Publicación - Miagropecuaria.com
Transcripción
Publicación - Miagropecuaria.com
Muerte Súbita Asociada A Pasteurelosis Neumónica En Bovinos Dr. José Francisco Morales Álvarez Centro Nacional de Investigaciones Disciplinarias en Microbiología Animal. INIFAP. México Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán. UNAM. México I. INTRODUCCIÓN La Pasteurelosis produce grandes pérdidas económicas en rumiantes en casi todo el mundo, no solo por muerte, sino también por disminución en ganancias de peso, menor eficiencia en la conversión alimenticia y costos elevados del tratamiento en animales afectados con neumonía crónica, entre otros. Pasteurella haemolytica es un agente que comúnmente se asocia a problemas neumónicos de rumiantes. Se han reconocido, por hemoaglutinación indirecta, 17 serotipos de acuerdo a antígenos capsulares solubles. La Pasteurelosis en rumiantes se presenta principalmente en dos maneras: la forma neumónica, causada por P. haemolytica biotipo A y la forma septicémica producida por el biotipo T. Los biotipos A y T son diferenciados por su capacidad de fermentar arabinosa o trealosa respectivamente. En la nomenclatura actual los biotipos A fueron cambiados al género Mannheimia y los del biotipo T quedaron como Pasteurella trehalosi. Dentro del biotipo A se incluyen los siguientes serotipos A1, A2, A5, A6, A7, A8, A9, A11, A12, A13, A14, A16, A17 y en el biotipo T los serotipos T3, T4, T10, T15. En bovinos el serotipo más común es al A1 y en ovinos es el A2, sin embargo, se han reconocido los 17 serotipos como potencialmente patógenos y representan el 90% de los aislamientos. El otro 10% permanece como no tipificable y se duda de su patogenicidad. Esta bacteria produce en fase logarítmica de crecimiento una sustancia soluble que es tóxica para macrófagos y leucocitos de rumiantes. Es una citolisina formadora de poros que pertenece a la familia de toxinas RTX. Tiene un peso molecular de 105 kDa y es común a todos los serotipos de M. haemolytica. En la patogénesis de la enfermedad existen múltiples interacciones huésped-bacteria, que se inicia con la inhalación del agente, la colonización nasofaríngea, la llegada al alvéolo, la respuesta a la colonización y por último culmina con la evasión bacteriana a las defensas del huésped. Actualmente, la patogénesis de la enfermedad es poco clara, ya que los mecanismos que permiten a la bacteria establecerse y diseminarse durante una infección no están completamente estudiados. Varios componentes asociados a la pared celular como el lipopolisacárido, proteínas de membrana externa, material capsular, la leucotoxina, así como otros factores de virulencia involucrados en la colonización, pueden contribuir en la presentación de la enfermedad. Se ha considerado a la Leucotoxina, como el principal factor de virulencia de la bacteria; esta exotoxina está relacionada en todos los serotipos desde el punto de vista inmunológico, funcional y genético. La participación de la Leucotoxina en la generación de daño tisular en el pulmón, ocurre a través de la activación y destrucción de neutrófilos polimorfonucleares, los macrófagos intervienen en la activación de fosfolipasas con la subsecuente liberación del factor activador plaquetario, la activación de compuestos con efectos quimiotácticos y vasoactivos derivados del ácido araquidónico, la degranulación enzimática de los lisosomas, la generación de radicales tóxicos del oxígeno. También, la inducción de citocinas proinflamatorias como la Interleucina-1 y el Factor de Necrosis Tumoral, contribuyen a la formación de una respuesta inflamatoria y en consecuencia daño tisular. Asimismo, las plaquetas pueden también contribuir a liberar fibrinógeno y compuestos vasoactivos en presencia de la Leucotoxina. Por otra parte, también se ha demostrado que la Leucotoxina induce la liberación de histamina de las células cebadas del pulmón, lo que confirma la importancia de este mecanismo inflamatorio en el desarrollo del daño pulmonar. Los efectos citotóxicos de M. haemolytica en el macrófago alveolar, pueden también contribuir con la severidad de daño pulmonar, al tener los macrófagos factores de descarga que causan irritación y deposición de fibrina. Además la habilidad de las bacterias para debilitar al macrófago y linfocitos puede ser importante en el inicio de la enfermedad. La neumonía causada por M. haemolytica se caracteriza por ser una pleurobronconeumonía fibrinosa severa. Sin embargo se logra aislar este agente de cuadros neumónicos que varían en cuanto a su severidad, distribución y morfopatología. En estos cuadros podemos encontrar desde neumonías supurativas focales y difusas, hasta cuadros donde existen lesiones vasculares con trombosis y hemorragias, en los que adicionalmente se puede observar la transformación de macrófagos dando un aspecto arremolinado o de "avena". Se cree que este último cambio se debe al efecto tóxico de la leucotoxina que produce M. haemolytica. También, es importante mencionar que M. haemolytica forma parte de la microbiota normal de vías respiratorias altas y por lo tanto puede aislarse de individuos clínicamente sanos. Es obvio que clínicamente los cuadros descritos, ocasionan desde retrasos en el crecimiento hasta la muerte del individuo. Se menciona que factores predisponentes desempeñan una función determinante en el desarrollo de la enfermedad, por ejemplo: las condiciones medio ambientales adversas y mala alimentación pueden favorecer la presentación del complejo respiratorio. Se ha demostrado la participación de agentes primarios de tipo viral (Virus de la Rinotraqueitis Bovina Infecciosa [IBR por sus siglas en inglés], virus de la Diarrea Viral Bovina [VDVB], Adenovirus, Virus Respiratorio Sincicial Bovino, Parainfluenza 3, entre otros) capaces de iniciar el complejo neumónico y son parte fundamental para que se presente una neumonía. También existe la posibilidad de que existan diferencias en cuanto a mecanismos de patogenicidad entre las cepas aisladas de diversos cuadros neumónicos, así como, de cepas provenientes de animales sanos. Entre estos mecanismos de patogenicidad podrían contarse, la capacidad de producir Leucotoxina, la presencia de adhesinas, el serotipo, la expresión de proteínas de membrana externa (PME), proteínas reguladas por hierro (PRH), plásmidos de resistencia a quimioterapeúticos, antígenos aglutinantes serotipo-específico, neuroaminidasa y la sialoglicoproteasa. Estos factores estarían involucrados principalmente en la colonización, replicación del agente y la presentación del cuadro neumónico. II Muerte súbita asociada a Pasteurelosis Neumónica en bovinos. Algunas consideraciones. La Pasteurelosis Neumónica es un término que implica la infección pulmonar asociada a bacterias del género Pasteurella. Dentro de este género se encuentran Pasteurella multocida y haemolytica. Sin embargo, con la nomenclatura actual se tendrían que hacer algunas consideraciones. Por ejemplo, los biotipos A de Pasteurella haemolytica y que son los responsables de inducir cuadros neumónicos, pasaron a formar parte de un nuevo género conocido como Mannheimia haemolytica, por lo que entonces la neumonía ocasionada por esta bacteria ya no entraría en el complejo denominado “Pasteurelosis Neumónica”. Es probable que esta situación no tenga mucha relevancia, sin embargo, estos detalles terminológicos, a través del tiempo han generado graves problemas, tal es el caso de la “SEPTICEMIA HEMORRÁGICA”. Esta enfermedad es ocasionada por Pasteurella multocida tipos B y E, tipos que son exóticos para todo el continente americano. En muchos países de Latinoamérica, se utiliza el término de “Septicemia hemorrágica” para describir casos de muerte súbita asociada a bacterias del género Pasteurella, incluso existen una gran variedad de biológicos que están indicados para esta enfermedad. Las leyendas de estos biológicos comerciales a la letra dicen: “Vacuna (o bacterina) para prevenir la Septicemia Hemorrágica de los bovinos, ovinos y caprinos”. Además, en su formulación indican: “….. este biológico es una suspensión bacteriana inactivada que contiene Pasteurella multocida tipo A o D y Pasteurella haemolytica A1”. Independientemente de la efectividad de estos biológicos, casi siempre cuestionada, es importante resaltar que se cae en un doble engaño: Primero, se comercializa un biológico para una enfermedad que ni siquiera existe en el continente americano, y segundo estos inmunógenos contienen tipos bacterianos que no tienen efecto protector contra la “Septicemia hemorrágica”. El problema es mucho mas grave y tiene varias vertientes. Por un lado, los productores de animales y aún los Médicos Veterinarios, tienen arraigado este concepto y por otro lado, considerando el estatus sanitario de un país, estamos aceptando tener una enfermedad de naturaleza exótica, con las implicaciones que esto conlleva. Lo que se comentará a continuación es probable que genere más confusión, por lo que le pido al lector agudice sus sentidos para evitarla. Primera pregunta: ¿Existe la muerte súbita asociada a la Pasteurelosis neumónica? La respuesta es: Si. Segunda pregunta: ¿A que se debe este proceso? La respuesta: A septicemia, a choque endotóxico. Tercera pregunta: ¿Cuales son las principales manifestaciones? La respuesta es: Fiebre, cuadro respiratorio, muerte súbita y un cuadro patológico congestivo-hemorrágico generalizado. Cuarta pregunta: ¿Entonces, existe o no la Septicemia hemorrágica? La respuesta es: Como enfermedad ya se comentó que la Septicemia Hemorrágica no existe en el continente americano. Sin embargo, en el caso de los ovinos los biotipos T de Pasteurella haemolytica (Actualmente Pasteurella trehalosi) se encuentran asociados a cuadros septicémicos y muerte súbita, aún sin cuadro respiratorio previo. Tiene que entenderse que el término septicemia, en términos simples, es la presencia de bacterias y sus toxinas en sangre. La mayoría de estas toxinas inducen daños severos sobre los vasos sanguíneos y por esta razón se observa a la necropsia un cuadro congestivo hemorrágico generalizado. La septicemia puede presentarse en cualquier infección producida por bacterias que sean capaces de invadir el torrente sanguíneo y que a su vez tengan la capacidad de producir toxinas. Ejemplos de estas infecciones son las ocasionadas por Salmonella, Escherichia coli (algunas cepas), Pasteurella, etc. En la patogenia de la Pasteurelosis Neumónica ocasionada por Pasteurella multocida y Mannheimia haemolytica en bovinos, ovinos y caprinos, las bacterias ya establecidas en el pulmón y debido a sus propiedades patogénicas, tienen la capacidad de invadir el torrente sanguíneo y provocar un cuadro septicémico. En este caso la enfermedad se denomina Pasteurelosis Septicémica. Es evidente que esta septicemia se produce solo si la bacteria tiene la capacidad producir sus toxinas, invadir el torrente sanguíneo y si el sistema inmune del animal lo permite. En general, los cuadros septicémicos derivados de una Pasteurelosis Neumónica son poco frecuentes, sin embargo pueden existir aún sin neumonía previa. Como ya se mencionó, el sistema inmune juega un papel determinante en evitar la septicemia en estos casos y muy probablemente la inmunización efectiva pueda contribuir en ello. Los factores que permiten la inducción de una septicemia en el caso particular de Pasteurella y Mannheimia, se encuentran determinadas por las propiedades patogénicas de estas bacterias. El Lipopolisacárido (LPS) es el factor principal, debido a que induce daño endotelial directo o mediado por el Factor de Necrosis Tumoral. La lesión endotelial provoca un incremento de la permeabilidad vascular y por lo tanto, la posibilidad de que las bacterias pasen al torrente sanguíneo junto con las toxinas producidas. El daño vascular sistémico caracterizado por congestión y hemorragias, también se debe al efecto del LPS aunado a la activación de la cascada de coagulación y los fenómenos de autorregulación del propio sistema, que provocan el conocido choque endotóxico. La causa de la muerte súbita en el animal es la coagulación intravascular diseminada y la falla circulatoria periférica. En las infecciones por Mannheimia haemolytica la patogenia se complica más debido a que, aparte de la endotoxina, se produce una exotoxina que daña de manera directa a los leucocitos en general, provocando inmunosupresión local y sistémica grave, lo que finalmente hace que el cuadro sea sobreagudo. Regresando al tema de la “Septicemia hemorrágica”, en estudios realizados en México hace aproximadamente 15 años, se demostró la presencia de anticuerpos contra los tipos B y E de Pasteurella multocida. Sin embargo, en estudios bacteriológicos exhaustivos realizados en pulmones neumónicos de bovinos, los tipos aislados con frecuencia alta fueron el tipo A y el tipo D y no se logró el aislamiento de los tipos B y E. La explicación que dieron los autores de estos trabajos de investigación fue que, después de una revisión detallada de las bacterinas comerciales disponibles en esa época, algunas de ellas que estaban indicadas para prevenir la septicemia hemorrágica, aparentemente si contenían los tipos B y E de P. multocida y la respuesta serológica que ellos encontraron la asociaron con la bacterinización con estos biológicos. Afortunadamente en la actualidad ya no existen este tipo de biológicos en el mercado, pero en su momento, si en realidad estos biológicos contenían los tipos B y E, aunque estuviesen inactivados, no dejaban de representar un riesgo potencial por el manejo de las cepas, antes de inactivar, en los laboratorios productores de estas bacterinas. III. ESTADO ACTUAL DE LOS BIOLOGICOS PARA PREVENIR LA ENFERMEDAD. Aunque la inmunización ha tenido un impacto importante en reducir pérdidas económicas debido a las enfermedades infecciosas, la tecnología de la vacunación no ha cambiado durante los últimos años. Sin embargo, con la llegada de la biotecnología y la comprensión de factores de virulencia de agentes infecciosos, combinado con el conocimiento de la respuesta inmune, se ha creado una revolución en el número de nuevos agentes que pueden ser controlados potencialmente por inmunización. Los avances en biología molecular, bioquímica, inmunología y áreas afines han producido el desarrollo de muchas nuevas vacunas, así como la de mejorar las que ya existen. La disponibilidad creciente de estos inmunógenos, está proporcionando la oportunidad para prevenir enfermedades infecciosas serias en grupos de edad diferentes y reducir la morbilidad y mortalidad. En la actualidad se ha desarrollado una diversidad de inmunógenos para prevenir la neumonía por M. haemolytica, con resultados aparentemente satisfactorios en algunos casos. Los inmunógenos a base de bacterias vivas de cultivos de 6 horas son los que han dado resultados más satisfactorios. Se argumenta que este tipo de biológicos son eficaces porque los cultivos jóvenes producen más material inmunogénico (material capsular, leucotoxina y otros antígenos no muy bien definidos). También la replicación limitada del agente en el sitio de la inoculación favorece la estimulación de los mecanismos inmunológicos mediados por células. La eficacia de la vacunación requiere que la respuesta inmune esté encaminada a los factores o antígenos que estén relacionados con protección. Además es de utilidad examinar el estado inmune de los animales a nivel campo. La prevención de Pasteurelosis Neumónica por inmunización se ha intentado durante décadas. En relación al uso de las bacterinas, se ha discutido de manera amplia acerca de la protección que brindan, debido a que en la mayoría de las veces se concluye que confieren escasa protección e incluso se menciona que pueden incrementar el daño pulmonar. La ineficacia de estos biológicos se debe a que al ser inoculados a un animal, se producen anticuerpos séricos contra antígenos capsulares, sin embargo, existen otros antígenos que participan en la patogénesis de la enfermedad y que no están contenidos en estas bacterinas, como la leucotoxina de M. haemolytica. A pesar de lo anterior, en México se siguen utilizando las bacterinas, sin saber a ciencia cierta su eficacia, serotipos utilizados y las características de las cepas contenidas. En México se han introducido biológicos para la prevención de la Pasteurelosis Neumónica de los bovinos y que se han empezado a utilizar en borregos e incluso en cabras, algunos de estos biológicos tienen incluida a la leucotoxina de Mannheimia haemolytica como parte de los antígenos que inducen protección. Si bien, la leucotoxina es el antígeno mejor caracterizado, el que ha demostrado inducir mejor protección y que es un antígeno común a todos los serotipos de M. haemolytica , no hay que olvidar que los antígenos capsulares, entre otros, también son importantes y éstos si son específicos del serotipo de la bacteria. En bovinos el serotipo más común y el que está contenido en estos biológicos es el serotipo A1. Sin embargo, en ovinos el serotipo más común reportado a nivel mundial es el A2. Bajo el supuesto de que las bacterinas para prevenir la Pasteurelosis Neumónica no son muy eficaces y considerando que los laboratorios de producción de biológicos nacionales solo producen bacterinas, se han introducido recientemente en el mercado nacional, vacunas de nueva generación. Estos biológicos son bacterinas mas "leucotoxoide", o productos de la superficie bacteriana más "leucotoxoide". También estos biológicos fueron desarrollados inicialmente para bovinos y se quieren utilizar en forma extensiva en ovinos y caprinos sin evaluación previa. Por ejemplo, algunos productores con el afán de disminuir el costo de estos biológicos se formulan la primera pregunta: ¿qué dosis se utilizará para borregos?. Si para una vaca está indicado 2.5 ml del biológico para el borrego ¿podré utilizar 0.5 ó 1 ml?. La segunda pregunta: ¿Cuál es el mejor momento para aplicarla?. ¿En invierno? ¿En época de lluvias? ¿A corderos? ¿A adultos? ¿A hembras gestantes?, etc. Respuesta con otra pregunta: ¿ Los sistemas de producción de los bovinos son igual que para los ovinos?. ¿ Se consideró esto para indicar los biológicos para los ovinos? Por todas estas razones en el CENID-Microbiología, INIFAP-SAGAR existe una línea de investigación relacionada con la evaluación de éstos biológicos. El objetivo general del proyecto es evaluar, de manera comparativa varios inmunógenos comerciales, en condiciones controladas y en campo. Se ha incluído como grupo control un inmunógeno experimental a base de bacterias muertas y sobrenadante rico en leucotoxina y otros antígenos de Mannheimia haemolytica para prevenir la Pasteurelosis Neumónica. Se ha utilizado como modelo al ovino, por la facilidad económica de trabajar en esta especie. Estas investigaciones han dado resultados alentadores y en algunos resultados obtenidos hasta el momento, tanto a nivel laboratorio (experimental) como en ensayos de campo se ha demostrado la eficacia de estos inmunógenos. Dentro de estos resultados destacan: la capacidad de la mayoría de estos biológicos para inducir una respuesta de anticuerpos contra los principales antígenos relacionados con la patogenicidad de la bacteria (antígenos capsulares, leucotoxina, proteínas de membrana externa, etc). En los estudios comparativos con biológicos comerciales, se demostró que el inmunógeno experimental, posee características de respuesta similares a los comerciales, e incluso en algunas las supera. Es conveniente resaltar, que en esta investigación, se incluyeron variables como dosis y producción de anticuerpos contra antígenos capsulares (serotipo 1 y 2), contra la leucotoxina y contra las proteínas de membrana externa de M. haemolytica. Los resultados preliminares más relevantes fueron: ? El biológico experimental supera en título, aunque no por mucho, los anticuerpos contra antígenos capsulares. ? Este biológico genera buenos títulos de anticuerpos desde dosis de 1.0 ml y se incrementan directamente proporcional a la dosis. ? Da una buena respuesta contra la leucotoxina. ? El biológico comercial genera una respuesta contra antígenos capsulares del serotipo A2, que supuestamente no esta incluido en el biológico. ? Dosis de 1.0 ml. del biológico comercial generan una buena respuesta en ovinos contra algunos antígenos, incluso superior a las obtenidas con 2.5 ml. Sin embargo, es necesario realizar más estudios, sobretodo en condiciones controladas para ratificar estos resultados y considerar ensayos de desafío para evaluar el efecto protectivo de estos biológicos. Hay que recordar que "El título de anticuerpos no siempre es sinónimo de protección" Por último, un aspecto importante a considerar, es la posible sobrestimación de los procesos neumónicos en los animales domésticos, que si bien son muy importantes, en muchos casos se dan diagnósticos clínicos equivocados. Por ejemplo, “No todo lo que brilla es oro” dice un conocido refrán mexicano, que puede ser aplicado a lo siguiente: No todos los pulmones que a la necropsia se observan rojos y pesados son indicativos de un cuadro neumónico. Estos cambios indican congestión y edema pulmonar, cambios que frecuentemente se presentan como procesos terminales a la muerte de los animales, independientemente de la causa de la muerte. Clínicamente también es fácil confundir una neumonía, por ejemplo, el escurrimiento nasal, a veces sin estar acompañado de otros signos, hacen a un clínico dar un diagnóstico de neumonía. Desgraciadamente estos casos ocurren muy a menudo en México y resultan ser la mejor alternativa de salida al desconocimiento de los cambios patológicos inducidos por las neumonías LECTURAS RECOMENDADAS 1.-Adlam, C., Knights, J.M., Mugridge, A., Lindon, J.C., Baker, P.R.W., Beesley, J.E. Spacey, B., Carig, G.R. and Nagy, L.K. 1984. Purification, characterization and immunological properties of serotype-specific polysaccharide of Pasteurella haemolytica ( serotype A1) organisms. J. Gen. Microbiol. 130: 2415-2426 2.- Aguilar, R.F., Jaramillo, M.L., Morales, A.J.F., Trigo, T.F.J. y Suárez, G.F. 1997. Evaluación de la protección contra la pasteurelosis neumónica, en corderos vacunados con diferentes antígenos de Pasteurella haemolytica A1.. Vet Méx, 28 (3) 3.- Aguilar T, C. y Tórtora P, J.: Mortalidad de corderos en dos sistemas de producción ovina en Milpa Alta, D.F., Memoria de lII Congreso Nacional de Producción Ovina. 146. (1989) 4.- Aley, M.R. and Clarke, J.L.: The influence of microorganism on the severity of lesions in chronic ovine neumonia. N. Z. Vet. J., 25: 200 (1977) 5.- Berggren, K.A., Baluyut, C.S., Simonson, R.R., Bemrick, W.J. and Maheswaran, S.K.: Cytotoxic effect of Mannheimia haemolytica on ovine neutrophils. Am. J. Vet. Res., 42: 1383 (1981) 6.-Biberstein, E.L. 1978. Biotyping and serotyping of Pasteurella haemolytica. Methods in Microbiol. 10: 253-268 7.-Binkhorst, G.J., Henricks, P.A.J., Ingh, T.S.G. A.M., Hajer, R. and Nijkamp, F.P. 1990. The effect of stress on host defense system on lung damage in calves experimentally infected with Pasteurella haemolytica type A1. J. Vet. Med. Ass. 37: 525-536 8.-Brogden, K.A., DeBey, B. and Cutlip, R. 1995. Lesions induced in vivo by cell-associated products of Pasteurella haemolytica and their role in the pathogenesis of bovine respiratory disease. Memorias del Seminario de Pasteurelosis Neumónica del Ganado Bovino. Monterrey, N.L., México. 23-29. Universidad Autónoma de Nuevo León. Monterrey, N.L., México 9.-Chang, Y.F., Young, R., Post, D. and Struck, D.K. 1987. Identification and characterization of the Pasteurella haemolytica leukotoxin. Infect. Immun. 55: 2348-2354 7.-Clinkenbeard, K.D., Mosier, D.A. and Confer, A.W. 1989. Transmembrane pore size and role of cell swelling in cytotoxicity caused by Pasteurella haemolytica leukotoxin. Infect. Immun. 57: 420-435 8.-Colin, R., Jaramillo, M.L., Aguilar, R.F., Trigo, T.F.J. y Merino, M.M. 1987. Serotipos de Pasteurella haemolytica en pulmones neumónicos de ovinos en México. Rev. Lat-Amer. Microbiol. 29: 231-235 9.-Confer, A. W. and Simons, K.R. 1986. Effects of Pasteurella haemolytica lipopolysaccharide on selected functions of bovine leukocytes. Am. J. Vet. Res. 47: 154-157 10.- Confer, A.W., Panciera, R.J., Corsvet, R.E., Rummage, J.A., and Fulton, R.W.: Bovine pneumonic pasteurellosis: Effect of culture age of Mannheimia haemolytica used as a live vaccine. Am. J. Vet. Res. , 45: 2543 (1984). 11.- Confer, A.W., Panciera, R.J., Fulton, R.W., Gentry, M.J. and Rummage, J.A.: Effect of vaccination with live or killed Pasteurella haemolytica. Am. J. Vet. Res., 46: 342 (1985). 12.- Confer, A.W., Panciera, R.J., Gentry, M.J. and Fulton, R.W.: Immunologic response and resistance to experimentally induced pneumonic pasteurellosis in cattle vaccinated with various dosages of lyophilized Pasteurella haemolytica. Am. J. Vet. Res. 47:1853 (1986). 13.- Confer AW, Panciera RJ, Mosier DA. 1985. Immunity to Pasteurella haemolytica. JAVMA 193:1308-1316 14.- Dereck AM, Simons KR, Confer AW, Panciera RJ, and Clinkenbeard KD, 1989. Pasteurella haemolytica antigens associated with resistance to pneumonic pasteurellosis. Infect Immun. 572: 711-716. 15.- Donachie, W. 1994. Vaccine development against Pasteurella haemolytica infections in sheep. Abstract book HAP 94 In Edinburgh, Haemophilus, Actinobacillus and Pasteurella. International Conference U.K. 31 July- 4 August p. 18-19 16.- Frank, G.H. and Wessman, G.E.: Rapid plate agglutination procedure for serotyping Pasteurella haemolytica. J. Clin. Microbiol., 7: 142 (1978). 17.-Filion, L.A., Wilson, P.J. and Bielefeldt-Ohmann, H. 1984. The role of stress on the induction of pneumonic pasteurellosis. Can. J. Comp. Med. 48: 268-274 18.- Gentry, M.L., Confer, A.W., and Kreps, J.A.: Simple visual assay for determination of Pasteurella haemolytica cytotoxin neutralizing antibody titers in cattle sera. J. Clin. Microbiol, 22: 968 (1985). 19.- Gentry, M.L., Confer, A.W., and Kreps, J.A.: Simple visual assay for determination of Pasteurella haemolytica cytotoxin neutralizing antibody titers in cattle sera. J. Clin. Microbiol, 22: 968 (1985). 20.- Gonzalez, C.T. and Maheswaran, S.K. 1993. The role of induced virulence factors produced by Pasteurella haemolytica in the pathogenesis of bovine pneumonic pasteurellosis: Review and hypothesis. Br. Vet. J. 149: 183- 193 21.- Himmel, M.E., Yates, M.D., Laverman, L.R. and Squire, P.G.: Purification and partial characterization of a macrophage citotoxin from Pasteurella haemolytica. Am. J. Vet. Res., 43: 764 (1982). 22.- Lea Master, B.R., Evermann, J.F., and Lehmkuhl, H.D.: Identification of ovine adenovirus types five and six in an epizootic of respiratory trac disease in recently weaned lambs. J.A.V.M.A., 190: 1545 (1987). 23.-Lee, C.W. and Shewen, P.E. Evidence of bovine Immunoglobulin G1 protease activity in partially purified culture supernate of Pasteurella haemolytica A1. Can J Vet Res, 60:127-132 (1996) 24.- Lopez, A., Maxie, M.G., Savan, M., Ruhnke, H.L., Thomson, R.G., Barnum, D.A. and Geissinger, H.D.: The pulmonary clearance of Pasteurella haemolytica in calves infected with Bovine Virus Diarrhea or Mycoplasma bovis. Can. J. Comp. Med., 46:302 (1982). 25.- Martin, S.W., Meek, A.H., Davis, D.G., Thomson, R.G., Johnson, J.A., Lopez, A., Stephe, L., Curtis, R.A. y Prescott, 1980. Factors associated with mortality in feedlot cattle. The Bruce county beef project. Can J. Comp. Med., 44: 1. 26.- Morales A.J.F. Avances y perspectivas sobre inmunización contra la pasteurelosis neumónica en ovinos. Inmunología del aparato respiratorio. Editado por Aguilera F.J.L. et al. UNAM 1996. ISBN 968-36-4332-9 27.- Morales A.J.F. El Complejo Respiratorio de los Ovinos. Memorias del III Simposio de ovinos de pelo en Tamaulipas. INIFAP-SAGAR. Tamaulipas 1999-11-11 28.- Morales, A.J.F., Jaramillo, M.L., Oropeza, V.Z., Tórtora, P.J., Trigo.T.F.1993. Evaluación experimental de un inmunógeno de Pasteurella haemolytica en corderos. Vet. Méx., 24 (2): 97-105. 29.- Morales, A.J.F., Jaramillo, M.L., Tórtora, P.J., Trigo, T.F. 1993. Evaluación de campo de un inmonógeno de Pasteurella haemolytica en corderos. Rev. Tec. Pec. Mex. 31 (3): 163-169. 30.- Morales, A.J.F., Jaramillo, M.L, Ayala, A.D., Trigo, T.F.J. 1994. Evaluación de fagocitosis, efecto bactericida y citotoxicidad de Pasteurella haemolytica y Pasteurella multocida en macrófagos alveolares en bovinos. Rev. Lat.-Amer. Microbiol. 36: 57-66. 31.-Murray, J.E., Davies, R.C. , Lainson, F.A., Wilson, C.F. and Donachie, W. 1992. Antigenic analysis of iron-regulated proteins in Pasteurella haemolytica A and T biotypes by immunoblotting reveals biotype-specific epitopes. J. Clin. Microbiol. 138: 283-288 32.- Ortega, F.D., Tovar, L.G.V, López, G.C., Cuéllar, O.J.A y Morales, A.J.F. Respuesta serológica a cuatro biológicos comerciales y uno experimental para prevenir la Pasteurelosis Neumónica en ovinos. IV Congreso Latinoamericano de Especialistas en Pequeños Rumiantes y Camélidos Sudamericanos. Curitiba, Brasil. 2005. 33.- Pijoán, A.P., Aguilar, R.F. y Morales, A.J.F.Caracterización de los procesos neumónicos en becerros de la región de Tijuana, Baja California, México. Rev. Vet. Méx. 30 (2): 149-156. 1999. 34.-Ramirez- Romero, R. and Brogden, K.A. 1995. Patogenesis del daño pulmonar provocado por Pasteurella haemolytica. Rev. Lat- Amer. Microbiol. 35: 353-365 35.- Sánchez-Mejorada, P.H., Morales, A.J.F., Zepeda, M.O., Espino, R.G. y Trigo,T.F. 1988. Determinación de anticuerpos anticápsula y anticitotoxina de Pasteurella haemolytica en suero de bovinos, ovinos y caprinos. Rev. Téc. Pec. Méx. 26 (2): 192-201. 36.- Shewen, P.E., and Wilkie, B.N.: Cytotoxin of Pasteurella haemolytica acting on bovine leukocites. Infect. Immun., 35: 91 (1982). 37.- Shewen, P.E. and Wilkie, B.N.: Pasteurella haemolytica cytotoxin: Production by recognized serotypes and neutralization by typespecific rabbit antisera. Am. J. Vet. Res., 44: 715 (1983). 38.- Shewen, P.E., and Wilkie, B.N.: Evidence for the Pasteurella haemolytica cytotoxin as a product of growing bacteria. Am. J. Vet. Res., 46: 1212 (1985). 39.-Téllez LI y Salazar L. Evaluación de una vacuna comercial y una experimental contra la pasteurelosis neumónica en ovinos. Tesis de Licenciatura. Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán, UNAM. 2000. 40.-Trigo, F.J. 1987. El complejo infeccioso de los bovinos y ovinos. Ciencia Veterinaria 4: 1-36 41.- Trigo, T.F., Jaramillo, M.L., Aguilar, R.F. y Morales, A.J.F.1993. Contribución al conocimiento y prevención de la pasteurelosis pulmonar bovina y ovina en México. CANIFARMA, México. 42.- Velázquez, O.V., Mejía, S.T. y Díaz, G.R.: Frecuencia de aislamiento de Pasteurella haemolytica biotipo "A" a partir de hisopos nasales obtenidos de corderos de 0-90 días de edad en el valle de Toluca. 1er Congreso nacional de Producción Ovina (AMTEO). 183-185 (1988). 43.- Williams, W.: Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. 2:5 (1986). 44.- Wilkie, B.N. and Markham, R.J.F.: Sequential titration of bovine lung and serum antibodies after parenteral or pulmonary inoculatión with Pasteurella haemolytica. Am. J. Vet. Res. 40: 1690 (1979). 45.-Yates, W.D.G., Babiuk, L.A. and Jericho, K.W.F. 1983. Viral- bacterial pneumonia in calves: Duration of the interaction between bovine Herpesvirus-1 and Pasteurella haemolytica. Can. J. Comp. Med. 47: 257-264 Nota: Las referencias resaltadas con negritas, corresponden a algunos trabajos de investigación donde ha participado el autor de este escrito.