Multiplicación in vitro de la especie oleaginosa argania [Argania

Multiplicación in vitro de la especie oleaginosa argania [Argania

XI Congreso SECH. Albacete 2007.
Multiplicación in vitro de la especie oleaginosa argania [Argania
spinosa (L.) Sheel.] procedente de Marruecos
K. Majourhat1,2, A. Hafidi1, A. Piqueras2, P. Martínez-Gómez2
Faculté des Sciences Semlalia. University Cadi-Ayyad of Marrakech Morocco
2
Departamento de Mejora Vegetal. CEBAS-CSIC. Murcia. Spain
1
Palabras clave: argania, micropropagación, cultivo in vitro, germoplasma
Resumen
La especie argan [Argania spinosa (L.) Sheel] perteneciente a la familia Sapotaceae
es una especie arbórea y perenne endémica del Suroeste de Marruecos. Esta
especie, de la cual se extrae un aceite muy apreciado tanto para cocina como para
cosméticos, juega un importante papel socio-económico en las zonas áridas y
semiáridas de la región Subsahariana marroquí. Sin embargo, en estos momentos
debido a la sobreexplotación por parte de los habitantes de la zona, se está
produciendo una gran erosión de los recursos filogenéticos de la especie. En este
sentido, diferentes esfuerzos se están llevando a cabo para restaurar y conservar la
diversidad genética de la especie. En este sentido, en este trabajo se presentan los
resultados de un proyecto de colaboración hispano-marroquí sobre la
multiplicación in vitro de esta especie. Hasta la fecha se han desarrollado eficientes
protocolos adaptados a la especie argania para la introducción, la multiplicación y
la elongación del material in vitro. Por otra parte se están ensayando diferentes
protocolos y medios para el enraizamiento del material y así cerrar el ciclo de
micropropagación in vitro de esta especie.
INTRODUCCIÓN
Argania spinosa (L.) Sheel. perteneciente a la familia Sapotaceae es una espeice
frutal endémica del Sudoeste de Marruecos. Esta especie con una superficie de 800.000
hectáreas juega un importante papel tanto socio-económico como medioambiental en
estas regiones muy próximas al desierto del Sahara. De hecho la argania es el ultimo
árbol antes del desierto (Benchkroun y Buttoud, 1989). El aceite de la semilla de la
argania es la parte comercializable y de mayor valor tanto a nivel de alimentación como
a nivel cosmético. Además de este valor comercial el árbol de la argania sirve para
evitar la desertización de estas zonas tan áridas y el fruto sirve de alimento para el
ganado caprino (Pennington, 1991).
Sin embargo la sobreexplotación de esta especie y su degradación está
erosionando gravemente su diversidad genética. En este sentido, diferentes esfuerzos se
están llevando a cabo para restaurar y conservar la diversidad genética de la especie
como son la puesta a punto de protocolos eficientes de multiplicación in vitro (Nouaim
et al., 2002; Bousselmame et al., 2001).
El objetivo de este trabajo ha sido desarrollar un protocolo para la multiplicación
in vitro de esta especie oleaginosa argania [Argania spinosa (L.) Sheel.] procedente de
Marruecos.
MATERIAL Y MÉTODOS
Se utilizaron semillas colectadas en Maruecos de diferentes ecotipos de la
especie argania. Las semillas fueron esterilizadas y sembradas in vitro en un medio de
germinación (Fig. 1). Posteriormente, los brotes se subcultivaron cada 21 días en medio
de multiplicación a 22 + 1ºC con un fotoperiodo de 16 h y una intensidad luminosa de
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55 µmol m-2 s-1. Los medios de cultivo consistieron en los macronutrientes de MS
además de micronutrientes, vitaminas y componentes orgánicos, ensayando diferentes
concentraciones de cada uno de los elementos. El pH se ajustó a 5,8 antes de esterilizar
el medio en un autoclave a 121 ºC durante 20 minutos.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los diferentes ensayos dieron lugar a un protocolo eficiente de cultivo in-vitro
adaptado a esta especie argania. En la Tabla 1 se muestran los medios de cultivo más
adecuados para la germinación de las semillas, la introducción y multiplicación de
brtotes, y su elongación. En estos momentos los esfuerzos se centran en el desarrollo de
un medio de cultivo adecuado para el enraizamiento y así cerrar el ciclo de
multiplicación y propagación de la especie oleaginosa argania en condiciones in vitro.
El cultivo en condiciones in vitro en tubo de ensayo (Fig. 1) nos ofrece
oportunidades únicas para la micropropagación de esta esepcie argania con serios
riesgos de estinción. Las ventajas que nos ha ofrecido consisten en la minimización de
la influencia del medioambiente permitiendo un manejo de gran número de plantas en
un espacio limitado además de acelerar el crecimiento de las plantas.
Agradecimientos
Esta investigación ha sido financiada por el proyecto A/6210/06 “Caractérisation
biochimique et génomiques des morphotypes de l´arganier (Argania spinosa L. Skeels)”
finaciado por la Agencia Española de Cooperación Internacional (AECI). El Dr. Khalid
Majourhat también agradece la ayuda de la AECI para la realización de su estancia en el
CEBAS-CSIC de Murcia
Referencias
Benchakroun F, Buttoud G (1989) L’arganeraie dans l’économie rurale du sud-ouest
marocain. Forêt Méditerranéenne 2, 127–136.
Bousselmame, F., Kenny, L., and Chlyah H. 2001. Optimisation des condition de
culture pour l’enracinement in vitro de l’arganier (Argania spinosa L.). C. R. Acad.
Paris. 324:995-1000.
Nouaim, R., Mangin, G., Breuil, M.C. and Chaussod R. 2002. The argan tree (Argania
spinosa) in Morocco: propagation by seed, cutting and in vitro techniques.
Agroforestery Syst. 54:71-81.
Pennington, T.D. 1991. The genera of the Sapotaceae. Kew publishing. 307 pp.
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Tabla 1. Medios de cultivo utilizados en el cultivo in vitro de la especie argania.
Introducción + Multiplicación
MS including vitamins
Sacarosa
30 g
BAP
5 mg
NAA
0.01 mg
MES
0.200 g
GA3
0.5 mg
L. glutamina
0.120 g
Sequestrene
0.010 g
Agar
8g
Agua 1 litro. pH del medio ajsutado a 5,8 antes de la esterilización
Germinación de semillas
MS macro and micronutrients
Sacarosa
20 g
GA3
0.05 mg
Agar
8g
Elongación
Enraizamiento
MS incluyendo vitaminas
MS incluyendo vitaminas
Sacarosa
30 g
Sacarosa
15 g
BAP
2,5 mg
IBA
0,1 – 1* mg
GA3
0.075 mg
Agar
8g
L. glutamina
0.120 g
Sequestrene
0.010 g
Agar
8g
Agua 1 litro. pH del medio ajsutado a 5,8 antes de la esterilización
* En este rango se encontraría la concentración óptima
A
B
Fig. 1. Detalle de la germinación (A) y la elongación (B) in vitro de la especie argania.
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