Cubiertas Comestibles de Cera y Polifenoles de Candelilla: Una
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Cubiertas Comestibles de Cera y Polifenoles de Candelilla: Una
2013 Volumen 5, No 10. Revista Científica de la Universidad Autónoma de Coahuila Cubiertas Comestibles de Cera y Polifenoles de Candelilla: Una Alternativa de Conservación de Papaya (Carica papaya L.) Edible Coatings of Wax and Polyphenols from Candelilla: An Alternative of Conservation of Papaya (Carica papaya L.) Ricardo Télles-Pichardo1, Karina Cruz-Aldaco2,3, Emilio Ochoa-Reyes4, Cristóbal N. Aguilar2 y Romeo Rojas2* 1 Departamento de Ingeniería Química y Bioquímica. Instituto Tecnológico de Zacatepec. Morelos, México. Departamento de Investigación en Alimentos. Universidad Autónoma de Coahuila. 25280, Saltillo, Coahuila, México. 3 Bioingenio LifeTech SA de CV 25280, Saltillo, Coahuila, México. 4 Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo A.C. – Unidad Cuauhtémoc. Chihuahua, México. *Correo electrónico: [email protected] 2 Resumen Actualmente, el consumidor demanda productos de alta calidad y que contengan sólo ingredientes naturales, el éxito de estos productos se debe a sus buenas características sensoriales y nutricionales. Las películas comestibles se utilizan como una cubierta sobre los alimentos en forma de envoltura. El mecanismo por el cual estas películas conservan la calidad de frutas y vegetales es debido a que crean una barrera a los gases, produciendo una atmósfera modificada alrededor del producto y a su vez representa una barrera física que evita el contacto con microorganismos que afecten los frutos. En este trabajo se desarrollaron cubiertas comestibles formuladas con cera de candelilla-polisacáridos naturales y polifenoles, se utilizó una cera extraída de la planta Euphorbia antisyphilitica Zucc. Se aplicó la formulación en papayas, se monitoreo el efecto que generan las cubiertas comestibles con polifenoles y sin polifenoles sobre la pérdida de peso del fruto almacenado a temperatura ambiente, cambios en la apariencia visual externa del fruto e invasión fúngica. Los datos encontrados en este trabajo indican que las cubiertas comestibles de cera de candelilla y polifenoles, afectan significativamente en la vida de anaquel del fruto (p≤0.05). Sin embargo, el mejor tratamiento que perdió menor peso y conservó mejor apariencia visual fueron las papayas con recubrimiento y polifenoles (CP), la cual logró mejorar la calidad de vida de anaquel de papaya en mayor medida que el resto de los tratamientos, aun el uso del tratamiento con cubierta-CC (sin polifenoles) mejoró la calidad de vida de anaquel considerablemente. Palabras cave: Cera de Candelilla, Polifenoles, Película Comestible, Papaya Abstract Currently, consumers demand products of high-quality that contain only natural ingredients, the exit of these products is due to its good sensory and nutritional characteristics. Edible films are used as a cover over the foods in form of wrap. The mechanism by which these coatings retain the quality of fruits and vegetables is because it creates a barrier to gases, producing a modified atmosphere around the product and represent a physical barrier that avoid the contact with microorganisms that affect the fruit. In this work, we developed edible coatings formulated with candelilla wax-natural polysaccharides and polyphenols, we used a wax extracted from candelilla plant (Euphorbia antisyphilitica Zucc). The formulation was applied in Papaya fruit and was evaluated the effect that is generated with edible coatings with polyphenols and without on weight loss of the fruit stored at room temperature, changes in external visual appearance and fungal invasion. The data in this study indicate that edible coating of candelilla wax and polyphenols, affect significantly in the shelf life of fruit (p≤0.05). However, the best treatment were papaya with edible coating with polyphenols (CP) due to the minor weight loss and preserve the better visual appearance in comparison with the others treatments, but the use of edible coating-CC (without polyphenols) was able to improve the shelf life and quality considerably. Key words: Candelilla wax, polyphenols, edible coating, Papaya. 1 2013 Volumen 5, No 10. Revista Científica de la Universidad Autónoma de Coahuila INTRODUCCIÓN La papaya (Carica papaya L.) es nativa de América y crece en clima tropical y subtropical (Alvarez y Nishijima, 1987). En México, con una producción anual promedio de 1 100 000 toneladas para el 2009 solo se registraron exportaciones por el 10 %. Esto convierte al país en el principal exportador del mundo con ingresos superiores a los 600 millones de dólares (SAGARPA, 2011). Sin embargo, es un producto climatérico muy perecedero con una corta vida de anaquel, incluso cuando se mantiene bajo refrigeración (Morais y col., 2008). Su rápido deterioro es resultado de su alto contenido de agua, de su alta tasa de respiración y de su producción autocatalítica de etileno que se traduce en elevar la temperatura durante su almacenamiento, provocando el fácil reblandecimiento de su estructura y cambios en color y sabor (Balbino y Colheita, 2003; Castricini y col., 2012). Para mejorar o aumentar su vida poscosecha se han utilizado diversos tratamientos, tales como: tratamiento con agua caliente, almacenamiento con atmosfera controlada y/o modificada, irradiación gamma. Sin embargo, una técnica que se ha estado popularizando por los buenos resultados que ofrece es el uso de recubrimientos comestibles. Los recubrimientos comestibles son capas delgadas de materiales aplicadas en la superficie de un producto alimenticio con la intención de mejorar su apariencia o prolongar su vida de anaquel. Esto se logra al generar un intercambio controlado de gases (O2, CO2 y etileno) que están implicados en la respiración además de proporcionar una barrera a la pérdida de humedad (Lacroix y Tien, 2005; Pavlath y Orts, 2009). Los recubrimientos pueden ser fabricados a partir de biopolímeros como proteínas, polisacáridos o lípidos (Gennadios y col., 1997); Además, la adición de un plastificante es necesaria para la modificar las propiedades físicas o funcionales del recubrimiento (Han y Gennadios, 2005). La goma arábiga o goma acacia proviene de un exudado gomoso de los tallos o ramas de especies Acasia. Es el menos viscoso y más soluble de los hidrocoloides (NisperosCarriedo, 1994). Se utiliza ampliamente en la industria por alto poder de emulsificación, formación de película y encapsulación (Motlagh y col., 2006). Debido a estas propiedades es usada para retardar la cristalización de los azucares, espesar dulces, jaleas, barnices y gomas de mascar (Fogarty, 1988). Se ha utilizado para revestir la nuez pecanera para eliminar su apariencia húmeda y aceitosa (Arnold, 1963). Así mismo se ha utilizado como recubrimiento de manzanas (El-Anany y col., 2009; Saucedo-Pompa y col., 2007; Ochoa y col., 2011), aguacates (Saucedo-Pompa y col., 2007; Saucedo-Pompa y col., 2009), fresa (Télles-Pichardo y col., 2012), plátano (SaucedoPompa y col., 2007), tomates (Ali y col., 2010) mostrando un retraso significativo en el cambio de pérdida de peso, firmeza, solidos totales, ºBrix, acidez titulable, color y apariencia durante el periodo de almacenamiento en comparación con los controles sin recubrimiento. El objetivo del presente trabajo fue evaluar un recubrimiento previamente probado en otros frutos frescos para validar su potencial como un producto comestible que prolonga la calidad y vida de anaquel de frutas. Además, poder ampliar su campo de aplicación en frutos de alto valor comercial en los que su principal problema es su corta vida de anaquel que impide elevar el nivel de exportación. Así mismo, evaluar el potencial de los polifenoles totales de tallos de candelilla en la vida de anaquel de este fruto. MATERIALES Y MÉTODOS Extracción de cera de candelilla La planta de candelilla fue proporcionada por la empresa MULTICERAS S.A. de C.V., García, Nuevo León, México. Posteriormente se limpió y cortó la planta de acuerdo a lo repostado por De León-Zapata y col. (2008). El proceso de extracción y purificación se llevó a cabo con una solución de ácido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxílico a 121 °C (15 Lb/in2) en un equipo de acero inoxidable diseñado en el D.I.A. y posteriormente se refinó el cerote mediante refundición en agua (Rojas-Molina, 2010; Ochoa-Reyes y col., 2010; Rojas-Molina y col., 2011). Los experimentos se realizaron por triplicado. Recuperación de polifenoles totales Los tallos de candelilla sin cera fueron deshidratados a 60 °C por 48 h. Después de la deshidratación, se redujo el tamaño de partícula en un molino de cuchillas. La extracción acuosa de polifenoles totales se llevó a cabo en una relación 0.20 g mL-1 p/v a 60 °C por un periodo de 30 min con agitación cada 5 min. Posteriormente, el material se filtró con tela de manta y después con papel Whatman # 41 para eliminar las partículas de gran tamaño. Para la purificación de los polifenoles se utilizó una columna de cromatografía con Amberlita XAD-16. Primero se utilizó agua para eliminar los compuestos indeseables y después se usó etanol para recuperar la fracción rica en polifenoles totales de candelilla (PTC). El solvente fue evaporado y se recuperaron los PTC como un polvo fino. (Seeram y col., 2005; Ascasio-Valdés y col., 2010). Los experimentos se realizaron por triplicado. Preparación de recubrimiento La formulación se llevó a cabo de acuerdo a lo reportado por Saucedo-Pompa y col. (2007). Para formar la emulsión se utilizó goma arábiga, cera de candelilla y aceite de jojoba como plastificante. El polisacárido se solubilizó en agua MiliQ a temperatura ambiente y después se calentó a 80 °C. Se adicionó la cera y el plastificante y se homogenizaron todos los componentes a 15 000 rpm (InternationalTM Mod. LI-17V) por 15 min. 2 2013 Volumen 5, No 10. Revista Científica de la Universidad Autónoma de Coahuila Aplicación del recubrimiento Los frutos (Papaya) fueron obtenidos en el mercado de abastos Benito Juárez (Periférico Luis Echeverría, Saltillo, Coahuila, México). Se seleccionaron de acuerdo a su uniformidad en tamaño, ausencia de daños en la piel, ausencia visible de microorganismos, madurez y color. Se desinfectaron con una solución clorada (500 ppm) por 5 min y se secaron a temperatura ambiente (González-Aguilar y col., 2005). La aplicación del recubrimiento se llevó a cabo mediante inmersión por un periodo de 2 segundos y un posterior secado con flujo de aire. El proceso se repitió una vez más para posteriormente almacenar los frutos a temperatura ambiente (25 ± 3 °C) por un periodo de 8 días muestreando diariamente. Evaluación de vida de anaquel Los tratamientos evaluados fueron: Papaya con recubrimiento y polifenoles (CP), Papaya con cubierta (CC) como control positivo y Papaya sin cubierta (SC) como control negativo. Durante el periodo de almacenamiento, los tratamientos fueron monitoreados cada 24 h usando como variables de respuesta los dos principales indicadores de la senescencia de los frutos. La pérdida de peso se determinó usando una balanza de precisión (METTLER-TOLEDO Mod. E-021300) el cual se expresó como porcentaje de pérdida de peso (Hernández-Muñoz y col., 2008). Los cambios de apariencia fueron monitoreados con una cámara fotográfica (Sony Cyber-shot 13.6 MegaPixels). El experimento se realizó con una n=1 para cada tratamiento. El experimento se llevó a cabo sin repeticiones. La investigación se llevó a cabo en el Departamento de Investigación en Alimentos (DIA) de la Facultad de Ciencias Químicas (FCQ) de la Universidad Autónoma de Coahuila (UAdeC). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Extracción de cera de candelilla La extracción de cera de candelilla es más eficiente que el método tradicional (Rojas-Molina y col., 2011), además es un proceso eco-amigable sin daños a la salud y permite la recuperación de los polifenoles de los residuos (tallos sin cera). El rendimiento más alto logrado fue de 800 ± 31.7 mg de cera/100 g de planta. La cera presentó las características visuales propias de la cera de candelilla (color amarillo, dura compacta y quebradiza) similar a los mencionado por el Instituto de la Candelilla, 2008 y Multiceras, 2010). La variación en rendimientos en la obtención de cera de candelilla varía de acuerdo a la temporada en que se recolecta la planta, la distancia, la altura, etc. Sin embargo, algunos reportes mencionan que se pueden tener rendimientos de hasta 4166 mg/100 g de planta (RojasMolina y col., 2011). Adicionalmente, en reportes anteriores no se hace mención de acerca de la obtención de cera totalmente orgánica libre de ácido sulfúrico que reduce los daños a la salud y al medio ambiente. Recuperación de polifenoles totales Los polifenoles totales de planta de candelilla (PTPC) son el resultado del aprovechamiento de los tallos de candelilla sin cera que antes eran considerados como un residuo. Con anterioridad se demostró que los PTPC tienen un alto contenido en ácido elágico (Aguilera-Carbó y col., 2008; Ascasio-Valdés y col., 2010) con alto potencial en la industria cosmética, dermatológica, alimentaria, etc. (Nizard y col., 1998). El rendimiento fue de 7.41 mg/g planta similar a lo reportado por Ascasio-Valdés y col. (2010) por lo que con la nueva metodología de extracción de cera de candelilla orgánica reportada por Rojas-Molina, (2010) no afecta el contenido de polifenoles presentes en los tallos de candelilla. Esto se debe principalmente a la estabilidad térmica de los polifenoles, principalmente el ácido elágico (Barch y col., 1996; Bala y col., 2006). Vida de anaquel La pérdida de agua por transpiración del fruto es la principal causa de pérdida de peso del mismo (Kader, 1986). Esta deshidratación se ve reducida por la presencia de una cubierta cérea externa o epicuticular (Mrozek y Burhardt, 1973; Storey y Price, 1999) que aumenta la resistencia a la cutícula a la difusión de agua (Price y col., 2000). La aplicación de recubrimientos hidrofóbicos en la superficie de las frutas aporta una barrera adicional a la deshidratación (Baldwin y col., 1997). La aplicación del recubrimiento comestible redujo la pérdida de peso (fig. 1), los cambios de apariencia y la contaminación fúngica de los frutos. Todas las muestras presentaron una pérdida gradual de peso durante el almacenamiento. El tratamiento CP, CC y SC perdieron el 11.73 %, 13.84 % y 14.48 % de su peso inicial, respectivamente. Así mismo, esto representa una pérdida agua de 0.858, 0.807 y 0.669 g H 2O*Kg papaya/h para los tratamientos SC, CC y CP, respectivamente. Estas variaciones se deben principalmente a la capacidad de la cubierta para formar una capa continua y/o penetrar en los poros del fruto (Hagenmaier y Baker, 1993) y poder sellar heridas. Además, la presencia de los compuestos activos y su alta capacidad antioxidante y antifúngica logran retardar la senescencia del fruto. Reportes similares usaron un recubrimiento adicionado con activos antioxidantes como el ácido elágico (uno de los componentes presentes en los PTPC) y gálico en frutos modelo como manzana (Saucedo-Pompa y col., 2007; Ochoa y col., 2011), aguacate (Saucedo-Pompa y col., 2009), plátano (Saucedo-Pompa y col., 2007) y fresa (TéllesPichardo y col., 2012). Los autores demostraron la efectividad del recubrimiento al reducir la pérdida de peso en comparación con los controles. Las diferencias las atribuyen 3 2013 Volumen 5, No 10. Revista Científica de la Universidad Autónoma de Coahuila principalmente a la naturaleza hidrofóbica del recubrimiento, a la barrera formada (Ghaouth y col., 1991; Islas-Osuna y col., 2010), a la disminución de la concentración de O 2 e incremento de CO2 que reduce el número de poros por el cual el vapor de agua y otros gases se intercambian (ISTH, 1990) y a la presencia de compuestos activos con actividad antioxidante y antifúngica (Farag y col., 1989). Otros autores también coinciden con el efecto del uso de recubrimientos para preservar la vida de anaquel en papaya usando almidón (Almeida-Castro y col., 2011; Castricini y col., 2012), quitosán (Osman y col., 2011; Ali y col., 2011) y alginato (Tapia y col., 2008). 16 SC CC CP 14 Pérdida de peso (%) 12 10 8 6 4 2 0 0 2 4 6 8 Tiempo (días) Figura 1. Pérdidas de peso en frutas (papaya) despues de 8 días de almacenamiento a 25 ± 2 ºC. Tiempo inicial (0 días) SC CC CP Tiempo final (8 días) SC CC CP Figura 2. Apariencia externa de papaya sin cubierta (SC), con cubierta (CC) y con cubierta y polifenoles (CP) almacenadas a 25 ± 2 ºC. 4 2013 Volumen 5, No 10. Revista Científica de la Universidad Autónoma de Coahuila Cambios de apariencia Entre los beneficios que brinda la aplicación de recubrimientos comestibles en frutos se encuentra conservar su apariencia ya que es la primera impresión que tiene el consumidor. Esto para frutos climatéricos y no climatéricos se reduce al disminuir la tasa de respiración evitando su marchitez (Sinclair, 1984; Chávez y col., 1993). Con el uso de los recubrimientos a base de cera y polifenoles de candelilla se logró preservar la apariencia de las papayas siendo CP el mejor tratamiento, seguido de CC y SC (fig. 2). También, el uso del tratamiento con PTPC (CP) presentó mayor resistencia visual al ataque de microorganismos. El crecimiento de microorganismos se debe principalmente a la pérdida de agua, la liberación de iones, otros componentes de las células y el polisacárido hidratado del recubrimiento que proveen un medio rico para el desarrollo de microorganismos (Brackett, 1987). Estos resultados son similares a lo reportado en manzanas (Ochoa y col., 2011), zanahorias (Farag y col., 1989), aguacate (Saucedo-Pompa y col., 2009; Maftoonazad y col., 2007) usando recubrimientos comestibles con activos como ácido cítrico, antioxidantes fenólicos (Farag et al., 1989; Rojas-Grau et al., 2006; Saucedo-Pompa y col., 2007; Saucedo-Pompa y col., 2009; Ochoa y col., 2011; Télles-Pichardo, 2012) mejorando las propiedades del recubrimiento reduciendo la susceptibilidad del fruto a un ataque microbiano. CONCLUSIÓN Los recubrimientos comestibles a base de cera y polifenoles de candelilla como bioactivo preservan la calidad de papaya a temperatura ambiente (25 ± 2 ºC) por 8 días. El recubrimiento CP permite retrasar la pérdida de agua y el crecimiento microbiano incrementando la vida de anaquel de papaya fresca entera. Sin embargo, para futuros estudios será necesario llevar a cabo otros análisis como ºBrix, acidez titulable, firmeza, análisis microbiológico, etc, para conocer a detalle los cambios físico-químicos del fruto. AGRADECIMIENTOS Los autores agradecen el apoyo financiero proporcionado al proyecto Fondo Sectorial CONAFOR- CONACYT-200891633, al Posgrado en Ciencia y Tecnología de Alimentos PNPC 001468, al CONACYT por el apoyo otorgado a Ricardo Télles Pichardo en el programa de Veranos por la Innovación en la Empresa 2011 promovido por el Foro Consultivo de Ciencia y Tecnología (FCCyT). Así como al Grupo Bioingenio S.C por todas las facilidades bridadas para la culminación del proyecto. REFERENCIAS Aguilera-Carbó AF, Augur C, Prado-Barragan LA, Aguilar CN y Favela-Torres E. 2008. Extraction and analysis of ellagic acid from novel complex sources. Chem. Papers. 62(4): 440–444. Ali A, Maqbool M, Ramachandran S y Alderson PG. 2010. 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