Biólogo con mención en Botánica Héctor Alonso Aponte Ubillús
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Biólogo con mención en Botánica Héctor Alonso Aponte Ubillús
Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Ciencias Biológicas Escuela Académico Profesional de Ciencias Biológicas Respuesta de Schoenoplectus americanus (Pers.) Vol. ex Sch. & R. Séll. (Cyperaceae) “junco” a diferentes concentraciones de nutrientes Tesis para optar al título profesional de Biólogo con mención en Botánica Por Héctor Alonso Aponte Ubillús 2007 I Dedico esta obra a mis padres Hector y Chela: mis primeros profesores a mis hermanos Juan José y Ana Lucía: mis amigos incondicionales y a Kathia: mi compañera inseparable II AGRADECIMIENTOS Deseo manifestar mi profundo agradecimiento al profesor Asunción Cano, asesor de esta tesis por haberme brindado su confianza y apoyo durante el desarrollo de todo el proyecto. Agradezco también a la profesora Mery Suni, al profesor César Arana y al biólogo Gabriel Clostre quienes fueron también piezas fundamentales con su asesoría y apoyo durante la tesis. A la ONG Terra Nuova, a la Sociedad Peruana de Ecodesarrollo (SPDE), al Consejo Superior de Investigación y a la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos quienes brindaron el financiamiento para llevar a cabo este proyecto. A Randy Rosales, Marcelino Riveros, Junior Chuctay, Kathia Tarqui y Juan José Aponte quienes me ayudaron en la elaboración de la parte experimental y permitieron que este proyecto se lleve acabo. A mis compañeros del Laboratorio de Florística del Museo de Historia Natural por su amistad, sus ánimos y por ser mi ejemplo de investigadores. Muchas Gracias III RESUMEN Schoenoplectus americanus (Pers.) Volkart ex Schinz & R. Séller (sinónimo de Scirpus americanus Pers.) conocido comúnmente como “junco” es una especie muy frecuente a lo largo de la costa peruana. Habita en ambientes ligados a cuerpos de agua, como los humedales de la costa central del Perú. En los últimos años, estos ambientes se han visto afectados por procesos de eutrofización. Estos procesos se caracterizan por la abundancia del nitrógeno y fósforo en el medio ambiente acuático. En el presente estudió se evaluó la respuesta fisiológica de Schoenoplectus americanus a niveles de materia orgánica altos, medios y bajos como los disponibles en los humedales de la costa central del Perú en un experimento de laboratorio. La etapa inicial del estudio comprendió la colecta de fango en localidades de la costa donde se distribuye esta especie, para determinar las concentraciones de nutrientes en el ambiente natural de la planta. Posteriormente se procedió a la colecta y traslado de individuos desde la laguna “El Paraíso” hacia la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, donde se llevó a cabo un experimento exponiendo a las plantas colectadas a niveles bajos, medio y alto de nitratos y fosfatos siguiendo como parámetros los datos obtenidos en la etapa inicial. El experimento tuvo una duración de dos meses durante los cuales se evaluó la variación del número de tallos (tallos nuevos por planta), variación del número de yemas (yemas nuevas por planta), número de tallos senescentes, crecimiento total (número de tallos y yemas nuevos por planta); variación de la biomasa fresca (biomasa final menos biomasa inicial) y floración por planta en cada tratamiento. Terminado el experimento se hizo un análisis del peso seco por tratamiento así como un análisis del contenido de N, P, K, Ca y Mg en los tejidos de la planta completa. Los resultados fueron analizados por tratamientos y agrupados según su concentración de nitratos y fosfatos. Se aplicaron los test de ANOVA y el test de agrupamiento de Duncan mediante el software SPSS Ver 12.0. Se determinó que las concentraciones a utilizar para los tratamientos serían 1mg/L (concentración baja); 15mg/L (concentración media); y 30 mg/L (concentración alta) de nitratos y fosfatos, la cuales fueron combinadas en nueve tratamientos distintos. IV El análisis de los resultados obtenidos para la variación del número de tallos, crecimiento total, variación de la biomasa fresca, el peso seco de las plantas y el contenido de N, K, y Ca en los tejidos de la planta mostraron diferencias significativas entre los tratamientos (p<0.05) pudiendo apreciar que los promedios aumentaron en forma directamente proporcional a la concentración de nitratos en los tratamientos. Los análisis de Duncan mostraron agrupamientos entre los datos para estos mismos parámetros agrupando generalmente los tratamientos de acuerdo al contenido de nitratos. Sólo florecieron los tratamientos de baja concentración de nitratos a partir de los 45 días. La variación del número de yemas mostró tener los mayores promedios en los tratamientos de mayor concentración de nitratos y concentraciones bajas de fosfatos. La senescencia de los tallos mostró ser inversamente proporcional a la concentración de nitratos en los tratamientos, sin embargo la relación de estos dos últimos parámetros con el contenido de nutrientes se pone en discusión. Por los datos obtenidos se deduce que la concentración de nitratos en los tratamientos fue el principal factor determinante de los cambios en el crecimiento, fenología, biomasa y concentración de N, K y Ca en los tejidos de la planta durante el experimento. Ningún efecto fue causado debido a la variación de las concentraciones de fósforo. Se postula que respuestas similares a las obtenidas en laboratorio deberían apreciarse en el campo frente a un fenómeno de eutrofización a nivel de las comunidades de esta especie. Son necesarios sin embargo esfuerzos por plantear planes de monitoreo in situ a fin de conocer a profundidad la ecología de las poblaciones de esta especie. V ABSTRACT Schoenoplectus americanus (Pers.) Volkart ex Schinz & R. Séller (sinonym of Scirpus americanus Pers.) known as “junco” is a common specie along the Peruvian coast that lives in places related to water bodies like the Peruvian coastal wetlands. This ecosistems have been affected by eutrophication processes in the last years. The eutrophication process is characterized by the abundance of nitrogen and phosphorus in the aquatic mean. The present study tested the reaction of this specie at low, medium and high leves of nitrogen and phosphorus using the concentration in the Peruvian wetlands as a parameter on a laboratory experience. The first stage of the study was the collection and determination of the organic composition of the soil in the habitat of the plant. Then, the plant specimens where moved from the lake “El Paraíso” to the Universidad Nacional Mayor de San Marcos where the experiment was prepared using the results obtained in the first stage. The experiment was made in two months. The plant growth as number of new stems (new stems per plant), number of new buds (new buds and stems less that 5cm height per plant) and number of death stems per plant; total growth (new stems+ new buds per plant); fresh biomass and flowers blooming were evaluated in each treatment. At the end of the experiment it was calculated the dried biomass and it was made an N, P, K, Ca and Mg tissue content analysis in each treatment. The results were analyzed in each treatment, grouped by its nitrogen and phosphorus content with the test ANOVA and Duncan grouping test using SPSS 12.0. It was determined in the first stage that the concentration of nitrates and phosphates to use would be 1mg/L (low concentration); 15mg/L(mean concentration); and 30mg/L (high concentration) that where used combined in nine different treatments. The statistic analysis of the results obtained in the number of new stems, total growth, fresh biomass, dried weight and in the N, K, y Ca tissue content showed significant differences between the treatments (p<0.05) showing the increase of the means directly proportional to the nitrates content in the treatments. The Duncan analysis showed the grouping between the results in these same parameters, grouping the treatments generally by the nitrate content in the treatments. Flower blooming was reported only in VI the treatments of low nitrates concentration since the day 45 of evaluation. The number of new buds showed the biggest means in the highest nitrates and lowest phosphates content treatments and the senescence seemed to be inversely proportional to the nitrates content in the treatments, but the relation of this parameters with the nutrient content in the treatments is discussed. With the results obtained it is possible to affirm that the nitrates content in the treatments was the principal factor in the changes in growth, phenology, biomass, and tissue content of N,K, and Ca. There was no effect detected by the phosphate content in the treatments. Similar answers could be possible in the specie during in situ eutrophication proccess. However it is necessary to start attempts of monitoring wetland conditions to know what the community responses to these changes are. VII CONTENIDO Dedicatoria Agradecimientos Resumen Abstract Contenido Lista de Tablas y Figuras Lista de Anexos y Láminas II III IV VI VIII IX XII Introducción 1 Objetivos 5 Antecedentes 6 Metodología 1. Área de Estudio 2. Parte experimental 2.1. Primera etapa: Conocimiento de los Nutrientes en el Fango 2.2. Segunda Etapa: Evaluación de campo y colecta de la muestras para Experimentación 2.3. Tercera etapa: Experimentación en Laboratorio 10 Resultados 1. Primera etapa: Conocimiento de los Nutrientes en el Fango 2. Segunda Etapa: Evaluación de campo y colecta de la muestras para Experimentación 3. Tercera etapa: Experimentación en Laboratorio 3.1. Condiciones de Temperatura y Humedad durante el experimento 3.2. Resultados de la medición de parámetros biológicos durante el experimento 3.3. Control Cualitativo de las soluciones 3.4. Resultados del Análisis de composición NPK tisular 22 Discusión 1. Nutrientes en los fangos de las Lagunas 2. Implicancia de los resultados 58 Conclusiones Recomendaciones 62 63 10 12 12 14 15 22 25 26 26 26 52 52 58 60 VIII Referencias Bibliográficas 64 ANEXOS LÁMINAS FOTOGRÁFICAS Lista de Tablas y Figuras Página TABLA 1 TABLA 2 TABLA 3 TABLA 4 Esquema de preparación de las soluciones para los tratamientos del experimento. Datos preliminares de la Química del sedimento donde vive Schoenoplectus americanus. Composición Químicas de las Soluciones utilizadas en el experimento. Datos antes de iniciar el experimento. 17 23 24 27 TABLA 5 Variación del Número de Tallos por tratamiento a lo largo del experimento. 28 TABLA 6 Variación del Número de Tallos en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. 29 TABLA 7 Aumento del número de tallos en los tratamientos por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. 30 TABLA 8 TABLA 9 TABLA 10 Variación del Número de Yemas por planta a lo largo del experimento. Variación del Número de Yemas en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Aumento del número de yemas en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. TABLA 11 Cantidad de tallos senescentes por planta o a lo largo del experimento. TABLA 12 Cantidad de tallos senescentes por planta en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. TABLA 13 TABLA 14 31 33 33 34 35 Cantidad de tallos senescentes en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. 35 Crecimiento Total de las plantas por tratamiento a lo largo del experimento. 37 IX TABLA 15 TABLA 16 TABLA 17 TABLA 18 TABLA 19 TABLA 20 TABLA 21 TABLA 22 TABLA 23 TABLA 24 TABLA 25 TABLA 26 TABLA 27 TABLA 28 TABLA 29 TABLA 30 Crecimiento Total en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Crecimiento total en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Floración de los plantas por tratamiento a lo largo del experimento. Floración en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Floración en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Peso Fresco de las plantas por tratamiento a lo largo del experimento. Peso Fresco de los Individuos en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Peso fresco en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Aumento del Porcentaje de Peso Fresco de los Individuos por tratamiento a lo largo del experimento. 37 38 39 40 41 42 43 44 45 Porcentaje de aumento de peso fresco en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. 46 Aumento en peso de los individuos en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. 47 Peso Seco de los individuos por tratamiento al finalizar el experimento. Porcentaje de materia seca por tratamiento al finalizar el experimento. Peso seco de los individuos en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) al final del experimento. Porcentaje de materia seca las plantas en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) al final del experimento. Peso seco de los individuos en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) al finalizar el experimento. 48 48 49 50 51 X TABLA 31 TABLA 32 TABLA 33 TABLA 34 TABLA 35 TABLA 36 TABLA 37 FIGURA 1 FIGURA 2 FIGURA 3 FIGURA 4 FIGURA 5 FIGURA 6 FIGURA 7 Porcentaje de materia seca las plantas en los tratamientos por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) al final del experimento. 51 Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado su porcentaje en la planta entera. 52 Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por los gramos de cada elemento por individuo por tratamiento. 53 Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado su porcentaje en la planta entera de acuerdo a la cantidad de nitratos disponible en los tratamientos. 54 Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por su cantidad en gramos de cada elemento por individuo de acuerdo a la cantidad de nitratos disponible en los tratamientos. 55 Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por su porcentaje en la planta entera de acuerdo a la cantidad de fosfatos disponible en los tratamientos. Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por los gramos de cada elemento por individuo de acuerdo a la cantidad de fosfatos disponible en los tratamientos. Mapa de la Costa de Lima en donde se señalan las localidades de muestreo Curva de Performance obtenida a partir de las parcelas realizadas en la Laguna El Paraíso (Huacho - Lima). Variación del Número de Tallos de acuerdo a la concentración de Nitratos. Crecimiento Total de acuerdo a la concentración de nitratos. Floración de acuerdo a la concentración de nitratos. Variación del Peso Fresco de acuerdo a la concentración de nitratos. Resultados obtenidos de los datos agrupados por su contenido de nitratos para el peso seco. 56 57 11 25 30 38 40 44 50 XI Lista de Anexos y Láminas ANEXO 7: ANEXO 8: ANEXO 9: Datos bibliográficos y experimentales de la composición del fango de los humedales. Datos de temperatura y Humedad Relativa obtenidos durante la etapa de aclimatación y la etapa experimental Número de tallos y diferencia de número de tallos de cada planta a lo largo del experimento. Número de yemas y diferencia de número de yemas de cada planta a lo largo del experimento. Número tallos senescentes de cada planta a lo largo del experimento. Crecimiento total (número de tallo + número de yemas) de cada planta a lo largo del experimento. Número de flores de cada planta a lo largo del experimento. Peso fresco de cada planta a lo largo del experimento. Peso seco de cada planta al finalizar el experimento. Lámina 1: Lámina 2: Lámina 3: Lámina 4: Lámina 5: Lámina 6: Localidades de Muestreo Análisis de Parcelas en el Humedal "El Paraíso" Aclimatación y establecimiento del experimento. Pesado mensual de las plantas Control de Parámetros: Nitratos y Fosfatos Resultados del Experimento ANEXO 1: ANEXO 2: ANEXO 3: ANEXO 4: ANEXO 5: ANEXO 6: XII INTRODUCCIÓN Los humedales son ecosistemas que tienen substratos afectados por agua e incluyen plantas que dependen de la misma (Mitsch & Gosselink, 1993). Estos ecosistemas se encuentran entre los más importantes del planeta, ya que controlan las corrientes de agua y mantienen su calidad, regulan los niveles de carbono global, tienen un valor cultural y recreacional, además de proveer de hábitat a animales y plantas únicamente adaptados a ecosistemas húmedos (Clarkson et al., 2004). Entender cuáles son las respuestas que estos ecosistemas presentan al verse impactado por el ser humano ha sido objeto de múltiples investigaciones (León et al, 1995;Young, 1998; Montoya, 1998; USDA, 2000; Christophenson, 1994, Cano et al., 1998; Clarkson et al., 2004; Cooke et al., 1990). Uno de los principales factores que determinan el estado de los humedales es la calidad y cantidad del agua (Young, 1998). El agua se encuentra íntimamente ligada al suelo ubicado en el fondo de las lagunas. Este último influye en la vida de Foto 1. Schoenoplectus americanus; una especie frecuente en los humedales de la costa peruana, motivo de la presente investigación. 1 la planta, ya que sus propiedades químicas y físicas tienen fuertes interacciones con las raíces. Los cambios nutricionales, de pH y minerales son factores que afectan directamente a la planta, evidenciándose en su morfología y desarrollo (Bidwell, 1979). En las últimas décadas la eutrofización ha sido una amenaza para los ecosistemas acuáticos. Se entiende por eutrofización al proceso de sobre enriquecimiento de ecosistemas acuáticos con nutrientes (Carpenter, 2005). Un humedal eutrófico es aquel humedal que presenta un elevado nivel de nutrientes. Este proceso puede alterar dramáticamente la composición de la vegetación debido a la especificidad de las especies para ocupar ambientes con amplia o baja disponibilidad de nutrientes. Es así que los humedales que poseen mayor diversidad de especies son generalmente aquellos que poseen niveles de nutrientes intermedios, mientras que los ambientes con bajo nivel de nutrientes (oligotróficos) y con alto nivel de nutrientes (eutrófico) poseen una menor diversidad de especies. Los cambios en las poblaciones pueden ser potencialmente interpretados como indicadores de estos cambios en el régimen de nutrientes (Clarkson et al., 2004). Ejemplo de ello es el alga Euglena gracilis considerada una de las especies indicadoras de la calidad del agua para los Pantanos de Villa (Lima, Perú), al responder por medio del aumento poblacional frente a situaciones de eutrofización (Montoya, 1998). Por el contrario, otras especies reaccionan a la deficiencia de nutrientes en los humedales. Entre estas últimas cabe mencionar a plantas con flores como Schoenus brevifolius, Carex gaudichaudiana y Gleichenia dicarpa quienes reaccionan por medio de variaciones en los niveles de fósforo y nitrógeno en sus tejidos. Asimismo hay especies que no son afectadas por los niveles de nutrientes en su crecimiento. Entre ellas tenemos a Typha orientales y Schoenodorus phoenix (Clarkson et al., 2004). La contaminación de los humedales costeros de Lima ha sido causada por los silos y desagües de las poblaciones aledañas, afectando de esta forma las condiciones del agua y suelo (Young, 1998). La eutrofización derivada de los cultivos agrícolas por adición de fosfatos y nitratos como resultado de actividades humanas es otro de los principales problemas que está afectando gravemente a este tipo de ecosistemas (Tyler, 1994; Graham et al., 2005; Cooke et al., 1990). Además, de todos los humedales costeros, sólo uno se encuentra protegido en el sistema oficial (Sistema 2 Nacional de Áreas Naturales Protegidas por el Estado, SINANPE): Los Pantanos de Villa (León, et al., 1997). De la misma forma a nivel mundial se han visto cambios dramáticos debido a la intervención del ser humano. Actualmente, Canadá y Estados Unidos han perdido la mitad de estos ecosistemas en los últimos cien años (Christopherson, 1994). Asimismo debido al establecimiento de comunidades europeas, los humedales de Nueva Zelanda han sido reducidos al 10% (Clarkson et al., 2004). El nitrógeno y el fósforo han sido utilizados como indicadores de procesos de eutrofización (Cruz, 2002; Pesson, 1979, Chang et al., 2006) y han mostrado ser vitales para la vida de la planta (Clarkson et al., 2004; Boyd, 1970, Graham et al., 2005). El nitrógeno es importante para las funciones de respiración, síntesis de proteínas, formación del DNA y crecimiento. Las formas más comunes de nitrógeno son el nitrato, nitrito, amoniaco amonio, nitrógeno como gas libre, y formas orgánicas como aminoácidos y proteínas. El nitrógeno es liberado del medio acuático (masa de agua) mediante los procesos de nitrificación y desnitrificación así como por la absorción de plantas y acumulación en el substrato (Miglio, 2003). De la misma forma, el fósforo es vital para la composición de compuestos proteicos y para la transferencia de energía dentro de las células. Este último se encuentra en los ecosistemas acuáticos en forma de fósforo orgánico e inorgánico (Ramírez, 1992). El fósforo sale del medio acuático por absorción de las plantas, por acumulación en el suelo de las lagunas y por precipitación de fosfatos insolubles (proceso que ocurre a un pH mayor que 8) (Miglio, 2003). El cambio climático aumentará la temperatura superficial de las lagunas, aumentando por consecuencia los niveles de mineralización y liberación de nutrientes como el nitrógeno y fósforo, creando por lo tanto un estado de eutrofización (Castro, 2002), por lo que intentos de conservación, restauración y creación de humedales son necesarios (Fisher & Acreman, 2004). Conocer cuáles serían los efectos de estos nutrientes en plantas de los humedales costeros nos permitiría pronosticar cuáles serían los cambios en las poblaciones que comparten estos ambientes. Schoenoplectus americanus (Pers.) Volkart ex Schinz & R. Séller (sinónimo de la especie anteriormente denominada Scirpus americanus Pers.), conocido comúnmente como “junco”, es una planta frecuente en los humedales de la costa 3 central del Perú, perteneciente a la familia Cyperaceae (León & Young, 1996) (Foto 1.). Esta especie posee dos tipos de reproducción: a) clonal, por medio de la propagación por rizomas que generan nuevos rametos, y b) sexual por medio de flores. La reproducción sexual produce aquenios, que al germinar formarán plantas (genetos) con múltiples clones (rametos). Cada rameto está compuesto por múltiples tallos que pueden llegar hasta 1.5 metros, los cuales presentan una hoja vestigial en la parte inferior. En la época de floración brotan un gran número de espigas en la parte superior del tallo formando una inflorescencia pseudo lateral. Cada espiga contiene hasta 20 espiguillas color rojizo (Adams, 1994). Esta especie ha mostrado ser muy adaptable a los hábitats de los humedales costeros, encontrándose en espejos de agua, totorales, zonas arbustivas y gramadales además de formar grandes comunidades denominadas vegas de cyperáceas (León et al., 1995). Muestra de ello es la capacidad que posee para resistir los cambios de estrés salino sobre otras especies características de humedales como Eleocharis pallustris y Sagitaria lancifolia (Howard & Menselssohn, 1999). Actualmente viene siendo utilizada para estudios de tipo molecular y ecológico con la finalidad de apreciar cuales serían sus respuestas frente a los cambios climáticos globales (Blum et al., 2005) presentándose como especie potencial para el análisis de estos cambios. 4 OBJETIVOS El primer objetivo de este estudio es conocer cuáles son las características fisicoquímicas del fango en el cual crece Schoenoplectus americanus por medio de revisiones bibliográficas y muestreos de suelo en los humedales de la costa Limeña. Un segundo objetivo del estudio es conocer cual es la respuesta de Schoenoplectus americanus frente a concentraciones de nitratos y fosfatos bajas, medias y altas con respecto a su ecosistema natural, evaluando de esta forma su potencial como indicador de niveles de nutrientes. Foto 2. Se muestra uno de los ambientes en el cual crece Schoenoplectus americanus. Nótese el suelo seco y agrietado donde se encuentran creciendo los tallos. 5 ANTECEDENTES 1. Ecofisiología de Schoenoplectus americanus y especies relacionadas Pocos estudios han sido realizados estudiando los aspectos ecológicos y fisiológicos de S. americanus. Dentro de ellos tenemos el trabajo de Boyd (1970), quien realizó estudios demostrando que la variación de toma de nutrientes aumenta únicamente en el periodo de crecimiento en Schoenoplectus americanus, posterior a ello llega el periodo de floración que detiene este proceso. En su estudio incluyó además análisis de nitrógeno, fósforo, potasio entre otros minerales para analizar los cambios en el nivel de nutrientes a nivel tisular. Asimismo, en el trabajo de Blum et al (2005), Schoenoplectus americanus es una especie que es considerada como modelo de estudios de poblaciones en pantanos y de respuestas ecológicas a los cambios climáticos globales por su capacidad de Foto 3. El “junco” brinda materia prima para elaborar artículos artesanales como los que se muestran. Esta actividad mantiene a muchas familias de la costa peruana. 6 mostrar el aumento de CO2 ambiental mediante la respuestas estomáticas, y teniendo además preferencias por ambientes donde este gas es abundante. En estudios realizados en Kingsville organizados por la USDA (United States Department of Agricultural Natural Resources Conservation Service) se nombra a Schoenoplectus americanus como una de las especies más aprovechadas como biorremediador por su gran capacidad de captación de nutrientes, lo que permite el control de la cantidad de nutrientes en los ecosistemas (USDA, 2000). Sin embargo no se reporta cuales son las respuestas fisiológicas de la población frente a las condiciones de contaminación. Otras especies del mismo género han merecido atención para algunos estudios en donde e ha analizado la relación entre los nutrientes y la especie. Tal es el caso de Schoenoplectus mucronatus (L.) Pall. subsp. robustus (Miq.) T. Koyama, donde se ha demostrado que el nitrógeno y el potasio son los elementos dominantes en los tejidos de angiospermas acuáticas como estas (Hwang et al., 1996; Hwang et al., 2000). Estudios realizados en otras macrofitas emergentes demuestran que el nitrógeno es el factor determinante para el crecimiento (Grace, 1988). Miglio (2003) menciona al género Schoenoplectus como un género potencial para tratamiento de agua residual, al evaluar la capacidad de Schoenoplectus tatora para el tratamiento de aguas servidas en la ciudad de Puno, logrando remover hasta un 94% de nitratos y un 59% de fósforo Especies muy relacionadas a Schoenoplectus americanus como Scirpus maritimus y Scirpus robustus han mostrado cambios en fisiología de acuerdo a los niveles de nutrientes que presentaba el fango donde vivían (Kantrud, 1996). Clarkson, et al. (2003) menciona también a varias especies pertenecientes a las Cyperaceas que tienen este uso como indicadores, entre ellas Schoenus brevifolius, Carex secta, C. gaudichaudiana y Carex virgata. Schoenoplectus americanus, tiene un ciclo de vida que depende de las condiciones ambientales, mostrando cambios en su fenología (Boyd, 1970). 7 2. Monitoreo y Control de Nutrientes en Humedales Peruanos y del Mundo Los humedales de la costa central del Perú han recibido especial atención en los últimos años. Ejemplo de ello tenemos los trabajos de Castro (2002) y Cruz (2002) realizados en la Laguna El Paraíso (Huacho), donde se detallan los niveles de nutrientes disponibles en el agua de las lagunas, sin embargo no se dan datos a cerca de los niveles de nutrientes en el fango de las lagunas, punto de acumulo de nutrientes y sustrato relacionado con la especie en estudio. En estos trabajos se explican muy bien los papeles del Nitrógeno y Fósforo como principales nutrientes que influencian en el crecimiento de las plantas acuáticas. Para la Laguna de Medio Mundo tenemos el trabajo de Ramírez (1992). Este trabajo incluye también datos a cerca de las condiciones de nutrientes en la laguna con lo que concluye para la fecha de estudio que la condición de la laguna es eutrófica. No proporciona sin embargo datos a cerca del fango de las lagunas. Para los Pantanos de Villa tenemos los trabajos de Samanez y colaboradores (1995) y Quispe & Valenzuela (1995) que nos dan datos referentes al nivel de nutrientes en el agua de las lagunas, mas no nos proporcionan datos a cerca del fango. Para la fecha del estudio (1995), Samanez y colaboradores nos indica que los niveles fisicoquímicos del agua de la laguna se encontraban en un nivel regular. En algunos países como Nueva Zelanda se ha logrado publicar manuales de monitoreo de humedales en los cuales se incluyen capítulos de cómo utilizar a las plantas en la interpretación del estado de nutrientes y eutrofización. El trabajo de Clarkson y colaboradores (2004) es un buen ejemplo de ello. En este trabajo además se resalta la importancia del contenido de nitrógeno y fósforo en el tejido de las plantas, ya que la proporción de los mismos indica cuál sería el posible estado de nutrientes en el medio donde se encuentran. Actualmente no se han publicado datos a cerca del contenido de nutrientes en los suelos de los Pantanos de la Costa Central del Perú. Sin embargo hay varios trabajos que muestran la química del suelo en varias zonas del mundo entre los que se encuentran las investigaciones de Foster (2004), Graham y colaboradores (2005), Schwars (1996), Hwang et al. (2000) y Kantrud (2006). 8 3. Usos de Schoenoplectus americanus Schoenoplectus americanus se encuentra nombrada en el Catálogo Mundial de Plantas de Importancia Económica elaborado por Wiersema y León (1999). León & Young (1996) en su trabajo de plantas acuáticas peruanas, nos indica que esta planta viene siendo utilizada desde tiempos pre-colombinos y su tradición persiste hasta ahora siendo utilizada por los pobladores que viven en zonas aledañas a humedales de la costa central del Perú como materia prima para fabricar cestos artesanales y otros productos utilizando la fibra de esta especie (León et al 1998) (Foto 3). 9 MÉTODOS 1. AREA DE ESTUDIO El área de estudio corresponde a los humedales donde se realizaron colectas de suelo y especimenes biológicos. Estos humedales se ubican en la costa central del Perú, en el departamento de Lima, entre los 10º54`30`` y los 12º13`S, desde el nivel del mar hasta altitudes no mayores de 15 m. Corresponde a 4 localidades: Pantanos de Villa, Laguna El Paraíso, Albuferas del Medio Mundo y Humedal de Puerto Viejo (Lámina 1). Pantanos de Villa se encuentra al sur de la ciudad de Lima en el distrito de Chorrillos. Es un humedal de que posee zonas de juncal, gramadal, vega de ciperáceas y varios cuerpos de agua. Además se encuentra protegido por el (SINANPE) (León, et al., 1997). La Laguna El Paraíso se encuentra al norte de la ciudad de Lima en el Distrito de Huacho. En este humedal se localiza una vega de S. americanus bastante extensa Foto 4. Colecta de suelo en el Humedal “Medio Mundo” (Huacho), se aprecia la gran cantidad de tejido vegetal descompuesto que forma parte del sustrato de Schoenoplectus americanus. 10 Figura 1. Mapa de la Costa de Lima en donde se señalan las localidades de muestreo. hacia los lados norte y sur de la localidad . Las masas de agua en este humedal están divididas en Laguna Norte y Laguna Sur, siendo la laguna norte la de mayor extensión (Castro, 2002). Por la gran cantidad de junco, en esta localidad son frecuentes las actividades de extracción del junco con fines comerciales (Foto 6). Su cercanía con el mar determina la influencia del agua de mar en este ambiente durante las mareas altas. Las Albuferas de Medio Mundo se encuentran al norte de la ciudad de Lima, en el Distrito de Végeta. Es una localidad que presenta una gran vega de S. americanus hacia el lado norte, y un espejo de agua hacia el lado sur, con una extensión total de 261,5 ha. (Cano, et al., 1996) El Humedal de Puerto Viejo se encuentra al Sur de la ciudad de Lima en el Distrito de Chilca. Este humedal posee grandes extenciones de gramadal, vega de cyperáceas (con predominio de S. americanus) y espejos de agua. 11 2. PARTE EXPERIMENTAL La parte experimental comprendió 3 etapas, detalladas a continuación: 2.1. Primera etapa: Conocimiento de los Nutrientes en el Fango Esta primera etapa consistió en la investigación de la disponibilidad de nutrientes que existe en el fango de los hábitats donde esta planta ha sido reportada o de los hábitats potenciales para la planta. Para ello se realizó un revisión de la bibliografía disponible (Foster 2004; Schwarz, et al., 1996; Graham, S. et al., 2005; Hwang, et al., 2000 y Kantrud, 1996) y a su vez se realizaron 4 muestreos de fango, uno por cada localidad anteriormente señalada. La finalidad de estos muestreos es unir estos datos a los datos bibliográficos para así tener un espectro de la situación actual de las concentraciones de nutrientes en los humedales de la costa peruana. Para la colecta de suelos fueron realizadas durante los meses de marzo y abril del 2006, realizando en siguiente procedimiento: a. Ubicación de los ambientes sumergidos donde se encuentre la especie: Se tomaron datos de ubicación de los diversos ambientes donde se encontró poblaciones sumergidas de S. americanus. b. Medición de la profundidad en la cuál las raíces tienen contacto con el fango: Para ello se extrajeron 10 plantas al azar en cada localidad en las cuales se midió la profundidad en la que se encontraban enterradas los rizomas (desde el suelo hasta la ubicación del rizoma, sin contar la masa de agua). c. Colección de muestras de fango: Una vez determinados los parámetros anteriores (ubicación y profundidad de los rizomas), se colectó el fango de tres puntos en cada localidad donde se encontraron las poblaciones identificadas anteriormente, tomando en cuenta la profundidad donde se encontraban las raíces. En cada punto se midió un área de 1m2, de la cual se tomaron cinco submuestras al azar. Las cinco submuestras fueron mezcladas formando una muestra (Foto 4.). 12 Una vez realizada la colecta se procedió a analizar las muestras de la siguiente forma: a. Análisis de Materia Orgánica Total: Las muestras correspondientes a una misma localidad y a ambientes similares fueron mezcladas, excepto una de las muestras de Pantanos de Villa y otra de la Laguna El Paraíso, las cuales fueron separadas al apreciar que la consistencia no era la misma. Con las muestras se realizó un análisis de materia orgánica total. Así se obtuvo 4 valores promedio de materia orgánica total en el fango, cada uno correspondiente a una localidad. Para la medición del Nitrógeno total se llevó a cabo el método de micro Kjeldahl. Para la medición del Fósforo total se utilizó el método de Olsen Modificado, con un extracto de NaHCO3O, 5M, pH 8.5. Para el Potasio se utilizó la extracción en Acetato de Amonio 1N pH 7.0. El Magnesio fue determinado por Espectrofotometría de absorción atómica. A su vez se midió la conductividad y el pH por medio de la lectura de extracto en relación sueloagua 1:1 y en pasta saturada utilizando el método del conductímetro y potenciómetro para la conductividad y el pH respectivamente. Este análisis se llevó a cabo por el laboratorio de Análisis de Agua, Suelo y Medio Ambiente de la Universidad Nacional Agraria La Molina siguiendo la metodología propuesta por Chapman & Pratt (1984) y Reynoso y colaboradores (1993). b. Análisis de Materia Orgánica Disponible: Se obtuvieron 6 valores de materia orgánica disponible para la planta. En esta etapa se decidió evaluar independientemente las muestras de Pantanos de Villa y de Medio Mundo separadas anteriormente dado que eran distintas. Para la medición del nitrógeno disponible como Nitrato se realizó el Método de Reducción de Cadmio. Para la medición del nitrógeno disponible como amonio se utilizó el método de Nessler. Para medir el Fósforo disponible se utilizó el método del ácido ascórbico. Para determinar la cantidad de potasio disponible se utilizó el método del tetra feníl borato. A su vez se midió el pH y la Conductividad utilizando el método del potenciómetro y el conductímetro respectivamente. Este análisis fue realizado por el Laboratorio de Fisiología 13 Vegetal de la Facultad de Ciencias Biológicas perteneciente a la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. 2.2. Segunda Etapa: Evaluación de campo y colecta de la muestras para Experimentación Para la parte experimental fue necesario contar con muestras biológicas de la especie en estudio. Para la colecta de las mismas se utilizó el siguiente procedimiento: a. Elección de la localidad de muestreo: Una vez realizados los análisis de materia orgánica y la revisión bibliográfica se eligió una de las localidades como punto de colecta. Para la elección se consideró la localidad que tuvo valores intermedios de nutrientes. b. Trámite del Permiso de Colecta: Se tramitó el permiso de colecta respectivo en INRENA para la colecta de los individuos en la localidad seleccionada. c. Evaluación de la densidad de individuos por parcelas: En la localidad seleccionada se evaluaron las poblaciones sumergidas por medio del método de parcelas con la finalidad de conocer la densidad de los individuos en esta localidad y repetir los mismos datos en la parte experimental. En el mes de mayo del 2006, se realizaron 10 parcelas de 1m2 en donde se contabilizaron los tallos de los individuos (Lámina 2). Estas parcelas fueron instaladas sobre poblaciones sumergidas de S. americanus. d. Colecta de los individuos: En el mes de junio del 2006, fueron colectados plantas correspondientes a las zonas sumergidas de la localidad seleccionada. De cada planta se contabilizaron el número de tallos. De esta forma, junto con el dato anteriormente obtenido por las parcelas (número de tallos por área), se logró saber cuál es la densidad de genetos (plantas fisiológicamente independientes) por metro cuadrado, dato que fue tomado en cuenta para considerar la cantidad de genetos que se utilizaron por balde en la parte experimental. Dos muestras de tallos e inflorescencias fueron 14 colectadas y depositadas en el herbario USM (H. Aponte 198 depositado en USM) 3.3. Tercera Etapa: Experimentación en Laboratorio Una vez colectados los individuos se siguió el siguiente procedimiento: a. Etapa de aclimatación: Los individuos colectados fueron transportados a la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, donde se había preparado un ambiente perteneciente al Laboratorio de Fisiología Vegetal de esta facultad. Aquí se llevaron a cabo todas las demás evaluaciones. Inicialmente pasaron por una etapa de aclimatación. Esta etapa tuvo una duración de cinco semanas entre los meses de junio y julio del 2006. Durante este periodo las plantas fueron colocadas en baldes de plástico y alimentadas con la Solución Nutritiva San Marcos © (Laboratorio de Fisiología Vegetal, Facultad de Ciencias Biológicas, Derechos Reservados) utilizando sólo la octava parte de la concentración sugerida por el producto (Lámina 3). En esta etapa se realizó también la propagación clonal de los individuos mediante el la separación de las plantas en dos o tres nuevos clones, de acuerdo al tamaño inicial. De esta forma se obtuvieron un aproximado de 300 clones provenientes o no de un mismo geneto, cada uno fisiológicamente independiente y con una cantidad similar de rametos. De aquí en adelante cada uno de estos clones será llamado “planta”. Las plantas fueron mezcladas en cuatro baldes con la solución nutritiva. Al término de la etapa de aclimatación fueron seleccionadas al azar 270 plantas para el trabajo experimental. A cada planta se le retiraron los tallos senescente o con clorosis total a fin de empezar el estudio con plantas sin tallos senescentes que pudieran influir en la composición líquida de las soluciones de los tratamientos al descomponerse. b. Mediciones previas a la etapa experimental: Antes del inicio del experimento cada una de las 270 plantas fue pesada con una balanza eléctrica (precisión de 0.01g). A su vez se registró su estado fenológico (vegetativo o de floración) y se contabilizó el número de tallos y yemas. Fue considerado como tallo a aquellos que alcancen los 5 cm de altitud, 15 dado que a este tamaño aparecen por completo los caracteres fotosintéticos (color verde intenso). Los menores de 5 cm fueron considerados yemas (color blanco). A cada planta medida se le asignó un código, el cuál fue anotado con plumón indeleble en una etiqueta plástica y amarrado con rafia a la base de la planta, a la altura del inicio de los tallos. c. Preparación de soluciones para la experimentación: Simultáneamente se prepararon soluciones nutritivas stock, que nos permitieron establecer los tratamientos para la parte experimental. Utilizando soluciones stock se preparó una solución para cada tratamiento. Cada solución varia en cuanto a la cantidad de nitratos y fosfatos disponibles para la planta de la siguiente forma : A) En las soluciones que requirieron concentraciones bajas de nitrato y fosfatos se consideraron los datos disponibles para la concentración de estos componentes en humedales oligotróficos. Estos datos fueron obtenidos del análisis de los datos en la primera etapa. B) En las soluciones que requirieron concentraciones medias de nitrato y fosfatos se consideraron los datos disponibles para las concentraciones promedio de estos componentes en los humedales muestreados. C) En las soluciones que requirieron concentraciones altas de nitrato y fosfatos se consideraron los datos disponibles para la concentración de estos componentes en humedales eutróficos. Las concentraciones fueron obtenidas de los análisis de los resultados y la bibliografía obtenida para la primera etapa. Dado que no siempre los nitratos y fosfatos se encuentran en la misma proporción en el medio acuático se decidió realizar una distribución factorial, tres niveles de nitratos con tres niveles de fosfatos (nueve tratamientos en total). Se planteó entonces el esquema de la Tabla 1. Los microelementos fueron colocados en la misma concentración en cada solución. 16 Tabla 1. Esquema de preparación de las soluciones para los tratamientos del experimento. Trat. = Tratamiento; Comp. = Componente. Comp. Trat.1 Trat.2 Trat.3 Trat.4 Trat.5 Trat.6 Trat.7 Trat.8 Trat.9 Nitratos Baja Baja Baja Media Media Media Alta Alta Alta Fosfatos Baja Media Alta Baja Media Alta Baja Media Alta d. Distribución de las plantas por tratamiento: Cada uno de los nueve tratamientos contó con tres repeticiones. Una vez realizadas las mediciones previas de densidad de individuos y preparadas las soluciones nutritivas se distribuyeron los individuos en los baldes donde se llevó a cabo el experimento. En cada balde se colocó una cantidad de individuos similar a la densidad de individuos encontrada en el humedal de colecta (Lámina 3). e. Experimento: Una vez aclimatadas, las plantas fueron colocadas en los baldes con las soluciones nutritivas preparadas anteriormente. Fueron colocadas 10 plantas por balde. Cada balde contenía entre 2 a 4 piedras de canto rodado que brindaron estabilidad y oscuridad a las raíces. Este periodo tuvo una duración de 2 meses entre los meses de julio y noviembre del 2006. Para asegurar que la concentración de las soluciones se mantengan a lo largo del periodo de evaluación, cada solución fue cambiada semanalmente por una solución nueva de la misma concentración. Durante esta etapa se realizaron las mediciones de los siguientes parámetros biológicos: Variación del número de tallos mayores a 5 cm por planta Este parámetro nos permitió medir el crecimiento de la planta por medio del conteo de los tallos. Para ello se restó el número de tallos contados cada 15 días del número de tallos contados una vez terminada la etapa de aclimatación. 17 Variación Número de yemas y tallos menores a 5 cm por planta Este parámetro nos permitió medir el crecimiento continuo de la planta por medio del conteo de las yemas. Para ello se restó el número de yemas contadas cada 15 días del número de yemas contadas una vez terminada la etapa de aclimatación. Senescencia de los tallos La senescencia representa el grado de envejecimiento de los tallos, y nos da una idea de los cambios en los estadios de la planta. Para obtener este valor se contó cada 15 días el número de tallos secos o en un estado de clorosis total por planta. Floración Este parámetro permitió apreciar los cambios en la fenología de las plantas y apreciar si es que los tratamientos provocaban algún cambio en ella. Para ello se contaron cada 15 días el número de tallos que presentaron flores por planta. Crecimiento total Este parámetro, compuesto de la variación mensual de los tallos y las yemas, nos permite medir el crecimiento total de cada una de las plantas. Para ello se restó el número de yemas y tallos contados cada 15 días del número de yemas y tallos contados una vez terminada la etapa de aclimatación. Aumento de Biomasa fresca. El análisis de la biomasa, permitió tener un valor de productividad en las plantas. Para ello se pesó cada una de las plantas, secándolas previamente con papel toalla evitando dañar las raíces. En el proceso se utilizó una balanza eléctrica de 0.01g de precisión (Lámina 4). Este proceso se repitió cada treinta días con la finalidad de evitar el estrés en las plantas, en especial en las raíces. Se calculó la variación de la biomasa fresca por individuo, restando el peso fresco obtenido cada 30 días del peso obtenido al final de la etapa de aclimatación. 18 Porcentaje de Aumento de la Biomasa Fresca Este parámetro fue derivado de la biomasa fresca mediante la siguiente operación: BF − BI % BF = x100 BI Donde el porcentaje de aumento de Biomasa fresca (%BF) se calculó a partir e la resta de la biomasa fresca cada treinta días (BF) menos la biomasa inicial una vez terminada la etapa de aclimatación (BI). Este valor es dividido nuevamente entre BI y es multiplicado por 100. Este dato permitió conocer el porcentaje de incremento del peso inicial a lo largo del experimento. Peso seco Este parámetro nos permite tener un valor de la biomasa seca de cada una de las plantas. Pasados los dos meses las plantas fueron sacadas de los baldes y empaquetadas en bolsas de papel con su respectivo código. Posteriormente fueron secadas en un horno a temperatura constante de 70ºC. Este proceso se llevó a cabo en el Museo de Historia Natural. Antes del secado siete plantas fueron retiradas dado que presentaban únicamente tallos muertos, tallos totalmente secos o en clorosis total, a fin de evitar casos de encontrar porcentajes de muy altos debido a senescencia o sequedad por factores externos. Luego se pesaron las plantas secas en una balanza eléctrica de 0.01g de precisión en el Laboratorio de Fisiología Vegetal de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Se registraron los pesos y a su vez se calculó el porcentaje de materia seca que contenían por tratamiento, de esta forma se lograría saber si los nutrientes afectaron o no en el porcentaje de materia seca por planta. 19 f. Control de Parámetros ambientales Fueron controlados también la temperatura y Humedad relativa durante el experimento. Fueron tomadas las máximas y mínimas semanales de ambos parámetros haciendo uso de un Termohigrómetro Radioshack© de un decimal de precisión para la temperatura y una unidad de precisión para la humedad relativa. g. Control cualitativo de las soluciones Paralelamente se realizaron análisis cualitativos del contenido de los nitratos y fosfatos en el agua, al inicio y al final del experimento con la finalidad de descartar que los resultados se deban a una deficiencia de estos nutrientes en los tratamientos de mayor concentración. Para el control cualitativo de nitratos se utilizó el test colorimétrico Nitrate Test Kit (0.0110.0 mg/l) for Fresh & Saltwater Hagen ©. Para el control de fosfatos se utilizó el Test colorimétrico el Test Phosphate Model PAA. Code 3114-01 LaMotte ©. Igualmente se registró el pH mediante el uso de papel Wattman ©. Asimismo se registró la conductividad de las soluciones mediante el método del conductímetro, haciendo uso de un conductímetro con una décima de precisión. Estos análisis fueron realizados en muestras tomadas de cada tratamiento al final de las dos primeras y dos últimas semanas, antes de realizar el cambio de solución h. Contenido de N, P y K: Posterior al análisis de biomasa seca se realizó un análisis de contenido de Nitrógeno, Fósforo y Potasio en los tejidos de las plantas utilizadas en el experimento. Para la medición del Nitrógeno se utilizó el método de micro Kjeldahl. Para la medición del fósforo se utilizó el método del Color Amarillo del Vanadomolibdofosfórico. Para la medición del fósforo se utilizó el método de Espetrofotometría de Absorción Atómica. Este análisis se llevó a cabo en el laboratorio de Análisis de Agua, Suelo y Medio Ambiente de la Universidad Nacional Agraria La Molina siguiendo la metodología propuesta por Chapman & Pratt (1987) y Reynoso et al. (1993). De esta forma se obtuvieron los porcentajes del contenido de estos componentes en las plantas, que después 20 fueron multiplicados por el peso seco para saber a cuantos gramos equivalen esos porcentajes. i. Análisis de los resultados: El análisis estadístico de los datos se realizó mediante el software SPSS 12.0. En él se realizó el análisis de ANOVA para apreciar si hay diferencias significativas entre los tratamientos. A su vez se realizó análisis de agrupamiento de Duncan para apreciar el agrupamiento de los tratamientos según su grado se semejanza. Estas pruebas estadísticas fueron aplicadas de tres formas: ¾ A los datos de acuerdo a los tratamientos. Este análisis permitir tener una panorama general del comportamiento de los promedios en cada tratamiento. ¾ A los datos agrupados de acuerdo a la cantidad de nitratos en la solución. Esto permitió saber si se encuentran diferencias significativas entre los tratamientos por la cantidad de nitratos en la solución. ¾ A los datos agrupados de acuerdo a la cantidad de fosfatos en la solución. Esto permitió saber si se encuentran diferencias significativas entre los tratamientos por la cantidad de fosfatos en la solución. 21 RESULTADOS 1. Primera Etapa: Conocimiento de los nutrientes en el Fango Como resultado de las visitas a las localidades de muestreo se logró apreciar que las poblaciones sumergidas se encontraban generalmente al borde de las lagunas o en canales de regadío. Asimismo, la colecta de las plantas en las localidades dió como resultado que los rametos se encontraban entre los 5 y 15 centímetros de profundidad del suelo. Este fue el rango de profundidad elegido para la colecta de muestras de fango. El análisis del contenido de nitrógeno y fósforo en el suelo de los humedales de la costa central complementó los datos bibliográficos obtenidos con anterioridad. Ello permitió elaborar un cuadro ubicado en el Anexo 1. En el se pueden apreciar las diversas concentraciones de moléculas en el suelo de los humedales de costa central de Perú obtenidos en el Laboratorio de Fisiología Vegetal de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos y el Laboratorio de Análisis de Agua, Suelo y Medio Ambiente de la Universidad Nacional Agraria La Molina. Foto 5. Se aprecia la floración de individuos de Schoenoplectus americanus, obtenida como respuesta a tratamientos de baja concentración de nutrientes. 22 Tabla 2. Datos preliminares de la Química del sedimento donde vive Schoenoplectus americanus. Se muestran los rangos de los valores obtenidos en el presente estudio. Datos Derivados del Anexo 1. Parámetro N (%) NH4 (mg/L) NO3 (mg/L) P (%) PO4 (mg/L) K (%) Ca (%) Mg(%) pH Conductividad Rango encontrado en el presente estudio 0.49 – 2.16 1.95 - 12.25 0.5 – 3.5 0.13 - 0.185 0.8 – 13.05 0.33 – 1.04 0.85 - 39.48 0.31 – 9.05 6.32 – 8.32 3.1 - 41. 3 Como resultado se obtuvieron los primeros datos correspondientes al fango de las lagunas de los humedales de la costa central del Perú, que corresponden al fango donde se ha encontrado S. americanus. La Tabla 2 muestra los datos preliminares de la química del suelo donde vive S. americanus. Se puede apreciar que tiene un rango bastante amplio de conductividad, característico de esta especie. La suma de los valores máximos de los nitratos y de amonio (nitrógeno disponible) da un valor de 15.75. El valor más alto para los fosfatos (fósforo disponible) fue de 13.05 Dado que el objetivo experimento era apreciar los posible efectos del aumento y disminución de las concentraciones de nutrientes se determinó que la concentración media necesaria para los tratamientos sería de 15mg/L tanto de nitratos como de fosfatos, la cual no se encontraba muy lejana de los valores máximos obtenidos. Para los tratamientos de mayor concentración se duplicó la concentración elegida, es decir, se utilizaron 30mg/L de nitratos y fosfatos. Para los tratamientos que requirieron valores bajos de nitratos y fosfatos se hizo la revisión del Anexo 1 y se consideró que la concentración de 1mg/L de nitratos y fosfatos sería la mejor, ya que esta se encontraba inclusive representada en una de las muestras analizadas (0.8 para la muestra 1 de Pantanos de Villa). Por lo tanto para los tratamientos se utilizaron soluciones con la composición descrita en la Tabla 3. El medio de preparación de las soluciones para el experimento fue agua de caño. Sin embargo, dada la concentración tan baja de nitratos requerida para los 23 Tabla 3. Composición Químicas de las Soluciones utilizadas en el experimento. Los valores de Conductividad y pH que se indican fueron obtenidos de mediciones de las soluciones al inicio y al final de cada semana. Variables Componentes Soluciónes Trat 5 Trat 6 Trat 1 Trat 2 Trat 3 Trat 4 Nitarto (en forma de Nitrato de Sodio) (mg/L) 1 1 1 15 15 Fosfato (en forma de Fosfato Monocálcico) (mg/L) 1 15 30 1 15 Trat 7 Trat 8 Trat 9 15 30 30 30 30 1 15 30 Constantes Calcio (en forma de Cloruro de 220-250 220-250 220-250 220-250 220-250 220-250 220-250 220-250 220-250 Calcio) (mg/L) Azufre (En forma de sulfato de magnesio y SULPOMAG (SPMg)) (mg/L) Cloro y Sodio (en forma de cloruro de sodio) (mg/L) Magnesio (mg/L) Hierro (mg/L) Boro (mg/L) Manganeso (mg/L) Cobre (mg/L) Zinc (mg/L) Molibdeno (mg/L) pH y Conductividad pH Conductividad 110 110 110 110 110 110 110 110 110 300 300 300 300 300 300 300 300 300 70 70 70 70 70 70 70 70 70 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,0005 0,0005 0,0005 0,0005 0,0005 0,0005 0,0005 0,0005 0,0005 7 - 7.5 7 - 7.5 7 - 7.5 7 - 8 7 - 8.5 7 - 8.5 7 - 8.5 8.5 - 9 8.5 - 9 2.3 - 3.3 2.3 - 3.3 2.4 - 3.3 2.7 - 3.8 2.8 - 3.8 2.8 - 3.8 2.9 - 3.9 2.9 - 3.9 2.6 - 3.7 tratamientos de 1mg/L de NO3 (tratamientos 1, 2 y 3) fue necesario utilizar agua destilada. Lo valores de pH y Conductividad fueron similares a los valores registrados en las muestras colectadas de campo siendo estos valores relativamente básicos para el pH (pH promedio 7.5) y altos para la Conductividad (Conductividad promedio 9.52) (ANEXO 1). 2. Segunda Etapa: Evaluación de campo y colecta de la muestras para Experimentación 24 Teniendo en cuenta la evaluación de los datos de los nutrientes en el fango se eligió la Laguna El Paraíso (Huacho) como la localidad elegida para hacer la colecta y evaluación de parcelas, debido a que presentaba concentraciones medianas de nitratos y fosfatos en las zonas de muestreo. Una vez realizadas las parcelas en la Laguna el Paraíso se encontró que el número de tallos por metro cuadrado en las poblaciones del borde de la laguna se encontrada entre 120 y 130, obteniendo en algunas parcelas como máximo 180 tallos. La curva de preformarse de la cantidad de tallos en la Laguna El Paraíso se muestra en el Figura 2. En ella se puede apreciar que la curva se estabiliza entre 160 y 180 tallos por metro cuadrado en las parcelas evaluadas. Terminada la etapa de aclimatación, una vez propagadas y separadas las plantas, se obtuvo que cada planta tenía en promedio 4 tallos (3.8 de promedio). Entonces se efectuó la siguiente operación: N= T 170 = = 44.73 TG 3.8 200 Tallos / Metro Cuadrado 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Parcela Figura 2. Curva de Performance obtenida a partir de las parcelas realizadas en la Laguna El Paraíso (Huacho - Lima). Se aprecia que la curva se estabiliza entre los 160 y 180 tallos por metro cuadrado. Donde N es el número de plantas por metro cuadrado, T es el número de tallos por metro cuadrado (considerado 170 por ser un punto medio obtenido de la evaluación 25 por parcelas) y TG es el número de tallos por planta contabilizado al final de la etapa de aclimatación (es decir 3.8). Teniendo en cuenta las dimensiones del envase en donde se colocarían los individuos (0.2 m2) se multiplicó este valor por la cantidad de genetos por metro cuadrado obteniendo 9 plantas por cada balde (8.94 en un cálculo preciso). Para lograr que los datos fueran estadísticos se decidió incluir una planta más por balde considerando que las plantas provienen de la separación de plantas de mayor tamaño y que el espacio no sería saturado. Finalmente se colocaron 10 plantas por balde haciendo un total de 30 plantas por tratamiento divididas en tres repeticiones. 3. Tercera Etapa: Experimentación en Laboratorio A continuación se describen los datos obtenidos durante la etapa de experimentación. La Lámina 6 muestra algunos resultados obtenidos en esta etapa. 3.1. Condiciones de Temperatura y Humedad durante el experimento De forma general la temperatura fue aumentando en los meses de Octubre y Noviembre. Las temperaturas promedio durante la etapa de aclimatación fue de 18.97°C (ambiental) y 19.02°C (sensor interno de la caseta). Durante el experimento se tuvo una temperatura promedio 20.65°C en el agua donde se encontraban los individuos y 19.29ºC en el sensor dentro de la caseta meteorológica. La humedad relativa promedio durante la etapa de aclimatación fue 77.80% y 78.85% durante la etapa de aclimatación y experimental respectivamente. Mayores detalles de la temperatura y humedad registrados durante la etapa de aclimatación y durante el experimento se encuentran en el Anexo 2. 3.2 Resultados de la medición de parámetros biológicos durante el experimento Cada uno de los parámetros mencionados en el método dio resultados muy interesantes. A continuación se presentaran los resultados de los datos por tratamiento a si como de los datos agrupados por la cantidad de nitratos y fosfatos en el medio. Los datos con los cuales se hizo la evaluación estadística de cada parámetro se encuentran en los Anexos 3, 4, 5, 6, 7 y 8. 26 Tabla 4. Datos al inicio del experimento. Se muestran los datos iniciales promedio de los parámetros medidos a lo largo del experimento por tratamiento. El análisis de Duncan no mostró ningún agrupamiento. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=30 plantas por tratamiento. Tratamiento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 a) Nitrato (mg/L) Fosfato (mg/L) 1 1 1 15 15 15 30 30 30 p 1 15 30 1 15 30 1 15 30 Tallos 0 días (tallos / individuo) 3.9 3.6 3.7 3.6 3.9 3.6 3.8 4.1 3.7 0.922 Número de Crecimiento yemas 0 Floracíon 0 total 0 días días días (flores (tallos+yemas (yemas / / individuo) / individuo) individuo) 2.6 2.9 3.4 2.2 2.6 2.6 2.5 2.4 2.6 0.741 6.3 5.7 6.0 5.8 5.9 5.6 6.0 6.4 5.8 0.857 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1.000 Peso fresco 0 días (gr) 10.67 10.91 10.21 10.12 10.33 9.01 10.93 10.6 10.26 0.788 Valores iniciales Los promedios de los valores al inicio de los tratamientos se encuentran en la Tabla 4. En ella se puede apreciar que no hay diferencias significativas entre los tratamientos y que el análisis de Duncan no mostró ningún agrupamiento entre los datos. Esto nos indica que estábamos empezando a trabajar con una población homogénea para los parámetros analizados. b) Variación del Número de Tallos durante el experimento Los promedios de los incrementos del número de tallo por planta para cada tratamiento son mostrados en la Tabla 5. Es posible apreciar que los valores promedio mas altos se obtuvieron en los tratamientos de mayor concentración de nitratos. Se apreciaron diferencias significativa a los 45 días (p=0.004) y altamente significativa a los 60 días (p=0.000), encontrando que los promedios aumentan como aumenta la concentración de nitratos, desde los tratamientos 1 al 9. El análisis de Duncan identifica los grupos a y b en los 45 días, cada uno con valor de consistencia para los grupos de 0.089 y 0.057 respectivamente, lo que indica que hay poca consistencia para los grupos. A los 60 días se aprecia la formación de los grupos a, b, c y d mediante el análisis de Duncan, cada uno con un valor de 27 consistencia para los grupos de 0.076, 0.165, 0.056 y 0.102 para a, b, c, y d respectivamente, lo que indica la poca consistencia de estos grupos. Para los datos agrupados por su cantidad de nitratos se muestra la Tabla 6 con los promedios del incremento del número de tallos por planta respectivos a cada agrupamiento. Con este agrupamiento el análisis ANOVA encuentra diferencias significativas desde los 15 días de tratamientos con valores de p=0.027 a los 15 días, p=0.004 a los 30 días, p=0.000 a los 45 días y p=0.000 a los 60 días. Analizando las medias se vuelve evidente que a mayor cantidad de nitratos en la solución la planta genera mayor cantidad de tallos. Tabla 5. Variación del Número de Tallos por tratamiento a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de los valores indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan, cuando este identificó agrupamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En naranja se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=30 plantas por tratamiento. Tratamiento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Nitrato (mg/L) 1 1 1 15 15 15 30 30 30 p Fosfato (mg/L) 1 15 30 1 15 30 1 15 30 Tallos 15 días (tallos nuevos / individuo) Tallos 30 días (tallos nuevos / individuo) Tallos 45 días (tallos nuevos / individuo) Tallos 60 días (tallos nuevos / individuo) 3 2.1 2.2 2.6 2.6 2.6 3.0 3.2 2.9 0.100 3.9 3.4 3.7 3.8 4.1 3.8 4.7 4.9 4.1 0.144 4.9 b, c 4.5 c 4.8 b,c 5.9 a,b,c 6.2 a,b,c 6 a,b,c 6.9 a, b 7.6 a 7.4 a 0.004 6.2 c,d 6.1 d 6.5 c,d 8.6 a,b,c,d 8.2 b,c,d 9.1 a,b,c 10.3 a,b 11.3 a 10.3 a,b 0.000 El análisis de Duncan encuentra agrupamientos en los datos desde los 15 días (valores consistencia para los grupos de a=0.051 y b=0.534 y), 30 días (valores consistencia para los grupos de a=1.00 y b=0.457), 45 días (valores consistencia para los grupos para a=1.00 ,b=1.00 y c=1.00) y a los 60 días (valores consistencia 28 para los grupos para a=1.00 ,b=1.00 y c=1.00). Es claro el resultado desde los 45 días dado que los tratamientos quedan separados en tres grupos distintos de acuerdo a la cantidad de nitratos, que se muestran como el factor determinante del crecimiento de nuevos tallos en el tiempo. El Figura 3 resume los resultados obtenidos, mostrando como aumenta el número de tallos de forma proporcional a la concentración de nitratos en los tratamientos, desde los 15 días, haciéndose más evidente conforme pasa el tiempo. El número de tallos se convierte en un buen parámetro de medición de crecimiento en esta especie al presentar cambios rápidos y significativos ligados a la cantidad de nitratos en el medio. Tabla 6. Variación del Número de Tallos en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=90 plantas por agrupamiento. Nitrato (mg/L) 1 15 30 p Tallos 15 días (tallos nuevos / individuo) 2.4 b 2.6 a,b 3.0 a 0.027 Tallos 30 días (tallos nuevos / individuo) 3.6 b 3.9 b 4.7 a 0.004 Tallos 45 días (tallos nuevos / individuo) 4.7 c 6.0 b 7.3 a 0.000 Tallos 60 días (tallos nuevos / individuo) 6.3 c 8.7 b 10.7 a 0.000 N° Tallos / Individuo 12 Concentración Nitratos (ppm) 10 8 1 6 15 4 30 2 0 15 30 45 60 Días Figura 3. Incremento del Número de Tallos de acuerdo a la concentración de Nitratos. Se observa las curvas que se diferencian en el tiempo frente a la concentración de nitratos en el medio. 29 Tabla 7. Aumento del número de tallos en los tratamientos por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. En este caso no hubo agrupamientos por el análisis de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 plantas por agrupamiento. Fosfato (mg/L) 1 15 30 p Tallos 15 días (tallos nuevos/ individuo) 2.9 2.7 2.6 0.426 Tallos 30 días (tallos nuevos / individuo) 4.2 4.1 4.2 0.983 Tallos 45 días (tallos nuevos / individuo) 5.9 6.1 6.1 0.932 Tallos 60 días (tallos nuevos / individuo) 8.4 8.5 8.7 0.944 Por otro lado los análisis de los datos agrupados de acuerdo a la cantidad de fosfatos en los tratamientos no presentaron diferencias significativas (p > 0.05) a lo largo del tiempo (Tabla 7). El análisis de agrupamientos de Duncan no agrupa a los tratamientos ya que son considerados todos como un mismo grupo. Esto nos indica que el fósforo no influyó en el crecimiento de tallos nuevos a lo largo del tiempo, dando más consistencia a la afirmación de que los nitratos son el factor determinante para este parámetro de crecimiento. c) Variación del Número de Yemas por tratamiento El incremento del número de yemas es mostrada en la Tabla 8. Se puede apreciar que los resultados no mostraron diferencias significativas a lo largo de casi todo el experimento, excepto a los 60 días, con un valor de p=0.04. No se puedo apreciar ninguna tendencia en cuanto al número de yemas y los tratamientos. El análisis de Duncan muestra agrupamientos muy poco soportados a los 15 días (valor de consistencia para los grupos para a=0.065 y b=0.134) y a los 60 días (valor de consistencia para los grupos a=0.112, b=0.104 y c=0.127). A pesar que los valores más altos se encuentren en el tratamiento 7 que tenía una concentración alta de nitrato no se pudo apreciar una tendencia en el tiempo. El poco valor de consistencia para los grupos del análisis de Duncan no permite llegar a ninguna conclusión. El análisis de los datos agrupados por su cantidad de nitratos se muestra en la Tabla 9. En ella se puede apreciar que los resultados del análisis ANOVA encuentran 30 Tabla 8. Variación del Número de Yemas por planta a lo largo del experimento. Se muestran los promedios por planta en cada tratamiento. Las letras al lado derecho de los valores indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan, cuando este identificó agrupamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En naranja se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=30 plantas por tratamiento. Tratamiento Nitrato Fosfato (mg/L) (mg/L) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 1 15 30 1 15 30 1 15 30 P Número de yemas 15 días (yemas nuevas / individuo) 2.6 a,b 2.9 a,b 3.4 a 2.2 b 2.6 a,b 2.6 a,b 2.5 a,b 2.5 a,b 2.7 a,b 0.285 Número de yemas 30 días (yemas nuevas / individuo) 2.3 2.0 2.4 2.2 2.2 2.5 2.1 2.5 2.8 0.541 Número de yemas 45 días (yemas nuevas / individuo) 2.8 3.3 2.7 3.2 3.0 2.7 2.9 3.1 2.8 0.804 Número de yemas 60 días (yemas nuevas / individuo) 2.7 b,c 3.0 b,c 2.3 c 3.6 a,b 3.1 b,c 3.0 b,c 4.3 a 3.5 a,b 3.1 b,c 0.004 diferencias significativas únicamente a los 60 días cuando se refleja por los promedios que a mayor cantidad de nitratos hay más número de yemas. El análisis de Duncan encuentra agrupamientos desde los 15 días con valores relativamente significativos a los 15 días (valores de consistencia para los grupos a=0.067 y b=0.745) y a los 60 días (valores de consistencia para los grupos a=0.147 y b=1.00) en donde queda separado el grupo con 1mg/L de nitratos por tener un promedio bajo, sin embargo la consistencia del grupo a no es muy fuerte, siendo este agrupamiento representativo únicamente para el 15% de los datos encontrados. Probablemente un mayor análisis en el tiempo permitiría encontrar diferencias más marcadas en este parámetro. Por otro lado el análisis de los datos agrupados de acuerdo a la cantidad de fosfatos arrojó resultados significativos igualmente a los 60 días (Tabla 10). En este caso se puede apreciar que los promedios aumentan de acuerdo a como disminuye el contenido de fosfatos en las soluciones. El análisis de ANOVA muestra un valor de 31 p=0.040 a los 60 días. El análisis de agrupamiento de Duncan encuentra agrupamientos a los 60 días con valores de consistencia para los grupos bastante bajos (valores de consistencia para los grupos para a=0.217 y b=0.189) lo que no permite tener conclusiones tajantes en este caso, sin embargo hay que considerar la tendencia de los promedios como un valor importante. Se podría llegar a la conclusión de que se produjeron mayor número de yemas a cantidades altas de nitratos y bajas de fosfatos, lo cuál encajaría exactamente con los resultados, ya que es justamente el tratamiento 7 (con 1mg/L de fosfato y 30mg/L de nitratos) aquel que tiene el mayor promedio a los 60 días. Sin embargo es necesario recordar que este parámetro permite medir la capacidad de la planta de producir nuevos tallos en un momento determinado de la evaluación. Es por ello que los resultados deben tomarse con mucha cautela ya que reflejan los resultados en el momento final de toda la evaluación, mas no implican una continuidad en el tiempo. Ello explicaría la falta de tendencias en el análisis por tratamientos, que de la mano con los análisis de datos agrupados hacen la medición de este parámetro bastante discutible. Tabla 9. Incremento del Número de Yemas en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=90 plantas por agrupamiento. Nitrato (mg/L) 1 15 30 p Número de yemas 15 días (yemas nuevas / individuo) 3.0 a 2.5 a,b 2.6 b 0.069 Número de yemas 30 días (yemas nuevas / individuo) 2.3 2.3 2.5 0.598 Número de yemas 45 días (yemas nuevas / individuo) 3.0 3.0 2.9 0.952 Número de yemas 60 días (yemas nuevas / individuo) 2.7 b 3.3 a 3.7 a 0.002 32 Tabla 10. Aumento del número de yemas en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de agrupamiento de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de Significancia <0.05 y <0.01. n=90 plantas por agrupamiento. Número de yemas 15 Fosfato (mg/L) días (yemas nuevas / individuo) 1 2.5 15 2.7 30 2.9 p 0.221 c) Número de yemas 30 días (yemas nuevas / individuo) 2.2 2.2 2.6 0.133 Número de yemas 45 días (yemas nuevas / individuo) 2.9 3.1 2.7 0.252 Número de yemas 60 días (yemas nuevas / individuo) 3.6 a 3.2 a,b 2.9 b 0.040 Senescencia de los tallos por tratamiento La cantidad promedio de tallos que senecieron por planta a lo largo del experimento en cada tratamiento se muestra en la Tabla 11. Se apreciaron diferencias significativas en la cantidad de tallos muertos a los 60 días con un valor de p=0.000. Los promedios más altos se encuentran en los tratamientos de menor concentración de nitratos y en el tratamiento número 9 donde las concentraciones de nitratas y fosfatos son altas (30 mg/L para ambos parámetros). El análisis de Duncan muestra agrupamientos a los 15 días (valor de consistencia para los grupos para a=0.053 y b=0.122), a los 30 días (valor de consistencia para los grupos a=0.163 y b=0.208), a los 45 días (valor de consistencia para los grupos a=0.065y b=0.068) y a los 60 días (valor de consistencia para los grupos a= 0.058, b=0.284, c=0.119, d=0.082 y e=0.09. Mediante el análisis de los promedios se aprecia que los nitratos vuelven a jugar un rol importante, en este caso influyendo en la senecencia de los tallos. La cantidad de nutrientes en el tratamiento 9 podría haber favorecido de alguna forma en la senescencia de las plantas, elevando el promedio, sin embargo hay que considerar que la probabilidad de los tallos tengan senescencia en el tratamiento 9 es mayor debido a que tiene también el promedio más alto en la cantidad de tallos. 33 Tabla 11. Cantidad de tallos senescentes por planta o a lo largo del experimento. Se muestran los promedios por planta en cada tratamiento. Las letras al lado derecho de los valores indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan, cuando este identificó agrupamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En naranja se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=30 plantas por tratamiento. Tratamiento Tallos que Tallos que Tallos que Tallos que Nitrato Fosfato senecieron a senecieron a senecieron a senecieron a (mg/L) (mg/L) los 15 días los 30 días los 45 días los 60 días 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 1 15 30 1 15 30 1 15 30 p 0.3 0.5 0.4 0.6 0.4 0.9 0.5 0.8 0.7 0.950 0.8 a,b 1.2 a 1.0 a,b 0.8 a,b 0.9 a,b 1.0 a,b 0.6 b 0.9 a,b 0.7 b 0.373 1.2 a,b 1.5 a 1.3 a,b 0.7 b 1.2 a,b 1.0 a,b 0.9 a,b 0.7 b 0.9 a,b 0.059 2.4 a,b 2.8 d 2.0 b,c,d 0.9 e 1.6 c,d,e 1.3 d,e 1.5 c,d,e 1.2 e 2.1 a,b,c 0.00 La cantidad de tallos senescentes por planta en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos se muestra en la Tabla 12. En ella se puede apreciar diferencias significativas entre los tratamientos desde los 45 días con valores de p=0.005 a los 45 días y p=0.00 a los 60 días. El análisis de agrupamiento de Duncan encuentra grupos desde los 45 días con valores bastante significativos a los 45 días (valores de consistencia para los grupos a=1.00 y b=0.536) y a los 60 días (valores de consistencia para los grupos b=1.00 y a=0.145). Se puede apreciar sin embargo que entre los tratamientos de 15mg/L y 30mg/L de nitratos, el de 30mg/L registró valores más altos de senescencia, debido seguramente a la influencia del tratamiento 9 que tiene un promedio alto en este parámetro. La cantidad de tallos senescentes por planta en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos se muestra en la Tabla 13, en donde se aprecia que el Análisis de ANOVA no encontró diferencias significativas entre los agrupamientos. Igualmente el análisis de Duncan no encontró agrupamientos entre los datos. Los fosfatos entonces no tienen ninguna influencia en este parámetro evaluado para esta especie. 34 Tabla 12. Cantidad de tallos senescentes por planta en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=90 plantas por agrupamiento. Nitrato (mg/L) Tallos muertos a los 15 días Tallos muertos a los 30 días Tallos muertos a los 45 días Tallos muertos a los 60 días 1 15 30 p 0.4 0.7 0.4 0.081 1.1 0.9 0.8 0.120 1.4 a 1.0 b 0.9 b 0.005 2.4 a 1.3 b 1.6 b 0.000 Tabla 13. Cantidad de tallos senescentes en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. En este caso el análisi de Duncan no encontró agrupamientos entre los datos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 plantas por agrupamiento. Fosfato (mg/L) Tallos muertos a los 15 días Tallos muertos a los 30 días Tallos muertos a los 45 días Tallos muertos a los 60 días 1 15 30 p 0.5 0.6 0.7 0.260 0.8 1.0 1.9 0.222 0.9 1.2 1.1 0.594 1.6 1.9 1.8 0.486 Los nitratos parecen ser entonces un factor determinante es este parámetro. Como nutriente fundamental, los nitratos cumplen igualmente un rol esencial en el proceso de senescencia de las plantas aumentando la senescencia en las plantas con deficiencias de este elemento. 35 e) Crecimiento total Los resultados de crecimiento total (variación del número de tallos + variación del número de yemas) se encuentran en la Tabla 14. Se puede apreciar que los promedios vuelven a mostrar la tendencia a de aumentar a lo largo del tiempo de acuerdo a la cantidad de nitratos en los tratamientos, obteniendo los valores mas altos en los tratamientos 7, 8 y 9 y los más bajos en los tratamientos 1,2 y 3 a los 60 días con un valor de significancia de p= 0.000. El análisis de Duncan muestra agrupamientos con valores de consistencia para los grupos bastante bajos a los 30 días (valor de consistencia para los grupos para a=.0.056 y b=0.092), a los 45 días (valor de consistencia para los grupos para a=0.209, b=0.084 y c=0. 0.094) y a los 60 días (valor de consistencia para los grupos para (a=0.096 y b=52). Los promedios más altos vuelven a ser en los tratamientos de mayor concentración de nitratos, lo que indica la gran importancia de este componente para esta especie, en especial para la producción de órganos como tallos y yemas. Tabla 14. Crecimiento Total de las plantas por tratamiento a lo largo del experimento. Se muestran los promedios por planta en cada tratamiento. Las letras al lado derecho de los valores indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan, cuando este identificó agrupamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En naranja se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=30 plantas por tratamiento. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento total 15 días total 30 días total 45 días total 60 días Nitrato Fosfato Tratamiento (tallos+yemas (tallos+yemas (tallos+yemas (tallos+yemas (mg/L) (mg/L) nuevos / nuevos / nuevos / nuevos / individuo) individuo) individuo) individuo) 1 1 1 3.2 a, b 3.9 a,b 5.3 c 6.5 b 2 1 15 3.0 b 3.3 b 5.8 a,b 7.0 b 3 1 30 3.3 a, b 3.8 a,b 5.2 c 6.5 b 4 15 1 2.6 a, b 3.8 a,b 7 a,b,c 10 a,b 5 15 15 3.2 a, b 4.3 a,b 7.3 a,b,c 9.3 a,b 6 15 30 3.3 a, b 4.4 a,b 6.7 a,b,c 10.2 a,b 7 30 1 3.4 a, b 4.9 a,b 7.6 a,b,c 12.5 a 8 30 15 3.5 a, b 5.6 a,b 8.5 a 12.6 a 9 30 30 3.5 a 4.3 a 8.1 a,b 11.43 a p 0.903 0.167 0.560 0.000 36 Los promedios de los datos agrupados por la cantidad de nitratos se encuentran en la Tabla 15. En ella es posible apreciar aquella tendencia de forma más clara, ya que los resultados del ANOVA indican diferencias significativas desde los 15 días con valosres de p=0.011 a los 30 días, p=0.001 a los 45 días y p=0.00 a los 60 días. El análisis de Duncan muestra agrupamientos entre estos datos desde los 30 días logrando separar los tratamientos en tres grupos distintos a los 60 días (valores de consistencia para los grupos a=0.06 y b=0. 268 a los 30 días, a=0.117 y b=1.000 a los 45 días; y a=1.00, b=1.00 y c=1.00 a los 60 días). La Figura 4 muestra claramente la tendencia inversamente proporcional del crecimiento con respecto a la concentración de nitratos en el medio desde los 15 días. Se muestra entonces el claro papel de los nitratos en el crecimiento de la planta. Tabla 15. Crecimiento Total en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=90 para cada agrupamiento. Nitrato (mg/L) 1 15 30 p Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento total 15 días total 30 días total 45 días total 60 días (tallos+yemas (tallos+yemas (tallos+yemas (tallos+yemas nuevos / nuevos / nuevos / nuevos / individuo) individuo) individuo) individuo) 3.2 3.7 b 5.5 b 6.7 c 3.0 4.2 a,b 7.0 a 9.9 b 3.5 5.1 a 8.1 a 12.2 a 0.469 0.011 0.001 0.000 37 (Tallos + Yemas nuevos) / Individuo 14.0 Concentración de Nitratos (ppm) 12.0 10.0 8.0 1 6.0 15 4.0 30 2.0 0.0 15 30 45 60 Días Figura 4. Crecimiento Total de acuerdo a la concentración de nitratos. Se observa las curvas bien diferenciadas, mostrando el crecimiento de los individuos frente a la concentración de nitratos en el medio. Los resultados obtenidos del análisis de los datos agrupados por su cantidad de fosfatos se muestran en la Tabla 16. El análisis de ANOVA no encontró diferencias significativas para los tratamientos encontrando p>0.05 en todos los casos. Tabla 16. Crecimiento total en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. En este caso el análisis de Duncan no encontró agrupamientos entre los datos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 para cada grupamiento. Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento total 15 días total 30 días total 45 días total 60 días Fosfato (mg/L) (tallos+yemas (tallos+yemas (tallos+yemas (tallos+yemas / individuo) / individuo) / individuo) / individuo) 1 15 30 p 3.08 3.23 3.38 0.689 4.11 4.22 4.63 0.516 6.65 7.18 6.72 0.716 9.68 9.65 9.41 0.957 38 El análisis de Duncan tampoco encontró agrupamientos entre los datos. Se deduce entonces que el fósforo no cumple un papel importante para los parámetros de crecimiento analizados en esta especie. f) Floración Los promedios de la floración por planta en cada tratamiento se muestran en la tabla 17. Para este parámetro se lograron resultados tajantes, encontrando que los únicos tratamientos que presentaron floración bien marcada fueron aquellos que se presentaron deficientes de nitratos, es decir, los tratamientos 1, 2 y 3 con 1mg/L de nitratos. Se notaron diferencias significativas altos desde los 45 días con p=0.003 y a los 60 días con valores de p= 0.000. El análisis de Duncan separa los tratamientos en dos grupos a los 45 días (con valores de consistencia para los grupos de a=0.229 y b=0. 104) y a los 60 días en tres grupos (valores de consistencia para los grupos para a=1.000, b=0.882 y c=0.801). Los valores de p y de agrupamiento se vuelven bastante altos a los 60 días logrando obtener conclusiones tajantes de la influencia de los nitratos en la floración de las plantas. Tabla 17. Floración de los plantas por tratamiento a lo largo del experimento. Se muestran los promedios por planta en cada tratamiento. Las letras al lado derecho de los valores indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan, cuando este identificó agrupamientos. Cuando este identificó agrupamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En naranja se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=30 plantas por tratamiento. Tratamiento Floracíon 15 Nitrato Fosfato días (flores / (mg/L) (mg/L) individuo) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 p 1 15 30 1 15 30 1 15 30 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1.00 Floracíon 30 días (flores / individuo) Floracíon 45 días (flores / individuo) Floracíon 60 días (flores / individuo) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1.00 0.3 a 0.2 a,b 0.2 a,b 0b 0b 0b 0b 0b 0b 0.003 1.5 a 0.73 b 0.73 b 0c 0.06 c 0c 0.06 c 0c 0c 0.000 39 Tabla 18. Floración en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de agrupamiento de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=90 para cada agrupamiento. Nitrato (mg/L) Floracíon 15 Floracíon 30 Floracíon 45 Floracíon 60 días (flores / días (flores / días (flores / días (flores / individuo) individuo) individuo) individuo) 1 15 30 p 0 0 0 1 0 0 0 1 0.24 a 0b 0b 0.000 1.0 a 0.02 b 0.02 b 0.000 El análisis de los datos agrupados de acuerdo a la cantidad de nitratos corrobora los resultados anteriormente dichos (Tabla 18). Se observa que los resultados del análisis ANOVA son bastante importantes desde los 45 días, cuando empieza la Inflorescencias / Individuo floración de los tratamientos con nitrógeno bajo, obteniendo un valor p=0.000. 1,2 1 Concentración de Nitratos (mg/L) 0,8 0,6 1 15 0,4 30 0,2 0 30 45 60 Días Figura 5. Floración de acuerdo a la concentración de nitratos. Se observa el único tratamiento que realizó una floración significativa llegando a ser el promedio de 1 inflorescencia por planta. 40 Tabla 19. Floración en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. En este caso el análisis de Duncan no realizó ningún agrupamiento. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 para cada agrupamiento. Floracíon 15 Floracíon 30 Floracíon 45 Floracíon 60 Fosfato (mg/L) días (flores / días (flores / días (flores / días (flores / individuo) individuo) individuo) individuo) 1 0 0 0.1 0.5 15 0 0 0.1 0.3 30 0 0 0.1 0.3 p 1.00 1.00 0.710 0.125 A los 60 días se obtiene un valor de p=0.00. El análisis de agrupamiento de Duncan separa los tratamientos de 1mg/L desde los 45 días (valores de consistencia para a=1.00 y b=1.00 a los 45 días y a los 60 días). La Figura 5 representa lo obtenido durante el experimento, mostrando cómo se diferencian los tratamientos de nitrógeno bajo de los demás tratamientos. Definitivamente las condiciones de estrés, en este caso la deficiencia de nitratos, provocaron la floración de estos individuos, una respuesta bastante esperada con modalidad de supervivencia de la especie. Por otro lado, el análisis de los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos no mostró diferencias significativas entre los agrupamientos mediante el análisis ANOVA generando valores de p>0.05 en todos los casos. A pesar de no haber diferencias significativas los promedios muestran una tendencia a mayor floración en los tratamientos de mayor cantidad de fosfatos. Para corroborar aquello sería necesario un mayor tiempo de evaluación de tal forma que todos los tratamientos empiecen a florecer, de tal forma que se pueda medir aquel parámetro de forma completa. La floración en los tratamientos de menor concentración de nitratos no significó que no hubiera algunos tallos floreciendo en los tratamientos de concentración media, lo que significa que es posible que en los tratamientos de mayor concentración de nitratos el ciclo fenológico se completa en un periodo cercano a los 75 días. Es necesario mencionar también que durante el tiempo en el cual las plantas florecieron se registró un aumento de temperatura en el sensor que pudo 41 hacer favorecido el proceso fenológico, pero definitivamente, en forma uniforme para todos los tratamientos. g) Variación de la Biomasa Fresca Los promedios de la variación de la biomasa fresca por tratamiento se muestran en la Tabla 20. Se puede apreciar diferencias significativas entre los tratamientos a partir de los 60 días con un valor de p=0.000. El análisis de agrupamiento de los datos de Duncan muestra valores de consistencia para los grupos bajos a los 30 días (valor de consistencia para los grupos para a=0.060 y b=0. 131) y a los 60 días (valores de consistencia para los grupos para a=0.109, b=0. 054, c=0.089 y d=0.051). Se puede apreciar que los promedios más altos se encuentran nuevamente en los tratamientos con nitratos en mayor cantidad, es decir en los tratamientos 7, 8 y 9 (tratamientos con nitratos en concentración alta), mientras que los promedios más bajos se encuentran en los tratamientos 1, 2 y 3 (tratamientos con deficiencia de nitratos). Tabla 20. Peso Fresco de las plantas por tratamiento a lo largo del experimento. Se muestran los promedios por planta en cada tratamiento. Las letras al lado derecho de los valores indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan, cuando este identificó agrupamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En naranja se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. Tratamiento Nitrato Fosfato (mg/L) (mg/L) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 p 1 15 30 1 15 30 1 15 30 Peso fresco 30 días (g) Peso fresco 60 días (g) 15.79 a,b 14.00 b 14.34 b 16.03 a,b 16.65 a,b 14.92 b 17.72 a,b 20.26 a 16.51 a,b 0.100 18.02 b,c,d 16.52 d 17.65 c,d 23.38 a,b,c,d 23.08 a,b,c,d 23.68 a,b,c 26.65 a 28.90 a 24.81 a,b 0.000 42 Los promedios del peso fresco de los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos se muestran en la Tabla 21. Se puede apreciar que el análisis de ANOVA encuentra diferencias significativas entre los tratamientos desde los 30 días de evaluación con valores de p=0.014 a los 30 días y p=0.000 a los 60 días. El análisis de Duncan agrupa los tratamientos desde los 30 días de evaluación con valores bajos de consistencia para los grupos (valores de consistencia para a=0. 056 y b=0.033). Sin embargo a los 60 días este análisis separa tajantemente el grupo a que contiene al los tratamientos con 1mg/L con valores de consistencia significativos (valores de consistencia de los grupos a=0.060 y b=1.000). El análisis de los promedios indica que a mayor cantidad de nitratos se registraron promedios más altos, por lo que se confirma que los nitratos jugaron un papel fundamental en la variación de la biomasa fresca. La Figura 5 muestra la forma en como van aumentando el peso de las plantas a lo largo del experimento. A los 30 días es posible apreciar que los tratamientos con nitratos elevados ya tenían un promedio más alto, el cual se eleva aún más a los 60 días. Tabla 21. Peso Fresco de los Individuos en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de agrupamiento de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=90 para cada grupamiento. Nitrato (mg/L) 1 15 30 p Peso fresco 30 días (gr) 14.7 b 15.9 a,b 18.2 a 0.014 Peso fresco 60 días (gr) 17.4 b 23.4 a 26.8 a 0.00 43 Variación Peso Fresco (gr) / Individuo 30 25 Concentración de Nitratos (ppm) 20 15 1 15 10 30 5 0 30 60 Días Figura 6. Variación del Peso Fresco de acuerdo a la concentración de nitratos. Se observa las curvas bien diferenciadas, mostrando el aumento peso fresco de los individuos frente a la concentración de nitratos en el medio. Tabla 22. Peso fresco en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Se muestran los promedios por planta por cada agrupamiento. En este caso análisis de agrupamiento de Duncan no encontró agrupamientos entre los tratamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 para cada grupamiento. Fosfato (mg/L) 1 15 30 p Peso fresco 30 días (gr) 16.5 16.9 15.3 0.343 Peso fresco 60 días (gr) 22.7 22.8 22.1 0.908 Los promedios del peso fresco de los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos se muestran en la Tabla 22. En el se pueden apreciar que os promedios son similares, no habiendo influencia de la cantidad de fosfatos en este parámetro. El análisis de ANOVA no encuentra diferencias significativas entre los tratamientos (p=0.343 a los 30 días y p=0.908 a los 60 días). El análisis de agrupamiento de Duncan no encontró agrupamientos entre los grupos considerando que los datos de las tres concentraciones poseen promedios similares. Se puede inferir que los 44 fosfatos no afectaron de forma significativa en el proceso del aumento del peso fresco h) Porcentaje de Aumento de la Biomasa Fresca La Tabla 23 muestra los valores promedio del porcentaje de aumento de la biomasa fresca por planta en cada tratamiento. Es posible apreciar que el análisis de ANOVA encuentra diferencia significativas entre los tratamientos desde los 30 días (p=0.031 a los 30 días y p=0.000 a los 60 días). El análisis de las medias permite apreciar que los promedios más altos se encuentran en los tratamientos con concentraciones de nitratos medias y altas, registrándose el promedio mayor en el tratamiento 6 a lo 60 días (aumentando en un 165% de su peso fresco inicial). El análisis de agrupamiento de Duncan muestra la formación de dos grupos desde los 30 días con valores de consistencia poco significativos (valores de consistencia la los grupos a=0.098 y b=0. 574 a los 30 días; y a=0.113 y b=0. 497 a los 60 días). A los 60 días es posible apreciar que los tratamientos 1, 2 y 3 son separados en el grupo b, mientras que los demás tratamientos quedan en el grupo a, lo que lleva a inferir que la causante de los promedios más bajos sería la deficiencia de nitratos. Tabla 23. Aumento del Porcentaje de Peso Fresco de los Individuos por tratamiento a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de los valores indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan, cuando este identificó agrupamientos. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En naranja se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=30 plantas por tratamiento. n=30 individuos por tratamiento Tratamiento Nitrato Fosfato (mg/L) (mg/L) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 p 1 15 30 1 15 30 1 15 30 Aum peso a los 30 días (%) 46.69 b 34.4 b 42.22 b 56.61 b 67.76 a,b 64.92 a,b 60.42 a,b 95.78 a 53.34 a,b 0.031 Aum peso a los 60 días (%) 68.86 b 58.24 b 72.53 b 125.87 a 129.02 a 165.32 a 136.91 a 161.66 a 141.88 a 0.00 45 La Tabla 24 muestra los promedios del Porcentaje del aumento del peso fresco por planta obtenidos del análisis de los datos agrupados por la cantidad de nitratos. En el análisis ANOVA para estos datos encuentran diferencias significativas entre los tratamientos a los 60 días (p=0.000). El análisis de los promedios muestra resultados similares a los encontrados en el análisis de los tratamientos independientemente, en donde los tratamientos de mayor cantidad de nitratos mostraron un mayor aumento del porcentaje de la biomasa fresca. El análisis de Agrupamiento de Duncan muestra la formación de grupos con valores de consistencia para a=0.375 y b=1.000 a los 30 días, y a=0.476 y b=1.000 a los 60 días. Estos valores separan tajantemente al grupo b que incluye a los tratamientos con nitratos en baja concentración, reafirmando lo obtenido en el análisis por tratamiento. El análisis de los datos agrupados por el contenido de fosfatos para el porcentaje de aumento del peso fresco no mostró diferencias significativas entre los tratamientos (valores p=0.450 y p=0.498 para lo 30 y 60 días respectivamente) (Tabla 25). El análisis de agrupamiento de Duncan no encontró agrupamientos entre los dato considerando todos los datos como un solo grupo. Nuevamente el rol de los fosfatos parece ser poco importante para este parámetro biológico. Tabla 24. Porcentaje de aumento de peso fresco en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de agrupamiento de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En rosado se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=90 para cada grupamiento. Nitrato (mg/L) 1 15 30 p Aum peso a los 30 días (%) 41 b 63 a 71 a 0.06 Aum peso a los 60 días (%) 66 b 138 a 146 a 0.00 46 Tabla 25. Aumento en peso de los individuos en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) a lo largo del experimento. En este caso el análisis de Duncan no realizo ningún agrupamiento. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 para cada grupamiento. Fosfato (mg/L) 1 15 30 p Aum peso a los 30 días (%) 54.58 65.98 55.49 0.450 Aum peso a los 60 días (%) 110.54 116.31 125.24 0.498 h) Peso seco El promedio del peso seco por planta en cada tratamiento es mostrado en la tabla 26. Se puede apreciar que el análisis de ANOVA no muestra diferencias significativas entres los tratamientos con un valor de p=0.053. Igualmente el análisis de agrupamiento de Duncan agrupa los tratamientos con valores muy bajos de consistencia (valor de consistencia para los grupos para a=0.087, b=0.054 y c=0.059) por lo que el agrupamiento es igualmente poco significativo. Es rescatable sin embargo que los promedios mayores se muestran en los tratamientos 7, 8 y 9 donde la concentración de nitratos es mayor. El porcentaje de materia seca no se muestra significativo entre los tratamientos (p=0.399) y el análisis de Duncan no encuentra agrupaciones (Tabla 27). Según el análisis ANOVA todos los porcentajes son similares. Todos los tratamientos tienen en promedio 18% de materia seca, sin embargo este 18% para los tratamientos 7, 8 y 9 representa un mayor valor de peso seco que para los tratamientos 1, 2 y 3 debido a que las plantas de los tratamientos con nitrógeno alto tienen un mayor peso. Se puede decir entonces que los nutrientes no influenciaron en la proporción de materia húmeda/materia seca en las plantas a pesar de la diferencia de los tratamientos. 47 Tabla 26. Peso Seco de los individuos por tratamiento al finalizar el experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=30 individuos para los tratamientos 1,2,3 y 6. n=29 para los tratamientos 5,7 y 8 y n=28 para el tratamiento 4. Tratamiento Nitrato Fosfato (mg/L) (mg/L) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 1 15 30 1 15 30 1 15 30 p Peso seco a los 30 días(gr) 2.98 a,b,c 2.69 c 2.77 b,c 3.43 a,b,c 3.05 a,b,c 3.21 a,b,c 3.59 a,b,c 3.97 a 3.78 b,c 0.053 Tabla 27. Porcentaje de materia seca por tratamiento al finalizar el experimento. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=30 para los tratamientos 1, 2, 3 y 6; n=29 los tratamientos 5, 7, 8 y 9; y n=28 para el tratamiento 4. Nitrato Fosfato Tratamiento (mg/L) (mg/L) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 p 1 15 30 1 15 30 1 15 30 %Materia seca (Peso seco x 100)/ (Peso fresco) 19.51 20.33 17.67 16.27 15.66 17.44 18.8 21.44 15.94 0.399 El análisis de los datos promedio de peso seco por planta de acuerdo a la cantidad de nitratos en los tratamientos muestra diferencias significativas (Tabla 28). Se puede apreciar que el análisis de ANOVA encuentra diferencias significativas con 48 un valor de p=0.001, un valor bastante significativo El análisis de los promedios muestra que el peso seco aumenta en los tratamientos de acuerdo a la cantidad de nitratos en los mismos. La Figura 7 muestra como aumenta este promedio, según aumenta la cantidad de nitratos. El análisis de agrupamiento de Duncan agrupa los datos con valores de consitencia altos (valores de consistencia para a=1.000 y b=0.111 a los 30 días) separando para este momento al tratamiento de nitratos alto. Los promedios obtenidos para el porcentaje del aumento del peso seco según la cantidad de nitratos en los tratamientos se muestran en la Tabla 29. En ella se puede apreciar que, al igual que los tratamientos evaluados independientemente no se encontraron diferencias significativas, ni tampoco agrupamientos mediante el análisis de Duncan. Hay que tener en cuenta que el peso fresco es mayor en las plantas de los tratamientos de mayor contenido de nitrógeno (Tabla 21), lo que significa que si bien estadísticamente se considera que los resultados son semejantes, el 18.9% correspondiente a los tratamientos de nitrógeno alto, corresponde a un valor mucho mayor que el 19.7% de las plantas de los tratamientos con bajos niveles de nitratos. Tabla 28. Peso seco de los individuos en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) al final del experimento. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de agrupamiento de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 para nitratos 1mg/L; n=87 para nitratos 15 y 30mg/L. Nitrato (mg/L) 1 15 30 p Peso seco (gr) 2.8 b 3.23 b 3.78 a 0.001 49 4 Peso seco (gr) 3.5 3 2.5 a 2 1.5 b b 1 0.5 0 1 Tratamientos Segun Nitratos Figura 7. Resultados obtenidos de los datos agrupados por su contenido de nitratos para el peso seco. Se aprecia diferencias significativas en el peso, aumentando como aumenta la cantidad de nitratos en la solución. Tratamientos de 15mg/L nitratos color azul, 30mg/L de nitratos color verde y 60mg/L color amarillo. Para los datos agrupados por su cantidad de fosfatos no se encontraron diferencias significativas para este parámetro (p=0.927) (Tabla 30), por lo que se considera que los promedios son similares. El análisis de agrupamiento de Duncan no encontró agrupamientos entre los datos tratándolos como un mismo grupo. El porcentaje de materia seca contenido de acuerdo a la cantidad de fosfatos en los tratamientos no encontraron diferencias significativas entre los agrupamientos (p=0.661) y el análisis de Duncan no encontró agrupaciones (Tabla 31). Tabla 29. Porcentaje de materia seca las plantas en los tratamientos por su cantidad de nitratos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) al final del experimento. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=90 para nitratos 1mg/L; n=87 para nitratos 15mg/L y n=87 para nitratos 30mg/L. Nitrato (mg/L) 1 15 30 p %Materia Seca (Peso seco x 100)/ (Peso fresco) 19.17 16.45 18.96 0.392 50 Tabla 30. Peso seco de los individuos en los tratamientos agrupados por su cantidad de fosfatos (1mg/L, 15mg/L y 30mg/L) al finalizar el experimento. En este caso el análisis de Duncan no realizo ningún agrupamiento. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=87 para fosfatos 1 mg/L; n=88 para fosfatos 15mg/L y n=89 para fosfatos 30mg/L. Fosfato (mg/L) 1 15 30 p Peso seco (gr) 3.33 3.24 3.25 0.927 El análisis de los promedios muestra un ligero aumento en porcentaje conforme disminuye el contenido de fosfatos, lo cual queda en discusión por no ser significativo estadísticamente, llegando a la conclusión que los fosfatos, al igual que los nitratos, no influyen en la proporción de materia seca / contenido de agua en las plantas. El rol de los nitratos en la producción de biomasa es muy importante para esta especie, mientras que los fosfatos poco afectaron los parámetros de biomasa. La proporción entre materia seca y materia húmeda no parece ser afectada por las concentraciones de nutrientes en el medio donde crece la planta. Tabla 31. Porcentaje de materia seca de los individuos en los tratamientos con 1mg/L, 15mg/L y 30mg/L de fosfatos al finalizar experimento. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=87 para fosfatos 1 mg/L; n=88 para fosfatos 15mg/L y n=89 para fosfatos 30mg/L. % Materia seca (Peso Fosfato (mg/L) seco x 100)/ (Peso fresco) 1 18.19 15 19.14 30 17.11 p 0.661 51 3.3. Control Cualitativo de las soluciones El análisis colorimétrico de la cantidad de nitratos y fosfatos en la soluciones al inicio y al final de los tratamiento mostró que hubo disponibilidad de los nutrientes evaluados (nitratos y fosfatos) en los tratamientos (Lámina 5). Además permitieron comprobar la correcta preparación de las soluciones. El pH y la conductividad de los tratamientos variaron ligeramente mostrando los valores máximos y mínimos mostrados en la Tabla 3. En las soluciones de mayor concentraciones de nutrientes se registraron valores altos de pH y Conductividad, mientras que valores bajos eran registrados en los tratamientos con menores concentraciones. Los pH registrados fueron relativamente básicos, siendo similares a los pH registrados para los muestreos en las localidades de la costa Limeña (Anexo 1). 3.4. Resultados del Análisis de composición NPK tisular La Tabla 32 muestra los datos obtenidos de la medición de nitrógeno (N), fósforo (P), calcio (Ca) y magnesio (Mg) en los tejidos de las plantas en cada tratamiento como porcentaje. Tabla 32. Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado su porcentaje en la planta entera. n=1 para cada tratamiento. Nitrato Fosfato Tratamiento (mg/L) (mg/L) 0 (inicio) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 15 15 15 30 30 30 1 15 30 1 15 30 1 15 30 N% 1.51 0.86 0.98 1.20 1.79 1.13 1.88 1.99 1.46 2.02 P% 0.19 0.25 0.35 0.38 0.15 0.43 0.41 0.35 0.17 0.38 K% 1.29 3.98 3.42 3.92 4.30 4.56 5.24 4.98 4.04 4.86 Ca% 0.41 0.60 0.58 0.76 0.86 1.01 0.80 0.97 0.99 0.84 Mg% 0.06 0.38 0.37 0.44 0.31 0.36 0.32 0.35 0.31 0.30 52 Este análisis incluye el valor de tratamiento 0 que se obtuvo de un grupo de 10 plantas que se analizaron antes de la etapa experimental, es decir ante de ser sometidas a los tratamientos. Es posible apreciar que el porcentaje de nitrógeno (%N) es más alto en los tratamientos con nitratos en mayor concentración, llegando a ser inclusive mayor que la cantidad de nitratos reportados para el inicio de los experimentos (tratamiento 0) en los tratamientos 4, 6, 7 y 9. De igual forma el porcentaje de fósforo (%P) es mayor en lo tratamientos con fósforo alto siendo en casi todos los casos mayor que el porcentaje inicial. El contenido de potasio (%K) se muestra igualmente mayor en los tratamientos de mayor concentración de nitratos, todas las concentraciones se muestran mayores que la concentración inicial. El contenido de calcio (%Ca) parece haber sido afectado igualmente según la cantidad de nitratos habiendo mayor concentración en los tratamientos que tuvieron mayor cantidad de nitratos y en todos los casos se aprecia un aumento del contenido de este ión con respecto al contenido inicial. El porcentaje de magnesio (%Mg) parece bastante estable entre los tratamientos pero es definitivamente mayor que el contenido antes de empezar los tratamientos. Tabla 33. Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por los gramos de cada elemento por individuo por tratamiento. Resultado obtenido del producto de los datos obtenidos en la Tabla 26 por el peso seco. N=1 para cada tratamiento. Tratamiento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 N(g) 0.026 0.026 0.033 0.061 0.034 0.060 0.071 0.058 0.076 P(g) 0.007 0.009 0.011 0.005 0.013 0.013 0.013 0.007 0.014 K(g) 0.119 0.092 0.109 0.147 0.139 0.168 0.179 0.160 0.184 Ca(g) 0.018 0.016 0.021 0.029 0.031 0.026 0.035 0.039 0.032 Mg(g) 0.011 0.010 0.012 0.011 0.011 0.010 0.013 0.012 0.011 53 El contenido de los mismos parámetros en gramos se encuentra en la Tabla 33 y provienen de la multiplicación de los valores de la tabla 29 por el peso seco de cada tratamiento (Tabla 26). Se puede apreciar que los datos son concordantes con los porcentajes obtenidos en la Tabla 32. El contenido de nitrógeno, calcio y magnesio en gramos aumenta de acuerdo a la cantidad de nitratos en los tratamientos. El contenido de fosfatos parece aumentar en los tratamientos de mayor cantidad de fosfatos. Los análisis de los tratamientos agrupados nos permitirán tener un mejor panorama de estos datos. Los datos agrupados por la cantidad de nitratos muestran cómo la cantidad de nitratos en los tratamientos afecta significativamente la concentración en porcentaje de nitrógeno calcio y magnesio, siendo los porcentajes mayores a mayor concentración de nitratos (Tabla 34). Los valores del análisis ANOVA son significativos para el contenido de nitrógeno (p=0.047), calcio (p=0.022) y magnesio (0.044). Tabla 34. Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado su porcentaje en la planta entera de acuerdo a la cantidad de nitratos disponible en los tratamientos. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de agrupamiento de Duncan. A la derecha se muestra el peso seco de cada tratamiento, obtenido de los datos experimentales anteriores. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En amarillo se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=3 para cada agrupamiento. Tratamiento Inicial 1mg/L 15mg/L 30mg/L Sig N% 1.51 1.01 b 1.60 ab 1.80 a 0.047 P% 0.20 0.32 0.33 0.03 0.940 K% 1.29 3.77 4.70 4.63 0.078 Ca% 0.41 0.64 b 0.89 a 0.93 a 0.022 Mg% 0.06 0.39 a 0.33 b 0.32 b 0.044 54 Tabla 35. Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por su cantidad en gramos de cada elemento por individuo de acuerdo a la cantidad de nitratos disponible en los tratamientos. Resultado obtenido del producto de los datos obtenidos en la Tabla 30 por el peso seco. Las letras al lado derecho de cada valor indican el grupo al que pertenecen como resultado del análisis de agrupamiento de Duncan. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. En amarillo se encuentran resaltados los niveles de significancia <0.05 y <0.01. n=3 para cada agrupamiento. N 1mg/L 15mg/L 30mg/L p N(g) 0.028 b 0.052 a,b 0.068 a 0.010 P(g) 0.009 0.010 0.011 0.740 K(g) 0.106 b 0.152 a 0.175 a 0.003 Ca(g) 0.018 c 0.029 b 0.035 a 0.001 Mg(g) 0.011 0.011 0.012 0.236 El análisis de agrupamiento de Duncan separa los tratamientos en la composición del porcentaje de nitrógeno (valor de consistencia para los grupos a=0.418 y b=0. 062), calcio (valor de consistencia para los grupos a=0.603 y b=1.000) y magnesio (valor de consistencia para los grupos a=1.000 y b=0.704). Los valores de agrupamiento de calcio y magnesio se muestran bastante altos y separan a los tratamientos con concentraciones bajas de nitratos. El análisis por la cantidad de nitrógeno, fósforo, potasio, magnesio y calcio en gramos en los tratamientos agrupados por su cantidad de nitratos se muestran en la Tabla 35. Se puede apreciar que los análisis de ANOVA muestran significancia para el contenido de nitrógeno (p=0.010) ya que el nitrógeno aumenta según la concentración de los nitratos en el tratamiento. Igualmente el calcio muestra diferencias significativas entre los tratamientos (p=0.001) según el contenido de nitratos en el tratamiento. En este caso el potasio muestra también diferencias significativas entre los tratamientos aumentando según aumenta la concentración de nitratos en los tratamientos. No se encuentran diferencias significativas para el fósforo y magnesio. El análisis de agrupamiento de Duncan muestra que los datos se agrupan en la cantidad de nitrógeno (valor de consistencia para los grupos 55 a=0.212 y b=0.080), potasio (valor de consistencia para los grupos a=0.087 y b=1.000) y calcio (valor de consistencia para los grupos a=1.00, b=1.00 y c=1.00). Evidentemente la cantidad de nitrógeno en los tejidos se vio afectada por la cantidad de nitratos en los tratamientos separando los tratamientos de concentraciones bajas de nitratos. Igualmente para el potasio, el análisis separa los datos en dos grupos donde quedan separados los tratamientos con nitratos en baja concentración. Para ambos casos se encuentran promedios mayores a mayor concentración de nitratos en los tratamientos. El resultado obtenido para la cantidad de calcio en los tejidos separa los tratamientos en tres grupos distintos, además de encontrar diferencias significativas entre los tratamientos. El análisis de los promedios para este caso muestra el importante rol del nitrógeno en la captación del calcio siendo esta directamente proporcional a la cantidad de nitratos en el medio. El análisis de los datos de acuerdo al contenido de fosfatos en los tratamientos no encuentra diferencias significativas entre los tratamientos en el contenido de nitrógeno, fósforo, potasio, calcio y magnesio por su porcentaje (p>0.05 en todos los casos) ni por su contenido en gramos (p>0.05 en todos los casos) (Tablas 36 y 37). Tabla 36. Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por su porcentaje en la planta entera de acuerdo a la cantidad de fosfatos disponible en los tratamientos. En este caso el análisis de Duncan no realizo ningún agrupamiento. A la derecha se muestra el peso seco de cada tratamiento, obtenido de los datos experimentales anteriores. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=3 para cada agrupamiento. Tratamiento Inicial 1mg/L 15mg/L 30mg/L p N% 1.51 1.50 1.19 1.70 0.422 P% 0.20 0.25 0.31 0.39 0.283 K% 1.29 4.42 4.00 4.67 0.431 Ca% 0.41 0.81 0.86 0.80 0.910 Mg% 0.06 0.35 0.35 0.35 0.984 56 Tabla 37. Contenido de N (Nitrógeno); P (Fósforo); K (Potasio); Ca (Calcio) y Mg(Magnesio) expresado por los gramos de cada elemento por individuo de acuerdo a la cantidad de fosfatos disponible en los tratamientos. En este caso el análisis de Duncan no realizo ningún agrupamiento. Resultado obtenido del producto de los datos obtenidos en la Tabla 32 por el peso seco. En la parte inferior se muestran los resultados del nivel de significancia obtenidos en el análisis ANOVA. n=3 para cada agrupamiento. P 1mg/L 15mg/L 30mg/L p N(gr) 0.050 0.039 0.055 0.603 P(gr) 0.008 0.010 0.013 0.291 K(gr) 0.147 0.130 0.152 0.708 Ca(gr) 0.027 0.028 0.026 0.951 Mg(gr) 0.012 0.011 0.011 0.687 El análisis de agrupamiento de Duncan tampoco encuentra agrupamientos entre los datos. Al revisar los promedio sin embargo se puede apreciar que la cantidad de fósforo parece aumentar según la cantidad de fosfatos en ls tratamientos, sin embargo no hay soporte estadístico para poder afirmarlo (p=0.291). Nuevamente los nitratos parecen tener un rol muy importante en la incorporación de moléculas en los tejidos de la planta, aumentando la concentración de las moléculas conforme aumenta el contenido de nitratos en los tratamientos. Los fosfatos sin embargo parecen no tener mucha influencia en estos aspectos. 57 DISCUSIÓN 1. Nutrientes en los fangos de las lagunas Los datos obtenidos de la bibliografía nos permiten tener un panorama de lo que puede estar ocurriendo en las zonas en donde realizaron las colectas, que corresponden a canales y bordes de lagunas. Los datos de Foster (2004) provienen de una zona eutrófica natural. Los datos obtenidos en el presente análisis se sobrepasan este nivel de eutrofización llegando a tener para Medio Mundo un valor mayor que el obtenido por Foster en mas de un 300% (%N 0.525 para Foster y %N 2.16 para la Laguna de Medio Mundo). Ejemplos de una fuerte eutrofización son los trabajos de Swarz (1996) y Graham. y colaboradores (2005). Los datos de Swarz (1996) corresponden a datos de canales abandonados de humedales. Los canales evaluados por Swarz (1996) son canales en donde el agua se ha mantenido empozada por más de 30 años, con un flujo constante de agroquímicos y minerales que han causado un efecto dramático en la composición del sedimento. El estudio de Gram. y colaboradores (2005) muestra datos de una laguna eutrófica naturalmente por más de 100 años. Ambos trabajos muestran datos que difieren ampliamente de los datos obtenidos en el presente estudio. Foto 6. Se aprecia el secado de las plantas Schoenoplectus americanus en el Humedal El Paraíso – Huacho. 58 Los datos de Hwang y colaboradores (2000), muestran condiciones de una laguna oligotrófica que, en comparación con los datos obtenidos en el presente estudio, llegan a ser definitivamente menores (hasta mil veces menor para nitrógeno amoniacal y seis mil veces menor para fosfatos disueltos). El área evaluada por Hwang y colaboradores (2000) es un área de conservación extrema en donde la contaminación ha sido reducida al máximo. El flujo de agua a esta laguna es principalmente el agua de lluvias. Además no hay zonas agrícolas alrededor que puedan contribuir con el aumento en concentración de nutrientes, lo que conlleva a un estado oligotrófico que puede llevar a ser perjudicial para las especies. Las evaluaciones de Kantrud (2006) muestran valores bibliográficos de muchas áreas en donde se han reportado la presencia de especies del género Schoenoplectus, entre las que se encuentran S. maritimus , especie muy frecuente en nuestra costa y que comparte el hábitat con S. americanus. Los datos obtenidos en la presente evaluación se encuentran dentro de los parámetros físico-químicos de los nutrientes principales. Sin embargo se ha podido apreciar grandes diferencias en cuanto a la presencia de Calcio y Magnesio siendo hasta 100 veces más altos en el presente estudio. Basándose en estos análisis es interesante también corroborar la relación entre el grado de eutrofización de los humedales y el impacto humano en cada localidad. El área que mostró el mayor grado de eutrofización corresponde a Medio Mundo, en donde se pudo apreciar el evidente uso del junco como recurso natural de uso por su fibra. Sin embargo la gran cantidad de tallos muertos en el hábitat y los parches vacíos por la extracción del junco colaboran con el proceso de descomposición de materia, aumentando la cantidad de nutrientes disueltos hasta el punto en que el sustrato donde se encuentran las raíces de S. americanus corresponde a tallos muertos de su misma especie. Valores altos fueron encontrados también en los Pantanos de Villa cuyos problemas de contaminación provienen principalmente por impacto de poblaciones humanas que contaminan los canales y por la acumulación natural de agua en algunas zonas. Los valores mas bajos se encontraron en Puerto Viejo, humedal en donde los focos de contaminación no son tan graves y el impacto del humedal por las comunidades humanas parece no haber afectado en el problema de eutrofización, sino mas bien en el tamaño de los espejos de agua que 59 con el tiempo se van reduciendo más y más. La Laguna El Paraíso presenta pequeños focos de contaminación que pueden ser evitados brindando información de los habitantes y turistas quienes arrojan plásticos y basura en algunas zonas de la laguna. La variedad de ambientes en el que se señala puede vivir Schoenoplectus americanus se ve entonces corroborada con los datos obtenidos en el campo, encontrándose en nivel del fango del hábitat de esta especie en la costa central del Perú en un nivel medio de eutrofización. Mayor cantidad de datos a cerca del contenido de materia orgánica en el suelo serían necesarios para complementar los ya obtenidos y poder mostrar la química del sedimento de Schoenoplectus americanus, sin embargo el presente estudio contribuye con los primeros datos en este aspecto mostrados en la Tabla 2. Estos datos serán la base de estudios posteriores del hábitat de esta especie y de sus poblaciones a lo largo de la costa peruana. 2. Implicancia de los resultados Los datos obtenidos son los primeros a cerca de cómo afectan los niveles de nutrientes en la fisiología de esta especie a nivel experimental. Es evidente el rol los nitratos en los múltiples procesos de la planta, en este caso la producción de tallos nuevos, floración, biomasa y acumulación de moléculas en los tejidos teniendo este nutriente mas influencia que los fosfatos en esta especie. Los resultados concuerdan igualmente con los trabajos de Hwang, et al. (1996) y Hwang, et al., (2000) en donde se menciona que los niveles de nitrógeno y potasio son los más abundantes en los tejidos de las macrófitas de humedales, resultado igualmente obtenido en el presente estudio. Los datos concuerdan además con la importancia de los nitratos para las funciones fisiológicas de plantas de humedales mencionada en otros trabajos (Miglio, 2003; Boyd, 1970 y Ramírez, 1992.). Resultados similares a los obtenidos en este experimento de laboratorio podrían ser encontrados en casos naturales de eutrofización en las poblaciones de esta especie. La rapidez y el conocimiento actual de las respuestas de esta especie convierten a la misma en un potencial bioindicador de las condiciones naturales de los 60 humedales. Sin embargo, para poder corroborar esta nueva hipótesis será necesario establecer proyectos que incluyan el monitoreo de las poblaciones. La reacción a los niveles de nitrógeno en la floración, convierte a esta especie en una especie potencial para el estudio de la translocación de nutrientes y la implicancia que podría tener estos procesos en la genética de las poblaciones Thompson & Eckert (2004). 61 CONCLUSIONES Schoenoplectus americanus aumenta de forma significativa la producción de tallos a niveles altos de nitratos, producción que no se ve afectada por los niveles de fosfatos. La floración en Schoenoplectus americanus se da niveles bajos de nitratos en los tratamientos, sin verse afectada por los niveles de fosfatos. Schoenoplectus americanus aumenta su biomasa fresca y seca a mayores concentraciones de nitratos, más no de fosfatos. La proporción entre materia seca y humedad en los tejidos de Schoenoplectus americanus no se ve afectada por las diversas concentraciones de nutrientes en los tratamientos. La acumulación de nitrógeno, potasio y calcio se ve favorecida en Schoenoplectus americanus a niveles altos de nitratos en los tratamientos, sin verse afectada por la cantidad de fosfatos en el medio. 62 RECOMENDACIONES A fin de comprobar las hipótesis de que la planta tiene una reacción similar a la obtenida en el laboratorio en el campo y que esta especie es un bioindicador potencial de niveles de eutrofización, sería necesario plantear planes de monitoreo en las poblaciones naturales de esta especie, preferentemente en zonas donde la extracción o cosecha de estos individuos no influya en las evaluaciones. Sería de mucho interés lograr medir parámetros como la longitud de las raíces, a fin de poder apreciar si es que hay cambios a este nivel relacionados con la cantidad de nutrientes. Sería igualmente interesante poder evaluar los procesos de translocación de nutrientes de esta especie a lo largo del periodo fenológico, a fin de poder apreciar directamente en que parte de los tejidos de la planta (rizoma, tallos, hojas vestigiales, raíces o inflorescencias) se encuentran en mayor concentración los nutrientes evaluados en el presente estudio (nitrógeno, fósforo, potasio, calcio y magnesio) de acuerdo al ambiente al que son expuestos. 63 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Adams, C.D. 1994. Schoenoplectus pp. 449-450. En Flora Mesoamericana. Vol. 6: Alismatacea a Cyperaceae. Davidse, G., M. Sousa S. y A. Charter eds. Universidad Nacional Autónoma de México. 2. Bidwell, R. 1979. Fisiología Vegetal. AGT EDITORES SA. Mexico. Pp.292-295. 3. Blum, M.; J. McLachlan; C. Saunders & J. Herricks. 2005. Characterization of microsatellite loci in Schoenoplectus americanus (Cyperaceae). Prime Note. Molecular Ecology Notes 5,661-663. 4. Boyd, C. 1970. 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