IGENATAL Brochure

Acerca de Igen Biotech
IGEN es una empresa de capital privado, centrada en I+D+i en el campo
de la biotecnología. Desde su fundación en 2008, IGEN está colaborando
Extraction de ADN a partir de muestras de baja
celularidad.
iGENatalTM Kit. IGEN Biotech.
con centros de I+D de reconocido prestigio en el campo de la
biomedicina, con el objetivo de crear un portfolio de productos y servicios
de alto valor.
Objetivos
Materializar en aplicaciones prácticas los avances en investigación
Alto rendimiento, alta pureza y alta calidad desde sólo
50.000 células.
Rápido y sencillo
Almacenamiento a temperatura ambiente
I+D avalada por el CDTI.
biomédica y llevarlos al mercado en forma de productos y servicios.
Aportar valor a los proyectos y optimizar sus plazos de desarrollo,
resultados y aplicaciones.
Colaborar con entidades acreditadas para el desarrollo conjunto de
proyectos estrictamente seleccionados.
iGENatalTM, es el primer producto desarrollado por Igen Biotech. Consiste
en un kit de extracción de ADN genómico diseñado especialmente para
la extracción de ADN de muestras prenatales de baja celularidad como
por ejemplo líquido amniótico o vellosidades coriónicas. Este sistema de
extracción permite la extracción de una muestra de ADN de alta calidad
desde una pequeña muestra mediante un ensayo rápido y sencillo,
proporcionando una gran calidad a un coste menor que el de las marcas
líderes de la extracción de ADN..
iGENatalTM tiene un precio asequible de 225 € por kit (válido para 50
extracciones).
Abstract
La extracción de ADN de muestras de baja celularidad, como líquido
amniótico, vellosidad coriónicas, es un campo de gran dificultad debido,
sobre todo a los pobres rendimientos de ADN obtenido o el tiempo
necesario para la obtención del ADN necesario para su posterior
aplicación.
About iGENatalTM
iGENatalTM kit ha sido específicamente diseñado para muestras prenatales
de baja celularidad ofreciendo una rápida y fácil extracción cimentado
en la técnica de extracción en fase orgánica. Sus fases son: lisis,
aislamiento, precipitación, lavado, secado y resuspensión. La fase más
larga es la lisis (entre 30-90 minutos, dependiendo del tipo de muestra),
El procedimiento habitual tras la obtención de las muestras consiste en la
para una duración total de ensayo de máximo 3 horas.
expansión celular mediante largos cultivos in vitro con el fin de obtener la
cantidad de células suficiente para su posterior análisis mediante técnicas
citogenéticas o moleculares, llegando a atrasar el diagnóstico a días e
incluso semanas, siendo clave en este tipo de diagnósticos el tiempo y la
eficacia.
iGENatalTM kit se basa en un proceso de extracción en fase orgánica
(fenol/cloroformo) optimizado que implica lavado y diferenciación entre
fases que ofrece una gran eficiencia y comodidad a la técnica de
extracción.
Además de un ahorro de tiempo, la eliminación de los cultivos se traduce
en una reducción de horas de trabajo y un menor error debido a la
intervención humana. Esto también significa que los sistemas automáticos
no estén sobrecargados de trabajo, necesitando menor tiempo de ensayo
y aumentando sus ciclos de vida.
La cantidad y calidad del rendimiento generado por iGENatalTM es
equivalente a aquellas generadas por caros sistemas automáticos.
Figura
1.
Pasos
de
la
extracción de AND en fase
orgánica
iGENatalTM
utilizando
Alto rendimiento desde baja celularidad
Gran pureza y calidad del ADN obtenido
Los kits de extracción de ADN genómicos existentes en el mercado suelen
La optimización del procedimiento de separación en fase orgánica de
centrar su acción en sangre completa, plasma suero, tejido animal o
iGENatalTM kit ofrece un ADN prácticamente libre de impurezas, sobre
vegetal, etc., el Kit de IGEN Biotech es capaz de extraer ADN desde
todo, impurezas de ARN o proteínas. El ADN obtenido posee la calidad
aproximadamente 50.000 células, lo que le aporta un valor solo capaz de
suficiente para cualquier ensayo subsecuente a diferencia de otros
ser igualado por caros sistemas automáticos.
productos como los basados en columnas de sílice que normalmente
obtienen ADN contaminado de trazas de nucleótidos. Los ratios de
La baja celularidad de la muestra inicial, no afecta al rendimiento del ADN
recuperado. Cantidades mínimas de partida (2 mL de líquido amniótico o
2-3
mg
de
vellosidad
coriónica)
aseguran
un
alto
absorbancia, A260/A280 y A260/A230 están entre 1.7 – 1.9 y por encima de 2
respectivamente.
rendimiento
(aproximadamente 80µg/ml de líquido amniótico y 800µg/ml de vellosidad
coriónica).
CHORIONIC VILLUS
AMNIOTIC FLUID
141,26
150,00
500
424,3
400
100,00
300
200
100
78,22
229,64
50,00
72,83
0,00
0
50.000
150.000
250.000
50.000
100.000
Figura 2. Rendimiento de iGENatalTM Kit. Concentraciones (ng/µL) de AND obtenidas
desde diferentes celularidades A) Vellosidad coriónica cultivada; B) Líquido
amniótico.
Figura 3. Ratios A260/A280 y A260/A230. Espectro de absorbancia del ADNA genómico
obtenido de 2 mg de vellosidad coriónica mediante iGENatalTM Kit.
Sequencing-grade DNA
Optimización de los tiempos de extracción.
La constante evolución de la biología molecular necesita, cada día más,
de métodos capaces de trabajar a menores concentraciones, sin que se
vean afectados la calidad, eficacia y rendimientos de los métodos. El Kit
de
Extracción
de
ADN
Genómico
de
IGEN
Biotech
se adapta
perfectamente a los nuevos métodos de análisis, siendo el ADN obtenido
capaz de ser analizado mediante microarrays, q-PCR, a-CGH, X-MAP y
cualquier
tipo
de
secuenciación
masiva
como,
por
ejemplo,
pirosecuenciación ya que apenas se producen fragmentaciones de ADN.
A pesar de la especialización del kit en muestras de extracción
complicada, esto no aumenta el tiempo de ensayo. El tiempo de
procesamiento aproximadamente es de 90 minutos (a partir de líquidos
amnióticos) y de 120 minutos (a partir de muestras de vellosidad
coriónica).
Referencias
El kit está siendo validado en varios laboratorios europeos.
Wessex Regional Genetics Laboratory, Salisbury District Hospital. UK.
Hospital San Joan de Deu. Barcelona, España.
NE Thames Regional Genetics Service. Great Ormond Street Hospital
NHS Trust. London, UK.
Quantitative Genomics Medicine Laboratories, SL. Barcelona, Spain.
Figura 4. Electroforesis en Agarosa 0,8% de ADNs genómicos obtenidos a partir de
muestras prenatales (AF, líquido amniótico; CVS, vellosidad coriónica) mediante
iGENatalTM kit en comparación con AND genómico obtenido por métodos
tradicionales a partir de muestras de sangre.