Fiebre Amarilla

Fiebre Amarilla
Importancia y Uso Racional del Laboratorio en la
Vigilancia y Atención de los pacientes con cuadro clínico
icterohemorrágicos agudos
Dra. MERCEDES CARRILLO
Directora General
Laboratorio Central de Salud Pública
2008
Virus de la Fiebre Amarilla
El agente etiológico de la Fiebre Amarilla es
un arbovirus del género Flavivirus
(familia Flaviviridae)
Rol del Laboratorio en la Vigilancia y
Seguimiento de los Pacientes con cuadro
clínico icterohemorrágicos agudos
Vigilancia Laboratorial de febriles
Investigación de Brotes como componente del
Equipo de Salud
Estudios Serológicos (IgM)
Confirmación de circulación del virus en focos
sospechosos
Diagnóstico diferencial
Apoyo para el diagnóstico presuntivo y
seguimiento clínico
Investigación Aplicada
Ante la aparición de casos sospechosos, el LCSP
conjuntamente con funcionarios del SENEPA y
los del Hospital Distrital de San Estanislao, se
realizó una Investigación del Brote
– Búsqueda activa de febriles
– Vectores
– Datos conducentes a dilucidar los casos
Departamento
de
Virología
Virología
Diagnóstico Diferencial - LCSP
Las distintas formas clínicas de la fiebre
amarilla también pueden identificarse en
otras enfermedades febriles que
evolucionan con ictericia, manifestaciones
hemorrágicas o ambas.
Por lo que se deben descartar las siguientes
patologías:
– Leptospirosis, Malaria grave; Hepatitis A, B y C
y Fiebre hemorrágica por virus dengue.
Pruebas Realizadas por el LCSP
en la Vigilancia
Detección de Anticuerpos
– MACMAC-ELISA IgM
– Aumento de por lo menos cuatro veces en los niveles de
anticuerpos de IgG contra el virus de la fiebre amarilla
(seroconversión), por pruebas de neutralización
Detección de virus o ARN viral
- Aislamiento viral en cultivo celular
- RT
RT--PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)
Cuando y como tomar las
muestras de sangre ?
En la etapa Virémica (1, 2 y 3 Días)
En la etapa Aguda (después del 5º Día)
En la etapa Convaleciente (15 a 20 Días)
Tipo de
muestra
Nº y
volumen de
muestra
Momento de recolección
Sangre:
Serología
2 muestras
de suero de 5
ml. cada una
1ª muestra (Fase aguda)
después del 5º día del
inicio de síntomas.
2ª muestra (Fase
convaleciente) a partir de
decimocuarto día del
inicio de los síntomas
Sangre:
Aislamiento
Viral
Una muestra
de 5 ml. de
suero
Órganos
o
tejidos:
Aislamiento
Viral
Órganos
o
tejidos:
Inmunohistoquímica
Recipiente
Conservación
Transporte
Tubo estéril, seco,
herméticamente
cerrado y rotulado.
No usar
anticoagulantes
En heladera y remitir
antes de 24 hs al
LCSP.
Caja térmica c/
hielo
En la fase aguda, hasta el
3º día del inicio de los
síntomas
Tubo estéril, seco,
herméticamente
cerrado y rotulado.
No usar
anticoagulantes
Remitir
inmediatamente
al
LCSP en forma
refrigerada. Congelar
a menos 70o C o en
Nitrógeno líquido.
Caja térmica c/
hielo seco o
Termo para
Nitrógeno
líquido
Fragmentos
Hasta 8 horas post-mortem
Frasco con medio de
transporte viral,
herméticamente
cerrado y rotulado
Llevar
inmediatamente
al
LCSP o congelar a
menos 70o C o en
Nitrógeno líquido.
Caja térmica c/
hielo seco o
Termo para
Nitrógeno
líquido
Fragmentos
Hasta 8 horas post-mortem
Frasco estéril c/
solución de formol al
10%
Temperatura
ambiente
Temperatura
ambiente
Pruebas de laboratorio
Clínico para Fiebre Amarilla
Hemograma (leucocitos, plaquetas, hematócrito)
Albúmina
Pruebas de la función hepática
Urea, creatinina, TP, gasometría, electrolitos
Bilirrubina, Glicemia Crasis Sanguínea y Tipificación
Orina--verificar si hay hematuria microscópica
Orina
Muestra para el aislamiento
viral y PCR
Deben ser colectadas en los 3 primeros días de iniciado el
estado febril (fase virémica).
Para asegurar las optimas condiciones durante el
aislamiento, la separación del suero del coagulo se
realizará el mismo día de la toma de muestra y
asépticamente.
Los tubos con suero se congelaran y se almacenaran en el
freezer, en caso de no enviar inmediatamente. (Lo ideal es
congelar a -20º C)
El suero debe enviarse lo antes posible al laboratorio
realizando el transporte en congelación.
TECNICAS DE EXTARCCION Y PREPARACION DE LAS SANGRE
AISLAMIENTO VIRAL Y PCR DEL DENGUE
1- Usar Yodo-Alcohol con algodón para limpiar la zona de
extracción. Luego desinfectar en forma de espiral con una
gasa con alcohol
2- Esperar hasta que se seque el área
desinfectada
(sin soplar)
3- Extraer 10 ml. de sangre con
jeringa desechable
TECNICAS DE EXTARCCION Y PREPARACION DE LAS SANGRE
AISLAMIENTO VIRAL Y PCR DEL DENGUE
4- Cargar la sangre en los tubos estériles
correctamente, identificarlos con nombre,
flamear la boca de los mismos y taparlos
rápidamente
Nombre y
Apellido
5- Colocar los tubos que contiene la sangre
entre hielo o en el refrigerador (No congelar)
6- La separación del suero debe hacerse en campana de flujo laminar o frente a una
llama (Lamparita) y con tapa boca en el mismo día de la extracción
TECNICAS DE EXTARCCION Y PREPARACION DE LAS SANGRE
AISLAMIENTO VIRAL Y PCR DEL DENGUE
7- Remitir el suero al Laboratorio Central de Salud Pública en condiciones
refrigeradas con la ficha epidemiológica junto con el pedido médico
Hoja de
Pedido
Fecha
Epidemiológica
Contenedor
Observación: Las muestras para aislamiento viral deben ser
colectadas entre los 3 primeros días del inicio de la fiebre
No olvidar los
datos
laboratoriales
como ser:
Hepatograma,
Creatinina y otros
indicados en la
ficha !!!!
Flujograma de Envíos de Muestras y Resultados
Laboratoriales de Fiebre Amarilla
D.G.V.S.
DIVET
SENEPA
LCSP
REGION
SANITARIA
Hospital
Centro de
Salud
Puesto de
Salud
Otros
Laboratorios
Públicos y
privados
Otros Servicios
de Salud
Públicos y
Privados
Ficha Epidemiológica de
Fiebre Amarilla y
Criterios de rechazo de
muestras
•
Muestra de paciente sin cuadro febril
ictérico agudo
•
Muestra
extraída
condiciones
y
remitida
inapropiadas
(en
en
jeringa,
frasco inadecuado, muestra inadecuada,
transporte inadecuado)
•
Muestra sin ficha epidemiológica o no
completada
correctamente
(importante
indicar fecha de inicio de síntomas y
antecedentes de vacunación)