NUTRIENTES LIPOSOLUBLES Y SUS EFECTOS SOBRE

NUTRIENTES LIPOSOLUBLES Y SUS EFECTOS SOBRE

NUTRIENTES LIPOSOLUBLES Y SUS EFECTOS SOBRE CÉLULAS CANCEROSAS DE MAMA
HUMANAS
Moreno Pascal FN1, García Hidalgo R1, Soria AE2, Quiroga PL1
1- Instituto de Biologìa Celular y Cátedra de Biologìa Celular,Histologìa,Embriologìa . FCM-UNC;
2- Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (INICSA) CONICET-FCM,UNC. Cátedra Biología Celular, Histología y Embriologia.FCM-UNC
Persona que presenta:
Moreno Pascal FN, [email protected]
Area: Clínica Básica
Disciplina: Oncología
Resumen:
Estudios epidemiológicos y experimentales indican que el ácido retinoico sólo, por un lado y ácidos grasos polinsaturados (PUFAs) por el otro, ejercen un rol modulador neoplásico. Se evaluó la
sinergia de éstos sobre algunos parámetros tumorales, utilizando un inhibidor específico del PPARγ
(GW9662), ligandos naturales de los ácidos grasos.
Se utilizaron dos líneas celulares de cáncer de mama humana en cultivo (MCF-7 y T47-D). Agregamos ácido retinoico (AR=ATRA, 0-10 μM) sólo o combinado con ácido grasos (50 μM): ω6 (AA:
20:4, ácido araquidónico) y ω3 (EPA 20:5, ácido eicosapentaenoico) y un inhibidor farmacológico
específico de los PPARγ (GW 9662 (50 μM). Las células fueron tratadas por 24-48 horas en éstas
condiciones; se evaluaron: proliferación (resazurina), incorporación lipídica (cromatografía de gas),
grado de peroxidación lipídica y de estrés celular (técnica enzimática- GTTP). Los datos se expresaron como media ± error estándar de por lo menos tres experimentos separados realizados por
triplicado. Para su análisis, los efectos de los diferentes tratamientos se compararon por modelos
de ANOVA seguidos por la prueba de Fisher, para un nivel de p<0,05.
El perfil de ácidos grasos mostró una relación positiva entre el aporte exógeno y la incorporación
de ácidos grasos en ambas líneas celulares. El AR presentó actividad antitumoral propia, ya que la
viabilidad celular mostró diferencias significativas (p≤ 0,01) para ambas líneas celulares en ausencia o presencia del antagonista (GW 9662), mientras que los PUFAs utilizados necesitaron de AR
para ser activos. Asimismo, con relación a lipoperóxidos, el AR más AA mostraron actividad antitumoral a través de la formación de lipoperóxidos comprometiendo así la integridad de la membrana
celular y por lo tanto la viabilidad de dicha célula cancerígena. Se encontró una diferencia estadísticamente significativa (p<0,05) entre los tratamientos cuando se agregó el GW9662 junto al AR+AA
con respecto a los controles (T47-D/ C=.0.422 vs AR+AA= 0.996). La presencia del inhibidor
específico produjo un incremento citotóxico en todos los tratamientos sin tener una actividad por
sí mismo. Este estudio muestra que el ácido retinoico y ciertos ácidos grasos junto con GW 9662
responden independientemente en los diferentes tratamientos, no mostrando efecto sinérgico.
Palabras Clave:
PUFAs, ácido retinoico, PPARs, células cancerosas de mama
Revista de la Facultad de Ciencias Médicas 2016; Supl.(1):
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XVII Jornada de Investigación Científica JIC 2016
LIPOSOLUBLE NUTRIENTS AND THEIR EFFECTS ON HUMAN BREAST CANCER CELLS
Moreno Pascal FN1, García Hidalgo R1, Soria AE2, Quiroga PL1
1- Instituto de Biologìa Celular y Cátedra de Biologìa Celular,Histologìa,Embriologìa . FCM-UNC;
2- Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (INICSA) CONICET-FCM,UNC. Cátedra Biología Celular, Histología y Embriologia.FCM-UNC
Persona que presenta:
Moreno Pascal FN, [email protected]
Abstract:
Epidemiological and experimental studies suggest that retinoic acid and polyunsaturated fatty acids
(PUFAs) have a modulatory role in neoplasia. The synergy of these compounds was evaluated,
using a specific inhibitor of PPARy (GW9662), a natural ligand of fatty acids.
Two cell lines of human breast cancer were used, MCF-7 and T47-D. The cells were treated for
24-48 hours with retinoic acid (ATRA, RA = 0-10 uM) alone or in combination either with fatty acids
ω6 (AA: arachidonic acid, 50 uM) or ω3 (EPA: eicosapentaenoic acid, 50 uM). Also, they received 0
or 50 uM of GW 9662. Under these conditions, we evaluated: proliferation (resazurin staining), lipid
incorporation (gas chromatography), degree of lipid peroxidation and cell stress (enzymatic marker:
GTTP). Data were expressed as mean ± SD of at least three separate experiments performed in
triplicate. The effects of different treatments were compared using ANOVA followed by Fisher’s test
for a level of p<0.05.
The fatty acid profile in both cell lines showed a positive relationship with the exogenous addition of
the corresponding fatty acids. The RA presented itself antitumor activity in both cells lines in absence or presence of antagonist (GW 9662) (p ≤ 0.01), whereas PUFAs needed RA to show inhibitor
activity. In T47-D cells the RA + AA + GW9662 treatment showed antitumor activity with formation of
lipid peroxides (p <0.05), respect to controls (C = 0.422 abs. vs. RA + AA + GW 9662 = 0.996 ).
GW 9662 increased the cytotoxic effect of all treatments without showing any activity by itself. Therefore, we did not observe synergy when the cells were treated with retinoic acid and fatty acids (AA
and EPA) with addition of GW 9662.
Keywords:
PUFAs, retinoic acid, PPARs, breast cancer cells
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Revista de la Facultad de Ciencias Médicas 2016; Supl.(1):