Noviembre 2009 - ELA España • Asociación española contra la
Transcripción
Noviembre 2009 - ELA España • Asociación española contra la
Revista de la Asociación Española Contra la Leucodistrofia. ELA-España nº 3. infos Nuestros protagonistas: ASOCIACIÓN ESPAÑOLA CONTRA LA LEUCODISTROFIA www.elaespana.com Noviembre 2009 Sumario EDITORIAL MEDICINA PÁG. 1 - ¿Reparar la mielina gracias a las hormonas tiroideas? - Nuevo tratamiento con células madre en la enfermedad de Pelizaeus-Merzbacher - Gastrostomía. - 2º Congreso científico de la Fundación ELA. - Coloquio Familias ELA/Investigadores ACTUALIDAD PÁG. 26 - Alarma en la comunidad científica por los recortes en investigación - La crisis en la ciencia - El ‘milagro’ de Andy y Ángel VIDA ASOCIATIVA PÁG 31 - El real madrid con la leucodistrofia. - “La Princesa de Asturias recibe a las Asociaciones de Neurofibromatosis, Leucodistrofia y Esclerosis Tuberosa” - Los Futbolistas veteranos del Getafe C.F., Real Madrid, Atlético de Madrid y Rayo Vallecano organizan un partido contra la Leucodistrofia - Más colaboraciones. - Encuentros de Familias. - Campaña 400x5 UN ESPACIO PARA TÍ PÁG. 45 Estimados amigos: Este año 2009, ha estado lleno de nuevos y esperanzadores resultados y acompañado por una importante actividad de ELA España a distintos niveles, lo que espero que continúe traduciéndose en un futuro en grandes logros como los de este año. Me gustaría trasladaros mi gran alegría ante los resultados publicados recientemente sobre el ensayo de terapia génica en las formas infantiles de X-ALD, realizado gracias a la labor de nuestra entidad en tres niños españoles y a cuya financiación hemos contribuido también activamente. Como siempre, animaros a seguir luchando de forma individual ante la situación que nos ha tocado vivir y de forma general uniendo nuestras fuerzas a través de la Asociación. Tan importante es esto, que continuar haciéndonos oír y divulgar el nombre de las Leucodistrofias, constituye una forma efectiva para reducir los errores y retrasos diagnósticos. A pesar de parecer que muchos de nuestros esfuerzos no conllevan un fruto inmediato, debemos mantenernos firmes en esta línea y continuar trabajando para que se conozca, estudie y tenga en cuenta nuestra patología. Grandes logros siempre requieren de grandes esfuerzos, que se hacen menos pesados cuando se ven recompensados poco a poco. Por lo que contar con un resultado positivo en este ensayo clínico, no implica solamente la diferencia entre que uno de nuestros niños padezca la enfermedad o que esta se vea estabilizada y frenada gracias a este tratamiento, sino que en el largo camino que hay que recorrer hasta poder realizar en un afectado esta terapia, se precisa: la sospecha de esta enfermedad por parte del profesional, el desarrollo de las pruebas adecuadas para el correcto diagnóstico, la derivación y conocimiento del profesional de referencia…, todo ello se ha cumplido adecuadamente, y esto ha sido en gran parte, gracias a nuestro esfuerzo y a la lucha constante durante años, informando a los profesionales implicados, orientando a las familias interesadas, divulgando la existencia de las Leucodistrofias y sobre todo, gracias a mantener la esperanza en que nuestros esfuerzos, algún día serían efectivos para algo y para alguien. Por ello desde mi más profunda felicidad, por todo lo que hemos logrado juntos hasta el momento, os doy las gracias por vuestra confianza, esperando que esto sea solo, el comienzo de un final feliz. Con cariño Bienvenido Corral Presidente ELA-España Medicina ¿REPARAR LA MIELINA GRACIAS A LAS HOR- MONAS TIROIDEAS? El equipo “Biopatologías e Imágenes de la Mielina”, promovido por Said Ghandour en el laboratorio de imágenes y neurologías cognoscitivas (UMR 7191) de Estrasburgo, pone de manifiesto que, en un modelo animal que presenta una severa pérdida de la mielina del cerebro, la remielinización de los axones es favorecida por un tratamiento de la hormona tiroidea T3. Las alteraciones de la envoltura de mielina conducen a déficits funcionales severos y su reparación es actualmente un objetivo clínico principal, ya que podría seguramente contribuir a la disminución o incluso a la prevención de enfermedades de la mielina. Las hormonas tiroideas son reguladores del desarrollo del sistema nervioso. Son a la vez necesarias para la promoción del crecimiento de las neuronas, de sus interconexiones e indispensables para la diferenciación y la maduración de los oligodendrocitos, células especializadas que garantizan la producción de mielina. ¿Las hormonas tiroideas tienen el mismo efecto en el cerebro adulto desmielinizado? En ratones, cuyo cerebro está desmielinizado con ayuda de cuprizona, un quelatante de cobre para reproducir la esclerosis múltiple, este equipo demostró el efecto beneficioso de una hormona tiroidea (la triiodotironina, T3) sobre la reparación de la mielina del cerebro. La utilización del IRM del tensor de difusión (DT-MRI) apoyada por un análisis de los tejidos orgánicos impulsores, mostró un notable efecto del T3 sobre la regeneración de los precursores de oligodendrocitos, sobre su diferenciación y maduración y sobre el remielinización de los axones. ¿Cómo la T3 indujo la remielinización en el cerebro adulto? El equipo del Dr. Ghandour demostró que implica la transformación de células madre cerebrales en oligodendrocitos. Este estudio indicó también que la T3 estimula la capacidad de reparación endógena del cerebro. Este tema, sobre el cual se inclinan numerosos laboratorios, se considera como una futura vía para la terapia de las enfermedades del cerebro. Este estudio fue subvencionado por la Fundación de Investigación ELA. Referencia: “Recuperación from chronic demyelination by thyroid hormona therapy: myelinogenesis induction and assessment by difusión tensor magnetic resonancia imaging”. Harsan LO, Steibel J, Zaremba A, Agin A, Abeto R, Pollo P, Chorlito B, Parizel N, Grucker D, Boehm N, Miller RH, Ghandour MS. J Neurología (2008) 28,14201- 14189. NUEVO TRATAMIENTO CON CÉLULAS MADRE EN LA ENFERMEDAD DE PELIZAEUS-MERZBACHER Un ensayo terapéutico de la fase I se iniciará pronto en la Universidad de California, San Francisco (UCSF), Estados Unidos, en colaboración con la empresa de biotecnología StemCell, Inc.. que pondrá a prueba la seguridad y la eficacia del trasplante de células madre neuronales en los niños con la enfermedad de PelizaeusMerzbacher (PMD). En PMD, un gen defectuoso en el cromosoma X conduce a la insuficiencia de la mielinización de las fibras nerviosas en el cerebro, los trastornos neurológicos y la muerte en las formas más severas de la enfermedad. En la actualidad, no existe ningún tratamiento eficaz para esta leucodistrofia. El proceso de tratamiento se llevará a cabo por el profesor David Rowitch, Jefe de Neonatología del Hospital de Niños de UCSF y miembro del Consejo Científico de la Fundación ELA, es la primera prueba terapéutica con células madre neurales diseñado para tratar una enfermedad neurodegenerativa que resulta de la falta de mielina. Cuatro pacientes, con edades comprendidas entre seis meses y cinco años, afectados por la forma más severa 1 de la enfermedad se incluirán en este ensayo. Todos los niños recibirán infusiones de las células madre neurales en la neurocirugía y los fármacos inmunosupresores durante los nueve meses para prevenir el rechazo de las células madre trasplantadas. Se llevará a cabo un seguimiento intensivo durante un año para evaluar la seguridad y tolerancia de las células trasplantadas, los efectos de la cirugía y la inmunosupresión, y para ver si los niños muestran signos de mejoría clínica. Las imágenes de resonancia magnética son realizadas durante cuatro años más para vigilar los problemas potenciales asociados con estas células. El principal objetivo de la Fase I es probar la seguridad de las células trasplantadas. El objetivo secundario es determinar si las células ayudan a corregir la falta de mielina en los cerebros de los pacientes. Varias pruebas se utilizan en este estudio, incluida la resonancia magnética para monitorear la producción de mielina, los exámenes clínicos que evaluarán cuidadosamente la función neurológica y los informes de los padres. StemCell, Inc.. compañía de biotecnología en la que se desarrollaron las células madre neurales purificadas en el centro de este ensayo clínico, concluyó un estudio clínico de fase I en el pasado mes de enero, en 6 pacientes con enfermedad de Batten, otra enfermedad rara; fueron tratados de manera similar y reportó resultados positivos en términos de seguridad. El injerto y la supervivencia a largo plazo de las células en el cerebro también han sido constatados. La fecha de inicio del ensayo terapéutico PMD aún no se ha establecido. Para más noticias sobre esta prueba, visite http:// neonatology.ucsf.edu/nbri/clinical-research.aspx GASTROSTOMÍA. En el marco de las leucodistrofias como en otras patologías invalidantes, puede ocurrir un déficit motriz en relación con los órganos y los músculos necesarios para la masticación y la deglución. Estos desórdenes de la deglución son desórdenes motrices en sentido estricto; actúan según los casos de parálisis (centrales o periféricos), de desordenes de la coordinación motriz o de déficits musculares (miopatías en par- 2 ticular). Este déficit puede implicar una repercusión a veces principal en la vida diaria en relación con el aspecto alimenticio y pudiendo comprometer el pronóstico vital, en particular, por riesgo de “ falsa ruta”. Cuando la función de deglución está afectada o cuando la toma alimenticia espontánea se vuelve insuficiente para garantizar una nutrición correcta, será necesario administrar la nutrición por sonda nasogástrica o por gastrostomía. La sonda siempre se utilizará como primera opción, ya que su instauración es inmediata. La gastrostomía será previsible si la nutrición por sonda debe persistir en el tiempo. Es una etapa importante en la vida del niño y de su familia. Es necesario que este acontecimiento se prevea antes de que ocurra, para que la transición de la alimentación normal hacia una alimentación por sonda o gastrostomía suceda de la mejor forma posible. Además, la puesta en marcha de una nutrición por sonda o gastrostomía nunca debe hacer desaparecer la nutrición por vía oral ya que ésta es un vector de placer, de vida social y familiar. Se debe mantener en todos los casos que sea posible. Si hay “falsas rutas”, se podrá a pesar de todo, dar alimentos semi-sólidos y agua gelificada, que permitirá mantener la alimentación por vía oral. Para superar esta etapa, es muy necesario estar bien informado. Estas son las respuestas a las cuestiones que se plantean a menudo los padres sobre la gastrostomía. ¿Qué es una gastrostomía? Es un método endoscópico que tiene por objetivo la instauración de una sonda de alimentación directamente a través de la piel y la pared del estómago, con el fin de permitir a los pacientes que no pueden alimentarse normalmente recibir la aportación energética necesaria. Esto permite evitar la incomodidad a largo plazo de la sonda naso-gástrica (pasando desde la nariz hasta en el estómago). ¿Cómo es el proceso? La gastrostomía siempre se establece bajo anestesia general con una hospitalización de 24 a 48 horas. Es instalada por vía endoscópica, o por método quirúrgico. La intervención dura en general de 15 a 20 minutos. Se asocia a veces a una cirugía anti-reflujo para los pacientes que lo necesitan. Inicialmente se instala un tubo de gastrostomía que se deja en el lugar durante varias semanas para permitir la organización del orificio de gastrostomía. El botón definitivo se establecerá en general al cabo de seis semanas. Deberá cambiarse a continuación regularmente (cada seis meses), o más a menudo, en función de las necesidades de adaptación del botón a la morfología y al crecimiento del niño. ¿Hay riesgos en la instalación y a la utilización de la gastrostomía? Todas las actuaciones médicas pueden implicar complicaciones. Aparecen en el momento de la endoscopia (o del gesto quirúrgico) pero pueden revelarse también algunas horas o algunos días después del examen (dolores abdominales, vómitos de sangre roja o negra, fiebre, tos, paro del tránsito intestinal…). Una vez la gastrostomía se ha realizado, las consideracopnes a tener en cuenta son: - la retirada del botón gástrico (la renovación del botón se hace a menudo por la familia que tiene un botón de reemplazo en domicilio); - la obstrucción de la sonda (si la sonda se atasca, puede desatascarse administrando agua tibia o con gas, o incluso Coca-cola, o pasando una sonda de calibre inferior al interior de la sonda taponada); - complicaciones en el orificio de la gastrostomía (los cuidados locales podrán requerir la aplicación de antiséptico o de nitrato de plata si se forman granulomas a nivel del orificio de la gastrostomía). ¿Cuáles son las ventajas y los inconvenientes de la nutrición por sonda gástrica o por gastrostomía?. Las principales ventajas de la gastrostomía con relación a la nutrición por sonda se describen en el cuadro de abajo. 3 Es necesario hacer hincapié en el hecho de que las familias aceptan bien el botón muy rápidamente y que los cuidados locales son poco vinculantes. Los beneficios más evidentes son: la mejora del estado alimenticio, la facilidad de utilización, la disminución de las “ falsas rutas” y de las molestias pulmonares (y en consecuencia hospitalizaciones) y la liberación de la cara (que si no, es entorpecida por la sonda naso-gástrica). Los inconvenientes residen sobre todo en el gesto de instalación, que es más invasiva, y los cuidados locales que la gastrostomía requiere. ¿Se puede administrar los medicamentos por la sonda de la gastrostomía? La mayoría de medicamentos pueden ser administrados a través de la gastrostomía, son sobre todo los medicamentos bajo forma de líquidos o gotas. La forma de administración de los medicamentos puede modificar sus propiedades (destrucción por el ácido gástrico, interacción con los nutrientes, absorción sobre la superficie de la sonda…). En cualquier caso, la toma de medicamentos deberá siempre discutirse con el médico referente. ¿El botón de gastrostomía es siempre definitivo? Una vez colocada, la gastrostomía podrá utilizarse durante numerosos años. El botón debe cambiarse regularmente (cada seis meses) y puede adaptarse al creci- 4 miento del niño o a la variación de la talla de la pared abdominal. Durante mucho tiempo, no tendrá mejoría el estado neurológico, no tendrán mejoría las capacidades de deglución y la gastrostomía será entonces definitiva. En algunos casos, hay una mejora del estado neurológico y de las funciones de alimentación por vía oral, entonces podrá retirarse muy fácilmente el botón. Basta con retirarlo y colocar una compresión estéril sobre el orificio de la gastrostomía durante algunos días, este orificio se cerrará espontáneamente. En el caso (raro) donde el orificio no se cierra espontáneamente, podrá ser necesaria una intervención quirúrgica. ¿Cuándo se debe poner el botón de gastrostomía? Es necesaria una indicación real (insuficiencia de toma alimenticia, “falsas rutas” de alimentación por vía oral) y una aceptación paternal de la anestesia y de la intervención necesaria para la instauración de la gastrostomía. Además, es necesaria una aceptación de la instauración de una prótesis permanente. Algunos padres necesitan tiempo para habituarse a la idea de que le van a hacer “un agujero” en el vientre de su niño. Como nos dice una madre, “ ¡No quería! Para mí era una solución fácil para el personal médico, pero la cuestión de mutilar el vientre de mi pequeño jamás […] Si hubiera podido contar con la opinión de otros padres lo hubiera hecho mucho antes”. Estas reacciones iniciales son muy legítimas y deben respetarse. Otra madre de nuestra consulta nos da el mismo tipo de testimonio después de haber rechazado inicialmente esta intervención quirúrgica: “ Todo se volvió más fácil y el botón es mucho más práctico que la sonda. Los cuidados locales son poco vinculantes con relación a los beneficios que la gastrostomía nos aporta”. Es importante poder entrevistarse con familias que pueden compartir su experiencia sobre este método de administración de la nutrición. Los testimonios son a menudo más eficaces que los discursos médicos que los padres perciben como demasiado técnicos y no están suficiente personificados en la vida de su niño. La gastrostomía es una opción, cada vez más utilizada. Una vez existente, se per- cibe una mejora del estado alimenticio y una disminución de las complicaciones (reflujo, ahogos, infecciones respiratorias) permitiendo al mismo tiempo mantener una alimentación por vía oral mientras sea posible. 2º CONGRESO CIENTÍFICO FUNDACIÓN ELA. DE LA La Fundación ELA ha organizado el 2º congreso científico titulado “Desafío terapéutico en las enfermedades de la sustancia blanca”, los días 26 y 27 de junio de 2009 en Luxemburgo. Este congreso reunió a los especialistas de las leucodistrofias y de la reparación de la mielina a nivel internacional, ya sean investigadores, médicos o estudiantes (más de 150 personas en total) con el fin de hacer balance de los avances de la investigación en este ámbito. El programa científico elaborado por el Comité científico del congreso, compuesto por los profesores Patrick Aubourg, Monique Dubois-Dalcq y Odile Tanguy, abordó cinco temas: - 1. Células madre y reparación de los genes. - 2. Biología de la mielinización/remielinización. - 3. Funciones cognoscitivas y enfermedades desmielinizantes. - 4. Neuroimagen de las enfermedades de la sustancia blanca. - 5. Terapias Se organizaron también once sesiones de comunicación: enfermedades peroxisomales, enfermedades lisosomales, enfermedades hipomielinizantes, enfermedades cavernosas, leucodistrofias indeterminadas/identificación de nuevos genes, otras enfermedades la mielina, biología y desarrollo de la mielina, enfoques terapéuticos, fisiopatología, modelos experimentales. Estas distintas sesiones en particular permitieron a los jóvenes investigadores y estudiantes presentar un gran número de labores de investigación e intercambiarlas con sus iguales. Se presentaron múltiples progresos científicos en el congreso: Adrenoleucodistrofia. Los resultados preliminares del ensayo de terapia génica por autotransplante de médula ósea cuyas células se han corrigido genéticamente, llevado a cabo por el Pr. Aubourg en París para la adrenoleucodistrofia, ponen de manifiesto que de 24 a 30 meses después del transplante, la proteína normal se expresa de manera similar en las células resultantes de la médula ósea en los 2 niños tratados. Las lesiones cerebrales por su parte progresaron en estos dos enfermos hasta 24-30 meses después del inicio del tratamiento. Los resultados de esta prueba son comparables a los observados después de un transplante de médula ósea clásica. Los trabajos del Dr. Kemp (Academic Médical Center, Amsterdam) parecen indicar que la proteína ALDP implicada en la adrenoleucodistrofia se repliega mal. La utilización de proteínas chaperonas que permiten el buen repliegue de la proteína podría ser beneficioso. El Dr. Engelen (Academic Médical Center, Amsterdam) estudia actualmente los síntomas en las mujeres portadoras del gen ALD y puso de relieve que un 68% de las mujeres experimentan señales atribuibles a la adrenoleucodistrofia como la incontinencia, los problemas de locomoción, las perturbaciones sensoriales y la espasticidad. En otro estudio clínico, el Dr. Engelen demostró que la lovastatina, medicamento utilizado para reducir el colesterol, no tiene ningún efecto sobre los ácidos grasos de cadena muy larga, característica de la enfermedad, y no recomienda pues su utilización en la adrenoleucodistrofia. La búsqueda de variables genéticas en la adrenoleucodistrofia por el Dr. Aubourg y el Dr Kemp permitió poner de relieve, por el momento, la variable ELOI/L1 que podría quizá explicar el desencadenamiento de la enfermedad y su progresión. Se buscan otras variables. El Dr. Savary (Inserm U-866, Dijon) puso de relieve que las moléculas que imitan la acción de las hormonas tiroideas son capaces de estimular de manera transitoria la producción de genes vinculados con el 5 gen de la adrenoleucodistrofia en células de ratón. Dos moléculas conocidas por su acción sobre la formación de mielina y la supervivencia de oligodendrocitos, IGF-1 y NT-3, fueron administradas por terapia génica en el líquido cefalorraquídeo de ratones afectados de adrenoleucodistrofia (R. Maestroeni, Lausana). Este tratamiento previene la decadencia de las funciones motrices del ratón enfermo y tiene un efecto beneficioso sobre el proceso de desmielinización. Enfermedades lisosomales. Un ensayo clínico de fase I/II de terapia génica por transplante de células madre hematopoyéticas genéticamente corregidas por el hombre para la Leucodistrofia Metacromática, dirigido por la Dra. Biffi, está programado en Milán a finales del año 2009. Una terapia similar está en curso de evaluación para la enfermedad de Krabbe en animales con resultados preliminares esperanzadores. El equipo del Dr. Aubourg trabaja en la puesta en marcha de un segundo ensayo de terapia para la Leucodistrofia Metacromática por inyección intracerebral del gen ARSA, responsable de la enfermedad cuando ha mutado, utilizando un vectormedicamento. Esto pone en evidencia que un número limitado de inyecciones intracerebrales permiten una difusión significativa del vector en un cerebro de tamaña amplio. Los nuevos experimentos han testado un nuevo tipo de vector (AAV10) que permite acelerar y mejorar la recuperación de ratones enfermos tratados a un año de sintomatología. Las últimas etapas antes del ensayo terapéutico incluyen: la optimización del método de administración, la evaluación de la tolerancia y la eficacia de la inyección intracerebral de vectores de grado clínico en los monos en las dosis que serán utilizadas en el hombre, el estudio toxicológico en las ratas y los primates. El objetivo es depositar una demanda de autorización de ensayo clínico ante la AFSSAPS en 2010. El paso de la enzima ARSA al nivel de la barrera hematoencefálica es limitado, lo que limita la eficacia de un tratamiento para enzimoterapia. Los trabajos de 6 laboratorio del Pr. Gieselmann en el cultivo de células porcinas sugieren que la manipulación de ciertos azúcares a nivel de la enzima puede permitir una transferencia a través de la barrera mejorando así la liberación de ARSA a nivel del cerebro. La combinación de múltiples terapias ha testado la enfermedad de Krabbe con el fin de determinar diferentes afectaciones del organismo. El equipo del Dr. Gritti en Milán se ha interesado por la combinación de la terapia génica y celular. Los resultados muestran que las células madre neuronales genéticamente corregidas y transplantadas en el cerebro expresan la proteína GALC, proteína deficiente en la enfermedad de Krabbe, de manera estable en los ratones nuevos-natos enfermos. Además, la terapia génica por inyección intracerebral en los ratones que desarrollan síntomas muy temprano en su vida permite producir una proteína GALC activa en el cerebro y la médula espinal. Enfermedad de Pelizaeus-Merzbacher. El Dr. Sereda en Alemania ha tratado ratones enfermos con un nuevo medicamento anti-progesterona Lonaprisan de administración subcutánea durante 10 semanas, el objetivo es reducir la expresión del gen PLP1 responsable de la enfermedad. Los resultados revelan que la expresión de PLP1 es disminuida en el grupo tratado con Lonaprisan en relación al grupo no tratado. Se constata una mejora de la función motriz, que sin embargo vuelve a la normalidad, así como el aumento del 30% de los axones mielinizados en el haz corticoespinal y una disminución de la respuesta inflamatoria. El blanco del Lonaprisan, los receptores de la progesterona, es pues un blanco terapéutico potencial en el tratamiento de la enfermedad. Enfermedades Cavernosas. El Pr Elroy-Stein está desarrollando un nuevo modelo experimental del Síndrome CACH en ratones. Los síntomas observados son moderados y parecidos a la forma tardía del adulto. Los ratones se caracterizan por las numerosas modificaciones a nivel de la expresión de genes. El Dr. Pavitt desarrolla un nuevo test que per- mita identificar la composición que pueda imitar o ayudar a la proteína elF2B, molécula deficiente en esta enfermedad. En la Enfermedad de Alexander, dos aproximaciones se están evaluando por el equipo de la Dra. Pham-Dinh. La primera aproximación, de tipo farmacológico, permite estimular la producción de moléculas chaperonas en los modelos celulares de la enfermedad, que lleva a una disminución de células de agregados de GFAP, molécula responsable de la enfermedad. La segunda aproximación tiene por estrategia la reducción de la expresión de la proteína GFAP utilizando ARNsh en un modelo celular. Se observa una disminución de la expresión de GFAP en el orden del 65% y no se ha constatado ninguna mutación del agregado de GFAP. Las dos aproximaciones van ahora a testarse en un modelo de ratones que han desarrollado la enfermedad para un mismo equipo de investigación. Los estudios sobre la proteína MLC1, responsable de la Leucodistrofia Megalencefálica con quistes subcorticales (o MLC), están actualmente dirigidos a fin de comprender la función de la proteína y su localización. Investigación sobre la mielina. Las microvesículas producidas por los oligodendrocitos , los exosomas, han sido recientemente descubiertos por el Dr Albers en Alemania. Estas microvesículas están implicadas en la comunicación celular y la transferencia de sustancias entre las células. Los análisis han revelado que los exosomas transportan proteínas de la mielina como la PLP, CNP y MOG pero también las proteínas con funciones neuroprotectoras. La liberación de exosomas es controlada por la actividad del entorno celular. Los exosomas incubados con las neuronas son capaces de influir en el metabolismo neuronal. celulares. Este método puede ser utilizado para marcar los oligodendrocitos y así visualizar las interacciones entre oligodendrocitos y axones. El Dr. Klugmann, Alemania, desarrolla actualmente nuevos vectores de terapia génica que determinan de manera específica los oligodendrocitos. Contribuyendo a esto, el Dr Ghandour testa una nueva herramienta permanente para transportar ARNi a nivel de los oligondendrocitos y del cerebro gracias a un péptido derivado de una proteína del virus de la rabia. Según el Dr Windrem (Universidad de Rochester, Nueva-York), el transplante de células precursoras de oligodendrocitos como estrategia terapéutica para las enfermedades de la mielina necesita así mismo nuevos modelos animales que permitan estudiar la psicología de los oligodendrocitos y de los precursores en el cerebro adultos del hombre. La posibilidad de identificar células precursoras de oligodendrocitos o células madre del sistema nervioso periférico permite considerar, según el Dr. Baron (Inserm U-975, París) nuevas perspectivas cuyo objetivo es promover la remielinización endógena o exógena por las células de Schwann en el sistema nervioso central. El rol de diferentes moléculas en la mielinización / remielinización y la biología de los oligodendrocitos subraya como, por ejemplo, las moléculas Sema6A, Sox17 y la hormona tiroidea T3. Los trabajos del Pr. Franklin (Cambridge, Royaume-Uni) ponen en evidencia que las perturbaciones de la remielinización unidas al envejecimiento son irreversibles. De hecho, determinar las células precursoras de oligodendrocitos endógenos para promover la remielinización podría ser una terapia potencial en las enfermedades de la mielina como la esclerosis múltiple. La técnica de Brainbow, desarrollada por el Dr. Livet (Instituto de la visión, París), es un método utilizado por transgenes capaces de marcar células del mismo tipo con diferentes colores fluorescentes, permitiendo así visualizar las interacciones 7 COLOQUIO FAMILIAS ELA/INVESTIGADORES 28 Y 29 DE MARZO DE 2009 EN PARÍS Por tercer año consecutivo, las familias de la asociación y los especialistas mundiales de las leucodistrofias se encontraron en París. Durante dos días, los investigadores pudieron presentar sus investigaciones, exponer sus resultados y responder a las preguntas de las familias. A continuación encontrará el resumen de los talleres por patologías. Taller ALD/AMN y otras leucodistrofias peroxisomales ALD/AMN Princiapales progresos en la fisiopatogénia de la ALD Prf. Patrick Aubourg - Hospital St-Vincent-dePaul, París, Francia La constitución, desde hace 5 años, de un grupo europeo de médico-investigadores que colaboran estrechamente en trabajos sobre la Adrenoleucodistrofia, vinculada al X (Aurora Pujol y Stéphane Fourcade, IBIDELL, Barcelona, España; Ronald Wanders y Stephan Kemp, AMC, Amsterdam, Paises Bajos; Celia Kasmann y Klaus Nave, Max Planck, Göttingen, Alemania; Johannes Berger y Sonja Forss-Petter, Institute of Brain Research, Viena, Austria; Nathalie Cartier y Patrick Aubourg, UMR 745, París, Francia) permitió captar los mecanismos patológicos que conducen, a partir de una mutación del gen ALD en los oligodendrocitos, al desarrollo de la Adrénomieloneuropatía (AMN), de una afectación cerebral desmielinizante sin inflamación o de una afectación cerebral desmielinizante con inflamación. Un nuevo concepto importante es que la afectación del oligodendrocito, la célula que fabrica la mielina en el cerebro y la médula espinal, puede conducir: • 1) a un ataque de los axones (los cables de los nervios) SIN desmielinización (como es el caso en la AMN), • 2) o a un ataque de la mielina como es el caso en las formas cerebrales de ALD del niño o el adulto. Los resultados conjuntos de este equipo europeo permitieron demostrar que la mu- 8 tación del gen ALD en los oligodendrocitos implicaba sobre todo y de manera primitiva un ataque de los axones, sin desmielinización y que los factores metabólicos y genéticos suplementarios eran necesarios para que un ataque cerebral desmielinizante se desarrollara; es decir, un ataque cerebral desmielinizante con “inflamación”. En cada etapa del desarrollo de distintas formas de la enfermedad, los distintos mecanismos patogénicos están definidos claramente y son ahora objeto de investigaciones terapéuticas específicas. Queda muy lejos el simple concepto de que la acumulación de ácidos grasos de cadena muy larga es el único elemento responsable del conjunto de las patologías observadas en la ALD. Los progresos determinantes, hechos en la ALD, tienen por otra parte repercusiones importantes para todas las leucodistrofias. Efectos de los ácidos grasos de cadena muy larga sobre la mielina. Pr Georg Reiser – Instituto de Neurobiología, Otto von Guericke Universität, Magdeburgo, Alemania La desmielinización del sistema nervioso central es la señal de desordenes neurodegenerativos hereditarios graves, como la adrenoleucodistrofia vinculada al X (XALD). Se ha observado la pérdida de oligodendrocitos productores de mielina y la activación de astrocitos, un tipo de célula importante del cerebro, en la XALD. La acumulación de los ácidos grasos de cadena muy larga (AGTLC) es una característica bioquímica destacada de la X-ALD. Una alteración de la degradación de los AGTLC se ha demostrado que es la responsable de esta acumulación. A pesar de los estudios sobre los problemas clínicos del X-ALD en los pacientes y de investigaciones en animales knock-out X-ALD, el papel celular y neurológico de la acumulación de los AGTLC y sus consecuencias en la enfermedad no están aún claramente establecidas. No sabemos actualmente si los AGTLC, generalmente no tóxicos, están vinculados a la desmielinización y a la inflamación. En nuestro modelo experimental, estudiamos células de cerebro aisladas, es decir, los oligodendrocitos, astrocitos y neuronas, en paralelo. Ya utilizamos este modelo “in vitro” como refe- rencia para el estudio de los ácidos grasos asociados a la enfermedad de Refsum. La acumulación de ácidos grasos saturados en cadenas ramificadas, ácidos fitánico y pristánico, es característico de la grave enfermedad peroxisomal de Refsum. Se observan distintos síntomas neurológicos en estos desordenes, que se producen la mayor parte del tiempo en la adolescencia. Resultados principales. Nuestros estudios demostraron una elevada actividad tóxica de los AGTLC, que conducía a una desregulación cálcica (Ca2+), una disfunción mitocondrial y a la muerte de células cerebrales. Un elevado aumento intracelular de Ca2+, un mensajero secundario muy importante en la célula, puede conducir a numerosas disfunciones de los procesos celulares. Por otra parte, las mitocondrias, quiénes constituyen uno de los centros principales de producción energética de las células, son de un interés muy particular. La exposición a los AGTLC induce una alteración más importante sobre los oligodendrocitos productores de mielina, que sobre las neuronas y las células gliales. Además, tenemos datos demostrando claramente que estos AGTLC inducen la producción de citoquinas proinflammatorias por los astrocitos, lo que causa una inflamación o una desmielinización en el sistema nervioso central. Nuestras investigaciones en curso, concentradas sobre este tipo importante de células que son los oligodendrocitos ponen de manifiesto que los AGTLC, perturban el desarrollo y la maduración de estas células productoras de mielina e implican una desmielinización. Detectamos una modificación muy importante del nivel de las proteínas básicas de la mielina (MBP). La proteína MBP desempeña un papel muy importante en la maduración de los oligodendrocitos y en la formación de la envoltura de mielina. Las anteriores hipótesis postulaban el papel fundamental de los oligodendrocitos en las enfermedades peroxisomales. Estas células son necesarias para garantizar la integridad y la vitalidad axonal. Nuestros resultados establecen la relación entre la acumulación de los AGTLC y la desmielinización observada en la ALD vinculada al X. Además, los datos de los que disponemos permiten postular un receptor de membrana para los AGTLC. Este receptor podría ser responsable de algunos de los cambios observados e inducidos por los AGTLC en la fisiología celular. Detección prenatal de la X-ALD y otras enfermedades peroxisomales. Dr. Richard Jones – Laboratorio de Enfermedades Peroxisomales, Kennedy Krieger Institute, Baltimore MD, EE.UU Las enfermedades peroxisomales constituyen un grupo genéticamente heterogéneo, caracterizadas por una disfunción bioquímica de las vías metabólicas específicas de las organelas. Una de las principales vías peroxisomales es la β-oxidación de los ácidos grasos de cadena larga. La enfermedad más común que implica esta vía es la adrenoleucodistrofia (ALD) vinculada al cromosoma X, que resulta de las mutaciones del gen ABCD1. La frecuencia de la ALD es de 1:17 000 en la población y se caracteriza por manifestaciones a nivel suprarrenal y neurológico. Más del 90% de los pacientes de sexo masculino afectados, desarrollarán una insuficiencia suprarrenal primaria y un 35% de los varones, desarrollarán un desmielinización cerebral inflamatoria, que implicará una grave incapacidad y la muerte antes de la edad de diez años. El tratamiento de esta enfermedad puede ser mejorado por una detección precoz. El diagnóstico de la ALD vinculada al X, se basa en el aumento de los ácidos grasos de cadena muy larga (AGTLC) en los sujetos de sexo masculino o sobre pruebas de ADN para los sujetos de sexo masculino o femenino. Tales exámenes son muy precisos y están disponibles en clínica. Pero hasta ahora, el diagnóstico se basa en la búsqueda de miembros enfermos en la familia y una detección amplia de las familias. Desgraciadamente, este método tiene varias limitaciones: • la enfermedad del primer individuo afectado por ALD en la familia, a menudo ha progresado ya a una fase demasiado avanzada para poder ocuparnos de ella; • el diagnóstico se basa en la definición y el examen de todos los individuos en riesgo de la familia; 9 • como en numerosas enfermedades vinculadas al X, el porcentaje de mutación espontánea es del 5 al 7%, lo que significa que una población importante de pacientes que sufren de ALD no se diagnosticará por el método de detección familiar amplia. La detección en los recién nacidos constituyó un progreso principal para el diagnóstico precoz de numerosos desordenes hereditarios del metabolismo. La mayoría de los programas de detección en los recién nacidos, utilizan actualmente una muestra de sangre depositada sobre una tarjeta, que es enviada a un laboratorio central y analizada en parte por técnicas de espectrometría de masas. Desgraciadamente, tal metodología de medida de AGTLC no permite distinguir de manera fiable el paciente afectado por ALD, de los pacientes sanos. Hemos demostrado recientemente, que la detección de una anomalía en los tipos de otra clase de lípidos con una longitud de cadena de 26 carbonos (los PC-lyso: lisofosfatidilcolinas) puede constituir un diagnóstico de la ALD. La definición de los PC-lyso 26:0 como marcador de diagnóstico posible de la ALD, ofrece un enorme potencial para la detección de esta anomalía genética al nacimiento, antes del principio de las manifestaciones de la ALD, y mucho antes de que la enfermedad progrese sensiblemente. Espectrometría de masa en tándem (TMS) para los lípidos Lyso PC 26:0. El PC lyso es medido por la espectrometría de masa en tándem, una técnica standard aplicada al análisis de muestras de sangre secada, en los programas de detección en el recién nacido. La cuantificación del Lyso- PC 26:0 (que representa menos de un 0,2% de los PC lyso contenidos en la sangre secada) depende de la obtención de un compuesto normal puro, al cual el compuesto natural puede compararse. Utilizamos un compuesto sintetizado especialmente a tal efecto (2H4-26: 0-lysoPC), que es puro al 99,78%. Determinación de la sensibilidad y la especificidad de la prueba de detección. Emprendimos un análisis de las muestras tomadas sobre un número conocido de recién nacidos afectados por la enferme- 10 dad. Éstos procedían de programas de detección realizados sobre los recién nacidos en los Estados Unidos (en los Estados de Maryland, California y Michigan) y en Costa Rica. Un total de 1.194 muestras de sangre secada se han analizado por TMS. Sobre la base de nuestros análisis, 1.178 de entre ellas pudieron clasificarse como normales y 16 como provenientes de sujetos que presentan enfermedades peroxisomales. Las muestras de la categoría de enfermedades peroxisomales, tenían una cantidad media de PC lyso 26:0, 10 veces más elevado que aquélla medida sobre la sangre de los sujetos normales. Durante nuestro análisis en ciego, la muestra de sangre secada de un recién nacido que pertenecía supuestamente al grupo de pacientes que sufrían de ALD no dio un resultado anormal. El nivel PC lyso 26:0 medido era idéntico al constatado en los sujetos normales. Para poder distinguir si se trataba de un falso negativo, se efectuó sobre el ADN extraído de esta muestra de sangre secada del recién nacido, un análisis de la mutación ABCD1. El análisis de ADN, puso de manifiesto que la mutación ABCD1 de este paciente no estaba presente en el ADN aislado procedente de esta sangre. El análisis molecular puso de manifiesto claramente, que la muestra de sangre analizada no procedía de un recién nacido identificado como paciente de ALD y eliminó la posibilidad de un resultado, falso negativo. En esta fase, la prueba de detección se validó y las muestras de sangre de todos los sujetos analizados fueron correctamente identificadas. En esta población limitada en número, y según nuestros datos TMS, no hay identificado ningún sujeto falso negativo o positivo. Futuras direcciones de la investigación. Somos conscientes de que el número relativamente limitado de muestras de sangre sujetas al análisis TMS, no es suficiente para poder validar la adecuación de este método sobre una población mucho más amplia de sujetos. Es necesario efectuar un análisis TMS sobre un número mucho más importante de muestras de sangre procedentes de recién nacidos. Idealmente, este número debería incluir muestras tomadas sobre prematuros al nacimiento, presentando desordenes hepáticos y/u otras complicaciones que pueden afectar al metabolismo de los lípidos. Estudios suplementarios referentes a un grupo mucho más importante de sujetos están en curso, con el fin de determinar la fiabilidad clínica del método en condiciones reales de práctica médica. 5.000 muestras tomadas en el Estado de Maryland están actualmente en curso de análisis por nuestro grupo de Baltimore. Todas las muestras cuyos resultados parecen sugerir una anomalía peroxisomal serán indicadas en el estado de Maryland y estudios de seguimiento detallados serán efectuados sobre estas muestras en el Instituto Kennedy Krieger. Estos estudios determinarán si el resultado anormal observado se debía a una enfermedad peroxisomal o solamente a un resultado “falso positivo”. Prevemos realizar también análisis sobre alrededor de 100.000 muestras anónimas en el laboratorio genético de la Mayo Clinic de Rochester (Minnesota). Cualquier resultado anormal detectado por el método en alta producción, del laboratorio de detección prenatal de Mayo Clinic, será confirmado por nosotros mismos en Baltimore. Estos 100.000 análisis y los otros 5.000 de Maryland, permitirán determinar la especificidad del método. IGF-1 y NT-3 en la terapia de la adrenoleucodistrofia Roberto Mastroeni - BRAIN Mind Institute - Escuela Politécnica Federal de Lausanne, Lausanne, Suiza El adrenoleucodistrofia (ALD) es una enfermedad genética que causa una desmielinización progresiva del cerebro o un ataque de las prolongaciones de los nervios (axones) en la médula espinal. El ratón ALD representa un buen modelo de la forma adulta de ALD llamada adrenomieloneuropatía, que se caracteriza sobre todo por un ataque a los axones de la médula espinal. Evaluamos en este ratón ALD, el potencial terapéutico de la administración de IGF-1 y NT-3, dos proteínas que tienen propiedades tróficas protectoras sobre las neuronas y los oligodendrocitos que fabri- can la mielina. Para probar la eficacia de estas 2 sustancias, hemos recurrido a la inyección de “vectores-medicamento” de la terapia génica, para hacer expresar los genes del IGF-1 y el NT-3 en el líquido cefalorraquídeo de ratones ALD viejos, de 17 meses y que presentan síntomas motores de la enfermedad. Cinco meses después de la inyección de estos “vectores-medicamento”, observamos un efecto terapéutico claro sobre las capacidades motrices de los ratones ALD tratados. El análisis de los ratones puso de manifiesto también que los cables de los nervios en el médula espinal se mielinizan mejor. Estos resultados prometedores abren la vía para prever este enfoque terapéutico en pacientes afectados por AMN. Sin embargo, son necesarios numerosos estudios antes de poder llevar a cabo una prueba terapéutica en los pacientes AMN. Terapia génica de la adrenoleucodistrofia: primeros resultados del ensayo terapéutico. Dra. Nathalie Cartier-Lacave - INSERM U 745, París, Francia El transplante de células madre hematopoyéticas de donante es el único tratamiento eficaz en las formas cerebrales de ALD, cuando se realiza en una fase precoz de la evolución de la enfermedad y se dispone de un donante compatible (de médula ósea o cordón umbilical). En cuanto el gen se clonó, nuestro objetivo consistió en corregir las propias células madre hematopoyéticas de los pacientes, con ayuda de un vector viral para realizar un autoinjerto de células corregidas. El desarrollo de los vectores lentivirales derivados del virus del SIDA, el VIH, volvió esta estrategia mucho más eficaz y nuestros resultados preclínicos nos permitieron presentar una solicitud de prueba terapéutica. En diciembre de 2005, obtuvimos la autorización de la AFSSAPS, para tratar a 5 niños afectados por ALD cerebral con terapia génica. Sus células CD34+ son tomadas y transducidas con un vector HIV-ALD, luego son reinjertadas cuando todas las pruebas de seguridad son normales. Tres niños han 11 sido tratados. Se toleró perfectamente el tratamiento. El porcentaje de leucocitos en sangre (glóbulos blancos) que expresan la proteína ALD normal, es estable y correcto en la sangre de los niños. Todas las pruebas de seguridad realizadas hasta ahora, son satisfactorias. La evolución clínica y radiológica con un retroceso que llega hasta los 16 meses es comparable a la observada más tarde en el grupo de células normales de donante. Estos resultados son muy alentadores. Demuestran que se puede, por terapia génica, estabilizar la ALD cerebral. Es la primera vez que se obtiene, por terapia génica, tal efecto terapéutico, para una enfermedad neurológica grave. Nuestro objetivo consiste en proseguir este ensayo, incluyendo otros dos pacientes, y extenderlo a un mayor número de niños y adultos afectados por ALD cerebral. La producción del vector de grado clínico en cantidad suficiente, es el problema principal en la actualidad, en términos disponibilidad, calidad y coste. Es nuestra prioridad. A más largo plazo, nuestro objetivo consiste también, en demostrar que la terapia génica podría ser eficaz para tratar la AMN del adulto. Trabajamos en la demostración preclínica en modelos animales. ENFERMEDAD DE REFSUM La enfermedad de Refsum adulta: nuevo punto de vista para una vieja enfermedad Dr. Morten Horn – Departamento de Neurología, Oslo University Hospital Ullevål, Oslo, Noruega La enfermedad de Refsum adulta (ARD) fue descrita por primera vez en 1945 por el neurólogo noruego Sigvald Refsum (1907-1991). Los pacientes estudiados por el profesor Refsum estaban muy enfermos y en una fase avanzada de la enfermedad. En realidad, tres de los cinco primeros pacientes a quienes diagnosticó murieron poco después de que se realizara ese diagnóstico. Sobre la base de la descripción inicial de profesor Refsum, los médicos de todo el mundo se esperaban que la ARD fuera una combinación de los siguientes síntomas: retinita pigmentaria (que implica una visión telescópica y una 12 ceguera nocturna, progresivas), polineuropatía crónica (implicando debilidad y entumecimiento de los brazos y piernas) y ataxia (manifestándose por un desorden del equilibrio y los problemas de coordinación de los brazos y piernas). Sin embargo, durante los años 60, una noticia que describía las manifestaciones de esta enfermedad en los pacientes, hizo que se modificara la concepción que tenemos de la ARD. En particular, el importante trabajo del Dr. Brian Gibberd (19312006) permitió mostrar cómo la ARD se desarrolla durante la vida de los pacientes. El Dr. Gibberd identificó y describió alrededor de 40 pacientes en Gran Bretaña y publicó sus resultados en numerosos artículos. Uno de los resultados más importantes puestos en relieve, fue que en casi todos los pacientes, el primer síntoma que debe apreciarse se refería a la ceguera nocturna y a la visión telescópica; los síntomas de la retinita pigmentaria. La pérdida del sentido olfativo (llamada anosmia) era un fenómeno también precoz. Los otros síntomas como la polineuropatía y la ataxia aparecían más tarde durante la enfermedad, a menudo numerosos años después de que los problemas de visión hubieran aparecido. Estas observaciones son importantes, ya que la ARD es una enfermedad que puede tratarse. Si los pacientes mantienen un régimen alimentario con una cantidad reducida en ácido fitánico (es decir, un régimen sin productos lácteos ricos en grasas, ni carne grasa de rumiantes o de pescados grasos), los niveles de ácido fitánico contenidos en el cuerpo caerán y varios de los síntomas de la ARD se mejorarán. Esto es sobre todo cierto en la polineuropatía y la ataxia (perdida del equilibrio y la coordinación de los brazos y piernas), los desordenes cardíacos (perturbaciones del ritmo cardíaco) y problemas de piel (piel seca que se escama). Los problemas de visión y oído, por el contrario, mejorarán raramente con el régimen, pero permitirá a menudo frenar el deterioro progresivo observado en los pacientes no tratados. Comprendemos ahora hasta qué punto un diagnóstico precoz de ARD es importante. Gracias a un diagnóstico precoz, por ejemplo cuando la retinita pigmentaria se diagnostica (los desordenes oculares), el régimen alimentario puede ser prescrito. Así el paciente puede taponar el deterioro de su visión y evitar el desarrollo posterior de los otros síntomas de la enfermedad. Uno de mis propios proyectos de investigación consiste en estudiar pacientes noruegos con retinita pigmentaria y evaluar los niveles de ácido fitánico de la sangre, para confirmar si estos pacientes tienen una forma inicial de ARD. En Noruega, ningún nuevo paciente afectado por ARD se declaró oficialmente durante los 50 últimos años, con relación a los 11 pacientes indicados durante el Segunda Guerra Mundial. Esta es la razón por la que tenemos decidido conducir una búsqueda de nuevos pacientes y pensamos encontrarlos entre los enfermos afectados por retinita pigmentaria. Como médico, considero que la comunidad médica debe modificar su manera de pensar sobre la ARD. Actualmente, esta enfermedad es sobre todo del ámbito de los neurólogos. Pero como explicábamos arriba, a menudo el neurólogo solamente ve al paciente de ARD varios años después de que la enfermedad se manifestara por primera vez en este paciente. Sería quizá más juicioso tratar esta enfermedad como una enfermedad ocular donde los problemas neurológicos pueden ocurrir como complicaciones, si el paciente no se trata suficientemente pronto. De esta forma podríamos esperar identificar a los pacientes de manera más precoz para poder tratarlos, de modo que no se produjeran complicaciones irreversibles. Taller MLD y demás leucodistrofias lisosomales MLD Hacia un ensayo de terapia génica por transferencia intracerebral del gen Dr. Caroline Sevin - INSERM U 745, París, Francia La Leucodistrofia Metacromática (MLD) es una enfermedad desmielinizante y mortal vinculada a una sobrecarga lisosomal causada por un déficit en la arisulfatasa-A (ARSA). Contamos con el precedente, de que la transferencia intracerebral del gen ARSA utilizando un vector adeno-asociado (AAV5/ARSA), corrige la enfermedad en el modelo de ratón MLD. Antes de lanzar una aplicación clínica, era imprescindible una etapa que consistía en evaluar la viabilidad, la eficacia y la seguridad de la transferencia intracerebral del gen AAV/ARSA en un cerebro de mayor importancia y más cercano al tamaño del cerebro de un niño. Debido a la falta de este tipo de modelo animal para la MLD, utilizamos a un primate no humano para este estudio. El vector AAV5-ARSA se inyectó en 3 zonas seleccionadas de la sustancia blanca o los núcleos de sustancia gris subcorticales del hemisferio derecho de los monos. Los animales se estudiaron durante 3 meses después de la inyección. La intervención se toleró bien y los exámenes neurológicos y clínicos siguieron siendo normales durante toda la duración de la experimentación. Las inyecciones intracerebrales, implicaron una amplia difusión del vector que recombinaba (del 35 a un 45% del hemisferio inyectado). La enzima ARSA fue suficientemente expresada, principalmente en las neuronas de corteza cerebral y los núcleos subcorticales, con diferencias mínimas observadas entre los animales. La actividad del ARSA se ha aumentado significativamente del 50 al 65% del hemisferio inyectado. Se ha indicado un proceso inflamatorio muy moderado limitado a la zona de la inyección. En su conjunto, los resultados de este estudio en los primates son muy alentadores y sugieren que la inyección intracerebral del vector AAV/ARSA podría ser muy beneficiosa para los niños afectados por las formas infantiles más graves y formas juveniles precoces de la MLD. Utilizamos un nuevo serotipo de AAV para la última fase de nuestro estudio preclínico, que demostró una mayor eficacia que el vector AAV5 en lo que se refiere a la difusión en el cerebro (gracias a la mejor difusión del vector y una mejor expresión de la proteína terapéutica). Recientemente demostramos que la inyección intracerebral de este nuevo vector, conduce a mejores resultados en los ratones MLD que el vector anterior AAV5/ARSA (en términos de difusión y de expresión del ARSA 13 recombinante, de corrección de la sobrecarga en sulfátidos y lesiones neuropatológicas del SNC). Un estudio clínico a largo plazo en ratones MLD está en curso. Un lote de tipo “clínico” del vector AAV/ ARSA, está actualmente en curso de producción y se utilizará pronto para efectuar los últimos estudios pedidos por la AFSSAPS, antes de prever la utilización clínica de nuestro enfoque de terapia génica: • estudio (eficacia y seguridad) en los primates; • estudios toxicológicos y de biodistribución en las ratas y los primates. Nuestro objetivo final consiste en presentar a finales de 2010 a la agencia francesa de seguridad sanitaria AFSSAPS, una solicitud de autorización de terapia génica (IND) destinada al tratamiento de pacientes afectados por la forma infantil tardía de la MLD, a una fase precoz de la enfermedad. Terapia génica con células madre hematopoyéticas para el tratamiento de las Leucodistrofias Metacromáticas Dra. Alessandra Biffi - Telethon Institute for Gene Therapy, Milán, Italia La Leucodistrofia Metacromática es una enfermedad causada por un déficit hereditario de la arisulfatasa-A (ARSA). Dado que no existe ninguna terapia actualmente eficaz, la necesidad médica para la MLD se hace muy urgente. Pusimos de manifiesto recientemente que en el ratón, el trasplante de células madre hematopoyéticas (CSH, células de origen de los componentes sanguíneos) corregidas por vectores de terapia génica de última generación (dichos lentivirus, LV) permiten transportar las enzimas lisosomales al sistema nervioso de ratones enfermos. El tratamiento permite prevenir y corregir las manifestaciones funcionales y patológicas y el déficit neurológico ya establecido en la MLD, cuando se aplica a las fases presintomática y sintomática respectivamente. El grado de eficacia de la terapia génica depende de los tipos de actividad enzimática en las células CSH y de los órganos objetivos, reforzando pues el concepto que la única ventaja de la terapia génica se debería a la expresión de la enzima ARSA funcional en las células CSH en cantidad superior a la de los donantes 14 sanos. Tenemos también optimizado la corrección de los genes de CSH humanas, gracias a un LV a gran escala, cuyo objetivo es obtener una transferencia del gen y una sobre expresión de la enzima eficaces en las células. La reproductividad y la seguridad del protocolo de transducción han podido ser demostradas sobre modelos adaptados. La producción de vectores LV de grado clínico se optimizaron para permitir una producción de LV a gran escala, con un alto título y de alta calidad. A partir de estos datos estamos estableciendo una prueba de terapia génica que utiliza CSH en pacientes afectados de MLD. No estando disponible ninguna norma, para definir los criterios a los cuales un paciente debe responder, para convertirse en candidato de la primera fase experimental clínica de terapia génica en la MLD, tuvimos en cuenta a la vez, la información obtenida por nuestro estudio, de la historia natural de la enfermedad y algunas consideraciones éticas sobre la enfermedad. Durante los seis últimos años, hemos estudiado la historia natural de la MLD sobre una amplia gama de pacientes. Nuestra observación clínica e instrumental confirmó que los pacientes que presentan una forma precoz de la enfermedad (infantil tardía y juvenil precoz) presentan una progresión clínica homogénea y muy rápida, mientras que los pacientes afectados por formas más tardías (juvenil tardía y adulta) se presentan más heterogéneos, aunque caracterizados por una estabilidad relativa de la enfermedad. Según estos datos, los pacientes que sufren las formas precoces podrían tener una mejor relación beneficio/riesgo, teniendo en cuenta la severidad de la enfermedad. Al contrario, en los pacientes cuya enfermedad comienza en una fase tardía, sería más difícil distinguir entre el beneficio clínico potencial y la evolución natural y benigna de la enfermedad. En cuanto a las consideraciones éticas relacionadas con la MLD, favorecimos los principios de autonomía, benignidad y malignidad. Estos principios precisan que, en el caso de una enfermedad como la MLD donde el tutor debe dar su consentimiento, y donde el tratamiento es irreversible con graves riesgos potenciales, la prueba clínica debe contemplar la aportación de un beneficio clínico significa- tivo a los pacientes. Esta es la razón por la que, habida cuenta de las consideraciones éticas, introduciremos parámetros de eficacia clínica en el diseño de la prueba. Prueba clínica de la terapia por sustitución enzimática en el tratamiento de las leucodistrofias metacromáticas. Dra. Christine Dali - Dept. of Clinical genetic, Copenhague University Hospital, Copenhague, Dinamarca Trece niños (5 niños y 8 niñas) afectados por la forma infantil tardía de la MLD (edad media de 34 meses; intervalo 24 a 59) participaron en la fase I/II de una prueba clínica abierta de enzimoterapia sustitutiva a dosis crecientes. La arisulfatasa-A humana recombinanda (rhASA) se les ha administrado por vía intravenosa una vez cada 2 semanas durante 52 semanas. Cuatro niños recibieron una dosis baja (0,625 mg/kg), cinco una dosis media (1,25 mg/kg) y cuatro una dosis elevada (2,50 mg/kg); no existía grupo placebo. Diez de los 13 niños que participaban en el estudio, presentaban una forma avanzada de la enfermedad al principio. Once niños terminaron la prueba; dos la detuvieron debido a la progresión de la enfermedad y de su incapacidad para poder viajar las semanas 18 y 30 respectivamente. Las perfusiones de enzimas se toleraron bien en general y pudo proseguirse la prueba ininterrumpidamente, durante toda su duración. Siete niños desarrollaron reacciones vinculadas a las perfusiones, de intensidad ligera a moderada y de naturaleza transitoria. Estas reacciones se caracterizaban por fiebre baja, náuseas y vómitos, palidez, malestar y erupciones por urticaria, aisladamente o combinadas. Los síntomas fueron tratados con medicamentos o por tratamientos preventivos, según los casos. Un análisis mostró la presencia de anticuerpos al rhASA en estos 7 niños. El análisis de biomarcadores potenciales en el líquido cefalorraquídeo (LCR) reveló una reducción de los niveles de galactocerebrósido-3-sulfato (sulfátido) en el grupo de pacientes que recibieron elevadas dosis, que apareció en el transcurso de la semana 10 y alcanzó un valor mínimo en semana 26, manteniéndose duraderamente hasta el semana 52. No pudo ob- servarse durante la prueba ningún efecto fácilmente perceptible de la enzimoterapia sustitutiva, sobre las funciones motrices o cognoscitivas. Un grupo placebo, sería necesario en paralelo, para poder detectar los posibles efectos beneficiosos de la enzimoterapia sustitutiva, sobre el grado de progresión clínica en el caso de una enfermedad avanzada. Concluimos que el rhASA puede administrarse sin riesgo por vía intravenosa a los niños afectados por MLD en la forma infantil tardía, en períodos que pueden llegar hasta las 52 semanas. Una respuesta farmacológica que consiste en una reducción de los niveles de sulfátidos del LCR se produce a dosis de 2,50 mg/kg de rhASA administrada una semana sobre dos. Para demostrar los beneficios clínicos de esta terapia, una nueva prueba clínica, actualmente en preparación, estudiará probablemente administraciones semanales de la enzima por vía intravenosa y una exposición a tasas más elevadas, en los pacientes que presentan una forma precoz de la enfermedad; se exigirá un grupo control placebo, probablemente en paralelo. KRABBE Test de eficacia de un transplante de células madre neuronales unido a una terapia génica y farmacológica para tratar la enfermedad de Krabbe. Dra. Angela Gritti - HSR-TIGET, Fondazione San Raffaele del Monte Tabor, Milán, Italia La leucodistrofia de células globoides (GLD) es un desorden neurodegenerativo genético grave, que afecta al sistema nervioso central y periférico y los órganos viscerales, causado por una deficiencia de la enzima lisosomal GALC. La GLD es una afección global que necesita de nuevas estrategias combinadas, para determinar los distintos emplazamientos de la enfermedad en el momento conveniente durante su evolución. Más aún, dada la desmielinización extendida y el daño de los tejidos orgánicos que caracterizan la GLD (resultando también una fuerte neuro-inflamación), recurrir a las terapias destinadas a una reparación cerebral, parece esencial para poder curar completamente la enfer- 15 medad. Las células madre neurales (NSC), aparecen como la norma de referencia que debe utilizarse en la terapia celular sobre reparación cerebral de varias enfermedades neurodegenerativas. Proponemos explotar la biología particular del NSC (autorenovación y expansión “in vitro”, multipotencia, capacidad para expresar moléculas terapéuticas después de la corrección del gen “in vitro” y después del trasplante en el cerebro huésped, integración en el SNC y reparación de los tejidos, actividad immunomoduladora) unido a una terapia génica (con el fin de obtener una sobreexpresión estable de la GALC en el células del donante y/o para aportar directamente la GALC en el SNC) y una terapia farmacológica (con el fin de reducir la inflamación en el SNC del receptor). El objetivo final es corregir la anomalía metabólica, restaurar la actividad enzimática, la desmielinización extensa y los daños del SNC en los modelos murinos de GLD, reproduciendo la gravedad y la progresión rápida de la enfermedad humana. Este proyecto, abre nuevas perspectivas para el desarrollo de protocolos de terapias celulares/génicas, combinadas en el tratamiento de enfermedades de sobrecarga lisosomal, con una implicación neurológica. Si tal investigación resulta eficaz, la disponibilidad de NSCs humanos en la comunidad científica garantizaría un desarrollo rápido de este estudio hacia experimentaciones preclínicas y clínicas. Taller Síndrome de CACH - Enfermedad de Alexander - MLC SÍNDROME DE CACH. El nuevo modelo de ratón creado para el estudio del Síndrome de CACH muestra anomalías específicas. Pr Orna Elroy-Stein - Dept. of Cell Research & Immunology, George S. Wise Faculty of Life Sciences, Tel Aviv, Israël Los elementos de base de la producción de mielina, aislante de las fibras nerviosas, son códigos para los genes. La mutación genética en un código crítico de información genética asociada conduce a 16 una producción menor o anormal de mielina que se deteriora progresivamente sin que pueda producirse su reemplazo. La ataxia infantil con hipomielinización del SNC (CACH: Chilhood Ataxia with CNS Hypomyelination), también conocida bajo el nombre de síndrome de sustancia blanca evanescente (VWM: Vanishing White Matter), designa a las “leucodistrofias vinculadas a mutaciones en elF2B” según el nombre del gen mutado. Es interesante tener en cuenta que el gen elF2B no está directamente implicado en la formación de la mielina, pero es indispensable para la síntesis general de proteínas, un proceso fundamental y común a todas las células vivas. Es pues sorprendente que una mutación de este gen no sea peligroso para los otros tipos de células del cuerpo, como es el caso de las células gliales mielinizantes del cerebro. Con el fin de incluir la disfunción de las células con mutaciones elF2B, comenzamos nuestra investigación utilizando células procedentes de biopsias de piel tomadas sobre niños enfermos o sanos. Hemos descubierto que las células procedentes de pacientes son hipersensibles a la tensión fisiológica. Para incluir cómo esta respuesta anormal a la tensión celular podría afectar a la formación y el mantenimiento de la mielina, debíamos estudiar las células cerebrales que por supuesto no pueden proceder de pacientes humanos. Generamos pues un modelo de ratón para la enfermedad utilizando técnicas avanzadas de genética para introducir en su genoma una mutación específica (nombrada “knock-in”) en el gen codificado para la subunidad catalítica de elF2B (elF2B5). Este ratón “knock-in” (KI) elF2B5 homocigoto genéticamente modificado constituye el primer modelo animal disponible para el estudio de las leucodistrofias vinculadas a las mutaciones en elF2B. Estos ratones experimentales ofrecen por primera vez una única posibilidad de estudiar el efecto de la mutación sobre la bioquímica del cerebro. Los ratones presentan defectos de las funciones motrices a una edad precoz, pero sus síntomas neurológicos son moderados, tal como ocurre con la forma tardía de la enfermedad en el hombre, destacando la importancia de la tensión medioambiental en la progresión de la enfermedad. Varias series secuenciales de IRM que permiten seguir el desarrollo del cerebro y analizar las diferencias cuantitativas de las distintas regiones sobre el cerebro entero, mostraron el desarrollo retrasado y anormal de regiones específicas del cerebro. Además se puso de relieve en estos ratones una disfunción celular de los astrocitos, que representan un tipo específico de células cerebrales gliales que sostienen las neuronas. Los ratones elF2B5-KI van a permitir abordar las cuestiones vinculadas al reglamento de la síntesis proteica durante los procesos clave de formación y mantenimiento de la mielina. El estudio profundizado de los aspectos fundamentales de mielinización y de su control constituye una etapa importante en la puesta a punto de una terapia para las leucodistrofias vinculadas a mutaciones en elF2B y otras enfermedades asociadas a la mielina. Los ratones son también una herramienta experimental potente para estudiar el papel de la tensión medioambiental sobre la progresión de enfermedad y un modelo animal de importancia para el cribado de medicamentos en el futuro. ENFERMEDAD DE ALEXANDER. Enfoques terapéuticos, farmacológicos y shARN, en modelos celulares y animales de la enfermedad de Alexander. Dra. Danielle Pham-Dinh - INSERM U975, París, Francia. La enfermedad de Alexander se debe a mutaciones en el gen que codifica el GFAP, proteína del citoesqueleto del astrocito. Las mutaciones implican la formación de agregados o inclusiones (las fibras de Rosenthal) que contienen GFAP, ubiquitina y pequeñas proteínas de la tensión (Hsp27 y αB-cristalina ). Los sistemas destinados a doblar (chaperonas, especialmente HSP40 y HSP70) o deteriorar (sistema ubiquitina-proteasoma y autofagia) las proteínas defectuosas, se ponen en juego en numerosas enfermedades neurodegenerativas vinculadas a agregados proteicos. Era probable que estos sistemas estuvieran implicados en la enfermedad de Alexander, como lo sugiere el marcado de las fibras de Rosenthal por anticuerpos antiubiquitina, Hsp27, αB-cristalina, como ha sido recientemente demostrado por otros equipos. Construimos un modelo celular de la enfermedad de Alexander expresando el GFAP transferido fusionado a GFP en distintos tipos celulares (astrocitos murinos, celulas U373, SW13). La proteína transferida forma agregados inmunorreactivos para anticuerpos antiHsp27, αB-cristalina y ubiquitina, como en otros modelos publicados. Por otra parte, experiencias de videomicroscopio nos muestran que los agregados de GFPGFAP transferido son inestables en un 10% de las células transfectadas, incitándonos a buscar la implicación de las vías de repliegue/degradación de las proteínas anormales. Los inmunomarcajes de estas células ponen de manifiesto que: • los marcadores de la autofagia mTOR y ATG5 están colocalizados con los agregados, • HSP40 y HSP70 están colocalizados con los agregados, • Metacromática70, mediador de la autofagia chaperona-dependiente, está colocalizada con los agregados en presencia de lactacistina. La implicación de las vías de repliegue/degradación en los procesos de desagregación de las proteínas anormales es abordada también en nuestro modelo gracias a la utilización de drogas inductivas o inhibidoras. Las drogas que inhiben el sistema ubiquitina-proteasoma (lactacistina, MG132) y la autofagia (3-metiladenina, bafilomicina A) aumentan la agregación de GFAP, mientras que las drogas que inducen la expresión de las chaperonas HSP70 y HSP40 (geldanamicina, 17DMAG, celastrol) y las que inducen la autofagia (rapamicina, trehalosa) lo disminuyen. Estas vías son pues objetivos farmacológicos potenciales. La estrategia de la extinción del DNA de GFAP por una construcción lentiviral shanti-GFAP (colaboración con J. Mallet) se probó también “in vitro” con éxito. Los enfoques farmacológicos y de interferencia del DNA se aplicarán a dos ratones KI que expresarán mutaciones diferentes del GFAP. 17 Investigación en curso relativa a los enfoques terapéuticos para la enfermedad de Alexander. Dr Albee Messing - Waisman Center, University of -Madison wisconsin, Madison, WI, los EE.UU. La enfermedad de Alexander es una enfermedad generalmente mortal que resulta en casi todos los casos de mutaciones en un único gen, el GFAP (proteína ácida fibrilar glial). En alrededor de los dos tercios de los pacientes, la enfermedad se declara durante los dos primeros años de la vida, y la mitad de estos pacientes afectados mueren antes de la edad de 6 años. El GFAP forma parte de una amplia familia de genes conocido bajo el nombre de “filamentos intermediarios”, entre los cuales se encuentran las queratinas del cabello, de la piel y otras proteínas. Aunque el GFAP esté presente en varios tipos celulares del organismo, es más abundante en los astrocitos, uno de los principales tipos celulares del cerebro y de la médula espinal. Qué papel desempeña el GFAP normalmente en los astrocitos, y cómo las mutaciones cambian las funciones proteicas y celulares para desencadenar la enfermedad, son las principales cuestiones que permanecen actualmente sin respuesta. Una serie de observaciones indican que al menos uno de los efectos del GFAP transferido es inducir un aumento de la cantidad total de GFAP en los astrocitos. Propusimos que si este aumento alcanza niveles suficientemente elevados, se vuelve tóxico para los astrocitos, causando efectos secundarios nocivos a la vez para las neuronas y los oligodendrocitos (las células que fabrican la mielina). Para facilitar la investigación sobre los cambios celulares y moleculares en el origen de la enfermedad de Alexander, desarrollamos varias razas de ratón de excepción que simplifican los estudios sobre las funciones de los astrocitos y las respuestas vinculadas a las lesiones. Una de ellas se concibe para permitir una medida rápida de la primera fase en la actividad génica - la producción de ARNm a partir del ADN. Otros tipos de razas implican las mutaciones comunes asociadas a la enfermedad de Alexander en sus propias copias 18 del gen GFAP, y desarrollan fibras de Rosenthal en los astrocitos, como en aquéllas que se forman en los pacientes humanos. En un modelo experimental, prácticamente todos los ratones se mueren a una edad precoz, es decir, de 4 a 5 semanas después de su nacimiento. Nuestro laboratorio desarrolla dos líneas de investigación para la puesta a punto de tratamientos contra la enfermedad de Alexander. La primera tiene por objeto encontrar compuestos o medicamentos que detengan la producción de GFAP, según la hipótesis de que una reducción de la producción de la proteína mutante, implica una reducción de los niveles totales por debajo del límite máximo tóxico, lo que reduciría la patología y los síntomas. Concebimos un sistema de cultivo de los astrocitos que permite el cribado de un gran número de compuestos sobre un corto período. Inicialmente, nuestros esfuerzos se concentraron en las colecciones ricas en medicamentos de uso humano ya aprobadas por el FDA (organismo oficial americano encargado de controlar la calidad de los alimentos y expedir las autorizaciones de comercialización de los productos farmacéuticos), o sobre productos naturales para los cuales la autorización del FDA no es obligatoria (un total de 2.880 medicamentos o compuestos). De esta manera, los medicamentos dados por prometedores podrían utilizarse en futuras pruebas clínicas sin tener que sufragar los costes prohibitivos a menudo asociados al desarrollo completamente nuevo de compuestos. Tales costes son actualmente uno de los obstáculos principales para la puesta a punto de nuevos tratamientos para las enfermedades raras como la enfermedad de Alexander. Una segunda estrategia potencial para el tratamiento implica una manipulación de la “respuesta a la tensión” de los astrocitos, que representa una alteración de la actividad de centenares de genes que se producen naturalmente en las células expuestas a una variedad de agresiones o de lesiones. Constatamos que la producción de GFAP mutante y la acumulación de GFAP a niveles anormalmente elevados, exige esta respuesta de los astrocitos. Se puede considerar que algunos aspectos de esta respuesta representan un medio para los astrocitos de protegerse de lesiones futuras. Al utilizar los modelos de ratón de la enfermedad de Alexander, descubrimos que aumentar la producción de una proteína de tensión, conocida bajo el nombre de αB-cristalina, asegura una protección espectacular contra los efectos por otra parte mortales de la mutación y el exceso de GFAP. MLC La Leucodistrofia megalencefalica con quistes subcorticales: de una enfermedad nueva hacia el gen y la proteína. Pr Marjo van der Knaap - Department of Child Neurology, VISTO University Médico Center, Amsterdam, Países Bajos. El leucodistrofia megalencefálica con quistes subcorticales (MLC) se ha descrito por primera vez como enfermedad de pleno derecho en 1995. Los pacientes presentan un estado normal al principio, luego desarrollan una macrocefalia durante el primer año de vida. En esta fase, la IRM del cerebro ya indica anomalías impresionantes de la sustancia blanca cerebral, aunque el estado de los pacientes sigue siendo normal o presenta solamente un retraso moderado. Al cabo de algunos años, el deterioro neurológico gradual comienza por una ataxia y una espasticidad lenta y progresiva, conduciendo generalmente a una dependencia de silla de ruedas en una edad situada entre los 10 y 20 años. Los parámetros del IRM indican que el contenido en agua de la sustancia blanca aumenta mucho. La patología cerebral presenta innumerables vacuolas dentro de la sustancia blanca cerebral, asociada a una división de la mielina y a la formación de vacuolas intramielínicas. Sobre la base de los criterios de IRM, seleccionamos pacientes y recogimos muestras de ADN de estos pacientes y sus familias. Efectuamos un estudio genético e identificamos en 2001 un gen para el MLC: el MLC1. Existen todo tipo de mutaciones; numerosos pacientes presentan mutaciones nulas. Hasta ahora, no pudo encontrarse ninguna relación genotipo-fenotipo. El gen codificado por una proteína mem- branaria, se expresa en el cerebro y en los glóbulos blancos. El grupo de investigación del Dr. Estevez y el nuestro descubrió que la proteína MLC1 se sitúa en el cerebro en extremidades astrocitarias, en la barrera hematoencefálica y en el líquido cefalorraquídeo-cerebral. La función de esta proteína sigue siendo desconocida hasta ahora. En un 25% de los pacientes afectados por MLC, no se ha observado ninguna mutación de MLC1. Estos resultados indican que hay al menos otro gen responsable de MLC. Los estudios genéticos efectuados por nosotros mismos o por otros y el análisis de genes candidatos no permitieron la definición de un segundo gen para el MLC. La Leucodistrofia megaloencefálica: principio de reflexión hacia pruebas terapeúticas. Dr. Raul Estévez - Departamento de Ciències Fisiològiques II, University apagado Barcelona, Hospitalet de Llobregat, España. La Leucodistrofia Megaloencefálica con quistes subcorticales (MLC) es un tipo raro de leucodistrofia, generalmente causado por mutaciones en el gen MLC1. La función de la proteína MLC1 es completamente desconocida, aunque se haya mencionado un vínculo con los flujos de los canales iónicos al respecto. Nuestro grupo ha contribuido a incluir la localización exacta de la proteína MLC1 en los vertebrados y a explicar la alteración bioquímica causada por las mutaciones MLC. Estos últimos trabajos indican que la MLC es una enfermedad conformacional y sugieren que las estrategias farmacológicas destinadas a mejorar la expresión del MLC1 podrían ser útiles para tratar a algunos pacientes afectados de MLC. Comentaremos brevemente nuestros trabajos anteriores, y también las tres direcciones hacia las cuáles pensamos proseguir nuestras investigaciones sobre el MLC: los genes/proteínas importantes para la función de MLC1, y los modelos celulares y animales de la enfermedad MLC basados en un defecto de proteína MLC1. Conduciremos un debate sobre la forma en que el estudio de estos modelos podría aportar indicaciones sobre la fisiopatología de la enfermedad y el desarrollo de futuras pruebas que tienen por objeto encontrar una terapia para los pacientes 19 afectados por MLC. Taller PMD - LD Indeterminadas PMD Estudio de los mecanismos de empalme en el PMD. Pr Franca Cambi - Department of Neurology, Univ. Of Kentucky College of Medicine, Lexington, KY, USA La proteolipoproteina (PLP) y el DM20 son las principales proteínas de la mielina, producidas a partir del mismo gen (PLP1) por empalme alternativo, un proceso que permite a las distintas proteínas producirse a partir de un gen único. El PLP se convierte en la proteína principal de la mielina en el sistema nervioso central en desarrollo o adulto. Aunque el PLP y el DM20 difieren de 34 aminoácidos solamente, que están ausentes en el DM20, el PLP ejerce funciones importantes en las interacciones entre los axones (cables de los nervios) y la mielina (aislante en torno a los axones) contrariamente al DM20. Las muchas determinadas mutaciones en el gen PLP1 son la causa de la enfermedad de Pelizaeus-Merzbacher y la paraplejia espástica de tipo 2 (PMD/SPG2). Se demostró que las mutaciones que afectan al empalme alternativo del PLP/DM20 eran responsables del PMD/SPG2. Específicamente, todas estas mutaciones reducen la abundancia de PLP y se asocian a la enfermedad humana. Nuestros trabajos se han concentrado en el reglamento del empalme alternativo del PLP por la caracterización de las secuencias reguladoras en el DNA del PLP y los factores proteicos que obran recíprocamente con estas secuencias. Adoptamos los dos enfoques siguientes: 1) examinar cómo los cambios que ocurren en los pacientes afectados por PMD afectan al empalme de PLP; y 2) introducir mutaciones en la región específica del PLP y analizar su papel en el empalme de PLP/DM20. Por el análisis de las mutaciones PMD, hemos podido definir secuencias importantes que mejoran el empalme alternativo del PLP. Presentaremos nuestros resultados obtenidos en un ratón que hemos modificado genéticamente para que lleve una supresión de la secuencia de DNA que controlará el em- 20 palme y pondrá de manifiesto que la pérdida de esta secuencia altera la cantidad de PLP fabricada en el cerebro, implicando una función motriz y una estabilidad de la mielina insuficientes. El análisis sistemático de las mutaciones en el DNA específico de PLP nos permitió definir un grupo de secuencias y de factores de empalme que mejoran mucho el DM20. Presentaremos datos sobre el papel de estos factores y secuencias de reglamento del empalme del PLP/DM20 en los oligodendrocitos, las células que fabrican el PLP/DM20 y que producen la mielina. En resumen, creamos un modelo de ratón PMD en el que la enfermedad es causada por la alteración del empalme de PLP/DM20, que podrá explotarse en futuras pruebas terapéuticas, e identificamos las proteínas que controlan el empalme del PLP/DM20 que podrán ser el objetivo de intervenciones destinadas a reconstituir la cantidad normal de PLP. Perspectivas para la terapia de la enfermedad de Pelizaeus- Merzbacher (PMD). Dr James Garbern - Wayne State University, School of Medicine, Detroit, MI, USA. Aunque actualmente no existe ningún tratamiento específico para el PMD, prevemos que las terapias futuras deberán concebirse en función del tipo específico de mutación que afecta a cada persona. Los pacientes que sufren la forma más severa de PMD presentan generalmente mutaciones del gen PLP1 que implican la producción de una proteolipoproteina anormal 1 (PLP1). El Dr. Alex Gow, uno de mis colegas de la universidad Wayne State en los Estados Unidos, descubrió que las células que producen la mielina (los oligodendrocitos) se debilitan y degeneran debido a la activación de una respuesta bioquímica llamada “Respuesta UPR” (Unfolded Protein Response). El Dr. Gow utiliza actualmente modelos animales de PMD para probar medicamentos que reducen la activación de la respuesta UPR, esperando que esto pueda reducir la cantidad de oligodendrocitos degenerados y permitir sintetizar la mayor cantidad de mielina. El enfoque más prometedor para una terapia eficaz en las formas más severas de PMD en el niño es probablemente el trasplante de células. El obstá- culo principal a esta terapia por trasplante celular es probablemente la dificultad de establecer suficientemente las células en un número suficiente de regiones del sistema nervioso sin crear aún más lesiones. Varios grupos, incluso el de Dr. Steven Goldman a la Universidad de Rochester (los EE.UU), pudo obtener resultados impresionantes utilizando progenitores de células gliales humanas (un tipo de célula madre) para tratar los ratones portadores de una enfermedad genética de la mielina, con una buena mejora neurológica y una más larga duración de vida. Los muchachos afectados por formas graves de PMD, que tienen generalmente muy pocos oligodendrocitos sanos, podrían ser los mejores candidatos para el trasplante de células madre (o idealmente de progenitores oligodendrocitarios). En EE.UU hay notables progresos en este ámbito y una sociedad líder en el ámbito de terapias por células madre recientemente recibió la autorización de la FDA americana de proceder al primer ensayo clínico que utiliza células madre sobre pacientes afectados por PMD. Encontrará este anuncio en la dirección http://www.stemcellsinc. com/news/081218.html PLP1. En el caso de pacientes con duplicación del PLP1, para los cuáles seguramente está producida una excesiva cantidad de PLP1, el tratamiento ideal sería desarrollar terapias que reducen la cantidad de proteína PLP1 fabricada por los oligodendrocitos. Una terapia potencialmente eficaz consistiría en utilizar pequeñas moléculas inhibidoras de DNA (ARNi), que han sido descubiertas por el Dr. Fuego y Mello, Premio Nobel de medicina en 2006. El ARNi debería reducir específicamente la cantidad de gen PLP1 expresado, idealmente a su nivel normal, lo que debería normalizar la mielina. La dificultad consiste en aportar este ARNi a las células sin riesgo y sin causar efectos secundarios tóxicos. El Dr. Duncan de la universidad del Wisconsin, y otros científicos, trabajan en probar este tipo de terapia en los modelos animales de PMD. El tratamiento a base de ARNi debería también ayudar a los pacientes que sufren de graves formas de PMD, puesto que sabemos que un déficit total en PLP1 causa ataques menos severos que cuando la producción de PLP1 es excesiva o existen graves deficiencias de la proteína PLP1. En colaboración con el Dr. Skoff (uno de los participantes en el coloquio de ELA en 2008), proseguimos nuestros trabajos sobre algunos de los excelentes modelos animales de PMD, especialmente sobre la forma de PMD con duplicación del gen PLP1. El Dr. Skoff pudo poner de manifiesto que la ignición desempeña un papel importante en la progresión de la enfermedad. Más importante aún, constató que algunos medicamentos absorbidos por vía oral eran eficaces para retrasar la progresión de la enfermedad. El Dr. Skoff constató también que los ratones que producen demasiada cantidad de PLP1 desarrollaban una ignición cerebral, lo que aún no había sido observado anteriormente en el PMD. Puesto que los ratones genéticamente desprovistos de defensas inmunitarias y teniendo una excesiva cantidad de PLP1 presentan un síndrome neurológico más reducido (como lo demostró el grupo del Dr. Rudolf Martini en Alemania), es posible que los medicamentos antiinflamatorios puedan ser útiles en los pacientes que presentan una duplicación del gen El Dr. Saher y Nave en Alemania prueban medicamentos destinados a hacer bajar el colesterol para ver si éstos pueden también hacer bajar la cantidad de PLP1 en los modelos animales de PMD. El Dr. Robert Skoff de la universidad Wayne State hizo algunos descubrimientos importantes: existen efectos también metabólicos indirectos inducidos por una cantidad excesiva de PLP1. Constató que el exceso de PLP1 deteriora las mitocondrias, las estructuras subcelulares, fabricando la adenosina trifosfato (ATP), un compuesto esencial que proporciona la energía para las numerosas reacciones bioquímicos de las células. El Dr. Skoff prueba tratamientos que permiten mejorar la función mitocondrial, y mantener un buen estado alimenticio en los ratones. De manera asombrosa, la mielina se produce en personas que no pueden producir ningún PLP1 (se habla de cambio PLP1 nulo), y sus síntomas neurológicos no son tan graves que los de la mayoría de pacientes afectados por PMD. Dado que los oligodendrocitos no degeneran en las personas que presentan cambios nulos, la terapia 21 por transplante celular no puede ser eficaz. Por el contrario, la terapia génica por transferencia de un gen PLP1 normal puede ser eficaz. Las personas que presentan un síndrome nulo tienden a conocer un deterioro más rápido, comenzando típicamente en la adolescencia. Pensamos que la razón principal de este deterioro es el decaimiento de los axones o de las fibras nerviosas. Terapias que permiten retrasar o impedir el decaimiento axonal deberían ser muy útiles. Estas estrategias neuroprotectoras podrían ser también útiles en otras enfermedades neurológicas. Las terapias potenciales incluyen los factores neurotróficos y las proteínas asimilables a hormonas que son importantes para la salud neuronal. En las personas que presentan un síndrome nulo debido a mutaciones sin sentido (un tipo específico de mutación por la cuál la célula produce un PLP1 más corto), existen medicamentos en curso de evaluación en otras enfermedades genéticas, pudiendo ayudar a la célula a superar el error genético para permitirle producir al menos una proteína PLP1 parcialmente funcional. Existen excelentes modelos animales para cada uno de los diferentes tipos de PMD. Si algunos de los estudios animales son coronados con éxito, deberíamos estar en condiciones de empezar la evaluación de estos distintos tratamientos en las personas afectadas por PMD. LEUCODISTROFIAS INDETERMINADAS Hacia la definición de un nuevo gen implicado en la leucodistrofia autosómica dominante de inicio en adulto. Dr. Alfredo Brusco - University apagado Turín, Dept. of Genetics, Biology and Biochemistry, Turin, Italia. Las leucodistrofias son, en la mayoría de las enfermedades, infantiles o juveniles. Pero hay una enfermedad que es la excepción a esta norma, es una forma muy rara de leucodistrofia llamada leucodistrofia dominante autosómica (ADLD) que se declara a los 40/50 años. Los primeros síntomas se manifiestan por una disfunción de las funciones intestinales y urina- 22 rias, por la impotencia y por caídas súbitas de tensión arterial cuando el paciente pasa de la posición dormida a la posición de pie (síntomas autonómicos). Se siguen estos síntomas por el ataque de otras redes neurales (en particular, una disfunción del haz piramidal constatado por la dorsiflexión del dedo grande del pie cuando se estimula el lado planto-lateral del pie, la hiperrreflexia y la espasticidad), una descoordinación del movimiento de miembros y dificultades de articulación en la lengua (disfunción cerebelosa). La IRM indica una pérdida de mielina de forma característica que permite distinguir esta enfermedad de las otras leucodistrofias y otras enfermedades desmielinizantes como la esclerosis múltiple. Las señales y los síntomas de la ADLD progresan lentamente durante un período de 20 años. El gen transferido en la ADLD es la lamina B1 (LMNB1) del cromosoma 5q23. Hasta ahora se han indicado seis familias de origen geográfico diferente que presentan características idénticas de la enfermedad. En todos los temas atendidos está presente una duplicación del gen LMNB1, lo que representa dos copias del gen sobre el mismo cromosoma. La lamina B1 es una proteína expresada en el núcleo de todas las células, e implicada en el mantenimiento de la estructura nuclear y en el reglamento de la expresión de numerosos genes. Sabemos que la duplicación implica una expresión de lamina B1 más abundante que en los temas normales, lo que altera probablemente el mantenimiento de los oligodendrocitos, un tipo de célula especializado en la formación de la mielina del sistema nervioso central, como se demostró recientemente. El mecanismo que conduce a la destrucción de la mielina en el cerebro de los pacientes afectados por ADLD es actualmente desconocido: ¿porqué una proteína expresada en todas el células tendría una acción privilegiada en el cerebro?, ¿por qué los pacientes presentan las señales y los síntomas de la enfermedad solamente a partir de los 40 años? estas son dos de las numerosas cuestiones aún sin respuesta. El objetivo de nuestro proyecto consiste en estudiar las bases genéticas de otra leucodistrofia autosómica dominante de inicio adulto presente en una gran familia italiana sobre siete generaciones, y descrita inicialmente hace más de 10 años. Los temas alcanzados presentan señales y síntomas idénticos a los del ADLD, aunque ligeramente diferentes: principio de la enfermedad a los 40/50 años, con descoordinación de la marcha (ataxia), espasticidad, y dificultades de elocución y para tragar. Sin embargo, ninguno de los pacientes presenta las disfunciones autonómicas descritas al principio de una ADLD. Desde un punto de vista neuro-radiológico, estos pacientes presentan una desmielinización simétrica del cerebro, y se diferencian de los pacientes afectados por ADLD por lo que se refiere al cerebelo, que está relativamente preservado. Pusimos de manifiesto que el gen de lamina B1 no estaba duplicado, contrariamente a la presencia del gen LMNB1 de duplicación constatada en todos los casos de ADLD definidos hasta ahora. Mostramos también que ninguna otra mutación estaba presente en el gen LMNB1 de nuestros pacientes. Con el fin de definir la causa genética de esta nueva leucodistrofia, usamos el método de análisis nombrado “scan del genoma entero” que nos permitió localizar el gen responsable de enfermedad sobre el cromosoma 5. Más concretamente, esta técnica definió un segmento de ADN hereditario en todos los temas alcanzados de esta familia: ésto implica 11 genes, y es interesante tener en cuenta que la lamina B1, anteriormente excluida, está presente en esta lista. Este resultado significa que el gen transferido presente en nuestra familia se encuentra entre los once genes identificados. Nosotros trabajamos a continuación en dos direcciones principales: • 1) estudiamos la expresión de LMNB1, y demostramos por PCR instantáneo que el gen LMNB1 es sobre-expresado en los glóbulos blancos de los pacientes, como es el caso también de los pacientes que presentan una duplicación del gen. • 2) estudiamos los diez genes restantes en la región candidata, sin poder detectar ninguna otra mutación. En conclusión, estos resultados preliminares ponen de manifiesto que definimos una alternativa de leucodistrofia idénti- ca al ADLD. Existen diferencias a la vez sobre el plan clínico/neuro-radiológico y genético entre la forma que estudiamos y las ya descritas en la literatura. Sabemos también ahora que la causa genética está vinculada al cromosoma 5, y localizada sobre un pequeño segmento genético. Ningún gen en este intervalo se transfiere al parecer, aunque esté establecido que la lámina sobre-expresada B1, lo que sugiere que este gen está implicado, de una forma u otra. Algunas indicaciones preliminares sugieren la presencia de una delección (es decir, la pérdida de material genético) en la región candidata sobre el cromosoma 5. En los próximos meses, estudiaremos aún más este punto utilizando un enfoque por hibridación genómica comparativa sobre chip de ADN (aCGH). Buscaremos también estudiar el efecto de la delección sobre la expresión de lamina B1, intentando demostrar su implicación en la patogenia. La definición del gen causal de esta forma variable de leucodistrofia autosómica dominante, proporcionará la base para una mejor comprensión de la patogenia de las leucodistrofias, enriquecerá las pruebas genéticas disponibles para los pacientes y sus familias, y contribuirá a hacer progresar el conocimiento de este proceso complejo de la mielinización en el sistema nervioso central. Es una fase esencial para poder poner a punto futuros tratamientos para estos desordenes raros y para un mejor conocimiento de las otras enfermedades desmielinizantes más comunes. Identificación del gen responsable de una nueva forma de leucodistrofia: la odontoleucodistrofia. Pr André Mégarbané - Unidad de Genética Médica, Facultad medicina, Universidad Santo José, Beirut, el Líbano. Las leucodistrofias representan a un grupo de enfermedades hereditarias muy heterogéneo, que afectan a la sustancia blanca, compuesta principalmente de la mielina. Nuestro proyecto tiene por objeto identificar el gen responsable de un nuevo síndrome autosómico recesivo en una gran familia siria, que asocia una leucodistrofia y una oligodontia. Los estudios efectuados sobre el genoma entero nos permitieron identificar una nueva región situada sobre el cromosoma 10, vinculada a la enfermedad 23 y en consecuencia susceptible de contener el gen mórbido. Se probaron quince genes y fueron excluidos como responsables de la enfermedad. Nuestro objetivo consiste ahora en proseguir la investigación con el fin de identificar el gen implicado en este nuevo síndrome utilizando una nueva tecnología: el triplete a alta producción de la región candidata entera. Si el gen en cuestión se identifica, se aplicará un enfoque funcional con el fin de comprender mejor la fisiopatología de la enfermedad y elaborar estrategias terapéuticas. La definición del gen proporcionará también una base para el consejo genético. TALLER SÍNDROME AICARDI-GOUTIÈRES. Pr Yanick Crow - Academic Unit of Medical Genetics, St Mary’s Hospital, Manchester, Royaume-Uni En 1984, Jean Aicardi y Françoise Goutières, dos neuropediatras franceses, describieron una enfermedad cerebral genética que comienza durante la infancia, que reproducía las características de las infecciones virales de las que sufren los bebés en el útero. Los indicadores clínicos de esta enfermedad ahora conocida bajo el nombre de síndrome de AicardiGoutières (AGS) incluyen: • una acumulación de calcio (calcificación) en el cerebro, mejor observada sobre un escáner, • modificaciones en la sustancia blanca del cerebro y médula espinal, mejor observadas por IRM, • elevados índices de glóbulos blancos, interferón-alfa y pterinas (proteínas producidas por el organismo para combatir una infección viral) en el líquido cefalorraquídeo (probados por punción posterior) • lesiones distintivas de los dedos del pie asemejándose a sabañones que empeoran generalmente con el frío. Se describieron hasta ahora cuatro genes diferentes (véase el cuadro) que, cuando son dañados por modificación/mutación genética, pueden causar el AGS. 24 En el estado actual de los conocimientos, se implica un único gen en una misma familia. Se distinguen dos tipos principales de presentación del síndrome AGS. Algunos bebés, especialmente los que tienen mutaciones AGS1, encuentran problemas poco tiempo después del nacimiento. Los síntomas característicos incluyen dificultades de alimentación, señales neurológicas anormales, un escaso tipo de placas (células sanguíneas implicadas en la coagulación) y anomalías hepáticas. En cambio, otros niños, a menudo los que presentan mutaciones AGS2, se desarrollan normalmente las primeras semanas o los primeros meses de vida. Pero ocurre a continuación precipitadamente un período de irritabilidad intensa, el niño lloran mucho durante varias horas sin interrupción, duerme muy mal y desarrolla accesos de fiebre sin infección. Este período se acompaña de una pérdida de las adquisiciones psicomotoras. Al cabo de algunos meses, la progresión de la enfermedad parece detenerse. Numerosos pacientes afectados de AGS siguen estando estables en la adolescencia y al principio de su veintena. Las características neurológicas típicas del AGS se refieren a las dificultades de aprendizaje, la rigidez de los miembros con una limitación de los movimientos del tronco y el control de la cabeza y una alteración de la tonicidad muscular (distonía) de los miembros. Aunque los problemas neurológicos observados en el síndrome de AGS sean a menudo graves, un reducido número de niños, generalmente los que presentan AGS2, conservan buenas aptitudes de comunicación y buenas funciones neurológicas. Método de transmisión. El síndrome de Aicardi-Goutières es una afectación genética hereditaria de tipo autosómico recesiva. Esto significa que para una pareja que tiene un niño afectado, existe 1 oportunidad sobre 4 de tener otro niño enfermo. Tenemos conocimiento de 3 casos solamente dónde el síndrome AGS se transmitió como “dominante nuevo”. En estos raros casos, el riesgo de reaparición es muy escaso. Diagnóstico prenatal. La disponibilidad de pruebas genéticas nos permite confirmar el diagnóstico de AGS en la mayoría de las familias, pero no todas. Este punto es importante, habida cuenta del riesgo de reaparición de 1 sobre 4, mencionado anteriormente. Para algunas parejas, si las dos mutaciones pueden identificarse en su niño, es posible proponer pruebas cuando llega un nuevo embarazo. ¿Cómo implican en la enfermedad las modificaciones de los genes TREX1 y RNASEH2A/B/C? Estos genes producen sustancias químicas llamadas nucleasas que deterioran el ADN y el ARN. Durante el ciclo de vida normal de nuestras células, las nucleasas eliminan los residuos de ADN y ARN producidos naturalmente. Un fallo de este proceso puede implicar una respuesta inmunitaria por parte del organismo contra su propio ADN y ARN. Una reacción inmunitaria similar se observa en respuesta al ADN y al ARN viral en caso de infección. Esto explicaría porqué las características clínicas del AGS y las infecciones virales coinciden y porqué se constatan elevados niveles del agente antiviral interferón-alfa en los niños afectados por AGS. Aún más importante, el interferón-alfa y la eliminación de nuestros propios ácidos nucléicos parecen también ser cruciales para impedir al organismo desarrollar reacciones autoinmunes contra sus propios tejidos en las enfermedades llamadas autoinmunes, como en el caso del lupus eritematoso sistémico (SLE/lupus). tales lesiones puedan ser reversibles. Pero si pudieran darse tratamientos en una fase precoz de la enfermedad, se puede pensar que las terapias podrían ser extremadamente útiles. Por otra parte, las lesiones de la piel de las que sufren numerosos niños son un verdadero problema y su tratamiento aportaría una comodidad mejorada a los enfermos. Investigación. Trabajamos sobre el síndrome de AGS durante los 10 últimos años y nuestro laboratorio se consagra actualmente al desarrollo de tratamientos para esta enfermedad. Muy importante: incluir las bases genéticas y de la patología celular del AGS proporcionará nuevas ideas relativas a las vías clave de la respuesta inmunitaria innata. Esta es la razón por la que numerosos laboratorios prestigiosos, se interesan por las enfermedades autoinmunes, y están atentos en lo que pudiera interesarles del síndrome AGS para las enfermedades que estudian (como el lupus). La participación de estos grupos en una investigación cooperativa significa que progresos significativos en la comprensión de síndrome de AGS pueden esperarse realmente para los próximos años. Confiamos en que tales conocimientos nos permitirán proponer tratamientos eficaces contra esta enfermedad devastadora. Tratamientos. Cuando el niño afectado sufre daños cerebrales significativos, es poco probable que 25 Actualidad ALARMA EN LA COMUNIDAD CIENTÍFICA POR LOS RECORTES EN INVESTIGACIÓN El Gobierno baraja una reducción del 37% hasta caer a los niveles de 2006 La investigación científica en España está seriamente amenazada por la crisis. Las cifras que está manejando el Gobierno para el presupuesto del año que viene implican una reducción del 37% del dinero destinado a financiar los proyectos de I+D, las becas y los contratos de investigadores, incluidas las convocatorias del Plan Nacional, eje de la actividad científica española de excelencia. La alarma ha empezado a circular en la comunidad de ciencia y tecnología. Con estas cifras, la inversión en I+D española retrocedería al nivel de 2006, es decir, la situación anterior al crecimiento notable de los últimos años. El presidente Rodríguez Zapatero anunció el pasado 9 de septiembre en el Congreso un recorte presupuestario de un 6% en el gasto medio de los ministerios. Pero el borrador para 2010 elaborado por Economía y Hacienda adjudica al Ministerio de Ciencia e Innovación 4.700 millones de euros, lo que supone ya un 11% de reducción de la partida general respecto a 2009 (5.380 millones), aún restando la parte de Universidades que se contabiliza ahora en el Ministerio de Educación. Sin embargo, en el capítulo de la financiación del Plan Nacional, proyectos de investigación, contratos, becas y programa Ramón y Cajal, el escenario de inversión que se maneja cae de los 1.580 millones de euros de este año a unos 1.000 millones el que viene. Lo que sube es la partida de créditos, destinados esencialmente a las empresas, que experimentaría un aumento del 3%. Este capítulo supone ya más de la mitad del presupuesto general del Ministerio. 26 Una portavoz de dicho departamento recuerda que la partida de 2010 será de austeridad, como ha anunciado el presidente del Gobierno, pero puntualiza que es pronto para hacer valoraciones. “Estamos analizando las partidas y estableciendo las prioridades del ministerio”, informa, además de recordar que se trata de un borrador y que los borradores se discuten hasta el final. Pero el recorte barajado para la ciencia española es lo suficientemente significativo como para hacer saltar todas las alarmas. La reducción de esos casi 600 millones de euros (37%) de los fondos competitivos del Plan Nacional de I+D+i “supondría, en la práctica, la suspensión de las convocatorias de becas, contratos y proyectos de I+D”, advierte Luis Sanz, director del Instituto de Políticas y Bienes Públicos del CSIC y presidente del Comité de Política Científica y Tecnológica de la OCDE. También en la Confederación de Sociedades Científicas de España (Cosce) se percibe seria preocupación por el fuerte recorte de la inversión en la I+D recogido en el borrador del presupuesto. “Existe consenso sobre la necesidad de cambiar hacia una economía basada en el conocimiento y la presente crisis presenta la oportunidad para hacerlo”, declara Joan Guinovart, presidente de la Cosce. “Si realmente queremos cambiar de modelo, no podemos dejar de invertir en I+D. Hay que seguir apostando por la investigación y por la educación si no queremos que nuestros hijos vivan peor que nosotros. No hay otra alternativa. El camino no será ni fácil, ni rápido, ni está garantizado el éxito, pero es el único posible. La alternativa implicaría relegarnos, nosotros mismos, a un papel secundario y subalterno. Es necesario mantener el rumbo, a pesar del temporal, y resistir la tentación de recortar en lo que debe ser la base de nuestro futuro”. Guinovart es muy claro en su valoración: “Si creen que la investigación y la educación son caras, prueben con la ignorancia y la mediocridad”. La crisis en la ciencia DECLARACÍÓN DE 50 INVESTIGADORES BIOMÉDICOS Carta abierta al Gobierno Las implicaciones de la ciencia y la tecnología en la economía preocupan a la comunidad científica. “Si el presidente del Gobierno respalda estos presupuestos sería como tirar piedras contra su propio tejado, liquidaría las bases del cambio de modelo productivo y del relanzamiento de la competitividad, desandando el camino ya recorrido en el fortalecimiento de la I+D”, dice Sanz. Él destaca que “seguramente hay que contener el crecimiento del gasto, pero creíamos que este Gobierno ya sabía que la I+D es una inversión (y no un gasto) actual para el futuro que, además, crea empleo”. Como miembros del Ciberned (Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Neurodegenerativas) y a título personal, los abajo firmantes nos dirigimos a nuestros responsables políticos directos (Ministerio de Ciencia e Innovación y Presidencia) para manifestar nuestra enorme perplejidad y desconcierto cuando se nos ha comunicado el recorte presupuestario para el próximo año, aproximadamente un 30%, y su traducción directa en la no renovación de contratos de investigación que va a suponer. También los sindicatos están alarmados, advierte Emilio Criado, investigador del CSIC y uno de los responsables de Comisiones Obreras en dicha institución. El Gobierno ha convocado a la mesa de dialogo social el próximo 18 de septiembre para exponer los criterios sobre la futura Ley de Sostenibilidad de la Economía. CC OO planteará en dicha reunión “la necesidad de mantener el crecimiento de los gastos en I+D como clave para el cambio de modelo de desarrollo, así como la reanudación de las negociaciones sobre la Ley de Ciencia, interrumpidas a finales de junio”. “Está claro que se avecinan tiempos de austeridad extrema para la investigación en general y para el CSIC en particular”, afirma Criado. ALICIA RIVERA - Madrid - 10/09/2009 El PAIS. Deseamos recordar que el Ciber representó una apuesta decidida para estimular la investigación biomédica de excelencia, sobre las patologías humanas más relevantes, impulsada por el anterior Ministerio de Sanidad a través del Instituto de Salud Carlos III, y que ahora depende del Ministerio de Ciencia e Innovación. Entre otros nueve Ciber, Ciberned se configuró como un centro en red en el que los investigadores miembros (clínicos y básicos) trabajamos en las instituciones a las que pertenecemos, mientras que participamos al mismo tiempo activamente en la agenda de investigación cooperativa propia del Ciberned. El centro se fundó a principios de 2007. El Ciberned se constituyó con 48 grupos de investigación, después de una selección por comités externos, liderados por un investigador principal o responsable, a los que pertenecen unos 300 científicos procedentes de las universidades, hospitales y OPIS. Es esa financiación competitiva la que determinaba que la mayor parte del presupuesto lo debíamos de usar en contratación de personal (con la idea explícitamente indicada de “estabilizar personal investigador”), asumiendo la idea (muy razonable en aquel momento) de que la competitividad de los grupos se potencia formando y manteniendo un tamaño mínimo de laboratorio. De este modo, se favorecía la formación de equipos de investigación integrados por predoctorales y posdoctorales, con apoyo técnico, para que pudiesen trabajar de manera más 27 sostenible en proyectos de interés biomédicos. Este apoyo nos pareció un punto de inflexión en la ciencia biomédica del país y así lo expresamos. Pasados dos-tres años se nos anuncia, como propuesta para el próximo año, un recorte presupuestario que en concreto en Ciberned representa la reducción del 30-40% (de 219 contratados no podremos renovar entre 60 y 70). Si recordamos que somos nueve Ciber la reducción de contratos puede estar entre 400 y 500, si esto no se repara. Es reiterativo, pero importante, recordar que la Ciencia se basa en tres grandes pilares: centros, financiación y capital humano. En tiempos de crisis se puede entender que la financiación o inicio de nuevos centros se dilate; que la renovación o adquisición de nuevos equipos, se posponga uno o dos años… pero el capital humano debería de ser la prioridad absoluta. Más si se pretende, como se indica desde nuestras administraciones, cambiar en la medida de lo posible el modelo productivo. Así lo expresaba la ministra de Ciencia e Innovación, con gran contundencia recientemente en televisión: “Para salir de la crisis hay que invertir más en I+D+i”. (Ciertamente, lo único positivo que podríamos sacar de esta crisis). Si queremos basar parte de esa recuperación de futuro en I+D+i, el capital humano es esencial para poder iniciar, en el momento de la recuperación, un inicio enérgico de la actividad productiva. Dicho de forma simple, no podemos darnos el lujo de tirar licenciados y doctores a la basura. Además del daño concreto de mandar personal al paro. Recordemos que es personal altamente especializado, que lleva proyectos de investigación que tendremos que parar, y que ni uno ni otros los podremos rescatar al mes siguiente de la salida de la crisis. Por otro lado, se traslada un mensaje muy negativo a las siguientes generaciones de universitarios interesados en la investigación biomédica que no será fácil de recuperar. 28 Creemos firmemente que si se ha podido diseñar un sistema de ayuda a la banca para minimizar el daño; si se ha generado una serie de planes para mantenimiento de empleo en sectores muy afectados (plan E); deberíamos de ser capaces de orquestar un Plan i, no de innovación, sino de inteligencia. Si deseamos ser competitivos, lo que tenemos que minimizar es la pérdida de inteligencia. Deseamos recordar la frase de Santiago Ramón y Cajal, que en estos tiempos tiene aun mayor sentido: “Lo que el país necesita es plantar árboles y sembrar mentes”. ¡No podemos tirar lo que teníamos ya sembrado! Como creemos que lo único que no tiene recuperación son las “neuronas muertas”, deseamos, y exigimos desde la autoridad moral que nos da el trabajar en problemas de muy difícil resolución, como son las enfermedades neurodegenerativas (como el Alzheimer o el Parkinson), que esta propuesta de reducción presupuestaria, no se concrete en los términos en los que se nos ha comunicado. 01/10/2009. EL PAIS. EL ‘MILAGRO’ DE ANDY Y ÁNGEL Un ensayo confirma la eficacia de la terapia genética en una enfermedad rara Los pacientes, que están haciendo su vida normal, han sido tres menores españoles La investigación supone un nuevo impulso para este tipo de tratamientos PATRICIA MATEY. El MUNDO. MADRID.- Hace un año, ELMUNDO.es relató a sus lectores la historia de tres niños españoles (Andy, Ángel y Andrés) que estaban empezando a ‘escribir’ el futuro de las leucodistrofias. Los tres eran los primeros del mundo en formar parte del primer ensayo clínico internacional que trataba de demostrar la validez de la terapia genética contra una variante de esta rara enfermedad hereditaria llamada adrenoleuco- distrofia, la patología protagonista de la película ‘El aceite de la vida’. Hoy, afortunadamente, podemos transmitirles buenas noticias: el tratamiento está resultando un éxito. Para ellos y sus padres se trata de un ‘milagro’. Ninguno tenía donante de médula o de células de cordón umbilical compatibles [el tratamiento que se está utilizando actualmente para tratar de frenar la progresión de la enfermedad] y por ese motivo, el ensayo francés con terapia genética era su última esperanza. “Es la primera vez que una enfermedad grave del cerebro ha sido tratada con éxito mediante la terapia génica. Yo uso el término tratado; no curado. La patología se ha detenido”, destaca a elmundo.es Patrick Aubourg, del Hospital San Vicente de Paul, París (Francia) y director de la investigación. Sus datos, que han sido publicados en la prestigiosa revista ‘Science’, demuestran la eficacia del tratamiento y la buena evolución de Andy [ahora con 10 años] y de Ángel [de 9], a los 24 y 30 meses de recibir el tratamiento. El caso de Andrés no ha sido recogido en el ensayo debido a que “se realizó el tratamiento hace unos 16 meses. Tiempo insuficiente para comprobar si es eficaz o no”, comenta Carmen Sever, fundadora de la Asociación Española contra las Leucodistrofias (ELA-España), perteneciente a su homóloga en Europa, quien han financiado la mayoría del estudio. Agradecimiento Ella ha recibido, además, el agradecimiento expreso de los autores del trabajo, liderados por el neuropediatra Patrick Aubourg, del Hospital San Vicente de Paul, París (Francia), a través del mencionado artículo, por ayudar al reclutamiento de los pacientes para el ensayo. José González, padre de Ángel, está entusiasmado y agradecido. “Fuimos a París sin saber qué podía pasar y ahora nuestro hijo está bien, va al colegio. Las lesiones que se produjeron antes de recibir el tratamiento seguirán, pero el progreso de la enfermedad se ha detenido. Es una espe- ranza para muchos pacientes”, reconoce José González, padre de Ángel. Lo es también para Rosario Vara, madre de Andrés, que espera que la evolución de su hijo continúe los mismos pasos que la del madrileño Andy y la de Ángel, “al que fuimos a conocer a Valencia donde reside para saber cómo era el tratamiento antes de volar a Francia”. Las leucodistrofias (existen 15 tipos distintos) son patologías neurodegenerativas que destruyen la mielina (sustancia blanca que recubre los nervios) de los sistemas central y periférico. Ese daño provoca la paralización progresiva de todas las funciones vitales: movimiento, equilibrio, vista, oído, memoria... Cada semana nacen en Europa entre 20 y 40 menores afectados por ellas. Una de estas patologías es la adrenoleucodistrofía, la que sufren Andy y a Ángel y la que, desgraciadamente, acabó con la vida de sus hermanos mayores. Se produce por mutaciones en el gen ABCD1 que codifica para la proteína adenosín trifosfata (ALD). La deficiencia de esta proteína causa la acumulación de niveles altos de ácidos grasos saturados en el cerebro y en la corteza adrenal, lo que desencadena la degeneración de la cubierta de mielina y de la glándula adrenal. El procedimiento El tratamiento al que hace referencia ‘Science’ consiste en la extracción de células madre sanguíneas obtenidas en sangre periférica, gracias a su movilización desde la médula ósea con la ayuda de tratamiento farmacológico. Una vez en el laboratorio, éstas son infectadas y tratadas con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH), que ha sido previamente modificado para evitar su efecto patógeno. De esta forma actúa como un ‘taxi’ biológico para transportar la versión correcta del gen que está defectuoso [localizado en una región del cromosoma llamada Xq28] que causa la enfermedad. Los virus son una de las llaves de la terapia génica, debido a su capacidad de infectar a las células de otros organismos y multiplicarse. Antes se les “desviste” de 29 Para Salvador Martínez, subdirector del Instituto de Neurociencias de Alicante, uno de los datos más trascendentes de la investigación “es la eficacia que se ha obtenido con el tratamiento”. Acabando con el escepticismo El éxito del científico Aubourg se suma a otros obtenidos recientemente con terapia genética y llega, tal y como recoge el editorial que acompaña a su trabajo y que firma Luigi Naldin [del Instituto Telethon de Terapia Genética de Milán (Italia)], tras años de escepticismo por parte de la comunidad científica. sus partículas patógenas mediante técnicas de ingeniería genética. “Esta es la primera vez que se ha utilizado con éxito un vector lentiviral del VIH como terapia génica en humanos. Los lentivirus derivados del VIH permiten la expresión del gen terapéutico en principio de por vida, porque éste se inserta en los cromosomas del genoma. Por lo tanto, las células madre que se derivan de las células inicialmente tratadas en el laboratorio expresarán el gen terapéutico para siempre”, aclara el director de la investigación. Una vez las células fueron modificadas se inyectaron en los pacientes que previamente recibieron quimioterapia para destruir su médula. Los datos de la investigación constatan que entre los 14 y 16 meses después de la infusión, “la desmielización cerebral progresiva se había detenido y los resultados clínicos fueron similares a los que se obtienen con el trasplante de médula”, reza el estudio. Dos años más tarde, el 15% de las células sanguíneas expresaba correctamente la proteína ALD, a un nivel suficiente para frenar la patología en el cerebro. “Por primera vez, también hemos logrado que el gen terapéutico se exprese en un porcentaje tan elevado de células, algo que no se había conseguido en otros ensayos con otras enfermedades”, recuerda el investigador francés. 30 Sin embargo, el nuevo ensayo alienta a seguir investigando dado que “este tipo de terapia es importante para otras enfermedades genéticas y metabólicas”, comenta el doctor Martínez. Mucho trabajo “queda por hacer en materia de terapia genética”, comenta Patrick Aubourg. Y puede que el más inmediato sea el que están planeando ya para el próximo año. Así lo afirma a elmundo.es Amber Salzman, presidenta de la Fundación Stop Adrenoleucodistrofias, que ha cofinanciado la investigación de Aubourg. “Esperamos que al año que viene podamos hacer un nuevo estudio que incluya a niños con la enfermedad más avanzada y adultos. Tenemos la esperanza de que la terapia génica se extienda también a otras enfermedades. Sabemos además que, en este sentido, ya hay varios programas en marcha” Mientras, Andy, Ángel y Andrés seguirán creciendo. “Y aunque nunca se puede predecir qué va a pasar a largo plazo, dados los resultados específicos en su enfermedad creo que podemos esperar lo mejor, que los niños tratados vayan bien y se traten más en estas condiciones”, defiende el director del Instituto de Neurociencias de Alicante. Vida Asociativa EL REAL MADRID CON LA LEUCODISTROFIA Los jugadores posaron con una pancarta con el lema “Juntos, salvemos a los niños enfermos” Como viene haciendo en los últimos días, el Real Madrid apoyó durante la celebración del encuentro entre el equipo blanco y el Real Valladolid a la Asociación Europea contra las Leucodistrofias (ELA). De esta forma, los jugadores de ambos conjuntos posaron antes del encuentro con una pancarta a favor de la campaña de ayuda contra esta enfermedad. Con ocasión del partido ante el Valladolid, el Club blanco organizó un dispositivo especial para sensibilizar al mayor número de personas en la lucha contra las leucodistrofias. Una de estas iniciativas fue desplegar antes del partido una pancarta de seis metros por tres con el lema de la campaña: “Juntos, salvemos a los niños enfermos”. Este acto viene a completar una serie de actividades que ha desarrollado el Real Madrid codo a codo con ELA. El pasado viernes, diversos niños que padecen leucodistrofia asistieron a la Ciudad Real Madrid para asistir a un entrenamiento y conocer de cerca a sus ídolos, a quienes pudieron saludar personalmente. Asimismo, los pequeños realizaron el sábado por la mañana el Tour del Bernabéu, invitados por el Club. Todos ellos disfrutaron de lo lindo con cada rincón del coliseo blanco. Uno de ellos, Ángel, tuvo el privilegio de conocer a Zidane e incluso de presenciar el encuentro ante el Valladolid desde el palco de autoridades. En el descanso del partido, el presidente del Real Madrid, Florentino Pérez, le hizo entrega de una bufanda y una camiseta del equipo con el número 5 y su nombre a la espalda. 31 “LA PRINCESA DE ASTURIAS RECIBE A LAS ASOCIACIONES DE NEUROFIBROMATOSIS, LEUCODISTROFIA Y ESCLEROSIS” La Princesa de Asturias recibió, el pasado día 28 de septiembre, en el Palacio de la Zarzuela a una representación de tres asociaciones de enfermedades con poca incidencia como son la Neurofibromatosis, la Leucodistrofia y la Esclerosis Tuberosa, que afectan principalmente a niños y que no tienen cura. Doña Letizia les ha saludado y se ha reunido con ellos para conocer sus inquietudes y apoyarles en su lucha por conseguir las mejores soluciones a su problema. La Princesa mantiene desde hace más de un año contactos con ese tipo de asociaciones y así en 2008 recibió a representantes de la Federación Española de Enfermedades Raras, este año presidió en el Senado en el mes de marzo los actos del Día Mundial de esas dolencias y en abril tuvo una audiencia con integrantes de la Asociación de Fibromialgia y Síndrome de Fatiga Crónica. LOS FUTBOLISTAS VETERANOS DEL GETAFE C.F., REAL MADRID, ATLÉTICO DE MADRID Y RAYO VALLECANO ORGANIZAN UN PARTIDO CONTRA LA LEUCODISTROFIA El Ayuntamiento de Getafe colabora con la Federación Española de Asociaciones de Futbolistas Veteranos, para realizar un Partido de Fútbol de Veteranos entre los combinados: GETAFE C.F. – REAL MADRID vs. ATLÉTICO DE MADRID – RAYO VALLECANO, cuyos beneficios serán donados en parte a la Asociación Española Contra la Leucodistrofia (ELA-España). El partido tuvo lugar el pasado día 7 de junio en las instalaciones del Coliseum Alfonso Pérez. Los veteranos del Real Madrid, Atlético de Madrid, Rayo Vallecano y Getafe celebraron un partido benéfico el próximo domingo en el Coliseum de Getafe, cuya recaudación será donada a la Asociación Española Contra la Leucodistrofia. El presidente del Getafe C.F, Angel Torres, ha subrayado que es “bonito que los equipos de fútbol de Madrid se unan por esta causa” y ha animado a todas las personas a que “acudan al estadio del Getafe”. 32 El partido de fútbol estuvo organizado por la Federación Española de asociaciones de veteranos de fútbol, con la colaboración del Ayuntamiento de Getafe, cuyo alcalde, Pedro Castro, ha dicho que “estas cosas hacen grande al fútbol”. El concejal de deportes, Ángel Bustos, ha calificado de “acontecimiento” el partido al “unirse el deporte con lo social” y espera que el público “responda”. MÁS COLABORACIONES. Nuestro agradecimiento a: Mercadillo Solidario. Otero de los Herreros. Segovia. Cine de verano. Asociación Adelante Alcolea Alcolea de Tajo (Toledo) Representación teatral. Stog Teatre. Hospitalet de Llobregat. Festival. Asociación Ilusionate Alcolea del Tajo (Toledo) Ponte tus zapatillas. Colegio Joyfe. Madrid Reunión de Asociaciones de Caja Navarra. ELA-España. Delegación Vasco - Navarra. 33 ENCUENTROS DE FAMILIAS. Con el objeto de cubrir las expectativas y necesidades del variado colectivo al que representamos, la Asociación Española Contra la Leucodistrofia ha decido mejorar el Encuentro de Familias 2009, dividiéndolo en tres modalidades diferentes: 1. I Encuentro de Adultos. La Asociación Española Contra la Leucodistrofias (ELA-España) ha desarrollado el I Encuentro de Adultos afectados por Leucodistrofias. El hecho de que los adultos representen el 5% del total de afectados supone un aliciente de cara a contemplar su realidad de manera global, y fruto de ello, de dar respuesta más eficaz a sus necesidades. A la hora de establecer el programa del mismo, teníamos desde el principio una idea clara, que fuera un espacio participativo en el que el protagonista fuera el adulto contando sus experiencias personales, compartiendo las de los demás y aprendiendo todos de todos. Hasta ahora este 5% no había participado del anual Encuentro de Familias debido a sus características específicas, muy distantes de las del resto de familias afectadas. Esta primera modalidad de Encuentro ha tenido lugar los días 3, 4 y 5 de julio de 2009 en el Centro de Referencia Estatal de Atención a Personas con Enfermedades Raras y sus Familias (Ministerio de Sanidad y Política Social). El Centro de Referencia Estatal de Atención a Personas con Enfermedades Raras y sus Familias, se configura como un centro avanzado en la promoción, desarrollo y difusión de conocimientos, experiencias innovadoras y métodos de atención a personas con enfermedades raras, y como centro de alta especialización en servicio de apoyo a familias y cuidadores y en servicios de prevención, promoción de la autonomía personal y participación social de las personas con dichas enfermedades. En el I Encuentro de Adultos afectados por Leucodistrofia participaron 13 afectados adultos acompañados de sus familiares directos, que pudieron mantener una distendida Charla - Coloquio con la Dra. María Luisa Giros (Instituto de Bioquímica Clínica de Barcelona), el Dr. Jaume Coll (Servicio de Neurología del Hospital. Universitario Germans Trías i Pujol de Badalona), June Ruiz Orcajo (Diplomada en Fisioterapia / Terapeuta Bobath) y el Dr. Chiclana (Psiquiatra). 2. Atención Residencial Especializada. ELA-España organiza por primera vez un programa de atención a pacientes con leucodistrofias y descanso a cuidadores principales, en instalaciones residenciales especializadas en la atención de enfermedades poco comunes. Los menores han podido disfrutar de una semana de alojamiento y atención individualizada (atención sanitaria, atención psicológica, fisioterapia, hidroterapia, terapia ocupacional, apoyo escolar) en apartamentos totalmente adecuados a las necesidades de los pacientes (habita- 34 ciones con oxígenos, camas articuladas, grúas, baños adaptados, dietas individualizadas…). Los familiares / acompañantes han disfrutado de tiempo de ocio y descanso que han podido alternar con actividades de apoyo y formación (atención psicológica, fisioterapia, taller de inteligencia emocional para cuidadores). manejar las dificultades que conlleva una enfermedad poco frecuente. Esta tercera modalidad de Encuentro ha tenido lugar los días 9 – 12 de Octubre de 2009 en el Centro de Vacaciones Sol Verde. Sol Verde es un complejo de turismo rural y activo situado en la finca “Fuente del Álamo”, a 1,5 km de la localidad de Villanueva de la Fuente (C. Real). Dispone de alojamientos y otras dependencias comunes rodeadas por instalaciones ociodeportivas y zonas verdes. Ideal para familias y grupos que buscan descanso en plena naturaleza junto con la posibilidad de realizar actividades recreativas y de turismo activo. Esta segunda modalidad de Encuentro ha tenido lugar también en el Centro de Referencia Estatal de Atención a Personas con Enfermedades Raras y sus Familias (Ministerio de Sanidad y Política Social), los días 7 – 13 de septiembre de 2009. 3. Jornada Anual de Respiro Familiar (Encuentro de Familias). Para este Encuentro se busca una ambientación divertida y diferente, donde las nuevas familias puedan encontrar el apoyo de otras con más experiencia. Con ello pretendemos que las familias se beneficien de la adquisición de conocimientos y habilidades, para poder 35 Con la Campaña 400 x 5 la Asociación Española Contra la Leucodistrofia premiará a los socios que más socios nuevos capten en las fechas comprendidas entre el 1 de diciembre de 2009 y el 20 de abril de 2010. PRIMER PREMIO: Alojamiento para 2 personas en Balneario o casa rural durante un fin de semana. El nombre de los ganadores se publicará en la revista de mayo 2010 y en la web de ELA-España. TERCER PREMIO: Cheque - Regalo de El Corte Inglés. 36 SEGUNDO PREMIO: Camisera oficial del Real Madrid firmada por los jugadores. 37 38 39 40 Un espacio para tí TENGO UNA NIETA Tengo una nieta preciosa, la miro con su cara bonita cual dulce rosa del Carche. Le hablo y su media sonrisa, es más bella que el arco iris, sonrisa que está privada de luz, pero sus oídos suplen los colores, reciben besos de los amaneceres y música de un campo con flores, para un alma que rebosa belleza y el cuerpo suyo vivo, vibrante en sensaciones, si escucha hablar. Tengo una nieta, alma del silencio, es escultura y labios de angelote del retablo barroco de Santiago, me escucha siempre, sin preguntar y me da consejos de eternidades, porque se mira en el celeste espejo, y nos invita al soplo del Misterio.. ¿Quién conoce los designios de Dios? ¿Quién sabe donde reside lo mejor? Quizá no vemos el verdadero color de la vida, que se trazó en el cosmos.. Tengo una nieta que me hechiza, la admiro , le susurro y le rezo, le finjo los sonidos de las playas, de las olas que van y que vienen. Recuerda el mediterráneo azul, mas hoy, lo imagina con la mente y recorre los altos cielos y la tierra, viaja hacia el norte su estrella. Tengo una nieta que me desborda, como un ángel de plata Salzillano, del noble retablo azul y púrpura pues su vida se pintó con aire azul. Mi nieta, conoce mejor que nosotros el lenguaje del Supremo Hacedor. Por eso esta mañana han bendecido su silenciosa, santa y virginal vida, Y se ha ido. Está con Santa María, Dios te salve María, reina y Madre, Oh dulce siempre virgen María, calienta siempre la cara de mi nieta, guarda en tu palacio de inocencias, la blanca paloma que te enviamos, desde nuestra basílica sacrosanta y convierte en estrella de la mañana, a tu hija, diamante de la esperanza. Ya vemos tu nueva estrella brillando. Nunca la olvidará el merecido amor, con que todos la fuimos arropando. Jesús de la eucaristía, dulce consuelo, embellece el firmamento de la noche, con la esperanza de su resurrección. Tengo una nieta, que no se marcha, la tenemos guardada en el corazón. MANUEL GEA “ Abuelo de Amelita” DESDE LA ASOCIACIÓN ESPAÑOLA CONTRA LA LEUCODISTROFIA LES DESEAMOS FELIZ NAVIDAD: CON LA COLABORACIÓN DE: 41 21