Experiencia en reducción/inactivación de patógenos en

Experiencia en reducción/inactivación de patógenos en

Experiencia en
reducción/inactivación de
patógenos en Clínica Santa
María, Santiago de Chile
TM. Fernando Aro Menares.
Banco de Sangre Clínica Santa María
Chile - 2015
Clínica Santa María, Santiago de Chile
BANCO DE SANGRE
POLÍTICA DE SERVICIOS DE SANGRE (MINSAL 2013)
Objetivos centrales de la Política
Mejorar, minimizar pérdidas y reducir costos
Centralizar procesos productivos: Aumenta
eficiencia del proceso, estandariza calidad producto
y garantiza el abastecimiento.
Cambiar el actual sistema de donación: de
reposición a altruista.
Racionalizar el uso de la práctica transfusional
MISIÓN
BANCO DE SANGRE DE LA CSM
Ser un Banco de Sangre a la vanguardia
tecnológica y de seguridad, que se constituya
en un respaldo terapéutico oportuno y confiable a
las actividades clínicas que así lo requieran,
dirigido a usuarios privados y públicos con un
enfoque de calidad, seguridad y en un entorno de
responsabilidad social tanto interna como
externa, bajo una gestión moderna, flexible e
innovadora que agregue valor.
Atención de Donantes: Obtención de sangre
Identificación
Registro
Extracción
Fidelizar
Entrevista
Consentimiento
Exs.Pre Ext.
Procesamiento a la sangre donada
Exámenes a sangre donada
Fraccionamiento
 Sangre Total  Uso restringido
CALIFICACIÓN
INMUNOHEMATOLÓGICA
•ABO y RhD
•Estudio Acs. Irregulares
•Tipificación otros
sistemas sanguíneos
CALIFICACIÓN
MICROBIOLÓGICA
•VIH
•HEP B
•HEP C
•CHAGAS
•SIFILIS
•HTLV I/II
 Glóbulos Rojos c/s leucorreducción
 C. Plaquetas c/s leucorreducción
 Plaquetas de aféresis.
 Plasma fresco congelado /Plasma sin factor VIII
 Crioprecipitados (Conc. Factor VIII)
 Irradiación
 Inactivación
Validación y Etiquetaje
UMT
Almacenamiento y Distribución
DATOS ESTADÍSTICOS 2014 (SIBS Hematos)
ATENCIÓN DE DONANTES
• 4637 Donaciones sangre
• 587 Donaciones plaquetas aféresis
PRODUCCIÓN
•
•
•
•
4605
2715
4612
1100
Glóbulos rojos
Plaquetas estándar
Plasmas
Crioprecipitados
Otras actividades
• Biología molecular Genotipificación
• Preparación de Membranas amnióticas para
procedimientos oftalmológicos.
• Preparación de PRP: traumatología, heridas,
tratamientos dentales, oftalmología, etc.
DESAFÍOS FUTUROS
• Criopreservación de sangre y tejidos
• Bancos de tejidos: Huesos, córneas, etc.
• Terapia Celular
INACTIVACIÓN/REDUCCIÓN
DE PATÓGENOS EN
PLAQUETAS
 Riesgos de la transfusión sanguínea
 Donantes “obligados”
 Errores en la administración de HC.
 Contagio de enfermedades infecciosas.
Infecciones virales (periodos de ventana)
Contaminación bacteriana (obtención, almacenamiento,
distribución, instalación)
 Las Reacciones Adversas
 Mediadas Inmunológicamente
 inmunomodulación, aloinmunización, EIVH, PPT, etc.
 Mediadas No Inmunológicamente
 SCC, SCFe, etc.
 Riesgos de la transfusión sanguínea
 ESTRATEGIAS
 Promover la donación altruista a repetición
 Disponer de normativas y técnicas de entrevista, que
garanticen la selección de donantes seguros.
 Disponer de técnicas de tamizaje con capacidad de
pesquizar en forma precoz periodos de ventana.
 Disponer de una Medicina Transfusional eficiente.
 Realizar hemovigilancia activa y permanente.
 Obtener sangre y componentes con dispositivos seguros de
acuerdo a normas internacionales.
 Producir componentes gamma-irradiados
 Obtener productos leucorreducidos para minimizar el
contagio de patógenos.
 Realizar “Inactivación o reducción de patógenos”.
¿QUÉ ES LA REDUCCIÓN DE PATÓGENOS?
Un método orientado tanto a la eliminación de:
 Bacterias (Gram positivas y Gram negativas), como
de virus (con y sin cápside), así como de parásitos.
(Patógeno libre o asociado a células)
Un método que:
 Proporcione mayor seguridad al paciente que va a
ser Transfundido.
 No altere las funciones o la vitalidad de las células
transfundidas
 Convenga desde el punto de vista económico.
Métodos
Producto
sanguíneo
Método
fotodinámico
Plaquetas estándar
o de Aféresis
Riboflavina
Fenotiazina (Tionona)
Amotosaleno-HCL
(S-59)
----
Glóbulos rojos
Riboflavina
Fenotiazina (1,9dimetil-azul de
metileno)
----
PEN110 (Inactina)
S-303 (FRALE)
Fenotiazina
(azul de metileno)
Amotosaleno-HCL
(S-59)
Plasma fresco
congelado
Método
fotoquímico
Otros métodos
Solvente-detergente
Tratamiento fotoquímico con amotosaleno y luz UVA
(INTERCEPT® Blood System)
Cloruro de
Amotosaleno
λ 320-400 nm
S-59
Tratamiento fotoquímico con amotosaleno y luz UVA
(INTERCEPT® Blood System)
El mecanismo de acción del Amotosalen se
basa en penetrar la membrana celular y
nuclear, intercalándose en las regiones
helicoidales de ADN y ARN, formando
crosslinks en los pares de bases de los ácidos
nucleicos y a la exposición de luz UVA, bloquea
la replicación de DNA y RNA, inhibiendo la
supervivencia de las células
Experiencia en Banco de Sangre
Clínica Santa María
20112012
• Se incorpora Inactivación de patógenos en BS CSM
• Plaquetas aféresis, suspendidas en plasma
2013
• Se incorpora PAS
• Cultivo de plaquetas de aféresis (liberación a las 24 hrs)
• Se adquieren Kits de Inactivación para Plaquetas en
Solución Aditiva.
2014
• Se inactiva el 53,8 %de la producción de plaquetas de
Aféresis
• Se efectúa estudio de productos inactivados
PROCEDIMIENTOS DE INACTIVACIÓN DE UNIDADES DE PLAQUETOFÉRESIS
25.4%
3500
696
3000
2500
2000
1500
2742
53.8%
17.2%
10.5%
120
72
618
698
686
580
2011
15.5%
2012
17.2%
2013
10.5%
2014
53.8%
2015
60.0%
Histórico
25.4%
TOTAL PRODUCTOS INACTIVADOS
96
120
72
312
96
696
TOTAL DE AFERESIS OBTENIDAS
618
698
686
580
160
2742
1000
15.5%
96
500
312
60.0%
96
160
0
PRODUCTOS INACTIVADOS (%)
• En la búsqueda de mejorar las condiciones de
almacenamiento plaquetario y la calidad de
éstas, se han creado las soluciones aditivas
(PAS) e Inactivadores de patógenos, los cuales
garantizan la calidad de este producto
sanguíneo, aumentando la viabilidad y
disminuyendo en el riesgo de contaminación
microbiológica.
Se planteó la idea de ser pioneros en Chile en
utilizar Solución Aditiva (PAS) y el Inactivador de
Patógenos (Amotosalen).
Estos elementos, ya estudiados en el extranjero y
que son probados en el Banco de Sangre de Clínica
Santa María, para evaluar:
• Contaminación bacteriana de CP
• uso para prevención EIVH (revisión bibliográfica)
• tiempo de almacenamiento (estudio)
• Contaminación
bacteriana
de
CP
e
Inactivación
representa la enfermedad infecciosa más
frecuentemente transmitida a través de
transfusiones, y el riesgo clínico fundamental
cuando se infunden estos concentrados es la
sepsis postransfusional en el receptor,
complicación que se asocia a mortalidades en
torno al 20%.
EICH e Inactivación
• Se produce por una respuesta inadecuada y
autodestructiva del organismo frente a la incorporación y
proliferación de linfocitos T presentes en los componentes
sanguíneos.
• Por su mecanismo de acción, el sistema inhibe la
capacidad proliferativa de las células T, siendo una
alternativa a la radiación gamma para prevenir la
enfermedad injerto contra huésped asociada a la
transfusión (EICH-AT).
Tiempo de almacenamiento
Evaluar plaquetas de aféresis para prolongar
tiempo de almacenamiento post Inactivación, para
demostrar sus características y así lograr obtener
concentrados con óptimos estándares de calidad
hasta el 7 y 9 días de almacenamiento.
Antecedentes:
• La FDA y AABB expresan que las plaquetas pueden ser
almacenadas sólo hasta el 7° día, si se usa algún método
de detección o reducción de la contaminación
bacteriana.
•
Hay cambios cualitativos y cuantitativos en la plaqueta,
como cambios morfológicos, con expresión de P-Selectina
y fosfatidilserina en la membrana, disminución de glucosa
y aumento de lactato, disminución de pH.
• Importantes pérdidas en la viabilidad de las plaquetas y
baja recuperación en posteriores transfusiones
PROCEDIMIENTO TÉCNICO
Kit de Inactivación
Procedimiento de Inactivación
¿Qué estudiamos?:
Comparación de plaquetas con PAS vs
plaquetas con PAS inactivadas
En relación a lo descrito que:
• Existe un deterioro con el tiempo de almacenamiento, y
que se refleja en la disminución del recuento y la
sobrevida de las plaquetas in-vivo, inhibiendo la
respuesta de agregación e incrementando la activación
plaquetaria
Cuáles fueron nuestros objetivos?
Objetivo General:
Demostrar que las plaquetas obtenidas por aféresis
resuspendidas en solución aditiva y tratadas con
Amotosalen, muestran una mejor recuperación y
viabilidad durante el período de almacenamiento.
Objetivos Específicos:
1.Evaluar los factores y/o parámetros cualitativos y
cuantitativos durante el almacenamiento de las
plaquetas.
2.Correlacionar la lesión en las plaquetas por el
almacenamiento prolongado.
Algoritmo de trabajo
Plaquetoféresis
Control:
PQFs en plasma
Almacenamiento a
22°C, en agitación
constante
Día 1
Día 5
Día 7
Muestra:
PQFs +PAS
Con Inactivación
Día 1
Día 5
Sin Inactivación
Día 7
Día 9
Volumen, pH, Recuentos celulares (plaquetas, Leucocitos
residuales), Torbellino óptico, HSR, CF (Expresión P-selectina),
Parámetros metabólicos (Glucosa, LDH, PO2 y PCO2), Estudio
Microbiológico
CONCLUSIONES
• Se observó que en ninguno de los 3 grupos de muestra:
concentrados plaquetarios en plasma, concentrados
plaquetarios con solución aditiva, ni en concentrados
plaquetarios con solución aditiva tratadas con
Amotosalem hubo desarrollo bacteriano al momento de
realizar el estudio microbiológico.
• Se demostró que los concentrados plaquetarios
obtenidos por aféresis con solución aditiva, muestran
una mejor recuperación y viabilidad, manteniendo un
metabolismo
estable
durante
el
período
de
almacenamiento en comparación a las plaquetas
suspendidas en plasma.
CONCLUSIONES
• El estudio de los concentrados con PAS, realizados al 9 día,
demostró que existen cambios metabólicos severos, que
afectaron la viabilidad plaquetaria, no haciendo recomendable
su uso.
• Las plaquetas con solución aditivas hasta el 7 día
presentaron buenos estándares de calidad, concordantes con
estudios internacionales realizados.
• Se comprobó que las plaquetas de aféresis con solución
aditiva tratadas con Amotosalem se correlacionan bastante
bien con las plaquetas que sólo presentan solución aditiva,
pudiendo extender su utilización hasta 7 días.
¡¡ MUCHAS GRACIAS !!