho papel en una cubeta que contenga el solvente 45.3.7. de forma que su borde inferior esté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y
dejar secar al aire cuando se haya alcanzado una
altura del frente del solvente comprendido entre 20
o 25 cm. Identificar el colorante por medio de
soluciones de colorantes sintéticos básicos
depositados simultáneamente sobre el cromatograma.
45.4.2. Determinación de colorantes de carácter
ácido.
Partir del residuo de vino concentrado a un tercio y neutralizado después de su extracción con
Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO; si no se realizó la determinación de
colorante de carácter básico, poner 200 ml de vino
en un Erlenmeyer de 500 ml y llevar a ebullición
hasta que el vino se reduzca a un tercio de su volumen. En uno u otro caso, añadir 3 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5) y 0,5 g de lana blanca; hervir
durante cinco minutos, decantar el líquido y lavar la
lana con Agua PA-ACS abundante. En el Erlenmeyer que contiene la lana, añadir 100 ml de Agua PAACS y 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5);
hervir durante cinco minutos, decantar el líquido
ácido y repetir esta operación hasta que el líquido
de lavado sea incoloro. Después de haber lavado
bien la lana, para eliminar completamente el líquido
ácido añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 10 gotas de
Amoníaco 20% (en NH3) PRS; llevar a ebullición
suave durante diez minutos a fin de disolver la materia colorante artificial que eventualmente se haya
fijado sobre la lana. A continuación, retirar la lana del
Erlenmeyer, llevar el volumen de líquido a 100 ml y
hervir hasta evaporación completa del Amonio
Hidróxido; una vez conseguida dicha evaporación,
añadir 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5)
(comprobar que el líquido haya adquirido reacción
francamente ácida, llevando una gota de éste sobre
el papel indicador). Poner en el Erlenmeyer 60 mg
de lana blanca y llevar a ebullición durante cinco
minutos; retirar la lana y aclararla bajo el chorro de
agua fría. Si después de esta operación la lana toma
coloración roja, cuando se trata de vino tinto, o
amarilla, si se trata de vino blanco, confirma la presencia de materia colorante orgánica artificial de
naturaleza ácida. Si la coloración adquirida es débil
o dudosa, repetir el tratamiento con Amoníaco 20%
(en NH3) PRS y hacer una segunda fijación sobre
una hebra de lana de 30 mg. Si transcurrida esta
segunda fijación se obtiene una coloración rosa,
aunque sea débil, se deduce la presencia de colorante ácido. Recurrir para un análisis más completo
a nuevas fijaciones-eluciones (hasta 4 o 5), operando siempre de forma idéntica a la empleada para la
segunda fijación hasta que se obtenga una coloración rosácea que, aunque sea pálida, no ofrece
lugar a dudas.
45.4.2.1. Caracterización por cromatografía de
papel.
Añadir sobre la hebra de lana coloreada 10 ml de
Agua PA-ACS, 10 gotas de Amoníaco 20% (en NH3)
PRS y llevar a ebullición; retirar la lana previamente
escurrida y concentrar la solución amoniacal hasta
0,5 ml. Depositar sobre papel de cromatografía 20
microlitros de la anterior solución concentrada, a
3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior;
introducir dicho papel en una cubeta que contenga
el solvente 45.3.8 de forma que su borde inferior
esté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y dejar
secar al aire cuando se haya alcanzado una altura
del frente del solvente comprendida entre 20 o
25 cm. Identificar el colorante por medio de soluciones de colorantes sintéticos ácidos depositados
simultáneamente sobre el cromatograma.
45.5. Referencia.
d’Analyse des Vins. A43k, páginas 1-6.
46. MERCURIO
46.1. Principio.
Oxidación de la materia orgánica con ácido nítrico y crómico, reducción de las sales mercúricas por
acción de Sn2+, volatilización del Hg metálico, arrastre del mismo por corriente de aire y determinación
de su absorbancia a 253,7 nanómetros.
Este método es aplicable a concentraciones de
mercurio superiores a 0,05 mg/l.
79
46.2.1. Espectrofotómetro de absorción.
46.2.2. Lámpara de mercurio.
46.2.3. Aparato para la reducción del ion mercúrico a mercurio metal y posterior arrastre de éste
con corriente de aire (figura 46.1).
46.2.4. Matraces de reacción de forma cónica
de 100 ml de capacidad.
46.2.5. Bomba peristáltica accionada con motor
provisto de vaciador de velocidad.
46.2.6. Llave de purga en T de teflón.
46.2.7. Tubo flexible de tigón de 1/8 pulgada de
diámetro interior y un metro, aproximadamente, de
longitud.
46.3. Reactivos.
471058 Acido Sulfúrico 95-98%
(máx 0,0000005% de Hg) PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
471153 Cromo VI Oxido
(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS
471303 Estaño ll Cloruro
(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS-ISO
121925 Hidroxilamonio Sulfato PA
313186 Mercurio solución patrón
Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA
251450 Parafina P. F. 55-60º C en pastilla DC
46.3.1. Acido Sulfúrico 95-98% (máximo
0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO, exento de mercurio.
46.3.2. Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS.
46.3.3. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)
PA-ACS exento de mercurio.
46.3.4. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)
PA-ACS exento de mercurio.
46.3.5. Solución de Acido Crómico al 5%. Llevar
a un vaso de 500 ml 25 g de Cromo VI Oxido y
80
Figura 46.l. Esquema de la instalación
M
disolverlos en 25 ml de Agua PA-ACS. Añadir lentamente y agitando Acido Sulfúrico concentrado
hasta enrasar a 500 ml cuando la solución esté fría.
46.3.6. Solución reductora.- Solución al 40% de
Estaño II Cloruro en Agua PA-ACS, acidulada con
Acido Sulfúrico.
46.3.7. Solución patrón.- Mercurio solución
patrón Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,080 g de 131426 Mercurio ll oxido amarillo PA en 100 ml de 131019 Acido Clohídrico 35%
PA-ISO a 1000 ml. En ambos casos, mediante dilución 1/1.000 se obtiene la solución de 1 mg/l.
46.4.1. Preparación de la muestra.
Tomar 1 ml de muestra y colocarla dentro de un
matraz cónico. Añadir 2 ml de Acido Nítrico 70% PAACS-ISO. Cerrar con película de Parafina P. F. 5560°C en pastilla DC y dejarlo en digestión durante
sesenta minutos a temperatura ambiente. Añadir 5 ml
de Acido Crómico al 5%, refrigerando durante la adición en baño de hielo. Tapar el matraz y dejarlo
durante sesenta minutos, agitando cada diez minutos. Transcurrido este tiempo, añadir 15 ml de Agua
PA-ACS, enfriando durante la adición con baño de
hielo. Una vez fríos los matraces, añadir 2 g, aproximadamente, de Hidroxilamonio Sulfato PA, agitar y acoplar los matraces al aparato de medida. Añadir 10 ml
de solución reductora. Continuar como en 46.4.3.
46.4.2. Construcción de la curva patrón.
A partir de 46.3.7, tomar 0; 5; 10; 15; 20 y 25 ml.
Tratarlas a continuación como se indica en 46.4.1.
Estas soluciones contienen 0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 y
0,5 partes por millón de Hg. Anotar las absorbancias obtenidas frente a las concentraciones correspondientes.
Efectuar la lectura de la absorbancia de la muestra. Una vez preparada según 46.4.1.
46.5. Referencias.
46.5.1. A. Bouchard: “Determination of mercury
aftersoon temperature digestion by flamaless atomic absorption.” Atom. Absorpt. Newsletter, vol. 12,
número 5 (115-117), 1973.
46.5.2. A. García de Jalón y J. Frías: “Un método para la determinación de mercurio en vinos mediante espectrofotometría de absorción atómica sin
llama.” Ministerio de Agricultura. Abril 1972.
47. PLOMO
47.1. Principio.
Determinación del plomo por A. A. después de
una concentración previa con objeto de conseguir
resultados suficientemente precisos.
47.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.
47.2.2. Lámpara de plomo.
47.2.3. Cápsula de platino de 100 ml de capacidad o similar.
47.2.4. Baño de arena.
47.2.5. Mufla con circulación de aire.
47.2.6. Matraces de 10; 100 y 1.000 ml de
capacidad.
47.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
313189 Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
47.3.3. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico
70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
47.3.4. Plomo solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo
1,598 g de 131473 Plomo ll Nitrato PA enrasando a
1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.
47.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml
de la muestra en una cápsula de platino y llevarla a
evaporación hasta consistencia siruposa en baño
de arena. Añadir a continuación 2 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el
baño de arena. Seguidamente introducir la cápsula
en la mufla y mantenerla durante dos horas a
450°C; transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla
enfriar. Añadir 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO,
evaporar en el baño de arena e introducir en la
mufla, repitiendo esta operación hasta obtener cenizas blancas. Disolver a continuación las cenizas con
1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de
Agua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger el
filtrado en un matraz de 10 ml, lavando la cápsula y
el filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase.
47.4.2. Construcción de la curva patrón.- A partir de la solución patrón 47.3.4, tomar alícuotas de
0,2; 0,4; 0,6; 0,8 y 1 ml, y llevar a 100 ml con Acido
Nítrico al 1% (v/v).
El contenido en plomo de estas soluciones es,
respectivamente, 2; 4; 6; 8 y 10 ppm Anotar las
absorbancias obtenidas frente a las concentraciones correspondientes.
47.4.3. Determinación.- Efectuar la lectura directa de la muestra preparada según 47.4.1 a 283,3 nm.
47.5. Cálculo.
Calcular el contenido en plomo, expresado en
ppm mediante comparación con la correspondiente
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.
81
48. RELACION P/a
48.1. Principio.
Estimación de los contenidos relativos de glucosa y fructosa, en mostos, vinos dulces y mistelas,
mediante el establecimiento de la relación entre azúcares reductores y desviación polarimétrica a 20°C.
48.2.1. Como en 7(a).2; 7(b).2, o 7(c).2.
48.2.2. Polarímetro con luz monocromática amarilla (lámpara de vapor de sodio) y tubo de 20 cm.
48.3.1. Determinar el contenido en azúcares
reductores según el método 7(a), 7(b) o 7(c).
48.3.2. Medida de la desviación polarimétrica.
Una vez verificado el correcto reglaje del polarímetro, comprobando la correspondencia del valor
“cero” con la existencia de un campo luminoso uniforme, ajustándolo si es necesario, introducir en el
tubo del polarímetro el líquido de defecación, sin
diluir, incoloro y limpio, utilizando para la determinación de azúcares reductores, evitando la formación
de burbujas de aire. Anotar la temperatura del líquido que debe ser lo más próxima posible a 20°C.
Efectuar la lectura de la desviación polarimétrica
varias veces sucesivas, tomando la media de los
resultados obtenidos.
48.4. Cálculo.
Determinar el poder rotatorio y la relación P/a
aplicando las fórmulas siguientes:
a20 = at+ at (t - 20) x K
P/a20 (expresado con su correspondiente signo)
siendo:
TABLA I
p/at
-
1,19
1,41
1,73
2,24
2,64
3,20
4,06
5,56
8,8
21
K
0,006
0,007
0,008
0,009
0,012
0,012
0,013
0,014
0,022
0,042
49. ANHIDRIDO CARBONICO
(Método aprobado pero no
publicado en el B.O.E.)
49.1. Principio.
Después de la oxidación en frío del anhídrido
sulfuroso por el hidrógeno peróxido en presencia
del ion de cobre II, el anhídrido carbónico desplazado del vino por una solución tampón de fosfato y
ácido fosfórico es arrastrado en frío en circuito
cerrado por una corriente de aire mediante una
pequeña bomba de circulación hacia una solución
valorada de bario hidróxido. El exceso de esta base
se determina inmediatamente con una solución
valorada de ácido clorhídrico en presencia de un
indicador mixto de timolftaleína-fenolftaleína.
Aplicable a contenidos inferiores a 6 g/l.
P = g/l de azúcares reductores.
at = poder rotatorio en divisiones sacarimétricas
a t°C (un grado polarimétrico = 4,615 divisiones
sacarimétricas).
a20 = poder rotatorio en divisiones sacarimétricas a20°C.
t = temperatura del líquido en el momento de la
lectura.
K = coeficiente variable con la naturaleza de los
azúcares, dado por la tabla I en función del valor
P / at .
82
48.5. Referencias.
48.5.1. J. Blouin. Manual practique d’analyse
des Moûts et Vins. 1977.
48.5.2. J. Ribereau Gayon, E. Peynaud. Sciences et Techniques du Vin. Tome I. 1972.
49.2.1. Aparato de vidrio para extracción del
CO2 en circuito cerrado (fig. l) compuesto de:
- un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola
antiespuma sobre la que va adaptada una
bureta (5);
- dos barboteadores (2) y (3);
- una bomba (4) que garantice la circulación del
aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).
49.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
PRS
M
121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA
PA-ACS-ISO
171739 Timolftaleína RE
49.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N: En un
matraz aforado diluir exactamente a 1:1 Sodio
Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.
49.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g de
BaCl2. 2H20 por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
49.3.3. Solución de Bario Hidróxido.
Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario
Cloruro de 90 g/l con 1 volumen de solución de
Sodio Hidróxido 0,2N. Conservar en recipiente que
evite la carbonatación.
49.3.4. Solución tampón:
Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida
400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA y
añadir 50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20°C =
1,63): Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO
con Agua PA-ACS hasta la densidad indicada que
corresponde a, aproximadamente, 79,4% y completar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientemente
hervida.
49.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).
Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g
de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en
100 g de solución.
Utilizarla 15 días después de su preparación
para lograr la decantación del eventual Na2CO3.
Esta solución debe ser transparente.
49.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10
volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H2O2
por litro y libera 10 veces su volumen de oxígeno
por descomposición catalítica con MnO2 en medio
alcalino.
49.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,
pulverizado.
49.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y
0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PA,
neutro y completar hasta 100 ml.
49.3.9. Acido Clorhídrico 0,2N. En un matraz
aforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV
con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solución 0,2N obtenida.
49.4.1. Vinos que contienen menos de 4 g de
CO2 por litro.
La botella de vino se debe mantener en posición
horizontal durante una noche a 0°C.
Colocar en el barboteador (2) 150 ml exactamente medidos de solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) algunos cristales de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, con
cuidado, en un matraz previamente enjuagado y
enfriado a 0°C, 50 ml de vino. Colocar el matraz (1)
en el circuito y esperar 10 minutos.
Conectar la bomba, e introducir mediante la
bureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en funcionamiento 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2), 50 ml
de la solución de Bario Hidróxido; valorarla con Acido Clorhídrico 0,2N con indicador mixto. Sea V2 el
número de ml gastados.
Es indispensable valorar diariamente el Bario
Hidróxido utilizando 150 ml. Sea V1 el número de ml
de Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.
49.4.2. Vinos que contienen más de 4 g de CO2
por litro.
La botella debe mantenerse en posición horizontal a 0°C durante una noche. Abrir la botella con
precaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 ml
del vino por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%
haciendo resbalar suavemente la solución por el
cuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente y
homogeneizar su contenido agitándola; colocarla
seguidamente en un baño de agua a 20°C.
Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos de
solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) unos cristales de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
Introducir lentamente la pipeta en la botella para
evitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml del
vino y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato y
dejarlo reposar 10 minutos.
El volumen del vino tomado se deberá reducir a
25 ml, si éste contiene más de 8 g/l de anhídrido
carbónico.
Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)
con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.
Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2) 50 ml
de la solución de Bario Hidróxido. Valorarla con Acido Clorhídrico 0,2N en presencia de indicador mixto. Sea V2 el número de ml utilizados. Sea V1 el
número de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consumidos para valorar 150 ml de solución de Bario Hidróxido.
49.5. Cálculo.
49.5.1. Para vinos que contienen menos de 4 g
de CO2 por litro.
Cantidades de CO2 en gramos por l en el vino.
CO2(g/l) = 0,088 (V1- 3V2).
49.5.2. Para vinos que contienen más de 4 g de
CO2 por litro.
Medir el volumen de líquido que queda en la botella y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomada para la
determinación. Sea V el volumen total así determinado. Calcular seguidamente el factor de corrección f,
necesario para tener en cuenta los 50 ml de Sodio
Hidróxido al 50% introducidos en la botella:
83
V
f = ————
V - 50
50. ETANAL
(Método aprobado pero no
publicado en el B.O.E.)
Si la muestra para la determinación es de 50 ml,
la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es (2V1 6V2) . 0,088 . f.
Este resultado debe multiplicarse por 2 si la
toma de muestra es de 25 ml.
50.1. Principio.
El etanal se determina en el vino, previamente
decolorado con carbón, midiendo a 570 nm la coloración verde o violeta que da con el sodio nitroprusiato y la piperidina.
49.6. Referencias.
49.6.1. Jaulmes (P.), Meth. An. 1972, n° 422;
Ann. Fals. Exp. chim. 1973, n° 708, 96-109.
d’Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.
50.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuar
lecturas a 570 nm.
50.3. Reactivos.
131064 Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
121237 Carbón Activo polvo PA
Etanal
182415
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA
181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV
50.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).
Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml
de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.
50.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%
(p/v).
En un matraz aforado de 250 ml disolver 1 g de
Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.
Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.
50.3.3. Carbón Activo polvo PA.
50.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)
(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua
PA-ACS.
50.3.5. Solución alcalina.
Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en
400 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Completar hasta un litro con Agua PA-ACS.
84
Figura 1
50.4.1. Determinación del Etanal.
Colocar 25 ml de líquido a analizar en un Erlenmeyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de Carbón
Activo polvo PA. Agitar enérgicamente durante
algunos segundos, dejar reposar durante 2 minutos
y filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino para
obtener un filtrado claro.
2 ml de filtrado incoloro se colocan en un Erlenmeyer de 100 ml y se adiciona agitando 5 ml de solución de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solución de
Piperidina, mezclar y colocar inmediatamente la mezcla en la cubeta de lectura de 10 mm de espesor. La
M
coloración obtenida que varía del verde al violeta, se
mide a 570 nm con relación al aire. Esta coloración
aumenta para disminuir seguidamente con rapidez.
Elegir como valor definitivo la máxima absorbancia
que se obtiene al cabo de unos 50 segundos.
La cantidad de Etanal contenido en el líquido
analizado se deduce de una curva patrón.
Solución patrón de Etanal combinado con el
Anhídrido Sufuroso.
Tomar Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS,
valorar en SO 2 determinar su cantidad exacta
midiéndola con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV.
En un matraz aforado de 1 litro colocar el volumen de esta solución que corresponda a 1.500 mg
de SO2. Introducir en el matraz, ayudados con un
embudo, alrededor de 1 ml de Etanal destilado
recientemente y recogido sobre una mezcla refrigerante. Enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS, mezclar y
dejar durante la noche.
La cantidad exacta de esta solución patrón de
Etanal combinada con el SO2 debe determinarse
como sigue:
En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml de
solución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del Acido
Clorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxidar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1) SV en presencia de solución de Almidón soluble RE hasta
coloración azul débil.
Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%
RE y la suficiente solución alcalina hasta la desaparición de la coloración azul y aparición de color rosa.
Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo
0,05 mol/l (0,1) SV hasta coloración azul débil. Siendo n el volumen gastado, la solución patrón de Etanal combinado con el SO2 contiene: 44,05 n mg de
Etanal por litro.
Preparación de la curva patrón:
En matraces aforados de 100 ml colocar sucesivamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.
Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corresponden a cantidades de Etanal próximas a 40-80120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las diluciones debe calcularse a partir del contenido en
Etanal de la solución patrón determinada anteriormente.
Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml de
cada una de estas soluciones como se indica anteriormente. La representación gráfica de las absorbancias de estas soluciones en función de la cantidad de Etanal es una recta que no pasa por el
origen.
50.5. Cálculo
Calcular el contenido en Etanal mediante comparación con la correspondiente curva patrón.
Si, de forma excepcional, el líquido a analizar
contiene Etanal libre, no combinado con el SO2 será
necesario, antes de empezar a determinar el Etanal
total, pasarlo previamente al estado de combinación con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a una
parte del líquido a analizar un pequeño exceso de
SO2 libre y esperar algunas horas antes de proceder a la determinación.
50.7. Referencias.
50.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.
Rdsch 1970. 66, 5-6.
d’Analyse des Vins. O. I. V. A-37, 1978.
51. PRESION DEL ANHIDRIDO
CARBONICO
51.1. Principio.
Medida de la presión gaseosa de un recipiente
cerrado herméticamente mediante un aparato adecuado que disponga de un manómetro.
51.2.1. Equipo manométrico que conste de las
siguientes partes:
51.2.1.1. Aguja perforadora del tapón o del recipiente, hueca, con válvula que obture el orificio de
entrada de gas a la misma y sistema estanco
de adaptación al tapón o recipiente.
51.2.1.2. Conducto que ponga en comunicación la aguja con el manómetro.
51.2.1.3. Manómetro que permita lecturas de
hasta 10 kg/cm2.
Mantener la muestra en reposo durante dos
horas al menos. Llevar la temperatura aproximadamente a 20°C y perforar el tapón o el recipiente
según el caso. Abrir la válvula con lo que el gas
pasa al manómetro. Leer la presión que indica el
manómetro.
51 4. Expresión de los resultados.
La presión se expresará en atmósferas a 20°C.
1 atm. = 760 mm de Hg = 1.034 kg/cm2
52. ANTISEPTICOS Y ANTIFERMENTOS
(Método microbiológico)
52.1. Principio.
Comparación del desarrollo, en vino problema y
testigo, de las levaduras contenidas en láminas de
agar-extracto de levadura glucosado, tras permanecer sumergidas 48 horas en ellos.
52.2.1. Hematímetro.
85
52.2.2. Cajas Petri.
52.2.3. Portaobjetos rayados en zig-zag.
52.2.4. Varilla en forma de U de unos 0,5 cm de
diámetro.
52.2.5. Tubos de ensayo aforados a 10 ml.
52.2.6. Tubos capaces de contener portaobjetos normales de microscopía.
52.2.7. Autoclave.
52.2.8. Microscopio.
52.2.9. Estufa de cultivo.
52.3. Reactivos y medios de cultivo.
141792 Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
131074 Agua PA-ACS
Etanal
403687 Extracto de levadura CULTIMED
121341 D(+)-Glucosa PA
52.3.1. Solución acuosa de Etanal de 6,9 g/l (1 ml
de esta solución combina 10 mg de SO2).
52.3.2. Mosto de 10º Bé. peptonado al 1 por
1.000. Esterilizar en autoclave a 112°C durante 20
minutos.
52.3.3. Agar-extracto de levadura glucosado:
Extracto de levadura CULTIMED. . . . . 5 g
D(+)-Glucosa PA . . . . . . . . . . . . . . . . 20 g
Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX . 17,5 g
Agua PA-ACS . . . . . . . . . . . . . . . . 1.000 g
Una vez fundido en baño de agua, distribuir a razón
de 10 ml por tubo y esterilizar a 120°C durante 20
minutos.
52.3.4. Capa de levadura: Saccharomyces
bayanus.
86
52.4.1. Preparación del vino problema: Si la
dosis de SO2 libre es superior a 15 mg/l, proceder a
combinación del exceso mediante la solución acuosa de Etanal, dejando transcurrir 24 horas, desde
su adición. Comprobar de nuevo que el contenido
de SO2 libre es inferior a 15 m/l.
52.4.2. Preparación del vino testigo: Utilizar un
vino de características lo más parecidas posibles al
vino problema, especialmente en grado alcohólico.
Respecto al SO2 libre se procederá como en 52.4.1
52.4.3. Siembra del Agar (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX y formación de la película: Una vez
fundidos en baño de agua los tubos con 10 ml de
agar-extracto de levadura glucosado y cuando la
temperatura baja a 45-50°C, sembrar, tras conteo
con hematímetro, 5 millones de levaduras/ml (50
millones por tubo) de un cultivo de 72 horas en
mosto peptonado de 10° Bé.
Tras homogeneizar rápidamente los tubos sembrados, verter su contenido sobre los portaobjetos
rayados, situados en posición inclinada, apoyados
sobre un brazo de la varilla en U colocada dentro de
la caja Petri; el agar fundido deslizará uniformemen-
te sobre la superficie de cada portaobjeto, formando una lámína de agar. Acto seguido colocar horizontalmente los portaobjetos apoyando sobre los
dos brazos de la varilla en U y dejar en reposo
durante un par de horas.
52.4.4. Formación de colonias: Asegurada la
solidificación del medio sembrado, sumergir completamente los portaobjetos en los tubos que contienen el vino problema y el vino testigo. Tapar no
herméticamente los tubos y mantener en la estufa
de cultivo a 25°C durante 48 horas.
Finalizado este período eliminar el vino de los
tubos, dejando los portaobjetos en el interior de
ellos en contacto con el aire y a 25°C.
52.4.5. Observación microscópica: Observar las
láminas inmediatamente después de sacadas del
vino. Si no se aprecia desarrollo de colonias incubar
en estufa a 25°C y repetir la observación microscópica a las 24, 48 y 72 horas si es necesario.
En los vinos de alto grado alcohólico puede
retrasarse aún más el desarrollo de las colonias,
como se comprueba en el vino testigo.
52.5. Interpretación de los resultados.
La presencia franca de colonias indica la ausencia de antisépticos y antifermentos.
52.6. Referencia.
52.6.1. Método biológico español-argentino
para la investigación de la presencia de antisépticos
en los vinos. E. Feduchy An. INIA. Serv. Tecnol. agr.
N 2. 1975.
M
87
Productos derivados
de la uva:
Zumos de uva
88
M
METODOS DE ANALISIS
1. GRADO BRIX
1.1. Principio.
Medida del índice de refracción y conversión en
grados Brix mediante las tablas adjuntas.
1.2.1. Refractómetro provisto del equipo necesario para mantener la temperatura a 20ºC.
1.2.2. Matraces o recipientes de vidrio que cierren herméticamente.
1.3. Procedimiento.
Colocar el refractómetro en un lugar iluminado
con luz difusa o frente a una fuente de luz artificial.
Circular agua a temperatura constante a 20°C a
través de los prismas del refractómetro. Ajustar el
instrumento colocando unas gotas de agua destilada entre los prismas. El índice de refracción deberá
ser 1,3330; si no es así corregir adecuadamente la
lectura.
Situar el zumo de uva en un envase herméticamente cerrado en un baño a 20°C y esperar a que
alcance dicha temperatura. Tomar con una pipeta
un poco de zumo de uva y poner unas gotas entre
los prismas del refractómetro. Medir el índice de
refracción.
1.4. Expresión de los resultados.
A partir del valor obtenido del índice de refracción se obtiene el grado Brix mediante la tabla I.
1.5. Observaciones.
1.5.1. Si se emplea otra temperatura para medir
el índice de refracción, utilizar la tabla II para la
corrección de temperatura a 20°C .
1.6. Referencias.
Official Methods of Analysis, AOAC-1984.
TABLA I
Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix
n
20°
Grado
Brix
n
20°
Grado
Brix
n
20º
Grado
Brix
n
20°
Grado
Brix
1,3330
1,3331
1,3332
1,3333
1,3334
1,3335
1,3336
1,3337
1,3338
1,3339
1,3340
1,3341
1,3342
1,3343
1,3344
1,3345
1,3346
1,3347
1,3348
1,3349
1,3350
1,3351
1,3352
1,3353
1,3354
1,3355
1,3356
0,009
0,078
0,149
0,253
0,288
0,358
0,428
0,498
0,567
0 637
0,707
0,776
0,846
0,915
0,985
1,054
1,124
1,193
1,263
1,332
1,401
1,470
1,540
1,609
1,678
1,747
1,815
1,3357
1,3358
1,3359
1,3360
1,3361
1,3362
1,3363
1,3364
1,3365
1,3366
1,3367
1,3368
1,3369
1,3370
1,3371
1,3372
1,3373
1,3374
1,3375
1,3376
1,3377
1,3378
1,3379
1,3380
1,3381
1,3382
1,3383
1,885
1,954
2,023
2,092
2,161
2,230
2,299
2,367
2,436
2,505
2,574
2,642
2,711
2,779
2,848
2,917
2,985
3,053
3,122
3,190
3,259
3,327
3,395
3,463
3,532
3,600
3,668
1,3384
1,3385
1,3386
1,3387
1,3388
1,3389
1,3390
1,3391
1,3392
1,3393
1,3394
1,3395
1,3396
1,3397
1,3398
1,3399
1,3400
1,3401
1,3402
1,3403
1,3404
1,3405
1,3406
1,3407
1,3408
1,3409
1,3410
3,736
3,804
3,872
3,940
4,008
4,076
4,144
4,212
4,279
4,347
4,415
4.483
4,550
4,618
4,686
4,753
4,821
4,888
4,956
5,023
5,091
5,158
5,225
5,293
5,360
5,427
5,494
1,3411
1,3412
1,3413
1,3414
1,3415
1,3416
1,3417
1,3418
1,3419
1,3420
1,3421
1,3422
1,3423
1,3424
1,3425
1,3426
1,3427
1,3428
1,3429
1,3430
1,3431
1,3432
1,3433
1,3434
1,3435
1,3436
1,3437
5,562
5,629
5,696
5,763
5,830
5,897
5,964
6,031
6,098
6,165
6,231
6,298
6,365
6,432
6,498
6,565
6,632
6,698
6,765
6,831
6,898
6,964
7,031
7,097
7,164
7,230
7,296
89
TABLA I (Continuación)
n
20°
90
1,3438
1,3439
1,3440
1,3441
1,3442
1,3443
1,3444
1,3445
1,3446
1,3447
1,3448
1,3449
1,3450
1,3451
1,3452
1,3453
1,3454
1,3455
1,3456
1,3457
1,3458
1,3459
1,3460
1,3461
1,3462
1,3463
1,3464
1,3465
1,3466
1,3467
1,3468
1,3469
1,3470
1,3471
1,3472
1,3473
1,3474
1,3475
1,3476
1,3477
1,3478
1,3479
1,3480
1,3481
1,3482
1,3483
1,3484
1,3485
1,3486
1,3487
1,3488
1,3489
Grado
Brix
7,362
7,429
7,495
7,561
7,627
7,693
7,759
7,825
7,891
7,957
8,023
8,089
8,155
8,221
8,287
8,352
8,418
8,484
8,550
8,615
8,681
8,746
8,812
8,878
8,943
9,008
9,074
9,139
9,205
9,270
9,335
9,400
9,466
9,531
9,596
9,661
9,726
9,791
9,856
9,921
9,986
10,051
10,116
10,181
10,246
10,331
10,375
10,440
10,505
10,570
10,634
10,699
n
20°
Grado
Brix
n
20º
Grado
Brix
n
20°
Grado
Brix
1,3490
1,3491
1,3492
1,3493
1,3494
1,3495
1,3496
1,3497
1,3498
1,3499
1,3500
1,3501
1,3502
1,3503
1,3504
1,3505
1,3506
1,3507
1,3508
1,3509
1,3510
1,3511
1,3512
1,3513
1,3514
1,3515
1,3516
1,3517
1,3518
1,3519
1,3520
1,3521
1,3522
1,3523
1,3524
1,3525
1,3526
1,3527
1,3528
1,3529
1,3530
1,3531
1,3532
1,3533
1,3534
1,3535
1,3536
1,3537
1,3538
1,3539
1,3540
1,3541
10,763
10,828
10,892
10,957
11,021
11,086
11,150
11,215
11,279
11,343
11,407
11,472
11,536
11,600
11,664
11,723
11,792
11,856
11,920
11,984
12,048
12,112
12,175
12,240
12,304
12,368
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1,4893
77,502
77,541
77,580
77,619
77,657
77,696
77,735
77,774
77,812
77,851
77,890
77,928
77,967
78,006
78,045
78,083
78,122
78,160
78,199
78,238
78,276
78,315
78,353
78,392
78,431
78,469
78,508
78,546
78,585
78,623
78,662
78,700
78,739
78,777
78,816
78,854
78,892
78,931
78,969
79,008
79,046
79,084
79,123
79,161
79,199
79,238
79,276
79,314
79,353
79,391
79,429
79,468
M
n
20°
1,4894
1,4895
1,4896
1,4897
1,4898
1,4899
1,4900
1,4901
1,4902
1,4903
1,4904
1,4905
1,4906
1,4907
1,4908
1,4909
1,4910
1,4911
1,4912
1,4913
1,4914
1,4915
1,4916
1,4917
1,4918
1,4919
1,4920
1,4921
1,4922
1,4923
1,4924
1,4925
1,4926
1,4927
1,4928
1,4929
1,4930
1,4931
1,4932
1,4933
1,4934
1,4935
1,4936
1,4937
1,4938
1,4939
1,4940
1,4941
1,4942
1,4943
1,4944
1,4945
Grado
Brix
79,506
79,544
79,582
79,620
79,659
79,697
79,735
79,773
79,811
79,850
79,888
79,925
79,964
80,002
80,040
80,078
80,116
80,154
80,192
80,231
80,269
80 307
80 345
80,383
80,421
80,459
80,497
80,534
80,572
80,610
80,648
80,686
80,724
80,762
80,800
80,838
80,876
80,913
80,951
80,989
81,027
81,065
81,103
81,140
81,178
81,216
81,254
81,291
81,329
81,367
81,405
81,442
n
20°
Grado
Brix
n
20º
Grado
Brix
n
20°
Grado
Brix
1,4946
1,4947
1,4948
1,4949
1,4950
1,4951
1,4952
1,4953
1,4954
1,4955
1,4956
1,4957
1,4958
1,4959
1,4960
1,4961
1,4962
1,4963
1,4964
1 4965
1 4966
1,4967
1,4968
1,4969
1,4970
1,4971
1,4972
1,4973
1,4974
1,4975
1,4976
1,4977
1,4978
1,4979
1,4980
1,4981
1,4982
1,4983
1,4984
1,4985
1,4986
1,4987
1,4988
1,4989
1,4990
1,4991
1,4992
1,4993
1,4994
1,4995
1,4996
1,4997
81,480
81,518
81,555
81,593
81,631
81,668
81,706
81,744
81,781
81,819
81,856
81,894
81,932
81,969
82,007
82,044
82,082
82,119
82,157
82,194
82,232
82,269
82,307
82,344
82,381
82,419
82,456
82,494
82,531
82,569
82,606
82,643
82,681
82,718
82,755
82,793
82,830
82,867
82,905
82,942
82,979
83,016
83,054
83,091
83,128
83,165
83,202
83,240
83,277
83,314
83,351
83,388
1,4998
1,4999
1,5000
1,5001
1,5002
1,5003
1,5004
1,5005
1,5006
1,5007
1,5008
1,5009
1,5010
1,5011
1,5012
1,5013
1,5014
1,5015
1,5016
1,5017
1,5018
1,5019
1,5020
1,5021
1,5022
1,5023
1,5024
1,5025
1,5026
1,5027
1,5028
1,5029
1,5030
1,5031
1,5032
1,5033
1,5034
1,5035
1,5036
1,5037
1,5038
1,5039
1,5040
1,5041
1,5042
1,5043
1,5044
1,5045
1,5046
1,5047
1,5048
1,5049
83,425
83,463
83.500
83,537
83,574
83,611
83,648
83,685
83,722
83,759
83,796
83,833
83,870
83,907
83,944
83,981
84,018
84,055
84,092
84,129
84,166
84,203
84,240
84,277
84,314
84,351
84,333
84,424
84,461
84,498
84,535
84,572
84,609
84,645
84,682
84,719
84,756
84,792
84,829
84,866
84,903
84,939
84,976
85,013
85,049
85,086
85,123
85,159
85,195
85,233
85,269
85,306
1,5050
1,5051
1,5052
1,5053
1,5054
1,5055
1,5056
1,5057
1,5058
1,5059
1,5060
1,5061
1,5062
1,5063
1,5064
1,5065
1,5066
1,5067
1,5068
1,5069
1,5070
1,5071
1,5072
1,5073
1,5074
1,5075
1,5076
1,5077
1,5078
1,5079
85,343
85,379
85,416
85,452
85,489
85,525
85,562
85,598
85,635
85,672
85,703
85,744
85,781
85,817
85,854
85,890
85,927
85,963
86,000
86,036
86,072
86,109
86,145
86,182
86,218
86,254
86,291
86,327
86,363
86,399
97
TABLA Il
GRADO BRIX
Temp.
°C
0
5
10
15
20
25
30
40
50
60
70
10
11
12
13
14
0,50
0,46
0,42
0,37
0,33
0,54
0,49
0,45
0,40
0,35
0,58
0,53
0,48
0,42
0,37
0,61
0,55
0,50
0,44
0,39
0,64
0,58
0,52
0,46
0,40
0,66
0,60
0,54
0.48
0,41
0,68
0,62
0,56
0,49
0,42
0,72
0,65
0,58
0,51
0,44
0,74
0,67
0,60
0,53
0,45
0,76
0,69
0,61
0,54
0,46
0,79
0,71
0,63
0,55
0,48
15
16
17
18
19
0,27
0,22
0,17
0,12
0,06
0,29
0,24
0,18
0,13
0,06
0,31
0,25
0,19
0,13
0,06
0,33
0,26
0,20
0,14
0,07
0,34
0,27
0,21
0,14
0,07
0,34
0,28
0,21
0,14
0,07
0,35
0,28
0,21
0,14
0,07
0,37
0,30
0,22
0,15
0,08
0,38
0,30
0,23
0,15
0,08
0,39
0,31
0,23
0,16
0,08
0,40
0,32
0,24
0,16
0,08
21
22
23
24
25
0,06
0,13
0,19
0,26
0,33
0,07
0,13
0,20
0,27
0,35
0,07
0,14
0,21
0,28
0,36
0,07
0,14
0,22
0,29
0,37
0,07
0,15
0,22
0,30
0,38
0,08
0,15
0,23
0,30
0,38
0,08
0,15
0,23
0,31
0,39
0,08
0,15
0,23
0,31
0,40
0,08
0,16
0,24
0,31
0,40
0,08
0,16
0,24
0,32
0,40
0,08
0,16
0,24
0,32
0,40
26
27
28
29
30
0,40
0,48
0,56
0,64
0,72
0,42
0,50
0,57
0,66
0,74
0,43
0,52
0,60
0,68
0,77
0,44
0,53
0,61
0,69
0,78
0,45
0,54
0,62
0,71
0,79
0,46
0,55
0,63
0,72
0,80
0,47
0,55
0,63
0,72
0,80
0,48
0,56
0,64
0,73
0,81
0,48
0,56
0,64
0,73
0,81
0,48
0,56
0,64
0,73
0,81
0,48
0,56
0,64
0,73
0,81
RESTAR
SUMAR
2. DENSIDAD
2.1. Principio.
La densidad (20°/20ºC) del líquido a analizar
se determina por medio del picnómetro.
98
2.2.1. Estufa.
2.2.2. Desecador.
2.2.3. Baño a 20°C.
2.2.4. Balanza analítica sensible a 0,1 mg.
2.2.5. Picnómetro Reischauer de 50 ml o similar.
El picnómetro Reischauer consiste en un
matraz de 50 ml de capacidad, cerrado con
un capuchón esmerilado provisto de un cuello de
6 cm de longitud y 4 mm de diámetro interior.
2.2.7. Embudo de 10 cm de diámetro.
2.2.8. Tubos capilares.
2.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
502612 DERQUIM Mezcla crómica
Papel de filtro
2.4. Procedimiento.
Si el líquido a analizar contiene una apreciable
cantidad de gas carbónico, conviene eliminar
completamente éste agitando fuertemente en un
Erlenmeyer y filtrarlo a continuación por medio de
un filtro cubierto de un vidrio de reloj.
2.4.1 Determinación del peso del picnómetro
vacío: Limpiar el picnómetro con Mezcla crómica
DERQUIM, caliente si es necesario; después
enjuagar cuidadosamente con Agua PA-ACS.
Secar durante tres horas en la estufa a 105108ºC. Enfriar en desecador hasta temperatura
ambiente y expresar el resultado con cuatro cifras
decimales.
2.4.2. Determinación del peso del picnómetro
lleno de agua. Llenar el picnómetro hasta la marca
con Agua PA-ACS. Tapar y ponerlo en un baño de
agua a 20ºC durante veinte minutos. Estando la
temperatura equilibrada, enrasar el picnómetro
(siempre sumergido en el baño de agua) con la
ayuda de un capilar.
Secar la parte vacía del cuello del picnómetro
por medio del papel de filtro.
Colocar el tapón, retirar el picnómetro del
baño de agua y secar cuidadosamente. El peso
M
del picnómetro lleno de agua debe ser determinado con una precisión de cuatro cifras decimales.
2.4.3. Determinación del peso del picnómetro
lleno de muestra: Después de haber vaciado el
picnómetro, lavar varias veces con la muestra y
proceder como en 2.4.2., sustituyendo el Agua
PA-ACS por zumo de uva.
2.5. Cálculos.
Calcular la densidad 20º/20°C aplicando la
siguiente fórmula:
c-a
d = ———
b-a
Siendo:
a = Peso picnómetro vacío.
b = Peso picnómetro lleno de agua hasta la
marca.
c = Peso picnómetro lleno de líquido para
analizar hasta la marca.
La densidad obtenida debe expresarse con
una precisión de cuatro cifras decimales.
2.6. Referencias.
Federation Internationale des Producteurs de
Jus de Fruits. Método número 1, 1968.
3. pH
3.1. Principio.
Medida potenciométrica a 20ºC, previa eliminación del dióxido de carbono por agitación en
frío y con vacío parcial.
3.2.1. pH-metro.
3.2.2. Electrodo/s para medida de pH.
3.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131481 Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO
272168 Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02
(20ºC) ST
272170 Tampón, Solución pH 7,00 ± 0,02
(20ºC) ST
3.3.1. Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02
(20ºC) ST o prepararla disolviendo 10,211 g de
Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO (KHC6H 4O 4)
(secado una hora a 105ºC) en un litro de Agua PAACS a 20ºC.
3.4. Procedimiento.
Introducir un volumen adecuado de muestra
en un kitasato. Conectar a vacío agitando al mismo tiempo el matraz, hasta eliminación del gas
carbónico.
Tomar un volumen de muestra exento de dióxido de carbono y determinar el pH.
Expresar el pH medido a 20ºC con uno o dos
decimales, según la precisión del aparato.
3.6. Observaciones.
3.6.1. Antes de cada nueva medida, limpiar los
electrodos con agua destilada y secarlos con
papel de filtro.
3.6.2. El electrodo de calomelanos debe ser
llenado de tiempo en tiempo de solución saturada
de ClK.
3.6.3. El electrodo de vidrio debe ser conservado en agua y el de calomelanos en solución
saturada de ClK. Los electrodos combinados
deben ser conservados en solución saturada de
ClK.
3.6.4. El calibrado se hace con ayuda de las
soluciones tampones siguiendo las indicaciones
particulares del fabricante del aparato.
3.7. Referencias.
Federation International des Producteurs de
Jus de Fruits. Método número 11, año 1968.
4. ACIDEZ TOTAL
4.1. Principio.
Valoración potenciométrica a pH=8,1 de la acidez del zumo de uva, previa eliminación del dióxido de carbono.
4.2.1. pH-metro con electrodo/s para medidas
de pH.
4.3. Reactivos.
171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE
4.4. Procedimiento.
Tomar 20 ml del zumo de uva, exento de dióxido de carbono, obtenido como en 3.4, y llevar a
un vaso de unos 100 ml de capacidad. Poner en
marcha el agitador y valorar con solución 4.3 hasta pH 8,1 a 20ºC.
Mantener en marcha el agitador durante la
operación, que debe durar, como mínimo, cinco
minutos.
4.5. Cálculos.
Calcular la acidez total expresada en meq/l,
con una aproximación de 0,1 meq/l, o en gramos
de ácido tartárico/l.
99
V
Acidez total (meq/l) = 10 ——
2
V
Acidez total (g ac.tartárico/l) = 0,75 ——
2
Siendo:
V= Volumen, en ml, de solución de Sodio
Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE
4.6. Referencias
Recuil des Méthodes Internationales d’Analyse
des Vins O.I.V. A 10 (1969), 1-3.
5. ACIDEZ VOLATIL
5.1. Principio.
Separación de los ácidos volátiles del zumo de
uva por arrastre con vapor de agua, evitando la
presencia de dióxido de carbono en el destilado.
Valoración con solución de sodio hidróxido, descontando los contenidos de ácido sórbico y de
dióxido de azufre libre y total.
5.2.1. Aparato para destilación (ver figura 21.I
pág. 52).
5.2.1.1. Matraz generador de vapor de 3.500 ml
(a). El agua condensada en el tubo de unión del
matraz con el borboteador, se purga por el purgador (c).
5.2.1.2. Borboteador (b). Tubo cilíndrico de
3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo
reposa sobre un disco de amianto de 15 cm de
diámetro con un orificio central de 29 mm. El tubo
(d) por el que entra el vapor en el borboteador
debe llegar a 1cm del fondo.
5.2.1.3. Columna rectificadora (e). De 20 mm
de diámetro y 50 cm de altura.
5.2.1.4. Refrigerante de West (f). De 40 cm de
longitud útil, colocado verticalmente.
100
5.3. Reactivos.
131066 Acido L(+) Tartárico PA-ACS-ISO
171073 Agua de Cal solución saturada RE
(o 171071 Agua de Barita solución
saturada RE)
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol 96% PA
131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato
PA-ACS-ISO
181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV
5.3.1. Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV
5.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Etanol 96% PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluir
convenientemente.
5.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo
0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y
5.4. Procedimiento
Alimentar el generador de vapor con Agua de
Cal solución saturada RE o Agua de Barita solución
saturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta
unos 2/3 de su volumen. Poner en el borboteador
20 ml de zumo de uva exento de gas carbónico,
como en 3.4. Añadir al zumo de uva unos 0,5 g de
Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO, poner en marcha
el generador de vapor, manteniendo abierta la salida del tubo purgador del vapor; después de cerrar
éste, calentar el borboteador. Durante la operación
se regula el calentador de forma que el volumen del
líquido en el borboteador no pase sensiblemente
de los veinte ml iniciales.
Destilar en unos doce-quince minutos 250 ml.
Valorar con Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N)
SV en presencia de dos gotas de Fenolftaleína
como indicador.
Valorar el dióxido de azufre libre en este mismo
destilado, añadiendo al terminar la valoración
anterior una gota de Acido Clorhídrico 37%
PA-ACS-ISO, para acidular nuevamente, valorando el dióxido de azufre libre con solución de Yodo
0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón soluble RE como indicador y un cristal de Potasio
Yoduro PA-ISO.
Para determinar el dióxido de azufre combinado con el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución
saturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PAACS-ISO (el liquido toma un color rosa pálido) y
valorar nuevamente con solución de Yodo 0,01N.
5.5. Cálculos.
Calcular la acidez volátil expresada en meq/l o
en g de ácido acético/l.
Acidez volátil (meq/l)=5(V/2-V’/10-V’’/20)
Acidez volátil (g/l ácido acético)=0,3(V/2V’/10-V”/20)
Siendo:
V = Volumen en ml utilizados de solución de
sodio hidróxido 0,05N.
V’ = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en
la oxidación del dióxido de azufre libre.
V” = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en
la oxidación del dióxido de azufre combinado con el acetaldehído.
M
5.6. Observaciones.
5.6.1. La determinación de la acidez volátil se
efectuará inmediatamente después de la apertura
del envase.
5.6.2. En la destilación del zumo de uva para
la determinación de la acidez volátil, el ácido sórbico pasa casi en su totalidad al destilado, falseando el resultado del análisis. Efectuar la
corrección.
100 mg de ácido sórbico equivalen a 0,892
meq = 0,0535 g de ácido acético.
5.6.3. La corrección de la acidez volátil se rea-
liza según la norma Jaulmes, descontándose Ia
totalidad del contenido en dióxido de azufre libre y
la mitad del contenido de dióxido de azufre total.
6. SOLIDOS SOLUBLES
El contenido en sólidos solubles expresado en
g/l se calcula a partir del valor de la densidad,
obtenida según el método oficial número 2 y utilizando la tabla adjunta.
TABLA 6.1
Estracto seco total (g/l)
Densidad
relativa
con dos
decimales
Tercer decimal de la densidad relativa
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Gramos por litro del extracto
1,00
0
2,6
5,1
7,7
10,3
12,9
15,4
18,0
20,6
23,2
1,01
1,02
1,03
1,04
25,8
51,7
77,7
103,7
28,4
54,3
80,3
106,3
31,0
56,9
82,9
109,0
33,6
59,5
85,5
111,6
36,2
62,1
88,1
114,2
38,8
64,7
90,7
116,8
41,3
67,3
93,3
119,4
43,9
69,9
95,9
122,0
46,5
72,5
98,5
124,6
49,1
75,1
101,1
127,2
1,05
129,8
132,4
135,0
137,6
140,3
142,9
145,5
148,1
150,7
153,3
1,06
1,07
1,08
1,09
155,9
182,1
208,4
234,7
158,6
184,8
211,0
237,3
161,2
187,4
213,6
239,9
163,8
190,0
216,2
242,5
166,4
192,6
218,9
245,2
169,0
195,2
221,5
247,8
171,6
197,8
224,1
250,4
174,3
200,5
226,8
253,1
176,9
203,1
229,4
255,7
179,5
205,8
232,0
258,4
1,10
261,0
263,6
266,3
268,9
271,5
274,2
276,8
279,5
282,1
284,8
1,11
1,12
1,13
1,14
287,4
313,9
340,4
366,9
290,0
316,5
343,0
369,6
292,7
319,2
345,7
372,3
295,3
321,8
348,3
375,0
298,0
324,5
351,0
377,6
300,6
327,1
353,7
380,3
303,3
329,8
356,3
382,9
305,9
332,4
359,0
385,6
308,6
335,1
361,6
388,3
311,2
337,8
364,3
390,9
1,15
393,6
396,2
398,9
401,6
404,3
406,9
409,6
412,3
415,0
417,6
1,16
1,17
1,18
1,19
420,3
447,1
473,9
500,9
423,0
449,8
476,6
503,5
425,7
452,4
479,3
506,2
428,3
455,2
482,0
508,9
431,0
457,8
484,7
511,6
433,7
460,5
487,4
514,3
436,4
463,2
490,1
517,0
439,0
465,9
492,8
519,7
441,7
468,6
495,5
522,4
444,4
471,3
498,2
525,1
1,20
527,8
530,5
533,3
536,0
538,7
541,4
544,1
546,8
549,6
552,3
1,21
555,0
557,7
560,4
563,1
565,8
568,5
571,2
573,9
576,6
579,3
101
TABLA 6.1
(Continuación)
Densidad
relativa
con dos
decimales
Tercer decimal de la densidad relativa
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Gramos por litro del extracto
1,22
1,23
1,24
582,0
609,3
636,6
584,8
612,1
639,4
587,5
614,8
642,1
590,2
617,5
644,9
593,0
620,3
647,4
595,7
623,0
650,3
598,4
625,7
653,1
601,1
628,4
655,8
603,9
631,2
658,6
606,6
633,9
661,3
1,25
664,0
666,8
669,5
672,3
675,0
677,7
680,5
683,2
686,0
688,7
1,26
1,27
1,28
1,29
691,4
719,1
746,7
774,4
694,2
721,9
749,5
777,2
697,0
724,7
752,3
780,0
699,8
727,4
755,1
782,8
702,5
730,2
757,8
785,6
705,3
732,9
760,6
788,3
708,1
735,7
763,4
791,1
710,8
738,5
766,1
793,9
713,6
741,2
768,9
796,7
710,4
744,0
771,7
799,5
1,30
802,3
805,0
807,8
810,6
813,4
816,2
819,0
821,8
824,6
827,4
1,31
1,32
1,33
1,34
1,35
830,2
858,3
886,5
914,8
943,1
833,1
861,2
889,4
917,7
835,9
864,0
892,2
920,5
838,7
866,8
895,0
923,3
841,5
869,6
897,9
926,2
844,3
872,4
900,7
929,0
847,1
875,3
903,5
931,8
849,9
878,1
906,4
934,7
852,7
880,9
909,2
937,5
855,5
883,7
912,0
940,3
TABLA DE INTERPOLAR
102
4° decimal
de la densidad
relativa
g/l del extracto seco
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,26
0,52
0,78
1,04
1,30
1,56
1,82
2,08
2,34
M
7. AZUCARES TOTALES Y REDUCTORES
7.1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reductoras distintas de los azúcares por defecación, inversión y posterior valoración basada en la acción
reductora de los azúcares sobre una solución
cupro-alcalina.
7.2.1. Material necesario para volumetrías.
7.2.3. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de
reflujo.
7.3. Reactivos
131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131505 Potasio Hexacianoferrato III 3-hidrato
PA-ACS
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
172174 Reactivo de Luff-Schoorl RE
131648 Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO
181723 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV
121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA
7.3.1. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % en
volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico
96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
7.3.2. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.
7.3.4. Solución de Potasio Hidróxido al 30%.
Disolver unos gramos de Potasio Hidróxido 85%
lentejas PA-ISO en el volumen conveniente de Agua
PA-ACS.
7.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%. Usese Potasio Yoduro PA-ISO, disuelto con Agua PAACS hasta la concentración deseada. Conservar en
frasco topacio.
7.3.6. Solución de Almidón al 1%. Disolver 1 g
de Almidón soluble RE con Agua PA-ACS, enrasando a 100 ml.
7.3.7. Solución de Carrez I:
Disolver 150 g de Potasio Hexacianoferrato III 3hidrato PA-ACS en un litro de Agua PA-ACS.
7.3.8. Solución de Carrez II:
Disolver 300 g de Zinc Sulfato 7-hidrato PA en un
litro de Agua PA-ACS.
7.3.9. Reactivo de Luff-Schoorl RE, o bien prepararlo de la siguiente forma:
Disolver 50 g de Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACSISO en 500 ml de Agua PA-ACS y 143,7 g de Sodio
Carbonato anhidro PA-ACS-ISO en 350 ml de Agua
PA-ACS tibia; cuando se haya enfriado, mezclar
con cuidado ambas soluciones. Disolver 25 g de
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml
de Agua PA-ACS. Añadir a la solución anterior y
enrasar con Agua PA-ACS hasta 1 l.
7.3.10. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
7.3.11. Solución de Fenolftaleína: Disolver 0,1 g
de Fenolftaleína PA-ACS en 100 ml de Etanol 96%
v/v PA.
7.4. Procedimiento.
7.4.1. Preparación de la muestra: Tomar con
pipeta 25 ml de la muestra en matraz aforado de
500 ml. Añadir 150 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de la
solución Carrez I; mezclar y añadir 5 ml de la solución Carrez II. Mezclar y enrasar con Agua PA-ACS.
Dejar en reposo diez minutos y filtrar.
7.4.2. Inversión de los azúcares: Tomar con
pipeta 25 ml de la muestra preparada según (7.4.1.)
y llevar a un matraz de 100 o 200 ml, según la dilución a emplear. Diluir con Agua PA-ACS hasta 75 ml
y añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 1-hidrato PAACS-ISO. Antes de 5 minutos llevarlo a 67-70°C en
un baño de agua, mantenerlo durante cinco minutos a esa temperatura. Comprobar la temperatura
con un termómetro introducido en la disolución.
Enfriar inmediatamente el matraz a 20°C, quitar el
termómetro y aclararlo. Neutralizar el contenido con
solución de Potasio Hidróxido al 30%, utilizando
Fenolftaleína como indicador. Añadir unas gotas de
Acido Acético glacial PA-ACS-ISO hasta que el
color de la Fenolftaleína desaparezca. Enrasar el
matraz con Agua PA-ACS.
7.4.3. Determinación de los azúcares totales:
La solución de la muestra no debe contener más
de 50 mg de azúcares reductores. Tomar con
pipeta 25 ml de la muestra preparada según
(7.4.2.) sobre un matraz que contenga 25 ml de la
solución de Luff-Schoorl (7.3.9.). Añadir al matraz
unas perlas de vidrio y conectar el refrigerante de
reflujo. Calentar el matraz con llama potente
durante dos minutos y mantener a ebullición
durante diez minutos exactos. Enfriar inmediatamente en agua. Cuando esté completamente frío,
añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
(7.3.5.) y, con cuidado, 25 ml de la solución de
Acido Sulfúrico (7.3.1.). Añadir 2 ml de la solución
de Almidón (7.3.6.) y valorar el contenido del
matraz con solución de Sodio Tiosulfato 0,1mol/l
(0,1N) SV (7.3.10.) hasta obtener una coloración
blanca cremosa. Si se hubieran empleado menos
de 5 ml en la valoración, repetir la determinación
utilizando una dilución de la muestra más adecuada.
Realizar en paralelo una determinación en blanco, empleando 25 ml de Agua PA-ACS.
103
7.4.4. Azúcares reductores: Para la determinación de azúcares reductores seguir el mismo procedimiento suprimiendo la inversión (7.4.2.).
7.5. Cálculos.
Sea D la diferencia entre lo gastado de Sodio
Tiosulfato por el blanco y lo gastado por la muestra.
La concentración de azúcares totales expresados
en glucosa se obtiene del valor D en la tabla, interpolando en caso necesario y multiplicando por el
factor de dilución.
7.6. Referencias.
Federation International des Producteurs de Jus
de Fruits. Método número 4. Año 1985.
8.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación del
ácido ascórbico por cromatografía de líquidos de
alta eficacia, detectándolo en el ultravioleta a
268 nm.
8.2.1. Equipo de filtración de muestra y disolvente para eliminar partículas superiores a 0,5 mm.
8.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con
detector de ultravioleta de longitud de onda variable
y registrador.
8.2.3. Columna NH 2 - Lichorsob de 250 x
4,6 mm fr 10 mm o similar.
8.3. Reactivos.
263093 Acetonitrilo-gradiente HPLC
131013 Acido L(+)-Ascórbico PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
PA-ACS-ISO
Tabla 7,1
Para 25 ml de reactivo de Luff-Schoorl
104
8. ACIDO ASCORBICO
D = ml de Tiosulfato
mg de Glucosa
Diferencia
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
2,4
4,8
7,2
9,7
12,2
14,7
17,2
19,8
22,4
25,0
27,6
30,3
33,0
35,7
38,5
41,3
44,2
47,1
50,0
53,0
56,0
59,1
62,2
2,4
2,4
2,5
2,5
2,5
2,6
2,6
2,6
2,6
2,6
2,7
2,7
2,7
2,7
2,8
2,9
2,9
2,9
3,0
3,0
3,0
3,1
8.3.1. Solución patrón de Acido Ascórbico de
300 mg/l, preparada con Acido L(+) - Ascórbico
PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS y conservada en
matraz color topacio.
8.3.2. Solución A: Tampón fosfato pH 3,5. Disolución 0,005M de Potasio di-Hidrógeno Fosfato
PA-ACS-ISO (KH2PO4): Filtrar esta solución con
(8.2.1.).
8.3.3. Solución B: Acetonitrilo-gradiente HPLC.
8.4. Procedimiento.
8.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:
Fase móvil: Tampón Potasio di-Hidrógeno Fosfato/Acetonitrilo-gradiente HPLC: 60/40 (v/v).
Flujo : 1 ml/minuto.
8.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo
entre 10 y 20 ml de la solución patrón (7.3.1.) y calcular el factor de respuesta.
Co
Factor de respuesta (F) = ––––
Ap
Siendo:
Co = Concentración en mg/l de ácido ascórbico.
Ap = Area del pico en el cromatograma de la
solución patrón.
8.4.3. Determinación: Homogeneizar. Filtrar
mediante (8.2.1.) e inyectar de 10 a 20 ml en el cromatógrafo.
8.5. Cálculos.
El contenido de ácido ascórbico, expresado en
M
mg/l (sin decimales), se obtendrá mediante la
siguiente fórmula:
9.4.2. Calibrado: inyectar en el cromatógrafo una
cantidad conocida de la solución patrón y calcular
los factores de respuesta.
Acido ascórbico (mg/l) = F x Ac
Siendo:
F = Factor de respuesta.
Ac = Area del pico del ácido ascórbico en la
muestra.
8.6. Observaciones.
8.6.1. La determinación del ácido ascórbico se
realizará inmediatamente después de la apertura
del envase.
8.6.2. Con este método no se determina ácido
dehidroascórbico.
9. RELACION GLUCOSA-FRUCTOSA
9.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación de
glucosa y fructosa por cromatografía de líquidos de
alta eficacia con detector de índice de refracción.
9.2.1. Equipos de filtración de muestra y disolventes para eliminar partículas superiores a 0,5 mm.
detector de índice de refracción y registrador.
9.2.3. Columna Sugar-Pack u otra columna que
permita la separación de glucosa y fructosa.
9.2.4. Horno para columna.
9.3. Reactivos.
Disódico Cálcica PA
131074 Agua PA-ACS
212236 Agua Desionizada QP
121211 Calcio Acetato x-hidrato PA
142728 D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP)
PRS-CODEX
121341 D(+)-Glucosa PA
9.3.1. Soluciones patrón de Glucosa y Fructosa
al 10% (p/v). Preparar ambas soluciones disolviendo 10 g de D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) PRSCODEX y D(+)-Glucosa PA en 100 ml de Agua PAACS.
9.4. Procedimiento.
9.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas
para la columna Sugar-Pack:
Fase móvil: Solución de 20 mg/l de Calcio Acetato x-hidrato PA o Acido Etilendiaminotetraacético
Sal Disódico Cálcica PA en Agua Desionizada QP y
Agua PA-ACS.
Flujo : 0,4-0,5 ml/min.
Temperatura del horno : 90-95° C.
Co
Factor de respuesta (F) = ––––
Ap
Siendo:
Co = Concentración en g/l del patrón.
Ap = Area del pico patrón en el cromatograma.
9.4.3. Determinación: Filtrar la muestra mediante
los equipos del apartado (9.2.1.) e inyectar una cantidad conocida en la columna.
9.5. Cálculos
El contenido en glucosa y fructosa, expresado
en g/l, se obtiene mediante la siguiente fórmula:
Glucosa (g/l) = F1 x A1 x f
Fructosa (g/l) = F2 x A2 x f
Siendo:
F1 = Factor de respuesta de la glucosa.
F2 = Factor de respuesta de la fructosa.
f
= Factor de dilución.
A1 = Area del pico de glucosa en la muestra.
A2 = Area del pico de fructosa en la muestra.
9.6. Observaciones.
Los factores de respuesta deben calcularse
varias veces durante una sesión. Es pues recomendable tener termostatizado el detector.
10. NITROGENO TOTAL
10.1. Principio.
Digestión del producto con ácido sulfúrico concentrado, en presencia de catalizador, en la cual se
transforma el nitrógeno orgánico en iones amonio,
que en medio fuertemente básico es desplazado en
forma de amoníaco, y recogido sobre ácido bórico.
La posterior valoración con ácido clorhídrico permite el cálculo de la cantidad inicialmente presente
de nitrógeno orgánico y amoniacal en la muestra.
10.2.1. Aparato Kjeldahl.
10.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
122726 Cobre II Sulfato anhidro PA
105
Papel Tornasol
131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO
141625 Selenio metal polvo PRS
171759 Verde de Bromocresol indicador
RE-ACS
10.3.2. Catalizador de selenio. Mezclar bien pulverizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 20 g de
Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio metal polvo PRS.
10.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel Tornasol.
10.3.4. Indicador: Pesar 105 mg de Rojo de Metilo
(C.I. 13020) RE-ACS y 150 mg de Verde de Bromocresol indicador RE-ACS y disolver a 100 ml con Etanol 96% v/v PA.
10.3.5. Solución de Acido Bórico al 1%. Pesar
10 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO, disolver con Agua
PA-ACS, añadir 10 ml del indicador (10.3.4.) y enrasar
a 1 litro con Agua PA-ACS.
10.3.6. Solución de Sodio Hidróxido al 40%. Disolver Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS hasta la concentración deseada.
10.3.7. Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV.
106
Poner en el matraz Kjeldahl 5-10 ml de zumo de
uva y añadir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
Evaporar hasta consistencia siruposa. Añadir 10 ml
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 7 g de catalizador
(10.3.2.), continuar calentando primero lentamente y
después enérgicamente hasta decoloración, proseguir unos minutos más. Si es necesario se van añadiendo nuevas dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
de 5 en 5 ml.
Enfriar el matraz a temperatura ambiente, adicionar
unas gotas de Fenolftaleína solución 1% RE y llevarlo
al aparato de destilación. En un vaso cilíndrico de
unos 200 ml añadir 25 ml de Acido Bórico PA-ACSISO (10.3.5.). Añadir al matraz solución de Sodio
Hidróxido (10.3.6.) en cantidad suficiente para viraje
de la Fenolftaleína solución 1% RE. Conectar el aparato de destilación con el generador de vapor de agua
y comenzar el arrastre del Amoníaco recogiendo el
destilado en la solución de Acido Bórico (10.3.5.).
Después de quince-veinte minutos, comprobar
con Papel de Tornasol si una gota del destilado no
acusa reacción alcalina. En este caso separar el vaso
y proceder a la valoración. Valorar con Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV (10.3.7).
10.5. Cálculo.
El contenido en nitrógeno expresado en mg/l
vendrá por la siguiente fórmula:
700 (V1- V0)
Nitrógeno (mg/l) = –––––––––––––
V
Siendo:
V = Volumen, en ml, utilizados de muestras.
V1 = Volumen, en ml, de solución de ácido clorhídrico empleado en la valoración.
V0 = Volumen, en ml, de solución de ácido clorhídrico empleado en el blanco.
Para efectuar el procedimiento Kjeldahl podrán
utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos,
adaptándose a las especificaciones del equipo.
10.7. Referencias.
Recueil des Methodes Internationales d’Analyse
des Vins. O. I. V. A. (40). 1969.
11. ETANOL
11.1. Principio.
etanol por cromatografía gaseosa.
11.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con
detector de ionización de llama.
11.2.2. Columna cromatográfica. Columna de
2 m de longitud y 2 mm de diámetro interno, relleno
de Porapak Q 80-100 mallas o cualquier otra
columna que permita la separación y cuantificación
del etanol.
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
351085 Etanol 96% v/v CG
354457 2-Propanol CG
11.4.1. Condiciones cromatográficas: Las condiciones cromatográficas orientativas para la columna
de Porapak son: Gas portador nitrógeno 35 ml/min.;
temperatura del horno: 130° C; temperatura del
inyector y del detector: 180° C.
11.4.2. Calibrado.
11.4.2.1. Patrón interno: Solución al 10% (v/v) de
2-Propanol CG en Agua PA-ACS
11.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución
de Etanol 96% v/v CG-Agua PA-ACS que contenga el
porcentaje de Etanol que se supone tiene la muestra.
11.4.2.3. Solución de calibrado: A 100 ml de la
solución patrón (11.4.2.2.) se le ha de añadir 1 ml de
la solución del patrón interno (11.4.2.1.) y se inyecta
1 microlitro en el cromatógrafo.
11.4.2.4. Muestra problema: A 100 ml de la muestra añadir 1 ml de la solución patrón interno
(11.4.2.1.) e inyectar 1 microlitro en el cromatógrafo.
M
11.5. Cálculos.
Calcular el factor de respuesta y la concentración de etanol en la muestra, aplicando las fórmulas
siguientes:
Ci x Ap
Factor de respuesta (FR) = –––––––––
Ai
Concentración en la muestra
Aim
(% en volumen) = FR x –––––––
Apm
Siendo:
Ci
= Porcentaje en volumen del etanol en la
solución patrón.
Ap = Area del patrón interno en la solución
patrón.
= Area del etanol en la solución patrón.
Ai
Aim = Area del etanol en la muestra problema.
Apm = Area del patrón interno en la muestra
problema.
11.6 Observaciones.
La determinación de etanol se efectuará inmediatamente después de la apertura del envase.
12. INDICE DE FORMOL
12.1. Principio.
Valoración de la acidez de los compuestos formados por la reacción del formaldehído con los aaminoácidos.
pH metro.
12.3. Reactivos.
131328 Formaldehído 36,5-38% p/v
estabilizado con metanol PA-ACS
PRS
12.3.2. Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)
PRS.
12.3.3. Solución de Formaldehído. Llevar el Formaldehído 36,5-38% p/v estabilizado con metanol
PA-ACS, a pH 8,1 mediante la solución de Sodio
Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.), utilizando
el pH-metro. Comprobar cada hora.
Poner 25 ml de zumo de uva en un vaso de precipitados y neutralizar con Sodio Hidróxido
0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.) hasta pH 8,1, utilizando el pH-metro. Añadir 10 ml de la solución de
Formaldehído (12.3.3.) y mezclar. Al cabo de un
minuto efectuar la valoración potenciométrica de la
solución problema con la solución de Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV hasta pH 8,1.
Si se hubieran utilizado más de 20 ml de la solución de Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV,
deberá realizarse de nuevo la valoración empleando
15 ml de solución de Formaldehído, en lugar de
10 ml.
Si la muestra contiene Anhídrido Sulfuroso, añadir algunas gotas de Hidrógeno Peróxido 30% p/v
(100 vol.) PRS antes de la neutralización.
12.5 Expresión de los resultados.
El índice de formol de la muestra analizada es
igual a la cantidad de solución alcalina utilizada en la
valoración expresada en ml de sodio hidróxido 0,1N
y que corresponden a 100 ml de zumo de uva.
12.6. Referencias.
Federation Internationale des Producteurs de
Jus de Fruits. Analyses F.I.P.J.F. No. 30 Año 1984.
13. PROLINA
13.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la prolina por reacción con ninhidrina en medio ácido.
13.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.
13.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que
permita efectuar lecturas a 517 nm.
13.3. Reactivos.
131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS
132362 Ninhidrina PA-ACS
13.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílico
del Etilenglicol PRS
13.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS
13.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO-Agua PA-ACS
1:1 (v/v).
Diluir la muestra hasta que contenga de 5 a
50 mg/l de prolina. Tomar 0,5 ml de muestra diluida
e introducirla en un tubo de ensayo con tapón de
rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico 98% PAACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al 3%. Cerrar
herméticamente el tubo e introducirlo en un baño de
agua hirviendo durante catorce o quince minutos,
añadiendo mientras se enfría 5 ml de solución de
2-Propanol PA-ACS-ISO- Agua PA-ACS 1:1 (v/v).
A continuación efectuar la lectura de la absorción a 517 nm después de cinco minutos y antes
107
de treinta minutos. Efectuar un blanco siguiendo el
procedimiento anterior, pero usando 0,5 ml de Agua
PA-ACS en vez de la solución problema.
Calcular el contenido en prolina por comparación con una curva patrón que comprenda concentraciones entre 5 y 50 mg/l.
13.6. Referencias.
C.S. Dugh J. of Food Science 34 (1969). 228.
14. ACIDO SORBICO
14.1. Principio.
ácido sórbico por cromatografía de líquidos de alta
eficacia y detección en ultravioleta a 230 nm.
14.2.1. Equipos de filtración de muestra y de
solventes, para eliminar partículas superiores a
0,5 mm.
detector de ultravioleta de longitud de onda variable
y registrador.
14.2.3. Columna C-18 de 250x4,6 mm de 10 mm
o similar.
14.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
261091 Metanol HPLC
122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato
PA
PA-ACS-ISO
14.3.1. Solución patrón de 50 mg/l de Acido
Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX en Metanol HPLC.
14.3.2. Solución tampón de fosfatos de pH =
6,6. Disolver 2,5 g de di-Potasio Hidrógeno Fosfato
3-hidrato PA (K2HPO4.3H2O) y 2,5 g de Potasio diHidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH2PO4) en un
litro de Agua PA-ACS. Filtrar esta solución con
(12.4.1.).
14.3.3. Metanol HPLC.
108
14.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas: Fase móvil: Metanol HPLC-tampón fosfato
10:90 (v/v).
Flujo : 1 ml/min.
entre 10 y 20 ml de la solución patrón (14.3.1.) y
calcular el factor de respuesta.
Co
Factor de respuesta (F) = –––––
Ap
Siendo:
Co = Concentración en mg/l de ácido sórbico.
solución patrón.
14.4.3. Determinación: Poner 10 ml de zumo de
uva en un matraz de 50 ml y enrasar con Metanol
HPLC. Homogeneizar. Filtrar con 14.2.1. e inyectar
entre 10 y 20 µl en el cromatógrafo.
14.5. Cálculos.
El contenido en ácido sórbico expresado en mg/l
se obtendrá mediante la siguiente fórmula:
Acido Sórbico (mg/l) = F x A1 x f
Siendo:
A1 = Area del pico del ácido sórbico en la
muestra.
f = Factor de dilución de la muestra.
La sensibilidad puede aumentarse efectuando
lecturas a 250 nm.
14.7. Referencias.
T. Stijve and Hischenhuber-Deutsche Lebensmittel-Rundschau 80, Jahrf/Heft 3/1984.
15. ACIDO BENZOICO
15.1 Principio.
ácido benzoico por cromatografía de líquidos de
alta eficacia y detección en el ultravioleta a 230 nm.
Como en 14.2.
15.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
261091 Metanol HPLC
PA
PA-ACS-ISO
15.3.1. Solución patrón de Acido Benzoico PA
en Metanol HPLC de 50 mg/l.
15.3.2. Como en 14.3.2.
15.3.3. Como en 14.3.3.
15.4 Procedimiento.
Como en 14.4., siendo en este caso Co la concentración en mg/l de Acido Benzoico en la solución
patrón (15.3.1.).
M
15.5. Cálculos.
El contenido en ácido benzoico expresado en
mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:
Acido benzoico (mg/l) = F x A1 x f
Siendo:
A1 = Area del pico del ácido benzoico en la
muestra.
La sensibilidad puede aumentarse efectuando
lecturas a 217 nm.
15.7. Referencias.
Como en 14.7.
Siendo:
Co = Concentración, en mg/l, de hidroximetilfurfural.
solución patrón.
16.4.3. Determinación: Inyectar en el cromatógrafo 20 µl de la muestra filtrada.
16.5. Cálculos.
El contenido en hidroximetilfurfural expresado en
mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:
Hidroximetilfurfural (mg/l) = F x A1 x f
Siendo:
F = Factor de respuesta
A1 = Area del pico de HMF en la muestra
16. HIDROXIMETILFURFURAL
16.1 Principio.
hidroximetilfurfural por cromatografía de líquidos de
alta eficacia y detección en el ultravioleta a 285 nm.
16.2.1. Equipos de filtración de muestra y de
solventes, para eliminar partículas superiores a
0,5 µm.
detector ultravioleta de longitud de onda variable y
registrador.
16.2.3. Columna C-18 de 200 x 4,6 mm de 5 µm
o similar.
16.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Hidroximetilfurfural
261091 Metanol HPLC
16.3.1. Solución patrón: Solución de 20 mg/l de
Hidroximetilfurfural recientemente destilado en
Metanol HPLC.
16.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas: Fase móvil: Agua Destilada y Desionizada.
tiempo de retención aproximado: 7 minutos.
Flujo 1 ml/min.
20 µl de la solución patrón (16.3.1.) y calcular el factor de respuesta.
Co
Factor de respuesta (F) = ––––––
Ap
17. CENIZAS
17.1 Principio.
Incineración del residuo obtenido tras la evaporación del zumo de uva realizada de manera que se
puedan obtener todos los cationes (excepto amonio) en forma de carbonatos y otras sales minerales
anhidras.
17.2.1. Cápsulas de platino o cuarzo, de unos
80 mm de diámetro, con fondo plano.
17.2.2. Baño de agua y arena.
17.2.4. Balanza analítica con sensibilidad de
0,1 mg.
Poner 25 ml de zumo de uva en cápsula tarada.
Evaporar con precaución en baño de agua (17.2.2.)
hasta consistencia siruposa.
Añadir al residuo unas gotas de aceite de oliva,
calentar lentamente en baño de arena (17.2.2.),
hasta que la mayor parte de la sustancia orgánica
esté carbonizada. Introducir la cápsula en el horno
(17.2.3.) a 525° C hasta que el residuo esté blanco
(generalmente a las seis u ocho horas). Enfriar
enseguida la cápsula en un desecador (unos treinta
minutos) y pesar rápidamente.
Puede, ocurrir, a veces, que el carbono no se
quema completamente. En este caso, humidificar
las cenizas con Agua PA-ACS, evaporar de nuevo y
calcinar. Si fuera necesario, repetir esta operación
varias veces.
17.4. Cálculos.
El contenido en cenizas, expresado en gramos
por litro, vendrá dado por la siguiente fórmula:
Cenizas (g/l) = 40 x P
109
Siendo:
P = Peso en g de las cenizas contenidas en
25 ml de zumo de uva.
Un ligero color marrón rojizo de las cenizas, posiblemente de Fe2O3 es aceptado y no requiere un
posterior tratamiento.
17.6. Referencias.
Federation International des Producteurs de Jus
de Fruits. Método N° 9. Año 1962.
18. MATERIAL MINERAL INSOLUBLE
EN ACIDO CLORHIDRICO AL 10%
18.1. Principio.
Tratamiento de las cenizas con ácido clorhídrico
al 10%, en las condiciones que se especifica en el
método.
18.2.1. El mismo que en (17.2.).
18.2.2. Papel de filtro, sin cenizas, de porosidad
media o crisol filtrante número 3.
18.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
18.3.2. Solución de Acido Clorhídrico al 10%
(p/p).
18.3.3. Solución de Plata Nitrato de 100 g/l.
Disolver Plata Nitrato PA-ACS-ISO con Agua PAACS hasta la concentración deseada.
110
Añadir a las cenizas totales en la misma cápsula
que se ha utilizado para su preparación, de 15 a
25 ml de la solución de Acido Clorhídrico (18.3.2.).
Llevar la cápsula y mantener a ebullición durante
diez minutos. Recubrir la cápsula con vidrio de reloj,
para impedir cualquier proyección.
Dejar enfriar y filtrar el contenido de la cápsula a
través del papel del filtro o crisol (18.2.2.). Lavar el
papel de filtro o crisol con Agua PA-ACS hasta que
las aguas de lavado estén exentas de Acido Clorhídrico, lo que se comprueba con la solución de Plata
Nitrato (18.3.3.).
Evaporar cuidadosamente e incinerar en el horno regulado a 525° C durante una hora. Dejar
enfriar la cápsula o el crisol y pesar con una precisión de 0,001 g. Repetir las operaciones de incineración hasta que la diferencia de masa entre dos
determinaciones sucesivas sea inferior a 0,001 g.
18.5. Cálculos.
El contenido en cenizas insoluble en ácido,
expresadas en mg/l, vendrá dado por la siguiente
expresión:
Cenizas insolubles mg/l = (P1-P0) x 40
Siendo:
P0 = Peso, en mg, de la cápsula vacía o el crisol
vacío.
P1 = Peso, en mg, de la cápsula o crisol con las
cenizas insolubles en ácido.
18.6. Referencias.
Instituto de Racionalización y Normalización del
Trabajo, UNE 34-096-81.
19. FOSFORO TOTAL
19.1. Principio.
Transformación de los compuestos fosforados y
posterior valoración espectrofotométrica como fosfomolibdovanadato.
19.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro de
efectuar lecturas a 400 nm.
19.2.2. Cápsula de platino, cuarzo o similar.
19.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131134 Amonio Molibdato 4-hidrato
PA-ACS-ISO
122352 Amonio meta-Vanadato PA
PA-ACS-ISO
19.3.1. Solución patrón de fosfatos. Disolver
0,2397 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACSISO (KH2PO4), desecado previamente en estufa
durante dos horas a 105° C, en Agua PA-ACS y enrasar a 250 ml.
19.3.2. Solución de Amonio Molibdato. Disolver
60 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO en
900 ml de Agua PA-ACS caliente, enfriar y enrasar a
1 litro.
19.3.3. Solución de Amonio meta-Vanadato.
Disolver 1,5 g de Amonio meta-Vanadato PA en
690 ml de Agua PA-ACS caliente, añadir 300 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, enfriar y enrasar a 1
litro.
19.3.4. Solución de metamolibdovanadato. Añadir
lentamente la solución de Amonio Molibdato (19.3.2.)
sobre la solución de Amonio meta-Vanadato
(19.3.3.), agitando. Conservar la solución en frascos
de polietileno.
M
19.3.5. Solución de Acido Clorhídrico. Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en
(1 + 3) (v/v).
19.3.6. Solución de Acido Clorhídrico. Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en
(1 + 9) (v/v).
19.4.1. Curva de calibrado. A partir de la solución patrón (19.3.1.) preparar una serie de soluciones que contengan 0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20;
0,25; 0,30 y 0,35 mg de P2O5/10 ml respectivamente. A continuación poner alícuotas de 10 ml de
cada solución en matraz aforado de 50 ml. Rápidamente añadir a cada matraz 5 ml del reactivo de
Metamolibdovanadato (19.3.4.), mezclar, enrasar y
tapar. Dejar reposar al menos treinta minutos.
Efectuar las lecturas de los patrones frente a la
solución 0,00 antes de una hora, a 400 nm. Representar gráficamente concentraciones frente a
absorbancias leídas.
19.4.2. Preparación de la muestra. Tomar 25 ml
de zumo de uva y obtener las cenizas según método oficial número 17. Disolver las cenizas en 10 ml
de solución de Acido Clorhídrico (19.3.5.) y evaporar en baño de agua. Disolver el residuo obtenido en
10 ml de solución de Acido Clorhídrico (19.3.6.)
calentar en baño maría y transferir a matraz de
100 ml, enfriar y enrasar con Agua PA-ACS. Agitar y
filtrar para eliminar las materias insolubles presentes.
19.4.3. Determinación. Tomar 10 ml de filtrado y
continuar como en la curva de calibrado (19.4.1.).
Si el contenido de P2O5 en las cenizas es superior a 3,5 mg, llevar a matraz aforado superior a 100
ml o efectuar diluciones hasta que el contenido de
P2O5 en la alícuota sea menor a 0,35 mg.
19.5. Cálculos.
El contenido en mg de P2O5 en 100 ml de muestra se obtendrá mediante la curva de calibrado,
teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.
Para expresar el resultado como mg de P en
100 ml de muestra, multiplicar el resultado anterior
por 0,437.
19.6. Referencias.
Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª edición, 1984.
20. SULFATOS
20.1. Principio.
Previa eliminación del dióxido de azufre por ebullición, se precipitan los iones sulfato como Bario
Sulfato, se calcina y se pesa.
20.2.1. Matraz Erlenmeyer de 500 ml provisto de
ampolla con llave de 100 ml y tubo de desprendimiento de vapor, atravesando ambos el tapón. El
matraz se coloca sobre disco metálico de 15 cm de
diámetro con abertura circular de 8 cm de diámetro.
20.2.2. Baño de agua y plancha caliente.
20.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
20.3.2. Bario Cloruro. 100 g de Bario Cloruro
2-hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PAACS.
20.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO
20.4.1. Eliminación del dióxido de azufre del
zumo de uva. Introducir en el Erlenmeyer del aparato
descrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido
Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución
para eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml de
zumo de uva por la ampolla de llave evitando que la
ebullición se pare durante esta adición. Continuar la
ebullición hasta reducir el volumen del líquido a unos
100 ml eliminando todo el dióxido de azufre.
20.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar el
residuo de la evaporación anterior a un vaso de
400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de
Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total
a 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l
(2N) SV y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota
10 ml de solución de Bario Cloruro, con la precaución de no parar la ebullición y dejar reposar en
caliente, colocando el vaso sobre placa a 60°C
durante cuatro horas y en baño de agua hirviendo
durante dos horas. En el caso de pequeñas cantidades de precipitado, se recomienda un segundo
reposo en frío durante 12 horas. Filtrar por filtro sin
cenizas, lavar el vaso y precipitado con Agua PAACS caliente hasta que no dé reacción con Plata
Nitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente
plegado a crisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, después de enfriar en un desecador, pesar.
20.5. Cálculos.
Calcular el contenido de sulfatos expresado en
meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproximación de ± 0,05 g/l.
Sulfato = 85,68 P meq/l.
Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.
P
= peso de las cenizas en g.
20.6. Referencias.
Recueil des Méthodes Internationales d’Analyse
des Vins. O.I.V., A 14, 1-4. 1969.
111
21. ANHIDRIDO SULFUROSO
21.1. Principio.
Liberación del sulfuroso “libre” por acidificación
del zumo de uva, arrastre por corriente de aire,
oxidación por borboteo en agua oxigenada neutra
y valoración con sosa del ácido sulfúrico formado.
Liberación por ebullición moderada del sulfuroso
“combinado”, que queda en el zumo de uva después de la extracción del sulfuroso “libre” y análogo tratamiento que en la determinación del sulfuroso “libre”. El sulfuroso “total” es la suma del
sulfuroso “libre” y el sulfuroso “combinado”. Puede
determinarse acidificando el zumo de uva y calentando y procediendo como en los dos casos anteriores.
Este método es aplicable para contenidos en
anhídrido sulfuroso superiores a 10 mg/l.
Como en 28 (a).2. de Métodos de Análisis de
Vinos pág. 59.
21.3. Reactivos.
Como en 28 (a).3. de Métodos de Análisis de
Vinos pág. 59.
112
21.4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre. En
el matraz de 100 ml del aparato, poner 10 ml de
zumo de uva y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al
25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio.
Si la riqueza en SO2 del vino es pequeña, se emplea
el matraz de 250 ml y se ponen 20-25 ml de uva.
Sumergir el matraz en un baño de agua a 10° C.
Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3 volúmenes y dos gotas del reactivo indicador en el
matraz B y neutralizar el Hidrógeno Peróxido con
Sodio Hidróxido 0,01N.
Adaptar el matraz B al aparato y hacer borbotear
aire (o, nitrógeno) durante 12-15 minutos. Retirar el
matraz B y valorar el ácido sulfúrico formado con
Sodio Hidróxido 0,01 N.
21.4.2. Análisis de anhídrido sulfuroso combinado. Después de terminar la valoración del anhídrido
sulfuroso libre, colocar en el matraz B, ya limpio, los
2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado y con
las dos gotas del indicador. Calentar con llama
pequeña hasta llevar a la ebullición el zumo de uva
que quedó en el matraz después de la determinación anterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondo
del matraz, que descansará sobre chapa metálica
perforada con orificio de 30 mm de diámetro, para
evitar la pirogenación de los azúcares del zumo de
uva sobre las paredes del matraz.
Mantener el paso del aire o nitrógeno durante la
ebullición que durará 12-15 minutos, tiempo que se
considera suficiente para arrastrar todo el sulfuroso
combinado y después oxidarlo. Retirar el matraz B
y valorar el ácido sulfúrico formado con Sodio
Hidróxido 0,01N.
21.4.3. Anhídrido sulfurososo total. Puede determinarse por la suma del anhídrido sulfuroso libre
más el anhídrido sulfuroso combinado, pero también puede determinarse directamente, actuando
desde un principio con corriente de aire o nitrógeno
y con calor.
21.5. Cálculos.
Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso
expresado en mg/l, con una aproximación de
10 mg/l.
320 V1
Anhídrido sulfuroso = –––––––– mg/l
V2
Siendo:
V1 = Volumen, en ml, de NaOH 0,01N gastados
en la valoración.
V2 = Volumen, en ml, de muestra para el análisis.
21.6. Referencias.
21.6.1. Paul, F. “Mitteinlungen Klosternenberg”,
A : 8, 21, 1958.
d’Analyse des Vins. O.I.V., A17, 1-8, 1969.
22. POTASIO
22.1. Principio.
El potasio se determina por fotometría de llama
previa adición de litio cloruro, para evitar la ionización parcial de los metales en la llama.
22.2.2. Material de uso normal en laboratorio.
22.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
141392 Litio Cloruro PRS
313190 Potasio solución patrón
K = 1,000 ± 0,002 g/l AA
22.3.1. Potasio solución patrón K = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,907 g de
131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO en un litro de
Agua PA-ACS.
22.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g
de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.
22.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3; 5 y
7 mg/l preparadas a partir de la solución de Potasio, previa adición de la cantidad necesaria de Litio
Cloruro PRS, para que el Litio se encuentre en una
proporción de aproximadamente 2.000 mg/l.
M
Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 200 ml con
Agua PA-ACS (previa adición de la cantidad necesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litio se encuentre en una proporción de aproximadamente
2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama frente
a las soluciones de referencia a 766-770 nm.
22.5. Cálculos.
El contenido de potasio se calcula a partir del
valor obtenido en el espectrofotómetro por comparación con la curva patrón, teniendo en cuenta la
dilución efectuada. Los resultados se expresan en
mg de Potasio/ 100 ml de la muestra.
Puede utilizarse una solución de 40 g/l de cloruro
de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo en este
caso la concentración adecuada de cloruro de cesio
en las disoluciones de la muestra y patrones entre
0,1-0,4%.
22.7. Referencias.
22.7.1. Federation International des Producteurs
de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.
tidad necesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litio
se encuentre en una proporción de aproximadamente 2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama
frente a las soluciones de referencia a 589 nm.
23.5. Cálculos.
El contenido de sodio se calcula a partir del valor
obtenido en el espectrofotómetro por comparación
con la curva patrón, teniendo en cuenta la dilución
efectuada. Los resultados se expresan en mg de
sodio/l de la muestra.
23.6.1. Puede utilizarse una solución de 40 g/l de
cloruro de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo
en este caso la concentración adecuada de cloruro
de cesio en las disoluciones de la muestra y patrones entre 0,1 y 0,4%.
23.6.2. Efectuar las diluciones necesarias para
que la muestra esté en el rango de la curva.
23.7. Referencias.
23.7.1. Federation International des Producteurs
de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.
23.7.2. Métodos Associations of Official Analytical Chemist. Ed. 1984.
23. SODIO
24. ARSENICO
23.1. Principio.
El Sodio se determina por fotometría de llama
previa adición de litio cloruro, para evitar la ionización parcial de los metales en la llama.
23.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
141392 Litio Cloruro PRS
313192 Sodio solución patrón
Na = 1,000 ± 0,002 g/l AA
23.3.1. Sodio solución patrón Na = 1,000 ±
131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO (NaCl) en un
litro de Agua PA-ACS.
23.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g
de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.
23.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3 y 5 mg/l
preparadas a partir de la solución de Sodio, previa
adición de la cantidad necesaria de Litio Cloruro
PRS, para que el Litio se encuentre en una proporción de aproximadamente 2.000 mg/l.
Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 100 ml (ver
23.6.2.) con Agua PA-ACS (previa adición de la can-
24.1. Principio.
La muestra se somete a una digestión ácida con
una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.
La determinación del arsénico se realiza por
espectrofotometría de absorción atómica, con
generador de hidruros.
24.2.2. Matraces Kjeldahl de 250 ml.
24.2.3. Espectrofotómetro de absorción atómica
equipado con sistema generador de hidruros.
24.2.4. Lámpara de descarga sin electrodos.
24.2.5. Fuente de alimentación para lámpara de
descarga sin electrodos.
24.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
313171 Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas
PA-ISO
123314 Sodio Borohidruro PA
113
24.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico al 32%
v/v. Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
24.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico al 1,5%.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACSISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
1.000 ml.
24.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
24.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%
(p/v): Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PAACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un
volumen de 100 ml.
24.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%
(p/v): Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y
disolverlo hasta 100 ml con la solución de Sodio
Hidróxido al 1%.
24.3.8. Disolución de EDTA Sal Disódica 2-hidrato al 1%. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.
24.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.
Pesar 23,5 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PAISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
24.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%
(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(24.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
24.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000
± 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico III Oxido EQP en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al
20% (24.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al
20% (24.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico 1% (24.3.11.).
24.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución
patrón de Arsénico (24.3.12.), en un matraz aforado
de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
24.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de
Arsénico (24.3.13.), en un matraz aforado de
100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
114
24.4.1. Preparación de la muestra: En un matraz
Kjeldahl, de 250 ml introducir 2 g de muestra con
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Llevar a ebullición
hasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la
solución resultante.
24.4.2. Preparación de los patrones de trabajos
y del blanco. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml
de la solución de Arsénico (24.3.14.) y someterlo al
mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solución contiene 10 nanogramos de Arsénico. Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados
siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
24.4.3. Condiciones del espectrofotómetro:
Encender la fuente de alimentación de las lámparas
de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente
para que se estabilice la energía de la lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitud
de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo
con las condiciones del aparato. Encender el generador de hidruros, colocando la temperatura de la
celda a 900° C, esperando hasta que se alcanza
dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del
generador de hidruros según las especificaciones
del aparato. Ajustar el flujo de argón de acuerdo
con las características del aparato.
24.4.4. Determinación: Las determinaciones de
la concentración de Arsénico se realizan por el
método de adición de patrones, por medio de
medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las
condiciones especificadas en (24.4.3.), añadiendo
al matraz de reacción 3 ml de la solución (24.3.8.).
Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de
Arsénico. Lavar los matraces antes y después de
cada uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (24.3.3.). Al
construir la gráfica de adición hay que descontar el
valor de absorbancia del blanco obtenido en las
mismas condiciones anteriores, pero añadiendo
3 ml de la solución blanco. En estas condiciones el
límite de detección de la técnica es de 5 ng.
25. HIERRO
25.1. Principio.
Determinación del hierro por absorción atómica
previa mineralización de la muestra.
25.2.2. Lámpara de hierro.
25.2.3. Los utilizados para el plomo en (26.2.3.),
(26.2.4.) y (26.2.5.).
25.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
313182 Hierro solución patrón
Fe = 1,000 ± 0,002 g/l AA
25.3.2. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico
70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentración indicada.
M
25.3.4. Hierro solución patrón Fe = 1,000 ±
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1g de 131365
Amonio Hierro III Sulfato 12-hidrato PA en 50 ml de
la solución de Acido Nítrico (1+1) y diluir hasta
1.000 ml con Acido Nítrico 1% (v/v).
25.4.1. Preparación de la muestra. Como en
(26.4.1.).
25.4.2. Curva de calibrado. A partir de la solución patrón (25.3.4.), preparar una serie de soluciones conteniendo de 0,5 a 5,0 mg de hierro por litro,
con Acido Nítrico al 1% (v/v).
25.4.3. Determinación. Igual que para el Plomo.
Efectuar las lecturas a 248,3 nm.
25.5. Cálculos.
Obtener el contenido de hierro de la muestra por
interpolación a partir de la curva de calibrado y
teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.
26. PLOMO
26.1. Principio
Determinación del plomo por absorción atómica
26.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.
26.2.4. Baño de arena o placa calefactora.
26.2.5. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo de
control de temperatura.
26.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
26.3.2. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.
26.3.3. Plomo solución patrón Pb = 1,000
± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a
1000 ml con Acido Nítrico al 1%.
26.4 Procedimiento.
26.4.1. Preparación de la muestra.- Poner
100 ml de la muestra en una cápsula de platino o
cuarzo y llevarla a evaporación hasta consistencia
siruposa en baño de arena. Añadir a continuación
2 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el
residuo en el baño de arena. Seguidamente introdu-
cir la cápsula en la mufla y mantenerla durante dos
horas a 450°C. Transcurrido dicho tiempo, sacarla y
dejarla enfriar.
Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendo esta operación hasta obtener cenizas blancas. Un ligero color marrón rojizo en éstas, posiblemente de Fe 2O3 es aceptado y no requiere un
posterior tratamiento.
Disolver a continuación las cenizas con 1 ml de
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PAACS, una vez disueltas filtrar y recoger en un matraz
de 10 ml, lavando la cápsula y el filtro con Agua PAACS hasta el enrase.
26.4.2. Curva patrón.- Diluir alícuotas apropiadas de la solución patrón con Acido Nítrico al 1%
para obtener una curva de concentraciones 2; 4; 6;
8 y 10 mg/l.
26.4.3. Determinación.- Operar según las especificaciones del aparato, usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solución está muy concentrada,
diluirla con Acido Nítrico al 1%.
26.5. Cálculos.
curva patrón y teniendo en cuenta el factor dilución.
26.6. Referencias.
26.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.
Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
27. ESTAÑO
27.1. Principio.
Determinación de estaño por absorción atómica,
previa digestión ácida.
27.2.2. Lámpara de estaño.
27.2.3. Material de uso normal en laboratorios.
27.3. Reactivos.
212236 Agua Desionizada QP
313180 Estaño patrón Sn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
27.3.2. Solución de Acido Clorhídrico 7N. Diluir
Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PAACS hasta la concentración deseada.
27.3.3. Agua Desionizada
27.3.4. Estaño solución patrón Sn = 1,000 ±
115
141304 Estaño metal, granalla PRS en 100 ml de
Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluir hasta
1.000 ml con Agua Desionizada.
27.4.1. Preparación de la muestra.- Medir de 1 a
5 ml de la muestra directamente en un Erlenmeyer.
Añadir 25 ml de solución de Acido Clorhídrico 7N.
Llevar a ebullición y mantenerla a fuego lento durante cinco minutos. Enfriar y transferir cuantitativamente a un matraz de 50 ml, enrasando con Agua PAACS. Agitar y filtrar con papel Watman número 1.
27.4.2. Curva de calibrado.- A partir de la solución patrón de Estaño, preparar una serie de soluciones conteniendo 50; 100; 150 y 250 mg/l de
Estaño.
27.4.3. Determinación.- Operar según las especificaciones del aparato usando una llama reductora
de óxido nitroso-acetileno. Medir las absorbancias
de la muestra y patrones a 286 nm.
27.5. Cálculos.
Obtener el contenido de estaño de la muestra
por interpolación a partir de la curva de calibrado.
28. COBRE
28.1. Principio
Determinación del cobre por absorción atómica,
28.2.2. Lámpara de cobre.
28.2.3. Los utilizados para el Plomo, en (26.2.3.),
(26.2.4.) y (26.2.5.).
28.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
116
(26.3.2.) y (26.3.4.)
28.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO 1:1. Diluir después a
un litro con Acido Nítrico al 1%.
28.4 Procedimiento.
28.4.1. Preparación de la muestra.- Como para
el Plomo en (26.4.1.).
28.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir
partes alícuotas de la solución patrón de Cobre
con Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones
que contengan de 1 a 5 mg de Cobre.
28.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.
Medir a 324,7 nm.
28.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos para la muestra, hallar mediante la curva patrón
las concentraciones de Cobre de la muestra,
teniendo en cuenta el factor de dilución.
29. ZINC
29.1. Principio.
Determinación del zinc por absorción atómica,
29.2.2. Lámpara de zinc.
29.2.3. Los utilizados para el Plomo en (26.2.3.),
(26.2.4.) y (26.2.5.).
29.3 Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
313193 Zinc solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
29.3.1. Los utilizados para el Plomo en (26.3.1.),
(26.3.2.) y (26.3.4.).
29.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141783
Zinc metal, polvo PRS en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico diluido con Agua PA-ACS
(1:1) y diluir a un litro con Acido Nítrico al 1% (v/v).
29.4.1. Preparación de la muestra.- Como para
el Plomo (26.4.1.).
partes alícuotas de la solución patrón (29.3.2.), con
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5
a 1 mg/l.
29.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.
La lectura se efectuará a 213,5 nm.
29.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zinc para la
muestra, teniendo en cuenta el factor concentración o dilución.
M
117
Productos derivados
de la uva:
Vinagres
118
M
1. EXTRACTO TOTAL
1.1. Principio.
El extracto seco total se define como el conjunto
de todas las sustancias que, en condiciones físicas
determinadas, no se volatilizan. En estas condiciones físicas deben fijarse de tal manera que las sustancias componentes del extracto sufran el mínimo
de alteración.
El método está basado en una evaporación del
vinagre en baño de agua con secado posterior en
estufa regulable a 100 - 105°C.
1.2.1. Balanza con aproximación de 0,001 g.
1.2.2. Estufa con ventilación de aire regulable de
100 a 105°C.
1.2.3. Desecador de vidrio con ácido sulfúrico
concentrado o gel de sílice (sílice amorfa impregnada con sustancia reveladora) como sustancia
desecadora.
1.2.5. Cápsulas de fondo plano de 5 cm de diámetro construidas en platino, níquel o cuarzo.
1.2.6. Pipetas aforadas de 10 ml con doble enrase.
1.3. Procedimiento.
Agitar la muestra y filtrar a través de un papel de
filtro plegado (tipo jarabe). Medir 10 ml del vinagre
filtrado en una cápsula previamente tarada. Evaporar en baño de agua hirviente durante 30 minutos y
mantener en la estufa durante dos horas y media a
105°C. Dejar secar la cápsula en el interior del
desecador y, una vez fría, pesar en la balanza de
precisión.
1.4. Cálculo.
El valor del extracto total del vinagre , en porcentaje, se hallará mediante la fórmula siguiente:
Extracto total: (M - m) 10
en la que:
M = masa, en gramos, de la cápsula con el
extracto seco.
m = masa, en gramos, de la cápsula vacía.
1.5. Referencias.
1.5.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.
Una norma española 33.101.
1.5.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.
11a. ed., página 519, 30.061.
2. ACIDEZ TOTAL
(Grado acético)
2.1. Principio.
La acidez total se define como la totalidad de los
ácidos volátiles y fijos que contiene el vinagre expresada en gramos de ácido acético por 100 ml de
vinagre.
La determinación se efectúa mediante una volumetría de neutralización en presencia de solución
alcohólica de fenolftaleína como indicador.
2.2.1. Bureta de 50 ml graduada en décimas de
ml.
2.2.2. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.
2.2.3. Matraces Erlenmeyer de 250 ml de capacidad.
2.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
2.3.2. Solución indicadora de Fenolftaleína. Se
disuelven 10 g de Fenolftaleína PA-ACS en Etanol
96% v/v PA y se completa a un litro con el mismo
solvente.
2.4. Procedimiento.
Medir 10 ml de vinagre, previamente filtrado, en
un Erlenmeyer de 250 ml. Diluir con 100 o 150 ml
de Agua PA-ACS recién hervida y fría hasta conseguir una solución débilmente coloreada. Añadir seis
gotas de la solución indicadora de Fenolftaleína y
agregar Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV contenido en la bureta gota a gota y agitando hasta viraje
del indicador.
2.5. Cálculo.
El valor de la acidez total o grado acético del
vinagre en porcentaje se hallará mediante la fórmula
siguiente:
Acidez total o grado acético = a x 10 x 0,0300
en la que :
a =volumen, en ml, de sodio hidróxido 0,5N.
2.6. Referencias.
11a. ed , página 520, 30. 068.
3. ACIDEZ FIJA
3.1. Principio.
La acidez fija se define como la totalidad de los ácidos fijos que contiene el vinagre, expresada en gramos, de ácido acético por 100 ml de vinagre.
119
3.2.2. Bureta de 10 ml de capacidad graduada
en décimas de ml.
3.2.3. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.
3.2.4. Cápsulas de 200 ml de capacidad.
3.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
3.3.2. Disolución indicadora de Fenolftaleína PAACS al 1% en Etanol 96% v/v PA.
3.4. Procedimiento.
Medir 10 ml de vinagre previamente filtrado y llevarlo a una cápsula de porcelana. Evaporar a
sequedad en baño de agua. Añadir de 5 a 10 ml
Agua PA-ACS recientemente hervida y volver a evaporar a sequedad, repitiendo esta operación cinco
veces más. Añadir, aproximadamente, 180 ml de
Agua PA-ACS recientemente hervida y fría, añadir
seis gotas de la solución indicadora de Fenolftaleína
y agregar Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV contenido en la bureta, gota a gota y agitando, hasta
viraje del indicador.
3.5. Cálculo.
El valor de la acidez fija del vinagre, expresado
en gramos de ácido acético por 100 ml, se hallará
mediante la fórmula siguiente:
Acidez fija = a x 10 x 0,00600
en la que:
a = volumen, en ml de sodio hidróxido 0,1N.
3.6. Referencias.
11a. ed., página 520, 30.069.
4. ACIDEZ VOLATIL
120
4.1. Principio.
Se define convencionalmente como valor de la
acidez volátil de un vinagre la diferencia entre los
valores de su acidez total y fija, expresadas ambas
en gramos de ácido acético por 100 ml de vinagre.
4.2. Cálculo.
El valor de la acidez volátil del vinagre, expresado en gramos de ácido acético por 100 ml, se hallará mediante la fórmula siguiente:
At - Af = acidez volátil
en la que :
At = acidez total o grado acético, expresado en
gramos de ácido acético por 100 ml.
Af = acidez fija de la misma muestra de vinagre,
expresada en gramos de ácido acético por
100 ml.
4.3. Referencias.
11a. ed., página 520, 30.070.
5. SULFATOS
5.1. Principio.
Precipitación del bario sulfato en medio ácido.
5.2.1. Vasos de precipitado de 250 ml.
5.2.3. Estufa.
5.2.4. Desecador.
5.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
171461 Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE
5.3.2. Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO.
5.4. Procedimiento.
A 100 ml de muestra en vaso de precipitado de
250 ml añadir 2 ml de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N)
SV, calentar a ebullición e ir añadiendo gota a gota
10 ml de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO (1 g
/100 ml de BaCl2.2H2O) sin que deje de hervir la
solución. Continuar hirviendo cinco minutos manteniendo el volumen constante, añadiendo Agua PAACS caliente siempre que sea necesario. Dejar en
reposo hasta que el sobrenadante esté claro (una
noche es suficiente, aunque no conviene sobrepasar ese tiempo). Filtrar por papel sin cenizas de poro
fino, lavar con Agua PA-ACS caliente hasta que no
dé reacción con Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE
las aguas del lavado, secar, calcinar, enfriar en
desecador y pesar.
5.5. Cálculo.
La proporción de sulfatos = 7,465 P g/l de K2SO4
siendo;
P = peso, en g, del producto de la calcinación.
5.6. Referencias.
11a. ed. (1970).
M
Una norma española 33-104-73.
6. ACETILMETILCARBINOL (ACETOINA)
6.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la acetoína por
cromatografía de gases.
6.2.1. Equipo de cromatografía de gases compuesto por:
6.2.1.1. Detector de ionización de llama.
6.2.1.2. Horno con temperatura regulable.
6.2.1.3. Registrador.
6.2.1.4. Gases: Aire-nitrógeno.
6.2.1.5. Columna: FFAP 2,5% sobre Chromosorb G (HP), añadiéndose un 0,5 de un reductor de
colas (p. e., Carbowax 1.500) y de dimensiones 2 m
de longitud y 1/8 de pulgada de diámetro externo
de la columna.
6.2.2. Microjeringa de 1 a 10 µl.
6.3. Reactivos.
Acetoína
131074 Agua PA-ACS
121884 1-Pentanol PA
142400 Calcio Hidróxido polvo 90% (USP)
PRS-CODEX
6.3.1. Acetoína.
6.3.2. 1-Pentanol PA.
6.3.3. Etanol absoluto PA.
6.3.4. Calcio Hidróxido polvo 90 % (USP) PRSCODEX.
6.4. Procedimiento.
6.4.1. Disolución patrón.
6.4.1.1. De Acetoína: A partir de Acetoína purificada de su posible contenido en Diacetilo mediante
destilación, obtener soluciones de Acetoína que
cubran un rango de concentraciones de 10 a
500 mg/l en Agua PA-ACS.
6.4.1.2. De patrón interno: Añadir 2 ml de
1-Pentanol PA en 100 ml de Solución Hidroalcohólica al 50%.
6.4.2.1. Condiciones cromatográficas. Gas portador: Nitrógeno (flujo de 12,5 mg/min.).
Temperatura horno: 70° C.
Temperatura inyector: 180° C.
Inyección : 4 o 2 µl.
Patrón interno: 1-Pentanol PA.
6.4.2.2. Método operatorio.
A cada una de las soluciones patrón de Acetoína
preparadas en 6.4.1.1., añadir solución de 1-Penta-
nol PA de tal forma que a las soluciones que contengan de 10 a 50 mg/l de Acetoína se le añadan
15 µl y a las que contengan de 50 a 500 mg/l se le
añadan 35 µl e inyectarlas a continuación, obteniendo la curva de calibrado (se deben efectuar dos
curvas de calibrado, una que cubra el rango de
0-50 mg/l de Acetoína y otra de 50 a 300 mg/l).
La inyección de la muestra puede efectuarse
directamente del vinagre, una vez añadido el patrón
interno, pero teniendo en cuenta que el tiempo de
retención es elevado y la concentración del acético
es muy grande, obliga a esperar un largo período
de tiempo entre dos inyecciones sucesivas. Para
evitar esta dificultad, deben neutralizarse a pH = 7
las muestras, preferiblemente con Calcio Hidróxido
polvo, 90% (USP) PRS-CODEX para evitar variaciones de volumen. Téngase en cuenta que la concentración de Acetoína en el medio neutro puede variar
con tiempo, por lo que la neutralización debe hacerse inmediatamente antes de inyectar en el cromatógrafo.
6.5. Cálculo.
Los cromatogramas obtenidos de las distintas
soluciones patrón permiten representar gráficamente la relación existente entre el cociente:
Area del pico de la acetoína
–––––––––––––––––––––––––––––––
Area del pico del alcohol n-amílico
La relación de áreas obtenida para la muestra se
compara con la curva de calibrado (concentración
de acetoína /relación de áreas ), obteniéndose la
cantidad de acetoína de la muestra.
6.6. Referencia.
6.1.1. E. F. Gorostiza, M. L. Gil de la Peña y M.
C. Gómez Cordobés. Instituto de Fermentaciones
Industriales.
7. CENIZAS
7.1. Principio.
Se denominan cenizas de un vinagre el conjunto
de los productos de incineración del residuo de
evaporación de un volumen conocido del vinagre,
realizada de manera que se puedan obtener todos
los cationes en forma de carbonatos y otras sales
minerales anhidras.
7.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de 70 mm
de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.
121
7.3. Procedimiento.
Colocar 20 ml de vinagre en una cápsula tarada
en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con
precaución en baño de agua hasta consistencia
siruposa, continuar el calentamiento sobre baño de
arena con moderación y durante una media hora.
Es conveniente ayudar a la evaporación con la aplicación de rayos infrarrojos hasta carbonización.
Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cápsula al horno eléctrico a 525 ± 25° C y con aireación
continua. Después de cinco minutos de carbonización completa, sacar la cápsula del horno, dejar
enfriar y añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evaporan en baño de agua, y llevar de nuevo al horno a
525°C.
Si la combustión de las partes carbonosas no
se consigue en 15 minutos, volver a comenzar la
operación de adición de Agua PA-ACS, evaporación y recalcinación.
Después de enfriar en el desecador, pesar la cápsula con las cenizas.
7.4. Cálculo.
Calcular el contenido en cenizas expresado
en g/l.
Cenizas = 50 P g/l.
P = peso, en g, de las cenizas contenidas en
20 ml de vinagre.
Dar los resultados con una aproxinación de
0,03 g/l.
7.5. Referencias.
d'Analyse des Vins. O. I. V., AGI, 1969.
7.5.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,
Ministerio de Agricultura, 1971, pág. 66.
8. INDICE DE OXIDACION
8.1. Principio.
Oxidación con potasio permanganato de las
sustancias volátiles fácilmente oxidables de los
vinagres.
122
8.2.1. Matraz de destilación de 250 ml de capacidad provisto de dispositivo de entrada de vapor
de agua para destilación por arrastre de vapor.
8.2.2. Matraz Erlenmeyer de 50 ml de capacidad
provisto de boca esmerilada y tapón.
8.2.3. Matraz aforado de 50 ml de capacidad.
8.2.4. Refrigerante de serpentín de 25 cm de
capacidad útil.
8.2.5. Calderín generador de vapor.
8.2.6. Pipeta aforada con doble enrase de 10;
20; 25 y 50 ml de capacidad.
8.2.7. Bureta de 50 ml de capacidad graduada
en décimas de ml.
8.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
171096 Almidón Soluble RE
181528 Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV
181722 Sodio Tiosulfato 1mol/l (1N) SV
8.3.1. Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV
8.3.2. Disolución valorada de Sodio Tiosulfato
1 mol/l (1N) SV. En un matraz aforado diluir a 1:1
Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV con Agua PA-ACS
y determinar el factor de la solución 0,5N obtenida.
8.3.3. Disolución de Potasio Yoduro PA-ISO al
50%. Ver 8.6.2. Disolver Potasio Yoduro PA-ISO en
Agua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.
8.3.4. Disolución indicadora de Almidón. Disolver 5 g de Almidón soluble RE en 20 ml de Agua
PA-ACS y se vierte en 1 ml de Agua PA-ACS hirviente. Se continúa la ebullición durante cinco minutos y se deja enfriar antes de su empleo. Conviene
guardarla en frascos esterilizados.
8.3.5. Disolución de Acido Sulfúrico al 50% en
volumen. Diluir Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con
Agua PA-ACS.
8.4. Procedimiento.
Ajustar el vinagre a 4 g por 100 de acidez total,
expresada en ácido acético. Tomar 50 ml de vinagre, con la acidez debidamente ajustada, e introducir en el matraz de destilación. Pasar a su través
una corriente de vapor de agua procedente del calderín descrito, a una velocidad regulada, de manera
que cuando se hayan recogido 50 ml de destilado
se conserven en el matraz de destilación aproximadamente 45 ml. Comprobar que la temperatura del
destilado no sobrepase 25°C. Pasar los 50 ml del
destilado al matraz Erlenmeyer de 500 ml. Añadir
10 ml de la solución de Acido Sulfúrico 96% PAACS y 25 ml Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N)
SV. Mantener el matraz durante una hora en el baño
de agua a 25°C.
Trascurrido ese tiempo, añadir 20 ml de la disolución de Potasio Yoduro. Tapar el matraz y mezclar
bien su contenido. Inmediatamente valorar el yodo
liberado con la dilolución de Sodio Tiosulfato 1 mol/l
(1N) SV. Simultáneamente, a la muestra de vinagre
llevar, en las mismas condiciones, un blanco en que
el destilado se sustituya por 50 ml de Agua PAACS.
8.5. Cálculo.
El valor del índice de oxidación de hallará
mediante la fórmula siguiente:
M
a -b
I = –––––– x grado acético del vinagre original
8
donde:
I = índice de oxidación.
a = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 mol/l
(1N) SV consumido en la valoración de la
muestra en blanco.
b = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 moll
(1N) SV consumido en la valoración de la
muestra de vinagre diluido.
8.6. Observaciones.
8.6.1. Si el índice de oxidación resulta mayor que
15, ha de repetirse la determinación, usando 25 ml
del vinagre ajustando a 4 grados acéticos, añadiendo 25 ml de agua. Repetir esta reducción a la
mitad hasta que el índice de oxidación sea menor
que 15. Calcular el índice de oxidación, teniendo en
cuenta las diluciones efectuadas.
8.6.2. Esta disolución no se debe usar si presenta color amarillento.
8.7. Referencias.
Una norma española 33-102-73.
8.7.2. Métodos Oficiales de Análisis de la Association of Official Agricultural Chemists de Estados
Unidos (ed. 1970).
9. METANOL (Alcohol Metílico),
METODO DEL ACIDO
CROMOTROPICO
9.1. Principio.
Como en 37.1 de los métodos oficiales de análisis de vinos.
Como en 37.2 de los métodos oficiales de análisis de vinos y matraz aforado de 25 ml.
9.3 Reactivos.
2-hidrato RE
131032 Acido orto-Fosfórico 85%
PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
131698 Sodio Disulfito PA-ACS
141717 Sodio Sulfito anhidro (BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
9.3.1. Como 37.3.1 de los métodos oficiales de
análisis de vinos.
9.3.2. Idem.
9.3.3. Idem.
9.3.4. Etanol 96% v/v PA.
9.4. Procedimiento.
Tomar 25 ml de vinagre, destilar en destilador
simple y recoger 15 ml de destilado en matraz aforado de 25 ml sumergido en baño de hielo. Añadir
el Etanol 96% v/v PA suficiente para que una vez
enrasado a 25 ml con Agua PA-ACS la concentración del Etanol 96% v/v PA sea del 5-6% (9.6.1.).
Continuar como en 37.4. de los métodos oficiales
de análisis de vinos.
9.5.Cálculo.
Como en 37.5 de los métodos oficiales de análisis de vinos.
9.6. Observaciones.
9.6.1. En vinagres normales suele ser suficiente
añadir 1,5% de Etanol 96% v/v PA.
9.7. Referencia.
9.7.1. Association of Official Agricultural Chemists Official Methods of Analysis,1965, página
138.
10 (a). ACIDO TARTARICO
(Método cualitativo)
10 (a).1. Principio.
Precipitación del ácido tartárico en forma de potasio bitartrato.
10 (a).2. Material y aparatos.
10 (a).2.1. Centrífuga.
10 (a).3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO
121526 di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA
PA-ACS-ISO
10 (a).3.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.
10 (a).3.2. Solución de Precipitación. Disolver
300 g de Potasio Cloruro PA-ACS-ISO; 5,75 g de
Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO y
1,25 g de di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA y enrasar
a 1.000 ml con Agua PA-ACS.
A baja temperatura la solución deposita pequeños cristales, por lo que se debe calentar ligeramente antes de emplearse.
10 (a).3.3. Etanol 96% v/v PA.
10 (a).4. Procedimiento.
Poner en un tubo de centrífuga 10 ml de vinagre,
123
0,4 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO, 7,5 ml
de la solución de Precipitación y 2 ml de Etanol
96% v/v PA. Agitar con una varilla de vidrio hasta
que aparezca un enturbiamiento cristalino aproximadamente a los diez segundos. Mantener el tubo
durante una hora a 8°C aproximadamente. Al cabo
de este tiempo agitar enérgicanente el contenido
del tubo con una varilla de vidrio, con la precaución
de mezclar bien con la solución que sobrenada.
Dejar en reposo aproximadamente a 8°C durante
una hora. Transcurrido este tiempo centrifugar.
10 (a).5. Interpretación de resultados.
La aparición de precipitado indica la presencia
de ácido tartárico en la muestra.
10 (a) .6. Referencia.
10 (a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales
d'Analyse des Vins. O. I. V. A-12-h.
10 (b). ACIDO TARTARICO
(Método cuantitativo)
10(b).1 Principio.
Aislamiento del ácido tartárico mediante columna de resinas cambiadoras de aniones y posterior
valoración colorimétrica.
10(b).2.1. Resinas aniónicas de basicidad fuerte
(III Merck o equivalente). Las resinas deben de
encontrarse en forma de acetato. Para ello deben
estar al menos veinticuatro horas en contacto con
una solución de ácido acético al 30 %.
10(b).2.2. Columnas de vidrio de 10-11 mm de
diámetro y 30 cm de longitud con llave en la parte
inferior.
124
10(b).3. Reactivos.
131008 Acido Acetico glacial PA-ACS-ISO
181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N)SV
182105 Acido Sulfúrico 1mol/l (2N) SV
131074 Agua PA-ACS
122352 Amonio meta-Vanadato PA
141339 Glicerina (USP,BP,F. Eur.) PRS-CODEX
211376 Lana de Vidrio, lavada QP
Resina Lewatit MP 600 (aniónica fuerte I)
181691 Sodio Hidróxido 1mol/l 1N SV
121700 Sodio meta-Peryodato PA
121716 Sodio Sulfato anhidro PA
10(b).3.1. Acido Acético al 30 % (v/v).- Introducir
300 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en un
matraz aforado y completar a 1.000 ml con Agua
PA-ACS.
10(b).3.2. Acido Acético al 0,5 % (v/v).- Introducir 5 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en un
matraz aforado y completar hasta 1.000 ml con
Agua PA-ACS
10(b).3.3. Solución de Sodio Sulfato al 7,1 %
(0,5N).- Disolver 71 g de Sodio Sulfato anhidro PA y
completar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.4. Reactivo Vanádico.- Disolver 10 g de
Amonio meta-Vanadato PA en 150 ml de Sodio
Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Pasar esta solución a un
matraz aforado de 500 ml, añadir seguidamente
200 ml de una solución de Sodio Acetato anhidro
PA diluido al 27 % en Agua PA-ACS y llevar luego a
500 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.5. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.
10(b).3.6. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.
10(b).3.7. Solución de Acido Peryódico 0,1N
(0,05M).- Introducir 10,696 g de Sodio meta-Peryodato PA en un matraz aforado de 1.000 ml, añadir
50 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV y completar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.8. Solución de Glicerina al 10 %.- Pesar
10 g de Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,
bidestilada y llevarla a 100 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.9. Solución de Acido Tartárico de 1 g
por l.- En un matraz aforado de 500 ml disolver
500 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO en 6,6
ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV y enrasar con
solución de Sodio Sulfato al 7,1% a 500 ml.
10(b).4.1. Preparación de las columnas de resinas aniónicas. Colocar en el fondo de la columna
[10(b).2.2.] Lana de Vidrio lavada QP formando
tapón de 2-3 mm de altura, aproximadamente, y
añadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos
5 mm sobre el tapón de Lana de Vidrio lavada QP.
Añadir la Resina Lewatit® MP 600 aniónica (*) conservada en Acido Acético al 30 %, agitar esta suspensión y agregar rápidamente un volumen de unos
10 ml, evitando la formación de burbujas de aire,
depositando en la superficie un tapón de Lana de
Vidrio lavada QP, que se conduce con una varilla de
vidrio con el fin de no remover las resinas en los
sucesivos lavados anteriores en su superficie. Las
resinas solamente pueden servir para una sola vez.
10(b).4.2. Aislamiento del Acido Tártarico.- Abrir
la llave inferior de la columna y dar salida al Acido
Acético diluido hasta unos 2-3 ml por encima del
tapón superior de Lana de Vidrio lavada QP. Añadir
seguidamente unos 10 ml de Acido Acético al 0,5%
y vaciar hasta igual altura; efectuar estos lavados
cuatro veces.
Después del último lavado y con la llave cerrada,
adicionar 10 ml de vinagre a analizar y señalar la
altura alcanzada con un lápiz graso, abrir a continuación la llave y dejar salir vinagre goteando a
razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por
minuto) hasta un poco por encima del tapón supe-
M
rior de Lana de Vidrio lavada QP. Llenar de nuevo la
columna con Acido Acético al 0,5 % hasta la señal
del lápiz graso y dejar salir a la misma velocidad que
la vez anterior y lavar después en la misma forma
siete veces con 10 ml de Agua PA-ACS.
Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuando el nivel del líquido se encuentre un poco más
arriba del tapón superior de Lana de Vidrio lavada
QP.
Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml. Eluir
los ácidos fijados en el cambiador de aniones,
mediante adiciones de solución de Sodio Sulfato
[10(b).3.3.] hasta la señal trazada en el tubo.
Para hacer esta operación resulta práctico colocar un frasco con solución de Sulfato unido por el
cuello a la columna mediante un manguito de caucho y con unas pinzas para regular la caída del líquido en la bureta o tubo. Puestos así en comunicación los dos aparatos (frasco y bureta o tubo), abrir
las pinzas del caucho de unión y la llave inferior,
dejando caer el líquido a la bureta unos 10 cm de
altura y sin que queden huecos vacíos. Regular la
salida del líquido en la proporción de 2-3 gotas por
segundo, para llenar el matraz receptor hasta el
enrase.
10(b).4.3. Determinación del ácido Tartárico.- En
dos matraces cónicos de 100 ml (A) y (B) introducir
20 ml del eluido. El matraz (A) sirve para la medida y
el matraz (B), en el cual el Acido Tartárico es destruido por el Acido Peryódico, constituye el testigo.
Añadir al matraz (A) 2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l
(2N) SV, 5 ml de Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N)
SV y 1 ml de Glicerina (USP,BP,F.Eur) PRS-CODEX
al 10%.
En el matraz (B), añadir 2 ml de Acido Sulfúrico
1 mol/l (2N) SV, 5 ml de Acido Peryódico 0,1N,
esperar quince minutos y añadir 1 ml de Glicerina al
10 % para destruir el exceso de Acido Peryódico.
Esperar dos minutos.
Verter a continuación, agitando, primero en el
matraz (B) e inmediatamente después en el matraz
(A), 5 ml del Reactivo Vanádico. Disparar inmediatamente un cronómetro e introducir el contenido de
dichos matraces en las cubetas de caras paralelas
de 10 mm de espesor del espectrofotómetro. Al
cabo de un minuto y treinta segundos medir la densidad óptica a 490 nm del líquido procedente del
matraz (A) (medida) después de haber reglado el
aparato para obtener la transmisión al 100 % con la
cubeta conteniendo el líquido testigo (B).
10(b).5. Cálculo
10(b).5.1. Preparación de la curva patrón.Tomar 10; 20; 30; 40 y 50 ml de la solución
10(b).3.9. e introducir cada alícuota en un matraz
aforado de 100 ml. Enrasar con solución de sodio
sulfato al 7,1%. Las diferentes diluciones corresponden a eluidos del vinagre conteniendo 1; 2; 3; 4
y 5 g de ácido tartárico por litro.
En dos matraces (A) y (B) de 100 ml poner 20 ml
de cada una de estas soluciones y tratarlas idénticamente igual a los eluidos del vinagre anteriormente descrito.
La representación gráfica de las densidades
ópticas de estas soluciones está en función de la
cantidad de ácido tartárico. Para ello es recomendable y más preciso partir de concentraciones 0,1;
0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1 g/l de ácido
tartárico.
10(b).5.2. Comprobar los valores obtenidos en el
ensayo con los correspondientes de la curva
patrón.
10(b).6. Referencia.
d’Analyse des Vins. A12h.
(*). En el original indica “Resina cambiadora de
aniones”, entendemos que es apropiada la Resina
Lewatit“ MP 600 aniónica fuerte I.
11. COBRE
11.1. Principio.
Determinación directa por espectrofotometría de
absorción atómica.
Espectrofotómetro de absorción atómica, con lámpara específica de cobre.
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Cu = 1,000 + 0’002 g/l AA
11.3.1 Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±
0’002 g/l AA o preparar disolviendo 1’000 g de
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1 + 1) y diluir a 1 litro
con Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO previamente
diluido al 1 % (v/v) con Agua PA-ACS.
11.3.2. Soluciones que contengan de 1 a 10 mg/l
de Cobre.- Diluir partes alícuotas de la solución
patrón con Acido Acético al 5 % en Agua PA-ACS.
11.4.1. Calibrado del aparato.- Ajustar el aparato
a una longitud de onda de 324,7 nm en condiciones tales que se obtenga una respuesta lineal al
introducirse las series de patrones preparados.
11.4.2. Determinación.- Efectuar la lectura directa de la absorbancia.
Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos,
hallar mediante la curva de patrón las concentraciones de cobre de la muestra.
125
11.6. Referencias.
11.6.1 G. Charlot et D. Bezier: “Analyse quantitative minerale”. El Masson, París (1955), 749-752.
11.6.2. H.E. Parker: “Atomic Absorption Newsletter” (1963), 13
11.6.3. Standart Conditions for Zn and Cu.
Analytical Methods for atomic absorbtion spectrophotometry “Perkin-Elmer”.
11.6.4. F. Rousselet: “Spectrophotometrie par
absorption atomique Boudin”. Ed. Paris (1968),
págs 59-144.
12. CLORUROS
12.1. Principio.
Determinación directa de cloruros por potenciometría utilizando el electrodo Ag/AgCl.
12.2.1. pH-metro con escala que permita apreciar 2 mV.
12.2.3. Electrodo Ag/AgCl con una solución
saturada de potasio nitrato como electrolito.
12.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.
12.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)
12.3.1. Solución patrón de Cloruros.- Disolver
2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de bromo), para análisis, previamente desecado en Agua
PA-ACS hasta 1 litro; 1 ml de esta solución contiene
1 mg de ion Cloro.
12.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver
4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en Etanol al
10% (v/v) hasta un litro. Diluir Etanol 96% v/v PA
con Agua PA-ACS. 1 ml de esta solución corresponde a 1 mg de ion Cloro.
126
12.4.1. Determinación del potencial del punto de
equivalencia.- Introducir 5,0 ml de la solución
patrón de Cloruros en un vaso de 150 ml. Diluir
aproximadamente a 100 ml con Agua PA-ACS y
acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACSISO (12.3.3.). Introducir los electrodos. Añadir la
solución de Plata Nitrato agitando moderadamente.
Los cuatro primeros ml se adicionan en fracciones de 1 ml y se leen las correspondientes lecturas
en milivoltios; los dos siguientes ml, en fracciones
de 0,2 ml y se continúa adicionando en fracciones
de 1 ml hasta que se hayan alcanzado un total de
10 ml. Después de cada adición se debe esperar
unos treinta segundos antes de hacer la correspondiente lectura en minivoltios. Los valores así obtenidos se llevan sobre un papel milimetrado en función
de los correspondientes ml de solución de Plata
Nitrato, y a partir del punto singular de la curva
obtenida, determinar el potencial del punto de equivalencia.
Para comprobar el potencial del punto de equivalencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la
solución patrón de Cloruros, 95 ml de Agua PAACS y 1 ml de Acido Nítrico 70 % PA-ACS-ISO.
Introducir el electrodo y valorar agitando, justamente hasta el potencial del punto de equivalencia.
Repetir esta operación hasta obtener una buena
concordancia con los resultados.
Este control debe efectuarse antes de determinar la concentración de cloruros en cada serie de
muestras a analizar.
12.4.2. Determinación.- Llevar a un vaso de
150 ml, 50,0 ml de vinagre. Añadir 50 ml de Agua
PA-ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.
Valorar a continuación, siguiendo el procedimiento
descrito anteriormente, hasta alcanzar el potencial
del punto de equivalencia.
12.5. Cálculo.
La cantidad de cloruros se determina mediante
las expresiones:
0,02 n en gramos de ion cloro.
0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion cloro.
0,0329 n en gramos de sodio cloruro por litro.
Siendo:
n = volumen en ml de solución de plata nitrato
necesario para alcanzar el potencial del
punto de equivalencia.
12.6. Referencia.
d’Analyse des Vins. OIV A-15j.
13. GRADO ALCOHOLICO
13.1. Principio.
Separación del alcohol por destilación, oxidación
del mismo por potasio dicromato y determinación
del contenido por valoración del exceso de dicromato.
Como en los apartados 5(a).2.1; 5(a).2.1.1;
5(a).2.1.2; 5(a).2.1.3 y 5(a).2.1.4 de los Métodos
Oficiales de Análisis de Vinos.
13.3. Reactivos.
M
131074 Agua PA-ACS
131368 Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato
PA-ISO
211229 Calcio Hidróxido natural, polvo QP
171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS
131362 Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO
131500 Potasio Dicromato PA-ISO
13.3.1. Solución de Potasio Dicromato.- Disolver
33,608 g de Potasio Dicromato PA-ISO en una cantidad suficiente de Agua PA-ACS y completar hasta
un litro a 20° C. Esta solución corresponde al grado
alcohólico internacional O.I.V. 1 ml de esta solución
oxida 7,8934 mg de alcohol.
13.3.2. Solución de Amonio Hierro II Sulfato.Disolver 135 g de Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato
PA-ISO y 20 ml de Acido Sulfúrico 96 % PA-ISO en
una cantidad de Agua PA-ACS suficiente y completar hasta 1 litro, un volumen de esta solución
corresponde a medio volumen de solución de Potasio Dicromato cuando está recientemente preparada. Esta solución se oxida lentamente, por lo que
debe ser valorada frecuentemente en la misma que
se realiza la determinación del alcohol, sustituyendo
la disolución alcohólica por Agua PA-ACS.
13.3.3. Solución de Potasio Permanganato.Disolver 1,088 g de Potasio Permanganato PAACS-ISO en una cantidad suficiente de Agua PAACS y completar hasta 1 litro.
13.3.4. Solución de Acido Sulfúrico diluido.- A
500 ml de Agua PA-ACS añadir, poco a poco y agitando, 500 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Después de enfriado, completar hasta 1 litro con Agua
PA-ACS.
13.3.5. Reactivo de Hierro II orto-Fenantrolina.Disolver 0,695 g de Hierro II Sulfato 7-hidrato PAACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS, añadir 1,485 g
de 1,10-Fernantrolina 1-hidrato RE-ACS. Calentar
para favorecer la disolución.
13.3.6. Lechada de cal 4N.- Desleír en la concentración conveniente, Calcio Hidróxido natural,
polvo QP con Agua PA-ACS.
13.4 Procedimiento.
13.4.1. Destilación.- Medir 200 ml de vinagre en
matraz aforado y anotar la temperatura. Introducir el
vinagre en el matraz de destilación que contenga
unos fragmentos de material poroso. Lavar el
matraz cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS.
Alcalinizar con un ligero exceso de Lechada de cal
4N. Recoger el destilado en el matraz aforado de
100 ml. Enrasar con Agua PA-ACS a la misma temperatura que se midió el vinagre inicialmente.
13.4.2. En un matraz Erlenmeyer, con tapón
esmerillado, de 250 ml, poner 20 ml de solución
valorada en Potasio Dicromato, 20 ml de Acido Sulfúrico diluido y agitar. Añadir 10 ml de destilado
exactamente medidos. Tapar el Erlenmeyer, agitar y
esperar por lo menos treinta minutos, agitando de
vez en cuando.
13.4.3. Valoración.- Valorar el exceso de Dicromato con la solución de Amonio Hierro II Sulfato.
Cuando la coloración verde de la solución vire a verde azulado, añadir cuatro gotas de reactivo de
1,10-Fenantrolina. Detener la adición de solución de
Amonio Hierro II cuando el líquido vire a marrón.
A menudo se puede llegar a pasar el viraje, siendo entonces necesario volver al punto preciso adicionando solución de Potasio Permanganato. Un
décimo del volumen empleado de esta solución se
resta del volumen de empleado de Hierro II Sulfato.
Hacer una prueba en blanco sustituyendo los 10 ml
de destilado por Agua PA-ACS.
13.5. Cálculo.
n’ - n
Grado alcohólico = –––––––
n’
Siendo:
n = volumen, en ml, gastados en la valoración.
n’ = volumen, en ml, gastados en la prueba en
blanco.
Si el grado alcohólico del vinagre es superior a
0,8°, repetir la oxidación utilizando 10 ml de destilado diluido a 1/2.
13.7. Referencia.
d’Analyses des vins. O. I. V. A-2-16.
14. ARSENICO
14.1. Principio.
Reducción del arsénico a arsenamina gaseosa
que reacciona con plata dietilditiocarbamato (disuelto en piridina), dando un complejo de color rojo.
14.2.1. Aparato Quickfit (figura I)
permita lecturas a 538 nm.
14.3. Reactivos.
131058 Acido Sulfurico 96% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
Arsénico
131303 Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
131457 Piridina PA-ACS
127
Figura 14.1
122382 Plata Dietilditiocarbamato PA
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
Zinc metal, granulado, exento
de Arsénico.
128
14.3.1. Solución de Plata Dietilditiocarbamato
PA.- Disolver 1.000 g de este reactivo en 200 ml de
Piridina PA-ACS. Esta solución puede conservarse
algunas semanas.
14.3.2. Plomo II Acetato en algodón.- Impregnar
el algodón hidrófilo en solución acuosa de Plomo II
Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO al 10%, escurrir el
líquido en exceso y desecar al vacío.
14.3.3. Solución acuosa de Potasio Yoduro PAISO al 15%.
14.3.4. Solución acuosa de Cobre II Sulfato
5-hidrato PA-ACS-ISO al 2%
14.3.5. Solución de Estaño Cloruro.- Disolver
0,33 g de Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO
en 100 cc de Acido Clorhídrico al 32% (d=1,16).
Diluir Acido Clorhídrico 35 % PA-ISO con Agua PAACS.
14.3.6. Zinc metal granulado, exento de Arsénico.
14.3.9. Solución de 100 mg/l de Arsénico.
14.4.1. Preparación de la muestra.- En un matraz
Kjeldahl de 500 ml, introducir 100 ml de vinagre con
100 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, para evitar las pérdidas de As. Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 10 ml, añadir 5 ml de Acido Sulfúrico
96% PA-ISO y continuar la ebullición adicionando
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO gota a gota hasta la
total decoloración. Después de la expulsión de los
vapores nitrosos dejar enfriar, diluir con 10 ml de
Agua PA-ACS y calentar hasta casi sequedad. Una
vez frío el matraz, trasvasar el residuo al matraz de
valoración utilizando 40 ml de Agua PA-ACS.
14.4.2. Valoración.- Poner en el tubo en U, 3 ml
de la solución de Plata Dietilditiocarbamato. Colocar
en la parte superior del tubo intermedio del aparato
el algodón impregnado en Plomo II Acetato al 10 %
con objeto de retener el sulfhídrico y la fosfamina
que puedan desprenderse al mismo tiempo que la
arsenamina.
Introducir la muestra preparada en el Erlenmeyer
de 100 ml del aparato descrito y añadir sucesivamente 10 ml de la solución de Estaño II Cloruro, 5 ml
de la solución de Potasio Yoduro y 1 ml de la solución de Cobre II Sulfato. Después de quine minutos
añadir 5 g de Zinc granulado y cerrar rápidamente el
aparato. Colocarlo en la oscuridad y dejar pasar
vapores por lo menos durante una hora.
14.4.3. Preparación de la curva de patrón.- A
partir de una solución 14.3.9, preparar soluciones
que contengan 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11;
12 mg de Arsénico por litro.
14.5. Cálculo.
Calcular el contenido en arsénico utilizando la
correspondiente curva patrón.
14.6.1. Interfiere en la determinación el antimonio
cuyo complejo absorbe a 510 nm.
14.6.2. La Ley de Lambert-Beer se cumple entre
las concentraciones de 0 y 15 microgramos de As.
14.6.3. Este método tiene un límite de detección
de 0,2 microgramos.
14.7. Referencias.
14.7.1. Vasak, V y Sedivec, V (1952) Chem. Listy
46, 341, citado por M.D. Garrido, M.L. Gil y C. Llaguno. An. Bromatología XXVI-2 (1974), 167-176.
d’Analyses des Vins. O. I. V. A-34f.
15. ZINC
15.1. Principio.
Determinación directa por espectrofotometría de
absorción atómica.
M
15.3. Reactivos.
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
Zn = 1,000 + 0,002 g/l AA
15.3.1. Zinc solución patrón Zinc = 1,000 +
0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de zinc
puro en el mínimo volumen necesario de Acido
Nítrico 60% PA-ISO (1+1) y diluir a 1 litro con Acido
Nítrico al 1% (v/v) (diluir Acido Nítrico 60% PA-ISO
con Agua PA-ACS).
15.4.1. Preparación de la muestra.- No se necesita preparación especial. En caso de elevada concentración, realizar una o varias diluciones hasta
quedar dentro del rango de medida.
15.4.2. Determinación.- Diluir partes alícuotas de
la solución (15.3.1.) con Acido Acético al 5% (diluir
Acido acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PAACS) para obtener soluciones de 0, 0,5, 1, 1,5 y
2 ppm. Aspirar las soluciones patrón y a continuación la muestra, anotando las absorbancias obtenidas a 213,8 nm.
15.5. Interpretación de resultados.
Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos, hallar las concentraciones de zinc de la muestra.
15.6. Referencias.
15.6.1. H. E. Parker, Atomic Absorptions Newsletter (1963), 13.
15.6.2. Standart conditions for Zn and Cu.
Analytical Methods for atomic absorption spectrophotometry “Perkin-Elmer”.
16. PROLINA
16.1. Principio.
Determinación cuantitativa de la prolina por reacción con ninhidrina en medio ácido.
16.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.
permita efectuar lecturas a 517 nm.
16.3. Reactivos.
131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS
131074 Agua PA-ACS
141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS
132362 Ninhidrina PA-ACS
16.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílico
del Etilenglicol PRS.
16.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS.
16.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS
1:1 (v/v)
Diluir la muestra hasta que contenga de 0,05 a
0,5 milimoles/ml de prolina. Tomar 1/2 ml de muestra diluida e introducirla en un tubo de ensayo con
tapón de rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico
98% PA-ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al
3%. Cerrar herméticamente el tubo e introducirlo en
un baño de agua hirviendo durante catorce o quince minutos. Enfriarlo a unos 200°C de cinco a diez
minutos, añadiendo mientras se enfría 5 ml de solución de 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS
1:1 (v/v).
A continuación efectuar la lectura de la absorción a 517 nm después de cinco minutos y antes
de treinta minutos.
Efectuar un blanco siguiendo el procedimiento
anterior, pero usando 0,5 ml de Agua PA-ACS en
vez de la solución problema.
16.5. Interpretación de resultados.
Calcular el contenido en prolina por comparación
con una curva patrón que comprenda concentraciones entre 0,05 y 0,50 milimoles/ml.
16.6. Referencia.
16.6.1. C.S.Ough J. of Food Science 34 (3),
pág. 228 (1969).
17. ACIDO ACETICO DE SINTESIS
17.1. Principio.
Separación del ácido acético mediante extracción con éter iso-propílico y medida de su contenido en C14 mediante espectrofotometría de centelleo líquido.
17.2.1. Pipeta automática de 100 µl.
17.2.2. Pipeta aforada de 10 ml.
17.2.3. Viales para conteo, de vidrio con bajo
contenido en potasio, dotados de un sistema de
cierre de material plástico para evitar el ataque del
ácido acético.
17.2.4. Extractor líquido-líquido en continuo, con
capacidad para 2 litros de muestra y 3,5 litros de
disolvente orgánico.
17.2.5. Columna rectificadora de 1 cm de longitud y 3 cm de diámetro interno, rellena de anillos
129
rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa aislante cerrada
al vacío.
17.2.6. Columna de destilación fraccionada de
40 cm de longitud y 3 cm de diámetro interno, rellena de anillos rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa
aislante cerrada al vacío y llave de salida a los
20 cm.
17.2.7. Espectrofotómetro de centelleo líquido.
17.3. Reactivos.
Butil-PBD.
131314 Eter Di-iso-Propílico estabilizado con
~50 ppm de BHT PA-ACS
Tolueno marcado con C14
17.3.1. Eter Di-iso-Propílico estabilizado con
~ 50 ppm de BHT PA-ACS.
17.3.3. Tolueno marcado con C14.
17.3.4. Solución de 8 g/l de Butil-PBD en Tolueno para centelleo.
130
17.4.1. Extracción y purificación del ácido acético.- Extraer 2 litros de vinagre de 5 grados acéticos
(o la cantidad correspondiente si se trata de vinagres de otra graduación) en continuo con 3,5 litros
de Eter Di-iso-Propílico estabilizado con ~ 50 ppm
de BHT PA-ACS durante 24 horas al menos con lo
que se obtiene un extracto que debe contener
aproximadamente el 70% de ácido acético presente en el vinagre.
Eliminar el disolvente por destilación en la columna 17.2.5. y rectificar el residuo en la columna
17.2.5. Recoger, por la salida situada en el centro
de la columna, la fracción que destila a 114° despreciando las primeras gotas de destilado. El destilado debe tener una riqueza de ácido acético mayor
del 95% en peso.
17.4.2. Medidas espectrofotométricas.
17.4.2.1. Fondo: En un vial se introducen 10,5 g
de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y 10 ml del
líquido del centelleo (17.3.4.).
17.4.2.2. Muestra problema: Introducir, en los
viales de conteo, 10,5 g de cada destilado y 10 ml
de líquido de centelleo (17.3.4.) Preparar al menos
2 viales por cada muestra problema y uno para el
fondo de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Cada
vial se lee 300 minutos como mínimo.
Una vez efectuado el conteo añadir a cada vial
un volumen de patrón interno (17.3.3.) que dé aproximadamente 40.000 dpm y contar durante 4 minutos.
17.5. Cálculo.
Actividad específica (dpm C14/g de C) = A1 - A2
siendo:
cpm(M)
A1 = –––––––––––––––
0,4 x E1 x g x e
cpm(F)
A2 = –––––––––––––––
0,4 x E2 x g x c
cpm (M+P) - cpm(M)
E1 (Eficacia de la muestra) = –––––––––––––––––
dpm (P)
cpm (F+P) - cpm(F)
E2 (Eficacia del fondo ) = –––––––––––––––––––
dpm (P)
g= gramos de la muestra o fondo en el vial.
c= gramos de ácido acético por gramo de muestra
o de fondo.
cpm (M+P) = cuentas por minuto de la muestra
más el patrón.
cpm (F+P) = cuentas por minuto del fondo más el
patrón.
cpm (M)
= cuentas por minuto de la muestra.
cpm (F)
= cuentas por minuto del fondo.
dpm (P)
= desintegraciones por minuto del patrón.
M
131
Productos Derivados
de la Uva:
Orujo, Heces y Lías.
132
M
METODOS DE ANALISIS
1. CONTENIDO ALCOHOLICO EN
ORUJOS, HECES Y LIAS.
1.1. Principio.
Se determina por destilación de la muestra alcalinizada y medida del contenido alcohólico por alcohometría.
1.2.1. Aparato de destilación.- Consta de las
siguientes partes:
1.2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml con
rodaje esmerilado. Se puede utilizar de boca ancha
o de boca estrecha.
1.2.1.2. Columna de rectificación de 20 cm de
largo.
1.2.1.3. Disco metálico o de amianto con un orificio de 8 cm de diámetro.
1.2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de longitud con circulación rápida de agua.
1.2.2. Equipo de medida.
1.2.2.1. Alcohómetros.
1.2.2.2. Termómetros.- Graduados en grados y
décimas de grado y comprendiendo el intervalo de
0 a 30°.
1.2.2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diámetro y 320 mm de altura.
1.2.3. Granatorio.
1.2.5. Vaso de precipitados.
Destilar a continuación recogiendo 200 ml, o
bien las tres cuartas partes de este volumen
(150 ml).
Añadir al destilado más gotas de Tornasol tintura
RE y comprobamos que el destilado toma color
azul, de franca alcalinidad, debida al NH3 que contiene.
Seguidamente, con una pipeta se adiciona Acido Sulfúrico al 10% en cantidad suficiente para que
el destilado vire a rojo, añadiendo un poco más
(0,5 ml) para que el medio quede francamente ácido.
Completar con Agua PA-ACS el contenido de
los 200 ml del matraz y se procede a una segunda
destilación, como si de un vino se tratase.
El destilado recogido de esta segunda destilación está ya en condiciones para determinar su grado alcohólico por aerometría y efectuar la corrección a 20° C.
El resultado se puede expresar:
- cm3 de alcohol absoluto / 100 g de muestra.
1.6. Referencias.
1.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analyses des Vins. O. I. V. 1969, A2 1-19.
1.6.2. De Bernadi, P.; García Viana, E. 1969.
“Determinación de grado alcohólico de heces y
lías”. Estación Enológica de Requena.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
211234 Calcio Oxido natural, escoriforme QP
171748 Tornasol tintura RE
1.3.1. Lechada de Cal. Solución de 120 g de
Calcio Oxido natural, escoriforme QP en 1.000 ml
de Agua PA-ACS.
1.3.2. Acido Sulfúrico al 10%. Diluir Acido Sulfúrico al 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.
1.4. Procedimiento.
El producto a analizar es vertido en un vaso de
precipitados donde es agitado para su homogeneización y al mismo tiempo para favorecer la expulsión de CO2 que pueda contener.
En el caso de orujos, el muestreo se realiza de
forma que la muestra sea lo más homogénea posible.
Pesar 200 g de muestra homogeneizada y vaciar
en el matraz de destilación, añadiendo 200 ml de
Agua PA-ACS, parte de los cuales se utilizan para
enjuagar el vaso que ha contenido la muestra y a
continuación se añade Lechada de Cal hasta neutralizar el exceso (10 ml aproximadamente).
133
Figura 1.1
Aguardientes
compuestos:
Whisky
134
M
METODOS DE ANALISIS
1. OBTENCION DEL DESTILADO
1.1. Principio.
Destilación de la muestra en condiciones determinadas.
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad
de fondo redondo y boca esmerilada.
1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth, (20-30 cm de
longitud) o similar.
1.2.3. Matraces aforados de 100 y 200 ml de
capacidad.
1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.
Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que
antes de enrasar se mantiene en baño de agua de
20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiando el interior del cuello del matraz de posibles
gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse
que queden burbujas de aire adheridas a las paredes del matraz.
Pasar cuantitativamente el volumen medido al
matraz de destilación, lavando tres veces consecutivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de
Agua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas de
lavado al matraz de destilación. Cuando se trate de
bebidas siruposas, por su gran contenido en azúcar, el lavado debe efectuarse consecutivamente
con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Proceder a la destilación.
Es conveniente añadir bolitas de vidrio para facilitar la ebullición suave. En algunos casos, si se
teme la formación de espuma, añadir un antiespuma inerte (como silicona).
El matraz de recogida del destilado es el mismo
en que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml de
Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,
de forma que el destilado resbale por la pared sin
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría
a menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado de
una alargadera que penetre por lo menos 4-6 cm
en el cuello del matraz.
Cuando se hayan recogido aproximadamente
190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentro del mismo baño, enrasarse con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
Tapar el matraz e invertirlo varias veces para
homogeneizar su contenido, antes de proceder a la
determinación del etanol.
1.4.2. Muestras con más de 60% de etanol.
El procedimiento anteriormente descrito, difiere
únicamente en que la muestra se mide en matraz
aforado de 100 ml, que se lava varias veces con
agua hasta alcanzar un volumen de aproximadamente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS
dentro del baño de agua a 20°C.
1.5. Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarse en ambos casos como sigue:
Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al
10% en volumen 5 veces sucesivas. Determinar en
la última destilación el título alcohométrico del destilado que no debe ser menor de 9,9% en volumen
de etanol.
1.5.2. La destilación debe efectuarse procurando que el flujo del destilado sea uniforme.
1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estará
comprendido entre 45 y 90 minutos.
1.6. Referencia.
1.6.1. Instituto Español de Normalización.
UNE 33-112-75.
2. FURFUROL
2.1. Principio.
Destilación y posterior medida espectrofotométrica
de su absorción a 277 nm.
2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.
2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.
2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.
2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de
vapor, según figura I.
135
Figura 2.1
2.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
121085 Etanol v/v 96% PA
141334 Furfuraldehído PRS
2.3.1. Disolución patrón de furfurol (furfuraldehído) de aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfuraldehído PRS recogiendo solamente la fracción de
punto de ebullicion, 161,2°C. De este destilado
tomar 1 ml, llevarlo a un matraz aforado de 100 ml
enrasando con Etanol 96% v/v PA. Tomar 5 ml de
esta disolución y diluir con alcohol al 50% en volumen en un matraz aforado de 500 ml.
2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de
(2.3.1.) obtener disoluciones de 0; 1 ;2; 3; 4 y
5 mg/l de Furfuraldehído PRS.
2.4. Procedimiento.
Destilar 25 ml de la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.) recogiendo 200 ml.
Si se observa turbidez en el destilado añadir un
volumen conocido de Etanol 96 % v/v PA, hasta
lograr total limpidez en el destilado.
Leer la absorbancia en el espectrofotómetro a
277 nm, comparando con las lecturas efectuadas a
las disoluciones de referencia o bien calculando la
absorbancia de una disolución que contenga 1 mg/l
de Furfuraldehído PRS (valor aproximado 0,15).
2.5. Cálculo.
El contenido en furfuraldehído se obtiene mediante la fórmula:
A
Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F
A’
Siendo:
A = Absorbancia de la muestra.
A’ = Absorbancia de una disolución que contiene 1 mg/l de furfuraldehído.
F = Factor de dilución.
2.6. Observaciones.
2.6.1. La disolución de referencia se debe preparar inmediatamente antes de efectuar la medida.
136
2.7. Referencia.
UNE 33-109-74.
3. EXTRACTO SECO
3.1. Principio.
Evaporación de la muestra a 105° C y pesada
posterior del residuo.
3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.
3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondo
plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de
altura.
3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácido
sulfúrico concentrado o gel de sílice como sustancias desecadoras.
3.2.5. Balanza analítica.
3.3. Procedimiento.
Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a
sequedad, en las cápsulas correspondientes previamente desecadas y taradas, en baño de agua
hirviente y mantener en la estufa a 105° C durante
30 minutos.
Dejar enfriar las cápsulas en el interior del desecador y una vez frías pesar en la balanza.
3.4. Cálculo.
El valor del extracto total de la muestra, en gramos por litro, se hallará mediante la fórmula siguiente:
Extracto total (g/l) = ( M - m ) x 40
Siendo:
M = Peso, en g, de la cápsula con el extracto
seco.
m = Peso, en g de la cápsula vacía.
3.5. Referencia.
UNE 33-106-74.
4. ESTERES
4.1. Principio.
Reacción cuantitativa de los ésteres con hidroxilamina en solución alcalina, formación de ácido
hidroxámico, acidificación, formación de un complejo coloreado con iones férricos y medida del
color desarrollado a 525 nm.
4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que permita lecturas a 525 nm.
4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y diámetro interno 2,5 cm.
4.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO
131914 Hidroxilamino Cloruro PA-ACS-ISO
141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS
M
4.3.1. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
2M. Conservar en nevera.
4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5N.
4.3.3. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
1M en Sodio Hidróxido 1,75 N. Mezclar inmediatamente antes de su uso, volúmenes iguales del reactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis horas.
4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.
4.3.5. Disolución de Hierro Tricloruro 0,37M.
Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos
PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un matraz
aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Acido Clorhídrico 4N y enrasar con agua.
la solución de Acido Clorhídrico (4.3.4.), mezclar y
añadir 2 ml de destilado. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.
4.4. Procedimiento.
4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo Acetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con alcohol de
50° (preparar a partir de Etanol 96% v/v PA y Agua
PA-ACS).
4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 y
300 mg/l de Etilo Acetato. Tomar de la solución
(4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y 15,0 ml introduciéndolos en matraces de 250 ml de capacidad y
completar con alcohol de 50° hasta el enrase.
4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de la
solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.) mezclándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar y
añadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones
(4.4.1.2.). Introducir en una serie de tubos de ensayo (4.2.2.), 2 ml de cada una de las soluciones
(4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).
Agitar y dejar reaccionar entre uno y 20 minutos.
Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídrico 4N
y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III
Cloruro 0,37 M a cada uno de los matraces, tanto al
de la solución de referencia como a los de las soluciones (4.4.1.2.). Efectuar las lecturas colorimétricas
a una longitud de onda de 525 nm.
Obtener las gráficas de calibrado mediante la
representación de las diferencias de absorción de
las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución de
referencia, en función de la concentración de Etilo
Acetato.
Destilar siguiendo el procedimiento descrito en el
método oficial nº 1.
Introducir en un tubo (4.2.2.) 2 ml del destilado y
4 ml de disolución de Hidroxilamina Clorhidrato
(4.3.3.), agitar y dejar reaccionar entre 1 y 20 minutos. Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídrico (4.3.4.) y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de
Hierro III Cloruro (4.3.5.) Efectuar la lectura colorimétrica a 525 nm inmediatamente, tomando como
blanco la solución de referencia preparada de la
siguiente forma:
Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolución de Hidroxilamina Clorhidrato (4.3.3.) y 2 ml de
4.7. Referencias.
4.7.1. Association of Official Analytical Chemists.
Edición 1975-9053-59.
4.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE
33-111-77.
4.5. Cálculo.
A partir de las lecturas obtenidas se halla el contenido en ésteres expresados en etilo acetato,
mediante las gráficas de calibrado.
4.6. Observaciones.
4.6.1. El mismo blanco puede ser usado para
una serie de muestras de distinto contenido en
ésteres, pero de semejente graduación alcohólica.
5. ALCOHOLES SUPERIORES
5.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación de los
alcoholes superiores al etanol, por cromatografía de
gases.
5.2.1. Cromatógrafo de gases equipados con
5.2.2. Columna cromatográfica.- Columna de
4 m de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena
de Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W
80-100 mallas, lavado a los ácidos.
5.2.3. Microjeringas de 1 ml.
5.3. Reactivos.
5.3.1. Patrones cromatográficos:
351082 1-Butanol CG
354330 iso-Butanol CG
353851 2-Butanol CG
354539 2-Metil-1-Butanol CG
352516 4-Metil-2-Pentanol CG
5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.
5.4. Procedimiento.
5.4.1. Condiciones cromatográficas.- Las condiciones cromatográficas orientativas son: Gas portador nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno
35°C, temperatura del inyector y del detector
150°C.
5.4.2. Calibrado.
5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en etanol de 40° de 4-Metil-2-Pentanol.
137
en etanol de 40° en las proporciones que se indican
en la Tabla 1.
solución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de la
solución del patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta
1 ml en el cromatógrafo.
5.4.3. Muestra problema.- A 10 ml de la muestra
llevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno
(5.4.2.1.) e inyectar 1 mlitro en las mismas condiciones en que se hizo para el calibrado.
5.5. Cálculo.
Una vez identificados los picos por sus retenciones relativas al patrón interno se calculan los factores de respuesta para cada uno de ellos y las concentraciones en la muestra problema aplicando las
fórmulas:
Ci x Ap
Factor de respuesta (Fr) = ––––––––
Ai
Aim
Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x f
Apm
Siendo:
Ci = Concentración del compuesto en la solución patrón.
patrón.
Ai = Area del compuesto en la solución
patrón.
Aim = Area del compuesto en la muestra problema.
problema.
f
= Factor de dilución de la muestra.
El contenido en alcoholes superiores vendrá
dado por la suma de los valores individuales obtenidos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100
ml de alcohol absoluto.
5.6. Referencia.
5.6.1. Association of Official Agricultural Chemists
138
TABLA 1
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
Compuesto
Concentración (mg/l)
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
2-Butanol
10
1-Propanol
125
iso-Butanol
175
1-Butanol
15
2-Metil-1-Butanol
100
3-Metil-1-Butanol
300
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
6. METANOL
6.1. Principio.
alcohol metílico por cromatografía gaseosa.
Como en (5.2.).
6.3. Reactivos.
Etanol pureza cromatográfica.
Metanol pureza cromatográfica
6.4. Procedimiento.
6.4.1. Condiciones cromatográficas.
Como en (5.4.1.)
6.4.2. Calibrado.
6.4.2.1. Patrón interno.- Como en (5.4.2.1.).
6.4.2.2. Solución patrón.- Preparar una solución
de Metanol, en Etanol a 40º C, de concentración
similar a la esperada en la muestra.
6.4.2.3. Solución de calibrado.- A 10 ml de la
solución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml de la
solución del patrón interno (6.4.2.1.), y se inyecta
1 ml en el cromatógrafo.
6.4.3. Muestra problema.
Como en (5.4.3.).
6.5. Cálculo.
Como en (5.5.).
7. GRADO ALCOHOLICO
7.1. Principio.
Se determina por destilación del producto y
medida de la densidad del destilado por areometría.
Para bebidas con un contenido en extracto seco
menor o igual a 600 mg en 100 ml, se efectuará
directamente, sin destilación.
7.2.1. Aparatos de destilación como en (1.2.).
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de
d 20/20 debidamente contrastado.
M
7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.
7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diámetro interior y 320 mm de altura.
7.2.5. Baño termostático a 20°C.
7.3. Procedimiento.
7.3.1. Obtención del destilado.- Según método
oficial nº 1 en el caso de bebidas con extracto seco,
sea mayor de 600 mg/100 ml.
7.3.2. Determinación areométrica.- Limpiar y
secar el alcohómetro antes de su empleo. Dejar que
el alcohómetro, termómetro, probeta y muestra,
alcancen en el baño termostatizado la temperatura
de 20ºC.
Aclarar 2 o 3 veces con la muestra la probeta
que contiene el termómetro. Echar la muestra en la
probeta hasta un volumen conveniente, inclinarla
unos 45° para evitar la agitación y las burbujas (al
introducir luego el alcohómetro, el nivel del líquido
debe estar justo por debajo del borde de la probeta). Tapar la probeta con la palma de la mano, e
invertirla 3 o 4 veces para igualar las temperaturas
de la probeta y del líquido. Secar el líquido de la
parte exterior de la probeta (no poner las manos
sobre la probeta para no calentar el líquido contenido).
Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba a
abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma
temperatura y que se distribuya cualquier cambio
de temperatura en todo el líquido. Mantener el bulbo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago,
dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocas
décimas de grados estén mojadas.
Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.
Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojo
justo debajo del plano de la superficie del líquido,
levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual
perpendicular al alcohómetro, hasta que la superficie varíe de elipse a una línea recta.
Anotar el punto en que esta línea intersecciona
con la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectura del alcohómetro.
Levantarlo ligeramente por encima de dicha lectura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el
alcohómetro y en el termómetro, comprobando así
las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohómetro con aproximación de 0,05° y la del termómetro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertir
la probeta con la muestra varias veces para que se
equilibre térmicamente todo el conjunto. Volver a
atemperar el alcohómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturas en el alcohómetro y en el termómetro. Los valores calculados son válidos si tienen
aproximación de 0,1 grados alcohólicos, si no fuera
así, realizar lecturas adicionales y calcular la media.
7.4. Cálculo.
7.4.1. Muestras con extracto seco mayor de
600 mg en 100 ml:
El grado alcohólico real es el leído en el destilado
obtenido según (7.3.1.).
Si en la obtención del destilado, 100 ml de
muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obtenida, debe ser multiplicada por 2.
7.4.2. Muestras con extracto seco menor o igual
a 600 mg en 100 ml:
Para obtener el grado alcohólico real, adicionar
al grado alcohólico aparente (leído directamente en
la muestra sin destilar) 0,2 grados alcohólicos por
cada 100 mg de extracto/100 ml.
7.5. Referencia.
7.5.1. Association of Official Analytical Chemist.
Edición 1980-9015-9.
8. ALDEHIDOS
8.1. Principio.
Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.
Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoración
del exceso de yodo con sodio tiosulfato.
mililitro.
8.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución 40%
p/v QP
182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.
8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Preparar esta disolución a partir de Sodio Hidrógeno
Sulfito solución 40% p/v QP y Agua PA-ACS.
8.4. Procedimiento.
Poner 100 ml del destilado (obtenido según
Método Oficial 1) en un matraz de 500 ml. Añadir
100 ml de Agua PA-ACS y un exceso de la disolución (8.3.3.) calculado de modo que equivalga
por lo menos a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l
(0,05N) SV.
Dejar el matraz bien tapado, durante 30 minutos
agitando de vez en cuando.
Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
Valorar el exceso de Yodo añadido con Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV, hasta decoloración
completa.
Debe hacerse simultáneamente un ensayo en
blanco, para comprobar en cada serie de ensayos
la estabilidad de las disoluciones de Yodo y Tiosulfato por ser tan diluidas.
139
8.5. Cálculo.
El contenido en aldehídos, expresado como
acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula:
1,1 x 100
Aldehídos (mg/100 ml
- V1 ) x –––––––––––
=
(V
2
de etanol absoluto)
A
a 100°C durante 30 minutos. Disolver y transferir el
residuo con varias porciones de alcohol (llevando
previamente a pH 8,2) de una graduación similar a
la muestra usando 50 ml de Etanol absoluto PA en
total.
Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido
(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.
9.5. Cálculo.
Siendo:
V1 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato
gastado en la muestra.
V2 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato
gastado en el blanco.
A = Grado alcohólico.
8.6. Observaciones.
8.6.1. La disolución de sodio bisulfito tiene
mayor tiempo de estabilidad si se le añade un 10 %
de alcohol. En cualquier caso esta solución es estable como máximo una semana.
8.7. Referencias.
8.7.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980-9052.
33-107-74.
9. ACIDEZ VOLATIL
9.1. Principio.
Se define convencionalmente como la diferencia
entre los valores de la acidez total y fija, expresadas
ambas en mg de ácido acético por 100 ml de alcohol absoluto.
9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.
9.2.2. pH-metro.
9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana.
140
V1 x 1,2 x 100
9.5.1. Acidez total (en
=
––––––––––––––
mg/100 ml de etanol absoluto)
A
Siendo :
V1 = Volumen, en ml de sodio hidróxido
empleados en (9.4.1.).
A = Grado alcohólico de la muestra.
V2 x 1,2 x 100
9.5.2. Acidez fija (en
=
––––––––––––––
mg/100 ml de etanol absoluto)
A
Siendo:
V2 = Volumen, en ml, de sodio hidróxido
empleados en (9.4.2.)
A = Grado alcohólico de la muestra.
9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado en
mg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,
vendrá dado por la fórmula:
Acidez volátil = Acidez total - Acidez fija.
9.6. Referencia.
Edición 1980-9046-9045.
10. CENIZAS
(Materia mineral total)
9.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
10.1. Principio.
Se denominan cenizas de un whisky, al conjunto
de los productos de incineración del residuo de
evaporación de un volumen conocido del whisky.
Diluir a 1:10 en matraz aforado Sodio Hidróxido 0,1
mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS.
10.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de
77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura, fondo plano.
9.4. Procedimiento.
9.4.1. Acidez Total.
Valorar 50 ml de la muestra con la disolución de
Sodio Hidróxido (9.3.1.), a pH 8,2 utilizando el pHmetro.
9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño maría, en
una cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla
10.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
M
Colocar 25 ml de whisky en una cápsula tarada
en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con
precaución en baño de agua hasta consistencia
siruposa, continuar el calentamiento sobre baño de
arena con moderación y durante una media hora.
Es conveniente ayudar a la evaporación con la aplicación de rayos infrarrojos hasta carbonización.
Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cápsula al horno eléctrico a 525°C ± 25°C y con aireación continua.
Después de cinco minutos de carbonización
completa, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y
añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evapora en
baño de agua, y llevar de nuevo al horno a 525° C.
Si la combustión de las partes carbonosas no se
consigue en quince minutos, volver a comenzar la
operación de adición de Agua PA-ACS, evaporación y recalcinación.
Después de enfriar en el desecador, pasar la
cápsula con las cenizas.
10.5. Cálculo.
El contenido en cenizas vendrá dado por la
siguiente fórmula:
Cenizas (g/l) = 40 x P
Siendo:
P = Peso, en gramos, de las cenizas contenidas
en 25 ml de whisky.
10.6. Referencias.
d’Analyses des Vins. O.I.V., AGI, 1969.
10.6.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,
Ministerio de Agricultura, 1971, pág 66.
11. PLOMO
11.1. Principio.
Determinación del plomo por A.A., previa mineralización de la muestra.
11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.
11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con
regulación de temperatura o estufa con control de
temperatura en el rango de 50 a 150°C.
11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de
vitrina de extracción de humos.
11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de
capacidad.
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.3.3. Acido Nítrico al 1% v/v en Agua PA-ACS.
11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±
11.4.1. Preparación de la muestra.- Poner
100 ml de la muestra en la cápsula (11.2.3.) y llevarla a evaporación hasta consistencia siruposa en
baño de arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml
de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el baño de arena o placa. Seguidamente
introducir la cápsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450°C, transcurrido dicho tiempo,
sacarla y dejarla enfriar.
baño de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendo esta operación hasta obtener cenizas blancas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas
(posiblemente de Hierro III Oxido) es aceptado y no
requiere un tratamiento posterior.
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PAACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavar
la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas del
lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.
alícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)
con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curva
de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.
11.4.3. Determinación.- Operar según las especificaciones del aparato; usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
11.5 Cálculo.
Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l
mediante comparación con la correspondiente curva patrón y teniendo en cuenta el factor de concentración o dilución.
11.6. Referencia.
Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.
12. ZINC
12.1. Principio.
Determinación del Zinc por A.A. previa mineralización de la muestra.
141
12.2.2. Lámpara de Zinc.
12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.),
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).
12.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(11.3.2.) y (11.3.3.).
12.3.2. Zinc solución patron Zn = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zinc
metal , granalla PRS en el mínimo volumen necesario
de Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítrico
del 1% (v/v).
12.4.1. Preparación de la muestra.- Como en
(11.4.1.).
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;
1; 1,5 y 2 mg/l.
12.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.
12.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zinc para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentración o dilución.
12.6. Referencia.
12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newsletter (1963), 13.
13. COBRE
13.1. Principio.
Determinación del cobre por A.A., mineralización
por cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a la
lectura con objeto de conseguir resultados suficientemente precisos.
142
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).
13.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(11.3.2.) y (11.3.3.).
13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ± 0,002
g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro
en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico (1:1)
y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).
(11.4.1.).
partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) con
Acido Nítrico del 1% para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de cobre/l.
13.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.
Medir a 324,7 nm.
13.5. Cálculo.
las concentraciones de cobre de la muestra.
13.6. Referencias.
13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newsletter (1963),13”.
13.6.2. F. Rousselet: “Spectrophotometrie par
absorption atomique Boudin”. Ed. París (1968), pág
59-144.
14. ARSENICO
14.1. Principio.
espectrofotometría de absorción atómica, con generador de hidruros.
14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de 0,1 g.
capacidad.
14.2.3. Pipetas de doble aforo.
14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.
14.2.8. Registro gráfico.
14.3. Reactivos.
131669 Acido Etilendiaminotetraacético sal
M
131037
131058
131074
313171
Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO
Acido Sulfúrico PA-ISO
Agua PA-ACS
Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131687 Sodio Hidróxido 97%, lentejas
PA-ACS-ISO
(d= 1,19 g/ml).
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 32% v/v.
Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACSISO (d= 1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un
volumen de 100 ml.
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 1,5% v/v.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACSISO (d=1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml.
14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84).
14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.
Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo
hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
14.3.8. Disolución de Acido Etilendiaminotetraacético al 1%. Pesar un gramo de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACSISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PAISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico
III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido
al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de
concentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la
solución de Arsénico (14.3.13.), en un matraz
aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con
Agua PA-ACS.
14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz
Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a
5 ml.
Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un
matraz de 50 ml la solución resultante.
14.4.2. Preparación del blanco y patrones de
trabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la
solución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mismo tratamiento que la muestra.
1 ml de la solución contiene 10 nanogramos de
Arsénico.
Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.
14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de
acuerdo con las condiciones del aparato.
Encender el generador de hidruros, colocando la
temperatura de la celda a 900°C, esperando hasta
que se alcanza dicha temperatura.
Se ajustan las condiciones del generador de
hidruros según las especificaciones del aparato.
Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con las
características del aparato.
Encender el registrador.
14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de
al matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),
más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solución (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,
20 y 50 ng de Arsénico.
Lavar los matraces antes y después de cada
uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (14.3.3.).
Al construir la gráfica de adición hay que descontar el valor de absorbancia del blanco obtenido
en las mismas condiciones anteriores, pero añadiendo 3 ml de la solución blanco.
En estas condiciones el límite de detección de la
técnica es de 5 ng.
143
Aguardientes
compuestos:
Ron
144
M
METODOS DE ANALISIS
1.1. Principio.
1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.
1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de
capacidad.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.3.1. Agua PA-ACS
1.4 Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.
antes de enrasar se mantiene en baño de agua a
matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PAACS cada vez, añadiendo las aguas del lavado al
matraz de destilación. Cuando se trate de bebidas
siruposas, por su gran contenido en azúcar, el lavado debe efectuarse consecutivamente con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS.
Proceder a la destilación.
teme la formación de espuma, añadir un antiespumante inerte (como silicona).
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría,
a menos de 10° C. El refrigerante debe ir dotado de
una alargadera que penetra por lo menos 4-6 cm
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentro del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
homogeneizar su contenido antes de proceder a la
1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. El
procedimiento anteriormente descrito difiere únicamente en que la muestra se mide en matraz aforado de 100 ml, que se lava varias veces con Agua
PA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximadamente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
1.5 Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarse en ambos caso como sigue:
10% en volumen cinco veces sucesivas. Determinar
en la última destilación el título alcohométrico del
destilado, que no debe ser menor del 9,9% en volumen de etanol.
comprendido entre cuarenta y cinco y noventa
minutos.
1.6. Referencia.
33-112-75.
2. FURFUROL
(Furfuraldehído)
2.1. Principio.
Destilación y posterior medida espectrofotométrica de su absorción a 277 nm.
2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.
2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.
2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.
2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de
vapor, según figura 1.
2.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
2.3.1. Disolución patrón de Furfuraldehído de
aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfuraldehído
PRS recogiendo solamente la fracción del punto de
ebullición 161,2°C. De este destilado tomar 1 ml,
llevarlo a un matraz aforado de 100 ml, enrasando
con Etanol al 95% en volumen. Tomar 5 ml de esta
disolución y diluir con Etanol al 50% en volumen en
un matraz aforado de 500 ml.
2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de
(2.3.1.) obtener disoluciones de 0, 1, 2, 3, 4 y
5 mg/l de Furfuraldehído.
145
2.6. Observaciones.
2.6.2. La disolución de referencia se debe preparar inmediatamente antes de efectuar la medida.
2.7. Referencia.
33-109-74.
3. EXTRACTO SECO REDUCIDO
3.1. Principio.
Evaporación de la muestra a 105°C y pesada
posterior del residuo, y aplicación de una fórmula
empírica.
3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a los
105°C.
3.2.2. Crisoles de platino o cuarzo de fondo plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura.
3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácido
sulfúrico concentrado o gel de sílice como sustancia desecadora.
Figura 2.1
2.4. Procedimiento.
2.4.1. Preparación de la muestra. Destilar 25 ml
de la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.),
recogiendo 200 ml.
Si se observa turbidez en el destilado, añadir un
volumen conocido de Etanol 95% hasta lograr total
limpidez en el destilado.
2.4.2. Determinación. Leer la absorbancia en el
espectrofotómetro a 277 nm, comparando con las
lecturas efectuadas a las disoluciones de referencia
o bien calculando la absorbancia de una disolución
que contenga 1 mg/l de Furfuraldehído PRS (valor
aproximado 0,15).
2.5. Cálculo.
El contenido en Furfuraldehído se obtiene mediante
la fórmula:
146
A
Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F
A’
Siendo:
A = absorbancia de la muestra.
A’ = absorbancia de una disolución que
contiene 1 mg/l de Furfuraldehído.
F = factor de dilución.
3.3. Procedimiento.
sequedad, en las cápsulas correspondientes previamente desecadas y taradas, en baño de agua
hirviente y mantener la estufa a 105ºC, durante
treinta minutos.
Dejar enfriar las cápsulas en el interior del desecador y una vez frías pesar en la balanza de precisión.
3.4. Cálculo.
Extracto total (g/l) = (M-m)x40
Siendo:
M = peso, en g, de la cápsula con el extracto
seco.
m = peso, en g, de la cápsula vacía.
El extracto seco reducido se calcula mediante la
fórmula siguiente:
Extracto seco reducido = ESR en (g/l)
Extracto seco total
= EST en (g/l)
Azúcares totales
= AT en (g/l) = sacarosa +
azúcares reductores
ESR
= EST - AT
3.5. Referencia.
33-106-74.
M
4. ESTERES
4.1. Principio.
Reacción cuantitativa de los ésteres con hidroxilamina en solución alcalina, formación de ácido
hidroxámico, acidificación, formación de un complejo coloreado con iones férricos y medida del
color desarrollado a 525 nm.
permita lectura a 525 nm.
4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y
diámetro interno 2,5 cm.
4.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO
131914 Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO
141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos
PRS
4.3.1. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro
2M. Diluir convenientemente Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. Conservar
en nevera.
4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5 N.
Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas
PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.
4.3.3. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro 1M
en Sodio Hidróxido 1,75N: mezclar inmediatamente antes de su uso, volúmenes iguales del
reactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis
horas.
4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.
Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35%
PA-ISO en Agua PA-ACS.
4.3.5. Disolución de Hierro III Cloruro 0,37M.
Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un
matraz aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Acido Clorhídrico 4N y enrasar con agua.
4.4. Procedimiento.
4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo
Acetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con Etanol
96% v/v PA convenientemente diluido en Agua
PA-ACS hasta concentración 50º.
4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250
y 300 mg/l de Etilo Acetato PA-ACS-ISO. Tomar
de la solución (4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y
15,0 ml introduciéndolos en matraces de 250 ml
de capacidad y completar con Etanol de 50° hasta el enrase.
4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de
la solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.)
mezclándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar y añadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones (4.4.1.2.).
Introducir en una serie de tubos de ensayo
(4.2.2.), 2ml de cada una de las soluciones
(4.4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).
Agitar y dejar reaccionar entre uno y veinte
minutos. Añadir 2 ml de la disolución de Acido
Clorhídrico 4N y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III Cloruro 0,37M a cada uno de los
matraces, tanto al de la solución de referencia
como a los de las soluciones (4.4.1.2.).
Efectuar las lecturas colorimétricas a una longitud de onda de 525 nm.
Obtener las gráficas de calibrado mediante la
representación de las diferencias de absorción de
las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución de
referencia, en función de la concentración de Etilo
Acetato.
4.4.2. Preparación de la muestra. Destilar
siguiendo el procedimiento descrito en el método
oficial número 1.
4.4.3. Determinación. Introducir en un tubo
(4.2.2.), 2 ml del destilado y 4 ml de disolución de
Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.), agitar y dejar
reaccionar entre uno y veinte minutos. Añadir 2 ml
de la disolución de Acido Clorhídrico (4.3.4.) y
mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III
Cloruro (4.3.5.)
Efectuar la lectura colorimétrica a 525 nm
inmediatamente, tomando como blanco la solución de referencia preparada de la siguiente forma:
Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolución de Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.) y 2 ml de
la solución de ácido clorhídrico (4.3.4.), mezclar y
añadir 2 ml del destilado. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.
4.5 Cálculo.
A partir de las lecturas obtenidas se halla el contenido en ésteres, expresados en mg de etilo acetato por 100 ml de alcohol absoluto, mediante las
gráficas de calibrado.
4.6. Observaciones.
4.6.1. El mismo blanco, puede ser usado para
una serie de muestras de distinto contenido en
ésteres, pero de semejante graduación alcohólica.
4.7. Referencias.
4.7.1. Association of Official Analytical Chemists. Edición 1975-9053-59
4.7.2. Instituto Español de normalización. UNE
33-111-77.
147
5.1. Principio.
alcoholes superiores al etanol por cromatografía de
gases.
5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 m
de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena de
Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W
5.2.3. Microjeringas de 1 µl.
5.3. Reactivos.
353851 2-Butanol CG
4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)
5.4. Procedimiento.
5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condiciones cromatográficas orientativas son: gas portador nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno
85°C, temperatura del inyector y del detector
150°C.
5.4.2. Calibrado.
5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en etanol de 40° C 4-Metil-2-Pentanol.
en alcohol de 40° en las proporciones que se indican en la tabla 1.
solución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de
la solución patrón interno (5.4.2.1.) Y se inyecta 1 µl
en el cromatógrafo.
5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestra
llevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno
(5.4.2.1.) e inyectar un litro en las mismas condiciones en que se hizo para el calibrado.
148
5.5. Cálculo.
fórmulas.
Ap
Factor de respuesta ( Fr ) = Ci x –––––
Ai
Aim
Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x –––––– x f
Apm
Siendo:
Ci = concentración del compuesto en la solución patrón.
Ap = área del patrón interno en la solución
patrón.
Ai = área del compuesto en la solución patrón.
Aim = área del compuesto en la muestra problema.
Apm = área del patrón interno en la muestra problema.
f
= factor de dilución de la muestra.
dado por la sumo de los valores individuales obtenidos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100
ml de alcohol absoluto.
5.6. Referencia.
5.6.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980, 9075.
TABLA 1
–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
Compuesto
–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
2-Butanol
10
1-Propanol
125
iso-Butanol
175
1-Butanol
15
2-Metil-1-Butanol
100
3-Metil-1-Butanol
300
–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
6. METANOL
(Alcohol Metílico)
6.1. Principio.
metanol por cromatografía gaseosa.
Como en 5.2.
6.3. Reactivos.
Metanol pureza cromatográfica.
4-Metil 2-Pentanol (Patrón interno).
Etanol pureza cromatográfica.
6.4. Procedimiento.
6.4.1. Condiciones cromatográficas.- Como en
5.4.1.
6.4.2. Calibrado.
6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.
6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución
M
de Metanol en Etanol a 40°, de concentración similar a la esperada en la muestra.
6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de la
solución del patrón interno (6.4.2.2.), se le añade
1 ml de la solución del patrón interno (6.4.2.1.) y se
inyecta 1 µl en el cromatógrafo.
6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.
6.5. Cálculo.
Como en 5.5.
6.6. Referencia.
Como en 5.6.
7. GRADO ALCOHOLICO
7.1. Principio
7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de
7.3. Procedimiento.
7.3.1. Obtención del destilado. Según método
oficial número 1.
7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar y
secar el alcohómetro antes de su empleo.
Echar el destilado en la probeta, inclinarla unos
45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar la
probeta con la palma de la mano, e invertirla 3 o 4
veces para igualar las temperaturas de la probeta y
el líquido.
Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta y
destilado, alcance en el baño termostatizado la
temperatura de 20°C.
abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma
temperatura y que se distribuya cualquier cambio
de temperatura en todo el líquido. Mantener el bulbo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago,
dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocas
décimas de grados estén mojadas.
la probeta con la muestra varias veces (el termómetro quede en su sitio), para que se equilibre térmicamente todo el conjunto. Volver a atemperar el alcohómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturas
en el alcohómetro y en el termómetro. Los valores
calculados son válidos si tienen aproximación de
0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lecturas adicionales y calcular la medida.
7.4. Cálculo.
obtenido según 7.3.1.
7.5. Referencia.
Edición 1980-9015-9.
8. ALDEHIDOS
8.1. Principio.
Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.
Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoración
del exceso de yodo con sodio tiosulfato.
ml.
8.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución
40% p/v QP
182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV
8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Diluir
convenientemente Sodio Hidrógeno Sulfito solución
40% p/v QP en Agua PA-ACS.
8.4. Procedimiento.
Poner 100 ml del destilado (obtenido según
Método oficial número 1) en un matraz de 500 ml
de Agua PA-ACS y un exceso de la disolución
(8.3.3.) calculado de modo que equivalga, por lo
menos, a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
Dejar el matraz, bien tapado, durante treinta
minutos, agitando de vez en vez.
Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.
Valorar el exceso de yodo añadido con Sodio Tio-
149
sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV hasta decoloración
completa.
Debe hacerse simultáneamente un ensayo en
blanco, para comprobar en cada serie de ensayos
la estabilidad de las soluciones de Yodo y Tiosulfato
por ser tan diluidas.
8.5. Cálculo.
El contenido en aldehídos, expresado como
acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula:
1,1 x 100
Aldehídos (mg/100 ml
- V1) x ––––––––––
de alcohol absoluto) = (V2
A
Siendo:
V1 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastado en la muestra.
V2 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastado en el blanco.
A = grado alcohólico.
8.6. Observaciones.
8.6.1. La solución de sodio bisulfito tiene mayor
tiempo de estabilidad si se le añade un 10% de
alcohol. En cualquier caso esta solución es estable,
como máximo una semana.
8.7. Referencias.
8.7.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980-9052.
33-107-74.
9. ACIDEZ VOLATIL
9.1. Principio.
Se define convencionalmente como la diferencia
entre los valores de la acidez total y fija, expresadas
ambas en mg de ácido acético por 100 ml de alcohol absoluto.
con la disolución de Sodio Hidróxido (9.3.1.) a
pH 8,2 utilizando el pH-metro.
9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño María, en
una cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla
a 100° C durante treinta minutos. Disolver y transferir el residuo con varias porciones de Etanol absoluto PA (llevando previamente a pH 8,2) de una graduación similar a la muestra usando 50 ml de Etanol
absoluto PA en total.
Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido
(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.
9.5. Cálculo.
V1 x 1,2 x 100
9.5.1. Acidez fija (en
mg/100 ml de etanol absoluto) = –––––––––––––––
A
Siendo:
V1 = volumen, en ml, de sodio hidróxido empleados en 9.4.1.
A = grado alcohólico de la muestra.
V2 x 1,2 x 100
9.5.2. Acidez fija ( en
mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––
A
Siendo:
V2 = volumen, en ml, de sodio hidróxido empleados en 9.4.2.
A = grado alcohólico de la muestra.
9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado en
mg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,
vendrá dado por la fórmula :
Acidez volátil = acidez total - acidez fija.
9.6. Referencia.
Edición 1980-9046-9048.
10. AZUCARES REDUCTORES
9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.
9.2.2. pH-metro.
9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana.
9.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
150
Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas
PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
9.4. Procedimiento.
9.4.1. Acidez total. Valorar 50 ml de la muestra
10.1 Principio.
Eliminación previa de todas las materias reductoras distintas de los azúcares reductores por defecación y posterior valoración basada en la acción
reductora de los azúcares sobre una solución
cupro-alcalina.
10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeración
de reflujo.
10.2.2. Material necesario para volumetría.
10.3. Reactivos.
M
131074
171096
121212
131270
211835
131466
131542
122032
131659
181691
181723
Agua PA-ACS
Almidón soluble RE
Calcio Carbonato precipitado PA
Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO
Piedra Pómez gránulos QP
Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
Potasio Yoduro PA-ISO
Sodio Carbonato 1-hidrato PA
Sodio Cloruro PA-ACS-ISO
Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV
Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV
10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidrato
PA-ACS-ISO (aproximadamente saturada). Añadir a
250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO,
Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta
disolución completa.
10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.
10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver por
separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PAACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Acido Cítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PAACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en
300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar la
solución de Cobre Sulfato y completar el volumen
con Agua PA-ACS hasta un litro.
10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.
Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO
con Agua PA-ACS. Conservar en frasco topacio.
10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % en
96% PA-ISO en Agua PA-ACS.
10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l. Diluir convenientemente 5 g de Almidón soluble RE en 1 l de
Agua PA-ACS; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro
PA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Esta
solución debe ser mantenida diez minutos en ebullición en el momento de su preparación.
10.4.1. Defecación plúmbica. Llevar 100 ml de
ron a un matraz aforado de 125 ml. Añadir agitando
5 ml de solución saturada de Plomo II Acetato y 1 g
de Calcio Carbonatado precipitado PA, agitar varias
veces y dejar sedimentar, por lo menos quince
minutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 ml
más de Agua PA-ACS y filtrar.
10.4.2. Valoración. Poner en el Erlenmeyer de
300 ml 25 ml de la solución cuproalcalina y 25 ml
de ron previamente defecado. Añadir unos gramos
de Piedra Pómez granulos QP y llevar a ebullición,
que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptando a Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantener
exactamente durante diez minutos la ebullición.
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al
25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación
valorar con Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.
Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los
25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PAACS y tratar como se ha indicado para la muestra.
10.5. Cálculo.
La cantidad de azúcar, expresada en azúcares
reductores contenida en la muestra analizada, se
obtiene en la tabla adjunta en función del número
n’ - n de ml de tiosulfato utilizado.
Siendo:
n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato 0,1 N, utilizados para la valoración de la
muestra.
n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato 0,1 N, utilizados en la prueba en blanco.
Expresar el contenido en gramos de azúcares
reductores por litro, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas en el curso de la defecación del
10.6. Referencia.
d’Analyses des Vins. O. I. V. A4e 106-107 (defecación y 126-127 (valoración).
151
152
TABLA 10.I
Azúcares reductores expresados en mg de glucosa
ml sodio
tiosulfato 0,1N
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,0
3,2
6,4
9,7
13,0
16,4
19,8
23,2
26,6
30,0
33,4
36,8
40,3
43,8
47,3
50,8
54,3
58,0
61,8
65,5
69,4
73,3
77,2
81,2
85,2
89,2
0,3
3,5
6,7
10,0
13,3
16,7
20,1
23,5
26,9
30,3
33,7
37,2
40,7
44,2
47,7
51,2
54,7
58,4
62,2
65,9
69,8
73,7
77,6
81,6
85,6
89,6
0,6
3,8
7,1
10,4
13,7
17,1
20,5
23,9
27,3
30,7
34,1
37,5
41,0
44,5
48,0
51,5
55,0
58,8
62,5
66,3
70,2
74,1
78,0
82,0
86,0
90,0
1,0
4,2
7,4
10,7
14,0
17,4
20,8
24,2
27,6
31,0
34,4
37,9
41,4
44,9
48,4
51,9
55,4
59,1
62,9
66,7
70,6
74,5
78,4
82,4
86,4
90,4
1,3
4,5
7,7
11,0
14,4
17,8
21,2
24,6
28,0
31,3
34,8
38,2
41,7
45,2
48,7
52,2
55,8
59,5
63,3
67,1
71,0
74,9
78,8
82,8
86,8
90,8
1,6
4,8
8,1
11,4
14,7
18,1
21,5
24,9
28,3
31,7
35,1
38,6
42,1
45,6
49,1
52,6
56,2
59,9
63,7
67,5
71,4
75,3
79,2
83,2
87,2
91,2
1,9
5,1
8,4
11,7
15,0
18,4
21,8
25,2
28,6
32,0
35,4
38,9
42,4
45,9
49,4
52,9
56,5
60,3
64,0
67,8
71,7
75,6
79,6
83,6
87,6
91,6
2,2
5,4
8,7
12,0
15,4
18,8
22,2
25,6
29,0
32,4
35,8
39,3
42,8
46,3
49,8
53,3
56,9
60,7
64,4
68,2
72,1
76,0
80,0
84,0
88,0
92,0
2,6
5,7
9,0
12,3
15,7
19,1
22,5
25,9
29,3
32,7
36,1
39,6
43,1
46,6
50,1
53,6
57,3
61,0
64,8
68,6
72,5
76,4
80,4
84,4
88,4
92,4
2,9
6,1
9,4
12,7
16,1
19,5
22,9
26,3
29,7
33,0
36,5
40,0
43,5
47,0
50,5
54,0
57,6
61,4
65,1
69,0
72,9
76,8
80,8
84,8
88,8
92,8
M
11. PLOMO
11.1. Principio.
Determinación del plomo por A.A., previa mineralización de la muestra.
temperatura en el rango de 50 a 150° C.
11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1000 ml de capacidad.
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS
(v/v).
de la muestra en la cápsula (11.2.3.), llevarla a evaporación hasta consistencia siruposa en baño de
arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de Acido
Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el
baño de arena o placa. Seguidamente introducir la
cápsula en la mufla y mantenerla durante dos horas
a 450° C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y
dejarla enfriar.
(posiblemente de Fe2O3 ) es aceptado y no requiere
un tratamiento posterior.
la cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas de
11.4.2. Construcción de la curva de patrón.
Diluir alícuotas apropiadas de la solución patrón
(11.3.4.) con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener
una curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.
11.4.3. Determinación. Operar según las especificaciones del aparato, usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solución está muy concentrada
11.5. Cálculo.
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de concentración o dilución.
11.6. Referencia.
11.6.1. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”.
Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.
12. ZINC
12.1. Principio.
Determinación del zinc por A.A. previa mineralización de la muestra.
12.2.3. Los utilizados para el plomo en 11.2.3.,
11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.
12.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.3.2. y 11.3.3.
Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumen
necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y
diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).
11.4.1.
12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir
1; 1,5 y 2 mg/l.
12.5. Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zn para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentración o
dilución.
153
12.6. Referencia.
12.6.1. H. E. Parker. “Atomic Absorption Newsletter” (1963),13.
13. COBRE
13.1. Principio.
por cenizas a < 450° C y concentración previa a la
13.2.3. Los utilizados para el plomo, en 11.2.3.,
11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.
13.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
11.3.2. y 11.3.3.
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro
con Acido Nítrico del 1% (v/v).
11.4.1.
Acido Nítrico del 1%, para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de Cu/l.
Medir a 324,7 nm.
13.5. Cálculo.
154
13.6. Referencia.
13.6.1. H. E. Parker “Atomic Absorption Newsletter” (1963),13.
13.6.2. F. Rousselet “Spectrophotometrie par
absorption atomique Boudin”. Edición París (1968),
páginas 59-144.
14. ARSENICO
14.1. Principio.
espectrofotometría de absorción atómica, con generador de hidruros.
14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de
0,1 g.
capacidad.
14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.
14.2.8. Registrador gráfico.
14.3. Reactivos.
131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO
131074 Agua PA-ACS
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de
1000 ml.
14.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO.
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y
disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
Pesar 3 g de Sodio Borohidruro PA y disolverlo hasta
100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
14.3.8. Disolución al 1% de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal
Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta
100 ml con Agua PA-ACS.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO
M
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta el volumen de
100 ml.
14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).
Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua
PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico
III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al
20% (14.3.9), neutralizar con Acido Sulfúrico al 20%
(14.3.10), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico 1%
(14.3.11.).
14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico (14.3.12.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
hasta el enrase con Agua PA-ACS.
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración 0,1mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico (14.3.13.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
Kjeldahl, de 250 ml, introducir 10 ml de muestra con
20 ml de Acido Nítrico (14.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfúrico (14.3.5.).
Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5ml
14.4.2. Preparación del blanco y patrones de trabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la solución de Arsénico (14.3.14.), y someterlo al mismo tratamiento que la muestra.
Un ml de la solución contiene 10 nanogramos de
Arsénico.
14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro. Encender la fuente de alimentación de las lámparas de
descarga sin electrodos con el tiempo suficiente para
que se estabilice la energía de la lámpara.
Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitud
de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo
con las condiciones del aparato.
que se alcance dicha temperatura.
Se ajustan las condiciones del generador de hidruros según las especificaciones del aparato.
Ajustar el flujo de argón de acuerdo con las características del aparato.
14.4.4. Determinación. Las determinaciones de la
concentración de Arsénico se realizan por el método
de adición de patrones por medio de medidas duplicadas en el espectrofotómetro en las condiciones
especificadas en 14.4.3., añadiendo al matraz de
reacción 3 ml de la solución 14.4.1., más 3 ml de la
solución 14.3.2. y 10 ml de la solución 14.3.8. Como
patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.
Lavar los matraces antes y después de cada uso,
con Acido Clorhídrico (14.3.3.).
Al construir la gráfica de adición hay que descontar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las
mismas condiciones anteriores, pero añadiendo 3 ml
de la solución blanco.
15. SACAROSA
15.1. Principio.
clorhídrica del líquido procedente de la defecación del
ron.
15.2. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
15.2.2. Sodio Hidróxido 12 N. Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas
PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS
15.3 Procedimiento.
Poner en dos matraces Erlenmeyer, de 200 ml
cada uno, el mismo volumen del líquido defecado
según el método oficial número 10. Añadir a cada
matraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACSISO, por cada 10 ml de líquido defecado.
En uno de los matraces añadir inmediatamente
0,3 ml de Sodio Hidróxido 12 N, por cada 10 ml de
líquido defecado, procediendo a la valoración de los
azúcares reductores según el método oficial número
10.
Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizar a baño de agua hirviendo durante 3 minutos. Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido
12 N que al otro matraz y valorar como en el caso
anterior.
15.4. Cálculo.
reductores encontrada en los resultados de estas dos
valoraciones, multiplicada por 0,95 de la riqueza en
sacarosa de la muestra de estudio.
Este resultado se expresa en g/l de ron teniendo
presentes las diluciones efectuadas eventualmente en
el curso de la defecación y del volumen de la muestra
de ron que se sometió a la defecación.
15.5. Referencia.
15.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analyses des Vins. O. I. V. AS, 4, 1969.
155
Aguardientes
compuestos:
Ginebra
156
M
METODOS DE ANALISIS
1.1. Principio.
1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad,
1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.
capacidad.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.3.1. Agua PA-ACS.
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.
matraz de destilación lavando tres veces consecutivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua
PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas de lavado
al matraz de destilación. Cuando se trate de bebidas siruposas, por su gran contenido en azúcar, el
lavado debe efectuarse consecutivamente con tres
proporciones de 50 ml de Agua PA-ACS.
salpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría
a menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado de
una alargadera que penetre, por lo menos, 4-6 cm
Cuando se hayan recogido, aproximadamente,
20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentro del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. El
procedimiento anteriormente descrito difiere únicamente en que la muestra se mide en matraz aforado de 100 ml, que se lava varias veces con Agua
PA-ACS hasta alcanzar un volumen de, aproximadamente, 230 ml. El destilado se recoge en matraz
aforado de 200 ml y se enrasa con Agua PA-ACS
1.5. Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarse en ambos casos como sigue:
10% en volumen cinco veces consecutivas. Determinar en la última destilación el título alcoholimétrico
del destilado, que no debe ser menor del 9,9% en
volumen de etanol.
comprendido entre cuarenta y cinco y noventa
minutos.
1.6. Referencia.
33-112-75.
2. FURFUROL
(Furfuraldehído)
2.1. Principio.
El furfurol se combina con la anilina en presencia
del ácido acético para dar un compuesto de color
rojo.
2.2. Reactivos.
141156 Anilina PRS
2.2.2. Anilina PRS recientemente destilada. Al
destilar debe pasar, como mínimo, un 95% entre
183°C y 185°C.
2.3. Procedimiento.
Poner 10 ml de destilación de ginebra (obtenido
según el método oficial número 1) o la ginebra
directamente, si no contiene ni extracto ni color, en
un tubo de tapón esmerilado. Añadir 0,5 ml de Anilina PRS y 2 ml de Acido Acético glacial PA-ACSISO. Agitar.
2.4. Cálculo.
Si antes de veinte minutos no aparece ninguna
coloración rosa salmón, la muestra se considera
exenta de furfurol.
157
2.5. Referencia.
2.5.1. Codex Oenologique International. OIV.
3. EXTRACTO SECO
3.1. Principio.
Evaporación de la muestra a 105°C y pesada
posterior del residuo.
3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.
3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondo
plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de
altura.
3.2.3. Desecador de vidrio que contenga
141058 Acido Sulfúrico 95-98% (USP-NF,BP) PRSCODEX o 211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indicador QP.
3.3. Procedimiento.
sequedad, en cápsulas correspondientes previamente desecadas y taradas, en baño de agua hirviente y mantener la estufa a 105°C durante treinta
minutos.
Dejar enfriar las cápsulas en el interior del desecador y una vez frías pesar en la balanza.
3.4. Cálculo.
Extracto total (g/l) = (M - m) x 40
Siendo:
M = Peso en g de la cápsula con el extracto
seco.
m = Peso en g de la cápsula vacía.
3.5. Referencia.
33-106-74.
4. BASES NITROGENADAS
158
4.1. Principio.
Fijación del amoníaco y las bases nitrogenadas
mediante ácido fosfórico, seguida de una primera
destilación. Liberación del amoníaco y las bases
nitrogenadas con sodio hidróxido, segunda destilación y posterior valoración con ácido clorhídrico del
segundo destilado.
El límite de detección del método es de 1 mg/l.
4.2.1. Matraz de 200 ml de capacidad.
4.2.2. Según (1.2.2.), (1.2.3.), (1.2.4.) y (1.2.5.).
4.3. Reactivos.
121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA
131074 Agua PA-ACS
171688 Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE
4.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA.
4.3.2. Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE.
4.3.3. Solución de Acido Clorhídrico 0,01N.
Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% PAISO en Agua PA-ACS.
4.3.4. Solución de Rojo de Metilo (C.I. 13020)
RE-ACS, disolver con 50 ml de Etanol absoluto PA
al 90% de volumen.
4.4. Procedimiento.
En un matraz de 200 ml, introducir 50 ml de
muestra, adicionar 40 ml de Agua PA-ACS y dos
gotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar y
desechar los primeros 80 ml.
Enfriar el matraz y al residuo frío adicionar 2 ml
de Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE (o 20 ml
de solución de sodio hidróxido al 1%, si hay proyecciones). Destilar de nuevo recogiendo alrededor
de 7 ml de destilado en un tubo de ensayo en el
que previamente se han introducido 2 ml de Agua
PA-ACS y una gota de solución de Rojo de Metilo,
procurando que el destilado caiga en el fondo del
tubo con la ayuda de una alargadera. Valorar a
continuación con una solución de Acido Clorhídrico 0,01N hasta que el indicador vire a rojo.
4.5. Cálculo.
Nitrógeno (mg de nitrógeno/litro) = 2,8 n.
Siendo:
n = volumen, en ml, de solución de ácido clorhídrico, 0,01N gastados en la valoración.
4.6. Referencia.
4.6.1. Codex Oenologique International. OIV,
1978, pág. 17.
5.1. Principio.
alcoholes al etanol, por cromatografía de gases.
M
5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 m
de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena de
Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W
5.3. Reactivos.
353851 2-Butanol CG
Aim = área del compuesto en la muestra
problema.
Apm = área del patrón interno en la muestra
problema.
f
= factor de dilución de la muestra.
dado por la suma de los valores individuales obtenidos de cada uno de ellos y se expresará en
mg/100 ml de alcohol absoluto.
5.6. Referencia.
5.4. Procedimiento.
5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condiciones cromatográficas orientativas son : Gas portador nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno
85°C, temperatura del inyector y del detector 150°C.
5.4.2. Calibrado.
5.4.2.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l en Etanol de 40° de 4-Metil-2-Pentanol.
en alcohol de 40° en las proporciones que se indican en la tabla 1.
la solución patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1µl
en el cromatógrafo.
5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestra
llevada a 40° se le añade 1 ml de patrón interno
(5.4.2.1.) e inyectar un µl en las mismas condiciones
en que se hizo para el calibrado.
5.5. Cálculo.
fórmulas:
Ap
Factor de respuesta (Fr) = Ci x ––––
Ai
Aim
Concentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x f
Apm
Siendo:
Ci
= concentración del compuesto en la
solución patrón.
Ap = área del patrón interno en la solución
patrón.
Ai
= área del compuesto en la solución patrón.
TABLA 1
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
Compuesto
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
2-Butanol
10
1-Propanol
125
2-Metil-1-Propanol
175
1- Butanol
15
2-Metil-1-Butanol
100
3-Metil-1-Butanol
300
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
6. METANOL
(Alcohol Metílico)
6.1. Principio.
Separación, identificación y cuantificación del metanol por cromatografía gaseosa.
Como en 5.2.
6.3. Reactivos
6.3.1. Metanol pureza cromatográfica
6.3.2. 4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)
6.3.3. Etanol pureza cromatográfica
6.4. Procedimiento.
6.4.1. Condiciones cromatográficas. Como en
5.4.1.
6.4.2. Calibrado.
6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.
6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución
de Metanol pureza cromatográfica a 40°C, de concentración similar a la esperada en la muestra.
6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de la
la solución del patrón interno (6.4.2.1.) y se inyecta
1 µl en el cromatógrafo.
6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.
159
6.5. Cálculo.
Como en 5.5.
6.6. Referencia.
7. GRADO ALCOHOLICO
7.1. Principio.
7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.
7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1°C de
160
7.3 Procedimiento.
7.3.1. Obtención del destilado. Según método
oficial número 1.
7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar y
secar el alcohómetro antes de su empleo.
Echar el destilado en la probeta, inclinar a unos
45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar la
probeta con la palma de la mano, e invertirla tres o
cuatro veces para igualar las temperaturas de la
probeta y del líquido.
Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta y
destilado, alcance en el baño termostatizado la
temperatura de 20°C.
abajo cinco o seis veces, de manera que alcance la
misma temperatura y que se distribuya cualquier
cambio de temperaturas en todo el líquido. Mantener el bulbo del alcohómetro en el líquido, secar el
vástago, dejarlo en reposo de modo que sólo unas
pocas décimas de grados estén mojadas.
la probeta con la muestra varias veces (el termómetro queda en su sitio), para que se equilibre térmica-
mente todo el conjunto. Volver a atemperar el alcohómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturas
en el alcohómetro y en el termómetro. Los valores
calculados son válidos si tienen aproximación de
0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lecturas adicionales y calcular la media.
7.4. Cálculo.
según 7.3.1.
7.5. Referencia.
Edición 1980-9015-9
8. SACAROSA
8.1. Principio.
clorhídrica del líquido procedente de la defecación
de la ginebra.
8.2. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
8.2.2. Sodio Hidróxido 12N. Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en
Agua PA-ACS
8.3. Procedimiento.
Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml
cada uno, el mismo volumen del líquido defecado
según el método oficial número 10. Añadir a cada
matraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACSISO por cada 10 ml de líquido defecado.
En uno de los matraces, añadir inmediatamente
0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N, por cada 10 ml de
líquido defecado, procediendo a la valoración de los
azúcares reductores, según el método oficial número 10.
Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizar a baño de agua hirviendo durante tres minutos.
Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido 12N que al otro matraz y valorar como en el
caso anterior.
8.4. Cálculo.
reductores encontrada en los resultados de estas
dos valoraciones, multiplicadas por 0,95, da la
riqueza en sacarosa de la muestra de estudio.
M
Este resultado se expresa en g/l de ginebra,
teniendo presentes las diluciones efectuadas eventualmente en el curso de la defecación y del volumen de la muestra de ginebra que se sometió a la
defecación.
8.5. Referencia.
8.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analyses des Vins. OIV, A5, 4. 1968.
9. ACIDEZ TOTAL
9.1. Principio.
La acidez total de la ginebra se considera como
la suma de los ácidos titulables cuando se lleva la
ginebra a pH=7 por adición de un licor alcalino valorado. El ácido carbónico no se considera comprendido en la acidez total.
El gas carbónico se elimina previamente de la
ginebra por agitación en frío y con vacío parcial.
9.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.
9.2.2. Agitador magnético
9.2.3. Kitasato de un litro.
9.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N
recientemente preparada.
9.4. Procedimiento.
Poner 150 ml de ginebra en un Kitasato de 1 l de
capacidad, conectar al vacío agitando al mismo
tiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 se
aprecia a los pocos momentos. Observar atentamente el momento en que dejan de desprenderse
las burbujas, desconectar del vacío.
Tomar 100 ml de la ginebra sin CO2 y llevar a un
vaso de unos 250 ml de capacidad, introducir el
electrodo del vidrio en la ginebra.
Poner en marcha el agitador procurando que no
se formen burbujas y añadir desde bureta solución
de Sodio Hidróxido (9.3.1.) a la ginebra hasta que la
aguja del potenciómetro marque pH=7, manteniendo el agitador en marcha durante la operación, que
no debe durar más de cinco minutos.
9.5. Cálculo.
Calcular la acidez total expresada en meq/l con una
aproximación de 0,1 meq/l o en mg de ácido acético.
Acidez total = 6 v mg ácido acético /l
v = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.
9.6. Referencias.
9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’Analyses des Vins. OIV, A 10, 1 3, 1969.
9.6.2. Jaulmes, P.: “La mesure de l’acidité total
des Vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,
556, 1955.
10. MATERIAS REDUCTORAS
(Azúcares reductores)
10.1. Principio.
Eliminación previa de todas las materias reductoras distintas de los azúcares por defecación y
posterior valoración basada en la acción reductora de los azúcares sobre una solución cupro-alcalina.
10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de
reflujo.
10.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO
122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA
10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidrato
(aproximadamente saturada). Añadir a 250 g de
Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO Agua PAACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolución
completa.
10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.
10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver por
separado: 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PAACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Acido Cítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PAACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en
300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar la
solución de Cobre Sulfato y completar el volumen
con Agua PA-ACS hasta 1 l.
10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.
Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO en
Agua PA-ACS. Conservar el frasco en topacio.
10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico 25% en
96% PA-ISO en Agua PA-ACS.
161
valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.
Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los
25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PAACS y tratar como se ha indicado para la muestra.
10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l; contendrá
200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Esta solución debe ser mantenida diez minutos en ebullición en el momento de
su preparación.
10.5. Cálculo.
La cantidad de azúcar, expresada en azúcares
reductores contenida en la muestra analizada, se
obtiene en la tabla adjunta en función del número
n’-n de ml de tiosulfato utilizado.
10.4.1. Defecación plúmbica.
Llevar 100 ml de ginebra a un matraz aforado de
125 ml. Añadir agitando 5 ml de solución saturada
de Plomo II Acetato 3-anhidro PA-ACS-ISO y 1 g de
Calcio Carbonato precipitado PA, agitar varias
veces y dejar sedimentar, por lo menos quince
minutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 ml
más de agua y filtrar.
10.4.2. Valoración.
Poner en el Erlenmeyer de 300 ml 25 ml de la solución cupro-alcalina y 25 ml de ginebra previamente
defecado. Añadir unos gramos de Piedra Pómez
QP y llevar a ebullición, que debe ser alcanzada en
dos minutos, adaptando el Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantener exactamente durante diez
minutos la ebullición.
fría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro
al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al
25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación
162
Siendo:
n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados en la valoración de la muestra.
n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados para la prueba
en blanco.
Expresar el contenido en gramos de azúcares
reductores por litro, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas en el curso de la defecación del
10.6. Referencia.
d’Analyses des Vins. OIV, A4e, 106-107 (defecación) y 126-127 (valoración).
ml sodio
tiosulfato
0,1N
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
0,0
3,2
6,4
9,7
13,0
16,4
19,8
23,2
26,6
30,0
33,4
36,8
40,3
43,8
47,3
50,8
54,3
58,0
61,8
65,5
69,4
73,3
77,2
81,2
85,2
89,2
0,3
3,5
6,7
10,0
13,3
16,7
20,1
23 5
26,9
30,3
33,7
37,2
40,7
44,2
47,7
51,2
54,7
58,4
62,2
65,9
69,8
73,7
77,6
81,6
85,6
89,6
0,6
3,8
7,1
10,4
13,7
17,1
20,5
23,9
27,3
30,7
34,1
37,5
41,0
44,5
48,0
51,5
55,0
58,8
62,5
66,3
70,2
74,1
78,0
82,0
86,0
90,0
1,0
4,2
7,4
10,7
14,0
17,4
20,8
24,2
27,6
31,0
34,4
37,9
41,4
44,9
48,4
51,9
55,4
59,1
62,9
66,7
70,6
74,5
78,4
82,4
86,4
90,4
1,3
4,5
7,7
11,0
14,4
17,8
21,2
24,6
28,0
31,3
34,8
38,2
41,7
45,2
48,7
52,2
55,8
59,5
63,3
67,1
71,0
74,9
78,8
82,8
86,8
90,8
1,6
4,8
8,1
11,4
14,7
18,1
21,5
24,9
28,3
31,7
35,1
38,6
42,1
45,6
49,1
52,6
56,2
59,9
63,7
67,5
71,4
75,3
79,2
83,2
87,2
91,2
1,9
5,1
8,4
11,7
15,0
18,4
21,8
25,2
28,6
32,0
35,4
38,9
42,4
45,9
49,4
52,9
56,5
60,3
64,0
67,8
71,7
75,6
79,6
83,6
87,6
91,6
2,2
5,4
8,7
12,0
15,4
18,8
22,2
25,6
29,0
32,4
35,8
39,3
42,8
46,3
49,8
53,3
56,9
60,7
64,4
68,2
72,1
76,0
80,0
84,0
88,0
92,0
2,6
5,7
9,0
12,3
15,7
19,1
22,5
25,9
29,3
32,7
36,1
39,6
43,1
46,6
50,1
53,6
57,3
61,0
64,8
68,6
72,5
76,4
80,4
84,4
88,4
92,4
2,9
6,1
9,4
12,7
16,1
19,5
22,9
26,3
29,7
33,0
36,5
40,0
43,5
47,0
50,5
54,0
57,6
61,4
65,1
69,0
72,9
76,8
80,8
84,8
88,8
92,8
M
11. PLOMO
11.1. Principio
Determinación del plomo A.A., previa mineralización de la muestra.
capacidad.
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000
ml con Acido Nítrico al 1%.
11.4 Procedimiento.
de la muestra en la cápsula (11.2.3.) llevarla a evaporación hasta consistencia siruposa en baño de
Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el
baño de arena o placa. Seguidamente introducir la
cápsula en la mufla y mantenerla durante dos horas
a 450°C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla enfriar.
(posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiere
11.5. Cálculo.
curva patrón y teniendo en cuente el factor de concentración o dilución.
11.6. Referencia.
Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
12. ZINC
12.1. Principio.
Determinación del zinc por A.A. previa mineralización de la muestra.
(11.2.4.) (11.2.5.) y (11.2.6.)
12.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(11.3.2.) y (11.3.3.)
necesario de Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro con
Acido Nítrico del 1 % (v/v).
(11.4.1.).
1; 1,5 y 2 mg/l.
12.5 Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zn para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentración o
dilución.
163
12.6. Referencia.
12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newsletter (1963), 13.
13. COBRE
13.1. Principio.
por cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a la
13.2.3. Los utilizados para el plomo, en (11.2.3.),
(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).
13.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(11.3.2.) y (11.3.3.)
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de
HNO3 (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 %
(v/v).
(11.4.1.).
Acido Nítrico del 1% para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de Cobre/l.
Medir a 324,7 nm.
13.5 Cálculo.
164
13.6 Referencias.
13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newsletter (1963),13”
13.6.2 F. Rousselet: “Spectrophotometrie par
absorption atomique Boudin”. Ed Paris (1968), pág.
59-144
14. ARSENICO
14.1. Principio.
14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de
0,1 g.
capacidad.
14.2.4. Matraces Kjeldahl de 250 ml.
14.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver
32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con
14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver
15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con
Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml.
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO
y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de
100 ml.
Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo
hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.
14.3.8. Disolución al 1 % de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.
Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetra-acético PAACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PAACS.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-
M
ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
100 ml.
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico
al 20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico 1% (14.3.11.).
14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de
Arsénico (14.3.13.), en un matraz aforado de
100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.
Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.
Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5 ml.
trabajo. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml de la
solución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mismo tratamiento que la muestra.
Arsénico.
Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con las
14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de
al matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),
más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solución (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,
20 y 50 ng de Arsénico.
uso, con Acido Clorhídrico (14.3.3.).
165
Aguardientes
compuestos:
Anís
166
M
1.1. Principio.
1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.
capacidad.
1.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
1.3.1. Agua PA-ACS
1.4. Procedimiento.
1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.
matraz de destilación, lavando tres veces consecutivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de
Agua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas del
lavado al matraz de destilación. Cuando se trate de
bebidas siruposas, por su gran contenido en azúcar, el lavado debe efectuarse consecutivamente
con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS.
de forma que el destilado resbale sin salpicadura
por la pared del matraz, que debe estar dentro de
un baño de hielo o agua fría, a menos de 1°C.
El refrigerante debe ir dotado de una alargadera
que penetra por lo menos 4-5 cm en el cuello del
matraz.
20°C.
Cuando se alcance dicha temperatura, dentro
del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACS
mediante pipeta.
1.4.2. Muestras con más del 60% del Etanol.
El procedimiento anteriormente descrito difiere únicamente en que la muestra se mide en matraz aforado de 100 ml, que se lava varias veces con Agua
PA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximadamente 230 ml. El destilado se recoge en matraz
1.5. Observaciones.
1.5.1. El sistema de destilación debe comprobarse en ambos caso como sigue: Destilar 200 ml
de una mezcla hidroalcohólica al 10 por 100 en
volumen cinco veces sucesivas. Determinar en la
última destilación el título alcohométrico del destilado, que no debe ser menor del 9,9% en volumen de
etanol.
comprendido entre 45 y 90 minutos.
1.5.4. El destilado podrá tener aspecto lechoso
como consecuencia de la emulsión de los aceites
esenciales.
1.6. Referencias.
1. Métodos Oficiales de análisis del ron, ginebra y
whisky.
2. PESO ESPECIFICO DEL ACEITE
ESENCIAL NATURAL
(En materia prima)
2.1. Principio.
Se basa en la determinación de la densidad relativa del aceite esencial respecto al agua a la misma
temperatura.
Se determinará esta densidad relativa a 25°C
para evitar la posible solidificación de la muestra.
2.2.1. Baño de agua termostatizado a 25 ± 0,1°C.
2.2.2. Picnómetro de 50 ml, según figura adjunta
(fig. 2.1.).
2.2.3. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado en
décimas de grado.
2.2.4. Tubo capilar.
2.3. Procedimiento.
2.3.1. Llenar completamente el picnómetro con
agua recientemente destilada, tapar y colocar en
2.2.1., de forma que el nivel del agua del baño esté
ligeramente por encima del nivel de enrase del picnómetro.
167
2.3.2. Después de treinta minutos quitar el tapón
y con 2.2.4. ajustar el nivel del agua hasta que la
parte inferior del menisco sea tangente con la señal
de enrase del picnómetro.
2.3.3. Sacar el picnómetro del baño. Con un
pequeño rollo del papel de filtro secar el interior del
cuello del picnómetro y el tapón. Introducirlo en
baño a temperatura ambiente durante quince minutos para acelerar la atemperación del líquido. Pasado este tiempo sacar el picnómetro del baño,
secarlo cuidadosamente, dejarlo otros quince minutos a temperatura ambiente y pesar.
2.3.4. Vaciar el picnómetro, enjuagar con acetona y secar completamente con corriente de aire.
Dejar quince minutos a temperatura ambiente,
tapar y pesar.
Según lo descrito:
Pa = Peso aparente del agua = Peso del picnómetro lleno - Peso del picnómetro vacío.
2.3.5. Del mismo modo que con el agua, se procede con el líquido problema, siendo:
Pw = Peso del picnómetro lleno - Peso del picnómetro vacío.
2.4. Cálculos:
Pa
Peso específico : P 25/25 = –––––
Pw
2.5. Observaciones.
Para evitar la solidificación de la muestra, es
conveniente que la temperatura de la habitación
esté próxima a los 25° C.
2.6. Referencias.
1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 13ª
edición, 1984 : 9.020-9.022.
3. PUNTO DE FUSION DEL ACEITE
ESENCIAL NATURAL
(En materia prima)
3.1. Principio.
Observación, con un sistema adecuado, de la
temperatura a la que se produce la fusión del aceite
esencial, previamente congelado. Como el aceite
esencial no es un compuesto puro, no tendrá punto
de fusión fijo, sino que fundirá en un rango determinado desde que se observan los primeros síntomas
en los cristales hasta que la muestra se vuelve completamente líquida.
3.2.1. Agitador.
3.2.2. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado en
décimas de grado.
3.2.3. Tubos capilares de vidrio.
3.2.4. Lupa o lente de aumento.
3.2.5. Vaso de precipitado de 1.000 ml, forma baja.
168
Figura 2.l
3.3. Procedimiento.
Se dispone de un sencillo sistema de medida
consistente en un agitador magnético con placa de
calefacción variable, un vaso de precipitado de
600 ml, un termómetro y una lupa.
Preparar un tubo capilar cerrado en su extremo,
donde se hace llegar una gota del aceite esencial
con la ayuda de otro tubo capilar más fino.
Introducir la punta del tubo capilar en un baño de
hielo, durante dos horas, para que se congele.
Llevar el vaso aproximadamente a la mitad con
agua destilada e introducir la punta del capilar y el
termómetro de forma que queden al menos 30 milímetros por debajo de la superficie.
Empezando 8-10°C por debajo del punto de
fusión de la muestra, calentar suavemente para
incrementar la temperatura del baño 0,5°C/minuto,
aproximadamente, agitando simultáneamente el
agua del baño con ayuda del agitador.
Anotar la temperatura a la que se produce la
fusión completa de la muestra, que se observará
con la ayuda de una lupa o lente de aumento.
M
3.4. Resultado.
El punto de fusión del aceite esencial será la
media aritmética de tres determinaciones sucesivas
que deberán coincidir en un rango de 0,5°C.
En el caso de muestras de más de 60% de
alcohol, sólo se toman 100 ml que se diluyen a
200 ml por lo cual, hay que multiplicar la lectura por
dos.
3.5. Referencias.
edición, 1984: 28.014.
4.5. Referencias.
edición, 1984 : 9.023-9.024.
4. GRADO ALCOHOLICO
4.1. Principio.
Destilación del producto y posterior medida de la
densidad del destilado por areometría.
4.2.1. Aparato de destilación como en el Método
Oficial número 1.
4.2.2. Alcohómetro graduado en décimas de
grado de d 20/20, debidamente contrastado.
4.2.3. Termómetro graduado en décimas de grado centígrado.
4.3. Procedimiento.
4.3.1. Obtención del destilado: Según Método
Oficial número 1.
4.3.2. Determinación areométrica:
Limpiar y secar el alcohómetro antes de su
empleo.
Verter el destilado debidamente homogeneizado
en la probeta.
Introducir el alcohómetro y el termómetro en el
líquido.
Esperar veinte minutos para que el termómetro,
el alcohómetro y el destilado adquieran la temperatura del baño termostático.
Alcanzada esta temperatura, sacar el termómetro, secar el vástago del alcohómetro y dejarlo introducir en el destilado con un ligero movimiento de
rotación.
Anotar el grado alcohólico leído.
Repetir estas operaciones varias veces. Las lecturas obtenidas son válidas si tienen aproximación
de 0,1 grados alcohólicos. Si no fuera así, realizar
lecturas adicionales y calcular la media.
4.4. Cálculos.
El grado alcohólico es la lectura obtenida en
4.3.2., expresada en grados y décimas de grado de
alcohol.
Si en la obtención del destilado 100 ml de muestra se destilaron a 200 ml, la lectura hay que multiplicarla por dos.
Nota: No quedando claro el párrafo anterior,
interpretamos:
5. AZUCARES TOTALES
5.1. Principio.
Dilución previa de la muestra, inversión y posterior valoración basada en la acción reductora de los
azúcares sobre una solución cuproalcalina.
5.2.1. Erlenmeyer de 250 ml con boca esmerilada.
5.2.2. Refrigerante de reflujo de 30 cm de longitud útil.
5.2.4. Baño de agua con termostato.
5.3. Reactivos.
131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS
141270 Cobre II Sulfato 5-hidrato
(USP, BP) PRS-CODEX
121647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA
5.3.2. Solución de Sodio Hidróxido 12N, preparada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACSISO y Agua PA-ACS.
5.3.4. Solución cuproalcalina:
Disolver por separado 25 g de Cobre II Sulfato 5hidrato (USP,BP) PRS-CODEX (SO4Cu.5H2O) en
100 ml de Agua PA-ACS, 50 g de Acido Cítrico
1-hidrato PA-ACS-ISO en 300 ml de Agua PA-ACS
y 388 g de Sodio Carbonato 10-hidrato PA en
300-400 ml de agua caliente. Mezclar cuidadosamente las soluciones de Acido Cítrico y Sodio Carbonato. Añadir enseguida la solución de Cobre Sulfato y llevar a un litro.
5.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30% (p/v),
preparada a partir de Potasio Yoduro PA-ISO y
Agua PA-ACS.
169
Conservar en frasco topacio. Es aconsejable no
preparar más de lo que se vaya a consumir diariamente.
5.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25% en
volumen, preparada a partir de Acido Sulfúrico 96%
PA-ISO.
5.3.7. Engrudo de almidón de 5 g/l. Para preparar esta solución mantenerla en ebullición durante
diez minutos. Añadir 200 g de Sodio Cloruro PAACS-ISO por litro para asegurar su conservación.
5.3.8. Solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l
(0,1N) SV.
5.4. Procedimiento.
Pipetear 10 ml de anís ( o el volumen adecuado en
función del contenido en azúcares) en un matraz de
500 ml, enrasándose con Agua PA-ACS (solución
A).
En un matraz de 200 ml se pipetean 25 ml de la
solución A, enrasándose con Agua PA-ACS.
Se realiza la inversión de la forma siguiente:
En un matraz de 50 ml pipetear 20 ml de solución B.
Se añaden 3 ml de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO, llevándose durante cinco minutos a un
baño a 75°C.
Se saca y se deja enfriar.
Se añade Fenolftaleína solución 1% RE y se neutraliza con solución de Sodio Hidróxido 12N hasta
cerca del punto de viraje y posteriormente con solución de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV hasta
viraje. Se enrasa con Agua PA-ACS y se procede
al análisis de los azúcares reductores totales
(solución M).
En un Erlenmeyer se ponen 25 ml de la solución cuproalcalina y 25 ml de la solución M, se
somete a ebullición con refrigerante de reflujo
manteniendo la ebullición diez minutos; se enfría
rápidamente, se añaden 2 ml de almidón, 10 ml
de solución de Potasio Yoduro y 25 ml de Acido
Sulfúrico al 25%, valorándose inmediatamente
con solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N)
SV. Se repite la valoración con un blanco, sustituyendo los 25 ml de solución M por 25 ml de Agua
PA-ACS.
170
5.5. Cálculos.
Sea D la diferencia entre lo gastado por el
blanco y lo gastado por la muestra.
La concentración de azúcares totales en la
muestra se obtiene a partir del valor D en la tabla,
interpolando en cada caso necesario y multiplicando el valor obtenido por 40 (factor de dilución).
Concentración azúcares totales
gramos/litros = Valor obtenido en tabla x 40.
5.6. Observaciones.
5.6.1. En el caso de haber tomado un volumen
distinto de anís, tener en cuenta para los cálculos
el factor de dilución.
5.7. Referencias
1. Recueil des méthodes internationales d'analyse des vins OIV A4-126-127.
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
D = ml
Mg
Diferencia
de tiosulfato
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
1
2,4
2,4
2
4,8
2,4
3
7,2
2,5
4
9,7
2,5
5
12,2
2,5
6
14,7
2,6
7
17,2
2,6
8
19,8
2,6
9
22,4
2,6
10
25,0
2,6
11
27,6
2,7
12
30,3
2,7
13
33,0
2,7
14
35,7
2,7
15
38,5
2,8
16
41,3
2,9
17
44,2
2,9
18
47,1
2,9
19
50,0
3,0
20
53,0
3,0
21
56,0
3,0
22
59,1
3,1
23
62,2
––
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
6. ANETOL
6.1. Principio.
anetol por cromatografía de gases.
6.2 Material y aparatos.
6.2.2. Columna de acero inoxidable de 3 m de
longitud de 1/8 pulgadas de diámetro interno,
rellena de SE 52 al 4% sobre Chromosob. AW.
DMCS, de 100-120 mallas.
6.2.3. Microjeringa de 1 µl.
6.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
142961 L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX
Trans-anetol
M
6.3.1. Trans-anetol patrón con un contenido en
cis-anetol menor de 0,5%.
6.3.2. L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
6.4. Procedimiento.
6.4.1. Curva de calibrado.
6.4.1.1. Patrón interno.
Pesar 0,25 g de L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)
PRS-CODEX y llevar a un matraz aforado de
100 ml, disolver en 40 ml de Etanol absoluto PA y
enrasar con Agua PA-ACS.
6.4.1.2. Solución patrón.
Pesar 1 g de anetol y disolver en 400 ml de Etanol absoluto PA, enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS.
Ese patrón debe estar en el momento de su utilización recientemente preparado.
6.4.1.3. Solución de calibrado. A partir de la solución 6.4.1.2. preparar soluciones que contengan
0,1; 0,25; 0,50; 0,75 y 1 g/l en alcohol de 40°C.
A 100 ml de estas soluciones se le añade 5 ml
de la solución 6.4.1.1.
Estas soluciones se inyectan en el cromatógrafo
obteniendo la curva de calibrado, representándose:
Area del Patrón
––––––––––––––––––––– frente a concentraciones.
Area del patrón interno
6.4.2. Condiciones cromatográficas aproximadas.
Temperatura del horno: 130°C.
Temperatura del inyector: 220°C.
Temperatura del detector: 220°C.
6.4.3. Preparación de la muestra:
Tomar 100 ml del destilado, según método 1.
Añadir 5 ml de patrón interno e inyectar en el cromatógrafo.
6.5. Cálculos.
Aim
6.5.1. Calcular la relación –––– y llevar a la curva
Apm
de calibrado, obteniéndose el valor de la concentración de anetol en la muestra problema.
6.5.2. También se puede emplear un patrón de
concentración fija de anetol, calculándose el factor
de respuesta y la concentración de la muestra aplicando las fórmulas siguientes:
Ap
Fr = Ci ––––
Ai
Aim
Concentración de la muestra g/l = Fr x –––– x f
Apm
Siendo :
Ci = Concentración del anetol en la solución
patrón, que será similar a la esperada en
la muestra problema.
patrón.
Ai = Area del anetol en la solución patrón.
Aim = Area del anetol en la muestra problema.
problema.
F
Se debe realizar el cálculo de la concentración
en anetol de la muestra con un patrón de riqueza
aproximada a la esperada. En caso de no conocerse ésta, se debe efectuar una inyección previa para
fijar el nivel de anetol refiriéndola al patrón de 1g/l y
una vez evaluado se inyectará un patrón, si fuese
necesario, de concentración próxima a la de la
muestra, obteniendo el resultado final por referencia
a este segundo patrón.
6.6. Referencias.
1. José Ramón García Hierro y Gertrudis Marín
Esteban. Informe del Laboratorio Arbitral de la Subdirección General de Laboratorios Agrarios.
7. METANOL
7.1. Principio.
metanol por cromatografía gaseosa.
7.2.2. Columna cromatográfica.
Columna de 4 m de longitud, de 1/8 pulgadas
de diámetro interno, rellena de Carbowax 1500, al
15% sobre Chromosorb W, 80-100 mallas, lavada a
los ácidos.
7.3. Reactivos.
7.3.1. Metanol pureza cromatográfica
7.3.2. 352516 4-Metil-2-Pentanol CG
7.3.3. Etanol pureza cromatográfica
7.4. Procedimiento.
7.4.1. Obtención del destilado como en el método oficial número 1.
7.4.2. Condiciones cromatográficas:
Las condiciones cromatográficas orientativas
son: Gas portador; nitrógeno, 20 ml/min, temperatura del horno, 85°C; temperatura del inyector y del
detector, 150°C.
171
7.4.3. Calibrado:
7.4.3.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l de
4-Metil-2-Pentanol CG en etanol de 40°C.
7.4.3.2. Solución Patrón: preparar una solución
de metanol en etanol de 40°, de concentración
similar a la esperada en la muestra. A 10 ml de esta
solución añadir 1 ml de la solución de patrón interno
7.4.3.1. e inyectar 1 µl en el cromatógrafo.
7.4.4. Muestra problema: A 10 ml del destilado
de anís llevado a 40°, se le añade 1 ml de patrón
interno 7.4.4.1. e inyectar 1 µl en las mismas condiciones en que se hizo para el calibrado.
7.5. Cálculos.
Calcular el factor de respuesta y la concentración de metanol aplicando las siguientes fórmulas:
Ap
Factor de respuesta (Fr) = Ci ––––
Ai
Aim
Concentración de la muestra (mg/l) = Fr ––––– f ,
Apm
siendo:
Ci = Concentración del metanol en la solución
patrón.
patrón.
Ai
= Area del metanol en la solución patrón.
Aim = Area del metanol en la muestra problema.
problema.
f
7.6. Referencias.
1. "Official Methods of Analysis of the A.O.A.C"
14ª edición, 1984 : 5.008-5.011.
8. BASES NITROGENADAS
8.1. Principio.
Fijación de las bases nitrogenadas y del amoníaco mediante el ácido fosfórico en el destilado de la
muestra.
Liberación de éstos mediante solución de sodio
hidróxido y valoración con ácido clorhídrico.
El límite de detección de este método es de
1 mg/l.
8.2.1. Destilador simple con dispositivos para
adición (figura 8.1.).
8.2.2. Probeta de 100 ml de capacidad.
8.2.3. Tubos de ensayo de boca esmerilada de
30 ml de capacidad.
8.2.4. Bureta de 25 ml de capacidad.
8.2.5. Pipetas de 50 ml de capacidad.
8.2.6. Matraz de 50 ml.
8.3. Reactivos.
121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA
131074 Agua PA-ACS
172
Figura 8.l
Destilador simple con dispositivo para adición
M
8.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA (d= 1,34
g/ml).
8.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%, preparada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PAACS-ISO y Agua PA-ACS.
8.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 0,01N,
preparada a partir de Acido Clorhídrico 0,05 mol/l
(0,05N) SV y Agua PA-ACS.
8.3.4. Disolución de Rojo de Metilo: Pesar 0,1 g de
Rojo de Metilo RE-ACS y disolver en 50 ml de Etanol 90% v/v, preparado por dilución previa de Etanol 96% v/v PA.
8.3.5. Agua Destilada PA (pH 6,5-7,5).
8.4. Procedimiento.
Obtener el destilado de 100 ml de muestra, operando según método de análisis número 1.
En un matraz de fondo redondo de 250 ml introducir 60 ml del destilado, 40 ml de Agua PA-ACS y
2 gotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar,
recogiendo los primeros 80 ml del destilado en
8.2.2. y desecharlos.
Enfriar el matraz y al residuo frío añadir 20 ml de
disolución de Sodio Hidróxido al 1%. Destilar de
nuevo, recogiendo alrededor de 10 ml de destilado
en un tubo de ensayo, en el que previamente se
han introducido 2 ml de Agua PA-ACS y una gota
de disolución de Rojo de Metilo, procurándose que
el destilado caiga en el fondo del tubo con la ayuda
de una alargadera.
Valorar a continuación con disolución de Acido
Clorhídrico 0,01N hasta viraje del indicador.
Efectuar el mismo procedimiento sobre un blanco de etanol al 40%.
8.5. Cálculos.
Concentración de bases nitrogenadas expresadas como hidróxido de amonio (mg/l) = 2,8 (v - v').
Siendo:
v = Volumen, en mililitros, de disolución de Acido Clorhídrico 0,01N gastados en la valoración.
v' = Volumen, en mililitros, de disolución de Acido Clorhídrico 0,01 N gastados en el blanco.
8.6. Referencias.
1. "Codex Oenologique International, O.I.V.",
1978, página 17
9. ACEITES ESENCIALES
9.1. Principio.
Extracción de los aceites esenciales y cuantificación.
9.2.1. Embudos de decantación de 500 ml.
9.2.2. Desecador con dispositivos para hacer
vacío o rotavapor.
9.2.3. Matraces de 100 ml de forma corazón
con boca adecuada para adaptar al rotavapor.
9.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
Anetol Patrón
132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm
de BHT PA-ACS-ISO
122006 n-Pentano PA
121716 Sodio Sulfato anhidro PA
9.3.1. n-Pentano PA.
9.3.2. Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.
9.3.3. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de
BHT PA-ACS-ISO.
9.3.4. Anetol Patrón.
9.4. Procedimiento.
Tomar 40 ml de anís e introducir en un embudo
de decantación añadiendo 160 ml de Agua PAACS, 40 g de ClNa y 60 ml de n-Pentano PA. Agitar
y dejar decantar durante unos diez minutos.
Una vez separadas las fases, tomar la correspondiente al Pentano. Añadir Sodio Sulfato anhidro
PA. Filtrar. Llevar al rotavapor para evaporar el Pentano, sin que la temperatura del baño alcance los
30° C.
Disolver el residuo obtenido en 5 ml de Eter
Dietílico estabilizado con ~6 ppm de BHT PAACS-ISO e inyectar en el cromatógrafo en las mismas condiciones del método número 6. Normalizar esta inyección obteniendo el porcentaje de
Anetol.
9.5 Cálculos.
El contenido en aceites esenciales totales expresado en gramos por litro vendrá dado por la
siguiente fórmula:
100
Aceites esenciales (g/l) = A –––––
B
Siendo :
A = Contenido de anetol, expresado en g/l,
obtenido en el método 6.
B = Contenido en porcentaje de anetol obtenido
en la normalización.
9.6. Referencias.
1. "Dosaje des huilles essentielles totales dans
les liqueurs anissés". A. Maurel. Annales des Falsifications et L'Expertise Chimique et Toxicologuique,
1941
2. Informe interno del Grupo de Trabajo de
Métodos Oficiales de análisis del Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación.
173
10. HIDROXIMETILFURFURAL Y
FURFURAL
10.1. Principio.
Separación y cuantificación por cromatografía
líquido-líquido de hidroximetilfurfural y furfural.
10.2.1. Cromatógrafo líquido-líquido con detector U.V.
10.2.2. Columna Sherisorb ODS 5 µ de 20 x
0,46 cm o columna similar de fase reserva.
10.2.3. Microjeringa de 25 o 50 µl o cualquier
sistema de inyección adecuado según loop e inyector.
10.2.4. Equipo de filtración de disolventes para
cromatografía líquido-líquido con filtro de 0,45 µm o
similar.
10.2.5. Equipo de filtración de muestras con filtros de 0,5 µm o similar.
10.3. Reactivos.
261091 Metanol HPLC
Hidroximetilfurfural
PA-ACS-ISO
PA
10.3.1. Metanol HPLC.
10.3.2. Solución tampón de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y di-Potasio Hidrógeno
Fosfato 3-hidrato PA. Disolver 1,25 g de KH2PO4 y
1,25 g de K2HPO4 en agua hasta un litro.
10.3.3. Hidroximetilfurfural patrón y Furfuraldehido recientemente destilado.
174
10.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:
Fase móvil. Solución de metanol al 10% (v/v) en
disolución tampón (10.3.2.).
Flujo: 0,8 ml/mn.
Longitud de onda. 285 nm.
Tiempo de retención aproximado: Siete minutos
para Hidroximetilfurfural y diez minutos para el Furfural.
10.4.2. Soluciones patrón:
Prepara soluciones de Hidroximetilfurfural y Furfural en Metanol de concentraciones aproximadas a
5 mg/l.
10.4.3. Diluir 5 ml de la muestra en Metanol a
25 ml.
Filtrar e inyectar directamente.
10.5. Cálculos.
Calcular la concentración de Hidroximetilfurfural
y Furfural expresada en mg/l, mediante las siguientes fórmulas.
Am
Hidroximetilfurfural o Furfural (mg/l) = ––––– x C
Ap
Siendo:
Am = Area de la muestra.
Ap = Area del patrón externo.
C = Concentración en mg/l del patrón.
10.6.1. Observación. - La preparación del patrón
de Hidroximetilfurfural debe efectuarse cada día.
Para evitar esta preparación se puede utilizar el mismo patrón, pero controlando su riqueza actual,
midiendo la absorbancia en U.V. a 284 nm, empleando la siguiente fórmula:
A
c = –––– x 100
Exl
Siendo:
c = Concentración en moles/l de Hidroximetilfurfural.
E = Coeficiente de absorción Molar, 1,82 x 104.
l = Longitud de paso de la cubeta en cm.
A = Absorbancia del patrón a 284 nm.
11. ARSENICO
11.1. Principio.
11.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de
0,1 g
capacidad.
11.2.4. Matraces "Kjeldahl" de 250 ml.
11.2.7. Fuente de descarga sin electrodos.
11.3. Reactivos.
Se utilizan solamente reactivos de grado de
pureza para análisis y Agua Destilada.
M
131036
131058
131074
313171
Acido Nítrico 60% PA-ISO
Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
Agua PA-ACS
Arsénico solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(d=1,19 g/ml).
11.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico.
Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hasta
un volumen de 1.000 ml.
11.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico.
Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PAACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hasta
un volumen de 1.000 ml.
11.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO (d=1,40 g/ml).
11.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84
g/ml).
Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACSISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.
Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%, preparada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PAACS-ISO y Agua PA-ACS.
11.3.8. Disolución al 1 % de Acido Etilendiamino-tetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO
(EDTANa2). Pesar 1 g de EDTANa2 y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.
Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas
PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un
volumen de 100 ml.
(v/v).
Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
100 ml.
11.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).
Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
100 ml.
0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsénico Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido
al 20% (11.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al
11.3.13. Solución patrón de Arsénico de concentración 10 mg/l.
Pipetear 1 ml de la solución patrón de Arsénico
(11.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
11.3.14. Solución patrón de Arsénico de concentración 0,1 mg/l.
Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico
(11.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir
En un matraz "Kjeldahl", de 250 ml introducir 4 g
de muestra con 20 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO
(11.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO
(11.3.5.).
Llevar la ebullición hasta reducir el volumen a
5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en
un matraz de 50 ml la solución resultante.
trabajo. En un matraz "Kjeldahl", introducir 5 ml de
la solución de Arsénico (11.3.14.) y someterlo al
mismo tratamiento que la muestra.
arsénico.
Encender la fuente de alimentación de las lámparas de descarga sin electrodos con el tiempo
suficiente para que se estabilice la energía de la
lámpara.
Ajustar el flujo de argón de acuerdo con las
Las determinaciones de la concentración de
Arsénico se realizan por el método de adición de
patrones, por medio de medidas duplicadas en el
espectrofotómetro en las condiciones especificadas
en (11.4.3.), añadiendo al matraz de reacción 3 ml
de la solución (11.4.1.), más 3 ml de la solución
(11.3.2.), y 10 ml de la solución (11.3.8.). Como
patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.
uso, con Acido Clorhídrico (11.3.3.).
175
12. PLOMO
12.1. Principio
Determinación del plomo por absorción atómica.
12.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar (de
150 ml de capacidad, aproximadamente)
capacidad.
12.3. Reactivos.
Acido Nítrico al 1%
131074 Agua PA-ACS
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA
12.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d= 1,835
g/ml).
12.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (d=
1,413 g/ml).
176
12.4.1. Preparación de la muestra.- Pesar 20 g
de la muestra en la cápsula (12.2.3.); llevarla a evaporación hasta consistencia siruposa en baño de
Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar lentamente el
residuo en el baño de arena o placa. Seguidamente
introducir la cápsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450°C; transcurrido dicho tiempo,
sacarla y dejarla enfriar.
(posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiere
12.5. Cálculos.
curva patrón y teniendo en cuenta el factor de concentración o dilución.
12.6. Referencia.
1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos. Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.
13. ZINC
13.1. Principio.
Determinación del zinc por absorción atómica
(12.2.4.) (12.2.5.) y (12.2.6.)
13.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(12.3.2.) y (12.3.3.)
necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y
diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 % (v/v).
(12.4.1.).
1; 1,5 y 2 mg/l.
M
13.5. Cálculo.
Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zinc para la
muestra, teniendo en cuenta el factor concentración o dilución.
13.6. Referencia.
1. H.E. Parker. “Atomic Absorption Newsletter”
(1963), 13.
14. COBRE
14.1 Principio
Determinación del cobre por absorción atómica
14.2.2. Lámpara de Cobre.
14.2.3. Los utilizados para el plomo, en (12.2.3.),
(12.2.4.), (12.2.5.) y (12.2.6.).
14.3. Reactivos
131074 Agua PA-ACS
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA
(12.3.2.) y (12.3.3.)
Cobre puro en el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro
con Acido Nítrico del 1 % (v/v).
(12.4.1.).
Acido Nítrico al 1% para obtener soluciones que
contengan de 1 a 5 mg de Cobre/litro.
14.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.
Medir a 324,7 nm.
14.5. Cálculo.
las concentraciones de Cobre de la muestra.
14.6 Referencias.
1. H.E. Parker: "Atomic Absorption Newsletter"
(1963).13.
2 F. Rousselet: "Spectrophotometrie par absorption atomique Boudin". Ed Paris (1968), pág. 59-144.
177
Sidras:
Sidras y otras bebidas
derivadas de la
Manzana
178
M
METODOS DE ANALISIS
1. ELIMINACION DEL ANHIDRIDO
CARBONICO
1.1. Principio.
Desgasificación de la sidra mediante agitación y
filtración.
1.2.1. Matraz Erlenmeyer.
1.2.2. Papel de filtro.
1.2.3. Embudo.
1.3. Procedimiento.
El volumen de sidra que vaya a utilizar, previamente llevada a 17-20°C, verterlo en un matraz
Erlenmeyer de capacidad doble del volumen utilizado. Agitar durante diez minutos y filtrar a continuación a través de un embudo cubierto de papel de filtro seco.
2. GRADO ALCOHOLICO ADQUIRIDO
Eliminar el anhídrido carbónico como se indica
en el método 1 y proceder como se indica en los
métodos oficiales de vinos número 5(a) ("Boletín Oficial del Estado" de 22 de julio de 1977) y 5(b)
("Boletín Oficial del Estado" del 23 de julio de 1977).
6. ACIDEZ VOLATIL
Proceder como se indica en el método oficial de
vinos número 21 ("Boletín Oficial del Estado" de 23
de julio de 1977).
7. EXTRACTO SECO TOTAL
en el método número 1 y proceder como se indica
en el método oficial de vinos número 6 ("Boletín Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977).
8. CENIZAS
en el método oficial de vinos número 11 ("Boletín
Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977).
9. HIERRO
10. ETANAL
3. AZUCARES REDUCTORES
en los métodos oficiales de vinos números 7(a) y
7(b) ("Boletín Oficial del Estado" de 23 de julio de
1977) y 7(c) ("Boletín Oficial del Estado" de 30 de
agosto de 1979).
4. ANHIDRIDO SULFUROSO
Proceder como se indica en el método oficial de
vinos números 28(a) y 28(b) ("Boletín Oficial del
Estado" de 26 de julio de 1977).
5. METANOL
(Alcohol Metílico)
10.1. Principio.
El etanal se determina en la sidra, previamente
decolorada con carbón, midiendo a 570 nm, la
coloración verde o violeta que da con el sodio nitroprusiato y la piperidina.
10.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuar
lecturas a 570 nm.
10.3. Reactivos.
121064 Acido Sulfuroso solución 6% PA
131074 Agua PA-ACS
121237 Carbón Activo polvo PA
Etanal
182415 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV
121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA
181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV
10.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).
Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml
de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.
179
10.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%
(p/v).
En un matraz aforado de 250 ml, disolver 1 g de
Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.
Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.
10.3.3. Carbón activo polvo PA.
10.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)
(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PAACS.
10.3.5. Solución alcalina.
Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en
400 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV con Agua
PA-ACS.
180
10.4.1. Determinación de etanal.
Colocar 25 ml de líquido a analizar en un erlenmeyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de Carbón
Activo polvo PA. Agitar enérgicamente durante
algunos segundos, dejar reposar durante 2 minutos
y filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino para
obtener un filtrado claro.
Dos ml de filtrado incoloro se colocan en un
Erlenmeyer de 100 ml y se adiciona, agitando, 5 ml
de solución de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solución de Piperidina; mezclar y colocar inmediatamente la mezcla en la cubeta de lectura de 10 mm
de espesor. La coloración obtenida que varía del
verde al violeta, se mide a 570 nm con relación al
aire. Esta coloración aumenta para disminuir seguidamente con rapidez. Elegir como valor definitivo la
máxima absorbancia que se obtiene al cabo de
unos 50 segundos.
La cantidad de etanal contenido en el líquido
analizado se deduce de una curva patrón.
Solución patrón de Etanal combinado con el Anhídrido Sulfuroso.
Tomar Acido Sulfuroso 6% PA, valorar en SO2 y
determinar su cantidad exacta midiéndola con Yodo
0,05 mol/l (0,1N) SV.
En un matraz aforado de 1 litro colocar el volumen de esta solución que corresponda a 1.500 mg
de SO2. Introducir en el matraz, ayudados con un
embudo, alrededor de 1 ml de Etanal destilado
recientemente y recogido sobre una mezcla refrigerante. Enrasar a un litro con Agua PA-ACS, mezclar
y dejar durante la noche.
La cantidad exacta de esta solución patrón de
Etanal combinada con el SO2 debe determinarse
como sigue:
En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml de
solución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del Acido
Clorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxidar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV en
presencia de Almidón soluble RE hasta coloración
azul débil.
Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%
RE y la suficiente solución alcalina hasta la desaparición de la coloración azul y aparición de color rosa.
Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo
0,05 mol/l (0,1N) SV hasta coloración azul débil.
Siendo n el volumen gastado, la solución patrón de
Etanal combinado con el SO2 contiene : 44,05 n mg
de Etanal por litro.
Preparación de la curva patrón:
En matraces aforados de 100 ml colocar sucesivamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.
Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corresponden a cantidades de Etanal próximas a 40-80120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las diluciones debe calcularse a partir del contenido en
Etanal de la solución patrón determinada anteriormente.
Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml de
cada una de estas soluciones como se indica anteriormente. La representación gráfica de las absorbancias de estas soluciones en función de la cantidad de Etanal es una recta que no pasa por el
origen.
10.5. Cálculo.
Calcular el contenido en etanal mediante comparación con la correspondiente curva patrón.
Si, de forma excepcional, el líquido a analizar
contiene etanal libre, no combinado con el SO2 será
necesario, antes de empezar a determinar el etanal
total, pasarlo previamente al estado de combinación con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a una
parte del líquido a analizar un pequeño exceso de
SO2 libre y esperar algunas horas antes de proceder a la determinación.
10.7. Referencias.
10.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.
Rdsch 1970. 66, 5-6.
d'Analyses des Vins. O. I. V. A-37, 1978.
11. ANHIDRIDO CARBONICO
11.1. Principio.
Después de la oxidación en frío del anhídrido
sulfuroso por el hidrógeno peróxido en presencia
del ion de cobre II, el anhídrido carbónico desplazado de la sidra por una solución tampón de fosfato y ácido fosfórico es arrastrado en frío en circuito cerrado por una corriente de aire mediante
una pequeña bomba de circulación hacia una
solución valorada de bario hidróxido. El exceso de
esta base se determina inmediatamente con una
solución valorada de ácido clorhídrico en presencia de un indicador mixto de timolftaleína-fenolftaleína.
Aplicables a contenidos inferiores a 6 g/l.
M
11.2.1. Aparato de vidrio para extracción del
CO2 en circuito cerrado (fig. 1) compuesto de:
- un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola
antiespuma sobre la que va adaptada una bureta (5);
- dos barboteadores (2) y (3);
- una bomba (4) que garantice la circulación del
aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).
11.3. Reactivos.
131074 Agua PA-ACS
PRS
121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato
PA
131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO
171739 Timolftaleína RE
11.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N : En
un matraz aforado diluir exactamente a 1:1 Sodio
Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.
11.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g de
BaCl2.2H2O por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.
11.3.3. Solución de Bario Hidróxido.
Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario Cloruro de 90 g/l con 1 volumen de solución de Sodio
Hidróxido 0,2N. Conservar en recipiente que evite la
carbonatación.
11.3.4. Solución tampón:
Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida
400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA y
50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20° C = 1,63) :
Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con
Agua PA-ACS hasta la densidad indicada que
corresponde a, aproximadamente, 79,4% y completar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientemente
hervida.
11.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).
Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g de
Sodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO en 100 g de
solución.
Utilizarla 15 días después de su preparación
para lograr la decantación del eventual CO3Na2.
Esta solución debe ser transparente.
11.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10
volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H2O2
por litro y libera 10 veces su volumen de oxígeno
por descomposición catalítica con MnO2 en medio
alcalino.
11.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,
pulverizado.
11.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y
0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PA
neutro, y completar hasta 100 ml.
11.3.9. Acido Clorhídrico 0,2 N. En un matraz
aforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1mol/l (1N) SV
con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solución 0,2N obtenida.
11.4.1. Sidras que contienen menos de 4 g de
CO2, por litro.
La botella de sidra se debe mantener en posición horizontal durante una noche a 0°C.
Colocar en el barboteador (2) 150 ml exactamente medidos de solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) algunos cristales de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, con
cuidado, en un matraz previamente enjuagado y
enfriado a 0°C, 50 ml de sidra. Colocar el matraz (1)
en el circuito y esperar 10 minutos.
Conectar la bomba, e introducir mediante la
bureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en funcionamiento 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2),
50 ml de la solución de Bario Hidróxido; valorarla
con Acido Clorhídrico 0,2N con indicador mixto.
Sea V2 el número de ml gastados.
Es indispensable valorar diariamente el Bario
Hidróxido utilizando 150 ml. Sea V1 el número de ml
de Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.
11.4.2. Sidras que contienen más de 4 g de CO2
por litro.
La botella debe mantenerse en posición horizontal a 0°C durante una noche. Abrir la botella con
precaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 ml
de sidra por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%
haciendo resbalar suavemente la solución por el
cuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente y
homogeneizar su contenido agitándola; colocarla
seguidamente en un baño de agua a 20° C.
Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos de
solución de Bario Hidróxido.
Introducir en el matraz (1) unos cristales de
Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.
Introducir lentamente la pipeta en la botella para
evitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml de la
sidra y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato y
dejarlo reposar 10 minutos.
El volumen de la sidra tomado se deberá reducir
a 25 ml, si ésta contiene más de 8 g/l de anhídrido
carbónico.
Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)
con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.
Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.
Parar la bomba y tomar del barboteador (2)
50 ml de la solución de Bario Hidróxido. Valorarla
con Acido Clorhídrico 0,2N en presencia de indica-
181
dor mixto. Sea V2 el número de ml utilizados. Sea V1
el número de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consumidos para valorar 150 ml de solución de Bario
Hidróxido.
11.5. Cálculo.
11.5.1. Para sidras que contienen menos de 4 g
de CO2 por litro.
Cantidades de CO2 en gramos por l en la sidra.
CO2 (g/l) = 0,088 (V1 - 3V2).
11.5.2. Para sidras que contienen más de 4 g de
CO2 por litro.
Medir el volumen de líquido que queda en la
botella y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomada
para la determinación. Sea V el volumen total así
determinado. Calcular seguidamente el factor de
corrección f, necesario para tener en cuenta los
50 ml de Sodio Hidróxido al 50% introducidos en la
botella:
V
f = ––––––
V - 50
Si la muestra para la determinación es de 50 ml,
la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es
(2V1 - 6V2) x 0,088 x f.
Este resultado debe multiplicarse por 2 si la
toma de muestra es de 25 ml.
11.6. Referencias.
11.6.1. Jaulmes (P.), Metch. An. 1972, n° 422;
Ann. Fals. Exp. Chim. 1973, n°708, 96-109.
d'Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.
182
Figura l
M
183
Relación de reactivos
y productos auxiliares
que se utilizan en los
métodos analíticos.
Productos derivados de
la Uva, Aguardientes
y Sidras.
184
NOTA: Algunos de los reactivos recomendados en
los métodos analíticos previamente descritos han
modificado su código y mejorado su calidad.
Además se han producido nuevas incorporaciones.
Por favor, consulte este anexo antes de efectuar
su pedido. Es la versión actualizada de la oferta de
productos suministrables en Mayo de 1999.
M
REACTIVOS Y PRODUCTOS AUXILIARES QUE HAN CAMBIADO DE CÓDIGO O DE CALIDAD
ANTERIOR
263093 Acetonitrilo gradiente HPLC
171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato RE
124559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal Disódica
Cálcica PA
171096
121118
171432
171168
351082
354330
353851
351086
351085
141897
171321
171327
141334
Almidón soluble RE
Amonio Bromuro PA
Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE
Azul de Bromotimol solución 0,04% RE
1-Butanol CG
iso-Butanol CG
2-Butanol CG
Etanol absoluto CG
Etanol 96% CG
Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS
1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS
Fenolftaleína solución 1% RE
Furfuraldehído PRS
261091
351091
351079
352516
164542
171439
251450
121884
171495
351885
354457
171615
171617
171634
171730
171739
171748
171759
121787
Metanol HPLC
Metanol CG
3-Metil-1-Butanol CG
4-Metil-2-Pentanol CG
4-Nitroanilina PS
Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS
Parafina P.F. 55-60°C en pastilla DC
1-Pentanol PA
Potasio Cloruro solución saturada RE
1-Propanol CG
2-Propanol CG
Rojo de Fenol RE-ACS
Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS
Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE
Tampón solución pH 10 RE
Timolftaleína RE
Tornasol tintura RE
Verde de Bromocresol RE-ACS
Zinc Sulfato 7-hidrato PA
ACTUAL
221881 Acetonitrilo (HLPC-gradiente) PAI
121024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato PA
144559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal Cálcica
Disódica
(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX
121096 Almidón de Patata soluble PA
131118 Amonio Bromuro PA-ACS
281432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RV
281168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RV
361082 1-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI
361089 iso-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI
123851 2-Butanol PA
361086 Etanol absoluto (UV-IR-HPLC) PAI
361085 Etanol 96% (UV-IR-HPLC) PAI
131897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PA-ACS
131321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato PA-ACS
281327 Fenolftaleína solución 1% RV
131334 Furfural estabilizado con ~0,1% de BHT
PA-ACS
361091 Metanol (UV-IR-HPLC prep.) PAI
321091 Metanol (PAR) PAI
131079 3-Metil-1-Butanol PA-ACS
162516 4-Metil-2-Pentanol PS
A10369 4-Nitroanilina, 98%
131439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) PA-ACS
253211 Parafina P.F. 56-58°C en lentejas DC
131884 1-Pentanol PA-ACS
281495 Potasio Cloruro solución saturada RV
361885 1-Propanol (UV-IR-HPLC) PAI
321090 2-Propanol (PAR) PAI
131615 Rojo de Fenol PA-ACS
131617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) PA-ACS
281634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RV
281730 Solución Tampón pH 10 RV
121739 Timolftaleína PA
281748 Tornasol tintura RV
131759 Verde de Bromocresol PA-ACS
131787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA-ACS
185
186
ACETALDEHIDO
A13752 3-HIDROXI-2-BUTANONA dímero,98%
(ACETOINA dímero)
131007 ACETONA
PA-ACS-ISO
221881 ACETONITRILO (HPLC-gradiente)
PAI
131008 ACIDO ACETICO glacial
PA-ACS-ISO
ACIDO ACETICO 2 mol/l (2N)
131013 ACIDO L(+)- ASCORBICO PA-ACS-ISO
A10934 ACIDO BARBITURICO, 98+%
121014 ACIDO BENZOICO
PA
131015 ACIDO BORICO
PA-ACS-ISO
131808 ACIDO CITRICO anhidro
PA-ACS
131018 ACIDO CITRICO 1-hidrato PA-ACS-ISO
131020 ACIDO CLORHIDRICO 37% PA-ACS-ISO
131019 ACIDO CLORHIDRICO 35%
PA-ISO
182107 ACIDO CLORHIDRICO 0,05 mol/l
(0,05N)
SV
(0,25N)
SV
(0,5N)
SV
181021 ACIDO CLORHIDRICO 1 mol/l (1N)
SV
182108 ACIDO CLORHIDRICO 2 mol/l (2N)
SV
A15135 ACIDO 4-CLOROBENZOICO, 98+%
121024 ACIDO CROMOTROPICO SAL
DISODICA 2-hidrato
PA
144559 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO
SAL CALCICA DISODICA
(RFE, USP, BP, Ph. Eur.)
PRS-CODEX
SAL DISODICA 2-hidrato
PA-ACS-ISO
SAL DISODICA 0,05 mol/l (0,05N)
SV
131030 ACIDO FORMICO 98%
PA-ACS
131032 ACIDO orto-FOSFORICO 85%
PA-ACS-ISO
121660 ACIDO orto-FOSFORICO 50%
PA
A13700 ACIDO 4-HIDROXIBENZOICO, 99%
131034 ACIDO L(+)- LACTICO
PA-ACS
131037 ACIDO NITRICO 69%
PA-ACS-ISO
PA-ISO
PA
ACIDO NITRICO AL 1%
ACIDO PERYODICO 0,05 M
121050 ACIDO PIROGALICO
PA
141045 ACIDO SALICILICO (RFE, USP, BP,
Ph. Eur)
PRS-CODEX
141055 ACIDO SORBICO (RFE, USP, BP,
Ph. Eur.)
PRS-CODEX
131057 ACIDO SULFANILICO
PA-ACS
471058 ACIDO SULFURICO 95-98%
(máx 0,0000005% Hg)
PA-ACS-ISO
131058 ACIDO SULFURICO 96%
PA-ISO
182102 ACIDO SULFURICO
0,01 mol/l (0,02N)
SV
181061 ACIDO SULFURICO 0,05 mol/l (0,1N) SV
181059 ACIDO SULFURICO 0,5 mol/l (1N)
SV
182105 ACIDO SULFURICO 1 mol/l (2N)
SV
131064 ACIDO SULFUROSO
solución 6%
PA-ACS
131066 ACIDO L(+)- TARTARICO
PA-ACS-ISO
ACIDO TIOBARBITURICO
A13401 ACIDO TIOSALICILICO,98%
141792 AGAR (USP)
PRS-CODEX
131074 AGUA
PA-ACS
171071 AGUA DE BARITA solución saturada RE
171073 AGUA DE CAL solución saturada
RE
212236 AGUA DESIONIZADA
QP
ALILO iso-TIOCIANATO
121096 ALMIDON DE PATATA soluble
PA
141101 ALUMINIO SULFATO 18-hidrato
(RFE, BP,Ph. Eur.)
PRS-CODEX
AMONIACO GAS
PA
121129 AMONIACO 25% (en NH3)
141128 AMONIACO 20% (en NH3)
PRS
131118 AMONIO BROMURO
PA-ACS
131121 AMONIO CLORURO
PA-ACS-ISO
131120 di-AMONIO HIDROGENO
CITRATO
PA-ACS
131368 AMONIO HIERRO (II) SULFATO
6-hidrato
PA-ISO
131365 AMONIO HIERRO (III) SULFATO
12-hidrato
PA-ACS-ISO
131134 AMONIO MOLIBDATO 4-hidrato
PA-ACS-ISO
131135 AMONIO NITRATO
PA-ACS-ISO
121146 di-AMONIO TARTRATO
PA
132352 AMONIO meta-VANADATO
PA-ACS
281432 ANARANJADO DE METILO
solución 0,1%
RV
A13482 trans-ANETOL,98%+
141156 ANILINA
PRS
211160 ARENA DE MAR lavada, grano fino QP
A16992 ARSENICO POLVO -100 mesh, 99,99%
313171 ARSENICO solución patrón
As = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
281168 AZUL DE BROMOTIMOL solución
0,04%
RV
251170 AZUL DE METILENO (C.I. 52015)
DC
131182 BARIO CLORURO 2-hidrato
PA-ACS-ISO
131188 BARIO HIDROXIDO
8-hidrato
PA-ACS-ISO
2,3-BUTANODIOL
361082 1-BUTANOL (UV-IR-HPLC)
PAI
131082 1-BUTANOL
PA-ACS-ISO
361089 iso-BUTANOL (UV-IR-HPLC)
PAI
123851 2-BUTANOL
PA
A13159 BUTIL-PBD (2-(4-Bifenil)-5(4-tert-butilfenil)-1,3,4-oxadiazol
121211 CALCIO ACETATO x-hidrato
PA
121212 CALCIO CARBONATO precipitado
PA
121221 CALCIO CLORURO
anhidro, polvo
PA
CALCIO CLORURO 0,5 mol/l (0,05M)
M
142400 CALCIO HIDROXIDO polvo,
(RFE,USP, BP. Ph. Eur.)
PRS-CODEX
211229 CALCIO HIDROXIDO natural, polvo
QP
211234 CALCIO OXIDO natural, trozos
QP
124537 CALCON (C.I. 15705)
PA
121237 CARBON ACTIVO polvo
PA
131245 CARBONO TETRACLORURO
PA-ACS-ISO
251246 CARMIN DE INDIGO (C.I. 73015)
DC
121248 CERIO (IV) SULFATO 4-hidrato
PA
142323 CLORAMINA T 3-hidrato
(RFE, BP, Ph. Eur.)
PRS-CODEX
313178 COBRE solución patrón
Cu = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
141266 COBRE METAL, polvo
PRS
122726 COBRE (II) SULFATO anhidro
PA
131270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato
PA-ACS-ISO
141270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato
(RFE, BP, Ph. Eur.)
PRS-CODEX
471153 CROMO (VI) OXIDO
(máx. 0,000005% de Hg)
PA-ACS
502612 DERQUIM MC MEZCLA CROMICA
121828 DIFENILAMINA
PA
313180 ESTAÑO solución patrón
Sn = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
141304 ESTAÑO metal granalla
PRS
471303 ESTAÑO (II) CLORURO
(máx. 0,000005% de Hg)
PA-ACS
131303 ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato
PA-ACS
ETANAL (ACETALDEHIDO)
121086 ETANOL ABSOLUTO
PA
361086 ETANOL ABSOLUTO (UV-IR-HPLC) PAI
361085 ETANOL 96% v/v (UV-IR-HPLC)
PAI
121085 ETANOL 96% v/v
PA
132770 ETER DIETILICO estabilizado con
~6 ppm de BHT
PA-ACS-ISO
131314 ETER DI-iso-PROPILICO estabilizado
con ~50 ppm de BHT
PA-ACS
131897 ETER mono-METILICO DEL
ETILENGLICOL
PA-ACS
131318 ETILO ACETATO
PA-ACS-ISO
403687 EXTRACTO DE LEVADURA
Ingrediente
CULTIMED
131321 1,10-FENANTROLINA 1-hidrato PA-ACS
131325 FENOLFTALEINA
PA-ACS
281327 FENOLFTALEINA solución 1%
RV
A13034 FLUOROGLUCINOL DIHIDRATO, 98%
(FLUOROGLUCINA)
131328 FORMALDEHIDO 37-38% p/p
estabilizado con metanol
PA-ACS
142728 D (-)-FRUCTOSA
PRS-CODEX
131334 FURFURAL estabilizado con
~ 0,1% de BHT
PA-ACS
141339 GLICERINA (RFE,USP, BP, Ph. Eur.)
PRS-CODEX
121341 D (+) - GLUCOSA
PA
132063 n-HEXANO
PA-ACS
141076 HIDROGENO PEROXIDO
30% p/v (100 vol.) estabilizado
PRS
131914 HIDROXILAMONIO CLORURO
PA-ACS-ISO
121925 HIDROXILAMONIO SULFATO
PA
A12475 5-(HIDROXIMETIL)-2FURALDEHIDO, 97%
313182 HIERRO solución patrón
Fe = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
211934 HIERRO metal, granulado fino
QP
141358 HIERRO (III) CLORURO 6-hidrato trozos
PRS
121793 HIERRO (II) SULFATO ~2-hidrato
PA
131362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato
PA-ACS-ISO
121360 HIERRO (III) SULFATO x-hidrato
PA
211376 LANA DE VIDRIO, lavada
QP
141392 LITIO CLORURO
PRS
131394 MAGNESIO ACETATO 4-hidrato PA-ACS
211794 MAGNESIO CLORURO
QP
~50% MgCl2 polvo
MAGNESIO CLORURO 0,1 mol/l (0,1M)
211276 MAGNESIO OXIDO
QP
142367 MANGANESO (IV) OXIDO
precipitado
PRS
131413 MANGANESO (II) SULFATO 1-hidrato
PA-ACS
142961 L(-)-MENTOL (RFE, USP, BP, Ph. Eur.)
PRS-CODEX
131426 MERCURIO (II) OXIDO amarillo
PA-ACS
121428 MERCURIO (II) YODURO rojo
PA
313186 MERCURIO solución patrón
Hg = 1,000 ±0,002 g/l
AA
361091 METANOL (UV-IR-HPLC prep.)
PAI
321091 METANOL (PAR)
PAI
131091 METANOL
PA-ACS-ISO
2-METIL-1-BUTANOL
131079 3-METIL-1-BUTANOL
PA-ACS
162516 4-METIL-2-PENTANOL
PS
131439 NEGRO DE ERIOCROMO T (C.I. 14645)
PA-ACS
132362 NINHIDRINA
PA-ACS
A10369 4-NITROANILINA, 98%
PAPEL DE FILTRO
(Ver Tarifa Panreac, Filtración MN)
91187 PAPEL DE TORNASOL neutro (rollo)
253211 PARAFINA P.F. 56-58°C en lentejas DC
122006 n-PENTANO
PA
131884 1-PENTANOL
PA-ACS
211835 PIEDRA POMEZ gránulos
QP
PINACIANOL O AZUL DE QUINALDINA
(YODURO DE 1,1’-DIETIL
CARBOCIANINA)
162377 PIPERIDINA
PS
131457 PIRIDINA
PA-ACS
187
132382 PLATA DIETILDITIOCARBAMATO
188
PA-ACS
131459 PLATA NITRATO
PA-ACS-ISO
PLATA NITRATO solución 0,1% p/v
141801 PLATA SULFATO
PRS
313189 PLOMO solución patrón
Pb = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
131466 PLOMO (II) ACETATO 3-hidrato
PA-ACS-ISO
131473 PLOMO (II) NITRATO
PA-ACS
816610.1 POLIAMIDA PARA CROMATOGRAFIA
313190 POTASIO solución patrón
K = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
121489 POTASIO BROMURO
PA
POTASIO CLORURO
(máx 0,005% de Br)
131494 POTASIO CLORURO
PA-ACS-ISO
281495 POTASIO CLORURO
solución saturada
RV
131500 POTASIO DICROMATO
PA-ISO
131505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)
3-hidrato
PA-ACS
131503 POTASIO HEXACIANOFERRATO (III)
PA-ACS
122333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato
PA
131509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO
PA-ACS-ISO
131481 POTASIO HIDROGENO FTALATO
PA-ISO
121486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO
PA
121515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas PA
131524 POTASIO NITRATO
PA-ISO
121526 di-POTASIO OXALATO 1-hidrato
PA
131527 POTASIO PERMANGANATO
PA-ACS-ISO
0,01 mol/l (0,05N)
SV
0,02 mol/l (0,1N)
SV
0,2 mol/l (1N)
SV
121523 POTASIO meta-PERYODATO
PA
131729 POTASIO SODIO TARTRATO 4-hidrato
PA-ACS-ISO
121531 POTASIO SORBATO
PA
131532 POTASIO SULFATO
PA-ACS-ISO
121534 POTASIO TIOCIANATO
PA
131540 POTASIO YODATO
PA-ACS-ISO
131542 POTASIO YODURO
PA-ACS-ISO
361885 1-PROPANOL (UV-IR-HPLC)
PAI
131090 2-PROPANOL
PA-ACS-ISO
321090 2-PROPANOL (PAR)
PAI
172174 REACTIVO DE LUFF-SCHOORL
RE
A12130 RESINA DOWEX 1X2-100(Cl)
RESINA LEWATIT‚ MP 600
(aniónica fuerte I)
816710
131615
131617
131621
141625
313192
141669
131633
281634
131644
123314
131648
122032
131647
131659
131668
131698
131675
121638
131965
121677
131687
171688
182153
171694
181693
181694
182155
181692
181691
182415
182158
182159
131703
121705
131706
131700
141859
131716
141717
131721
INDICADOR FLUORESCENTE UV254
ROJO DE FENOL
PA-ACS
ROJO DE METILO (C.I.13020)
PA-ACS
SACAROSA
PA-ACS
SELENIO METAL polvo
PRS
SODIO solución patrón
Na = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
SODIO METAL, barras
en atmósfera de argón
PRS
SODIO ACETATO anhidro
PA-ACS
SODIO ACETATO 1 mol/l (1M)
RV
di-SODIO tetra-BORATO 10-hidrato
PA-ACS-ISO
SODIO BOROHIDRURO
PA
SODIO CARBONATO anhidro
PA-ACS-ISO
SODIO CARBONATO 1-hidrato
PA
SODIO CARBONATO
10-hidrato
PA-ISO
SODIO CLORURO
PA-ACS-ISO
SODIO DIETILDITIOCARBAMATO
3-hidrato
PA-ACS
SODIO DISULFITO
PA-ACS
SODIO FLUORURO
PA-ACS-ISO
SODIO HIDROGENO CARBONATO
PA
SODIO di-HIDROGENO FOSFATO
1-hidrato
PA-ACS
2-hidrato
PA
SODIO HIDROXIDO lentejas
PA-ACS-ISO
SODIO HIDROXIDO solución 10% p/v
RE
SODIO HIDROXIDO
0,05 mol/l (0,05N)
SV
SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) RE
SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV
SODIO HIDROXIDO
0,25 mol/l (0,25N)
SV
SODIO HIDROXIDO 0,4 mol/l (0,4N)
SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N)
Indicador: Azul de Bromofenol
SV
Indicador: Fenolftaleína
SV
SV
SV
SODIO NITRITO
PA-ACS
SODIO NITROPRUSIATO 2-hidrato
PA
di-SODIO OXALATO
PA-ACS
SODIO meta-PERYODATO
PA-ACS
SODIO SALICILATO
PRS-CODEX
SODIO SULFATO anhidro PA-ACS-ISO
SODIO SULFITO anhidro
PRS
SODIO TIOSULFATO 5-hidrato
PA-ACS
M
182160 SODIO TIOSULFATO
0,05 mol/l (0,05N)
SV
181723 SODIO TIOSULFATO 0,1mol/l (0,1N) SV
181722 SODIO TIOSULFATO 1 mol/l (1N)
SV
281730 SOLUCION TAMPON pH 10
RV
272168 TAMPON SOLUCION
pH 4,00 ± 0,02 (20°C)
ST
pH 7,00 ± 0,02 (20°C)
ST
pH 9,00 ± 0,02 (20°C)
ST
TETRACLOROETANO
121739 TIMOLFTALEINA
PA
TOLUENO MARCADO CON C14
162378 p-TOLUIDINA
PS
TORIO NITRATO 4-hidrato
281748 TORNASOL TINTURA
RV
131252 TRICLOROMETANO estabilizado
con etanol
PA-ACS-ISO
131759 VERDE DE BROMOCRESOL
PA-ACS
181969 YODO 0,01 mol/l (0,02N)
SV
182161 YODO 0,025 mol/l (0,05N)
SV
181772 YODO 0,05 mol/l (0,1N)
SV
141782 ZINC METAL, granalla
PRS
313193 ZINC solución patrón
Zn = 1,000 ± 0,002 g/l
AA
A17368 ZINC, ALAMBRE, Ø 0,25 mm, 99,99+%
141783 ZINC METAL, polvo
PRS
131787 ZINC SULFATO 7-hidrato
PA-ACS
189
Aditio
Aditivos y
coadyuvantes
tecnológicos para
uso alimentario
industrial
PANREAC QUIMICA, S.A., fabrica además de
los reactivos para análisis PANREAC, una línea de
aditivos y coadyuvantes tecnológicos para uso alimentario industrial, que cumplen las especificaciones de pureza prescritas por The Food Chemicals Codex 4ª ed., complementadas con las exigencias específicas fijadas por la legislación española y comunitaria de la CEE.
En la relación que sigue se indica denominación del producto, fórmula y número de identificación. Para mayor información, solicite nuestro
catálogo ADITIO 1995.
190
M
Código Producto
201003
204333
201007
201008
202342
201013
202422
202034
201014
201808
201018
201020
202019
202785
202512
201669
201030
201029
201032
202344
202042
201034
202368
202051
202591
203389
202786
202345
201810
201055
201883
201058
201065
201066
201792
202035
202043
201081
201103
201130
201129
201119
201121
201116
201127
201126
201140
203464
204109
202357
203977
ACEITE DE VASELINA
ACETOFENONA
ACETONA
ACIDO ACETICO GLACIAL
ACIDO ADIPICO
ACIDO L(+)-ASCORBICO
ACIDO DL-ASPARTICO
ACIDO L-ASPARTICO
ACIDO BENZOICO
ACIDO CITRICO anhidro
ACIDO CITRICO 1-hidrato
ACIDO CLORHIDRICO 37%
ACIDO CLORHIDRICO 35%
ACIDO DECANOICO
ACIDO ESTEARICO
(Mezcla de ácidos grasos)
ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO SAL di-SODICA 2-hidrato
ACIDO FORMICO 98%
ACIDO FORMICO 85%
ACIDO orto-FOSFORICO 85%
ACIDO FUMARICO
ACIDO L-GLUTAMICO
ACIDO L(+)-LACTICO
ACIDO LAURICO
ACIDO DL-MALICO
ACIDO MIRISTICO
ACIDO NlCOTINlCO
ACIDO OCTANOICO
ACIDO PALMITICO
ACIDO PROPIONICO
ACIDO SORBICO
ACIDO SUCCINICO
ACIDO SULFURICO 95-98%
ACIDO TANICO
ACIDO L(+)-TARTARICO
AGAR
DL-ALANINA
L-ALANINA
ALCOHOL BENCILICO
ALUMINIO POTASIO SULFATO
12-hidrato
AMONIACO 30% (en NH3)
AMONIACO 25% (en NH3)
AMONIO CARBONATO
AMONIO CLORURO
AMONIO HIDROGENO CARBONATO
di-AMONIO HIDROGENO FOSFATO
AMONIO di-HIDROGENO FOSFATO
AMONIO SULFATO
L-ARGININA
L-ASPARAGINA anhidra
BENZOILO PEROXIDO humectado
con aprox. 25% de agua
D (+)-BIOTINA
Sinónimos
Fórmula
N.º de
identificación
C 8H 8O
CH3COCH3
CH3COOH
(CH2CH2COOH)2
C6H8O6
C4H7NO4
C4H7NO4
C6H5COOH
C6H8O7
C6H8O7.H2O
HCl
HCI
C10H20O2
C18H36O2
Na2H2C10H12N2O8.2H2O
HCOOH
HCOOH
H3PO4
HOOCCHCHCOOH
C5H9NO4
CH3CHOHCOOH
C12H24O2
C4H6O5
CH3(CH2)12COOH
E-260
E-355
E-300
E-210
E-330
E-330
E-507
E-507
E-236
E-236
E-338
E-297
E-620
E-270
E-296
E-375
C8H16O2
CH3CH2COOH
C6H8O2
HOOCCH2CH2COOH
H2SO4
E-280
E-200
E-363
E-513
(CHOH)2(COOH)2
E-334
E-406
C3H7NO2
C3H7NO2
C6H5CH2OH
(Amonio Bicarbonato)
AIK(SO4)2.12H2O
NH4OH
NH4OH
~(NH4)3(CO3)2H+NH2COONH4
NH4Cl
NH4HCO3
(NH4)2HPO4
NH4H2PO4
(NH4)2SO4
C6H4N4O2
C4H8N2O3
C14H10O4
E-522
E-527
E-527
E-503i
E-510
E-503ii
E-342ii
E-342i
E-517
191
Código Producto
201089
201082
201429
204233
201211
201212
201213
201219
201221
201215
201232
201214
202824
201818
201224
201228
201227
201226
201225
202400
201230
203238
201235
201237
202416
204441
203922
203645
202825
201286
201254
192
201877
201303
201086
201085
202695
201318
201319
202047
202728
202060
201339
202329
201922
201340
iso-BUTANOL
1-BUTANOL
BUTANONA
2-ter-BUTIL-4-METOXIFENOL
CALCIO ACETATO x-hidrato
CALCIO CARBONATO precipitado
tri-CALCIO di-CITRATO 4-hidrato
CALCIO CLORURO anhidro
escoriforme
CALCIO CLORURO anhidro polvo
CALCIO CLORURO 2-hidrato
escoriforme
CALCIO CLORURO 2-hidrato polvo
CALCIO CLORURO 6-hidrato
CALCIO CLORURO solución 45%
(en CaCl2.2H2O)
CALCIO ESTEARATO
CALCIO FORMIATO
tri-CALCIO FOSFATO
CALCIO HIDROGENO FOSFATO
anhidro
CALCIO HIDROGENO FOSFATO
2-hidrato
CALCIO bis (di-HIDROGENO
FOSFATO) 1-hidrato
CALCIO HIDROXIDO polvo
CALCIO LACTATO 5-hidrato
CALCIO PROPIONATO
CALCIO SULFATO 2-hidrato
CARBON ACTIVO polvo
CARBOXIMETILCELULOSA SAL
SODICA (baja viscosidad)
CARBOXIMETILCELULOSA SAL
SODICA (media viscosidad)
CARBOXIMETLCELULOSA SAL
SODICA (alta viscosidad)
L-CISTINA
2,6-Di-ter-BUTIL-4-METILFENOL
1,2 DICLOROETANO
DICLOROMETANO
estabilizado con amileno
1-DODECANOL
ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato
ETANOL absoluto
ETANOL 96% v/v
ETANOL 70% v/v
ETILO ACETATO
ETILO S-(-)-LACTATO
L-FENILALANINA
D(-)-FRUCTOSA
GELATINA 80-100 Blooms
GLICERINA
GLICERINA 87%
GLICERINA tri-ACETATO
GLICINA
Sinónimos
Fórmula
N.º de
identificación
C4H10O
(Metiletilcetona)
(BHA, Butildroxianisol)
(Calcio Difosfato)
C 4H 8O
C11H16O2
Ca(CH3COO)2.xH2O
CaCO3
Ca3(C6H5O7)2.4H2O
E-320
E-263
E-170i
E-333iii
CaCl2
CaCl2
E-509
E-509
CaCl2.2H2O
CaCl2.H2O
CaCl2.6H2O
E-509
E-509
E-509
~Ca(C18H35O2)2
C2H2CaO4
~Ca3(PO4)2
E-509
E-470a
E-238
E-341iii
CaHPO4
E-341ii
CaHPO4.2H2O
E-341ii
CaH4(PO4)2.H2O
Ca(OH)2
Ca(CH3CHOHCOO)2.5H2O
E-341i
E-526
E-327
E-282
E-516
CaSO4.2H2O
E-466
E-466
(BHT, Butilhidroxitoluol)
C6H12N2O4S2
C15H24O
ClCH2ClCH2
CI2CH2
C12H26O
SnCl2.2H2O
CH3CH2OH
CH3CH2OH
CH3CH2OH
CH3COOC2H5
C5H10O3
C9H11NO2
C6H12O6
(Glicerol)
(Glicerol)
C3H8O3
C3H8O3
C9H14O6
H2NCH2COOH
E-466
E-921
E-321
E-512
E-422
E-422
E-1518
E-640
M
Código Producto
201341
203140
202061
201076
201362
202045
202198
201375
202046
203385
201396
202029
201399
201927
201395
201404
201410
201413
202067
201091
203332
203209
201479
201487
201490
201492
201494
201522
201513
201505
201480
201512
202333
201509
201486
201515
201524
201855
201729
201531
201532
201533
201537
201540
201542
Sinónimos
D(+)-GLUCOSA
D(+)-GLUCOSA 1-hidrato
GOMA ARABIGA polvo
HIDROGENO PEROXIDO 30% p/v
(100 vol.) estabilizado
HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato
L-HISTIDINA
L-HISTIDINA mono-CLORHIDRATO 1-hidrato
LACTOSA 1-hidrato
L-LEUCINA
D-(+)-LIMONENO
MAGNESIO CLORURO 6-hidrato
MAGNESIO ESTEARATO
tri-MAGNESIO di-FOSFATO
(Magnesio
5-hidrato
orto-fosfato)
MAGNESIO HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato
MAGNESIO HIDROXI CARBONATO
5-hidrato
(Magnesio Carbonato)
MAGNESIO SULFATO 7-hidrato
MANGANESO (ll) CLORURO 4-hidrato
MANGANESO (ll) SULFATO 1-hidrato
D(-)-MANITA
(Manitol)
METANOL
METILO 4-HIDROXIBENZOATO
PARAFINA 51- 53°C lentejas
POTASIO ACETATO
POTASIO BROMATO
POTASIO CARBONATO
tri-POTASIO CITRATO 1-hidrato
POTASIO CLORURO
POTASIO DISULFITO
tri-POTASIO FOSFATO 1-hidrato
POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)
3-hidrato
(Potasio Ferrocianuro)
POTASIO HIDROGENO CARBONATO (Potasio Bicarbonato)
di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
anhidro
(di-Potasio ortoFosfato)
di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO
3-hidrato
POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO
(mono-Potasio
orto-Fosfato)
POTASIO HIDROGENO TARTRATO
POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas
POTASIO NITRATO
POTASIO NITRITO
POTASIO SODIO TARTRATO
4-hidrato
POTASIO SORBATO
POTASIO SULFATO
POTASIO SULFITO
POTASIO TARTRATO 1/2-hidrato
POTASIO YODATO
POTASIO YODURO
Fórmula
N.º de
identificación
C6H12O6
C6H12O6.H2O
E-414
H2O2
FeSO4.7H2O
C6H9N3O2
C6H10ClN3O2.H2O
C12H22O11.H2O
C6H13NO2
C10H16
MgCl2.6H2O
~Mg(C18H35O2)2
Mg3(PO4)2.5H2O
MgHPO4.3H2O
MgSO4.7H2O
MnCl2.4H2O
MnSO4.H2O
C6H14O6
CH3OH
C8H8O3
E-511
E-470b
E-343ii
E-504ii
E-518
E-421
E-218
CH3COOK
KBrO3
K2CO3
K3C6H5O7.H2O
KCl
K2S2O5
K3PO4.H2O
E-261
E-924
E-501i
E-332ii
E-508
E-224
E-340iii
K4Fe(CN)6.3H2O
KHCO3
E-536
E-501ii
K2HPO4
E-340ii
K2HPO4.3H2O
E-340ii
KH2PO4
(COO)2KH(CHOH)2
KOH
KNO3
KNO2
E-340i
E-336i
E-525
E-252
E-249
NaK(COO)2(CHOH)2.4H2O
CH3(CHCH)2COOK
K2SO4
E-337
E-202
E-515i
K2(COO)2(CHOH)2.1/2H2O
KIO3
KI
E-336ii
193
Código Producto
203646
201545
201090
201633
201632
203865
201637
201648
202032
201647
201655
201656
201659
201698
202363
L-PROLINA
1,2-PROPANODIOL
2-PROPANOL
SODIO ACETATO anhidro
SODIO ACETATO 3-hidrato
SODIO L(+)-ASCORBATO
SODIO BENZOATO
SODIO CARBONATO anhidro
tri-SODIO CITRATO 2-hidrato
tri-SODIO CITRATO 51/2-hidrato
SODIO CLORURO
SODIO DISULFITO
SODIO DODECILO SULFATO
201681
201680
201665
201638
201654
201679
tri-SODIO FOSFATO 1-hidrato
tri-SODIO FOSFATO 12-hidrato
SODIO HIDROGENO di-ACETATO
(Sodio Diacetato)
SODIO HIDROGENO CARBONATO
(Sodio Bicarbonato)
di-SODIO HIDROGENO CITRATO 11/2 Hidrato
di-SODIO HIDROGENO FOSFATO
(di-Sodio
anhidro
orto-Fosfato)
di-SODIO HIDROGENO FOSFATO
12-hidrato
(mono-Sodio
1-hidrato
orto-Fosfato)
2-hidrato
di-SODIO di-HlDROGENO PIROFOSFATO
SODIO HIDROXIDO lentejas
SODIO HIDROXIDO escamas
SODIO LACTATO sol. 50% p/p
SODIO NITRATO
SODIO NITRITO
tetra-SODIO PIROFOSFATO anhidro
(tetra-Sodio
Difosfato)
tetra-SODIO PIROFOSFATO
(tetra-Sodio
10-hidrato
Difosfato)
SODIO POLIFOSFATO
SODIO SULFATO anhidro
SODIO SULFATO 10-hidrato
SODIO SULFITO anhidro
SODIO TARTRATO anhidro
SODIO TARTRATO 2-hidrato
SODIO TIOSULFATO 5-hidrato
D(-)-SORBITA
(Sorbitol)
TALCO lavado
TIERRA SILICEA purificada y calcinada
TITANIO (IV) OXIDO
L-TRIPTOFANO
VAINILLINA
ZINC OXIDO
ZINC SULFATO 1-hidrato
ZINC SULFATO 7-hidrato
201678
201965
201677
201709
201687
201686
203307
201702
201703
201711
201710
194
Sinónimos
201684
201716
201715
201717
201720
201719
201721
203064
201733
202475
202101
202049
202048
201786
201788
201787
Fórmula
C5H9NO2
CH2OHCHOHCH3
CH3CH2CH2OH
CH3COONa
CH3COONa.3H2O
C6H7NaO6
C6H5COONa
Na2CO3
Na2CO3.H2O
Na2CO3.10H2O
Na3C6H5O7.2H2O
Na3C6H5O7.51/2H2O
NaCl
Na2S2O5
(Lauril Sulfato
Sódico)
N.º de
identificación
E-262i
E-262i
E-301
E-211
E-500i
E-500i
E-500i
E-331iii
E-331iii
E-223
C12H25NaO4S
Na3PO4.H2O
Na3PO4.12H2O
CH3COONaCH3COOH
NaHCO3
C6H6Na2O7.11/2H2O
E-339iii
E-339iii
E-262ii
E-500ii
E-331ii
Na2HPO4
E-339ii
Na2HPO4.12H2O
E-339ii
NaH2PO4.H2O
E-339i
NaH2PO4.2H2O
H2Na2O7P2
NaOH
NaOH
C3H5NaO3
NaNO3
NaNO2
E-339i
E-450i
E-524
E-524
E-325
E-251
E-250
Na4P2O7
E-450iii
Na4P2O7.10H2O
(NaPO3)6
Na2SO4
Na2SO4.10H2O
Na2SO3
Na2(COO)2(CHOH)2
Na(COO)2(CHOH)2.2H2O
Na2S2O3.5H2O
C6H14O6
E-450iii
E-452i
E-514i
E-514i
E-221
E-335ii
E-335ii
TiO2
C11H12N2O2
C8H8O3
ZnO
ZnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
E-420i
E-553b
E-171
M
195
Editado por:
PANREAC QUIMICA, S.A.
045 -16 - 500 - 9/99
Diseño:
Pere Duran
Inpresión:
Centre Telemàtic Editorial,
Dep. Legal:
B.43107-83
196
SRL

Productos derivados de la uva, aguardientes y sidras

Transcripción

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