Aspergillus - Dr. Patricio Godoy

Transcripción

Aspergillus - Dr. Patricio Godoy
Identificación de Hongos
Filamentosos de Interés Clínico
Dr. Patricio Godoy Martínez
Instituto de Microbiología Clínica
UACH
www.pgodoy.com
1
El género Aspergillus - importancia para la humanidad
El lado negativo:
Causa enfermedad invasiva y alérgica
en humanos y otros animales:
A. fumigatus
Causa contaminación de plantas y alimentos
produce micotoxinas:
A. flavus and A. parasiticus
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Aspergilosis invasiva: tropismo
vascular y fenómenos vaso-oclusivos
Infarto pulmonar
2
Aspergilosis invasiva: tropismo vascular y
fenómenos vaso-oclusivos
El género Aspergillus - importancia para la humanidad
Lado positivo:
Genética
Modelos del organismo para biología celular y genética:
A. nidulans
Producción de alimentos:
Enzimas y ácidos orgánicos: A. niger
Alimentos orientales: A. oryzae and A. sojae
Industria Farmacéutica:
Equinocandinas: A. nidulans and A. sydowi
lovastatina: A. terreus
fumagillin: A. fumigatus
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Ciclo de Aspergillus
Esporas inhaladas
Germinación
Masa de hifas
(plateau)
Fase de crecimiento
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3
El género Aspergillus – ~180 especies,
38 causan enfermedad (capaces de crecer a 37ºC)
Común en el medio ambiente
Aspergillus
A. nidulans – may be amphotericin B resistant fumigatus conidial
head
A. niger A. A.
A. fumigatus
low
frequency
of B
azole
resistance
flavus
resistant
terreus
–-sometimes
resistant
toamphotericin
AmB
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Aspergillus
Diagnóstico
Micológico
Directo
Indirecto
Examen microscópico directo


Hifas hialinas, tabicadas con división dicotómica
Demostrar la presencia de las hifas invadiendo los
tejidos
4
Histopatología: H&E
036
Histopatología: Grocott
Identificación
5
Observación macro-microscópica
de la colonia
Características morfológicas
Conídios
Conídio
Fiálide
Vesícula
Fiálides
Hifa
Septo
Conidióforo
Características morfológicas
COLUMNAR
RADIADA
6
Aspergillus fumigatus
Aspergillus fumigatus
Micromorfología de Aspergillus fumigatus. Uniseriado, cabeza columnar.
Conidióforos pequeños, pared lisa. Los conídios se producen en sucesión
basípeta formando largas cadenas. Conídios globosos, verdes de pared
rugosas.
Aspergillus section Fumigati
Especies del Fumigati utilizando caracterización fenotípica y características genéticas
(RAPD y MLST) de genes parciales de la calmoduliba, β-tubulina y actina,
TOTAL DE 30 ESPECIES: al menos 9 con interés clínico:
A. fumigatus (Raper e Fennell 1965)
A. fumisynnematus (Yaguchi et al., 2007)
A. lentulus (Balajee et al., 2005)—Potencial de Resistência
A. viridinutans (Hong et al., 2005)
N. fischeri (Chim et al., 1998; Gori et al., 1998)
N. pseudofischeri (Balajee et al., 2005; Coriglione et al., 1990; Padhye et al., 1994)
N. spinosa (Summerbell et al., 1992; Gerber et al., 1973)
N. hiratsukae (Guarro et al., 2002)
N. udagawae (Balajee et al., 2006)
7
Aspergillus niger
Aspergillus niger
Micromorfología de Aspergillus niger. Biseriado, cabeza radiada. Conidios
globosos, de color café a negros, rugosos. Conidióforos lisos.
Aspergillus flavus
8
Aspergillus flavus
Micromorfología de Aspergillus flavus. Uni y biseriados, cabeza radiada y
columnar. Conídios lisos y globosos. Conidióforos rugosos. Algunas especies
Resistencia a Anfo B.
Aspergillus section Flavi
Complejo Flavi: 23 especies pertenecientes al grupo:
A. flavus,
A. oryzae
A. subolivaceus
• thomii
A. terrícola var. americana
A. parasiticus
A. sojae
A. toxicarius
A. caelatus
A. pseudomarii
A. coremiiformis
A. favofurcatis
A. terrícola var. indica
A. terricula
A. tamarii
A. lanosus
A. robustus
A. leporis
A. nomius
A. avenaceus
A. bombycis
A. qizutongi
A. beijingensis
Cepas de A. flavus pueden presentar resistencia a anfotericina B (Balajee et al., 2007, Verweij, et al., 2007).
Frente a los antifúngicos triazólicos, (itraconazol, posaconazol, ravuconazol y voriconazol), cepas de A.
flavus demostraron: posaconazol CIM ≥ 0,5 μg/mL y los demás triazólicos CIM ≥ 1 μg/mL (Pfaller et al.,
2008).
(Hedayati et al., 2007).
R. Salim & R. Runco
Aspergillus parasiticus
conidióforos de longitud variable, pared hialina, gruesa, con ornamentación equinulada, vesículas esféricas, uni o biseriadas
(24-25 µm), las fiálides cubren completamente la vesícula. Conidios globosos o subglobosos verrugosos (2,5-3 µm) com
paredes delgadas (20, 21).
9
Aspergillus terreus
www.mycology.adelaide.edu.au
Aspergillus terreus
Micromorfología de Aspergillus terreus. Biseriado, cabeza columnar.
Conidios globosos y lisos. Conidióforos lisos. Resistencia Anfo B.
www.mycology.adelaide.edu.au
Scedosporium apiospermum
Aspergillus fumigatus
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FUSARIUM
Micosis superficiales producidas
por Fusarium
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Lesiones Oculares
laboratorio
Fusariosis: Diagnóstico

Métodos directos
 Hemocultivos
 Biopsias
 Secreciones respiratorias
 Directo y cultivo
12
Examen Microscópico Directo
Macromorfología de las colonias
de Fusarium
Micromorfología
Macroconídio
Mesoconídio
Microconídio
Clamidoconídio
De Hoog et al. - Atlas of Clinical Fungi. 2000.
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Micromorfología
Fusarium solani
Fusarium solani
Micromorfología de Fusarium solani: Condióforos largos >100um,
macroconídios más anchos en la mitad superior, pared gruesa.
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Fusarium oxysporum
Fusarium oxysporum
Micromorfología de Fusarium oxysporum: Condióforos cortos, macroconídios
de pared fina.
Fusarium dimerum
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Fusarium dimerum
Micromorfología de Fusarium dimerum: Conídios color naranja, micro y
macroconídios indistinguibles de tamaño, conídios usualmente con septo
central.
Fusarium verticillioides
Fusarium verticillioides
Micromorfología de Fusarium verticillioides: Macroconídios fusiformes,
monofiálides con microconídios en cadena.
draf.lorraine.agriculture.gouv.fr/phpwebgalle
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infecciones por Fusarium
F. solani
F. oxysporum
F. verticillioides
Fusarium spp.
F. proliferatum, F. sacchari, F. semitectum, F. chlamydosporum etc.
infecciones por Fusarium
— Ratón inmunocompetente —
INÓCULO: 2.5 x 107 conidiO/ml
n
Sobrevida (días)
F. solani
5
2-14
F. oxysporum
5
>30
F. verticillioides
2
>30
F. proliferatum
1
>30
Mayayo et al., J. Med. Microbiol. 48: 363, 1999
Susceptibilidad a la Anfotericina B por
Fusarium spp.
n
Media MICs
F. solani
16
3.47
F. oxysporum
19
2.13
F. verticillioides
7
1.98
Fusarium spp.
16
1.82
Pujol et al., JAC 39: 163, 1997
17
Según documento CLSI M 38 P
MICs (24h)
F. solani
n
RVC
PSC
VRC
18
27.4
19.3
3.4
F. oxysporum 4 5.6
1
1.6
Papithou et al., AAC 46: 3298, 2002
Fusarium

Difícil de diagnosticar y tratar

Dosis patrón de AMB es ineficiente

Recuperación de los neutrófilos es fundamental

El control de los síntomas de la enfermedad es esencial
Mortalidad cerca de 100%
Scedosporium apiospermum
Aspergillus fumigatus
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