ANA y enfermedad - Hospital de Cruces

Transcripción

Prácticas habituales de los laboratorios.
Ana María Bielsa Masdeu.
Especialista en Inmunología y Medicina Interna.
Servicio de Medicina Interna. Hospital de Cruces. Barakaldo.
17/05/2010
Estudio de los ANA
IFI
•Detecta todos los ANA
salvo anti-Jo1 y anti Ro a
veces.
•Título: a mayor título mayor
probabilidad de EAS
•Patrón: orienta a
especificidad / diagnóstico
ELISA ANA SCREENING
•ADN
•Sm
•U1RNP
•Ro
•La
•Scl70
•Jo-1
Ana María Bielsa Masdeu. Servicio de Medicina Interna. Hospital de Cruces. Barakaldo.
Estudio de los ANA
¿porqué algunos laboratorios no utilizan la IFI?
IFI
•Requiere personal
entrenado
•Subjetiva: patrón, título.
ELISA ANA SCREENING
•Lector de ELISA
•Objetivo
•Rápido
•Económico
ANA
IFI
+
Anti-DNA
Anti-ENA
(Sm, U1RNP, Ro, La)
Protocolo de estudio anti-ENA habitual
Anti-ENA screening +
IB
U1 RNP
Sm
POSITIVO
SS-A
SS-B
Scl-70
Jo-1
Anti-ENA screening
Ag conocidos fuera de
screening
U1 RNP
Sm
SS-A
SS-B
Scl-70
Jo-1
IB
Ag conocidos fuera de IB
ELISA + IB
Ag conocidos no detectables
por ELISA ni IB
ANA positivo por IFI
à Anti-ENA negativo
ELISA negativo
IB negativo
Puede ser cualquiera de
estos positivo, no están
presentes en la tira de IB
normalmente ni en el
ELISA de cribado.
Ag conocidos fuera de IB y ELISA habituales
ANA y enfermedad
Gp 210
Sp 100
CBP
CBP
Th/To
Ku
Nor 90
Mi-2
P 155
SRP
RNA pol III
ES
U3 RNP
ANA y enfermedad
DM
DM + cáncer
PM + mal
pronóstico
ES
ES
ES
ES
PL 7
PL12
OJ
EJ
KS
PM
PM
PM
PM
PM
ANA y enfermedad
ANA y enfermedad
Gp 210
Mi-2

P 155

CBP
Sp 100 CBBP
RNA pol III ES
U3 RNP ES
Th/To
ES
Ku
ES
Nor 90
ES
SRP
PL 7
PL12
OJ
EJ
KS
DM
DM + cáncer
PM + mal pronóstico
PM
PM
PM
PM
PM
ANA y enfermedad
ANA y enfermedad
Mi-2
DM
CBP
P 155
DM
cáncer
Sp 100 SOLO
CBBP SE SOSPECHARÁN
SI +SE
SRP
PM + mal
RNA pol III
ES REALIZA
pronóstico
U3 RNP ESINMUNOFLUORESCENCIA
PL 7
PM
Th/To INDIRECTA
ES
SOBRE CÉLULAS O
PL12
PM
TEJIDOS
Ku
ES
OJ
PM
Nor 90
ES
EJ
PM
KS
PM
Gp 210

Informe de resultado adecuado
•Buena práctica: informar de los antígenos
incluidos en el ENA Screening.
• No hay acuerdo acerca de que los resultados de ANA sean
significativos solamente a partir de un título de 1/160.
•Normalmente se consideran positivos y está indicado
proseguir el estudio en busca de la especificidad a partir de
1/40-1/50.
Informe de resultado inadecuado aunque habitual
•No consta con que técnica se han estudiado los ANA (IFI o ELISA)
•No especifican que anti-ENA han estudiado
Informe de resultado inadecuado aunque habitual
•No consta con que técnica se han estudiado los ANA (IFI o ELISA)
sabemos que es ELISA porque dan el resultado en unidades
•IFI en título: ejemplo 1/40, nunca con decimales, siempre
múltiplos de 10.
•ELISA en unidades: ejemplo 5 UL/ml
Resultados contradictorios del mismo paciente al ser
estudiado por diferentes laboratorios por utilizar
técnicas diferentes de cribado.
ANA + en laboratorio A
(IFI)
ANA – en laboratorio B
(ELISA)
ANA/ENA variabilidad de kits
Anti-ENA:
diferente combinación de
antígenos estudiados por el mismo laboratorio
Evolutivo de los resultados de Ac anti-ENA de un mismo paciente.
ENA: variabilidad de resultados en el mismo
paciente según el kit con el que se estudia
Ambos resultados son del mismo paciente
En este análisis los ENA no
incluyen centrómero, histonas ni
ribosomal pero no lo describen.
ANA:
estudio de la especificidad según el patrón.
El patrón de IFI es muy útil porque orienta a la especificidad pero no es
perfecto ni debe ser obstáculo para investigar las especificidades.
Ejemplo de dos sueros del mismo paciente estudiado por el mismo laboratorio:
•Patrón homogéneo en una determinación, homogéneo y nucleolar en otra.
•Anti-DNA + se corresponde con patrón homogéneo.
•Anti-SM y anti-RNP se corresponden con patrones moteados (no descritos en
estos resultados).
•El patrón nucleolar no corresponde ni a anti-DNA ni anti-Sm ni anti-RNP.
ANA:
estudio de la especificidad según el patrón.
Limitaciones
El patrón de IFI es muy
útil porque orienta a la
especificidad pero no es
perfecto ni debe ser
obstáculo para investigar
las especificidades.
Los Ac anti-DNA dan un
patrón homogéneo
Resultado con patrón inesperado.
SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD DE LOS TEST
MUY VARIABLES
Sueros de 57 pacientes
de LES estudiados por 3
casas comerciales
diferentes detectan
diferentes anticuerpos,
pueden ser tanto falsos
positivos como falsos
negativos.
Hay múltiples estudios
comparando diferentes
casas comerciales con
resultados semejantes.
MUY VARIABLES
Un mismo laboratorio
puede detectar
diferentes anticuerpos
en un mismo paciente
por haber cambiado de
kit o de casa comercial.
Ambas son analíticas del
mismo paciente, arriba
anti-SSb y anti-SSa
positivos, abajo ambos
negativos.
Por la diferente
representación de Ag
sabemos que es
diferente kit.
MUY VARIABLES
Mismo paciente
Diferentes resultados
Ac anti-Sm +
Diferentes
laboratorios
•
Diferentes casas
comerciales
Ac anti-Sm -
Ana María Bielsa Masdeu. Servio de Medicina Interna. Hospital de Cruces. Barakaldo.
S. ANTISINTETASA
Mujer de 37 años.
Raynaud desde 1998.
Dx en 2005
Afectación pulmonar
predominante.
ANA negativos por IFI x 2
(Laboratorio A)
• no estudian anti-ENA.
Ac anti-Jo1 positivos x 10
en Laboratatio B (estudian
los ANA por ELISA con
Jo-1)
Capilaroscopia patológica con capilares en
árbol, escasas dilataciones y ausencias.
Los Ac anti-Jo1 y anti-Ro pueden no detectarse por IFI.
S. ANTISINTETASA
Mujer de 56 años.
2008Neumonitis intersticial
linfocitaria.
2009 (enero) Raynaud.
2009 (agosto)
mecánico.
Manos de
10/06/2009
ANA 1/50
anti-ENA negativos
09/12/2009
ANA 1/800
anti-ENA negativos
Se solicita estudio de anti-ENA por IB con
más Ag que el ELISA de screening de Ac
anti-ENA
03/02/2010
anti-Ro52
Capilaroscopia patológica con capilares en
árbol, escasas dilataciones y ausencias.
El ELISA de screening de Ac anti-ENA
siempre contiene Ro (tal vez no el 52), la
discrepancia de resultado puede deberse a
diferente sensibilidad de los test.
CONCLUSIONES
Es fundamental el conocimiento del sistema de
estudio utilizado por cada laboratorio.
Es imprescindible una buena colaboración del clínico
con el laboratorio.
La IFI no debe ser sustituida por el ELISA en el
estudio de los ANA.
à Detecta los ANA conocidos y los desconocidos
à Puede ser negativo para anti-Ro y anti-Jo1
El patrón de IFI debe servir para orientar en la
búsqueda de la especificidad, no para bloquearla.
CONCLUSIONES
El uso de ELISA con 6-8 antígenos como cribado de Ac anti-
ANA/ENA es frecuente porque es económico y rápido.
El ELISA o inmunoblot en tira da más información con mayor
coste económico (mayor número de Ag estudidados).
El laboratorio debería especificar la técnica utilizada y los
antígenos estudiados.
Debería evitarse el resultado “anti-ENA negativo”.
El resultado de un enfermo puede variar por
à un cambio en su serología
à un cambio de laboratorio de diagnóstico
à un cambio del test
Estudio de los ANA
Antígenos
conocidos y
detectables
ELISA/IB/IP
IFI
•Detecta todos
los ANA salvo
anti-Jo1 y anti Ro
a veces.
ELISA
ANA/ENA
SCREENING
1.ADN
2.Sm
3.U1RNP
4.Ro
5.La
6.Scl70
7.Jo-1
LE
B
A
RI
A
V
ELISA/IB en tira
1.Sm
2.U1RNP
3.Ro
4.La
5.Scl70
6.Jo-1
7.Histonas
8.Nucleosomas
9.PMScl
10.PCNA
11.Centrómero
12.RNPribosmalP

ANA y enfermedad - Hospital de Cruces

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