Desde que se conocen las hormonas que participan en la

Transcripción

1
REVISIÓN DE LOS PROTOCOLOS EMPLEADOS EN
LA SINCRONIZACIÓN DE CELOS EN BOVINOS
SERGIO RAMIRO PALOMARES GARCÍA
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES – U.D.C.A
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
BOGOTÁ D.C., 2009
2
REVISIÓN DE LOS PROTOCOLOS EMPLEADOS EN
LA SINCRONIZACIÓN DE CELOS EN BOVINOS
SERGIO RAMIRO PALOMARES GARCÍA
Trabajo Presentado como requisito para optar al título
de Médico Veterinario y Zootecnista.
Director
EDGAR CIFUENTES
Medico veterinario
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES – U.D.C.A
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
BOGOTÁ D.C., 2009
3
NOTA DE ACEPTACIÓN
_________________________________
Jurado 1
_________________________________
Jurado 2
_________________________________
Director de monografía
Bogotá, D.C., mayo de 2009
4
TABLA DE CONTENIDOS
Pág.
INTRODUCCIÓN
15
1. OBJETIVOS
1.1. OBJETIVO GENERAL
1.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
16
16
16
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
17
3. JUSTIFICACIÓN
18
4. METODOLOGÍA
19
5. IMPACTO ESPERADO
20
6. MARCO TEÓRICO
6.1. ANTECEDENTES
6.2. FISIOLOGÍA REPRODUCTIVA DE LA HEMBRA BOVINA
6.2.1. Anatomía del aparato reproductor de la vaca
6.2.1.1. La vulva
6.2.1.2. La vagina
6.2.1.3. El útero
6.2.2. Foliculogénesis
6.2.3. La ovulación
6.2.4. El cuerpo lúteo
6.2.4.1. Luteolisis
6.2.5. Bases fisiológicas de la reproducción
6.2.5.1. Regulación endocrina: las hormonas de la reproducción
6.3. LA DETECCIÓN DEL ESTRO
6.3.1. Métodos para la detección del estro
6.3.2. Signos de estro
6.3.3. Patrones diarios en los signos de estro
6.3.4. Otros factores que influencian la expresión del estro
21
21
22
22
23
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24
28
32
35
35
37
41
52
56
61
62
62
5
Pág.
6.3.5. Cálculo de la intensidad de detección de celo
6.3.6. Momento óptimo para el servicio (monta – inseminacion)
6.3.7. Ausencia del estro o anestro
64
64
66
7. LA SINCRONIZACIÓN DE CELOS
7.1. Definicion de la biotecnología de Sincronizacion de Estros
7.2. LAS ONDAS FOLICULARES Y LA SINCRONIZACIÓN
7.3. PROTOCOLOS PARA CONTROLAR LAS DIVERSAS FASES DEL
CICLO ESTRAL
7.3.1. Protocolos a base de prostaglandina (PGF-2)
7.3.2. Protocolo Ovsynch (ovulación sincronizada)
7.3.3. Protocolo Heatsynch (celo sincronizado)
7.3.4. Protocolos con la utilización de GnRH + CIDR
7.4. MANIPULACIÓN DEL DESARROLLO FOLICULAR PARA LA
SINCRONIZACIÓN DE ESTROS
7.4.1. Relación: Dinámica folicular, progestágenos y fertilidad
7.5. PROTOCOLOS CON PROGESTERONA Y ESTROGENOS
7.5.1. Estrógenos
7.5.2. Progesterona
7.6. Presincronización con progesterona en novillas prepúberes
7.7. Interferencia de los niveles de progesterona y los dispositivos
Intravaginales
7.8. Ablación folicular
7.9. Efecto de los agonistas y el GnRH en la dinámica folicular
67
68
70
136
137
139
8. INDUCTORES DE OVULACIÓN
141
CONCLUSIONES
146
BIBLIOGRAFÍA
149
73
75
90
101
111
113
114
116
116
122
135
6
LISTA DE CUADROS
Pág.
Cuadro 1. Hormonas más importantes en la reproducción
51
Cuadro 2. Signos de estro en las vacas lecheras
63
Cuadro 3. Esquema AM-PM para la inseminacion artificial
65
Cuadro 4. Formas de control del ciclo estral y productos utilizados
75
Cuadro 5. Respuestas ováricas (media +ES) a tratamientos con
PGF-2 los días 5, 8 ó 12 del ciclo.
82
Cuadro 6. Esquema de presincronización para novillas cebuínas
prepúberes.
135
7
LISTA DE ESQUEMAS
Pág.
Esquema 1. Relaciones del sistema hipotálamo–hipófisis–ovárico
38
Esquema 2. Etapas del ciclo estral bovino
55
Esquema 3. División de las prostaglandinas según su origen
76
Esquema 4. Tratamiento A con PGF-2
78
Esquema 5. Opciones para sincrinización de estros utilizando
2 inyecciones de PGF-2 con 14 días de diferencia.
81
Esquema 6. Tratamiento B. con PGF-2
83
Esquema 7. Tratamiento C. con PGF-2
84
Esquema 8. Tratamiento D. con PGF-2
84
Esquema 9. Tratamiento de los 10 días.
85
Esquema 10. Esquema general del Ovsynch.
91
Esquema 11. Protocolos de sincronización con Ovsynch y Cosynch.
91
Esquema 12. Protocolo de manejo reproductivo que combina IA
a tiempo fijo (Ovsynch) con diagnóstico temprano de
gestación usando ultrasonido.
93
Esquema 13. Programa de presincronización para la
implementación del Ovsynch.
98
Esquema 14. Programa Presynch-Ovsynch.
98
Esquema 15. Programa de tratamiento y resultados asociados al
protocolo 7-11 Synch.
102
Esquema 16. Protocolo MGA.
103
Esquema 17. Esquema general del protocolo Heat–synch.
104
Esquema 18. Protocolos de resincronización de vacas lecheras
en lactación diagnosticadas como vacías en un
examen de palpación rectal en el día 45
post–inseminación.
106
8
Pág.
Esquema 19. Protocolos para resincronización de vacas lecheras
en lactación diagnosticadas como vacías en un
examen de ultrasonografía en el día 27 post
inseminación.
107
Esquema 20. Protocolos utilizados en la resincronización de vacas
deacuerdo con la fase del ciclo estral después del
diagnostico de preñez en el día 30 pos-IA.
110
Esquema 21. Protocolos de los experimentos en vacas de carne
con becerro al pie tratadas con GnRH, PGF-2
y CIDR.
113
Esquema 22. Valerato de Estradiol y desarrollo folicular.
122
Esquema 23. Tratamiento con MGA/PGF-2.
123
Esquema 24. Regimen Crestar.
126
Esquema 25. Tratamiento de sincronización utilizando los
implantes de norgestomet (Crestar) con GnRH a las
30 h de removido el implante e IATF, 54 h después
de la remoción del implante.
130
Esquema 26. Tratamiento de sincronización de celos e IATF
con Crestar y BE.
131
9
LISTA DE FIGURAS
Pág.
Figura 1. Metodología
19
Figura 2. Aparato reproductor de la hembra
23
Figura 3. Cervix
25
Figura 4. Oviductos
26
Figura 5. Ovario
27
Figura 6. Funciones del folículo y del cuerpo lúteo
27
Figura 7. Folículo y cuerpo lúteo
28
Figura 8. Proceso de desarrollo de los folículos y del cuerpo lúteo
32
Figura 9. Maduración del folículo hasta la ovulación y formación
del cuerpo lúteo
34
Figura 10. Ovulación
34
Figura 11. Proceso de luteolisis
36
Figura 12. Estructura y localización del hipotálamo y la glándula
Pituitaria
41
Figura 13. Estructura química de la prostaglandina F-2α (PGF-2α)
50
Figura 14. Fases del ciclo estral
52
Figura 15. Días del ciclo estral
57
Figura 16. El ovario de la vaca y su dinámica durante el ciclo estral
58
Figura 17. Método de detección de celo con pinturas y crayones
60
Figura 18. Horas y niveles en que se manifiestan los signos del estro
62
Figura 19. Diagrama para el servicio
66
Figura 20. Mecanismos de acción de la GnRH.
141
10
LISTA DE GRÁFICAS
Pág.
Gráfica 1. Concentraciones relativas de hormonas en cada fase
del ciclo estral con el respectivo folículo y desarrollo
del cuerpo lúteo.
54
Gráfica 2. Efecto de la sincronización del estro sobre el
desempeño reproductivo durante una sola semana
de servicio.
69
Gráfica 3. Fases de crecimiento folicular: reclutamiento
(dependiente de la FSH); Selección y dominancia
(dependiente de LH); Ovulación o atresia (en la
dependencia de la presencia o no del pico
preovulatorio de LH).
71
Gráfica 4. Esquema del ciclo estral con 2 ondas foliculares. La
primera onda culmina con la atresia del folículo
dominante por falta del pico préovulatório de LH
(Fase luteínica) la segunda onda culmina con la
ovulación (Fase folicular, baja progesterona y pico
preovulatório de LH).
72
Gráfica 5. Esquema del ciclo estral con 3 ondas foliculares. La
primera y la segunda onda culminan con la atresia de
los folículos dominantes por falta del pico preovulatório
de LH (Fase luteínica). La tercera onda culmina con la
ovulación (Fase folicular, baja progesterona y pico
preovulatório de LH).
72
Gráfica 6. Porcentaje de celo después de la PGF-2
80
Gráfica 7. Intervalo PGF-2: ovulación
80
Gráfica 8. Diferentes estatus foliculares al momento de una
inyección de PGF-2 y su gran variación en el
tiempo de ovulación.
83
Gráfica 9. Dinámica folicular – Ovsynch.
92
11
Pág.
Gráfica 10. Distribución de ovulaciones (horas) después de la
aplicación de la PGF-2 en Novillas cruzadas cebú
tratadas con el protocolo Övsynch¨ y con una dosis
única de prostaglandina.
97
Gráfica 11. Distribución de la ovulación en novillas holstein
tratadas con SMB por 9 dias y 1mg de BE im 24h
después
131
Gráfica 12. Dinamica folicular de novillas Nelore, Nelore x Angus
y Angus, utilizando DP4 1,9 g, Benzoato de
Estradiol y Prostaglandina.
136
12
LISTA DE TABLAS
Pág.
Tabla 1.
Tabla 2.
Tabla 3.
Tabla 4.
Tabla 5.
Tabla 6.
Tabla 7.
Resultados cruce rotativo de tres razas bovinas en el
norte de Córdoba.
Tasa de respuesta luego de la aplicación de una
inyección de Cloprostenol, según el día del ciclo en
vacas lecheras en lactancia.
Sincronización de Celos con PGF-2 en Receptoras Bos
indicus.
Tasa de preñez en el día 27 y 50 y perdidas de preñez
con el uso del protocolo Ovsynch y Heatsynch en la
resincronización de vacas diagnosticadas como vacías
en el examen de ultrasonido en el día 27 pos I.A.
Tasa de preñez en el día 27 y 50 en vacas sometidas a
resincronización en diferentes fases del ciclo estral.
Frecuencia de los pulsos de LH y tamaño del folículo
dominante en vacas implantadas con Norgestomet por 9
días y en ausencia de un CL funcional. Datos obtenidos
en el día 9 de la colocación del implante de de
Norgestomet.
Intervalo entre el tratamiento y el crecimiento de una
nueva onda folicular en novillas tratadas con un implante
de progestágeno y una inyección de 5mg de estradiol17b (E-17b) un día después.
Efecto de distintas dosis de BE (Benzoato de Estradiol)
combinadas con 50mg de progesterona administradas
en
el momento de la inserción del CIDR® en el
comienzo de la próxima onda folicular en vacas Hereford
Tabla 9. Preñeces logradas por IATF
con tres protocolos
diferentes de sincronización de celos.
Tabla 10. Porcentajes de preñez y retorno de vaquillonas de 15
meses que fueron IATF y Resincronizadas con
dispositivos intravaginales con progesterona recibiendo o
no 0,5mg de BE (Benzoato de Estradiol) al momento de
colocar los dispositivos.
86
88
89
108
109
116
117
Tabla 8.
118
119
120
13
Pág.
Tabla 11. Porcentaje de preñez en vacas y novillas que recibieron
un tratamiento de control del ciclo estral basado en
progesterona en dos años de trabajo, según tratamiento.
Tabla 12. Tasas de preñez (%) ajustadas (LSM) en novillas (Bos
indicus x Bos taurus) sincronizadas com Crestar® +
valerato de estradiol ó Crestar® +BE (Benzoato de
estradiol).
Tabla 13. Porcentaje de preñez de vacas en lactancia utilizando
diferentes protocolos de sincronización con Crestar®.
Tabla 14. Porcentaje de preñez en vacas y novillas tratadas con
SMB más la administración de BE
(Benzoato de
estradiol) a las 24 horas de remoción del SMB.
121
128
129
132
Tabla 15. Preñeces logradas por servicio natural de 90 días.
134
Tabla 16. Tasa de ovulación por grupo genético.
Tabla 17. Efecto del día del ciclo en la respuesta ovulatoria de
vacas Holstein en lactancia al tratamiento de GnRH.
Tabla 18. Porcentaje de preñez en vacas y vaquillonas tratadas con
SMB mas la administarcion de EB a las 24 horas de la
remoción del SMB e IATF.
Tabla 19. Porcentaje de preñez en vacas para carne con cria que
fueron tratadas con CIDR-B y EB ó GnRH para inducir la
ovulación.
137
140
143
144
14
LISTA DE FOTOGRAFÍAS
Pág.
Fotografía 1. Signos del estro
61
Fotografía 2. Implantes y dispositivos utilizados para la aplicación
de progestágenos y progesterona.
115
Fotografía 3. Secuencia de la administración y retiro de un implante
de Crestar® (Norgestomet).
126
Fotografía 4. Ilustración de la aspiración folicular guiada por
ultrasonido en bovinos.
138
REVISIÓN DE LOS PROTOCOLOS EMPLEADOS EN LA SINCRONIZACIÓN DE
CELOS EN BOVINOS1
Edgar Cifuentes Sepulveda2
Sergio Palomares Garcia3
2009
RESUMEN
Se revisaron los protocolos de sincronización de celos de fácil aplicación a las
condiciones de nuestra ganadería tropical, consientes del valor superlativo de los
índices reproductivos en la explotación ganadera cuya finalidad sea eficiencia y
rentabilidad, dada la creciente demanda mundial de alimentos y el potencial que
se presenta a los países del cinturón tropical, brindar una herramienta de consulta
a profesionales y ganaderos, que deseen profundizar en el tema ó iniciar un
programa en sus explotaciones. Se revisa la anatomía y fisiología reproductiva del
bovino como base de aplicación, la detección del celo y sus consideraciones como
principal limitante de la eficiencia reproductiva y de aplicación de biotecnologías.
Las Prostaglandinas como protocolo base que revoluciono la reproducción, su
respuesta de muy amplia variación ligada al desarrollo folicular y lúteal, la
inclusión de la GnRH como inductor de ovulación da origen al Ovsynch, Heatsynch
y CIDR – Synch, utilizados ampliamente y con buen éxito en lechería
especializada, La sincronización del desarrollo folicular utilizando GnRH y Ablación
Folicular como inductores de la onda 1.5 a 2.0 y 1.5 días post aplicación,
respectivamente y la combinación estrógenos y progesterona 5.5 días para
valerato de estradiol y 4.3 días para benzoato de estradiol, siendo el más utilizado
y eficaz actualmente a nivel mundial. Finalmente presincronizacion de novillas pre
púberes que aumenta la tasa de ciclicidad en 20% en novillas tratadas con
progesterona y estrógeno y los efectos negativos de la Progesterona > 1gr en
novillas Bos Indicus, por supresión de los pulsos de LH.
Palabras Clave: Ganadería tropical, Bovinos, Sincronización, Biotecnologías,
Eficiencia.
1
Trabajo de grado en modalidad Monografía.
Director. Práctica privada Genbiotec®.
3
Estudiante último semestre, carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
2
15
INTRODUCCIÓN
Desde que se conocen las hormonas que participan en la reproducción, el hombre
ha pretendido intervenir, modificar o al menos controlar la actividad reproductiva.
La modificación de los ciclos para que todas las hembras presenten celo en un
periodo breve de tiempo pareciera la técnica complementaria ideal para solucionar
las limitaciones del uso de biotecnologías. Al nivel de investigación, este objetivo
ha estimulado el desarrollo de numerosas líneas de trabajo por más de tres
décadas. (Ascoli et al., 1996).
Es conocida la influencia que tienen los días abiertos sobre la rentabilidad
económica de la actividad lechera. Los días abiertos son consecuencia de los días
transcurridos entre el parto y el primer servicio y la tasa de concepción, los que se
ven incrementados por el balance energético negativo que se produce en los
primeros meses de lactación en las vacas lecheras. (Diaz Goncalves et al, 2002)
La posibilidad de modificar el ciclo estral a través de tratamientos hormonales ha
permitido diseñar una variedad de protocolos para reducir el intervalo entre el
parto y el primer servicio. El control del ciclo estral puede reducir los problemas de
manejo asociados a la detección de celo en vacas, especialmente en sistemas de
producción actuales donde la intensificación también ha influido negativamente
para que las vacas manifiesten claramente signos de estro. (Diaz Goncalves et al,
2002)
16
1. OBJETIVOS
1.1. Objetivo general

Analizar los diferentes protocolos de sincronización de celos utilizados en
bovinos, desde el uso de la prostaglandina F2-, hasta los desarrollados
actualmente y su adaptación a nuestra ganadería tropical.
1.2.

Objetivos específicos
Revisar los tratamientos de sincronización de celos con prostaglandinas y
sus diferentes alternativas.

Analizar
trabajos
basados
en
la
utilización
de
progesterona
y
progestágenos combinados con estrógenos.

Documentar la utilización de la GnRH o estrógenos en la sincronización de
vacas y novillas.

Revisar y analizar ventajas y desventajas del uso de la sincronización de la
ovulación en los bovinos.
17
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
La aplicación de biotecnologías como superovulación, fecundación in vitro,
IA1(inseminación artificial), IATF (inseminación artificial a tiempo fijo), TE2
(transferencia convencional de embriones) y en general el manejo del hato
requiere de la permanente vigilancia de las hembras, para detectar el momento del
ciclo estral adecuado para su aplicación, lo que conlleva mucho tiempo e inversión
en dinero.
Adicionalmente en muchos casos se presentan problemas referidos a la dificultad
para establecer el momento exacto en que la hembra bovina está lista para la
aplicación de cualquiera de estas técnicas. Además, muchas veces los síntomas
de estro son de difícil detección Bos Indicus (estro corto y/ó nocturno) por lo que
no puede realizarse el tratamiento en el momento adecuado, otras veces sucede
que se cree que un animal ha entrado en celo y se pierde el trabajo, pues se
aplica el tratamiento a un animal que no está en listo.
1
2
Inseminación Artificial.
Transferencia de embriones.
18
3. JUSTIFICACIÓN
La apertura de mercados, los tratados de libre comercio y la situación de la
actividad ganadera, exigen la búsqueda de la máxima eficiencia en los procesos,
para garantizar un retorno económico adecuado; por lo que la eficiencia
reproductiva orientada al aumento de la producción debe ser el objetivo que tanto
veterinarios como ganaderos debemos perseguir.
En este contexto la optimización de la eficiencia reproductiva unida a programas
genéticos serios y a la adopción de tecnologías como la sincronización, deben ser
los factores que contribuyan a la mejora de los niveles de reproducción, la calidad
genética y la rentabilidad del ganado bovino.
Las biotecnologías reproductivas requieren ciertas condiciones que favorezcan su
fácil y eficiente aplicación, la sincronización de celos no es la excepción.
El bajo nivel tecnológico de los operarios sumado a las deficiencias en la toma de
decisiones que conlleva la selección de animales en estado corporal y de
ciclicidad no óptimos, tanto como una deficiente sincronización y detección de
calores conlleva a que los resultados obtenidos no sean satisfactorios y que
muchos ganaderos sientan temor por adoptar estas biotecnologías debido al
elevado costo y los bajos resultados obtenidos.
Por lo que se hace necesario identificar los factores que limitan el uso, eficiencia, y
aplicación a las condiciones de trabajo propias de nuestra ganadería de los
proceso de sincronización de celos y ovulaciones en bovinos. (ALBERIO, 2003),
(BARUSELLI et al, 2002) (BO, 2004b). (DÍAZ GONÇALVES et al, 2002)
19
4. METODOLOGÍA
El desarrollo del documento se llevó a cabo en 4 fases: 1) recopilación de
información secundaria, que se obtuvo de diversas fuentes (artículos de revistas,
libros, etc.), relativa al tema de investigación; 2) recolección de información
primaria mediante la realización de visitas a empresas relacionadas con el tema
de sincronización de celos en bovinos; 3) selección de la información obtenida en
los diferentes medios consultados; y 4) análisis y realización del documento a
partir de la información recolectada (ver Figura 1).
Figura 1. Metodología de trabajo.
Búsqueda de información secundaria.
Selección y tabulación de la información
Visitas CGR (biotecnología animal)
VITROGEN (biotecnología animal)
Análisis de la información.
Realización del documento.
Fuente: el autor.
20
5. IMPACTO ESPERADO
Se espera que este trabajo sirva como medio de consulta para los profesionales y
estudiantes de la carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia y carreras afines
que deseen ampliar sus conocimientos sobre la sincronización del estro3 en las
hembras bovinas, además de proveer información sobre el funcionamiento de su
ciclo estral , e información sobre estudios realizados o colectados por diversos
investigadores que han trabajado con esta biotecnología.
También el productor interesado en el tema, tiene en este trabajo, una herramienta
que le sirve, con el apoyo y orientación del veterinario, para la toma de decisiones
sobre el protocolo más adecuado para su caso específico.
3
Celo.
21
6. MARCO TEÓRICO
6.1. ANTECEDENTES
El control de ciclo sexual se realizaba empíricamente desde la más remota
antigüedad. El procedimiento consistía en la introducción de machos en un rebaño
de hembras, durante una estación determinada del año, logrando que se
sincronizaran los celos y por tanto los partos. Este método tradicional de
sincronización se conoce con la denominación de “efecto macho” (Xu et al., 1998).
Los métodos empleados en la sincronización del celo son básicamente
tratamientos hormonales, que han ido evolucionando simultáneamente con los
avances en el conocimiento de procesos fisiológicos que acontecen en el ovario
durante el ciclo sexual de las hembras. En 1966, Ericsson señaló que los ovarios
de las hembras están capacitados para producir cientos de miles de oocitos
durante su vida reproductiva; sin embargo, el número de crías que se obtienen de
las hembras gestantes es muchísimo menor (Díaz Gonçalves, 2002).
En la década de los 80 y principios de los 90, se realizaron numerosos estudios
para conseguir que hembras de alta calidad genética ovularan oocitos después de
un
tratamiento
hormonal
consistente en
la
hiperestimulación
ovárica
o
superovulación, para luego ser inseminadas con semen de un macho también de
alta calidad genética; de esta hembra tratada con hormonas, denominada
donante, se conseguían de 10 a 12 oocitos y un número igual de embriones
(Pedroso et al., 1995).
22
6.2. FISIOLOGÍA REPRODUCTIVA DE LA HEMBRA BOVINA
6.2.1. Anatomía del aparato reproductor de la vaca
El aparato reproductor de la vaca está conformado por órganos externos e
internos y por los huesos pélvicos. Su función consiste en producir hormonas,
recibir los espermatozoides, producir y liberar el óvulo, ofrecer el ambiente para
que ocurra la fertilización o unión de los gametos, garantizar la gestación y
expulsar la cría al momento del parto y producir hormonas. Las partes del aparato
reproductor de la vaca son de afuera hacia adentro (ver figura 2) (Wattiaux, 2000):

vulva

vagina

Útero, formado por:
a. Cuello del útero o cérvix
b. Cuerpo del útero
c. Cuernos uterinos (dos)
d. Oviductos, salpinges o trompas uterinas
e. Ovarios o gónadas femeninas
23
Figura 2. Aparato reproductor de la hembra.
Fuente. Wattiaux, 2000.
6.2.1.1. La vulva
Apertura externa del aparato reproductor y puerta de entrada del tracto genital. Se
encuentra localizada debajo del ano. Tiene tres funciones principales: dejar pasar
la orina, abrirse para permitir la cópula y forma parte del canal de parto. Incluidos
en la estructura vulvar están los labios y el clítoris. Los labios de la vulva están
ubicados a los lados de la apertura vulvar y tienen aspecto seco y arrugado
cuando la vaca no está en celo. En la medida que el animal se acerque al celo, la
vulva empezará a hincharse y tomará una apariencia rojiza y húmeda. El vértice
inferior de la vulva tiene un mechón de pelos, que en un momento dato puede
permitir la detección de secreciones anormales como pus, sangre, etc. El clítoris,
el divertículo suburetral y la terminación de la uretra, se encuentran en el vestíbulo
vulvar (Dejarnette, 2007).
24
6.2.1.2. La vagina
Es un canal que sirve para alojar el pene u órgano copulador del macho y
comunica la vulva con el útero, tiene una consistencia músculo–membranosa.
Tiene un largo entre 10 y 12,5 cm y es extensible. Termina en el orificio del cuello
uterino, cuya unión es abrupta, proyectándose el útero hacia la vagina, formando
un fondo de saco alrededor del orificio cervical. En la vagina queda depositado el
semen eyaculado por el toro durante la monta natural (Wattiaux, 2000).
Las células de la vagina y del cuello uterino secretan una sustancia mucosa que
lubrica el tracto reproductivo durante el celo o momento de aceptación del toro
para la monta. También sirve como pasaje del feto al nacimiento (Dejarnette,
2007).
6.2.1.3. El útero
Está compuesto por cuatro partes anatómicas:

Cuello o cervix. Está formado por paredes gruesas, conecta la vagina con el
útero. Su estructura interna presenta pliegues circulares que forman anillos y
que le dan una consistencia más dura semejando un cuello de gallina o pavo;
mide unos 10 cm de largo y entre 3 y 5 cm de grosor, dimensiones que varían
de acuerdo con la edad del animal (novillas o vacas). Durante el diestro y
durante la gestación, el cuello del útero se encuentra cerrado, aislándolo del
exterior. Durante el estro se abre o dilata para permitir la entrada de los
espermatozoides y durante el parto normal para garantizar la expulsión de la
cría (ver figura 3) (Dejarnette, 2007).
25
Figura 3. Cervix.
Fuente. Dejarnette, 2007.

Cuerpo del útero y cuernos uterinos: el cuerpo del útero se encuentra a
continuación del cuello, es corto, de aproximadamente 4–5 cm, a partir de los
cuales se bifurca dando origen a los cuernos uterinos (derecho e izquierdo). La
pared muscular del útero es muy delgada. La consistencia de los cuernos varía
de acuerdo con los niveles hormonales del animal: se ponen tensos, turgentes
o tónicos durante el celo o estro y flácidos, sin tono, durante el diestro
(Wattiaux, 2000).
En los cuernos uterinos ocurre la anidación del embrión y transcurre la preñez,
también suple de nutrientes al feto (Bavera, 2005).

Oviductos, salpinges o trompas uterinas: Son la continuación de los
cuernos uterinos hacia los ovarios, sirviendo para canalizar el óvulo al
desprenderse éste del ovario durante la ovulación, son largas y más o menos
flexuosas. El extremo libre es amplio como embudo y rodea o circunda al
ovario, lo que le permite recibir al óvulo en el momento de la ovulación; esta
parte o extremo se denomina "fimbria" ovárica o infundíbulo. La otra parte está
unida al extremo anterior de los cuernos uterinos, propiamente dichos.
Flexuosa y delgada cómo una paja, conduce al óvulo hacia el extremo anterior
del cuerno uterino (ver figura 4) (Dejarnette, 2007).
26
Figura 4. Oviductos.

Ovarios: En todos los animales, los ovarios son pares, es decir en número de
dos, y su tamaño depende de la edad, la especie y el estadio reproductivo del
animal. También se llaman gónadas femeninas y representan la parte más
importante del aparato reproductivo de la hembra. En la vaca se encuentran
suspendidos a derecha y a izquierda, lateralmente, sobre las trompas uterinas,
miden entre 3 y 5 cm, son ovoides; su forma varía durante el ciclo estral por la
aparición de estructuras como los folículos y el cuerpo lúteo o cuerpo amarillo.
El desarrollo de sus componentes histológicos está bajo el control de las
hormonas de la hipófisis (ver figura 5) (Dejarnette, 2007).
27
Figura 5. Ovario.
Folículos
Óvulo maduro
Cuerpo lúteo
Fuente. Manrique, 1990.
El ovario de la vaca está formado de una parte cortical y una zona medular,
que se diferencian una de la otra tanto por su estructura, como por sus
funciones. La superficie del ovario está cubierta por la túnica albugínea que es
una formación densa de tejido conjuntivo. En ella pueden localizarse dos tipos
de estructuras: los folículos y los cuerpos lúteos (Bavera, 2005).
Figura 6. Funciones del folículo y del cuerpo lúteo.
Fuente. Bavera, 2005.
28
o Folículo. Semeja una vejiga llena de líquido; contiene al óvulo y al liberarlo
se transforma en cuerpo lúteo y es responsable de la liberación de
hormonas femeninas del tipo estrógeno. El folículo constituye la estructura
funcional fundamental del ovario (ver figuras 6 y 7) (Bavera, 2005).
o Cuerpo lúteo. Es una estructura consistente formada por acumulación de
células luteales que crecen en el lugar donde ocurrió la ovulación
(rompimiento del folículo). Es responsable de la liberación de la hormona
progesterona. Es una estructura transitoria, importante porque mantiene la
preñez a través de la secreción de progesterona (ver figuras 6 y 7)
(Bavera, 2005).
Figura 7. Folículo y cuerpo lúteo.
Fuente. Martínez, 2005.
6.2.2. Foliculogénesis
Al final de la gestación la frenética actividad de la atresia folicular hace que en
apenas 20 semanas la dotación folicular del feto se haya reducido de 1 o 2
millones a sólo 300.000, que llegarán a la pubertad (Spicer y Echternkamp, 1986,
citados por Fricke, 2007).
La foliculogénesis es el proceso de formación de folículos maduros capaces de
ovular a partir de los folículos primordiales que yacen estáticos en el ovario. Este
29
proceso puede ser dividido, de acuerdo con las características fisiológicas de cada
grupo de folículos, en las siguientes etapas (ver figura 8) (Spicer y Echternkamp,
1986, citados por Fricke, 2007):
a. Folículos prenatales
Los folículos prenatales e dividen en:
Folículos primordiales. Formados prenatalmente, no permanecen más allá de los 6
meses de vida postnatal. Están constituidos por ovocitos primarios4 rodeados de
una única capa de células de la granulosa5, aplanadas, sin zona pelúcida6,
rodeados por algunas células de la pregranulosa y envueltos por la membrana
basal (Van Wezel y Rodgers 1996, citados por DÒcchio, 2000). Su evolución es
independiente de las gonadotrofinas. Componen el stock de folículos formados
durante la vida fetal que se van a desarrollar durante la vida reproductiva de la
hembra. Esos folículos en estado de quiescencia7 son caracterizados por un
oocito8 en la profase de la primera división meiotica (Adams, G. P., 1993).
Folículo primario. Aumenta el volumen del ovocito y las células epiteliales
adquieren una morfología cúbica, produciendo MPS9, que originan un halo
translúcido alrededor del ovocito conocido como zona pelúcida, atravesada por
procesos citoplasmáticos de las células de la granulosa, que la mantienen en
contacto íntimo con el ovocito. El mecanismo determinante del paso del estadio de
folículo primordial a folículo primario, en el cual las células de la granulosa crecen
y se multiplican no es totalmente conocido, pero se cree que ocurre sin la
4
Los ovocitos primarios detienen su división poco antes de la ovulación, tras el pico de LH, en que se
completa la primera división, con la emisión del primer corpúsculo polar, convirtiéndose el ovocito primario en
ovocito secundario (Echeverrás, 2006).
5 Grupo de células que rodean al ovulo y le sirven de sustento y para metabolizar hormonas (Blanco, 1990).
6 Membrana que recubre el embrión cuando éste está en el útero y lo protege de agentes infecciosos evitando
que se adhieran a él (Blanco, 1990).
7 Para asegurar la correcta progresión a través del ciclo, las células han desarrollado una serie de puntos de
control que previenen la entrada en una nueva fase del ciclo hasta que hayan completado exitosamente la
anterior. Los principales componentes de la maquinaria del ciclo celular son las quinasas dependientes de
ciclinas (CDK), las que, cuando son activadas, permiten a las células pasar de una fase del ciclo a la siguiente
(imbiomed, 2007).
8 Ovulo inmaduro.
9 Mensajeros intracelulares.
30
participación de gonadotropinas (McNatty et al., 1986, citados por Colazo et al.,
2000).
Folìculo secundario (120u). Proliferan las células de la granulosa formando varias
capas y uniéndose entre ellas mediante GAPS10. En las áreas en que se pierde la
unión entre las células de la granulosa se forman unas lagunas conocidas como
cuerpos de Call–Exner11, previo a la formación del antro por su confluencia. Se
diferencian e hipertrofian12 las células tecales13, las internas al final del estadio
primario están separadas de la granulosa por una membrana basal impermeable y
las externas formadas por comprensión del estroma circundante ante la expansión
folicular (Adams, 1993).
La granulosa desarrolla receptores para FSH, estrógenos y andrógenos. Con la
teca el folículo adquiere un suministro sanguíneo (1 o 2 arteriolas que acaban en
una red capilar adyacente a la membrana basal) y las células tecales desarrollan
receptores para la LH (Ascoli et al., 1996).
Estos folículos parecen abrirse paso hacia la superficie del ovario a través del
cono de Strassmann (un penacho cónico que se forma en un polo de la teca)
(Asprón, 2004).
Los folículos estrogénicos14 también sobresalen por su habilidad para resistir la
atresia y pasar a los estadios finales de maduración (Driancourt et al., 1994,
citados por Adams, G. P., 1993). Estos folículos tienen el potencial de tornarse
ovulatorios cuando son expuestos a un ambiente endocrino adecuado,
especialmente en la presencia de un patrón pulsátil de LH con alta frecuencia
(Ascoli et al., 1996).
10
Mensajeros intracelulares.
Agregados de material denso que se tiñe intensamente en las células de la granulosa de los folículos
ováricos en fase de maduración. También pueden verse en tumores ováricos originados en la granulosa
(MedCiclopedia, 2007).
12
Hipertrofia es un crecimiento exagerado de las células.
13 Células que están en el folículo junto a las células de la granulosa e intercambian síntesis hormonal con
estas.
14 Folículos en maduración que producen estrógeno.
11
31
b. Folículos antrales, terciarios o madurantes
La coalescencia15 de los cuerpos de Call–Exner conduce a la formación del antro
folicular16, inicialmente semilunar, desplazando a las células de la granulosa que,
rodeando el ovocito, permanecen íntegras formando el cumulus oophorus17
(cúmulo prolígero). El líquido folicular, que alcanza unas 1.000, está lleno de
esteroides18, péptidos19 y otras sustancias (Baird, 1978).
La formación del fluido que pre–llena la cavidad antral ocurre en folículos con
diámetro alrededor de 0,2 – 0,4 mm (Turnbull et al., 1977). Luego, posterior a la
formación del antro, los folículos entran en un rápido periodo de crecimiento,
marcado por la alta proliferación celular (granulosa y teca), en consecuencia los
elevados índices mitóticos se observan en folículos entre 0,7 y 1,5 mm declinando
cuando alcanzan los 2,2 mm (Echeverrás, 2006).
c. Folículos preovulatorio, ovulatorios o maduros
Los folículos preovulatorios, denominados también folículos estrogénicos,
alcanzan un desarrollo máximo de 15 mm. El cumulus oophorus está arrinconado
y constituido por la corona radiada (células de la granulosa que envuelven al
ovocito), la zona pelúcida (microvillis20 en el espacio previtelino), la membrana
vitelina (membrana del ovocito), la vesícula germinal (citoplasma del ovocito) y la
mancha germinal (núcleo del ovocito) (Fricke, 2007).
15
Unión.
Cavidad folicular amplia.
17 Son unas CAPS de células adheridas al oocito, que le sirven de protección, sustento y soporte.
18 Hormonas de síntesis grasa como por ejemplo el estrógeno.
19 Son un tipo de moléculas formadas por la unión de varios aminoácidos mediante enlaces peptídicos. Al
igual que las proteínas, están presentes en la naturaleza y son responsables de un gran número de funciones,
muchas de las cuales todavía no se conocen. La unión de un bajo número de aminoácidos da lugar a un
péptido: oligopéptido (número de aminoácidos < 10); polipétido (número de aminoácidos > 10). Los péptidos
se diferencian de las proteínas en que son más pequeños (tienen menos de diez mil o doce mil Daltons) y que
las proteínas pueden estar formadas por la unión de varios polipéptidos y a veces grupos prostéticos (Blanco,
1990).
20 Vellosidades microscópicas.
16
32
El folículo dominante secreta más del 80% del estradiol y también es responsable
por el 55% de la inhibina liberada en la circulación (Campbell et al., 1991).
Figura 8. Proceso de desarrollo de los folículos y del cuerpo lúteo.
Fuente. Tamayo et al., 2007.
6.2.3. La ovulación
En los bovinos, la ovulación se presenta al azar con respecto al ovario que
contiene el cuerpo lúteo previo. El desarrollo folicular se produce en ondas. Las
ondas foliculares son el desarrollo armónico y simultáneo de varios folículos
antrales funcionando a través de estadios integrados de reclutación, selección y
dominancia folicular (Hafez, 1987; Fortune et al., 1991; Fernandez Tubino, 2003;
Echeverría, 2004; 2005). Durante el ciclo folicular, se presentan generalmente dos
(y a veces hasta tres) curvas de actividad folicular; la primera al inicio y la segunda
a mitad del ciclo. De la primera surge un folículo dominante (menor a 5 mm de
diámetro) que aumenta su tamaño (por encima de los 10 mm de diámetro) entre
33
los días 5 y 11 para luego experimentar atresia 21 (Fortune et al., 1991). En la
segunda fase, surgen varios folículos productores de estrógenos y de ellos, uno es
el dominante y el que controla el destino de los demás, al haber adquirido el
tamaño adecuado, cumple la última fase de crecimiento y se constituye en un
folículo preovulatorio (maduro), listo para ovular, que se expande ligeramente
sobre la superficie del ovario para luego ser liberado (Manrique, 1990).
El folículo dominante secreta más del 80% del estradiol y también es responsable
por el 55% de la inhibina liberada en la circulación (Campbell et al., 1991).
Los folículos preovulatorios comienzan a segregar 17-ß estradiol, que al aumentar
induce el comportamiento estral. El pico de estradiol coincide con valores
decrecientes de progesterona, lo que desencadena el pico de LH, luego del cual,
si hay folículos maduros, se produce la ovulación (O´Shea et al., 1978).
Una vez el folículo se rompe y libera el óvulo, la cavidad se retrae y comienza a
llenarse gradualmente de células luteales, que conformarán el cuerpo lúteo. Este
cuerpo lúteo alcanza su madurez a los 7 días y se mantiene activo por 8 a 9 días
(total: 15 a 17 días), para luego involucionar quedando como pequeñas cicatrices
conocidas como cuerpo albicante (Hafez, 1987; Echeverría, 2004; 2005).
21
Atresia es la pérdida de folículos de un ovario que no han alcanzado el estado de folículo preovulatorio. Se
previene con la presencia de gonadotropinas. Casi todas las atresias son congénitas.
34
Figura 9. Maduración del folículo hasta la ovulación y
formación del cuerpo lúteo.
A: óvulo; D: folículo preovulatorio; E: eclosión; F: cuerpo rojo.
La ovulación ocurre entre 10 y 11 h después de finalizado el estro (o 30 h después
de comenzado el estro), salvo en la primera ovulación post parto que se produce
sin signos aparentes de celo (Hafez, 1987).
Figura 10. Ovulación.
Fuente. Bavera, 2005 y Dejarnette, 2007.
35
6.2.4. El cuerpo lúteo
El CL es una glándula endocrina temporal que se forma, después de la ovulación,
a partir de los tejidos que hacían parte de folículo. Así, el CL puede ser visto como
la etapa terminal del desarrollo folicular (Ver figura 11). El CL presenta áreas de
marcada ecogenicidad22 dentro del estroma ovárico23 (Singh et al., 1997).
Muchos cuerpos lúteos aparecen como masas de tejido sólido, pero también
pueden contener cavidades con fluidos. En base a exámenes de ultrasonido en
vaquillas, el 79% de los CL de aspecto normal contienen cavidades en algunos
casos <2 y en otros >10 mm de diámetro en algún momento del ciclo estral e inicio
de la preñez (Kastelic et al., 1990).
Las características ultrasonográficas24 del CL, como diámetro transversal, área
lútea y ecogenicidad han sido relacionadas con la estructura y funcionamiento
luteal (Battocchio et al., 1999; Kastelic et al., 1990; Singh et al., 1997). A pesar de
que el ultrasonido es más preciso que la palpación rectal para evaluar los folículos,
es difícil distinguir entre un CL en desarrollo y uno en regresión usando cualquiera
de las dos técnicas (Pieterse et al., 1990).
6.2.4.1. Luteolisis
El CL tiene un ciclo de maduración y regresión similar a la del folículo. En la
cavidad dejada por el folículo roto se forma una estructura similar a un coágulo, el
cuerpo hemorrágico, que se transforma en CL hacia el día 5 del ciclo (día 0 =
estro). El CL es totalmente funcional del día 5 al 15 del ciclo y a partir de este
momento, si la vaca no resulta preñada, empieza a involucionar dejando de
secretar progesterona, mientras se produce el desarrollo del folículo que ovulará
22
Áreas que aparecen de coloración blanca en la imagen del ecógrafo.
Parte de tejido que conforma el ovario en su conjunto.
24 Detectadas mediante la realización de ultrasonido.
23
36
tras el siguiente estro. Al atrofiarse el CL, se convierte en cuerpo albicante25 y
permanece visible en el ovario durante varios ciclos subsecuentes (Asprón, 2004).
La regresión del CL se debe a la presencia de un factor luteolítico como la PGF2, que es producida por el miometrio durante todo el ciclo estral y alcanza su
concentración máxima en el momento de la lúteolisis26 de cada especie. Durante
ese periodo la secreción de PGF-2 es pulsátil en razón de 3 a 4 pulsos por día.
Se ha establecido que son necesarios cerca de 5 pulsos para que ocurra la
lúteolisis completa. Los mecanismos de lúteolisis no están totalmente claros pero
hay evidencia de que la involución estructural del cuerpo lúteo es mediada por
apoptosis27 (Gaytan et al., 1998).
La lúteolisis puede ser bloqueada naturalmente por la acción de una proteína
llamada trofoblastina (también llamada interferón t), que es producida durante el
periodo próximo a la implantación del embrión, en los días 15 a 25 posteriores a la
ovulación y fecundación (Bavera, 2005).
Figura 11. Proceso de luteolisis.
25
Pequeñas cicatrices que quedan producto de la regresión del cuerpo lúteo.
Causa la regresión funcional y morfológica del cuerpo lúteo.
27 Conjunto de reacciones bioquímicas que ocurren en las células de un organismo pluricelular encaminadas a
producir la muerte de la célula de manera controlada.
26
37
6.2.5. Bases fisiológicas de la reproducción
La capacidad reproductiva de las hembras bovinas depende de cómo se llevan a
cabo eventos fisiológicos como: secreción hormonal, fertilización, implantación,
formación del embrión, preñez y parto. La fertilidad puede ser interrumpida en
cualquiera de los estadios de reproducción mencionados, los cuales son
controlados fisiológicamente por el hipotálamo, la hipófisis, los ovarios, la glándula
adrenal y el tracto reproductivo (Callejas, 1995).
La regulación de la actividad sexual está representada en el organismo por el
sistema hipotálamo-hipófisis-ovárico (ver esquema 1). El hipotálamo y la hipófisis
anterior en conjunto con los órganos reproductivos aseguran el ritmo de
reproducción interrelacionado hipotálamo, hipófisis, ovario y hormonas LH, FSH y
esteroides ováricos, para conformar la esencia de la maduración folicular,
ovulación, implantación y mantenimiento de la gestación. Todo esto está
claramente influenciado por factores hereditarios, nutricionales y ambientales que
pueden modificar el ciclo en cualquier animal (Caicedo et al., 2003).
Por su naturaleza, el estudio de la reproducción requiere un entendimiento muy
claro y profundo de los principios neuroendocrinos tanto desde el punto de vista
evolutivo como ecológico y metabólico. El conocimiento de esos procesos e
interacciones representa un punto focal sobre el cual el hombre puede influir y de
esa manera controlar diferentes aspectos reproductivos (Caicedo et al., 2003).
Durante la pubertad se adquieren la capacidad de producción de gametas fértiles
y el comportamiento reproductivo. Este es el momento en el cual los animales
liberan por primera vez sus células germinales maduras, es decir, es el comienzo
de la vida reproductiva (Callejas, 1995).
La pubertad representa el tiempo de transición entre el estado de inmadurez y la
madurez sexual, donde se resaltan varios caracteres como las conductas de
territorialidad, apareamiento y cuidado de las crías entre otras. Es menester que
para que esto ocurra el animal haya adquirido una estatura y pesos determinados,
38
por lo que, la raza tiene un efecto significativo sobre el momento de aparición del
primer estro, tanto como el ambiente, fotoperíodo y estado nutricional
(Cunningham, 1997).
La edad del primer estro en novillas varía considerablemente, pero la edad
promedio en novillas con estado nutricional bueno, fluctúa entre 10 y 12 meses
para razas lecheras y 14 y 15 meses para razas de carne (Cunningham, 1997;
Ascoli et al., 1996; De La Sota et al., 2002; Hafez, 1987).
Esquema 1. Relaciones del sistema hipotálamo–hipófisis–ovárico.
Fuente. Callejas, 1995.
39
Hipotálamo
Forma la base del cerebro y se encuentra localizado sobre la glándula pituitaria.
Sus neuronas producen la hormona liberadora de gonadotrofina o GnRH. La
GnRH, en la eminencia media, se difunde a los capilares del sistema porta
hipofisiario28 y de aquí a las células de la adenohipófisis estimulándolas para que
sintetice y secrete las hormonas hipofisiarias: folículo-estimulante (FSH) y
luteinizante (LH) (Sintex, 2005).
Histológicamente, el hipotálamo está compuesto de núcleos, células dispersas y
axones, los cuales conectan una célula con la otra. Pero el elemento principal del
hipotálamo, desde el punto de vista reproductivo, son las células neurosecretoras,
las cuales se encuentran dispersas en núcleos. Estas parecen células endocrinas,
debido a la presencia de gránulos secretores compuestos por hormonas
verdaderas, las cuales emigran a los axones para ser vertidas a las terminaciones
nerviosas (Martínez, 2005).
Glándula pituitaria o Hipófisis
Es una pequeña glándula localizada en la base del cerebro y consta de dos
lóbulos separados uno anterior o adenohipófisis y uno posterior o neurohipófisis.
El lóbulo anterior secreta tres hormonas primarias: la folículo estimulante (FSH)29,
la luteinizante (LH)30 y la prolactina (PRL), que son conocidas como
gonadotropinas porque estimulan las gónadas (ovarios) El papel de la hipófisis en
el control reproductivo se ilustra muy bien en el ciclo del ovario (figura 16) (Ascoli
et al., 1996).
28
Sistema que transporta hormonas del hipotálamo a la hipófisis mediante unos vasos sanguíneos especiales
para esto (Martínez, 2005).
29
Es la responsable del proceso de esteroideogénesis ovárica –producción de estrógeno y progesterona en el
ovario–, del crecimiento y la maduración folicular (Sintex, 2005).
30 interviene en el proceso de esteroideogénesis ovárica, ovulación, formación y mantenimiento del cuerpo
lúteo (Sintex, 2005).
40
Estas dos hormonas son secretadas a la circulación en forma de pulsos y son
reguladas por dos sistemas: el tónico y el cíclico. El sistema tónico produce el nivel
basal circulante, siempre presente, de hormonas hipofisiarias las cuales
promueven el desarrollo de los elementos germinales y endócrinos de las
gónadas. El sistema cíclico opera más agudamente, siendo evidente por solo 12 a
24 horas en cada uno de los ciclos reproductivos de la hembra. Tiene por función
primaria causar la ovulación (Sintex, 2005).
El lóbulo posterior de la glándula pituitaria secreta una hormona importante en la
reproducción: la Oxitocina, que estimula la contracción suave del músculo en el
útero y el oviducto. Esto ayuda al transporte del esperma y del óvulo por el
oviducto, como también a la expulsión del feto en el momento del parto. Además,
estimula las células musculares de la glándula mamaria para ayudar a que la
leche descienda (Ascoli et al., 1996). El lóbulo posterior es estimulado para
secretar sus productos a través de impulsos nerviosos. El lóbulo anterior secreta
sus productos como respuesta a estimulación hormonal recibida a través del
torrente sanguíneo (hipotálamo) (Martínez, 2005).
Ovario
Es el órgano esencial de la reproducción en la hembra y tiene dos funciones
principales: la endocrina, a través de la cual se elaboran las hormonas y la
exocrina (citogénica), por su producción de óvulos a través de los folículos. Entre
las hormonas que producen los ovarios podemos citar a los estrógenos, la
progesterona y la inhibina (adaptado de Manrique, 1990).
41
Figura 12. Estructura y localización del hipotálamo y la glándula pituitaria.
6.2.5.1. Regulación endocrina: las hormonas de la reproducción
La reproducción de la hembra está regulada por numerosas hormonas, secretadas
por glándulas especializadas (endocrinas), que generalmente pasan a la sangre o
linfa que las transporta a partes específicas del animal (órgano "blanco") donde
realizan su función (Asprón, 2004).
El cerebro regula la secreción de las glándulas endocrinas a través de las
hormonas, sustancias químicas producidas por tejidos específicos, que se vierten
directamente en el torrente circulatorio en respuesta a determinados estímulos
provocando una respuesta funcional específica, la cual puede manifestarse tanto
en forma inmediata como mediata. Como resultado de dicho proceso de
transferencia, la célula receptora de dicho estímulo, modifica su comportamiento a
través de cambios en sus esquemas metabólicos Los tipos de acciones
promovidas por las hormonas pueden ser modificaciones en la permeabilidad de
42
las membranas o en los mecanismos de transporte; modificación de la síntesis
proteica y/o modificación de la actividad enzimática celular (Calandra & De Nicola,
1985). De acuerdo con su estructura química las hormonas pueden agruparse en
esteroides, aminas31 y aminoácidos, proteínas, derivados de ácidos grasos y
péptidos (Willis & Smith, 1994; Dannies, 1999). En cambio, si se tiene en cuenta el
criterio funcional, se las considera neurosecretoras, tróficas, glandulares, tisulares
o sustancias mediadoras (Echeverría, 2005).
Según la velocidad de acción y la duración de la respuesta las hormonas pueden
clasificarse como de respuesta rápida y corta duración o de respuesta lenta y
persistente (Blanco, 1990; Calandra & De Nicola, 1985). Por último, podemos
considerar otra clasificación de acuerdo con la naturaleza de la respuesta
metabólica que producen y en tal caso consideramos aquellas de carácter
catabólico y anabólico cuyos efectos implicarían un ascenso o descenso de los
niveles de AMP32 cíclico intracelular (Calandra & De Nicola, 1985).
Las hormonas en general, son eliminadas de la circulación por mecanismos
variados: las proteínas y polipéptidos son catabolizados a sus aminoácidos
constitutivos principales en el hígado, el riñón y los diferentes órganos efectores;
los esteroides son inactivados en el hígado, el riñón u otros tejidos, o, por su
naturaleza, pueden ser secuestrados en tejido adiposo; las prostaglandinas son
rápidamente inactivadas por los órganos efectores o removidas de la circulación
por el pulmón y el hígado (Echeverría, 2004; 2005).
En general, la secreción es un proceso que no mantiene una velocidad uniforme y
sostenida y puede ser generada tanto en respuesta a un estímulo interno como a
uno del medio o puede estar sujeta a variaciones cíclicas como en el caso de las
hormonas gonadotróficas, ováricas o las esteroides en general (Blanco, 1990).
Las hormonas necesitan ser secretadas desde las células donde son sintetizadas
para ejercer sus acciones biológicas, aunque también pueden presentar una
31
Partes químicas de las proteínas, que al igual que los péptidos forman compuestos orgánicos en este caso
hormonas (Blanco, 1990).
32 Mensajero intracelular para reconocimiento hormonal.
43
actividad
parácrina33
transnacionales,
las
y
autócrina34.
cuales
ocurren
Pueden
en
sufrir
modificaciones
determinados
post
compartimientos
subcelulares y son llevadas a cabo en una estricta sucesión de eventos
intracelulares, que dan origen a productos biológicamente activos. La biosíntesis
de prohormonas es mediada por enzimas endoproteolíticas y son modificadas
enzimáticamente a lo largo del proceso de síntesis (Perone & Castro, 1997;
Echeverría, 2004).
Los
controles
por
retroalimentación
están
dados
por
el
sistema
de
retroalimentación negativa, en el cual el aumento de la concentración de las
hormonas da lugar a una menor producción de las mismas, usualmente a través
de una interacción con el hipotálamo o con la hipófisis (Cunningham, 1997).
Una de las características más sobresalientes de las hormonas, es su
especificidad. Esto se debe a la presencia de receptores para las mismas. La
regulación hormonal de la actividad celular muestra propiedades muy singulares:
especificidad, potencia, selectividad y rapidez. Las propiedades que pueden
determinar la capacidad de una hormona para interactuar con un receptor son
varias: tamaño, composición química, cargas eléctricas, presencia de grupos
funcionales críticos, cambios conformacionales, etc. (Blanco, 1990; Calandra & De
Nicola, 1985; Huanca, 2001).
Estos receptores pueden ubicarse intracelularmente como es el caso de los
receptores para las hormonas esteroides y tiroides o estar situados en la
membrana y generar respuestas tipo cascada como sería el caso de la adrenalina
y la GnRH entre otras (Rang & Dale, 1992; Gether & Kobilka 1998).
Una de las características más comunes de los receptores hormonales es su
escaso número por célula, el cual puede experimentar variaciones significativas,
según sea el estado metabólico de la célula o su estimulación hormonal previa
(Echeverrás, 2006).
33
34
Secreción de hormonas, a partir de una célula, que actúan en otro tipo de célula.
Secreción que actúa en la misma célula que la produce.
44
Según Hafez (1987), las hormonas que intervienen en la reproducción se dividen
en:
Primarias: forman parte directa de varios aspectos de la reproducción como la
espermatogénesis, ovulación, comportamiento sexual y materno, fecundación,
implantación y mantenimiento de la gestación, parto y lactancia.
Metabólicas: comprende aquellas hormonas necesarias para el bienestar general
y el mantenimiento en buenas condiciones de estado metabólico del animal, lo que
permitirá que ocurra la reproducción.
A continuación se hace una descripción de las hormonas que participan en el
proceso reproductivo y en la producción y finalización del estro.
Hormona Liberadora de Gonadotrofinas (GnRH)
Las susutancias del hipotálamo que controlan la liberación de las hormonas
hipofisiarias fueron inicialmente factores de liberación. A medida que se
conocieron sus estructuras químicas, se las ha llamado hormonas liberadoras y su
abreviatura genérica es RH. La GnRH es Segregada por el Hipotálamo, es un
péptido pequeño de diez bases de aminoácidos, con un peso molecular de 1.183
daltons que está encargado de estimular a la glándula hipófisis para que secrete
las hormonas gonodatrofinas FSH y LH. Juega un importante papel en el proestro.
Durante el ciclo estral la GnRH se secreta en pulsos cuya ferecuencia cambia
según el estadio del ciclo estral y esta en relación a los cambios de las
concentraciones de los esteroides ovaricos. Se han sintetizado dos tipos básicos
de análogos de GnRH. Los análogos antagonistas parecen unirse al receptor en la
hipófisis, pero no induce la liberación de LH o FSH, y bloquean la acción de la
hormona natural. Los análogos estimuladores inducen laliberacion de Lh y FSH, al
igual que la GnRH natural. La razón del aumento en la actividad biológica de los
agonistas GnRH se debe a su capacidad de permanecer unidos al receptor en la
hipófisis por mas tiempo que la hormona natural (Navil, 2007).
45
Oxitocina
Es una hormona peptidica que se sintetiza en el hipotalamo en el nucleo optico y
paraventricular se sintetiza junto con proteinas transportadosras llamadas
neurofisisnas y se almacena en la neurohipófisis, una vez liberada a la circulación
tinen una vida media muy corta (entre 5 y 10 minutos) ya que es degradada muy
rapidamente `por las neuropeptinas del higado y riñon Esta hormona tiene varias
funciones como son la contracción de la musculatura uterina y modificacion de los
umbrales de excitabilidad del miometrio, intervenir en el mecanismo del parto,
colaborando con la expulsión del feto y contracción del utero para asegurar la
hemostasia, estimulacion de las celulas mioepiteliales de los alveolos mamarios
papa la bajada de la leche, incrementa la frecuencia de contracciones del oviducto
interviniendo en el transporte espermático, en la vaca , oveja y el ser humano se
produce oxitocina en el CL e interviniendo activamente en el proceso de luteólisis,
(Sintex, 2005).
Hormonas gonadotrópicas o gonadotropinas
Son glicoproteínas producidas y liberadas por la hipófisis anterior, de donde se
vierten al torrente sanguíneo, para así alcanzar su órgano objetivo: las gónadas
(ovarios). Favorecen la maduración gonadal y la esteroidogénesis, capacitando al
organismo para que se pueda reproducir. La síntesis y la liberación de las
hormonas
gonadotrópicas
hipofisiarias,
son
reguladas
por
la
hormona
hipotalámica liberadora de gonadotrofinas (GnRH), misma que provee el enlace
entre los sistemas nervioso y endocrino (Prieto–Gómez et al., 2002).
Desde el aislamiento de este decapéptido y la identificación de su estructura en
1971, su estudio ha contribuido a entender los mecanismos y el patrón de
liberación de las hormonas gonadotrópicas (Peters et al., 1994).
46
Hormona Luteinisante (LH). Hormona producida en la hipófisis. Es una
glicoproteína compuesta de una subunidad a y otra b con un peso molecular de
30.000 daltons y una vida media de 30 minutos.los niveles tónicos o basales de
LH actúan con la FSH para inducir la secreción de estrógenos de los folículos
ováricos. Las células de las teca interna, contiene receptores de LH y mediante su
estimulo producen andrógenos, que pasan a las células de la granulosa, donde
mediante la acción de la FSH induce aromatización de estos andrógenos para
transformarse en estrógenos que son liberadosal antro folicular y de allí a la
circulación general. La LH es también responsablede inducir una serie de
reacciones enzimáticas que terminan con la ruptura de la pared folicular y la
ovulación y por efecto da origen al cuerpo lúteo, mismo que empieza a secretar
progesterona, hormona indispensable en la gestacion (Asprón, 2004). Aumenta la
síntesis de progesterona a partir del cuerpo lúteo preparando al útero para la
implantación del embrión disminuyendo el tono miometrial, aumentando la
viscosidad del mucus y cerrando el canal cervical. Además del pico preovulatorio,
inducirá la activación del oocito para que continue la meiosis. (Peters et al., 1994).
Hormona Folículo estimulante (FSH). Acrónimo del inglés (Follicle–Stimulating
Hormone). Hormona gonadotrópica, de naturaleza glicoprotéica producida por el
lóbulo anterior de la glándula hipófisis, que se encuentra en el cerebro. Esta
compuesta por dos subunidades diferentes denominadas alfa y beta, el peso
molecular es de aproximadamente 32.000 daltons,la vida media de esta hoemona
va de 2 a 5 horas. Esta hormona en la hembra estimula el crecimiento, desarrollo y
función del folículo en los ovarios para que, de esta manera, el óvulo o huevo se
encuentre disponible para la fertilización. La FSH, además junto con la LH
estimula la síntesis de estradiol e inhibina en las celulsa tecales de los folículos en
desarrollo, que a su vez actuaran en conjunto suprimiendo la liberación de FSH
por la hipófisis. En las mujeres después de la menopausia, la secreción de FSH
aumenta notablemente pasando por filtración renal y llegando a la orina con
47
elnombre de gonadotrofina menopáusica humana (hMG), que es cormercializada
como hormona para inducir la superovulacion enmujeres y animales (pergonal®,
serono). En la actualidad se usan mas comúnmente extractos de pituitaria de
cerdo (Folltropin®, vetrepharm o Pluset®, calier) o de oveja (ovagen®, ICP), que
contiene altas cantidades de FSH para la superovulacion de bovinos. (Peters et
al., 1994).
Hormonas Gonadales
Algunas de las hormonas producidas en los ovarios son: los estrógenos y la
progesterona, clasificadas ambas como esteroides. Una definición simple de la
función de estas hormonas es: los estrógenos estimulan actividad en el sistema
reproductivo, mientras que la progesterona inhibe dicha actividad (Reeves, 1989).
Estrógenos. Alcanzan su mayor nivel en el estro. Los estrógenos, hormonas
esteroideas, son producidos por el folículo ovárico y tienen acciones sobre los
distintos órganos en los que intervienen como son las trompas de Falopio, el útero,
la vagina, la vulva, el sistema nervioso central –en el cual estimulan la conducta de
celo– y el hipotálamo donde ejercen un "feed back" negativo sobre el centro
tónico35 y positivo sobre el centro cíclico36 (Sintex, 2005).
Los estrógenos son producidos por las células de la pared del folículo en
crecimiento en el ovario bajo el control de la LH. El folículo preovulatorio,
justamente antes de la ruptura, produce grandes cantidades de estrógenos. El
elevado nivel de estrógenos hace que la vaca muestre signos de estro (calor)
(Echeverrás, 2006).
Las células de la Teca y Granulosa encontradas dentro y alrededor del folículo en
crecimiento actúan en conjunto para la producción de estrógenos. Las células de
35
36
Localizado en el núcleo arcuato del Hipotálamo, actúa durante todo el ciclo (Sintex, 2005).
Núcleo de tipo pulsátil localizado en el Hipotálamo anterior, regula la ovulación (Sintex, 2005).
48
la teca producen andrógenos que se difunden dentro de las células de la
granulosa donde son convertidos en estrógenos. Después de la ruptura, las
células de la granulosa se convierten en células luteales grandes, formando las
principales células de secreción de progesterona del cuerpo lúteo (Martínez,
2005).
Los estrógenos tienen varios efectos: 1) desarrollo y función de los órganos
sexuales secundarios, 2) receptividad sexual o conducta estral, 3) ritmo y tipo de
crecimiento, especialmente depósito de grasa, y 4) preparación de la vaquilla
prepúber y la vaca posparto para el inicio de la actividad sexual cíclica (Asprón,
2004). Además dilatan el cuello del útero, favorecen la contractilidad de la
musculatura uterina y generan cambios en la viscosidad del moco cervical, base
para la detección del estro (Echeverrás, 2006).
El estrógeno de primera importancia en la hembra es el estradiol- 17b, pequeñas
cantidades de estrona y estriol son también secretados por diferentes partes del
ovario (Echeverrás, 2006).
Progesterona. Hormona esteroidea, sintetizada por el cuerpo lúteo, la placenta y
las glándulas adrenales su secreción es principalmente estimulada por acción de
la LH aunque también se ha visto que participan la FSH, factores de crecimiento
similares a la insulina (IGF-1) y las prostaglandinas E2 e I2. Se produce en mayor
cantidad durante el metaestro y el diestro y se sintetiza durante todo el período de
gestación. Esta hormona prepara el útero para el implante del embrión y para
mantener la gestación inhibiendo las contracciones y promoviendo el desarrollo
glandular del endometrio, estimulando el engrosamiento en la pared uterina y el
desarrollo de glándulas y músculos uterinos. Los efectos de la progesterona se
observan después que el tejido blanco ha estado expuesto durante cierto tiempo a
la estimulación de los estrógenos (Sintex, 2005).
49
La P4 suprime el desarrollo completo de los folículos y la secreción de estrógenos.
Niveles altos de esta hormona y bajos de estrógenos evitan que la vaca presente
estro (Asprón 2004).
Las funciones de estrógenos y progesterona no siempre son antagónicas y en
algunos procesos actúan juntas. El radio de concentración estrógenos/
progesterona determina el inicio y duración de la conducta estral. El desarrollo
uterino es iniciado por los estrógenos y completado por la progesterona. Los
estrógenos causan contracción uterina cerca del momento del estro y la ovulación
para ayudar al transporte espermático. La progesterona elimina la contracción
uterina que podría afectar la preñez, hace que se forme tejido secretor (alveolos)
de la glandula mamaria. Lo que hace evidente la importancia de esta hormona es
la regulación del cilo estral. (Asprón, 2004).
Otras hormonas en la reproduccion
Prostaglandina F2α
Producida por el miometrio, interviene en la regulación neuroendócrina del ciclo
estral mediante su efecto luteolítico (de regresión del cuerpo lúteo) y la liberación
de oxitocina, cumple además funciones de regulación de los mecanismos de
ovulación, susu concentraciones sanguineas son bajas pero se elevanen ciertas
condiciones como en el parto. Las prostaglandinas actúan como hormonas
autocrinas y paracrinas (Salverson et al., 2002).
Las prostaglandinas se pueden sintetizar a partir del ácido araquidónico37 por la
acción de diferentes enzimas38 como cicloxigenasas, lipoxigenasas, el citocromo
37
El ácido araquidónico (AA) es un ácido graso esencial, omega-6, formado por una cadena de 20 carbonos
con cuatro dobles enlaces (ácido eicosatetraenoico) en las posiciones 5, 8, 11 y 14, por esto es el ácido
20:4(5,8,11,14). Su fórmula química estructural es: CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CHCH2CH=CHCH2CH=
CH(CH2)3COOH (Tamayo et al., 2007).
La presencia de dobles enlaces ofrece a la molécula varios sitios potenciales de oxidación enzimática y
química, que junto con el posterior reordenamiento, permite la formación de diferentes lípidos con distintas
50
P-450, peroxidasas, etc. El mecanismo durante el cual la PGF-2ª llega del
endometrio al ovario en los rumiantes es único, ya que al ser liposoluble difunde
de las paredes de la vena utero-ovarica a laarteria ovarica (Adams H. R., 2001).
Figura 13. Estructura química de la
prostaglandina F2α (PGF-2α).
Fuente. Adams H. R., 2001.
Reguladores peptídicos
Son producidos en la teca y en la granulosa. Tienen como fin potenciar los
resultados de las gonadotropinas en la granulosa del folículo prenatal, son
glicoproteínas con acción auto, para y endocrina. Estos factores reguladores son
(Martínez, 2005):
Inhibina. Hormona proteica, coadyuvante, producida por las células de sertoli en
el macho y las de la granulosa en la hembra, interviene en el mecanismo de
actividades biológicas. El ácido araquidónico está presente en las membranas de las células corporales, y es
el precursor en la producción de eicosanoides. Es uno de los ácidos grasos esenciales requeridos por la
mayoría de los mamíferos. Las dos principales rutas oxidativas enzimáticas del AA son: 1) vía de la
lipoxigenasa (LOX): cuyos productos principales son los leucotrienos, HETE, HPETE y las lipoxinas. 2) vía de
la ciclooxigenasa (COX): como productos principales son las prostaglandinas y el tromboxano. Estas dos
enzimas no actúan sobre el AA esterificado, por lo que primero debe ser liberado en forma de ácido graso
libre de los fosfolípidos de membrana por fosfolipasas (Alberio, 2003).
38 Las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas. En estas reacciones, las moléculas sobre las
que actúa la enzima en el comienzo del proceso son llamadas sustratos, y estas los convierten en diferentes
moléculas (los productos). Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran en
tasas significativas. Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de
activación (ΔG‡) para una reacción, así se acelera dramáticamente la tasa de la reacción. La gran mayoría de
las reacciones de las enzimas son millones de veces más rápidas que las reacciones no catalizadas. Al igual
que ocurre con los catalizadores, las enzimas no son consumidas por las reacciones que ellas catalizan, ni
alteran su equilibrio químico. Sin embargo, las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más
específicas. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas, llamados inhibidoras que
disminuyen su actividad (Adams, H. R., 2001).
51
regulación de la secreción de FSH, ejerciendo un feedback negativo a nivel
hipofisiario sobre el estradiol, lo que conduce a la disminución en la secreción de
FSH. Al final de la fase lútea disminuyen las cantidades de estradiol–inhibina y
nuevamente aumenta la FSH para comenzar el reclutamiento de folículos para los
ciclos venideros (Sintex, 2005).
Activina. Coadyuvante de la acción de la FSH y antagonista natural de la inhibina,
tiene una acción autocrina bien definida y estimulante sobre el proceso de
aromatización (Sintex, 2005).
Cuadro 1. Algunas Hormonas importantes en la reproducción de la hembra bovina.
Hormonas
Puntos de interés
Estrógenos
Principal
hormona
femenina,
responsable de las características
sexuales secundarias;
signos de
comportamiento de celo, cambios
fisiológicos en el tracto reproductivo de
la hembra, desarrollo de la glándula
mamaria.
Progestágenos
Oxitocina
Prolactina
Prostaglandina F2α (PGF-2α)
Liberados por el cuerpo lúteo, causan
inhibición del comportamiento sexual,
mantenimiento de la preñez y desarrollo
de la glándula mamaria
Producida en la pituitaria posterior,
responsable de las contracciones del
musculo liso del endometrio en el útero
y de la eyección de leche por las células
de la ubre.
Producida en la pituitaria anterior, su
responsabilidad primaria es estimular la
síntesis de leche en la glándula
mamaria.
Liberada por el endometrio cuando no
se ha establecido preñez, causa lisis y
regresión del cuerpo lúteo en el ovario
para reiniciar el ciclo estral.
52
6.3. LA DETECCIÓN DEL ESTRO
El ciclo estral en la vaca se puede definir como el período que hay entre un celo y
otro, se caracteriza por la combinación de una serie de acontecimientos
fisiológicos que comienzan en un período estral y terminan en el siguiente. La fase
luteal
está
caracterizada
por
ausencia
de
manifestaciones
típicas
de
comportamiento sexual, presencia de cuerpo lúteo activo y altos tenores de
progesterona plasmática circulantes. La fase folicular comienza con el proestro; en
este momento ocurre un aumento del estrógeno del folículo preovulatorio que
induce un período de receptividad o estro esta fase es finalizada cerca de la
ovulación 35 a 45 h después. La fase luteal abarca el diestro y finaliza cerca de la
fase de luteólisis. (ver figura 14) (Echeverría, 2004, 2005; Mc Craken et al., 1999;
Niswender et al., 2000).
Figura 14. Fases del ciclo estral.
Día 0
Día 20
Día 1
FASE
FOLICULAR
Día 19
Día 4
P4
P2
FASE
LUTEAL
Día 18
Día 16
Día 11
Día 13
Día 7
53
Cada ciclo puede estar clásicamente dividido en una fase luteal y en una fase
folicular. Su duración promedio es de 21 días, con variaciones de 18 a 24 días y
tendencia a ser más corto en novillas. y que se mantiene así desde la pubertad
hasta los 10 o 15 años, cuando comienzan los signos de senilidad. El ciclo estral
se divide en 4 etapas o estadios, que se muestran en el esquema 2 (Martínez,
2005).
54
Gráfica 1. Concentraciones relativas de hormonas en cada fase del ciclo estral con el respectivo folículo y desarrollo del cuerpo lúteo.
55
Esquema 2. Etapas del ciclo estral bovino.
ESTRO
Día 0
Presencia folículo
preovulatorio
Pico máximo de estrogenos
Después de 12-18 horas
PROESTRO
METAESTRO
Días 17-21
Días 1-4
Declina la Progesterona
Ocurre la ovulación
Se incrementan los Estrógenos
El CL comienza su desarrollo
en el lugar donde se produjo la
ruptura del folíclo.
Próxima onda de desarrollo de
folículos
DIESTRO
Días 5-16
CL en pleno funcionamiento
Pico máximo de progesterona
engrosamiento del Endometrio
Fuente: Martínez, 2005.

Etapa preovulatoria (Estro o celo). La palabra estro proviene del latín estros
(deseo imperioso). Es un período de aceptación para el apareamiento
(receptividad sexual) que normalmente se presenta en novillas pubescentes y
vacas no preñadas. Consiste en el cambio rítmico de la conducta sexual
surgido durante la pubertad en las novillas. Durante este período la vaca
acepta la monta. Ocurre cada 21 días en promedio, aunque este intervalo
puede variar normalmente entre 18 y 24 días (Mellisho, 2006).
Diferentes autores estiman una duración promedio de 10 a 16 h, con un rango
de 3 a 28 h, dependiendo de la raza, la edad, los factores ambientales,
sociales, individuales, etc. Por ejemplo: 1) las razas índicas presentan celos
más cortos que las europeas; 2) las novillas tienen generalmente celos de
56
menor duración que las vacas; 3) el primer celo pospuberal o pospartal es más
breve; 4) en condiciones de estrés el celo dura menos, etc (De La Sota, 2002).
Asimismo vale la pena mencionar que un 25 a 30% de los celos dura menos de
8 horas. Por otra parte, algunos celos son "interrumpidos", es decir que el
período de receptividad se interrumpe por unas horas en que la hembra no
acepta la monta, lo que parece obedecer a un descanso que se toma el animal,
apartándose del GSA39 (Mellizo, 2006).

Etapa ovulatoria (Metaestro). Día siguiente del celo. Cuando se produce la
ovulación y son liberados los óvulos o gametos femeninos contenidos en los
folículos (Barros, 2000).

Etapa luteal (Diestro). Este período es responsabilidad de la hormona
progesterona –liberada por el cuerpo lúteo–, que mantiene al animal fuera del
celo y es la responsable de mantener la gestación o preñez. El útero envía, el
día 16 o 17 del ciclo, una señal al ovario para que destruya el cuerpo lúteo,
cayendo los niveles de progesterona e iniciándose nuevamente el proestro, en
caso de que la hembra no hubiese gestado, La hormona responsable de
destruir el cuerpo lúteo es la prostaglandina F2, que es liberada por el útero,
excepto cuando ocurre la gestación y se mantiene el cuerpo lúteo de gestación
(Barros, 2000).

Etapa folicular o de regresión lutea (Proestro). Antes del celo. Se presenta si el
animal no ha quedado preñado. Durante este período se da el crecimiento de
los folículos ováricos, los cuales liberan la hormona femenina (estrógeno) y son
responsables de la aparición del nuevo celo (Martínez, 2005).
39
Grupo sexualmente activo.
57
Figura 15. Días del ciclo estral
Durante el ciclo estral suceden una cadena de eventos que se repiten. En la vaca
el proceso de la foliculogénesis (crecimiento y maduración folicular), tiene inicio
con la formación de folículos durante la vida fetal, o sea al nacimiento la ternera ya
tiene determinado él numero de folículos primordiales en sus gónadas, la mayoría
de esos folículos durante su crecimiento van a degenerar en un proceso conocido
como atresia folicular, apenas una minoría va a completar su maduración y a
ovular (De La Sota, 2002).
58
Figura 16. El ovario de la vaca y su dinámica durante el ciclo estral.
Graafian Follicle
Folículo primario
Óvulo
Ovulación
Terciario
(Graafian)
Foliculo
(temprano)
Ruptura del
folículo
(Forms from ovulated
follicle)
Oocito primario
Cuerpo
hemorrágico
Regresión del
Cuerpo Lúteo
Cuerpo lúteo
(Produce progesterona)
Folículo
secundario
Atretic Follicle
Cuerpo Lúteo
muerto
6.3.1. Métodos para la detección del estro
Para maximizar la vida productiva de una vaca, esta debe ser servida en un
máximo entre los 80 y 90 días luego del parto. Ya sea que el productor utilice
inseminación artificial o servicio natural, la detección de estro es un componente
crítico para el buen manejo reproductivo en la explotación bovina. Cualquiera que
sea el caso, el registro de las vacas en estro o fechas de servicio es necesario
para predecir estros (Caicedo, 2003).
La detección de estros ha sido uno de los aspectos de la reproducción bovina más
estudiados en la actualidad, existiendo para su realización una serie de técnicas
que van desde la detección visual de forma continua, uso de pinturas y parches,
hasta la utilización de métodos computarizados (De La Sota, 2005).
59
Los signos de celo pueden variar en su duración o intensidad, por lo que el
inseminador debe saber reconocer, interpretar y confirmar los signos observados
para garantizar la eficiencia en la detección de celos. Programas como la
inseminación artificial, dependen básicamente de la eficiencia en la detección de
celos. Un elemento fundamental para la detección de celos es la adecuada
identificación de todas las vacas o novillas, así como la disposición de registros al
día (Bavera, 2005). Se han desarrollado diversos métodos para la detección del
estro, entre estos el más confiable se basa en la observación visual de los
animales, dos o tres veces al día durante 20 o 30 minutos, en cada ocasión,
preferiblemente después del ordeño. El uso de métodos de apoyo para la
detección del celo es sólo una forma auxiliar y nunca puede sustituir a la
observación visual, siendo la interpretación de las observaciones lo más
importante (Bavera, 2005).
Entre los métodos de apoyo para la detección de estro, utilizados para aumentar la
eficiencia en la detección del celo se cuentan: (1) Pintura en la base de la cola y
detectores de presión en la base de la cola. Los detectores de presión (Bovine
Beacon, Romage ®) se aplican sobre la base de la cola de la vaca con un
adhesivo y son activados por la presión ejercida por el animal que monta. En hatos
grandes, se ha extendido la utilización de pintura (Celotest, Northway ®), crayones
o tiza para realizar una marca sobre la base de la cola de los animales elegibles a
entrar en celo. La monta repetida de los animales en celo borra paulatinamente
dicha pintura lo cual es medido en una escala de 5 (intacta) a 0 (borrada
completamente) (ver figura 17). (2) Detectores electrónicos de presión en la base
de la cola. Los detectores electrónicos de presión en la base de la cola
(Heatwatch®, DDx, USA) fueron desarrollados para monitorear de manera
continua la frecuencia y duración de las montas que sufren los animales en celo.
Sin embargo la intensidad de detección de celo40 es superior con respecto a la
detección visual (91% y 54% respectivamente). (3) Retajos y animales tratados
40
Intensidad de detección del celo. Se define como el porcentaje de celos posibles que son observados
durantes un período de tiempo específico (De la Sota, 2005).
60
con esteroides masculinos. La utilización de retajos (toros vasectomizados o con
pene desviado), novillos, novillas o vacas androgenizadas mejora la intensidad de
detección del celo cuando son utilizados en combinación con pintura en la base de
la cola, detectores de presión en la base de la cola o marcadores Chin-ball ®, que
cuando son utilizados en forma individual. (4) Resistencia eléctrica de los fluidos
del tracto reproductivo. La resistencia eléctrica de los fluidos vaginales disminuye
durante el proestro y el estro y puede utilizarse si se mide en forma repetida hasta
alcanzar un valor mínimo que coincide con el momento del estro. Esta
metodología posee una intensidad que varía del 65 al 82% y una exactitud del 57
al 82%. (5) Podómetros. Los animales durante el celo son más activos y utilizan
más tiempo caminando o manteniéndose parados que descansando, para medir
dicha actividad se han desarrollado varios modelos de podómetros (Afiact, Bossio;
Heat Seeker-TX, Alfa-Laval Agri ®) (Dransfield et al., 1998; OĆonnor y Senger,
1997; Candfield y Butler, 1989; Maatje K. et al., 1997).
Figura 17. Método de detección de celo con pinturas y crayones.
Mientras más animales se encuentren en celo en un momento dado, mayor será la
actividad sexual de grupo y más fácil será la detección del celo. El médico
veterinario también puede utilizar tratamientos específicos para inducir los celos
(sincronización de celos) y facilitar las labores de detección (Bavera, 2005).
61
6.3.2. Signos de estro
La detección del estro requiere de una aguda observación. La mayoría de las
vacas poseen un patrón de comportamiento que cambia gradualmente desde el
comienzo al final del estro. El mejor indicador de que una vaca está en estro es
cuando se mantiene quieta y se deja montar por sus compañeras o por un toro.
Algunos signos, que pueden ayudar a identificar el estro en las vacas, se resumen
en el cuadro 2, la figura 19 y la fotografía 1 (Bavera, 2005).
Fotografía 1. Signos del estro.
a) Moco filante,
transparente, viscoso
d) Apoyo del mentón.
f) Monta activa.
b) Mucus ensuciando cola, pelos
demudados, raspaduras.
c) Vaca en celo en posición de cubrición,
aceptando la monta por otra.
e) Monta craneal.
g) Monta pasiva.
62
6.3.3. Patrones diarios en los signos de estro
El comienzo del estro sigue diferentes patrones, la mayor actividad se presenta
durante las últimas horas de la tarde- noche, a lo largo de la noche y en las
primeras horas de la madrugada. Las investigaciones muestran que más del 70%
de la actividad de monta toma lugar entre las 7:00 p.m. y las 7:00 a.m. (figura 18).
De manera que para detectar el estro en el hato, en el 90% de los casos, las
vacas deben ser observadas cuidadosamente en las primeras horas de la
mañana, las últimas horas de la tarde y en intervalos de cuatro a cinco horas
durante el día (Bavera, 2005).
Figura 18. Horas y niveles en que se manifiestan los signos del estro.
6.3.4. Otros factores que influencian la expresión del estro
La expresión y detección de estro puede ser más o menos fácil dependiendo de
una serie de factores como el tipo de alojamiento (establo, establo libre, pastura,
camino para caminar a lo largo del alambrado, etc.) provee varios grados de
facilidad para que la vaca exprese signos de estro y para que los productores los
63
detecten. En hatos más grandes, más de una vaca puede estar en estro al mismo
tiempo, cuando esto se presenta, las oportunidades de detección se incrementan
en forma dramática debido a que la actividad de monta también se incrementa
considerablemente. Por ejemplo, dos vacas en estro al mismo tiempo (grupo
sexualmente activo) hacen que la actividad de monta se triplique. En contraste,
factores tales como altas temperaturas y humedad, viento, lluvia, nieve,
confinamiento, y condiciones que pueden causar que las vacas patinen o caigan, o
dolores en las pezuñas tienden a inhibir la expresión de estro (Fuenmayor, 2007).
Cuadro 2. Signos de estro en las vacas lecheras.
SIGNOS
CARACTERÍSTICAS
Signos Principales
Permanece inmóvil cuando es montada.
Dejarse montar
Muestra signos asociados con el estro temprano y el tardío.
Estro temprano y
tardío
Signos
secundarios1
Balidos como los de un toro.
Signos generales de nerviosismo.
Corridas hacia adelante como si estuviese atacando. La posición de
cabeza a cabeza con otra vaca se ve frecuentemente.
Golpes o empujones contra los costados de otras vacas.
Olfateo de la vulva o la orina de otros animales acompañado algunas
veces con inversión de los orificios nasales.
Vacas que se colocan en un círculo, aquella en estro intenta descansar
su barbilla en la espalda de la otra. Esto puede conducir o no a la
actividad de monta.
Vulva rosada e inflamada (edematizada), mucosa vaginal hiperemica,
descarga de moco vaginal claro y elástico.
Disminución de la producción de leche.
Disminución del apetito.
Animales sucios (estiércol en los flancos).
Formación de grupo, lordosis
Vulva enrojecida e inflamada
Raspaduras (pérdida de pelo) en la grupa o base de la cola.
1. Signos no-específicos cuya ocurrencia depende de situaciones particulares.
Fuente. Wattiaux, 2007 y Fuenmayor, 2007.
Muchas de estas señales también pueden estar presentes en el proestro. El
síntoma más característico del estro es cuando la hembra se queda inmóvil
cuando es montada. Las señales del estro son inducidas por la elevada
concentración de estradiol en la circulación, proveniente del folículo preovulatorio,
que actúa en centros cerebrales (principalmente hipotalámicos) y medulares. La
64
acción del estradiol es potencializada por la pre-exposición a la progesterona,
hecho este que es lógico y no trae mayores consecuencias cuando es un ciclo
estral normal. (Wattiaux, 2007).
6.3.5. Cálculo de la intensidad de detección de celo
De acuerdo con Fuenmayor et al., (2007), la intensidad de detección de celos se
define como el porcentaje de celos posibles que son observados durante un
período de tiempo específico. Se han desarrollado varios métodos para expresar
el porcentaje de vacas detectadas en celo con respecto al número asumido o
calculado que debería estar en celo. Tanto el cálculo de la intensidad de
detección, como la comparación entre diferentes métodos de cálculo, presentan
dificultades debido a que normalmente se utilizan distintos intervalos de tiempo y
se incluyen o no a las vacas preñadas. Además generalmente se asume que:
1. Todas las vacas están ciclando luego de determinado día posparto,
2. Todos los celos detectados corresponden a ciclos estrales (no son falsos
positivos),
3. Todos los ciclos estrales son de aproximadamente 21 días.
Esto último es particularmente importante en aquellos rodeos donde se utilizan
prostaglandinas para la inducción de la luteólisis y la ovulación en las vacas
encontradas vacías al tacto (Fuenmayor, 2007).
6.3.6. Momento óptimo para el servicio (monta – inseminación)
Entre los factores que determinan el momento óptimo de servicio se incluyen:

Duración del celo.

Momento de ovulación.

Vida fértil del óvulo.
65

Vida fértil del espermatozoide. (Manrique et al., 1990).
La ovulación ocurre aproximadamente 30 horas después del inicio del celo. La
vida útil del óvulo se estima en 12 horas y la del espermatozoide en 24 horas. El
tiempo de capacitación espermática del espermatozoide es de 6 horas (Manrique,
1990).
El conocimiento de estas condiciones fisiológicas permitió desarrollar un esquema,
denominado sistema AM-PM, que consiste en dos observaciones de 30 minutos
cada una, una temprano en la mañana (entre 5 y 7 a.m.) y otra temprano en la
noche (entre 6 y 8 p.m.). Las vacas observadas en celo en la mañana se
inseminan en la tarde y aquellas observadas en celo en la tarde se inseminan la
mañana del día siguiente (ver cuadro 3 y figura 19) (Manrique et al., 1990).
Cuadro 3. Esquema AM–PM para la inseminación artificial.
Momento adecuado para el servicio, de acuerdo con el período de celo
 El celo tiene una duración de 10 a 18 horas. Los mejores resultados se obtienen cuando se insemina
al final del celo.
 Como regla práctica se recomienda que la vaca que es observada en celo por la mañana, debe
inseminarse por la tarde del mismo día, y las que se observan en celo por la tarde, en la mañana
siguiente.
 Para que la inseminación ocurra en las horas de menor calor, se recomienda hacerlo durante las
primeras horas de la mañana (5 a 7 a.m.) y en las últimas horas de la tarde (5 a 7 p.m.)
Antes del celo
5 a 10 horas
Las vacas comienzan a montarse
Demasiado temprano
Fin del celo manifiesto
Bueno
Celo
10 a 18 horas
Ideal
Bueno
7 a 12 horas
Después del celo
12 a 36 horas
Aquí de desprende el óvulo. Termina
la secreción saguinolenta.
Demasiado tarde
66
Figura 19. Diagrama para el servicio.
6.3.7. Ausencia del estro o anestro
Entre los problemas más comunes del rebaño se puede mencionar el anestro o
ausencia del celo en las vacas o novillas. El anestro puede ser verdadero y se
relaciona con la preñez (la vaca ha parido y el ciclo estral no se ha reestablecido –
estro mudo), la mala alimentación, baja condición corporal, amamantamiento,
problemas del tracto genital (quiste ovárico, momificación fetal, piómetra) o por
otras complicaciones luego del parto. Otro tipo de anestro es el falso, que se
asocia con el mal manejo y la mala detección de celos, muchas veces por
irregularidad en las observaciones, interpretación errónea de los signos,
inadecuada identificación de los animales o mal uso de los registros (Belloso et al.,
2002).
67
7. LA SINCRONIZACIÓN DE CELOS
La biotecnología ha jugado un papel muy importante en la producción animal,
durante años se practica de alguna forma u otra bajo varias banderas desde que
el hombre comenzó a domesticar a las especies animales. Muchas de las
herramientas antes utilizadas para la reproducción animal, ahora unidas por la
biotecnología, tienen y seguirán teniendo un papel muy importante en la selección
y propagación de características deseables e importantes a nivel económico en el
ganado. Desde este punto de vista, las prácticas de producción animal han sido un
éxito biotecnológico desde hace ya mucho tiempo (Sepúlveda et al., 2003).
La eficiencia de los sistemas de producción en bovinos es dependiente de la tasa
de terneros nacidos y destetados. La aplicación de los resultados de un estudio
sobre costos de producción, indicó que el intervalo máximo entre el parto y la
concepción sea de 100 días, para que una vaca se torne económicamente
rentable en una explotación, lo que significa una tasa de fertilidad en media de
90%. Para que sea posible la obtención de esos índices, es imprescindible que
sea utilizada una estación de monta no superior a 60 días. En ese contexto, la
sincronización de celos es importante, permitiendo una buena concentración de
los partos de las novillas en los momentos más adecuados del año en función del
ofrecimiento forrajero (Moraes, 1994).
En bovinos de leche o de carne confinados, la identificación de estros es uno de
los grandes problemas del proceso de inseminación artificial. En estos sistemas de
crianza, la sincronización de estros, asociada a procesos de IATF, es un
importante instrumento para fecundar las vacas sin la observación de los estros y,
con esto incrementar, los índices de gestación, reducir el intervalo parto
concepción y disminuir el número medio de dosis de semen por vaca inseminada.
Se ha avanzado a pasos agigantados en el uso de numerosas tecnologías como
la sincronización de celos y ovulaciones, biotecnología reproductiva que permite
68
entre otros, la concentración de la inseminación y de la parición en épocas
deseables dentro de los sistemas de producción (Evans y Maxwell, 1987),
Solucionar el problema de la baja detección de celos en los hatos bovinos,
eliminando la detección visual de celos, maximizar los recursos humanos del
establecimiento y para ajustarse a un régimen de tareas con periodicidad semanal
y adoptar programas de sincronización de celos y/o ovulaciones para la
inseminación a tiempo fijo de todos los animales y para programas de
Transferencia de Embriones obtenidos por MOET o FIV (Bó et al., 1995).
La mayoría de las biotecnologías reproductivas desarrolladas con posterioridad a
la sincronización de estros estuvieron relacionadas también con la mejora genética
y particularmente centradas en la mejora del uso de la IA, así como en el
desarrollo de otras que posibilitaran la ampliación de la capacidad reproductiva de
las hembras. Es así como aparecen los métodos de control del ciclo estral que
tuvo lugar en la década del 60. Su objetivo original fue simplificar la aplicación de
la IA en los países desarrollados, con lo cual era posible disminuir la cantidad de
horas dedicadas a este trabajo, disminuyendo así el costo en mano de obra. Más
tarde se vio que este objetivo era ampliamente superado con otros impactos que
el uso de esta técnica podía tener tanto con el uso de la IA así como simplemente
en el manejo reproductivo de los rodeos (Bó et al., 1995).
7.1. Definición de la Biotecnología de Sincronización de Estros
En términos prácticos, es importante diferenciar sincronización de inducción de
estros. La sincronización consiste en cortar o prolongar el ciclo estral a través de
la utilización de hormonas o asociaciones hormonales que induzcan la luteolisis o
prolonguen la vida del cuerpo Lúteo, de manera que un grupo de vacas entre en
estro y/o ovule durante un corto periodo de tiempo o en un mismo día. Al contrario
la inducción de estros consiste en inducir el estro en vacas que están en anestro,
a través de la utilización de hormonas o prácticas de manejo. Así mismo la
69
sincronización y la inducción de estros son procesos distintos y aplicables a
diferentes categorías de animales (Thatcher et al., 2004a).
Gráfica 2. Efecto de la sincronización del estro sobre el desempeño reproductivo
durante una sola semana de servicio.
Porcentaje
Con sincronización
Sin sincronización
Detectadas con estro
Tasa de concepción
Tasa de preñez
Fuente: Dejarnette, 2007.
El objetivo de un buen programa de sincronización es el control preciso del celo,
que posibilite la inseminación artificial en tiempo fijo (IATF) sin detección de celo,
además necesita estar aliado a altos índices de fertilidad con ovulación
sincronizada, las poblaciones blanco son generalmente, los rebaños de bovinos de
leche, cuyas tasas de preñez son generalmente pésimas debido al bajo índice de
detección de celos y de concepción además de la ocurrencia de anestro, y los de
bovinos de carne con alta incidencia de anestro en la época escogida para la
reproducción. Las estrategias de programación de la ovulación se han basado en
el control de la vida del cuerpo lúteo con prostaglandinas, en la inducción de la
ovulación con GnRH o en el impedimento del estro con el uso de tratamientos a
base de progestágenos (Thatcher et al., 2004a).
70
7.2. LAS ONDAS FOLICULARES Y LA SINCRONIZACIÓN
El desarrollo folicular se produce en ondas. Las ondas foliculares son el desarrollo
armónico y simultáneo de varios folículos antrales funcionando a través de
estadíos integrados de reclutación, selección y dominancia folicular (Hafez, 1987;
Fortune et al., 1991; Fernández Tubino, 2003):

Reclutamiento:
varios
folículos
primarios
pasan
a
desenvolverse
concomitantemente. Esta fase es dependiente de FSH (Hormona Folículo
Estimulante).

Selección y dominancia: un folículo crece más que los otros, tornándose
dominante e inhibiendo el crecimiento de los demás (dominados). Esta fase es
dependiente de la LH (Hormona Luteinizante).

Ovulación o atresia: El folículo dominante ovula después de un pico de
liberación de LH.
Mediante este proceso se selecciona un folículo dominante y se produce la
regresión de los folículos subordinados (Tamayo et al., 2007).
Durante el ciclo folicular, se presentan generalmente dos (y a veces hasta tres)
ondas de actividad folicular; la primera al inicio y la segunda a mitad del ciclo. De
la primera surge un folículo dominante (menor a 5 mm de diámetro) que aumenta
su tamaño (por encima de los 10 mm de diámetro) entre los días 5 y 11 para luego
experimentar atresia (Fortune et al., 1991). En la segunda fase, surgen varios
folículos productores de estrógenos y de ellos, uno es el dominante y el que
controla el destino de los demás, al haber adquirido el tamaño adecuado, cumple
la última fase de crecimiento y se constituye en un folículo preovulatorio (maduro),
listo para ovular. Se expande ligeramente sobre la superficie del ovario para luego
ser liberado (ver figura 10). Una vez que esto sucede, la cavidad se retrae y
comienza a llenarse gradualmente de células que conformarán el cuerpo lúteo
(Echeverrás et al., 2006).
71
Si durante el proceso hay un cuerpo lúteo activo, los niveles de progesterona
estarán altos (fase luteal) inhibiendo la liberación de LH (Feed Back negativo), y
entonces el dominante entra en atresia, y una nueva onda de crecimiento folicular
se inicia. La última onda folicular de cada ciclo culmina con la regresión del cuerpo
lúteo (inducida por la PGF-2 liberada en el útero). Con la disminución de los
Niveles de progesterona, cesa la inhibición sobre la LH que es liberada,
induciendo el crecimiento final del folículo, y la ovulación y posterior luteinización
formando el nuevo cuerpo lúteo (Fricke, 2007). Este proceso é ilustrado en las
gráficas 3, 4 y 5.
El folículo dominante es anovulatorio si ocurre en la fase luteal y ovulatorio si
ocurre en la fase folicular.
Gráfica 3. Fases de crecimiento folicular: reclutamiento (dependiente de la FSH);
Selección y dominancia (dependiente de LH); Ovulación o atresia (en la
dependencia de la presencia o no del pico preovulatorio de LH)
OVULACIÒN
DOMINANCIA
Fuente: Tecnopec 2005.
72
Gráfica 4. Esquema del ciclo estral con 2 ondas foliculares. La primera onda
culmina con la atresia del folículo dominante por falta del pico preovulatorio de
LH (Fase luteínica) la segunda onda culmina con la ovulación (Fase folicular,
baja progesterona y pico preovulatorio de LH).
Fuente: Tecnopec 2005.
Gráfica 5. Esquema del ciclo estral con 3 ondas foliculares. La primera y la
segunda onda culminan con la atresia de los folículos dominantes por falta
del pico preovulatorio de LH (Fase luteínica). La tercera onda culmina con la
ovulación (Fase folicular, baja progesterona y pico preovulatorio de LH).
Fuente: Tecnopec, 2005.
Las investigaciones con el empleo del ultrasonido demuestran que la primera
onda, donde los folículos inician su crecimiento, se produce poco después de la
73
ovulación y aproximadamente a los 6 días aparece el folículo dominante; la
segunda onda de desarrollo folicular comienza como promedio a los 8,5 días post
ovulación, o sea, 9,5 días del ciclo estral en las vacas de tres ondas y 9,5 días
post ovulación (10,5 días del ciclo) en las vacas de dos ondas, en estas últimas es
la onda donde se produce la ovulación. En las vacas que manifiestan tres ondas
foliculares, el folículo ovulatorio surge de la tercera onda el día 18
aproximadamente (Tamayo et al., 2007).
Las vacas con dos ondas de crecimiento folicular tienen ciclos más cortos (18 a 20
días) que las de tres ondas (21 a 24 días); lo cual es un indicador a valorar para
iniciar los tratamientos superovulatorios (Tamayo et al., 2007). Se ha reportado
que el nivel nutricional está asociado con una proporción más elevada de ciclos de
tres ondas. Sin embargo, los verdaderos factores genéticos o ambientales para
definir el comportamiento de las diferentes poblaciones de hembras bovinas en
relación con los patrones de las ondas foliculares no han sido aún establecidos
con precisión (Fricke et al., 2007).
7.3. PROTOCOLOS PARA CONTROLAR LAS DIVERSAS FASES DEL CICLO
ESTRAL
Los programas de sincronización son posibles gracias a los esfuerzos de muchos
investigadores que descubrieron métodos farmacológicos de control de cada fase
del ciclo estral, en diferentes estadios del ciclo reproductivo de los animales. Los
diversos Trabajos mostraron que es posible:
•
Sincronizar la emergencia de una nueva onda folicular, a través de la inducción
de la ovulación (GnRH), de la atresia folicular (progesterona+estradiol), o de la
ablación folicular mediante OPU.
•
Controlar la duración de la fase luteal, usando luteolíticos análogos como la
PGF-2 o los estrógenos, simulando una fase luteal, fortaleciendo la
74
progesterona por medio de dispositivos de liberación lenta, o progesterona de
administración oral.
•
Inducir la ovulación en la fase folicular, con GnRH, LH, hCG o estrógeno.
•
Inducir el crecimiento folicular en animales en anestro, utilizando
gonadotrofinas (FSH o eCG) (Tecnopec, 2005).
En la actualidad se encuentran disponibles tres métodos base para la
sincronización de celos, a partir de los cuales se han desarrollado una serie de
protocolos que implican la combinación de estos métodos:
1. PGF-2 con un intervalo de 2 semanas (Ferguson y Galligan, 1993).
2. GnRH y PGF-2 7 días más tarde (Thatcher y Hansen, 1992).
3. Implantes de liberación lenta de progestágenos41 durante 7 o 9 días (MacMillan
et al., 1991).
Las principales formas de control del ciclo estral y los productos utilizados son
resumidos en el cuadro 4.
41
Progestágenos es el nombre genérico dado a un grupo de compuestos similares a la progesterona, entre
los que podemos citar el acetato de melengestrol (MGA) -de administración oral-, los implantes subcutáneos
de Norgestomet como el SyncroMate-B y el Crestar y los dispositivos intravaginales con progesterona como el
CIDR, el DIV-B y el PRID (MacMillan et al., 1991).
75
Cuadro 4. Formas de control del ciclo estral y productos utilizados.
TIPO DE
FORMA DE
PRODUCTO
INDICACIÓN FARMACOLÓGICA
CONTROL
CONTROL
UTILIZADO
Sincronización de
la onda folicular
GnRH
Gestran Plus
Progesterona +
Estradiol
Primer + RIC-BE
Regresión del
cuerpo lúteo
PGF- 2α
Prolise
Induce la regresión del cuerpo lúteo
en la fase de respuesta (D6 a D17).
Inducción de la
ovulación
Estradiol
RIC-BE
GnRH
Gestran Plus
LH
Lutropin
En ausencia de Progesterona
induce la liberación de GnRH y LH y
la ovulación en 41 a 45 horas.
Induce la liberación de LH y la
ovulación en 28 a 30 horas.
Provoca un pico exógeno de LH y la
ovulación en 26 a 26 horas.
hCG
-------
Simula el efecto de la LH,
induciendo la ovulación en 26 a 28
horas.
FSH
Folltropin
eCG/PMSG
-------
Estimula el crecimiento folicular en
vacas en anestro, usado también en
la superovulación (TE).
Estimula el crecimiento folicular,
especialmente en vacas en anestro.
Inducción del
crecimiento
folicular
Induce el pico de ovulación o
luteinización del folículo dominante.
Surgimiento de una nueva onda
folicular después de 1 día y medio.
Induce la atresia folicular y el
surgimiento de una nueva onda
folicular a los 3 o 4 días.
Fuente: Tecnopec, 2005.
7.3.1. Protocolos a base de prostaglandina (PGF-2)
El descubrimiento, en la década de los 70, de las prostaglandinas como
mediadores de las acciones hormonales y, especialmente, la identificación de la
PGF-2α como la “luteolisina” uterina en varias especies domesticas, marcó un hito
en el desarrollo de la biotecnología42 reproductiva y determinaron un avance
importantísimo en el conocimiento de la fisiología y en la posibilidad de
manipulación y control del ciclo estral (Mellisho et al., 2006).
42
El término biotecnología, fue probablemente usado en primer lugar por el húngaro Kart Ereky en 1919. Se
podría definir como “toda aplicación tecnológica que utilice sistemas biológicos y organismos vivos o sus
derivados para la creación o modificación de productos o procesos para usos específicos” (CDB, 1992, art. 2
PNUD; citado por Wikipedia, 2007). Otra definición es “la utilización de organismos vivos o partes de los
mismos para obtener o modificar productos, mejorar plantas o animales o desarrollar microorganismos para
objetivos específicos” (Sociedad Española de Biotecnología, 2007).
76
El nombre de prostaglandinas fue dado por Von Euler en 1936 a un grupo de
sustancias presentes en semen y en extractos de las glándulas vesiculares del
carnero, capaces de inducir contractibilidad o relajación en la musculatura lisa,
supuestamente producidas por la glándula prostática (Mellisho, 2006), y cuya
actividad biológica no correspondía a ningún compuesto conocido hasta la fecha.
Bergstrom estimulado por Von Euler continuo los estudios sobre la purificación y
determinación de la estructura química de las prostaglandinas; en 1957 lograron
aislarse la mayoría de estos compuestos en estado puro y cristalino y en 1968 se
informo la síntesis total de varias prostaglandinas y de análogos de estas.(Bó,
2004a).
Se conoció entonces que las prostaglandinas se encuentran en la mayoría de los
tejidos del cuerpo (pulmón, timo, músculo esquelético, fluido menstrual, líquido
amniótico, intestino, sangre, tejido graso, etc.), actúan muy cerca de donde se
producen, y se destruyen rápidamente en la circulación, pues de lo contrario
debido a su actividad biológica, inducirían efectos generalizados indeseables. Esto
hace que sea muy difícil aislar las prostaglandinas naturales en cantidades
comerciales y que la mayor parte de las prostaglandinas que se utilizan a nivel
comercial sean sintéticas (Stevenson, 1996). Las prostaglandinas disponibles
pueden dividirse como se muestra en el esquema 3:
Esquema 3. División de las prostaglandinas según su origen.
Prostaglandinas
Sintéticas
De extracción natural
Naturales
Fuente. El autor, 2007.
Análogos
77
Las primeras, difíciles de obtener, no siempre garantizan un alto grado de pureza.
Las naturales de síntesis tiene la formula idéntica a las hormonas que se
encuentran en los tejidos; en el caso de la PGF-2, para sus acciones a nivel
reproductivo en bovinos, se utilizan dosis de 25 a 40 mg. Los análogos sintéticos
tienen el sitio activo de la molécula similar, pero no el resto de la molécula. Son
más potentes y en el caso de la PGF-2, se utilizan en dosis menores, que
dependen del análogo (150 a 800mg), lo cual reduce el riesgo potencial de efectos
secundarios (Bó et al., 2004a).
El tratamiento basado en la aplicación de agentes luteolíticos, implica, por
definición, la presencia de un cuerpo lúteo en el animal que va a ser tratado. La
inyección de prostaglandinas entre los días 5 y 17 del ciclo resulta, dentro de las
24 h siguientes, en una drástica caída en los niveles de progesterona y un
aumento de LH y estradiol en plasma, la presentación de celo y el pico
preovulatorio dentro de los 2–5 días siguientes y la ovulación en el momento
esperado con respecto al celo. La fertilidad de los celos obtenidos es comparable
a la de celos espontáneos ó aún superior (De la Sota et al., 2005).
La eficacia de estos fármacos como luteolíticos es cercana al 100% cuando son
utilizados en forma apropiada. Desde los comienzos de su uso hasta el presente,
se han seguido dos caminos para facilitar el uso extendido de este tipo de
tratamientos: las estrategias de utilización y la dosis apropiada (De La Sota et al.,
2005).
Al utilizar PGF-2 para sincronización de celos, el estro suele presentarse entre 2
a 6 días después de la aplicación por lo que siempre se requiere una inseminación
asociada a la detección de celos. Un sistema de manejo que podría revolucionar el
manejo reproductivo en bovinos es el uso de sincronización de celos e IA a tiempo
fijo, que elimine la necesidad de detectar celos, lo cual es posible alcanzar si se
78
logra sincronizar la ovulación después de la aplicación de PGF-2 (Macmillan y
Burke, 1996).
En 1972, Rowson y en 1974, Cooper y Furr utilizando Cloprostenol, demostraron
que en las hembras bovinas ciclando una inyección de 500 g causaba lùteolisis
en animales con CL en la mitad de la fase luteal. Si se administraba una segunda
dosis 11 días después de la primera todos los animales se encontraban en la fase
luteal y eran sensibles a la acción luteolítica (Boscos, 1997)
En trabajos posteriores sobre 3.810 novillas de cría, Cooper et al (1974),
demostraron que si estas eran inseminadas a las 72 y 96 horas después de la
segunda inyección de cloprostenol, sin detección de celos, la fertilidad era normal,
surgió así el primer tratamiento de sincronización de estros con prostaglandinas y
fue llamado Tratamiento A y para su aplicación se lleva a cabo el siguiente
procedimiento:
Esquema 4. Tratamiento A con PGF-2.
Fuente: CGR, 2002.
Los mismos autores informaron que más del 90% de las hembras que estaban
ciclando respondían al tratamiento y presentaban estro entre 2 y 4 días después
de la segunda inyección; destacaron la gran concentración de los celos y rápida
iniciación del mismo después de la segunda inyección, con respecto a la primera.
79
En cualquier grupo de hembras bovinas a las que se administrar PGF-2 con un
intervalo de 11 días, responderán a la primera inyección las que se encuentran
entre los días 5 y 17 del ciclo al comienzo del tratamiento; mientras que al
momento de la segunda inyección la mayoría se encontrara entre los días 8 y 11
del ciclo y responderán a la PGF-2 (Bó, 2004a).
Surgieron posteriormente varios protocolos de sincronización de estros con PGF.
En general los tratamientos propuestos son modificaciones del Tratamiento A y se
utilizan cuando hay buena tasa de detección de estros (Bó, 2004a).
Jhonson et al., 1999, realizando varios experimentos con novillas, que se
dividieron al azar en 2 grupos G(A )y G(B), que se mantuvieron en potreros
diferentes, cada uno con toro marcador vasectomizado. Después de haber
observado los celos, las novillas del G(A) fueron tratadas con el esquema de doble
dosis. Se dejaron descansar por un periodo mayor a 21 días, permitiendo su
retorno al celo natural y se les administro una única inyección de 500ug de
cloprostenol, 8 días después de observado el celo. Las novillas del G(B) fueron
tratadas con una única inyección en el día 8 del ciclo, descansaron 21 días y luego
se les aplico el régimen de doble dosis para completar los tratamientos cruzados,
corroborando lo expuesto por Cooper et al., 1974 en cuanto a que la
concentración de estros era mayor luego de la segunda inyección y apoyó la
hipótesis de que el estadio del ciclo estral en el momento de aplicación de la PGF2, influenciaba el tiempo de aparición del celo. En trabajos posteriores se
relacionó además el pico preovulatorio de LH al estadio del ciclo al momento de la
inyección (Scaramuzzi et al., 2000).
80
Gráfica 6. Porcentaje de celo después de la PGF-2.
40
35
.
30
% de animales
25
20
15
10
5
0
1
2
3
4
5
6
Días después de la PGF-2
Fuente: Seguin, 1987.
Intervalo PGF2 : Ovulación
Gráfica 7. Intervalo PGF-2: ovulación.
Porcentaje en celo
100
80
60
40
20
0
24
36
48
60
72
84
96
108
120
>120
horas post PGF
Novillas
Fuente: Wenkoff et al., 1987.
Vacas
Wenkoff et al., 1987
Trabajos más recientes en vacas de leche lograron mejorar la sincronización con
el Tratamiento A, prolongando el intervalo entre dosis hasta 14 días con lo cual se
aumenta el numero de animales en fase sensible a la acción de la PGF-2, esto
se debería a las diferencias en el patrón de desarrollo folicular inducidas por los
cambios metabólicos y hormonales asociados a la lactancia. Con 11 días de
intervalo, la segunda dosis de PGF-2 coincide con una alta proporción de vacas
en estadios tempranos del ciclo, con CL que no responde al efecto luteolítico, en
otro estudio de campo compararon 2 tratamientos con intervalos de 11 y 14 días,
81
en vacas primíparas lactando, el intervalo de 14 días incremento el porcentaje de
preñez a primo inseminación y redujo el numero de días vacía, debido a estas
observaciones se recomienda un intervalo de 11 días para novillas y de 14 para
vacas en lactancia (Thibodeaux, 1992).
Esquema 5. Opciones para sincronización de estros
inyecciones de PGF-2 con 14 días de diferencia.
utilizando 2
Opción 1. Detección del celo e IA después de cada inyección.
Detección del
celo e IA
Detección del
celo e IA
Detección del
celo e IA
Opción 1. Detección del celo e IA después la segunda inyección.
Posteriormente con el uso del ultrasonido se pudo dilucidar la dinámica folicular
del ciclo ovárico y analizar el efecto de la PGF-2 en un trabajo realizado por
(Kastelic et al., 1990) se pudo concluir que la longitud del intervalo desde la
inyección de prostaglandina hasta la ovulación dependía del estadio del folículo
dominante al momento del tratamiento. Cuando se trataron novillas en los días 5 a
8, el folículo dominante que se encontraba en la fase tardía de crecimiento o
estática temprana, se transformaba en ovulatorio, asimismo, cuando la novillas
fueron tratadas durante el día 12, era el folículo dominante de la segunda onda, en
fase temprana de crecimiento, el que se desarrollaba a ovula torio, otro grupo de
novillas fue tratado en el día 8 cuando se espera ocurra el surgimiento de la
segunda onda, 14 de 17 novillas ovularon el folículo dominante de la primera onda
82
y solo las 3 restantes de la segunda, en las novillas que ovularon el folículo de la
primera onda, el intervalo desde el tratamiento a la ovulación fue más corto que en
las que ovularon el folículo dominante de la segunda onda( 4,2 VS 6,3) (Bo et al.,
2004b).
Cuadro 5. Respuestas ováricas (media +ES) a tratamientos con PGF los
días 5, 8 ó 12 del ciclo.
Fuente: Kastelic et al., 1990.
83
Gráfica 8. Diferentes estatus foliculares al momento de una
inyección de PGF-2 y su gran variación en el tiempo de ovulación.
Fuente: Baruselli, 2001.
Esquema 6. Tratamiento B con PGF-2.
Fuente: CGR 2002.
Con este tratamiento entrarán en estro y serán inseminadas, después de la
primera dosis de PGF entre, un 60 a 65% de los animales ciclando, con respecto
84
al Protocolo A, se reduce un 35% el costo en dosis de PGF-2 y un 25% en dosis
de semen. (Bó et al., 2004b).
Esquema 7. Tratamiento C con PGF-2.
Fuente: CGR 2002.
Con este protocolo, se detecta también el estro, después de la segunda dosis de
PGF-2, la ventaja de esta variación es que no se gastarán dosis de semen en
animales que no estén ciclando. (Bó et al; 2004b).
Esquema 8. Tratamiento D con PGF-2.
Fuente: CGR 2002.
85
En este programa es mejor adoptar la detección de estros, pues la concentración
de los mismos no permite inseminar a tiempo fijo, podría realizarse con toros,
aumentando la oportunidad de servicio cuando estos son estacionados. (Bó et al;
2004b).
Esquema 9. Tratamiento de los 10 días.
Fuente: CGR, 2002.
Es un programa muy práctico y muy aceptado para ganado de carne propuesto
por Eaton. Se pueden usar calentadores, si todo el ganado esta ciclando los días
previos al servicio entraran en estro del 20% al 25% de las vacas (las que están
en lisis natural del CL) de modo que al momento de la inyección todas las
hembras no inseminadas y que están ciclando tiene un CL formado (Bó et al.,
2004a).
Permite acortar el proceso de IA reduciendo la mano de obra y los costos del
inseminador, solo se gasta una dosis de semen por animal y en las que están
ciclando es un tratamiento muy barato, pero es poco eficiente en grupos de
animales con alta incidencia de anestros. (Bó et al., 2004a).
Otra variación aplicable a estos protocolos, es administrar PGF-2 96 horas
después de exponer los animales al toro; las vacas servidas en ese período no
86
responderán a la PGF, es válido para concentrar las preñeces al comienzo de los
servicios naturales estaciónales. . (Bó et al., 2004a).
Este tratamiento se uso en 1993 en un establecimiento del norte de Córdoba que
utiliza cruzamiento rotativo con tres razas (Brahmán – Hereford – Simmental) en
novillas de 15 meses. (Bó et al., 2004a). Los resultados fueron estos:
Tabla 1. Resultados cruce rotativo de tres razas bovinas en el norte de Córdoba.
Fuente: CGR 2002.
Muchos productores lecheros utilizan programas de sincronización con PGF
induciendo estro y ovulación con sincronía variable. Esta sincronía, en vacas
lecheras en lactancia es insuficiente para lograr buenos resultados con IATF,
estas hembras tienen durante el ciclo estral características foliculares diferentes a
las de las vacas secas (De la Sota, 1993) y debido a la variabilidad del estado de
desarrollo folicular los resultados en preñez de los tratamientos de sincronización,
son inferiores a los que se obtienen en novillas (Wiltbank et al., 1996).
Relacion entre Dinámica folicular, PGF-2, estro y ovulación
Con la puesta en el mercado de las PGF-2, dejaron de usarse los progestágenos
en algunos sistemas debido a que se obtenía una baja fertilidad en los
tratamientos de 14 días ya que la progesterona no era capaz de bloquear por
completo la producción de estrógeno y además no alcanzaba a producir los
niveles suficientes de LH para ocasionar la ruptura del folículo y la ovulación, y en
cambio si ocasionaba que el folículo dominante, que depende de esta hormona
87
para crecer, continuara haciéndolo. Se pensaba que la progesterona debía imitar
lo que sucedía fisiológicamente, pero lo que sucedía realmente es que el folículo
crecía demasiado y no se producía la ovulación o resultaba en un óvulo
demasiado viejo incapaz de fecundarse, que se denomino como folículo
dominante persistente. Esto quedó comprobado por varios trabajos de
investigación, en los cuales, además, se asoció esta baja fertilidad a defectos en el
transporte de los espermatozoides y a mala calidad del oocito por envejecimiento
con bajas posibilidades de ser fertilizado o, en caso de ser fertilizado, a una baja
viabilidad embrionaria ya que al producirse altas cantidades de estrógeno por el
folículo persistente se altera el medio oviductal y uterino, y este medio hostil
produce la muerte del embrión (Bó et al., 2004b).
Teniendo en cuenta los problemas asociados a los protocolos con prostaglandina
como el intervalo entre estro y ovulación, que está determinado por la fase de
desarrollo del folículo dominante y por los tratamientos con progestágenos o
progesterona que inducían un folículo dominante persistente que a su vez ovula
un oocito de mala calidad, entonces el tratamiento ideal seria sincronizar el
desarrollo folicular de manera que todos los animales tuvieran un folículo en
crecimiento y con capacidad de ovular en el momento de la administración de
prostaglandina o de la remoción del implante de progesterona (Bó et al., 2004b).
Existen varios métodos por los cuales se puede considerar el control de la
dinámica folicular del bovino. La mayoría de los tratamientos estudiados han sido
orientados hacia la eliminación del efecto del folículo dominante (por métodos
físicos u hormonales) y de esta manera permitir el comienzo de una nueva onda
folicular en un determinado periodo de tiempo conocido. Las bases de este
procedimiento derivaron de estudios en los cuales la eliminación del folículo
dominante mediante cauterización (Adams, et al., 1993), o su supresión mediante
tratamientos con la fracción proteica del fluido folicular bovino (Kastelic et al.,
1990), fue seguida de un pico de FSH y el comienzo de una nueva onda folicular.
Un método físico recientemente utilizado es la ablación folicular mediante la
88
aspiración guiada por ultrasonografía transvaginal (Bergfelt, et al., 1994). Los
tratamientos hormonales pueden incluir la utilización de LH (Martínez et al., 1997)
o análogos de la GnRH (Thatcher, et al., 1989), que inducirán la ovulación o la
luteinización del folículo dominante, o la supresión de los folículos antrales
presentes mediante la utilización de estrógenos y progestágenos (Bo, et al.,1995).
Uso de la PGF-2 en Ganado de leche
La sincronización del estro en ganado de leche con PGF-2α es implementada para
facilitar la detección del estro y mejorar su desempeño reproductivo (Drillich et al.,
2000), las tasas de concepción al primer servicio en estudios sobre desempeño
reproductivo después de la sincronización varían entre 37 y 60%. Varias razones
han sido discutidas para las insatisfactorias tasas de concepción después de los
protocolos. Luteolisis incompleta e interferencia del protocolo de sincronización
con la dinámica folicular que puede llevar a sincronización sub-optima de la
ovulación, insuficiente duración de elevados niveles de progesterona antes del
estro usado para la inseminación puede decrecer las tasa de concepción
(Rosenberg, 1991; citado por Drillich et al., 2000), en los protocolos de
inseminación basados sobre la observación del estro , la dificultad en la detección
puede llevar a la inseminación de vacas que no están realmente en estro.
Tabla 2. Tasa de respuesta luego de la aplicación de una inyección de
Cloprostenol, según el día del ciclo en vacas lecheras en lactancia.
89
Fuente. Momont and Seguin, 1983; citados por Bó, 2004a.
Sincronización con PGF-2α en Bos indicus
Debido a las dificultades en la detección del estro en cebuínos varios grupos de
investigación iniciaron estudios con o objetivo de sincronizar o estro y la ovulación
para el empleo de biotecnologías en días predeterminados.
En bovinos das razas europeas, la administración de PGF-2α tiene inducido
elevadas tasas de manifestación de estro (70 a 90%, Tanabe & Hann, 1984; 66 a
97%, Laverdiere et al., 1995), entretanto, en cebuínos los resultados son
contradictorios. En vacas de la raza Nelore (Figueiredo et al., 1997; Castilho et al.,
1997a) y Gir (Gambini et al., 1997) fue observada baja manifestación de estro (<
50%) después de los tratamientos con PGF-2α, en presencia misma de un cuerpo
lúteo funcional (Pinheiro et al., 1998).
Tabla 3. Sincronización de Celos con PGF en Receptoras Bos indicus,
Tratadas
En Celo
Transferidas/
Preñadas/
En Celo
Transferidas
MATTO GROSSO
854
384
226
89/226
(BRASIL) 2000
(39.4%)
Preñadas/
Tratadas
89/854
(10.4%)
SANTA CRUZ
(BOLIVIA) 2001
700
479
223
111/223
(49.8%)
111/700
(15.9%)
GENERAL
1554
863/1554 (55.5%)
449/863
(52.0%)
200/449
(44.5%)
200/ 1554
(12.9%)
Fuente. Bó, 2004b.
Teóricamente, dos aplicaciones de prostaglandina, con intervalos de 11 a 14 días,
inducen el estro en una gran proporción de las hembras ciclando, en cuanto que
las hembras en anestro o ciclando irregularmente no responden al tratamiento. Por
lo tanto, tales programas no siempre proporcionan alto grado de sincronización o
alta tasa de preñez después de la aplicación de 2 dosis de PGF-2α, también a sido
observada gran variación en la detección del estro y en la ovulación, tanto en Bos
90
taurus, como en Bos indicus. Este dato indica que el tratamiento con PGF-2α
sincroniza eficientemente el momento de la lùteolisis y no el estadio de
desenvolvimiento del folículo ovulatorio. Así mismo, protocolos que buscan utilizar
a inseminación en tiempo fijo, apenas con a utilización de prostaglandina, no han
presentado buenos resultados (Barros et al., 2000).
Con la ampliación en los conocimientos sobre el control del ciclo estral, fue posible
hacer combinaciones de estrategias de manejo fisiológico como PGF-2, GnRH, y
progestágenos (Barros et al., 2000).
7.3.2. Protocolo Ovsynch (ovulacion sincronizada)
El Ovsynch (GnRH - PGF-2 -GnRH) fue desarrollado como estrategia de manejo
reproductivo para eliminar la necesidad de la detección de celo y permitir la
inseminación en tiempo fijo, es constituido por una inyección de GnRH en fases
aleatorias del ciclo estral para inducir la ovulación del folículo dominante presente
en el momento del tratamiento desde que este en la fase de crecimiento o en el
inicio de la fase estática. También, provocará atresia del folículo que no estuviera
más viable, surgiendo una nueva onda de crecimiento folicular 2 a 3 días después
del tratamiento con GnRH (Pursley et al., 1995).
Siete días más tarde, es administrada PGF-2 para regredir el CL ya existente o
recientemente formado, seguida de una segunda inyección de GnRH 48 horas
más tarde para inducir una nueva ovulación sincronizada 28–32h. La inseminación
artificial en tiempo fijo es realizada 12 a 16h post segunda inyección de GnRH. las
tasas de preñez son normales después de la IATF. Este protocolo fue
implementado con buenos resultados en muchas haciendas de ganado lechero
comercial en todo el mundo, como una estrategia para la IATF en el primer
servicio posparto, así como para reinseminación en vacas no preñadas. El
Ovsynch
posibilita
la
IATF
sin
la
necesidad
de
detección
de
celo,
aproximadamente 10 a 15% de las vacas presentan señales de estro durante el
91
protocolo, debiendo ser inmediatamente inseminadas, si el objetivo es alcanzar la
tasa máxima de preñez (Thatcher, 2004a).
Esquema 10. Esquema general del Ovsynch.
horas
horas
Esquema 11. Protocolos de sincronización con Ovsynch y Cosynch.
Animales inseminados 8-16 horas después
de la segunda inyección de GnRH.
Horas
Día
Horas
Animales inseminados al mismo tiempo
con la segunda inyección de GnRH.
92
Gráfica 9. Dinámica folicular – Ovsynch.
Fuente: Baruselli, 2002.
El momento de las inyecciones es crucial para que el protocolo de buenos
resultados. Si el intervalo entre la inyección de GnRH y de PGF-2 es inferior a 7
días, se disminuye la capacidad de regresión real de un CL recién desarrollado. Si
la segunda inyección de GnRH es atrasada para más de 48h serán entonces
identificadas más vacas en estro antes de la inyección de GnRH, las vacas no
ovulan de forma sincronizada y el tiempo de la inseminación estará errado. Es
fundamental que no se modifique el protocolo. Una pregunta común es si las
vacas pueden ser inseminadas en el momento de la inyección de GnRH o 24
horas más tarde para tornar el proceso de inseminación más práctico. Las tasas
de preñez son más bajas con la inseminación 24 horas post GnRH, siendo que el
momento ideal para la inseminación parece ser entre 12 y 18 horas después de
esa inyección (Thatcher, 2004a).
La respuesta al protocolo Ovsynch es optimizada cuando las vacas ovulan
después de la primera inyección de GnRH y cuando existe un CL que responde en
el momento de la administración de la PGF-2. Vasconcelos et al. (1999),
observaron que el protocolo Ovsynch iniciado entre los días 5 y 9 del ciclo
posibilitaría una mayor tasa de ovulación en respuesta a la GnRH. Los folículos
que presentan períodos de dominancia de más de 5 días (Austin et al., 1999) o las
93
vacas que iniciaron el protocolo Ovsynch en las fases iniciales del ciclo estral son
menos fértiles (Vasconcelos et al., 1999).
El esquema 12 muestra un escenario que combina el uso de Ovsynch y el
diagnóstico temprano de gestación usando ultrasonido. Los grupos de vacas que
pasan el período de espera voluntario recibirían su primera inseminación posparto
después de la sincronización de la ovulación con Ovsynch. Esto reduciría
dramáticamente los días medianos a la primera IA al eliminar la detección de estro
para el primer servicio post parto. El día 25 post IA, se identificarían las vacas no
preñadas con ultrasonido, quienes recibirían la primera GnRH para la
resincronización con Ovsynch. Esto resultaría en intervalo promedio entre
servicios de 35 días para las vacas que requieren resincronización (Fricke, 2007).
Esquema 12. Protocolo de manejo reproductivo que combina IA a tiempo fijo (Ovsynch) con
diagnóstico temprano de gestación usando ultrasonido.
Nótese que las inyecciones hormonales están programadas para los lunes (L) y miércoles (M), los
exámenes de ultrasonido los lunes (L), e IA a tiempo fijo (ITF) los jueves (J). El intervalo entre
servicios sería de 35 días para las vacas que requieren resincronización.
Fuente: Fricke, 2007.
Sincronización con Ovsynch en Bos Indicus
Con el objetivo de disminuir la variación del tiempo de la ovulación después del
tratamiento con prostaglandina, algunos investigadores estudiaron el empleo de
análogos do GnRH (gonadotropin releasing hormone), seguido de la aplicación de
prostaglandina después de 7 días. El tratamiento con GnRH causa la ovulación del
folículo dominante, surgiendo una nueva onda de crecimiento folicular 2 a 3 días
94
después del tratamiento con GnRH (Pursley et al., 1995; Twagiramungu et al.,
1995; Bodensteiner et al., 1996, citados por Wiltbank et al., 1997). Algunos
trabajos demostraron que los folículos con 0,9 a 1,0 cm. de diámetro en
crecimiento ovulan aun en presencia de un cuerpo lúteo funcional, con altos
niveles de progesterona (Wiltbank et al., 1997).
En un experimento, Pursley et al. (1995) detectaron ovulación en 18 de 20 vacas
(90%) y en 13 de 24 novillas (54%) tratadas con GnRH, independientemente de la
fase del ciclo estral. Los autores no recomiendan el empleo del método “Ovsynch”
para novillas debido a la baja respuesta ovulatoria de la GnRH y debido al hecho
de que la ausencia de ovulación no sincroniza el desenvolvimiento de una nueva
onda de crecimiento folicular. Por causa de la alta tasa de ovulación a la GnRH,
pocos animales presentaron celo entre la primera aplicación de GnRH y la
aplicación de prostaglandina después de 7 días, debido a la formación de un
cuerpo lúteo que produce progesterona. 60 a 70% de los animales tratados son
detectados en celo 4 días después de la aplicación de prostaglandina
(Twagiramungu et al., 1995).
Vasconcelos (1998), encontró una tasa de ovulación después de la primera
aplicación de GnRH de 64% en 156 vacas Holandesas tratadas en diferentes
períodos del ciclo estral. El autor observo variación de la tasa de ovulación
conforme a la época del ciclo estral, encontrando menores tasas en animales que
se encontraban entre los días 1 y 4 (23%) y mayores tasas en animales que
estaban entre los días 5 e 9 (96%). entretanto, a tasa de ovulación después de la
segunda dosis de GnRH (87%) no fue influenciada por la fase del ciclo estral, mas
vario (P < 0,01) de acuerdo con la respuesta a la primera aplicación de GnRH
(92% si hubo ovulación y 79% si no hubo ovulación). Fueron observadas
ovulaciones entre la aplicación de prostaglandina y la segunda dosis de GnRH
(6%) siendo que 7% de los animales no ovularon después de 48 horas de la
aplicación de la segunda dosis de GnRH. Los resultados del método “Ovsynch”
95
como la tasa de concepción a la inseminación artificial presentan variaciones entre
26 y 55% (Pursley et al., 1995; Vasconcelos, 1998).
Con el objetivo de comparar la eficiencia del tratamiento hormonal utilizando
GnRH o hCG en la última aplicación del método “Ovsynch”, Schmitt et al. (1994),
verificaron la tasa de preñez superior en novillas tratadas con hCG (52,9% vs.
45,5%), a pesar de no diferir estadísticamente. Los autores verificaron que cuando
fue utilizado hCG hubo reducción significativa de ciclos estrales de corta duración
(< 16 días) después de la inseminación (6% vs. 15.5%). Esta reducción é
justificada por el hecho de que el CL originado de una ovulación inducida por la
GnRH tiene capacidad reducida de secretar progesterona. Confirmando estés
resultados, estudio reciente realizado por nuestro grupo en novillas Bos indicus x
Bos taurus demostró que la hCG promueve ovulación y formación de un CL
accesorio con diámetro superior, que produjo mayores concentraciones de
progesterona que en animales tratados con GnRH (Marques et al., 2001).
En los trabajos realizados por Barros (1998), los animales fueron tratados, en
estadíos aleatorios del ciclo estral, con un análogo de GnRH (8 μg de acetato de
buserelina, IM, día 0) y siete días más tarde, con PGF-2α (25mg de dinoprost,
Lutalyse, vía IM, día 7). Veinte y cuatro horas después de la administración de
PGF-2α, todos los animales y recibieron nueva inyección de GnRH (8 μg, vía IM,
día 8). Cerca de 20 a 24 horas después de la segunda dosis de GnRH todas las
vacas fueron inseminadas artificialmente, sin observación de celo (día 09). Este
protocolo fue testado tanto en vacas lactantes (60 a 90 dias pós-parto, n = 44)
como en no lactantes (n = 49). Las tasas de preñez (número de vacas preñadas
en relación al número de tratadas) después de una única IA en tiempo fijo fueron
de 47,7% e 44,9%, para vacas lactantes e no lactantes, respectivamente (Barros
et al., 2000).
Con el objetivo de sustituir el último tratamiento con GnRH por Benzoato de
Estradiol, Barros et al. (2000) realizaron estudios en vacas cebúinas. El protocolo
hormonal fue semejante al anterior, pero en lugar de la segunda dosis de GnRH,
96
las vacas recibieron una dosis única de Benzoato de Estradiol (BE, Estrogin,
1,0mg, vía IM, día 8), y cerca de 30 a 34 horas después todos los animales fueron
inseminados artificialmente, sin observación de celo (día 9). Este protocolo fue
testado en 53 vacas Nelore lactantes (60 a 90 días posparto) que estaban ciclando
(confirmado por la presencia de cuerpo lúteo a la palpación rectal) y resulto en una
tasa de preñez de 43,3%. Es importante destacar que las vacas Nelore utilizadas
en los 2 protocolos arriba descritos se encontraban ciclando (cuerpo lúteo
detectado por palpación rectal o ultrasonográfia). Cuando los protocolos GnRHPGF-2α–GnRH e GnRH–PGF-2α–BE fueron testados en vacas en anestro las
tasas de preñez fueron más bajas: 14,9% en 67 vacas tratadas con el protocolo 1
y 19,1% en 68 vacas tratadas con el protocolo 2. Por lo tanto, estos tratamientos
no son efectivos en animales en anestro y deben ser utilizados solamente en
vacas que están ciclando.
Los resultados de arriba mostraron que los protocolos de tratamientos hormonales
GnRH–PGF-2α–GnRH y GnRH–PGF-2α–BE fueron eficaces en sincronizar la
ovulación de vacas Nelore ciclando y originaron tasas de preñez al rededor del
45%, después de una única inseminación artificial en tiempo fijo.
La substitución de la segunda dosis de GnRH por benzoato de estradiol, asociada
a IA 30 a 34 horas después del BE, resulto en tasa de preñez similar a aquella
obtenida con la GnRH, con la ventaja de que el costo do BE es mucho menor que
el de la GnRH.
La utilización de los protocolos GnRH–PGF-2α–GnRH e GnRH–PGF-2α–BE en
vacas en anestro, resulto en tasas de preñez bien inferiores (15 a 19%) a las
observadas en animales que estaban ciclando antes del tratamiento (alrededor de
45%) (Baruselli et al., 2002).
Se evaluó la respuesta ovulatoria en novillas cebúinas cruzadas tratadas con dosis
única de prostaglandina y con el protocolo “Ovsynch”. El intervalo entre la
aplicación de la PGF-2α y la ovulación fue de 74,3 ± 12 h (n=26) para el grupo
“Ovsynch” y de 72,6 + 21,8 h (n=20) el grupo prostaglandina (P>0,05). La
97
distribución de las ovulaciones después de la aplicación de la PGF-2α se
encuentra en la gráfica 10. Se observo mayor variabilidad en el grupo
prostaglandina. Los animales tratados con el protocolo “Ovsynch” presentaron
mayor tasa de ovulación. Después de la administración de PGF-2α (74,3%; 26/35)
que los animales tratados con una dosis única de PGF-2α (58,8%; 20/34). A pesar
de la mayor tasa de ovulación, fueron detectadas en estro apenas 22,9% (8/35) en
el grupo “Ovsynch”, comparado con 64,7% (22/34) de las novillas de el grupo
prostaglandina (P<0,01) (Baruselli et al., 2000).
Gráfica 10. Distribución de ovulaciones (horas) después de la
aplicación de la PGF-2 en Novillas cruzadas cebú tratadas con el protocolo
Övsynch¨ y con una dosis única de prostaglandina.
Fuente. Baruselli et al., 2000.
Las investigaciones han demostrado que el protocolo “Ovsynch” viene
presentando baja eficiencia en vacas cebúinas lactantes criadas a campo (Barros,
2000; Baruselli et al., 2001). Los trabajos indican la utilización de este protocolo
solamente en rebaños con altas tasas de ciclicidad, no siempre encontradas en las
propiedades productoras de carne y leche en los trópicos, que poseen rebaño
predominantemente cebú.
98
Pre-Synch – Ovsynch: (PGF-2–PGF-2 - GnRH – PGF-2 – GnRH)
Moreira et al. (2000), elaboraron un programa de pre-synch (presincronización)
para optimizar la respuesta al protocolo Ovsynch, aplicando dos inyecciones de
PGF-2 con 14 días de intervalo, siendo la 2da aplicación 12 días antes de la 1ª
inyección de GnRH del programa de IATF.
Esquema 13. Programa de presincronización para la implementación del Ovsynch.
TRATAMIENTO DE PRESINCRONIZACIÓN
Días de estro
Fuente. Thatcher et al., 2005.
Esquema 14. Programa Presynch-Ovsynch.
El programa Presynch-Ovsynch aumento las tasas de preñez en 18 puntos
porcentuales (25 para 43%), en vacas cíclicas en lactación. Son posibles otras
99
estrategias de presincronización para optimizar el protocolo de Ovsynch, deben
ser bien elaboradas para minimizar el numero de vacas que están en el inicio del
metaestro o en el final del diestro, cuando el fuera iniciado, y para tener un posible
folículo que ira a ovular con la primera inyección de GnRH. Futuros sistemas para
vacas lecheras en lactación pueden incluir la inserción de dispositivos
intravaginales con progesterona e inyecciones con altas dosis de estrógenos. Los
buenos resultados del protocolo Ovsynch dependen de si las vacas lecheras en
lactación están ciclando o no. Las tasas de preñez fueron menores en vacas que
no estaban ciclando en el momento en que el protocolo Ovsynch fue iniciado (22%
vs. 42%). De modo general, el programa consiguió inducir ciclicidad en el 75% de
las vacas en anestro, con base en el numero de vacas en ese estado clasificadas
como ovulando con la primera y/o segunda inyección de GnRH. Si las vacas en
anestro ovularan con la primera y la segunda inyección de GnRH del protocolo de
Ovsynch, entonces las tasas de preñez fueron aparentemente normales (39%). No
sorprende el hecho de que el numero de anestro fue mayor en las novillas
primíparas o de primera cría (35,6%) de lo que en vacas multíparas (16,9%) la
ocurrencia de anestro disminuyo, cuando mejoran los escores de condición
corporal registrados en el inicio el protocolo de Ovsynch. La inserción de
dispositivos a base de progesterona como parte del protocolo de Ovsynch (entre
inyección de GnRH y de PGF-2) también puede beneficiar los animales. El
manejo post parto de las vacas lecheras en lactación es de extrema importancia,
afectando bastante el desempeño reproductivo. Los esfuerzos hechos para
maximizar la salud, el confort y el estatus nutricional de las vacas después del
parto (aumentar consumo de materia seca) van a reflejar más tarde en la lactación
en términos de una mayor incidencia de vacas ciclando y mejora del desempeño
reproductivo (Thatcher et al., 2003).
Como el anestro tiene un impacto bastante significativo en las tasas de preñez, el
desempeño reproductivo fue evaluado apenas en las vacas cíclicas. Fue
observado un aumento en las tasas de preñez, cuando las vacas fueron
presincronizadas (52,3%) en comparación a las no presincronizadas (31,1%). El
100
motivo de esas mayores tasas de preñez con el uso del protocolo Ovsynch en
vacas presincronizadas fue asociado al numero de vacas que iniciaron el protocolo
de sincronización en fases favorables del ciclo estral, fue levantada la hipótesis de
que las tasas de preñez con el Ovsynch aumentarían si las vacas recibiesen la
primeras inyección de GnRH entre el día 5 y 10 del ciclo estral, y que la
presincronización sincronizaría cerca del 90% de las vacas ciclando, de forma que
ellas estarían entre el día 5 y 10 del ciclo, cuando fuese iniciado el protocolo. Las
vacas con alta concentración plasmática de progesterona (mayor 1ng/ml) después
de la primera inyección de GnRH en el momento de la administración de la
prostaglandina (o sea vacas altas-altas) probablemente iniciarían el protocolo
Ovsynch en un estadio ideal del ciclo estral. Los resultados del número de vacas
cíclicas clasificadas como ALTAS-ALTAS indicarían que aproximadamente 87,4%
de las presincronizadas fueron consideradas de este tipo en comparación al
71,7% de las no presincronizadas. Por lo tanto, conseguimos programar las vacas
para estar en la fase ideal del ciclo para iniciar el programa Ovsynch, lo que
resulto en una mayor tasa de preñez sincronizada. Una única inyección de PGF2 12 días antes del inicio del protocolo Ovsynch aumento la tasa de preñez
sincronizada en las vacas multíparas. Eso se debe a un aumento del numero de
vacas en el inicio del diestro en el comienzo del protocolo Ovsynch (Cartmill et al.,
2001).
Además del posible beneficio de la optimización del ciclo estral a través de la
presincronización, las inyecciones anteriores repetidas de PGF-2 pueden tener
un efecto terapéutico benéfico en el ambiente uterino, al estimular fases
recurrentes de proestro/estro, permitiendo el lavado natural del útero y mejorando
ese ambiente.
Navanukraw et al. (2002), concluirían un experimento en el que demostraron que
las tasas de preñez con el uso del Ovsynch también podrían ser mejoradas,
modificando el programa Presynch/Ovsynch, de forma que el intervalo de la 2a
inyección de PGF-2 en el Presynch hasta la 1a de GnRH en el Ovsynch fuese de
101
14 días. La tasa de preñez con el uso del programa Modificado Presynch/Ovsynch
fue mayor de lo que en el Ovsynch (49,6% mayor 37,3%) esa pequeña
modificación torna la secuencia de las inyecciones más práctica para los criadores
con la implementación de aplicaciones semanales.
Los tratamientos con progestágenos también podrían ser utilizados para
presincronizar el celo, permitiendo posteriormente la implementación de un
programa de sincronización que se beneficiaria de las fases de un nuevo folículo
dominante y del cuerpo lúteo. Esa es, en verdad, la estrategia del protocolo 7–11
Synch en ganado de carne, destinado a: 1) acortar el periodo de administración de
(MGA) sin comprometer la fertilidad y 2) mejorar la sincronía del estro a través de
la sincronización del desenvolvimiento y de la ovulación de los folículos de la
primera onda (ver esquema 14) (Kojima et al., 2000). La administración de MGA
bloquearía el retorno al estro en las novillas que habrían presentado celo
espontáneo en el final del ciclo estral. En ese ejemplo, la administración de MGA
por 7 días permitió que las novillas que estaban en el inicio del ciclo estral
alcanzasen por lo menos el día 7 de desenvolvimiento del CL, estadio en el que la
PGF-2 es capaz de regredir el CL. Por lo tanto, la administración de MGA en la
dosis diaria de 0,5 mg por novilla por 7 días y de la inyección de PGF-2 vía
intramuscular en el día 7 consigue controlar el estro durante el tiempo de vida del
CL con apenas 7 días de administración de MGA. Con todo, la tasa de concepción
seria menor, si las novillas hubiesen sido inseminadas en ese estro. Tanto para
prevenir la en ese estro como para conseguir controlar las ondas foliculares, las
novillas recibieron una inyección de hormona liberadora de gonadotropinas
(GnRH) por la vía Im en el día 4 después del ultimo día de administración de MGA
y una inyección de PGF-2 7 días después de la aplicación de GnRH, en el fondo,
el
protocolo
con
administración
de
MGA
y
PGF-2
presincroniza
el
desenvolvimiento folicular, de forma que la inyección posterior de GnRH induce la
ovulación, el desenvolvimiento del CL y el surgimiento de los folículos, de manera
102
que la administración de PGF-2 7 días más tarde induce la regresión del CL
simultáneamente el desenvolvimiento del folículo dominante sincronizado.
Otra alternativa es el uso del CIDR (controlled internal drug release)
Hipotéticamente seria posible iniciar el protocolo Ovsynch 2 días después de la
retirada del CIDR colocado por un periodo de 7 días y de administrar la PGF-2 en
el momento de la remoción. Ese programa garantiza una elevada tasa de
renovación folicular con la primera inyección de GnRH. Otra alternativa seria
colocar el CIDR simultáneamente a las aplicaciones de GnRH y PGF-2 para
garantizar la exposición a la progesterona, y evitar la ocurrencia prematura del
estro y estimular el estro en los animales en anestro (Thatcher et al., 2004a).
Esquema 15. Programa de tratamiento y resultados asociados al protocolo 7-11 Synch.
Desarrollo Folicular
PGF-2
GnRH
PGF-2
MGA (7 dias)
…..
1
7
11 días
11
Días de Tratamiento
Fuente: Kojima et al., 2000.
…..
18
103
Esquema 16. Protocolo MGA.
Detección del celo e IA 24 a
60 horas después de PGF.
GnRH y tiempo de no
respuesta a la IA 72
horas después de PGF
7.3.3. Protocolo Heatsynch (celo sincronizado)
El protocolo Ovsynch es más eficaz cuando es iniciado entre el día 5 y 12 Del ciclo
estral. Por lo tanto los programas que involucran presincronización, tales como el
Presynch-Ovsynch y/o Presynch-Heatsynch, pueden resultar en mayor tasa de
preñez en el primer servicio. Después del primer servicio, el aumento en la tasa de
preñez depende de la mejoría en la sobrevivencia de los embriones y de la
reinseminación rápida de las vacas que no preñaron o no consiguieron mantener
la gestación. Entre los diversos métodos utilizados para identificar vacas no
gestantes se incluyen la detección del celo, la verificación de las concentraciones
de progesterona, los test bioquímico/inmunológicos, la ultrasonografía y el examen
de palpación rectal (Bartolomé et al., 2002a)
Una estrategia de control del momento de la ovulación es la aplicación de estradiol
exógeno, que es capas de inducir un pico de LH a través del estimulo de la
secreción de GnRH por el hipotálamo, cuando es administrado en un ambiente
con bajos niveles de progesterona en el final del diestro y proestro. El pico de LH
inducido por el estradiol dura cerca de 10 horas, lo que se asemeja al pico
espontáneo y es más extenso que el inducido por la GnRH. El cipionato de
estradiol (ECP) una forma esterificada de estradiol-17b comercializada para uso en
104
bovinos, ha sido usada como componente de los programas de inseminación
artificial en tiempo fijo (IATF) en vacas lecheras en lactación. El ECP es utilizado
para sustituir la segunda inyección de GnRH del protocolo Ovsynch, siendo
titulado Heatsynch (celo sincronizado). Las vacas son presincronizadas con 2
inyecciones de PGF-2 administradas con un intervalo de 14 días, siendo el
Heatsynch iniciado 14 días después de la segunda inyección. Las vacas entonces
reciben una inyección de GnRH seguida por PGF-2 7 días más tarde. El ECP
(1mg im) es administrado 24 horas después de la inyección de PGF-2 y las
vacas son inseminadas 48 horas más tarde. Las tasas de preñez con el uso del
protocolo Heatsynch y Ovsynch no presentan diferencias (Bartolomé et al., 2002a)
Esquema 17. Esquema general del protocolo Heal–synch.
días
días
días
día
días
En vacas lecheras en lactación, los porcentajes de detección de celo y ovulación
después de la aplicación del ECP fueron de 75,7% y 86,5%, respectivamente. El
estro ocurrió en 29,0 +-1,8h (n=28) después de la administración del ECP. Los
intervalos medios hasta la ovulación fueron de 55,4 +-2,7h después de la
aplicación del ECP y de 27,5 +-1,1h después del inicio del estro. Como el 75% de
las ovulaciones ocurrieron entre las 48 y 72 horas después de la administración
del ECP, se recomienda que toda vaca en la que el estro sea detectado hasta 1,5
días después de la inyección del ECP sea inseminada en el momento de la
detección y todas las restantes a las 48 horas. Con base en las tasas de
sincronización de la ovulación y de preñez, El ECP puede ser utilizado en el lugar
de la GnRH como una opción para inducir la ovulación en la IATF. Como las vacas
lecheras en lactación presentan menores concentraciones plasmáticas de
105
estradiol en el periodo preovulatorio y el estro es menos intenso, la elevación el
nivel de estradiol después de la inyección de ECP compensa una deficiencia
inducida por la lactación, y nuestra experiencia muestra que las vacas que
expresan celo son más fértiles. La secreción de LH es directamente regulada por
la GnRH, cuando el estradiol induce la secreción de LH de forma indirecta a través
de la retroalimentación positiva de la secreción de GnRH en el hipotálamo, que
estimula la secreción de LH. Si las vacas son anovulatorias (anestro ó no
desarrollan retroalimentación positiva al estradiol), el protocolo Heatsynch puede
no ser tan eficiente como el Ovsynch a base de GnRH. El mayor tono uterino, la
facilidad en la inseminación y la ocurrencia del estro con el uso del protocolo
heatsynch son hechos bien recibidos por los inseminadotes (Thatcher et al.,
2004b).
Las tasas de concepción y de preñez fueron evaluadas en 750 vacas lecheras en
lactación sometidas a dos programas de manejo reproductivo en tres rebaños
comerciales de ganado lechero en la región central del estado de California (Cerri
et al., 2003). Los tratamientos fueron: IATF después de un protocolo de Heatsynch
o IA con detección de celo. En ambos grupos, las vacas fueron presincronizadas
con 2 inyecciones de 25mg de PGF-2 administradas con un intervalo de 14 días.
14 días después de la segunda inyección de PGF-2 las vacas recibieron 100mg
de GnRH seguida de una inyección de 25mg de PGF-2 7 días más tarde. Las
vacas en el grupo de detección del estro fueron inseminadas artificialmente
cuando fueron observadas en estro en los siguientes 7 días, en cuanto a las del
grupo Heatsynch/IATF recibieron una inyección de 1 mg de ECP 24h después de
la PGF-2 y fueron inseminadas 48 h más tarde. Toda vaca observada en estro
antes de la IATF en el grupo de Heatsynch fue inseminada después de la
detección. La preñez fue diagnosticada por ultrasonografia en el día 31 después
de la IA y reconfirmada a través de palpación rectal a los 45 y 65 días pos IA. Las
tasas de preñez en el día 45 después de la IA fueron mayores en las vacas del
106
protocolo Heatsynch de lo que las sometidas a IA después de la detección del
estro (Thatcher et al., 2004b).
En un estudio de 340 vacas en lactancia (Bartolomé et al., 2002a), normales en
términos de reproducción, en el período de septiembre de 2000 a mayo de 2001,
fueron utilizadas dos protocolos diferentes de resincronización con base en la fase
del ciclo estral, determinada por examen rectal. Las vacas con cuerpo lúteo
(diestro n=216) fueron tratadas con PGF-2 e inseminadas después de la
detección del estro en un intervalo de 2 a 7 días. En las vacas cuyos estros no
fueron observados hasta el día 14 (día 7 y 12 del ciclo estral si hubiesen
respondido a la prostaglandina) fueron sometidas al protocolo Ovsynch. Las vacas
con un folículo ovárico palpable y tono uterino o con un cuerpo lúteo hemorrágico
(proestro y metaestro) fueron tratadas con GnRH y 8 días más tarde (día 7 y 12
del ciclo estral) sometidas al protocolo Ovsynch (n=119) (Bartolomé et al., 2002a).
Esquema 18. Protocolos de resincronización de vacas lecheras en lactación diagnosticadas como
vacías en un examen de palpación rectal en el día 45 post inseminación.
PGF-2/Ovsynch
PGF-2
D0
GnRH
PGF-2
GnRH
IATF
D14
D21
D23
D24
CL
GnRH/Ovsynch
GnRH
GnRH
PGF-2
GnRH
TAI
16 h
D0
Folículos/tono
Cuerpo Hemorrágico/
edema
Fuente. Bartolomé, 2002a.
D8
D15
D17
D18
107
En el caso de las vacas en diestro, 39,3% (85/216) fueron detectadas en estro
después de la administración de PGF-2 y 60,7% (131/216) fueron inseminadas
artificialmente en tiempo fijo. La tasa de preñez en el día 45 fue semejante en las
vacas en diestro sometidas al protocolo PGF-2 + Ovsynch con inseminación
artificial en tiempo fijo (32,8% [39/11]).Entre las vacas en diestro, no fue observada
diferencia estadística en la tasa de concepción entre las inseminadas con
detección de estro (37/85; 43,5%) o sometida a IATF (35,9%). Esa diferencia
numérica (7,6%) tal vez fuese significativa, si hubiese un mayor número de vacas
en cada categoría (Bartolomé et al., 2002a).
En un estudio realizado de agosto a diciembre de 2001 con 332 vacas lecheras en
lactancia se evaluó la Tasa de Preñez con el uso de protocolos Ovsynch (n=166) y
Heatsynch (n=166) en vacas diagnosticadas como no preñadas en el examen de
ultrasonido en el día 27 después de la IA.
Esquema 19. Protocolos para resincronización de vacas lecheras en lactación diagnosticadas
como vacías en un examen de ultrasonografía en el día 27 post inseminación.
Heatsynch
Dia 0
Ovsynch
GnRH
Dia 7
PGF-2
Dia 8
ECP (1 mg, 0,5cc)
Dia 9
Día 10
IA en el Estro
IATF
Dia 0
GnRH
Dia 7
PGF-2
Dia 9
GnRH
+16h
IATF
Fuente. Thatcher et al., 2004a.
En el día 0, las vacas fueron clasificadas de acuerdo con las diferentes fases del
ciclo estral, determinadas por palpación rectal y ultrasonido. La cantidad de vacas
108
en los diversos estados fue la siguiente: diestro (46,4% [154/332]), Metaestro
(14,8% [49/332]), proestro (22% [73/332]), ovarios quísticos (14,1% [47/332]) y
anestro (2,7% [9/332]). No fue observada diferencia en la tasa de preñez en los
servicios de resincronización en el día 27 y en el día 50 con el uso del protocolo
Heatsynch y Ovsynch.
Tabla 4. Tasa de preñez en el día 27 y 50 y perdidas de preñez con el uso del protocolo Ovsynch y
Heatsynch en la resincronización de vacas diagnosticadas como vacías en el examen de
ultrasonido en el día 27 pos I.A.
Protocolo
TP en el Día 27
TP en el Día 45
Perdida de Preñez
Nº
%
Nº
%
Nº
%
Ovsynch
33/127
26, 0
30/166
18,1
8/33
24,2
Hetasynch
34/132
25,8
33/166
19,9
6/34
17,6
Fuente. Thatcher et al., 2004a.
Las tasas de preñez de acuerdo con la fase de el ciclo estral son mostradas en la
tabla 5 en las vacas en metaestro, la TP en el día 27 y 50 fue mayor con el
Heatsynch (52,2% y 44,4%) de que en el Ovsynch (15,4% y 9,1%). Cuando las
vacas están en metaestro, ya fue iniciada una onda de desarrollo folicular y una
inyección de GnRH no comienza una nueva onda. Consecuentemente esas vacas
ovulan más cerca de la inyección de prostaglandina de forma que es probable que
las sometidas al Heatsynch expresen celo y sean inseminadas después de la
detección. De hecho un alto porcentaje de vacas en metaestro fue inseminado en
el día 9 en el grupo Heatsynch (11/27) en comparación con el Ovsynch (0/22). Las
vacas en el grupo Ovsynch no fueron detectadas en estro, siendo inseminadas en
el día 10, el que probablemente fue más tarde (Bartolomé et al., 2002b).
109
Tabla 5. Tasa de preñez en el día 27 y 50 en vacas sometidas a resincronización en diferentes
fases del ciclo estral.
TP en el Día 27
TP en el Día 50
Fase
Ovsynch
Heatsynch
Ovsynch
Heatsynch
Nº
%
Nº
%
Nº
%
Nº
%
Diestro
20/64
31,2
14/58
24,1
17/82
20,7
12/72
16,7
Metaestro
2/13
15,4b
12/23
52,2a
2/22
9,1b
12/27
44,4a
Proestro
5/26
19,6
7/29
24,1
5/35
14,3
6/38
15,8
Quistica
6/19
31,2b
1/19
5,3c
6/22
27,3d
2/25
8,0c
Fuente. Bartolomé, 2002b.
a,b,c,d, Porcentajes con distinta letra difieren estadisticamente
De enero a diciembre de 2002 fue realizado un estudio con un rebaño de 3.000
vacas lecheras, siendo 877 diagnosticadas como vacías con base en un examen
de ultrasonido en el día 30 pos-IA (Día 0). El diagnostico de preñez fue alterado
del día 27 al 30 para tener un mayor número de vacas con CL y acelerar el
proceso de diagnostico con hechos de desarrollo más adelantados. En el D0 las
vacas fueron clasificadas de acuerdo con la fase del ciclo estral y fue colectada
una muestra de sangre para posterior análisis de la concentración de P4 en
plasma. Con base en el estadio del ciclo estral en los ovarios, las vacas fueron
distribuidas así: vacas en diestro, Ovsynch (n=216), Quicksynch (n=92, enero a
mayo) o Modified Quicksynch (n=110, junio a diciembre) (esquema 19). Las vacas
en metaestro fueron distribuidas en Ovsynch (n=54), Heatsynch (n=50), o GnRH +
Ovsynch (n=50). Las vacas en proestro fueron distribuidas en Ovsynch (n=75) o
GnRH + Ovsynch (n=73). Las vacas con ovarios quistitos fueron distribuidas en
Ovsynch (n=75) o GnRH + Ovsynch (n=78).
110
Esquema 20. Protocolos utilizadas en la resincronización de vacas de acuerdo con la fase del ciclo
estral después del diagnostico de preñez en el día 30 pos-IA.
PGF2a
ECP
*
IATF
D1
D2
D3
Quicksynch
D0
PGF2a
ECP
Ped/IA
D0
D1
D2
Nota: Detección de estro
24h post admin. de ECP
Ped/IA
Ped/IA
Modified
Quicksynch
D3
D4
Ovsynch
Nota: Ped = Actividad registrada en el podómetro: Día 4 sin actividad inicio del Ovsynch
GnRH
GnRH
PGF2a
GnRH
IATF
D17
D18
GnRH/Ovsynch
D0
D8
D15
Fuente. Thatcher et al., 2004b.
El diagnostico de preñez para la inseminación de las vacas resincronizadas fue
hecho en el día 30 a través del examen de ultrasonido. La distribución de las
vacas clasificadas de acuerdo con la fase del ciclo estral fue la siguiente: diestro
47,7%, metaestro 16,9%, proestro 16,4%, quistes ováricos 17,4%, y anestro 1,6%,
en cuanto a la progesterona, en las vacas en diestro el 95% de estas presentaban
niveles superiores a 1ng/ml, estos resultados coinciden con un estudio anterior en
el cual el 46% de las vacas preñadas estaban en diestro. También se observo que
el 61% de las vacas no preñadas tenían P4 mayor a 1ng/ml (Thatcher et al.,
2004b).
No fue observada diferencia en las tasas de preñez en las vacas en diestro
sometidas a Ovsynch (34,7%), ó Modified Quicksynch (28,2%) ó en metaestro
sometidas a GnRH + Ovsynch (31,8%), ó GnRH + Ovsynch (27,4%), la tasa de
preñez disminuyo en vacas en diestro sometidas a Quicksynch (21,7%), en
111
metaestro sometidas a Ovsynch (24,1%) o al Heatsynch (18%) y con quistes
ováricos que recibieron Ovsynch (20%) (Thatcher et al., 2004b).
7.3.4. Protocolos con la Utilización de GnRH + CIDR
El CIDR es un dispositivo intravaginal con progesterona, utilizado con asociación
con otras hormonas para sincronizar el estro en vacas y novillas de carne y leche.
Este producto fue desarrollado en Nueva Zelanda y viene siendo usado hace ya
varios años para adelantar el primer estro en la pubertad en novillas y el primer
estro posparto en vacas. La tasa de retención del CIDR en un intervalo de siete
días es superior al 97%. En algunos casos, ocurre irritación vaginal, que resulta en
la observación de un moco claro, turbio o amarillo, cuando se retira el dispositivo.
Los casos de moco son normales, no afectando la eficacia del producto. Se debe
tener cuidado en el manoseo de esos dispositivo siendo necesario el uso de
guantes de látex para evitar la exposición de la progesterona de la superficie del
CIDR y a la introducción de agentes contaminantes en la vagina de las hembras
tratadas (El-Zarkouny et al., 2001).
La respuesta de los ovarios a la GnRH depende de la fase de crecimiento folicular
en el que fue administrado. Un alto porcentaje de vacas en los últimos estadios del
ciclo estral (día 15 a 17) no consiguieron ovular después de la administración del
GnRH (Moreira et al., 2000).
De los protocolos de la sincronización del estro o de la ovulación actualmente
utilizado en vacas de carne con becerro al pie, el CO-Synch tiende ha ser el más
rentable y menos intensivo en mano de obra de lo que otros protocolos de
sincronización con IATF. Una desventaja del CO-Synch es que aproximadamente
10 a 20% de las vacas de carne con becerro al pie presentan celos antes e
inmediatamente después de la inyección de PGF-2, a menos que esas vacas
sean detectadas en estro e inseminadas, ellas no irían a preñar después del uso
del protocolo CO-Synch (Lamb et al., 2004).
112
En un estudio que comparo los tratamientos CO-Synch y CO-Synch más CIDR del
día – 7 al día 0 mostró que la inclusión del dispositivo mejoro las tasas de preñez
después de la IATF pero la progesterona aparentemente no mejoro las tasas de
preñez en las vacas de carne con becerro al pie que estaban ciclando en el inicio
de los tratamientos, también mostró que las variables del lugar entre las que se
incluían diferencias en el pasto y en la dieta, en la composición de la rasa, en la
condición corporal, en el intervalo posparto y en la localización geográfica, pueden
afectar el resultado de los protocolos con IATF (Lamb et al., 2004).
En otro estudio realizado en diferentes localidades, el estro de 2.630 vacas de
carne con becerro al pie fue sincronizado, haciéndose inseminación artificial
después de 5 tratamientos (ver figura). El porcentaje de vacas que estaba ciclando
en el principio de los tratamiento fue de 66,8% (1.534 de 2.296 vacas). El
porcentaje de vacas cíclicas vario de 38 a 90% entre los diversos locales las tasas
totales de preñez en el día 30 al día 35 variaron de 39 a 67% las mayores tasas de
preñez fueron alcanzadas con el protocolo Hibrid Synch + CIDR (57,9%) los
resultados obtenidos con el CO-Synch + CIDR (53,6%) y con el Hibrid Synch no
tuvieron diferencias significativas, pero fueron más altas que el tratamiento control
(52,3%) y que el CO-Synch, talvez las bajas tasas de preñez asociadas al COSynch sean consecuencia del atraso en la IATF realizado a las 60 horas en
comparación a los resultados anteriores que presentaban tasa de preñez de 47 a
52% cuando fue hecha a la 42 horas (Larson et al., 2004).
113
Esquema 21. Protocolos de los experimentos en vacas de carne con becerro al pie tratadas con
GnRH, PGF-2 y CIDR.
PGF-2
Control
CIDR
IATF y GnRH
Detección de estro e I.A
GnRH
PGF-2
GnRH
PGF-2
IATF y GnRH
CO-Synch
CIDR
CO-Synch+CIDR
GnRH
PGF-2
Hybrid Synch
IATF y GnRH
Detección de estro e I.A
GnRH
PGF-2
Hybrid Synch+CIDR
-17
IATF y GnRH
CIDR
IATF y GnRH
Deteccion de celos e I .A
-7
0
Días en relación a
60
84
Horas en relación a
Inyección de PGF-2
la inyección de PGF-2
Fuente. Thatcher et al., 2004b.
7.4.
MANIPULACIÓN
DEL
DESARROLLO
FOLICULAR
PARA
LA
SINCRONIZACIÓN DE ESTROS
Una de las mayores limitantes para la aplicación masiva de la sincronización de
estros es la variabilidad en la respuesta de los animales tratados. Si bien antes se
creía que se debía a factores exógenos, trabajos recientes han demostrado que es
debido principalmente al estadio o viabilidad de los folículos en el momento de
realizar el tratamiento (Bó et al., 1995).
114
La aplicación de la ultrasonografía permitió descubrir qué sucedía con el desarrollo
folicular, comprobando la existencia de hasta 2 o 3 ondas foliculares por ciclo, sus
diferentes estadios; como reclutamiento, selección dominancia y regresión u
ovulación (son fases en las cuales los folículos crecen y uno se hace dominante, o
sea más grande, y dependiendo de la etapa del ciclo en la que suceda pude
regredir u ovular) esto permitió desarrollar nuevos protocolos de sincronización y
de superovulación, así como de tratamiento de patologías como los quistes
foliculares (Bó et al., 1995).
7.4.1. Relacion: Dinámica Folicular, progestágenos y fertilidad
De la misma manera que lo enunciado anteriormente la ultrasonografía permitió
descubrir qué sucedía con el desarrollo folicular cuando los animales eran tratados
con dispositivos o implantes conteniendo progesterona o progestágenos sintéticos.
El nombre genérico de progestágenos se le da a un grupo de compuestos que son
similares a la progesterona. Estos compuestos están en el mercado desde hace
varios años, inclusive desde antes que se comenzara la utilización masiva de
PGF-2 para sincronización de celos. Dentro de estos compuestos podemos citar
los progestágenos de administración oral como el Acetato de Melengestrol (MGA),
los implantes subcutáneos de Norgestomet como el Crestar y los dispositivos
intravaginales con progesterona como el CIDR-B, el DIV-B y el PRID (Bó et al.,
1995).
115
Fotografía 2. Implantes y dispositivos utilizados para la aplicación de progestágenos y
progesterona.
Fuente. Nasser, 2006.
Las altas concentraciones de progesterona tienen un efecto supresivo sobre la
secreción pulsátil de LH, mientras que la FSH no es afectada. A su vez, la
secreción pulsátil de LH tiene un efecto crítico en el desarrollo del folículo
dominante. Pulsos de alta frecuencia estimularán el crecimiento del folículo
dominante, mientras que pulsos de baja frecuencia afectarán su desarrollo e
inducirán su regresión prematura. Dentro de esta temática se comenzó a estudiar
el efecto de los progestágenos sobre los pulsos de LH y el folículo dominante.
Este efecto de los progestágenos fue comprobado para casi todo los disponibles
en el mercado (MGA, Crestar, CIDR, PRID, etc.) en la tabla siguiente se
encuentran los resultados de un experimento donde se utilizó el Crestar. El
objetivo fue investigar cuantos implantes subcutáneos de Norgestomet eran
necesarios para inducir una frecuencia de pulsos de LH similares a los de la fase
luteal. En este experimento se administraron 2 dosis de PGF, una en el Día 7 y
otra en el día 8 para lisar el CL y se colocaron 1, 2, 4 y 8 implantes de Crestar en
el día 7 (Bó et al.,1997).
116
Tabla 6. Frecuencia de los pulsos de LH y tamaño del folículo dominante
en vacas implantadas con Norgestomet por 9 días y en ausencia de un CL
funcional. Datos obtenidos en el día 9 de la colocación del implante de de
Norgestomet.
Fuente. Adaptado de Sanchez et al., 1995.
a,b Datos con distintas letras en la misma columna difieren estadisticamente
7.5. PROTOCOLOS CON PROGESTERONA Y ESTROGENOS
7.5.1. Estrógenos
Estradiol 17-B
La utilización de progesterona y estrógenos puede afectar el desarrollo folicular,
suprimiendo el desarrollo del folículo dominante y de esta manera sincronizar el
desarrollo de una nueva onda folicular fue investigado críticamente por el grupo de
trabajo de Bó et al, en1993.
Las conclusiones de una serie de trabajos realizados por este grupo fueron que:
los progestágenos y el E-17B administrados en cualquier momento del ciclo estral,
induce el crecimiento sincrónico de una onda folicular, aproximadamente 4,3 días
después de la inyección de 5mg E-17B; indicaron además que el estradiol suprime
el desarrollo de los folículos a través de la supresión de las gonadotrofinas
circulantes (FSH y LH) y no por un efecto local a nivel del ovario (Bó et al., 1994).
117
Tabla 7. Intervalo entre el tratamiento y el crecimiento de una nueva
onda folicular en novillas tratadas con un implante de progestágeno y
una inyección de 5mg de estradiol- 17b (E-17b) un día después.
Fuente. Bó et al., 1994.
Benzoato de Estradiol (BE)
Luego de los trabajos realizados con el E–17b, se diseñaron una serie de
experimentos para evaluar la eficacia de otro estrógeno que se encuentra
disponible en el mercado, el benzoato de estradiol, los resultados de estos
trabajos demostraron que el BE es tan efectivo como el E-17B para sincronizar el
desarrollo folicular (Bó et al., 1995).
Trabajos posteriores compararon el efecto de las dosis de EB y E–17b y su
influencia en el día de comienzo de la nueva onda folicular. Los resultados de este
experimento demostraron que la dosis de 5 mg (E17b y EB) indujo el desarrollo de
una onda folicular en forma más consistente (Bó, 1995).
Diversos experimentos son realizados a fin de evaluar la efectividad de EB en
cuanto a: presentación comercial (solución oleosa inyectable o capsulas
intravaginales), día de administración (el mismo día de la inserción del
progestágeno o el día siguiente), dosis inferiores a 5mg en combinación con 50mg
de progesterona vía intramuscular, diferente tipo de animal (novilla-vaca, lechecarne), a fin de ajustar protocolos y dosis (Bó, 1995).
Se utilizaron 32 vacas hereford, que recibieron un CIDR en momentos no
conocidos del ciclo estral (D0) y fueron distribuidos al azar en 4 grupos (n=8 por
grupo): un grupo control (no BE) y 3 grupos que recibieron las siguientes dosis de
BE: 1mg, 2,5mg, y 5mg combinados con 50mg de progesterona (P4)
118
administrados vía im. Los animales fueron examinados diariamente por
ultrasonografía ovárica para determinar el crecimiento de la próxima onda folicular
(Caccia et al., 1998).
Tabla 8. Efecto de distintas dosis de EB combinadas con 50mg de
progesterona administradas en el momento de la inserción del CIDR en el
comienzo de la próxima onda folicular en vacas Hereford.
Fuente. CGR, 2002.
Se demostró que una dosis de 2,0 a 2,5mg de Benzoato de Estradiol unida a
50mg de progesterona administrados en el momento de la colocación del
dispositivo vaginal es más eficiente en la inducción y sincronía de una onda de
desarrollo folicular (Caccia et al., 1998).
Se diseño un experimento para evaluar las tasas de preñez en hembras bovinas
sincronizadas para IATF con diferentes protocolos. El trabajo se realizo en un
establecimiento ganadero del norte de santa fe (Argentina), en el que se utilizaron
un total de 150 vacas cruza cebú, con cría al pie, con un periodo post parto
promedio de 75 días, y una condición corporal (CC) de 2,5 a 3 (escala de 1 a 5).
En el día 0, las vacas del grupo 1 (G1) recibieron una esponja impregnada con
250mg de acetato de medroxiprogesterona (chronogest®, Intervet) y 2mg de
benzoato de estradiol (Estradiol® 10, Lab. Río de Janeiro) por vía intramuscular
(im). Las vacas del grupo 2 (2) recibieron el mismo tratamiento, pero con una
inyección de 10mg de acetato de medroxiprogesterona en combinación con 3mg
de EB (indugest® 1, intervet). el grupo 3 (G3), fue tratado con un dispositivo de
silicona impregnado con 1gr de progesterona natural de liberación lenta controlada
119
(DIB®, Syntex) y 2mg de EB (Estradiol 10, Lab, Río de Janeiro) (im). En el dia 8 se
retiraron los dispositivos y se aplico 1 dosis de 500ug de cloprostenol (Ciclase®,
Syntex) (im) y a las 24 h (Día 9) se aplico 1mg de EB (im). Treinta y dos horas
más tarde se IATF la totalidad de las vacas con semen congelado de un único
eyaculado. Los diagnósticos de preñez fueron realizados por ultrasonografía
transrectal (100 Falco Vet., Pie Medical, con transductor 8 MHz), 30 días después
de la inseminación artificial (Venturini et al., 2007a).
Tabla 9. Preñeces logradas por
IATF con tres protocolos diferentes
de sincronización de celos.
Grupo Porcentajes Totales
1
2
56,0
48,0
28/50
24/50
3
52,0
26/50
Fuente: Venturini et al., 2007a.
En un estudio que buscaba evaluar el efecto de la administración de 0,5mg de EB
al momento de colocar un dispositivo en novillas que fueron previamente
sincronizadas con un dispositivo e IATF, sobre los porcentajes de preñez a la
IATF, retorno y final, y de retorno. Se utilizaron 112 novillas Angus negras (58) y
rojas (54) con 15 meses de edad y una condición corporal de 3,5 a 4 (escala 1 a
5). El día 0 es coloco un DIB más 2mg de BE, im, en el día 8 se retiro el DIB y se
inyecto 0,5mg de cipionato de estradiol y 150ug de D(+) Cloprostenol, im y el día
10 se realizo la IATF (50-53h post DIB). Se utilizo semen congelado/descongelado
en pajuelas de 0,5ml, provenientes de 2 toros (A y B) de probada fertilidad. 13 días
post IATF (Día 23) las novillas se distribuyeron aleatoriamente dentro de raza y
toro para recibir un DIB de segundo uso 0,5mg de BE (BE05) o solo con el DIB
(control). El día 30 se retiro el DIB y al otro día comenzó la detección de celos e
inseminación por 4 días, utilizando semen congelado/descongelado proveniente
de 2 toros que habían demostrado en trabajos previos similar comportamiento
reproductivo. El diagnostico de gestación se realizo por ecografía (transductor
120
transrectal 4-7MHz, sosnovet 2000) a los 61 días post IATF para determinar
preñez de la IATF y del retorno (Madero et al., 2007).
Tabla 10. Porcentajes de preñez y retorno de vaquillonas de 15 meses que fueron IATF y
Resincronizadas con dispositivos intravaginales con progesterona recibiendo o no 0,5mg de BE al
momento de colocar los dispositivos.
Tratamientos
Preñez IATF
Retorno
Preñez Retorno
Preñez final
BE05
69,6 (39/56)
29,4 (5/17)
40,0 (2/5)
73,2 (41,56)
Control
60,4 (32/53)
52,4 (11/21)
36,4 (4/11)
67,9 (36/53)
BE05 +
Control
65,1 (71/109)
41,0 (16/39)
37,5 (6/16)
70,6 (77/109)
Fuente. Madero et al., 2007.
Se concluye que la administración de 0,5mg de BE no perjudica el porcentaje de
preñez ala IATF; no obstante, no mejora el porcentaje de retorno, ni la preñez final
por lo que no seria necesaria su aplicación (Madero et al., 2007).
La administración de Benzoato de Estradiol (BE) al retirar los dispositivos
intravaginales con progesterona, evita un encierre posterior de los animales
comparado con el protocolo tradicional que utiliza el BE alas 24 horas post
dispositivo. En este caso, algunos investigadores han propuesto que la IATF debe
realizarse a las 36 horas post dispositivo. El objetivo de un trabajo realizado por
Venturini et al. (2007c), fue evaluar un protocolo de sincronización de celos
aplicando BE al retiro de los dispositivos e IATF 36 horas post retiro de los
dispositivos, comparándolo con el protocolo tradicional. Se trabajo durante 2 años,
utilizando 750 vientres cruzas Brangus y Bradford ¼ a 3/8 (vacas con cría + vacas
secas: 357; novillas de 24 meses 348), las vacas con cría tenían un post parto de
80 a 100 días y una condición corporal de todos los vientres de 4 a 4,5 (escala de
1 a 5), el D0 se coloco un TRIU-B más 2mg de benzoato de estradiol im. En el D8
se retiro el TRIU-B, y se administro 150ug de D. Cloprostenol y los animales se
distribuyeron en forma aleatoria dentro de cada categoría a recibir 1mg de BE en
dicho momento (grupo BE0) ó 24h más tarde (grupo BE24). El servicio se realizo
por IATF a las 36 horas (BE0) o 56 (BE24) de retirados los TRIU-B. a las vacas
121
con cría se les practicó un destete temporario entre el retiro del dispositivo y la
IATF. En el servicio se uso semen congelado/descongelado en pajuelas de 0,5ml
proveniente de un toro probado. El diagnostico de palpación se realizó por
palpación transrectal a los 70 días post IATF (Venturini et al., 2007c).
Tabla 12. Porcentaje de preñez en vacas y novillas que recibieron un
tratamiento de control del ciclo estral basado en progesterona en dos años de
trabajo, según tratamiento.
Años
Categoría
Tratamientos
Vacas
I
Novillas
Vacas
II
Novillas
Preñez %
BE0
50,0 (25/50)
BE24
52,6 (30/57)
BE0
36,4 (24/66)
BE24
37,5 (12/32)
BE0
40,8 (51/125)
BE24
54,4 (68/125)
BE0
44,0 (55/125)
BE24
60,8 (76/125)
51,4 (55/107)a
36,7 (36/98)b
47,6 (119/250)
52,4 (131/250)
a,b Porcentajes con distintas letras son estadísticamente diferentes
EFECTOS PRINCIPALES
Años
I + II
Categoría
Tratamientos
Vacas + Novillas
Preñez %
BE0
42,3 (155/366)a
BE24
54,9 (186/339)b
Fuente. Venturini et al., 2007c.
a,b Porcentajes con distintas letras son estadísticamente diferentes
Se concluye que la administración de BE al momento del retiro del dispositivo con
la realización de una IATF a las 36h de retirado el mismo perjudican el porcentaje
de preñez comparado con el tratamiento tradicional (BE a la hora 24 de retirado el
dispositivo e IATF a la hora 56 (Venturini et al., 2007c).
122
Valerato de Estradiol (EV)
El EV es un estrógeno de vida media larga que se encuentra disponible en el
mercado asociado con implantes que contienen el progestágeno sintético
Norgestomet. Este preparado comercial es el Crestar y consiste en un implante
de liberación lenta de Norgestomet que se coloca subcutánea en la oreja del
animal, el tratamiento incluye además una solución inyectable oleosa que contiene
3mg de Norgestomet y 5mg de Valerato de Estradiol (Bó, 1995).
En estudios preliminares se observo que el EV tenia un efecto inhibitorio sobre el
desarrollo folicular (Bó, 1994), este experimento seria repetido más adelante por
Martínez et al. (1997), observándose un intervalo onda tratamiento más largo con
el EV que con el E–17b y, a su vez, el comienzo de la onda fue más variable, lo
que trajo como consecuencia una ovulación variable (Bó et al., 1995).
Valerato
de22.
Estradiol
Desarrollo
Folicular
Esquema
Valerato de yEstradiol
y Desarrollo
Folicular.
~ 5,5.días
(3 – 8)
12
FSH
10
8
6
LH
Diámetro Folicular (mm)
N + EV
4
9
0
Días
Fuente. Bó et al., 1991.
Bo et al., 1991
7.5.2. Progesterona
La utilización de progestágenos en la sincronización de estros en bovinos data de
los años 50, inicialmente siendo administrados por 11 a 14 días a semejanza de
los sistemas desarrollados para ovinos. Posteriormente en concordancia con los
bajos índices de fertilidad después de la sincronización, el período se disminuyó a
123
7–9 días, presentándose un incremento en los índices de gestación (Gordon,
1996). Los progestágenos son utilizados en la sincronización de estros para
aumentar la vida útil del cuerpo lúteo, permitiendo que las vacas presenten
regresión del cuerpo lúteo y consiguiente estro en un mismo periodo (Díaz
Gonçalves, 2002).
Acetato de Melengestrol (MGA)
Es el progestágeno que más se ha utilizado en Norteamérica para la
sincronización de estros, entre sus ventajas se incluyen: bajo costo, vía de
administración oral y muy baja toxicidad, la desventaja podría darse en animales
en pastura para asegurar un uniforme consumo de MGA.
Uno de los tratamientos con este progestágeno, consiste en administrar 0,5 mg
MGA/cabeza/día durante 14 días, seguido de una inyección de PGF-2, 17 días
después de suspenderse la administración de MGA, Se detecta celo y se
insemina, se ha reportado que este régimen resulta en una buena sincronización
de estros con buena fertilidad en novillas (Thatcher et al., 2004a).
Esquema 23. Tratamiento con MGA/ PGF-2.
MGA/PGF-2
PGF
MGA (0.5mg/d)
-31
-17
Dia
0 ver celo e I.A
Fuente: Funston et al., 2002.
La mayoría de las vacas estarán en estro pocos días después de suspendida la
ración de MGA. El porcentaje de preñez será optimo, si se detecta estro se IA 12h
post estro. La IATF en 72h después de la PGF-2, ha resultado en buena fertilidad
en algunos rodeos y mala en otros, por lo tanto una alternativa es IA a todos los
124
animales 72h post PGF-2 y después de detectar estro e IA hasta los 120 h o
directamente colocar todos a las 96 h de la administración de la PGF-2. Este
tratamiento parece ser más efectivo en animales con condición corporal moderada
a buena, comparado con los de condición corporal regular a mala. El destete
temporario de 48 h incrementa el porcentaje de vacas de 2 a 3 años que quedaron
preñadas en la primera parte de la época de servicio comparada con vacas de la
misma edad y el mismo tratamiento pero sin destete temporario o que no
recibieron ningún tratamiento (Funston et al., 2002).
Otro régimen utilizado, es administrar MGA durante 7 a 9 días y aplicar una
inyección de PGF-2 el último día. Este protocolo resulta en una fertilidad un poco
más baja que si se aplica la PGF-2 17 días después del MGA. En este régimen,
las vacas que comienzan a consumir MGA cuando se encuentran en el estadio
final del ciclo estral, tiene la regresión luteal normal pero no ovulan debido a los
altos niveles de MGA en la sangre. En estos casos el folículo dominante continúa
creciendo y se transforma en un folículo persistente mientras se mantengan los
niveles de MGA, produce altos niveles séricos de estrógeno y ovulara un ovocito
no viable (Thatcher et al., 2004a).
En Canadá, se ha desarrollado recientemente una novedosa forma de mejorar la
fertilidad con este régimen; se administran 0,5 mg/cabeza/día de MGA durante 7
días y, además, se inyectan 5 mg de E–1743 y 100 mg de P444 el primer día en
que se aplica MGA. El último día de administración de MGA se aplica una dosis
luteolítica de PGF-2. Este régimen resulta en un estro fértil y bien sincronizado.
La mayor parte del servicio ocurre en un periodo de 3 días, que reduce
notablemente el tiempo y el trabajo para la detección de estros comparados con
otros tratamientos (Martínez, 2005).
43
44
Estradiol–17β. Tipo de estrógeno.
Progesterona.
125
Norgestomet (N)
Es un progestágeno sintético utilizado en dos productos comerciales Syncro-MateB (SMB) y Crestar (Cr). El SMB, se encuentra actualmente descontinuado. Los
implantes auriculares de progestágenos contiene Norgestomet (17α-acetoxi-11βmetil- 19-norpreg-4-en-3,30-diona), que presenta potencia cerca de 200 veces
superior a la progesterona natural. Así, el implante hidronico de Syncro-Mate-B
poseia 6mg de norgestomet, en cuanto que el implante silástico de Crestar posee
3mg de norgestomet. El implante de silicona provoca la liberación del
progestágeno de forma homogénea y linear (Bó, 1995).
El implante es colocado subcutáneamente en la oreja. el producto viene
acompañado de una inyección que contiene 5mg de Valerato de Estradiol (EV) y
3mg de Norgestomet (N) que se administran en el mismo momento en que se
coloca él implante. El implante es extraído 9 días después, La finalidad de estos
implantes es mantener altos los niveles sanguíneos de progestágenos para
suprimir la liberación endógena de hormona luteinizante, simulando la fase
luteínica del ciclo estral. La regresión luteínica es alcanzada por la aplicación de
valerato de estradiol en el inicio del tratamiento o por la aplicación de
prostaglandinas en el momento de la remoción del implante (Baruselli et al., 2002).
126
Fotografía 3. Secuencia de la administración y retiro de un implante de
Crestar (Norgestomet).
Fuente. Walker, 2007.
Esquema 24. Regimen Crestar.
Iny 2ml
3mg Norgestomet
5mg Valerato de estradiol
CRESTAR Impl. Auricular
0
DIA
9
10 Detección de celo e IA am-pm
Fuente. Mellisho, 2006.

Día 0: implante de norgestomet en la oreja, inyección de 2 cc intramuscular, de
(norgestomet 3mg y valerato de estradiol 5mg.)

Día 9: se quita el implante.

Días 10–14: detección del celo e inseminación siguiendo la regla a.m. – p.m.
127
El uso de estos progestágenos en reproducción ha sido estudiado por más de 30
años (aún cuando todavía no se contaba con PGF en el mercado), investigadores
de esa época, como Wiltbank, encontraron que la inyección de 5mg de EV podía
inducir la regresión del CL; la idea es que el EV induzca la luteolisis y permita
mantener altos los niveles inmediatos del progestágeno que luego serán
mantenidos con la liberación lenta del implante subcutáneo. Los trabajos que
utilizaron implantes de norgestomet en bovinos demostraron que más del 90% de
los animales manifestaban estro después de la retirada del implante, con tasas de
concepción variando entre 33 e 68% (Odde, 1990). Los Animales que están en
anestro en el inicio del tratamiento también manifiestan estro después de la
retirada del implante, pero presentan menor fertilidad que animales cíclicos Los
trabajos recomiendan inseminar artificialmente los animales después de 48-54
horas del retiro del implante, con tasas de concepción aceptables (Odde, 1990).
Se compararon las tasas de preñez en novillas cebúinas y mestizas Bos indicus x
Bos taurus con empleo del implante de Crestar, asociado a una inyección de
valerato o benzoato de estradiol en el día de la implantación, las novillas fueron
divididas en dos lotes, llevándose en consideración el escore de condición
corporal (ECC). Cada grupo recibió uno de los tratamientos: Tratamiento 1: las
novillas recibieron un implante auricular de Crestar y una aplicación de Crestar
inyectable de (3mg de norgestomet + 5mg de valerato de estradiol). Los implantes
permanecieron hasta el D9 (D0=día del implante) cuando fueron retirados. En el
Día 8 se aplico una inyección IM de 150 μg de D-cloprostenol (Preloban). Las
inseminaciones artificiales en tempo fijo fueron realizadas 54 h después de la
retirada de los implantes. Tratamiento 2: las novillas recibieron un implante
auricular de Crestar y una inyección de 2mg de benzoato de estradiol + 50mg de
progesterona en momento el momento de colocar los implantes (=D0). Los
implantes fueron retirados en el D8 y en esta ocasión recibieron una inyección IM
de 150 μg de D-cloprostenol (Márquez et al., 2001).
128
Las inseminaciones artificiales en tiempo fijo fueron realizadas cerca de 54 h
después de la retirada de los implantes. Los diagnósticos de gestación fueron
realizados 35 días después de las inseminaciones artificiales por ultrasonografía.
La tasa de preñez fue significativamente superior cuando se empleo el benzoato
de estradiol en vez de valerato de estradiol en el inicio del tratamiento de
sincronización del estro y de la ovulación para inseminación artificial en tiempo fijo
en novillas Bos indicus (Márquez et al., 2001).
Tabla 12. Tasas de preñez (%) ajustadas (LSM) en novillas (Bos indicus x
Bos taurus) sincronizadas con Crestar + valerato de estradiol o Crestar +
benzoato de estradiol.
ab Porcentajes con distintas letras so estadisticamente diferentes.
Fuente. Madureira et al., 2001.
Las diferencias en los índices de preñez pueden deberse al nivel de ciclicidad de
los animales utilizados; otros reportes utilizando animales en posparto y novillas,
reportaron índices de preñez similares. Autores como Wiltbank y Gonzáles Padilla,
utilizando animales en anestro, reportaron altos índices de preñez. Estas
observaciones llevaron a la importante conclusión de que la condición corporal de
los animales tratados afecta significativamente la fertilidad (Márquez et al., 2001).
129
Igualmente se han reportado diferencias en la fertilidad con relación al estadio del
ciclo al inicio del tratamiento: 47% con tratamientos iniciados antes del día 14 vs.
37% después del día 14 del ciclo, estos resultados están relacionados al efecto
negativo de la exposición prolongada a los progestágenos y la formación de
folículos persistentes (Odde, 1990).
Tabla 13. Porcentaje de preñez de vacas en lactancia utilizando diferentes
protocolos de sincronización con Crestar.
Fuente. CGR, 2002.
Combinación de Norgestomet Y PGF -2
Se ha cuestionado la acción luteolítica del estradiol cuando es aplicado en fases
tempranas del ciclo estral. En un estudio se encontró que el 50% de las vacas
tratadas en fases tempranas del ciclo no mostraron estro y tenían altos niveles de
progesterona cuando se quito él implante (Pratt y Spitzer, 1994); estos resultados
fueron igualmente observados por Bó et al. (1994), utilizando SMB45 en programas
de Superovulación, por lo tanto algunos autores recomiendan aplicar PGF-2, 2
días antes del retiro de los implantes para aumentar los índices de preñez.En
general se estima que un 10% de los animales tratados puede presentar CL al
momento del retiro del implante y por lo tanto no tendrá estro y ovulación y esto es
más significativo en vacas grandes o lecheras en las que se ha reportado hasta un
10% más de preñez con el uso de PGF-2, que en novillas, en general en estas
últimas la mayoría entran en estro y ovularán por lo que no se justificaría el uso de
la PGF-2 (Bó et al., 2004b).
45
Sincromate–B, marca comercial de progestágeno.
130
Combinación de Norgestomet + EV con GnRH
Este protocolo fue desarrollado durante un ensayo, y consiste en la aplicación de
GnRH al final del tratamiento con Norgestomet para inducir ovulación
(Vasconcellos, 1994). Para este ensayo se utilizaron novillas Holstein que
recibieron un implante subcutáneo de Crestar y la inyección de EV el día 0, los
implantes fueron removidos el día 9 y la mitad de las novillas recibió 100 g46 de
gonadorelina 30 horas después del retiro. Se encontró que la ovulación fue más
sincrónica (56–64 h) y la preñez fue numéricamente mayor en las novillas tratadas
con GnRH que en las no tratadas (ovulación 60–72 h).
Esquema 25. Tratamiento de sincronización utilizando
los implantes de norgestomet (crestar) con GnRH a las
30 h de removido el Implante y IATF, 54 h después de la
remoción del implante.
Crestar
Fuente. Vasconcellos et al., 1999.
Combinación de Norgestomet + EV con Benzoato de Estradiol (EB)
Otra alternativa para inducir la ovulación es utilizar de 0,5 a 1 mg de EB a las 24 h
de la remoción del implante de Norgestomet, e inseminar a las 50–52 h post retiro
del implante, lo cual sincroniza la ovulación entre las 60–72 h postaplicación,
comparado con la gran dispersión de estros en los animales que no recibieron EB.
Con respecto a este tratamiento se encuentra diversidad en los resultados en su
46
Microgramos.
131
aplicación, pero en la mayoría de los casos los números son favorables a su
utilización (Bó et al., 2004b).
Esquema 26. Tratamiento de sincronización de celos e IATF
con Crestar y BE.
Crestar
Fuente. Bó, 2004.
Gráfica 11. Distribución de la ovulación en novillas holstein tratadas con Crestar por
9 días y 1mg de BE im 24h después.
Fuente. Bó, 2004.
132
Tabla 14. Porcentaje de preñez en vacas y novillas tratadas con SMB
más la administración de BE a las 24 horas de remoción del SMB.
Fuente. Bó, 2004.
ab porcentajes con letras distintas son estadísticamente diferentes
Combinación de Norgestomet + EV con eCG
La utilización de la eCG para estimular el desarrollo folicular fue estudiada en
novillas prepúberes y vacas con cría o vacas lecheras en lactancia. Las dosis a
ser utilizadas varían de 300 a 700 UI aunque con 700 UI se corre el riesgo de
aumentar los porcentajes de mellizos (Bó et al., 2004b).
Se han realizado diversos experimentos entre los que se destacan los que
midieron el tiempo posparto y la condición corporal de los animales vs. los
porcentajes de ciclicidad, ovulación y preñez y se concluye, que la condición
corporal esta influenciada por el tiempo posparto, que debe ser mayor a 70 días,
en los cuales los animales deben tener un score de condición corporal mayor o
igual a 2,5 para obtener resultados satisfactorios. En los animales con menor
score se observa que el tratamiento ayuda a las vacas a ciclar y tener mayor
oportunidad de quedar preñadas durante los siguientes servicios (Bó et al.,
2004b).
133
Uso del Norgestomet + eCG en Novillas Cruce Indicus
La combinación de Norgestomet y eCG ha sido bastante usada en Australia para
la sincronización de estros e IATF en novillas cruce Brahmán, principalmente en
Queensland por McGowan et al. (1991, 1992). En estos trabajos fueron utilizadas
novillas de cruce Indicus, que fueron sometidas a tres diferentes tratamientos T1)
PGF-2, con 12 días de diferencia e inseminación a las 72 horas; T2) CIDR-B 10
días + 400UI de eCG + PGF-2, en el momento del retiro del CIDR-B e IA a las
50 h; y, T3) SMB por 10 días + 400UI de eCG + PGF-2,
en el momento del
retiro e IA a las 50 h; acompañados de un detector de monta que evaluó las veces
que el animal había sido montado, mediante el uso de scores de 0 a 6 según la
intensidad de monta, si el entore era alto se esperaría que la fertilidad fuera mejor.
Una interesante observación de este trabajo es que las novillas que fueron
tratadas con CIDR-B ó Crestar y cuyo número de montas fue dudoso (score 5 o 6)
también resultaron preñadas mientras que muy pocas de las tratadas únicamente
con PGF-2, quedaron preñadas (Baruselli et al., 2002).
Otros trabajos con dispositivos vaginales a base de progesterona
Se estudió el efecto del tratamiento con el CIDR-B y el momento de la aplicación
de la PGF-2,
en los porcentajes de estro y de preñez en novillas Holstein. Los
animales fueron tratados con CIDR-B por 10 días y subdivididos para recibir media
o una dosis luteolítica de PGF-2, en el momento del retiro del implante o 2 días
antes, no encontrándose diferencia entre media dosis y dosis completa de PGF2,
los resultados de expresión de estro y preñez fueron similares, sin embargo
la administración de PGF-2,
en el día 8 fue más sincrónica en la expresión de
estros. Estos resultados evidenciaron la necesidad de desarrollar protocolos que
sincronicen el desarrollo folicular, de manera que todos los animales tengan un
folículo en crecimiento y con capacidad de ovular en el momento de la remoción
del dispositivo y la administración de PGF-2. Por esta época se comenzó a
134
discutir la posibilidad de que el estradiol podía sincronizar el desarrollo folicular
resultando en el comienzo de una nueva onda aproximadamente 4 días después
(Bó et al., 1994).
Se desarrollaron varios experimentos con cápsulas de estradiol encontrando
buena sincronía de estros, pero variabilidad en los porcentajes de preñez entre
grupos.
En un estudio de Venturini et al. (2007b), donde se buscaba evaluar el porcentaje
de preñez de la utilización de dispositivos intravaginales utilizados dos veces en
vacas primíparas a las que se les destetaron temporalmente los terneros, se
utilizaron 150 vacas primíparas con terneros de más de 80 días de vida y
condición corporal (CC) 2,5 (escala 1 a 5), distribuidas al azar en dos grupos con
diferentes tratamientos. Grupo 1 (n=75): Día (D)1: destete temporario con tablilla
nasal. D11: liberación de los terneros a la lactancia. Grupo 2 (n= 75): (D)1:
aplicación de un dispositivo DIB (Syntex Argentina) usado y destete temporario
con tablilla nasal. D8: retiro del dispositivo y encierre de los terneros por 72h. D11:
liberación de los terneros a la lactancia. La totalidad de las vacas se liberaron a
servicio natural con el 4% de toros, a partir del D8, durante 90 días. Los
diagnósticos de preñez fueron realizados a los 60 días de finalizado el servicio por
ultrasonografia transrectal (Falco vet. Pie medical con transductor de 8 MHz).
Tabla 15. Preñeces logradas por servicio natural de 90 días.
Grupo
Porcentajes
Totales
1:DT
62,7
47/75
2:DT + DIB
46,7
35/75
Fuente: Venturini et al., 2007b.
Los resultados obtenidos en el Grupo 2, justifican ampliamente su implementación.
Se observo que un alto porcentaje de las preñeces del Grupo 2 corresponden al
primer ciclo post tratamiento; a diferencia del Grupo 1, en el que los tiempos de
gestación fueron más heterogéneos (Venturini et al., 2007b).
135
7.6. Presincronización con Progesterona en novillas prepúberes
El aporte de progesterona por cerca de 8 días, en bajas dosis, es capas de
acelerar la entrada en reproducción, de las novillas que están próximas a la
pubertad (prepúberes). En un experimento realizado por Sá Filho y Baruselli
(FMVZ-USP) en 2006, la colocación de dispositivos de Progesterona, preutilizados
por 24 días, en novillas Nelore prepúberes, (CL ausente e folículos > 8mm),
durante 8 días, con aplicación de 1 ml de Benzoato de Estradiol (24 horas
después), aumento significativamente la ciclicidad de esas novillas en el inicio de
la estación de monta (de 63% para 83,3% de ciclicidad). Tal manejo resulto e una
mejora significativa de la preñez a la IATF en esas novillas, comparándolas con
las que no fueron presincronizadas.La utilización de dispositivos impregnados de
progesterona, para este fin, puede ser un manejo interesante de ser introducido en
rebaños
de
novillas,
en
las
que
se
desea
anticipar
la
pubertad
y,
consecuentemente, aumentar la preñez (Tecnopec, 2005).
El manejo es simple y de bajo costo, pues se utilizan dispositivos que serian
descartados (dispositivos ya usados por 3 veces).
Cuadro 6. Esquema de presincronización para novillas cebuínas prepúberes:
Día 0
Insertar dispositivo
Día 8
Retirar dispositivo
Día 9
Aplicar 1 ml de Benzoato de estradiol
Día 20 en adelante
Iniciar Protocolo de IATF
Fuente. Tecnopec, 2005.
Es importante recordar que, la desinfección, de los dispositivos usados en la
presincronización, debe ser muy bien hecha. Se recomienda la solución de
Amonio cuaternario 1:250, por cerca de 10 a 15 minutos (Tecnopec, 2005).
136
7.7. Interferencia de los niveles de progesterona y los dispositivos
intravaginales
Una de las características fisiológicas particulares de novillas cebúinas, que
interfiere en los resultados de programas de IATF, es relacionado al metabolismo
de la progesterona de esos animales. A través de experimentos, realizados por la
FMVZ-USP en 2003 e 2004, quedo demostrado que, las altas tasas de
progesterona e novillas cebúinas, disminuyen a tasa de crecimiento folicular y la
ovulación en programas de IATF. Por eso, los experimentos concluirían que se
deben evitar dispositivos con alta concentración de progesterona, en la IATF de
novillas cebúinas (Tecnopec, 2005).
Gráfica 12. Dinámica folicular de novilhas Nelore, Nelore x Angus e Angus,
utilizando DP4 1,9 g, Benzoato de Estradiol y Prostaglandina.
Fuente. Carvalho, 2002.
137
Tabla 16. Tasa de ovulación por grupo genético.
Grupo
genético
n
Tasa de
ovulación (%)
Angus
12
75,0 (9/12)
Angus X
13
84,6 (11/3)
Nelore
12
41,6 (5/12)
Fuente. Tecnopec, 2005.
Los dispositivos con 1gr o menos de progesterona, liberan esta hormona de forma
más fisiológica y adecuada al metabolismo de las novillas cebuinas, generando
mejores resultados de preñez en esta categoría animal, que los dispositivos con
altas dosis de progesterona. Lo mismo que se previene que las novillas
extremadamente sensibles a la progesterona sufran alteraciones en la tasa de
ovulación, se deben instruir los siguientes cuidados en la IATF (Tecnopec, 2005):

Dar preferencia a dispositivos ya usados (2 o 3 veces) o usar dispositivos
con 0,75 gr - 0,5 gr de progesterona.

Para dispositivos nuevos: aplicar media dosis de PGF-2 en la inserción
del dispositivo y media dosis en la retirada.
Ese manejo elimina la producción de progesterona por el eventual cuerpo lúteo
activo, presente en los ovarios de algunas novillas, evitándose que el acumulo de
progesterona endógena, aumentada por la liberada por el dispositivo, interfiera
desfavorablemente en el programa (Tecnopec, 2005).
7.8. Ablación folicular47
Puede ser realizada mediante la aspiración de folículos por ultrasonografía
transvaginal (técnica para obtener oocitos para FIV48), en la cual se aspiran todos
47
Aspiración del folículo con una aguja y una bomba de vacío.
138
los folículos presentes, resultando en el comienzo sincrónico de una nueva onda
folicular 1,5 días después; si se asocia este procedimiento con la inyección de 2
dosis de PGF-2, a los 4 días con intervalo de 12 horas induciremos regresión
luteal en todos los animales, incluso probablemente los que se encuentran en la
fase luteal temprana, induciremos una ovulación sincrónica debido a que todos los
animales poseen un folículo en la fase de crecimiento en el momento de la PGF2, y esto hace que puedan ovular al mismo tiempo (Bó et al.,1995).
Fotografía 4. Ilustración de la aspiración folicular guiada por ultrasonido en bovinos.
Fuente: Palomares, 2007.
48
Fertilización in vitro.
139
7.9. Efecto de los agonistas y el GNRH en la dinámica folicular
La GnRH y sus agonistas49 han estado disponibles en el marcado por más de 20
años. Al principio la GnRH fue usada solamente en el tratamiento de la
degeneración quística folicular en la vaca, pero posteriormente, se utilizó en la
sincronización de la ovulación en vacas repetidoras50.
Mediante la alteración de la molécula de GnRH nativa se han podido fabricar
potentes agonistas. En el mercado se encuentran distintos preparados
comerciales con actividad GnRH como la Buserelina, la Gonadorrelina, la
Etilamida y la Licerelina.
Al final de la década de los ochenta, cuando el advenimiento del ultrasonido
permitió la caracterización del desarrollo folicular bovino, Thatcher et al. (1989) y
MacMillan y Thatcher (1991), utilizaron un análogo del GnRH para alterar la
dinámica folicular, y proporcionaron la base para el desarrollo de un nuevo sistema
de sincronización del estro.
El desarrollo de un buen sistema de sincronización de estros que controle el
crecimiento de los folículos ováricos preovulatorios y la regresión del CL, se puede
lograr combinando inyecciones de un agonista de GnRH y de PGF (Badinga,
1994; Schmitt, 1994; Thatcher, 1986).
Trabajos realizados por varios grupos demostraron que la inyección (im51) de
GnRH
producirá
la
liberación
de
LH
en
un
pico
tipo
preovulatorio
aproximadamente a las dos horas de la aplicación (Thatcher, 1989). En 1991,
Macmillan y Thatcher encontraron que la administración de buserelina durante el
diestro (días 11, 12 o 13) alteró la dinámica folicular. Los autores reportaron la
49
Análogos.
Vacas que son inseminadas y vuelven a presentar celo, no se preñan, por fallas de ovulación o a nivel
hormonal–endocrino, entre muchas otras causas (vitrogen, 2007).
51 Intramuscular.
50
140
alteración de patrones de desarrollo, la aparición de folículos con antro nuboso 52
por aparente luteinización y, en algunos casos, la ovulación del folículo dominante.
Posteriormente, esta idea fue explorada por varios grupos resaltando entre los
más importantes el de Pursley et al. (1994), y Martínez et al. (1997). Estos trabajos
indican que se puede utilizar GnRH o LH para inducir, a través de la ovulación del
folículo dominante, el desarrollo de una nueva onda folicular. Este tratamiento es
efectivo en vacas en lactancia, pero hay controversia en cuanto al efecto de la
GnRH en novillas. El estadio de desarrollo del folículo dominante en el momento
de la administración de GnRH afecta el porcentaje de animales que ovulan y el
intervalo al inicio de la próxima onda folicular pudiendo variar de 2 a 5 días.
Cuando se administra en etapas aleatorias al ciclo estral, el GnRH ocasiona la
ovulación del folículo dominante e induce a la emergencia de una nueva onda de
crecimiento folicular 2 o 3 días después del tratamiento. Así, 6 o 7 días después, la
mayoría de los animales estarán en una fase de desarrollo folicular semejante en
el momento de la administración del PGF-2 y, por consiguiente, habrá una mejor
sincronización del estro (De la Sota et al., 2005).
Tabla 17. Efecto del día del ciclo en la respuesta ovulatoria de vacas Holstein
en lactancia al tratamiento de GnRH.
Fuente. Wiltbank et al., 1996.
52
Los folículos en una imagen normal de ultrasonido se ven totalmente negros, la utilización de la GnRH
produce liberación de LH que hace que el folículo se luteinice y en algunos casos ovule, esta luteinización
cambia la vascularidad del folículo y por lo tanto hace que la sangre produzca el efecto de nubocidad en el
antro (cavidad) del liquido folicular (Thatcher, 1989).
141
Figura 20. Mecanismos de acción de la GnRH.
Fuente. Prieto-Gómez et al., 2002.
8. INDUCTORES DE OVULACIÓN
La utilización de inductores de ovulación como Benzoato de Estradiol y GnRH, en
los programas de IATF de novillas púberes, resulta en buenas tasas de ovulación,
y no difieren estadísticamente en relación a la eficiencia.
Investigadores Brasileros, realizaron una serie de experiementos para evaluar el
efecto de la administración de GnRH al final del tratamiento de Crestar en la
sincronía de la ovulación. Utilizaron 20 vaquillonas Holstein que fueron tratadas
con Crestar (más EV + N) por 9 días y la mitad de las vaquillonas recibieron una
inyección de 100 μg GnRH (Cystorelin®, Merial) 30 horas después de la remoción
142
del Crestar. La ovulación, fue más sincrónica (56-64 horas) y la preñez fue
numéricamente (no significativamente) mayor (7/8) en las vaquillonas tratadas con
GnRH que en las no tratadas con GnRH (ovulación 60-76 h y 4/8 preñadas). Hay
que destacar que 3 vaquillonas (15%) no tuvieron regresión luteal. Este protocolo
también fue utilizado en vacas con cría, donde la administración de 250 μg de
GnRH en una cápsula de gelatina a las 30 horas de retirado el implante resultó en
un mayor porcentaje de preñez a la IATF en las vacas ciclando (61 vs 22 %) o en
anestro (31 vs 14%) con respecto a vacas Control (sin GnRH). (Vasconcelos et al;
1994).
Colazo et al., 1996, utilizaron un protocolo similar en vacas ciclando donde se
aplicó 10 μg de buserelina (Receptal®, Intervet, Argentina) y se obtuvo una preñez
del 54%.
Otra alternativa de inducción de la ovulación es utilizar 1 mg de EB a las 24 horas
de la remoción del Crestar e IATF a las 50-52 horas pos Crestar. Se diseñaron dos
experimentos para evaluar la sincronía de la ovulación y tasas de preñez en vacas
y vaquillonas tratadas con un implante Crestar y EB 24 horas después de retirado
el implante. En el Experimento 1 se utilizaron 11 vaquillonas Holando de 2 años de
edad que recibieron un Crestar y 2 ml de la porción inyectable de 5 mg de EV y 3
mg de N en momentos no conocidos del ciclo estral (Día 0). El Día 9 se retiraron
los implantes y 24 horas después 6 vaquillonas recibieron 1 mg EB (Grupo
Crestar+EB) mientras que las 5 restantes (Grupo Crestar) no recibieron ningún
otro tratamiento. Las vaquillonas fueron examinadas por ultrasonografía cada 12
horas para determinar el momento de la ovulación. Todas las vaquillonas ovularon
dentro de las 120 horas pos Crestar, pero la ovulación de las vaquillonas del
Grupo Crestar+EB fue más temprana y menos variable (mediana: 60,0 horas,
varianza: 24,0 horas, rango: 60-72 horas, P<0.03) que las del Grupo Crestar
(mediana: 84,0 horas, varianza: 748,0 horas, rango: 72-120 horas). (Carcedo et
al., 2000).
El objetivo del Experimento 2 fue comparar las tasas de preñez de vacas tratadas
igual al Experimento 1. Se utilizaron 232 vacas y vaquillonas para carne, de cuatro
143
establecimientos que recibieron Crestar y EV+N en el Día 0. El Día 9 los implantes
fueron removidos y 137 animales recibieron 1 mg de EB (Grupo Crestar+EB),
mientras que 95 animales no recibieron tratamiento (Grupo Crestar). Todos los
animales fueron IATF entre 50-55 horas pos remoción del implante y las preñeces
fueron diagnosticadas por palpación rectal a los 60 días pos IATF. Ambos grupos
estuvieron representados en los cuatro establecimientos. (Carcedo et al; 2000).
Tabla 18
Fuente. Carcedo et al, 2001
Además del tratamiento con 1 mg de EB a las 24 horas pos retiro del implante, se
puede sincronizar la ovulación utilizando GnRH en el momento de la IATF y con
esto disminuir el número de veces que los animales deben pasar por la manga
para recibir tratamientos. (Caccia et al., 1998; Martinez et al., 2000).
Un grupo argentino repitio este trabajo, se utilizaron 433 vacas para carne con
cría, con una condición corporal de 2,5 a 3,5 y que tenían entre 35 y 120 días pos
parto. Todas las vacas recibieron un CIDR-B y 2 mg de EB en el Día 0. Además, la
mitad de las vacas recibieron 50 mg de P4 al mismo tiempo. En el Día 8 se
removieron los CIDR-B y se inyectó una dosis de PGF. Las vacas, fueron
subdivididas nuevamente para recibir 1 mg de EB a las 24 horas de retirado el
CIDR-B o una inyección de 50 μg de GnRH (Cystorelin®, Merial) en el momento
de la IATF. Todas las vacas fueron IATF entre las 50 y 55 horas pos CIDR-B. (Bo
et al., 2000).
144
Tabla 19
Fuente. Bo et al, 2000
No hubo diferencias en los índices de preñez entre los tratamientos, sin embargo,
Colazo et al, tuvieron un mayor porcentaje de preñez en vaquillonas sincronizadas
con CIDR-B y cuya ovulación fue inducida con 0,5 mg de Cipionato de Estradiol
(ECP) a las 24 horas de la remoción del CIDR-B (216/331, 65 %) que vaquillonas
tratadas con GnRH en el momento de la IATF (169/328, 51%) o ECP en el
momento de la remoción del CIDR-B (168/320, 52%; P<0,01). En un experimento
preliminar (11) se observó que las ovulaciones ocurrieron en promedio entre 60 y
84 horas después de retirado el CIDR-B con un 37% (3/8) de vacas que ovularon
entre las 72 y 84 horas, lo que indica que el semen debería mantenerse viable y
en condiciones de fertilizar en el tracto reproductivo femenino durante 24 horas o
más. Por lo tanto, el semen utilizado debe ser de excelente calidad en programas
de IATF, sobre todo si se decide utilizar GnRH en el momento de la IA. (Colazo et
al., 2002).
Varios profesionales de campo relataron menor dilatación cervical y mayor
dificultad en la inseminación, cuando se utilizan GnRH en lugar de BE, en la IATF
de novillas. El Benzoato de Estradiol actúa sobre el cervix, dilatándolo. De este
modo, facilita el proceso de inseminación. Siendo la opción más interesante,
145
cuando trabajamos lotes grandes de novillas, donde la agilidad en la inseminación
es importante, ademas de su costo mucho menor comparado con la GnRH.
146
CONCLUSIONES

Los avances logrados en la comprensión de los mecanismos neuroendocrinos
de regulación del ciclo estral y de técnicas como el ultrasonido, han permitido
profundizar el conocimiento de la dinámica folicular y luteal. La alta
disponibilidad de hormonas sintéticas naturales o análogos a nivel comercial,
brindan al profesional una herramienta apropiada para la toma de decisiones
en cuanto a los tratamientos de sincronización más adecuados a utilizar en
función del tipo de animal que se desea tratar y los objetivos a alcanzar con el
uso técnicas de la biotecnología reproductiva como la IATF, MOET o la FIV.

Los protocolos de sincronización están basados en el control del Cuerpo Lúteo,
el desarrollo folicular y la ovulación. Para controlar la fase luteal se puede
inducir la regresión del Cuerpo Lúteo con PGF-2 o estrógenos, o prolongarla
mediante dispositivos con liberación lenta de progesterona o progestágenos.

De acuerdo con la revision, en trabajos de diferentes autores se concluye que
Los dispositivos liberadores de progesterona con concentración superior a 1 gr
pueden llegar a causar una fuerte supresión en la liberación hipotalámica de
gonadotropinas (LH)
causando un bloqueo en la dinámica
y desarrollo
folicular produciendo anestro en novillas de primera sincronización, esto,
probablemente, debido a la falta de niveles importantes de P4 en su sistema
‘’priming’’ y susceptibilidad propia de novillas cruza Bos indicus a la influencia
hormonal.

La utilización de prostaglandinas significó un aporte trascendental a la
producción animal y sentó bases muy importantes para las biotecnologías
147
reproductivas que dependen del ciclo estral. La propiedad luteolitica de la PGF2 la hace imprescindible en los tratamientos para sincronizar los celos en
bovinos.

Para realizar un control efectivo del desarrollo folicular existen métodos
mecánicos como la aspiración de todos los folículos mayores a 5mm presentes
en el ovario (nueva onda en 1,5 días después). O tratamientos hormonales con
la GnRH, pLH ó progestágenos más estradiol.

El tratamiento con GnRH induce ovulación en el 85% de las vacas en lactancia,
en las novillas dependerá del estadio del folículo dominante por lo que no es el
método de elección en estas últimas. El método Ovsynch, sincroniza la
ovulación de manera eficiente, funciona muy bien en vacas de lechería y
búfalos, mas no en novillas lecheras dada la poca sensibilidad de estas a la
GnRh, su utilización eleva un poco los costos de la sincronización.

El intervalo entre el tratamiento con 5mg de E-17B y el comienzo de la nueva
onda folicular es de 3 a 5 días, mientras que es de 3 a 4 días en el tratamiento
con 2,5mg de EB y 50mg de progesterona y de 3 a 8 días (promedio 5,5 días)
con el tratamiento de 5mg de EV y 3mg de Norgestomet. Es importante
recalcar que para que el tratamiento sea efectivo, se debe colocar la
progesterona (CIDR, SMB etc.) antes de la inyección de estradiol, el estrógeno
más disponible comercialmente es el Benzoato, es también el más utilizado
además de ser económico es muy seguro y según estudios recientes no
necesita ir acompañado de la inyección de progesterona a no ser que se trate
de un protocolo de superovulación en vacas donadoras.

Los trabajos revisados indican que para obtener una máxima eficiencia en los
programas de sincronizacion es necesario controlar, el desarrollo folicular y la
ovulación, cosa que podemos lograr con la utilización de progestágenos o
progesterona solos o en unión con estrógenos, que es el método actual más
eficiente en la sincronización de celos y ovulaciones, también el mas usado a
nivel mundial por ser aplicable a los animales aun en condiciones de anestro,
148
es de facil manejo y de bajo costo con excelentes resultados, convirtiéndose
una importante y rentable herramienta en los programas reproductivos en las
explotaciones de carne y leche.
149
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Desde que se conocen las hormonas que participan en la

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del 12 al 21 de agosto de 2016