cebo humano y trampa de luz “cdc” - BVS-INS
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cebo humano y trampa de luz “cdc” - BVS-INS
MINISTERIO DE SALUD INSTITUTO NACIONAL DE SALUD CENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº74 NEIL EDWIN SALAZAR CAPCHA WERTHER FERNANDO FERNÁNDEZ RENGIFO JOSÉ ALBERTO IANNACONE OLIVER ANA MARIA MORALES AVALOS MANUEL ESPINOZA SILVA 2005 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO INSTITUTO NACIONAL DE SALUD OFICINA GENERAL DE INVESTIGACIÓN Y TRANSFERENCIA TECNOLÓGICA. RED DE SERVICIOS DE SALUD ALTO AMAZONAS – HOSPITAL “SANTA GEMA” YURIMAGUAS, LORETO, PERÚ INFORME FINAL DEL PROYECTO REALIZADO: ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO INVESTIGADORES Neil Edwin Salazar Capcha, Werther Fernando Fernández Rengifo, José Alberto Iannacone Oliver, Ana Maria Morales Avalos & Manuel Espinoza Silva PROCEDENCIA : ALTO AMAZONAS, LORETO CODIGO OGITT : 2 – 04 -10 – 04 - 032 RESOLUCIÓN JEF. N : 786-2004 - J-OPD/INS – (15-10-2004) FINANCIAMIENTO : INS - MINSA. En el marco del “V” Concurso Nacional para Proyectos de Investigación en Enfermedades Emergentes, Reemergentes y otras enfermedades regionales no infecciosas Año 2004. 2004 - 2005 2 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO II. AUTORES: INVESTIGADOR: Biólogo. Neil Edwin Salazar Capcha1. 1 Oficina de Salud Ambiental de la Red Alto Amazonas – Loreto, Perú. Hospital “Santa Gema” Yurimaguas, Calle Progreso N° 305 - 307 – Yurimaguas - Alto Amazonas, Perú. E-mail: [email protected] CO-INVESTIGADOR: Biologo. Werther Fernando Fernández Rengifo2, 2 Oficina de Salud Ambiental de la Red Alto Amazonas – Loreto, Perú. Hospital “Santa Gema” Yurimaguas, Calle Progreso N° 305 - 307 – Yurimaguas - Alto Amazonas, Perú. E-mail: [email protected] CO-INVESTIGADOR: Biologo. Dr. José Alberto Iannacone Oliver3, 3 Laboratorio de Ecofisiología Animal. Facultad de Ciencias Naturales y matemáticas. Universidad Nacional Federico Villarreal. Calle San Marcos 383, Lima – Perú. E-mail: [email protected] CO-INVESTIGADOR: Dra. Ana Maria Morales Avalos 4 4 Oficina General de Investigación y Transferencia Tecnológica. Instituto Nacional de Salud. Calle Cápac Yupanqui 1400, Lima - Perú. E-mail: [email protected] CO-INVESTIGADOR: Dr. Manuel Espinoza Silva 5 5 Oficina General de Investigación y Transferencia Tecnológica. Instituto Nacional de Salud. Calle Cápac Yupanqui 1400, Lima - Perú. 3 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO III. INDICE I II III IV V VI VII Titulo Autores – filiación institucional Índice Resumen en español Resumen en Ingles Introducción Objetivos VII. 1. Objetivo General VII. 2. Objetivo Especifico VIII Materiales y métodos VIII. 1 Zona de estudio VIII. 2 Criterios de selección de las viviendas y personal para la vigilancia entomológica con los dos métodos de estudio. VIII. 3 Colecta de Anopheles spp VIII. 4 Método de captura con cebo humano VIII. 5 Método de captura con trampas de luz “CDC” VIII. 6 Determinación de las proteínas de circumesporozoito (CE) de Plasmodium falciparum (Pf), Plasmodium vivax (Pv), PvVK247 y PvVK210, mediante la prueba de Elisa. VIII. 7 Diseño de estudio VIII. 8 Criterios de inclusión VIII. 9 Identificación de Anopheles spp VIII. 10 Análisis de datos IX Resultados IX. 1. Incidencia de Plasmodium X Discusión X. 1 Incidencia de Plasmodium XI Conclusiones XII Recomendaciones XIII Agradecimientos XIV Fuente de financiamiento XV Referencias bibliográficas XVI Tablas Nº 01 – 11 XVII Figuras Nº 01 – 10 XVIII Anexos: A - Z., - AB 4 Pag. 01 02 03 04 05 06 07 07 07 08 08 09 09 10 11 13 13 14 14 14 16 20 22 26 27 28 28 29 29 33 - 41 51 52 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO IV. RESUMEN Objetivo: Evaluar la efectividad de dos métodos de colectas para Anofelinos adultos (cebo humano y trampas de luz CDC), en el intra y peri-domicilio durante la época lluviosa y seca de la región, así como determinar el grado de incidencia a malaria por el personal capturador con cebo humano, entre enero a Junio del 2005 en una localidad endémica de malaria del distrito de Yurimaguas, Loreto, Perú. Material y métodos: Se realizaron las colectas de los mosquitos adultos con cebo humano y trampas de luz CDC en cinco barrios: San Juan, Santa Rosa, Central, San Antonio y Florida de la localidad de Munichis, Yurimaguas. En cada barrio se seleccionaron dos casas por cada método de colecta. Se estimaron ecuaciones de regresión lineal, cuadrática y cúbica para calcular el número de anofelinos colectados por cebo humano a partir de los datos de captura con trampas de luz. Resultados: Se capturó un total de 7790 anofelinos en cebos humanos y 1525 en trampas de luz. Durante toda la evaluación se encontraron nueve especies de Anopheles, siendo las cuatro más abundantes: Anopheles benarrochi Gabaldon, Cova & López, 1941 (85,2%), Anopheles rangeli Gabaldon, Cova & López, 1940 (7,3%), Anopheles konderi Galvao & Damasceno, 1942 (4,0%), y Anopheles triannulatus Neiva & Pinto, 1922 (3,1%) y. La trampa de luz CDC capturó el 16,4%, 15,3%, 17,1% de anofelinos totales, en el intradomicilio y en el peridomicilio, respectivamente, en comparación con los capturados por cebo humano. No existieron diferencias entre la época seca y lluviosa en ninguno de los parámetros evaluados. Conclusiones: Se proponen tres modelos de regresión para estimar el número de anofelinos en cebos humanos intra y peridomiciliario a partir de trampas de luz CDC. Palabras clave: Anopheles; Cebo humano; Malaria; Métodos de captura, Perú, Trampas de luz, Yurimaguas (Fuente. BIREME) 5 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO V. ABSTRACT Objective: Evaluate the effectivy of two methods of catching of adult Anophelines (human bait and CDC light trap), in intra and peridomiciliary during wet and dry period, and also determinate malaria incidence level by capturer person by human bait, between January and June 2005 in an endemic locality of malaria from Yurimaguas district, Loreto, Peru. Material and methods: Catching of adult mosquitoes was performed by human bait and CDC light traps in five village: San Juan, Santa Rosa, Central, San Antonio and Florida of locality of Munichis, Yurimaguas. In each village were selected two houses by each method of catching. Equations of lineal, quadratic and cubic regression was estimated to determinate number of anophelines collected by human bait since dates of CDC light trap caughts. Results: A total of 7790 anophelines in human baits and 1525 in CDC light trap were collected. During all evaluation a total of nine species of Anopheles was found, being the four more common: Anopheles benarrochi Gabaldon, Cova & Lopez, 1941 (85.2%), Anopheles rangeli Gabaldon, Cova & López, 1940 (7.3%), Anopheles konderi Galvao & Damasceno, 1942 (4.0%), and Anopheles triannulatus Neiva & Pinto, 1922 (3.1%). CDC Light trap caught about 16,4%, 15,3%, 17,1% of total anophelines, in intradomiciliar and in peridomiciliar, respectively in comparison with catching by human bait. Not difference significanty exists between dry and wet season in none of parameters evaluated. Conclusions: three models of regression to estimate the number of anopheline on human bait intradomiciliar and peridomiciliar since CDC light traps were propoused. Key words: Anopheles, human bait, light trap, malaria, methods of catch, Peru, Yurimaguas. (Fuente. BIREME) 6 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO VI. INTRODUCCIÓN La malaria es una enfermedad metaxénica que está considerada como uno de los principales problemas de Salud Publica en América y en el mundo, situación que tiende a agravarse cada vez más, debido a factores climáticos, geográficos y a dificultades de orden económico o técnico1,2,3. Así mismo la incidencia de casos de malaria esta relacionada a cambios sociales y demográficos en los últimos años4,5. Otro factor es la ausencia de un control efectivo del mosquito en áreas donde la malaria es endémica5. Adicionalmente, la densidad poblacional de los mosquitos ha aumentado en áreas urbanas tropicales debido al incremento de hábitats larvario6,7. Otras causas son el movimiento constante de personas infectadas con el Plasmodium vivax ó P. falciparum, cambios en la Política de Salud Pública que pone énfasis en responder a las epidemias con alta tecnología dirigida al control del mosquito más que a prevenir las epidemias con medidas de saneamiento ambiental para reducir la población del mosquito8,9. La malaria es considerada por la Organización Mundial de la salud (OMS), como una enfermedad re-emergente10,11. En la provincia de Alto Amazonas, región Loreto, Perú, la malaria, tiene antecedentes tan antiguos como en el resto de la Amazonía, complicándose el escenario epidemiológico a partir de 1991, con el ingreso de P. falcíparum a Perú por la frontera Norte con el Ecuador, distrito de Pastaza y en el mismo año en zonas del distrito de Yurimaguas (5° 53´ 30´´ L.S y 76° 05´ 26´´ L.O), centros poblados menor de Pampa Hermosa y Munichis. Siendo que la lucha antivectorial con frecuencia es costosa, se hace necesario elaborar nuevas estrategias de vigilancia Entomológica técnico científica que permita tener un programa sostenible en el tiempo8, especialmente dirigidas a evitar el mayor contacto vector - hombre, en la transmisión de la malaria. El uso de las trampas de luz “CDC” resulta prometedor como un método alternativo de capturas para anofelinos2,12,13. El cual remplazaría al método de colecta tradicional de cebos humanos, en la cual el personal se expone a la picadura y por ende al peligro de infectarse de malaria y posiblemente sería un vehículo más de transmisión de la 7 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO enfermedad. Este método requiere de esfuerzo laboral, es tedioso, agotador y costoso para los programas debido a las remuneraciones de horas nocturnas. En adición, este método presenta una serie de objeciones de carácter ético y práctico12,14. VII. OBJETIVOS DEL ESTUDIO VII. 1. OBJETIVO GENERAL Realizar un estudio comparativo con dos métodos de colectas para Anofelinos adultos (cebo humano y trampas de luz “CDC”), a fin de evaluar la efectividad, el riesgo o el complemento en las colectas, en el intradomicilio y peridomicilio respectivamente, en una de las principales áreas maláricas del distrito de Yurimaguas, Loreto, Perú, durante la época lluviosa y seca de la región. VII. 2. OBJETIVOS ESPECIFICOS Conocer la dinámica poblacional de anofelinos spp. en el intradomicilio y peridomicilio de nueve casas, por cada método de captura (cebo humano y trampas de luz “CDC”), distribuidas en las zonas con mayores reportes e incidencia a casos de malaria de la localidad de Munichis. Relacionar los parámetros entomológicos, físicos y parasitológicos, obtenidos en el estudio comparativo (cebo humano y trampas de luz CDC), a través del análisis de sus componentes principales (CP), durante la época lluviosa y seca. Determinar la presencia de proteínas, circumesporozoito (CE) de Plasmodium falciparum (Pf), Plasmodium vivax (Pv) PvVK247 Y PvVK210, en los anofelinos capturados con ambos métodos de colecta, mediante la prueba de Elisa. Determinar a partir de las colectas de Anopheles spp. en las trampas de luz “CDC”, lo que se obtendría en el cebo humano (intradomiciliarimente y peridomiciliarimente), mediante el estimado de tres ecuaciones propuestas (regresión lineal, cuadrática o cúbica). Determinar el grado de incidencia a contraer malaria por parte del personal capturador con el método de cebo humano, en la localidad de Munichis. 8 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO VIII. MATERIALES Y MÉTODOS VIII. 1. ZONA DE ESTUDIO El presente estudio fue realizado en la localidad del Centro Poblado Menor de Munichis (Figura. 1), ubicado al extremo Nor-Oeste del distrito de Yurimaguas (5º 53´ 38´´ LS; 76º 06´ 19´´ LO), Perú, en un total de 18 (100%), de casas seleccionadas para la vigilancia entomológica mensual (Figura 2). La ubicación y elevación de cada vivienda fue registrada mediante un sistema de posicionamiento geográfico (GPS)Garmín - 12 canales, así como el tipo de superficie de cada vivienda (Tabla 1). Las dieciocho casas seleccionadas para la vigilancia entomológica de anofelinos por tipo de superficie (Figura. 3 y 4), fueron: 55,5 % son de madera, 22,2 % de topa, 11,1 % de pona y 11,1 % de adobe (Tabla 1). La localidad de Munichis, estratégicamente es considerada como una zona centinela o punto fijo, en la vigilancia entomológica del vector de la malaria, al pertenecer a la región de selva baja, con una topografía accidentada, cuya altitud máxima no supera los 180 msnm. El clima es húmedo tropical con lluvias frecuentes durante todo el año, pero con dos épocas o periodos bien definidos: Noviembre – Abril que es el periodo de mayor incidencia de las lluvias (Época lluviosa) y Mayo – Octubre que es el periodo de menos lluvias (Época seca). La precipitación pluvial anual es de 2200 mm. La temperatura promedio en la fase de campo durante las seis evaluaciones fue 25,6º C. En cambio, durante el invierno fue 26,0º C y 25,2º C en verano. La humedad relativa promedio fue de 85%, en invierno fue 84,9 % y 85,1 % en verano (Tabla anexo. T). El Centro Poblado Menor de Munichis está zonificada en 05 zonas y/o barrios, con una población de 1330 habitantes, distribuida en 258 viviendas, con condiciones bastante precarias de saneamiento ambiental. Esta localidad se caracteriza por ser una zona fuertemente intervenida por el hombre como consecuencia de la extracción de recursos naturales de la región, lo cual ha ocasionado deforestación y destrucción del suelo, generando espacios para la formación de criaderos potenciales para formas inmaduras de anofelinos (Figura. 7), que sumado a las condiciones climáticas, la 9 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO accidentada geografía y el flujo constante de personas por el creciente intercambio comercial, convierten a Munichis en una zona de riesgo para la transmisión de malaria. En este escenario se han presentado los primeros brotes epidémicos de malaria de la provincia en el año 1991. VIII. 2. CRITERIOS DE SELECCIÓN DE LAS VIVIENDAS Y PERSONAL PARA LA VIGILANCIA ENTOMOLOGICA CON LOS DOS MÉTODOS DE ESTUDIO En cada barrio se seleccionaron dos casas por cada método de colecta (Cebo humano y Trampas de Luz CDC); las cuales se eligieron de acuerdo a los reportes de pacientes con malaria (P. vivax y/o P. falciparum), registrados en el Puesto de Salud del CPM de Munichis en el año 2004. Así como de encontrarse cerca de criaderos potenciales (Figura. 7), a larvas de anofelinos spp. La ubicación geográfica de cada vivienda seleccionada, en total (18 =100%), para la vigilancia entomológica mensual, fue registrada mediante un sistema de posicionamiento geográfico (GPS) - Garmín 12 canales. El trabajo de campo, referido a la capturas de Anofelinos con los dos métodos (Cebo humano y Trampas de Luz “CDC”), fue realizado en un 60% por personal de la localidad del CPM de Munichis, previa coordinación con las autoridades locales, y del sector salud (Puesto de salud de Munichis), para su convocatoria, selección y capacitación previamente para este fin (Figura 9), mediante la realización in situ de tres cursos - talleres sobre vigilancia entomológica; el 40% restante fue personal con experiencia de la oficina de Salud Ambiental – Hospital “Santa Gema” Yurimaguas, los cuales fueron contratados exclusivamente para estas evaluaciones. Además se contó con un riguroso sistema de supervisión de campo y de gabinete. VIII. 3. COLECTA DE Anopheles spp Se realizaron las colectas de los mosquitos adultos con los métodos de cebo humano (Figura. 5), y trampas de luz CDC12 (Figura. 6), mensualmente, entre enero a junio del 2005 en cinco barrios de la localidad del Centro Poblado Menor de Munichis. La 10 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO distribución por barrios se presenta en la Tabla 1. La metodología que se empleó en cada método de captura para anofelinos, es la estandarizada por la OPS/OMS1 y OPS15. VIII. 4. MÉTODO DE CAPTURA CON CEBO HUMANO Las colectas de mosquitos con el método de colecta de cebo humano (Figura. 5), se realizaron teniendo como materiales indispensables: tubos colectores, vasos de colecta, linternas de mano, pilas y focos de linterna de recambio, los cuales se emplearon en las capturas con el método de cebo humano en las zonas del intradomicilio y peri-domicilio respectivamente, en dos viviendas seleccionadas por cada barrio, las cuales se utilizaron durante todo el estudio (épocas de invierno y verano de la región). Todas las colectas se efectuaron durante tres noches consecutivas, en cada mes, donde el periodo completo de captura por noche se considero (12 horas). En el intradomicilio y peridomicilio las colectas de mosquitos se realizo a partir de las 18.00 hasta las 6.00 horas, en parejas y por turnos (01 persona en el intradomicilio y 01 en el peridomicilio). Teniendo como características: 1º.- El personal contratado para la actividad, debe conocer al mosquito anofelino ó “Virote”, para tener una mayor facilidad en las capturas durante las horas de colecta en cada vivienda seleccionada. 2º.- Preparar su materia indispensable para las capturas: Linterna de mano con pilas, un tubo aspirador y sus vasos colectores rotulados por cada hora, un reloj, Lápiz y cinta de masking. 3º.- El personal debe de estar 10 minutos antes de iniciado las capturas en cada vivienda elegida para las capturas por barrios. 4º.- Escoger un sitio adecuado en donde sentarse, puede ser una silla o un tronco, tanto para el personal ubicado en al zona del Intradomicilio como en el peridomicilio, en cada casa seleccionada. 5º.- Sacarse los dos zapatos y las medias y en lo posible arremangarse los pantalones hasta las rodillas. 6º.- Si existen anofelinos en la zona, estos llegan poco a poco o en cantidad y se comenzaran a posar para picar especialmente en las piernas, tobillos y dedos del pie. 7º.- Chequear regularmente la presencia de anofelinos prendiendo la linterna y enfocándola en piernas, pies y brazos. 8º.- Si un 11 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO mosquito anofelinos esta picando, lentamente tomar el tubo aspirador y colocar la boca del tubo rápidamente sobre el insecto en la piel para capturarlo. 9º.- verificar que el anofelino este dentro del tubo y se haya desprendido de la piel o para esto mover a penas el tubo hacia un lado mientras ejerce presión sobre la piel para forzar al zancudo a dejar de picar y separarse de la piel. 10º.- Poner rápidamente el dedo pulgar o índice sobre la boca del tubo para impedir que escape el mosquito. 11º.Colocar inmediatamente en los vasos colectores, rotulados por cada hora, todos los mosquitos anofelinos capturados en su turno. 12º.- Los mosquitos colectados con el método de cebo humano, fueron identificados, contados y embalados a la mañana siguiente. Las personas que realizaron las colectas con cebo humano, fueron rotadas en todas las casas seleccionadas para la vigilancia entomológica por barrios, del CPM de Munichis, durante tres noches consecutivas, cada mes; siendo, supervisado tres veces durante las capturas en cada turno. VIII. 5. METODO DE CAPTURA CON TRAMPAS DE LUZ “CDC”. El CDC (CDC miniature light trap) es una trampa luminosa utilizada para la captura de dípteros pequeños en especial vectores de enfermedades como los mosquitos, flebótomos y otros pequeños insectos atraídos por la luz24. Las colectas de mosquitos con trampas de luz CDC (Figura. 6), se realizaron teniendo como materiales: Trampas de luz CDC, mangas de tul con liga en un extremo, baterías de moto de 12 voltios - 5 amperios, soga o piola para sujetar al CDC, lápiz, alcohol al 75%, cinta de masking, linternas de mano, focos de 12 voltios y ligas de jebe. El CDC consiste de un tubo de aproximadamente 14 cm de largo x 11 de ancho de polietileno transparente y en su interior se encuentra centrado un pequeño motor de 12 voltios para mover una hélice de metal acoplado en su parte inferior. Por arriba del motor se encuentra acoplado un pequeño foco, el motor que mueve la hélice y enciende al foco funciona por medio de una batería de 12 voltios y 5 amperios. En la parte superior del CDC se encuentra acoplado un techo circular de metal el cual va a proteger al aparato de la lluvia y servir de reflejo para la luz emitida por el pequeño 12 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO foco de 12 voltios. En la parte inferior del CDC se coloca una bolsa de tul ó trampa de tela transparente en donde serán capturados los especimenes que son atraídos por la luz y absorbidos o chupado por la corriente de aire de la hélice. Lo más conveniente es usar un elástico en el anillo de la bolsa para que se sostenga a la parte inferior (boca) del CDC, y en el cambio de manga por hora, se utiliza ligas de jebe para sujetar la entrada de la bolsa y no puedan escapar las especies colectadas en cada hora de muestreo. Para el funcionamiento de las trampas CDC se conecta a las baterías de 12 voltios - 5 amperios, el cable negro al polo negativo y el cable rojo al polo positivo. Una vez que el CDC funciona, asegurarse de que los cables están colocados en el polo correcto sintiendo con la palma de la mano la dirección del flujo de aire en el CDC. El flujo debe ser de arriba del CDC hacia abajo. La altura de ubicación de cada trampa CDC, tanto en el intradomicilio como en el peridomicilio de cada vivienda evaluada por barrio, fue a un metro del suelo, (este aporte en el presente estudio referido a la altura de ubicación de la trampa de luz, se debió a la propia experiencia por parte del personal de campo, quien comprobó in situ que a esa distancia los anofelinos eran mas susceptibles de ser capturados); a diferencia para las colectas de Lutzomyias en donde se recomienda que se cuelgue a una altura de 1.8 m a 2 m del suelo o un poco más alto25. Es muy importante que la trampa luminosa (hélice) siga funcionando al momento del cambio de manga ó al recoger el CDC en la mañana, caso contrario muchos de los especimenes capturados se escaparían antes de recoger los CDC. En lo que se refiere al lugar de trampeo (biotopos), de cada vivienda se colocaron simultáneamente dos trampas de luz CDC, distribuido en cada zona (01 en el peridomicilio y 01 en el intradomicilio), durante toda la noche las colectas de mosquitos se realizo a partir de las 18.00 hasta las 6.00 horas, en parejas (01 persona en el intradomicilio y 01 en el peridomicilio), por turnos, las personas que realizaron las colectas con trampas de luz CDC, fueron rotadas en las casas seleccionadas para la vigilancia entomológica por barrios, de la localidad de Munichis, durante tres noches consecutivas, de cada mes; siendo, supervisado tres veces por día, durante las 13 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO capturas, y en el cambio de mangas. Los mosquitos colectados con el método de trampas de luz CDC, fueron identificados in situ, contados y embalados a la mañana siguiente. VIII. 6. DETERMINACIÓN DE LAS PROTEÍNAS DE CIRCUMESPOROZOITO (CE) DE Plasmodium falciparum (Pf), Plasmodium vivax (Pv) PvVK247 Y PvVK210, MEDIANTE LA PRUEBA DE ELISA. Los mosquitos fueron evaluados en grupos que contuvieron la misma especie, la misma fecha, el mismo tipo de colecta, y el mismo barrio donde se realizo la colecta, Munichis. Los mosquitos individualmente se dividieron en dos partes, colocándose la cabeza y el tórax de 1 a 10 mosquitos en tubos de microcentrífuga de 1,5 mL. Las muestras fueron puestas en una solución amortiguadora de bloqueamiento 0,05% (Nonidet P-40) y después congeladas a -20°C hasta la realización de la prueba de ELISA. Los mosquitos fueron analizados para la presencia de proteínas de circumesporozoito (CE) de Plasmodium falciparum (Pf), Plasmodium vivax (Pv) PvVK247 y PvVK210 en armonía con los procedimientos de Wirtz et al33, 34, con ligeras modificaciones. Los tres ensayos de ELISA se corrieron consecutivamente transfiriendo las muestras de una placa de ensayo a una siguiente placa después de 2h de incubación. Los valores de absorbancia fueron registrados en un lector de placas de ELISA a 405 nm, 30 min después de la adición del sustrato (Faraj et al)27. Cinco controles negativos se corrieron en cada placa para su confirmación. Estas pruebas se realizaron en las instalaciones del Instituto de Investigación de Enfermedades Tropicales – NMRCD – Departamento de la marina de los Estados Unidos de América, gracias a las gestiones de la Bióloga Entomóloga carmen Flores. VIII. 7. DISEÑO DEL ESTUDIO El estudio fue de tipo longitudinal y comparativo en el tiempo. Se incluyó en el análisis para los índices entomológicos los obtenidos de la vigilancia entomológica realizados por cada método de captura (cebo humano y trampas de luz CDC), en sus cinco barrio (San Juan, Santa Rosa, Central, San Antonio y Florida), de la localidad del CPM de 14 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO MUNICHIS, durante los meses de invierno (enero, febrero y marzo), y verano (abril mayo y junio), del 2005. Se relacionó los índices entomológicos (IPHH, IPHN (Tabla anexo U – Z), ICMH y ICMN), con los casos de malaria de la población del CPM de Munichis, registrados mensuales en el Puesto de Salud durante la fase de campo del estudio (Tabla anexo AA), así como en el personal de campo que realizo las capturas con el método de cebo humano, en la época de lluvias y seca de la región (Tabla anexo AB). VIII. 8. CRITERIOS DE INCLUSIÓN Los datos registrados en el presente trabajo, se obtuvieron de las capturas de anofelinos spp., en 18 viviendas (09 para cebo humano y 09 en trampas de luz CDC) (Figura 2), en cada mes y durante la época lluviosa o invierno (enero a marzo 2005), y la época seca o verano (abril a junio 2005), distribuidos en cinco barrios: (San Juan (04 casas), Santa Rosa (04 casas), Central (04 casas), San Antonio (04 casas) y la Florida (02 casas), de la jurisdicción del Centro Poblado Menor de Munichis, distrito de Yurimaguas. El método de Cebo Humano fue específico para hembras de anophelinos spp, por ser hematófago a diferencia del macho que es fitófago. VIII. 9. IDENTIFICACIÓN DE ANOPHELES SPP. La determinación específica de las formas adultas de los culícidos (Figura. 8), se realizó in situ en la localidad de Munichis, y el control de calidad se realizo en el Laboratorio de Entomología de la Dirección de Salud Ambiental del Hospital Santa Gema Yurimaguas, empleando claves taxonómicas especializadas16. Así mismo los especimenes recolectados en campo, fueron derivaros a las instalaciones del área de entomología del NMRCD - Lima, para su control de calidad y pruebas de Elisa en los anofelinos spp., capturados en la localidad de Munichis VIII. 10. ANÁLISIS DE DATOS Se empleó la prueba de t de student para determinar si existen diferencias en la elevación geográfica entre las casas con cebos humanos y Trampas de luz CDC. Se uso el análisis de correlación de Pearson (r) para determinar si las diferentes especies 15 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO de mosquitos colectados intra y peridomiciliariamente en cebos humanos y en trampas de luz, respectivamente, estaban relacionadas. Se usó el ANDEVA para determinar si existen diferencias en el número de anofelinos capturados por cebo humano y por trampas de luz CDC, intra y peridomiciliariamente entre los seis meses de evaluación y entre las nueve Casas de los barrios de la localidad de Munichis. En adición se usaron diferentes ecuaciones de regresión (lineal, cuadrática y cúbica) para estimar el N° de anofelinos en cebos humanos a partir de trampas de luz CDC intra y peridomiciliariamente en 12 h durante tres días de evaluación. La correlación lineal se usó para relacionar el número de anofelinos por cebos humanos y por trampas de luz CDC, intra y peridomiciliario durante los seis meses del 2005 en la localidad de Munichis, Yurimaguas, Perú. Se empleó el análisis de componentes principales (ACP) como un criterio de reducción y ordenación de los dos parámetros físicos y de veinte índices para anofelinos: (IPHNF = IPHN – barrio Florida; IPHNSA 1 = IPHN – barrio San Antonio, Casa 1; IPHNSA 2 = IPHN – barrio San Antonio, Casa 2; IPHNSJ 1 = IPHN – barrio San Juan, Casa 1; IPHNSJ 2 = IPHN – barrio San Juan, Casa 2; IPHNC 1 = IPHN – barrio Central, Casa 1; IPHNC 2 = IPHN – barrio Central, Casa 2; IPHNSR 1 = IPHN – barrio Santa Rosa, Casa 1; IPHNSR 2 = IPHN – barrio Santa Rosa, Casa 2; IPHNT = IPHN Total; CHI = Número de anofelinos colectados con cebo humano intradomiciliario; CDCI = Número de anofelinos colectados en trampas de luz CDC intradomiciliario; CHP = Número de anofelinos colectados con cebo humano peridomiciliario; CDCP = Número de anofelinos colectados en trampas de luz CDC peridomiciliario; CHI A. benarrochi = Nº de Anopheles benarrochi en cebo humano intradomiciliario en 12 h durante tres días de evaluación; CHP A. benarrochi = Nº de Anopheles benarrochi en cebo humano peridomiciliario en 12 h durante tres días de evaluación; CHI A. rangeli = Nº de Anopheles rangeli en cebo humano intradomiciliario en 12 h durante tres días de evaluación; CHP A. rangeli = Nº de Anopheles rangeli en cebo humano peridomiciliario en 12 h durante tres días de evaluación; CDCI A. benarrochi = Nº de Anopheles benarrochi en trampas de Luz CDC intradomiciliario en 16 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO 12 h durante tres días de evaluación; CDCP A. benarrochi = Nº de Anopheles benarrochi en trampas de Luz CDC peridomiciliario en 12 h durante tres días de evaluación), obtenidos de cada uno de los seis muestreos, para producir variables compuestas no relacionadas. La rotación varimax fue realizada para facilitar la interpretación de los componentes del ACP17,18. Se empleó la prueba de t de student para determinar si existen diferencias estaciónales entre la estación seca y lluviosa para los dos parámetros físicos y los entomológicos. Con el fin de asegurar la homogeneidad de las varianzas y la normalidad, los datos fueron previamente transformados a log(n+1). En caso que existiera diferencias significativas entre los tratamientos se empleó la prueba de Tukey. Los datos se analizaron mediante el paquete SPSS ver. 13,0. Para el calculo de la diversidad ecológica alfa (Tabla 10), de los mosquitos se empleó el índice de Shannon-Wiener (H’) (bits·ind), el índice de Simpson (C), el índice de Margalef (Dmg), el índice de equidad de Pielou (J´) y el índice de Berger-Parker (d) (Moreno et al)29. Para el análisis de la diversidad ecológica beta (Tabla 11), comparativo de similaridad para los mosquitos entre cebo humano intra-domiciliario (CH-I) y peri-domiciliario (CH-P), trampa de luz CDC intra-domiciliario (CDC-I) y trampa de luz CDC peri-domiciliario (CDC-P) se aplicó el índice cuantitativos de Sörensen (Bray-Curtis)(Iscuantitativo)(Moreno et al) 29 IX. RESULTADOS No existieron diferencias en la elevación geográfica entre las casas con cebos humanos (152,2 ± 4,6) y Trampas de luz CDC (151,5 ± 5,10) (t=0,29 P =0,77; Prueba de Levene, F=0,33, P=0,57) (Tabla 1). Anopheles benarrochi Gabaldon, Cova & López, 1941 fue la especie más abundante en intra y peridomicilio en cebo humano y en trampas de luz CDC (Tabla 2). En el intradomicilio en cebo humano las cuatro especies más abundantes en orden de mayor a menor fueron: A. benarrochi (92,2%) > Anopheles konderi Galvao & Damasceno, 1942 (3,4%) > Anopheles rangeli Gabaldon, Cova & López, 1940 (2,7%) 17 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO > Anopheles triannulatus Neiva & Pinto, 1922 (1,1%). En cambio en el peridomicilio en cebo humano las especies más abundantes en orden de mayor a menor fueron: A. benarrochi (90,7%) > A. konderi (4,5%) > A. rangeli (2,8%) > A. triannulatus (1,5%). En el intradomicilio en trampas de luz CDC las tres especies más abundantes en orden de mayor a menor fueron: A. benarrochi (63,5%) > A. rangeli (22,2%) > A. triannulatus (14%). En el peridomicilio en trampas de luz CDC las cuatro especies más abundantes en orden de mayor a menor fueron: A. benarrochi (47,3%) > A. rangeli (35,4%) > A. triannulatus (10,7%) > A. konderi (5,8%) (Tabla 2). Durante toda la evaluación se encontraron un total de nueve especies de Anopheles, siendo las cinco más abundantes en orden de mayor a menor: A. benarrochi (85,2%) > A. rangeli (7,3%) > A. triannulatus (3,1%) > A. konderi (3,9%) > A. strodei (0,3%) (Tabla 2). Con relación al número de especies de Anopheles colectadas por cebo humano y trampa de luz CDC en el intradomicilio y peridomicilio se encontró en orden de mayor a menor lo siguiente: Cebo humano peridomicilio (n= 7) > Cebo humano intradomicilio (n=6) = Trampa de luz CDC peridomicilio (n=6) > Trampa de luz intradomicilio (n= 4). Anopheles forattinii Wilkerson & Sallum, 1999, se colectó por ambos procedimientos de captura; mientras Anopheles shannoni Davis, 1931, Anopheles nuñeztovari Gabaldón, 1940 y Anopheles strodei Root, 1926 fueron solo colectadas en cebo humano. En cambio A. mattogrossensis Lutz and Xeiva, 1911 sólo fue colectada en trampas de luz CDC (Tabla 2). La trampa de luz CDC capturó el 16,4%, 15,3%, 17,1% de anophelinos totales, anophelinos en el intradomicilio y peridomicilio, respectivamente en comparación con los capturados por cebo humano. La trampa de luz CDC capturó el 10,3 %, 12,5%, 9,7% de A. benarrochi total, A. benarrochi en el intradomicilio y A. benarrochi en el peridomicilio, respectivamente en comparación con los capturados por cebo humano. Igual comportamiento se encontró en A. konderi, en donde la trampa de luz CDC capturó el 14,9%, 0,8%, 2,1% del total, en el intradomicilio y en el peridomicilio, respectivamente en comparación con los capturados por cebo humano. Un patrón 18 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO opuesto se encontró para A. rangeli, en donde el cebo humano capturó el 31,8%, 40,5%, y 27,6% del total, en el intradomicilio y en el peridomicilio, respectivamente en comparación con los capturados por trampas de luz CDC. Este mismo comportamiento se encontró en A. triannulatus, en donde el cebo humano capturó el 36,4%, 31,4% y 40% del total, en el intradomicilio y en el peridomicilio, respectivamente en comparación con los capturados por trampas de luz CDC (Tabla 2). Se encontró una alta correlación lineal significativa entre la abundancia de mosquitos de las diferentes especies de Anopheles colectados durante todo el estudio con cebo humano y trampas de luz CDC intradomiciliaria y peridomiciliaria (Tabla 3a). Se encontró una alta correlación lineal significativa entre el número de Anopheles colectados en 12 h durante tres días de evaluación con cebo humano y trampas de luz CDC intradomiciliaria y peridomiciliaria respectivamente (Tabla 3b). Se observó una variación del total del número de Anopheles capturados por cebo humano en el intradomicilio, encontrándose diferencias entre enero y junio del 2005, y entre mayo y junio del 2005, respectivamente (Tabla 4). No se encontraron variaciones significativas en el total de Anopheles capturados por trampas de luz CDC en el intradomicilio (Tabla 4). Se encontraron variaciones significativas en el total de Anopheles capturados por cebo humano en el peridomicilio entre Junio y Enero-Mayo y 2005. En adición se vieron diferencias significativas entre el total de Anopheles capturados por trampas de luz CDC en el peridomicilio entre Abril y Junio (Tabla 4). No se encontraron variaciones en el número de Anopheles capturados por cebo humano en el intradomicilio y peridomicilio, y por trampas de luz CDC en el intradomicilio entre las casas en los barrios de la localidad de Munichis (Tabla 4). Sin embargó, solo se encontró diferencias entre el número de Anopheles capturados por trampas de luz CDC en el peridomicilio entre la casa de Santa Rosa 1, y las casas Central 1 y San Juan 1 (Tabla 4). 19 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Con relación a la temperatura, se encontró que existieron diferencias estaciónales entre febrero y mayo, y en la humedad relativa entre marzo y el resto de meses de 2006 (Tabla 4). El ACP produjo cuatro componentes con Eigenvalues > 1 para los parámetros físicos, y entomológicos (Tabla 5). Estos parámetros fueron ordenados en un espacio de dos dimensiones, deacuerdo al ACP. La temperatura y 13 parámetros entomológicos estuvieron correlacionados con el primer componente, que explicó el 50,925 % de la variabilidad. La humedad relativa, el índice de picadura hombre noche de la Casa Florida 1 (IPHNF), el índice de picadura hombre noche de la Casa San Antonio 1 (IPHNSA1), el índice de picadura hombre noche de la Casa San Antonio 2 (IPHNSA2) y el índice de picadura hombre noche de la Casa Central 1 (IPHNC1) estuvieron correlacionados con el segundo componente que explicó el 27,489 % de la variabilidad (Tabla 5). El tercer componente describió la variación del número de A. rangeli colectados en trampas de luz CDC intradomiciliario (A.r.-CDCI) (Tabla 5) y el cuarto componente el número de anofelinos en Trampas de luz CDC intradomiciliario (CDCI). El CP1 va incluyó 14 variables (Tabla 5). No existieron diferencias significativas entre la época lluviosa (muestreo 1 al 3) y seca (muestreo 4 al 6) para 20 parámetros entomológicos, y los dos parámetros físicos (temperatura y la humedad relativa) (Tabla 6). Se realizaron regresiones para estimar CHI intradomiciliario y peridomiciliario a partir de CDCI y CDCP, respectivamente. Tres modelos de regresión (lineal, cuadrático y cúbico) para estimar los CH intra y peridomiciliario a partir de los valores promedio de CDC fueron válidos (Tabla 7), aunque los coeficientes de determinación (R2) fueron relativamente bajos (entre 0,25 y 0,36). Un total de 7984 mosquitos anofelinos spp., fueron analizados por la técnica CEELISA (Tabla 8). Ocho especies fueron analizadas, siendo la secuencia en relación al número de especies evaluadas en orden descendente: An. benarrochi, An. rangeli, An. konderi, An. triannulatus, An. Strodei, An. forattinii y An. mattogrossensis con 20 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO nuñeztovari. An. benarrochi correspondió al 86,2% de los mosquitos anofelinos evaluados. Solo 10 (0,1%) de los mosquitos anofelinos fue positivo a la prueba de ELISA para Pv-VK247, el cual fue colectado entre el 18 al 20 de junio del 2005, del barrio de San Juan, y procedente de las colectas con cebo humano. Ningún otro anofelino fue positivo a la prueba de CE-ELISA para Pf, PvVK210 y PvVK247 (Tabla 8). IX. 1. INCIDENCIA DE PLASMODIUM La incidencia (x 1000 habitantes) de malaria por P. vivax o P. falciparum durante el periodo de estudio en la localidad de Munichis varió entre 11 a 29 casos por 1000 habitantes (Fig. 10). El 82,6% de los casos fue para P. vivax y el 17,4% para P. falciparum. El Promedio para el total de casos para Plasmodium, P. vivax y P. falciparum fue 17,29±6,45 (11-29); 14,29± 3,01 (11-20), y 3,00±4,69 (0-14), respectivamente. Los mayores picos se encontraron en Mayo y Julio del 2005 (Fig. 10). Los niveles propuestos para el Índice de Colecta Manga Noche (ICMN) en cinco categorías (Tabla 9), comparables a los niveles para IPHN fueron estimados a partir de las seis ecuaciones de regresión lineal, cuadrática y cúbicas peri-domiciliarias e intra-domiciliarias calculadas (Tabla 7). Este índice es catalogado en cinco categorías: muy alta, alta, mediana, baja y muy baja empleando las colectas de anofelinos adultos en las trampas de luz CDC, a través del Índice de Colecta Manga Noche (ICNM). Mathenge20 encontró que los anofelinos capturados por trampas de luz eran directamente proporcionales a los colectados por cebo humano, indicando que los valores de anofelinos obtenidos por trampas podían ser convertidos a lo obtenido por cebo humano. Los seis índices de diversidad alfa calculados para la fauna anofelina en la localidad de Munichis, Yurimaguas mostró que los índices J´ y H´ para los anofelinos capturados por las trampas de luz CDC fueron más altos que los colectados por cebo humano (Tabla 10), esto es debido a que los anofelinos colectados por cebo humano 21 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO mostraron una mayor dominancia de An. benarrochi, especie antropofílica según los índices D y C en comparación a los colectados por Trampa de luz CDC. Con relación a los valores de riqueza y Dmg presentaron mayores valores en el peridomiciliario que el intradomiciliario (Tabla 10). El índice de diversidad beta de similaridad de Sörensen cuantitativo (Iscuantitativo) mostró que los mayores valores de similaridad se encontraron entre los anofelinos colectados por el cebo humano peridomiciliario e intradomiciliario (89,93%), y entre los anofelinos colectados por las trampas de luz CDC peridomiciliario e intradomiciliario (78,60%) (Tabla 11). Estas altas similaridades encontradas, justifican el proponer una sola catalogación (Índice manga noche = IMN), sin tomar en cuenta si es peridomiciliaria o intradomiciliaria en cinco categorías para densidades de anofelinos adultos a partir de trampas de luz CDC equivalentes a las IPHN empleadas (Tabla 9). Sin embargo, esta propuesta del ICMN, aún solo ha sido validada para la zona de Munichis, Yurimaguas. Por lo que debería evaluarse si es que pudiera ser empleada en otras localidades del Perú. Durante los seis meses de evaluación (enero a junio del 2005), se encontró una incidencia promedio de 2,5±0,8 (2 a 4) casos mensuales de malaria en el personal de campo que participó en las colecta de los anofelinos mediante el método de cebo humano. Siendo un total de 15 casos de las 54 personas que participaron en la colecta de los anofelinos por cebo humano (Tabla anexo AB). Se encontraron diferencias significativas en la incidencia de casos de malaria entre el personal de campo que participó en la colecta de anofelinos como cebo humano (2,5±0,8) frente al personal que participó en las trampas de luz CDC (0±0) (t= 7,31; P= 0,001). Siendo por lo tanto el 4,8±1,2% mensual del total del personal que participó en la colecta empleando el cebo humano. En el caso de aquellos que participaron colectando por cebo humano, no existieron diferencias en la incidencia de malaria, entre los meses de invierno y verano (t =1,73; P = 0,16). A pesar de que Roper30 no encontró en los adultos de Padre Cocha, Loreto, Perú, que las actividades ocupacionales como: agricultura, pesca, docencia, o entre los que salen de casa antes de la seis de la mañana o los 22 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO que retornan después de las seis de la tarde incrementen el riesgo de malaria. Tampoco encontró riesgo a malaria en aquellos que ingresan al bosque amazónico o que participan en actividades recreativas u otras como: pasear después de las 18:00 horas, bañarse en ríos o cochas, ir a bailar, ir a beber a un bar local o participar en actividades religiosa. Sin embargo, observó que ver televisión de noche disminuía el riesgo a malaria en los adultos mayores de 16 años. En el presente trabajo, a pesar de que Munichis es considerada una zona de bajo riesgo a malaria en comparación a otras localidades de la provincia de Alto Amazonas y de la Amazonía peruana30, se puede observar que la actividad laboral de los adultos en participar temporalmente como personal de campo en las colecta de anofelinos por cebo humano incrementa la incidencia de riesgo a la malaria, los cuales al pasarse a incidencia (x1000) fluctúan entre 37 a 74 (45,2±13,6) (Fig. 9), por lo que estos resultados sustentan el no emplear el IPHN debido a fuertes razones éticas, y más bien continuar evaluando las trampas de luz “CDC” como método alternativo para la vigilancia epidemiológica vectorial. X. DISCUSIÓN El presente estudio evaluó la eficacia de dos métodos de colectas para anophelinos adultos: Trampas de luz “CDC” y Cebo Humano, en las zonas del en el intra y peridomicilio, en una localidad endémica a Malaria (Figura. 9). Muchos estudios han evaluado la eficiencia relativa de las trampas de luz CDC en relación al cebo humano, pero es muy dificultoso de comparar los resultados debido a que se han empleado diferentes metodologías y procedimientos. Así, algunas investigaciones emplean la misma casa en diferentes noches19. Pequeñas diferencias en la forma de dormir, disponibilidad de hospederos alternativos, temperatura, humedad, velocidad de viento y su dirección entre los diferentes días pudiera inducir variaciones en los resultados. En adición, los procedimientos usados para los estudios con cebos humanos también varían apreciablemente, algunos estudios usan un humano por casa, en cambio otros emplean dos personas por casa. Es necesario estandarizar las condiciones operacionales y los procedimientos de muestreo empleados si se requiere realizar 23 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO comparaciones validas entre varios estudios19,20,21. Nuestra metodología y procedimiento fue similar a Mathengue19, quienes emplearon en paralelo diferentes casas en la misma noche comparando trampas CDC y cebos humanos. Las fluctuaciones poblacionales de Anophelinos, mostraron como especie predominante a A. benarrochi (Tabla 2) La abundancia de esta especie, tanto en el intradomicilio y en el peridomicilio en cebo humano y en trampas de luz CDC, señalan a esta especie como de gran riesgo potencial antropofílico por incursionar en ambientes antropizados9. Los estudios sobre dinámica poblacional o comportamiento poblacional del vector permiten diseñar nuevas y mejores estrategias de lucha22. Las trampas de tipo CDC, al utilizar la luz como atrayente, a diferencia del método con cebo humano, captura indistintamente machos y hembras y por ende no permite determinar niveles de antropofilia. Esta trampa se puede utilizar tanto en intradomicilio, peri-domicilio o extradomicilio, y puede trabajar toda la noche o por un determinado número de horas, según los requerimientos del estudio a realizar12. Las evaluaciones de las trampas de luz CDC, han encontrado resultados prometedores2; aunque algunos autores mencionan que sólo se deben emplear en ambientes cerrados, no muy ventilados y no en el peridomicilio2, 12 . También las trampas CDC han sido utilizadas con éxito para evaluar medidas de intervención en la selva amazónica, donde las densidades de Anopheles darlingi Root, 1926 son sumamente elevadas23. En el presente estudio de tipo longitudinal se compara en el tiempo las capturas realizados con los métodos de las trampas de luz CDC y cebo humano, en donde este último tipo de colecta, es más eficiente en los siguientes cuatro criterios: 1) El número total de anofelinos capturados, 2) Al número de hembras de An. benarrochi capturados, el cual es el anofelino más importante como vector principal de malaria en la provincia de Alto Amazonas y por ende en el distrito de Yurimaguas, 3) Presenta altos niveles de antropofilia de esta especie, y 4) Se encuentra estandarizado los niveles de densidad de anofeles adultos en cinco categorías de IPHN (índice de picadura hombre noche). La eficacia no sólo debería incorporar los cuatro parámetros 24 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO previamente señalados, sino que el procedimiento que emplea las trampas de luz CDC podría remplazar al método de colecta tradicional de cebos humanos, debido a que esté último presenta las siguientes tres desventajas que deberían incorporarse al evaluar comparativamente su eficiencia: 1) El personal se expone a la picadura y por ende al peligro de infectarse de malaria, presentando una serie de objeciones de carácter ético y práctico; 2) Requiere de un mayor esfuerzo laboral, es tedioso y agotador, y finalmente, 3) Es más costoso para los programas de vigilancia epidemiológica de anofelinos vectores debido al pago de horas nocturnas. Algunos estudios han pretendido comparar las capturas por trampas de luz y el cebo humano, con diferentes conclusiones. Las discrepancias se atribuyen parcialmente a diseños experimentales diferentes, diferencias en la composición y densidades de especies en el área de estudio. Nuestros resultados concuerdan con lo encontrado por Mathengue20 quienes indicaron capturas proporcionales de anofelinos entre las trampas de luz CDC y el cebo humano. Sin embargo, las trampas de luz CDC solo capturaron entre el 16,4% al 17,1% de los anofelinos totales capturados por el cebo humano (Tabla 2). En el presente trabajo los datos que corresponden a seis meses de muestreo permiten proponer tres modelos de ecuaciones de regresión para estimar a partir del número de anofelinos de las capturas en trampas CDC en el intradomicilio y peridomicilio, el número de anofelinos capturados por cebo humano (Tablas 7). Por lo que es posible convertir el número de anofelinos capturados por trampas de luz CDC en su equivalente en cebo humano, para el cual existen rangos de riesgo para transmisión de malaria1. El ACP indicó una fuerte relación entre la temperatura y otros 13 parámetros entomológicos con el primer componente. Estos resultados muestran el alto grado de correlación entre la temperatura, el número de anofelinos intra y peridomicilio en cebos humanos y el número de anofelinos en el peridomicilio por trampas de luz CDC (Tabla 5). Guimaraes et al12 han encontrado una influencia de los factores climáticos, entre ellos la temperatura con la captura de anofelinos por cebo humano. Sin embargo, se 25 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO observa poca relación entre la temperatura y el número de anofelinos en el intradomicilio por trampas de luz CDC. En el presente estudio, sin embargo, cuando los resultados se analizaron por época lluviosa y seca, no existieron diferencias significativas en ninguno de los parámetros analizados (Tabla 6). Durante el presente estudio la época seca-lluviosa no fue un factor clave de influencia en la estacionalidad de Anofelinos en el intra y peridomicilio de cebo humano y trampas de luz CDC. En Anopheles darlingi Root 1926, se observó un incremento en sus poblaciones adultas en la estación lluviosa en Loreto y Madre de Dios capturados por cebo humano23. Se propone el índice de Colecta Manga Noche (ICMN) en cinco categorías (Tabla 9), con relación a la densidad de anofeles capturados: muy alta (>375), alta (180 – 375), mediana (35 – 180), baja (3 – 35) y muy baja (1 a 2) comparables a las cinco categorías de IPHN como muy alta (> 1000), alta (500 – 1000), mediana (100 – 500), baja (10 – 100) y muy baja (1 a 10). El ICMN se estimó a partir de las seis ecuaciones de regresión lineal, cuadrática y cúbica (Tabla. 7). Mathenge et al20 encontraron que los anofelinos capturados por trampas de luz eran directamente proporcionales a los colectados por cebo humano, indicando que los valores de anofelinos obtenidos por trampas de luz podrían ser convertidos a los obtenido por cebo humano. El método que empleo cebo humano capturo 411% más anofelinos que las trampas de luz CDC; así para obtener la misma cantidad de anofelinos totales por noches por cada colecta realizadas por cebo humano individual (IPHN), se requieren cuatro a cinco trampas de luz CDC. Sin embargo esta propuesta del uso del ICMN, sólo ha sido validada para la localidad del centro poblado menor de Munichis (zona de bajo riesgo a malaria), Yurimaguas, Loreto, Perú. Por lo que se recomienda que se debiera evaluar este método de trampas de luz CDC en otras localidades de mediano y alto riesgo a malaria de la provincia y del país. De los resultados obtenidos por la prueba de CE-ELISA se obtiene que solo An. benarrochi se encontró naturalmente infectado por P. vivax. Flores-Mendoza et al (2004)28 encontró para Loreto y Ucayali, Perú, que solo An. benarrochi y An. darlingi 26 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO se encontraron infectados por P. falciparum y P. vivax, entre 13 especies de anophelinos evaluados durante el 2001 y el 2002. Al igual en el presente estudio, An. rangeli, An. triannulatus y An. mattogrossensis, tampoco se encontraron infectados por alguna especie de Plasmodium (Tabla 8). An. benarrochi es considerado como un vector primario de malaria en los departamentos de Loreto y Ucayali, Perú donde An. darlingi no está reportado26. Sin embargo, estudios previos realizados por Need et al 31 , han encontrado a An. rangeli, An. triannulatus, An. oswaldoi y An. mattogrossensis positivos a la presencia de P. vivax-KV210 y P.vivax-KV247 durante 1990 y 1991. El porcentaje de infectividad natural de An. benarrochi a Plasmodium en Yurimaguas, es bajo en comparación a varios anofelinos de la amazonía: Anopheles neomaculipalpus Curry (0,84%), An. darlingi (0,82%) y Anopheles marajoara Galvao & Damasceno (0,27%) en Venezuela (Moreno et al)30; An. darlingi (0,98%) y An. benarrochi (0,14%) en Perú (Flores – Mendoza et al)28. Los bajos resultados obtenidos por la prueba CEELISA en An. benarrochi, no deben ser empleados como una confirmación de la ausencia de esporozoitos circulantes en la población total, pues estos resultados deben combinarse con lo obtenido por la investigación parasitológica (láminas positivas o negativas). En este estudio se observó en la localidad de Munichis un total de 161 casos de malaria por P. vivax y P. falciparum entre enero a julio del 2005, a pesar de que la prueba de CE-ELISA dio una tasa de infección de Plasmodium para An. benarrochi muy baja (Tabla 8). Estudios adicionales para la presencia de Plasmodium en estas especies son requeridos para determinar su importancia potencial en la epidemiología de la malaria en la zona de Yurimaguas. X. 1. INCIDENCIA DE PLASMODIUM La incidencia de casos totales de Plasmodium fue ligeramente menor a otras localidades de Loreto, como Padre Cosha, Iquitos (Roper et al)32. En cambio la proporción de casos de P. falciparum y P. vivax para Padre Cosha (P. vivax de 83,3% y P. falciparum de 16,7%) fue similar (Roper et al) 32. 27 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO XI. CONCLUSIONES El método que capturo mayor número de anofelinos spp, correspondió al cebo humano (83.6% =7790), mas que las trampas de luz CDC (16.4%=1525). Sin embargo, las ecuaciones obtenidas (regresión lineal, cuadrática o cúbica), para el intradomicilio y el peridomicilio indica que existe una relación directamente proporcional entre lo colectado con cebo humano y lo capturado por las trampas de luz CDC por 12h/3dias. Por lo que se recomienda el empleo de las trampas de luz, aunado a fuertes razones éticas para no usar el cebo humano, debido a que en el personal de campo se incrementa el riesgo a contraer malaria, después de la actividad. En cuanto al método y la zona de evaluación, donde se obtuvo el mayor número de anofelinos spp., se clasifico en orden de mayor a menor lo siguiente: Cebo humano peridomicilio (n= 7) > Cebo humano intradomicilio (n=6) = Trampa de luz CDC peridomicilio (n=6) > Trampa de luz intradomicilio (n= 4). De las especies de anofelinos spp. que fueron específicas por cada método fue: Anopheles shannoni, An nuñeztovari y An. strodei se colectaron en cebo humano. En el caso de An. mattogrossensis solo fue colectada en trampas de luz CDC. Mientras An forattinii, se colectó por ambos métodos de captura. Durante toda la evaluación se encontraron un total de nueve especies de Anopheles, siendo las cuatro más abundantes: Anopheles benarrochi (85,2%), Anopheles rangeli (7,3%), Anopheles konderi (4,0%) y Anopheles triannulatus (3,1%). La trampa de luz CDC capturó el 16,4%, 15,3%, 17,1% de anofelinos totales, anofelinos en el intradomicilio y en el peridomicilio, respectivamente en comparación con los capturados por cebo humano. Se proponen tres modelos (regresión lineal, cuadrática o cúbica), válidos para estimar el número de anofelinos capturados con cebos humanos en el intradomiciliario y peridomiciliario, a partir de las capturas de anofelinos con trampas de luz CDC; esta operación se realiza reemplazando en cada ecuación, la constante CDCIntra o CDCPeri, por el número total de anofelinos spp, capturados por 12h /3días, la cual nos estimara y/o indicara el número de anofelinos capturados con cebo humano, sin necesidad de realizar este último. No existieron diferencias significativas en ninguno de los parámetros evaluados, entre la época lluviosa (muestreo 1 al 3) y seca (muestreo 4 al 6), referidos al análisis de componentes principales (ACP), para 20 parámetros entomológicos y dos físicos (Tº y HR). De un total de 7984 anofelinos analizados, mediante la técnica CE-ELISA. An. benarrochi correspondió al 86.2% de mosquitos evaluados, resultando solamente de un pool de 10 (0,1%), An benarrochi fue positivo a la prueba de ELISA para Pv-VK247, del barrio San Juan, y procedente de colectas con cebo humano. Durante los seis meses de evaluación (enero a junio del 2005), se encontró una incidencia promedio de 2,5±0,8 (2 a 4) casos mensuales de malaria en el personal de campo que participó mediante el método de cebo humano. 28 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO XII. RECOMEDACIONES Continuar con la evaluación de este método de trampas de luz “CDC”, en otras localidades del distrito de Yurimaguas, como Pampa Hermosa (zona de mediano riesgo), y en otras zonas de bajo riesgo, como de alto riesgo a malaria de la Provincia de Alto Amazonas. Continuar con la validación del índice de Colecta Manga Noche (ICMN), propuesto en el presente estudio, realizado en el centro poblado de Munichis, Yurimaguas, Alto Amazonas, Loreto. Proponer otros métodos de colecta para anofelinos spp, alternativos a los utilizados en el presente estudio, y así mantener una vigilancia entomológica permanente del vector transmisor de la malaria, en zonas con alto riesgo, mediano y bajo riesgo a malaria y OEM, de nuestra amazonia. Continuar con investigaciones referidas al vector transmisor de la malaria, así como de otros vectores de enfermedades metaxénicas de la región amazónica del país. Investigar la relación que pudiera existir entre el vector transmisor de la malaria con otros artrópodos, y posibles reservorios animales del Plasmodium spp Continuar con investigaciones de la fauna entomológica, de importancia biomédica, en beneficio de la población de las localidades con riesgo a enfermedades metaxénicas. XIII. AGRADECIMENTOS A la Dra. Ana María Morales Avalos y al Dr Manuel Espinoza Silva, Oficina General de Investigación y Transferencia Tecnológica, OGITT del INS, por sus valiosos aportes en la realización del presente estudio. A la Dra. Carmen Flores, Departamento de Entomología, NMRCD, por el apoyo, gestión y opinión constante durante el desarrollo del presente estudio, así como el abastecimiento de materiales necesarios para la preservación, embalaje y control de calidad de las muestras entomológicas, y su análisis respectivo. A la Dra. Lidia E. Navarro Bardales, Directora del Hospital “Santa Gema” Yurimaguas, Alto Amazonas, por el constante apoyo y estimulo mostrado para la ejecución de la presente investigación, nuestro mas sincero aprecio y gratitud. A toda la población, autoridades y responsables del Puesto de Salud del Centro Poblado Menor de Munichis, Yurimaguas, nuestra más sincera gratitud, por su apoyo, interés y desempeño demostrado, en la fase de campo y de gabinete. Así mismo al personal técnico y profesional de la Oficina de Salud Ambiental – Red de Salud Alto Amazonas, participante por su valioso apoyo, durante la fase de campo; en especial a los 29 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Técnicos entomólogos. Julio Tello Pinedo, Adelina Altamirano Silva y Miguel García Dávila. XIV. FINANCIAMIENTO “Este estudio de investigación contó con el apoyo técnico-financiero del Instituto Nacional de Salud - INS - MINSA”. En el marco del “V” Concurso Nacional para Proyectos de Investigación en Enfermedades Emergentes, Reemergentes y otras enfermedades regionales no infecciosas Año 2004. XV. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Organización Panamericana de la Salud (OPS). Técnicas entomológicas de campo para la lucha antipalúdica. Parte I. Ginebra: OMS. 1993. 2. Rubio P. Evaluation of light trap combined with carbon dioxide and 1-octen-3-ol to collect anophelines in Venezuela. J Am Mosq Control Assoc 1996; 12: 91-96. 3. Iannacone JO, Caballero C. La técnica de precoloración de Walker para evaluar Plasmodium vivax Grassi y Plasmodium malariae Levenan en comunidades Ashaninkas en Satipo (Junín, Perú). Rev per Biol 1999; 6: 171180. 4. Consoli R A, de Oliveira R L Principais Mosquitos de importancia Sanitaria do Brasil. Ed. Fiocruz, Río de Janeiro, Brasil. 1994. 225 p. 5. Calderón G, Fernández R, Valle J. Especies de la fauna anophelina, su distribución, y algunas consideraciones sobre su abundancia e infectividad en el Perú. Re Per Epidemiol 1995; 8:5-23 6. López D, González R. Análisis de la dispersión y la abundancia de los estadios larvales de Anopheles nuñeztovari (gabaldón) en estanques piscícolas del municipio de Buenaventura. Colomb Bol Mus Entomol Univ Valle 1994; 2: 7384. 7. Iannacone J A, Alvariño L, Moreno R, Reyes M, Chauca J. Culícidos (Díptera) del río Chillón y sectores adyacentes de la Provincia Constitucional del Callao, Perú, durante el Niño 1997-1998. Acta Entomol Chilena 2000; 24: 51-60. 8. Berti J, Venegas C, Amarista J, González J, Montañés H, Castillo M, Guzmán H; González Jr J. Inventario preliminar y observaciones biológicas sobre los anofelinos (Diptera: Culicidae) de una región minera del estado Bolívar, Venezuela. Bol. Entomol Venez 1998; 13: 17- 26. 30 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO 9. Pérez D, Iannacone J. Efecto insecticida de Sacha Yoco (Paullinia clavigera var. Bullata Simpson) (Sapindaceae) y oreja de tigre (Tradescantia zebrina Hort ex Bosse) (Commelinaceae) en el control de Anopheles benarrochi Gabaldon, Cova García y López, 1941, principal vector de malaria en Ucayali, Perú. Ecol Apl 2004; 3:64-72. 10. Olano V, Carrasquilla G, Méndez F. 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Mathengue E M, Omweri G O, Irungu L W, Ndegwa P N, Walczak E, Smith T A, Killeen G F, Knols B G J. Comparative field evaluation of the mbita trap, 31 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO the centers fo disease control light trap, and the human landing catch for sampling of malaria vectors in Western Kenya. Am J Trop Med Hyg 2004; 70: 33-37. 21. Constantini C, Sargon NF, Sanogo E, Merzagora L, Coluzzi M. Relationships to human bitting collections and the influence of light and betnet in CDC light-trap of West African malaria vectors. Bull Entomol Res 1998; 88:503-511. 22. Marquetti M C, Valdez V, Aguilera L, Navarro A. Vigilancia entomológica de Aedes (S) aegypti y otros culícidos en Ciudad de La Habana, Cuba 1991-1996. Rev Cubana Med Trop 2000; 52: 133-137. 23. León W, Valle J, Naupay R, Tineo E, Rosas A, Palomino S M. 2003. 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Correo electrónico: [email protected] 33 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 1.- Coordenadas geográficas, elevación (msnm), y tipo de superficie de las casas empleadas para el estudio comparativo de dos métodos de colecta para anofelinos (Cebo Humano (CH) y Trampas de Luz (CDC)), en la localidad de Munichis, Yurimaguas, Loreto, Perú. Casas por Barrios Coordenadas geográficas Elevación Tipo de (msnm) Superficie Con cebo Humano San Juan (casa 1) 5º 53´ 30.9´´ LS; 76º 13´ 45.7´´LW 152 Madera San Juan (casa 2) 5º 53´ 25.6´´ LS; 76º 13´ 47.8´´LW 144 Madera Santa Rosa (casa 1) 5º 53´ 42.6´´ LS; 76º 13´ 32´´LW 150 Madera Santa Rosa (casa 2) 5º 53´ 37.4´´ LS; 76º 13´ 49.6´´LW 158 Madera Central (casa 1) 5º 53´ 35´´ LS; 76º 14´ 01.6´´LW 148 Madera Central (casa 2) 5º 53´ 42.5´´ LS; 76º 13´ 55.8´´LW 153 Madera San Antonio (casa 1) 5º 53´ 42.9´´ LS; 76º 14´ 0.16´´LW 158 Pona San Antonio (casa 2) 5º 53´ 43.5´´ LS; 76º 14´ 05.7´´LW 151 Topa Florida (casa 1) 5º 53´ 53.4´´ LS; 76º 14´ 09´´LW 156 Adobe San Juan (casa 1) 5º 53´ 31.2´´ LS; 76º 13´ 46.5´´LW 147 Madera San Juan (casa 2) 5º 53´ 25.2´´ LS; 76º 13´ 47.9´´LW 145 Pona Santa Rosa (casa 1) 5º 53´ 42.4´´ LS; 76º 13´ 32.2´´LW 152 Madera Santa Rosa (casa 2) 5º 53´ 36.5´´ LS; 76º 13´ 50.7´´LW 159 Topa Central (casa 1) 5º 53´ 35.7´´ LS; 76º 13´ 59.2´´LW 146 Madera Central (casa 2) 5º 53´ 40.9´´ LS; 76º 13´ 57´´LW 153 Madera San Antonio (casa 1) 5º 53´ 43.2´´ LS; 76º 14´ 01.7´´LW 156 Topa San Antonio (casa 2) 5º 53´ 43.5´´ LS; 76º 14´ 04.9´´LW 149 Topa Florida (casa 1) 5º 53´ 53.2´´ LS; 76º 14´ 08.7´´LW 157 Adobe Con trampas de luz (CDC) 34 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 2.- Mosquitos colectados por cebos humanos y por trampas de luz CDC en el Intra y Peri-domicilio, Enero a Junio del 2005, en la localidad de Munichis, Yurimaguas, Loreto, Perú. Especies de Anopheles benarrochi rangeli konderi triannulatus strodei forattinii mattogrossensis shannoni nuñeztovari Total I Cebo Humano P T 3011 90 112 38 12 1 0 0 0 3264 4107 126 203 67 18 3 0 1 1 4526 7118 216 315 105 30 4 0 1 1 7790 I = Intra-domicilio. P = Peri-domicilio. T = Total. 35 Trampas de luz CDC I P T 376 132 1 83 0 0 0 0 0 592 441 331 54 100 0 3 4 0 0 933 817 463 55 183 0 3 4 0 0 1525 Total 7935 679 370 288 30 7 4 1 1 9315 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 3a.- Matriz de correlación de Pearson entre la abundancia de especies de mosquitos colectados en cebos humanos y Trampas de Luz CDC, en el intra-domicilio y peri-domicilio durante el periodo 2005 en la localidad de Munichis, Yurimaguas, Loreto, Perú. Correlación ACH-I de Pearson ACH-P ACDC-I ACDCP ACH-I − 1.00** 0.93** 0.78* Significancia ACH-P ACDC-I 0,00 0,00 − 0,00 − 0.93** 0.78* 0.94** ACDC-P 0.01 0.01 0,00 − Tabla Nº 3b.- Matriz de correlación de Pearson entre el número de mosquitos colectados en cebos humanos y Trampas de Luz CDC, en el intra-domicilio y peridomicilio durante el periodo 2005, en la localidad de Munichis, Yurimaguas, Loreto, Perú. Correlación de Pearson CH-I CH-P CDC-I CDC-P CH-I − 0.81** 0.49** 0.65* Significancia CH-P CDC-I 0,00 0,00 − 0.01 − 0.32** 0.56* 0.55** CDC-P 0,00 0,00 0,00 − ACDC-I = Abundancia de especies de anofelinos capturados en trampas de luz CDC intra-domicilio durante todo el periodo de evaluación. ACH-I = Abundancia de especies de anofelinos capturados en cebos humanos intra-domicilio durante todo el periodo de evaluación. ACDC-P = Abundancia de especies de anofelinos capturados en trampas de luz CDC Peri-domicilio durante todo el periodo de evaluación. ACH-P = Abundancia de especies de anofelinos capturados en cebos humanos Peri-domicilio durante todo el periodo de evaluación. CDC-I = Número de especies de anofelinos capturados en trampas de luz CDC intra-domicilio en 12 horas, durante tres días de evaluación. CH-I = Número de especies de anofelinos capturados en cebos humanos intra-domicilio en 12 horas, durante tres días de evaluación. CDC-P = Número de especies de anofelinos capturados en trampas de luz CDC peri-domicilio en 12 horas, durante tres días de evaluación. CH-P = Número de especies de anofelinos capturados en cebos humanos peri-domicilio en 12 horas, durante tres días de evaluación. ** = Correlación es significativa a un nivel de 0.01. 36 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 4.- Variación en el número de anofelinos capturados por cebo humano y por trampas de luz CDC en el intra y peri-domicilio, (a) 12 h durante tres días de evaluación en el periodo de Enero a Junio del 2005, y entre casas de los barrios de la localidad de Munichis, Yurimaguas, Loreto, Perú. Mes de colecta CH-I (X ± DE) Sig. CDC-I (X ± DE) Sig. CH-P (X ± DE) Sig. CDC-P (X ± DE) Sig. TºC HR Enero 101,77 ± 81,22 b 8,33 ± 9,47 a 134,33 ± 103 b 11,77 ± 11,76 ab Febrero 42,66 ± 36,65 ab 7,66 ± 7,95 a 54,66 ± 40,98 ab 8,00 ± 10,13 ab 25,2ab 86,9a 27,5b 86,7a Marzo 72,77 ± 46,99 ab 17,33 ± 12,13 a 92,00 ± 56,75 ab 22,22 ± 15,30 ab 25,5ab 81b Abril 69,00 ± 82,42 ab 16,22 ± 13,10 a 67,88 ± 40,98 ab 29,22 ± 31,23 b 25,3ab 86,9a Mayo 67,66 ± 43,12 ab 10,00 ± 6,34 a 139,55 ± 100 b 24,77 ± 20,75 ab 24,6ab 82,9b Junio 8,77 ± 5,60 a 5,66 ± 2,87 a 14,55 ± 9,93 a 7,66 ± 3,61 a 25,8ab 85,4a F 2,85 2,40 4,59 2,46 2,49 2,87 Sig. 0,02 0,05 0,002 0,04 0,04 0,02 Barrios Florida - Casa 1 CH-I (X ± DE) Sig. CDC-I (X ± DE) Sig. CH-P (X ± DE) Sig. CDC-P (X ± DE) Sig. 98,66 ± 66,02 a 98,66 ± 66,02 a 142,33 ± 108 a 33,33 ± 20,84 ab 67,00 ± 82,74 a 67,00 ± 82,74 a 77,66 ± 63,88 a 17,66 ± 11,97 ab ab San Antonio Casa 1 San Antonio Casa 2 82,83 ± 48,81 a 82,83 ± 48,81 a 87,66 ± 51,20 a 20,83 ± 7,52 Central-Casa 1 44,33 ± 44,74 a 44,33 ± 44,74 a 75,00 ± 68,34 a 5,33 ± 3,01 a Central-Casa 2 42,66 ± 26,50 a 42,66 ± 26,50 a 148,00 ± 136 a 10,33 ± 7,03 ab 109,16 ± 105 a 109,16 ± 105 a 33,00 ± 20,89 a 32,00 ± 39,83 b 23,00 ± 14,46 a 23,00 ± 14,46 a 42,33 ± 47,33 a 10,50 ± 13,12 ab 20,66 ± 11,52 a 20,66 ± 11,52 a 80,16 ± 52,84 a 4,00 ± 2,82 a 57,66 ± 43,71 a 57,66 ± 43,71 a 83,83 ± 78,10 a 21,50 ± 15,69 ab Santa Rosa Casa 1 Santa Rosa Casa 2 San Juan-Casa 1 San Juan-Casa 2 F 1,77 1,47 1,65 2,29 Sig. 0,11 0,19 0,14 0,04 Letras iguales en una misma columna indican que los promedios son estadísticamente iguales. Sig.= Probabilidad. X= Promedio; DE = Desviación estándar. CDC-I = Nº de anofelinos capturados en trampas de luz CDC intra-domicilio en 12 h durante tres días de evaluación. CH-I = Nº de anofelinos capturados en cebos humanos intra-domicilio en 12 h durante tres días de evaluación. CDC-P = Nº de anofelinos capturados en trampas de luz CDC, peri-domicilio en 12 h durante tres días de evaluación. CH-P = Nº de anofelinos capturados en cebos humanos, peri-domicilio en 12 h durante tres días de evaluación. 37 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 5.- Resumen del análisis de componentes principales (CP) de los parámetros físicos y entomológicos. Parámetros Eigenvalue % de la varianza IPA Temperatura IPHN-SJ-1 IPHN-SJ-2 IPHN-C-2 IPHN-SR-1 IPHN-SR-2 IPHN-PT CH-I CH-P CDC-P A-b.-CH-I A-b.-CH-P A.r.-CDC-P A.b.-CDC-P HR IPHN-F IPHN-SA-1 IPHN-SA-2 IPHN-C-1 A.r.-CDC-I CDC-I A-b.-CDC-I CP1 11,71 CP2 6,32 CP3 2,27 CP4 1,96 50,92 0,735 -0,71 0,77 0,93 0,78 0,76 0,98 0,93 0,86 0,92 0,71 0,87 0,91 0,66 0,67 -0,38 0,57 0,45 0,42 0,45 0,31 0,53 0,30 27,48 -0,575 0,21 -0,42 0,02 -0,46 -0,61 0,12 0,35 0,43 0,26 -0,55 0,43 0,27 -0,39 -0,54 0,61 0,78 0,86 0,71 0,87 0,43 -0,44 -0,58 9,90 -0,023 -0,11 -0,32 -0,22 -0,38 0,13 -0,07 -0,08 0,16 -0,23 0,43 0,11 -0,27 0,55 0,20 0,51 0,07 -0,03 -0,11 -0,12 0,82 0,46 -0,17 8,55 -0,324 0,38 -0,30 -0,23 -0,12 -0,08 -0,06 0,01 0,19 -0,09 0,00 0,19 -0,09 -0,27 0,44 -0,35 0,15 0,13 0,37 -0,04 -0,14 0,55 0,72 Los valores más altos en cada componente para cada variable son mostardos en negrita Temp.= Temperatura; HR = Humedad Relativa; IPHN -F= Índice de Picadura Hombre Noche - barrio Florida; IPHN-SA-1= Índice de Picadura Hombre Noche - barrio San Antonio Casa 1; IPHN-SA-2: Índice de Picadura Hombre Noche - barrio San Antonio Casa 2; IPHN-SJ-1: Índice de Picadura Hombre Noche - barrio San Juan Casa 1;IPHN-SJ-2: Índice de Picadura Hombre Noche - barrio San Juan Casa 2; IPHN-C-1: Índice de Picadura Hombre Noche - barrio Central -Casa 1; IPHN-C-2: Índice de Picadura Hombre Noche barrio Central Casa 2; IPHN-SR-1: Índice de Picadura Hombre Noche - barrio Santa Rosa Casa 1; IPHN-SR-2: Índice de Picadura Hombre Noche - barrio Santa Rosa Casa 2; IPHN -T = Índice de Picadura Hombre Noche Total; CH-I = Nº de anofelinos en Cebo Humano intra-domiciliario;CDC -I = Nº de anofelinos en Trampas de Luz CDC - Intra-domiciliario;CH-P = Nº de anofelinos en Cebo Humano Peri-domiciliario; CDC -P = Nº de anofelinos en Trampas de Luz CDC - Peri-domiciliario; CH -I An. benarrochi = Nº de Anopheles benarrochi en cebo humano intra-domiciliario en 12 h durante tres días de evaluación; CH -P An. benarrochi = Nº de An. benarrochi en cebo humano Peri-domiciliario en 12 h durante tres días de evaluación. CH-I An rangeli= Nº de Anopheles rangeli en cebo humano intra-domiciliario en 12 horas durante tres días de evalución; CH-P An rangeli= Nº de Anopheles rangeli en cebo humano peri-domiciliario en 12 horas durante tres días de evalución; CDC -I An benarrochi= Nº de An. benarrochi capturados en trampas de luz CDC intra-domiciliario en 12 h durante tres días de evaluación; CDC -P An benarrochi = Nº de An. benarrochi capturados en trampas de luz CDC peri-domiciliario en 12 h durante tres días de evaluación 38 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 6.- Comparación entre la estación lluviosa y seca para parámetros físicos y entomológicos en al localidad de Munichis, Yurimaguas, Loreto, Perú. Parámetros IPA Temperatura HR IPHN-F IPHN-SA-1 IPHN-SA-2 IPHN-SJ-1 IPHN-SJ-2 IPHN-C-1 IPHN-C-2 IPHN-SR-1 IPHN-SR-2 IPHN-PT CH-I CH-P CDC-I CDC-P A-b.-CH-I A-b.-CH-P A.r.-CDC-I A.r.-CDC-P A-b.-CDC-I A.b.-CDC-P Estación Lluviosa 13,0 26,1 84,8 53,1 36,9 38,9 7,5 22,3 29,0 16,6 28,9 10,2 27,1 72,4 93,6 11,1 13,9 605 773 20,6 38,6 73,0 73,3 Estación Seca 17,6 25,2 85,1 22,3 9,5 15,4 13,0 23,5 10,4 20,8 54,6 9,0 19,8 48,4 73,9 10,6 20,5 398 592 23,3 71,6 52,3 73,6 t Sig. 1,15 1,04 0,08 1,39 1,58 2,74 0,64 0,08 1,30 0,39 0,84 0,25 0,64 0,91 0,45 0,11 0,84 0,93 0,49 0,18 1,24 0,55 0,01 0,31 0,35 0,93 0,23 0,18 0,06 0,55 0,93 0,26 0,71 0,44 0,81 0,55 0,41 0,67 0,91 0,45 0,40 0,64 0,86 0,28 0,61 0,99 IPA = Índice Parasitario Anual; Temp.= Temperatura; HR= Humedad Relativa; IPHN-F= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio Florida; IPHN -SA-1= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio San Antonio, casa 1; IPHN -SA-2 = Índice de Picadura Hombre Noche, barrio San Antonio, casa 2; IPHN -SJ-1= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio San Juan, casa 1; IPHN -SJ-2= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio San Juan, casa 2; IPHN -C-1= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio Central, casa 1; IPHN -C2= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio Central, casa 2; IPHN -SR-1= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio San Rosa, casa 1; IPHN -SR-2= Índice de Picadura Hombre Noche, barrio San Rosa, casa 2; IPHN-PT= Índice de Picadura Hombre Noche, Promedio Total; CH -I= Nº de anofelinos capturados con cebo humano, intra-domiciliario; CH -P= Nº de anofelinos capturados con cebo humano, peri-domiciliario; CDC -I = Nº de anofelinos capturados en trampas de luz CDC, intradomiciliario; CDC -P = Nº de anofelinos capturados en trampas de luz CDC, peridomiciliario. CH-I An benarrochi = Nº de Anopheles benarrochi en cebo humano intra-domiciliario, en 12 horas, durante tres días de evaluación; CH-P An benarrochi = Nº de Anopheles benarrochi en cebo humano, peri-domiciliario, en 12 horas, durante tres días de evaluación; CH-I An rangeli= Nº de Anopheles rangeli en cebo humano intra-domiciliario en 12 horas durante tres días de evaluación; CH-P An rangeli= Nº de Anopheles rangeli en cebo humano peri-domiciliario en 12 horas durante tres días de evaluación; CDC -I An benarrochi en trampas de luz CDC intradomiciliario en 12 horas durante tres días de evaluación; CDC -P An benarrochi en trampas de luz CDC peridomiciliario en 12 horas durante tres días de evaluación;. 39 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 7:- Ecuaciones de regresión válidas para estimar las capturas de anofelinos en cebos humanos a partir de las trampas de luz CDC, en el intra y peri-domicilio, en 12 horas, durante tres días de evaluación en la localidad de Munichis, Yurimaguas, Alto Amazonas, Loreto, Perú. Valores de F, Sig. y R2 Modelo Ecuación de regresión I (Lineal) CHI = 27,47 + 3,03 (CDCI) II (Cuadrático) CHI = 39,53 + 0,24 (CDCI) + 0,08 (CDCI) III (Cúbico) CHI = 27,60 + 5,31 (CDCI) - 0,34(CDCI) + 0,0088 (CDCI) I (Lineal) CHP = 43,30 + 2,34 (CDCP) II (Cuadratico) CHP = 30,45 + 3,92 (CDCP) - 0,02 (CDCP) 2 2 3 2 2 III (Cúbico) CHP = 42,93 + 1,23 (CDCP) + 0,0693(CDCP) + 0,0007 3 (CDCP) F = 16,85; Sig. = 0,000; 2 R = 0,25; F = 8,96; Sig. = 0,000; 2 R = 0,26; F = 6,20; Sig. = 0,001; 2 R = 0,27. F = 24,93; Sig.= 0,000; 2 R = 0,32. F = 13,82; sig. = 0,000; 2 R = 0,35. F = 9,60; Sig. = 0,000; 2 R = 0,36. CDC-I = Nº de anofelinos capturados en trampas de luz CDC intra-domicilio, en 12 h durante tres días de evaluación. CH-I = Nº de anofelinos capturados en cebos humanos intra-domicilio, en 12 h durante tres días de evaluación. CDC-P = Nº de anofelinos capturados en trampas de luz CDC peri-domicilio, en 12 h durante tres días de evaluación. CH-P = Nº de anofelinos capturados en cebos humanos peri-domicilio, en 12 h durante tres días de evaluación. F = Estadístico de Fisher. Sig. = Significancia. R2 = Coeficiente de determinación. n = 54 40 ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla Nº 8.- Mosquitos analizados por ELISA, para detectar la proteína CS de Plasmodium falciparum, P. vivax 210 and P.v 247, CPM de Munichis, Yurimaguas, Alto Amazonas, Loreto, Perú. Especies de Anopheles An benarrochi An benarrochi An konderi An konderi An rangeli An rangeli An triannulatus An triannulatus An strodei An nuñeztovari An mattogrossensis An mattogrossensis An forattinnii An forattinnii Tipo de Colección Cebo humano CDC trampas de luz Cebo humano CDC trampas de luz Cebo humano CDC trampas de luz Cebo humano CDC trampas de luz Cebo humano Cebo humano Cebo humano CDC trampas de luz Cebo humano CDC trampas de luz Número de mosquitos 6885 429 123 13 256 163 51 54 4 1 1 1 2 1 7984 Total CE= Circumesporozoito. Pf= Plasmodium falciparum. Pv= Plasmodium vivax. 41 CS proteína Pv 247 "pool" (1) positivo ESTUDIO COMPARATIVO DE DOS MÉTODOS DE COLECTA PARA ANOPHELINOS (CEBO HUMANO Y TRAMPA DE LUZ “CDC”), DURANTE LA EPOCA LLUVIOSA Y SECA, YURIMAGUAS – ALTO AMAZONAS, LORETO Tabla 9. Catalogación de los niveles de densidad anofelina adulta mediante el índice de colecta manga noche (ICMN), estimados mediante las ecuaciones de regresión propuestas. Densidad Anophelina IPHN Muy alta > 1000 Alta 500 a 1000 Mediana 100 a 500 Baja 10 a 100 Muy baja 1 a 10 Negativa 0 IPHN = Índice picadura hombre noche. ICMN= Índice de colecta manga noche. ICMN >375 180-375 35-180 3 a 35 1a2 0 Tabla 10. Índices de diversidad alfa de la fauna anophelina. Índices CH-I CH-P CDC-I CDC-P 0,21 0,65 0,62 Pielou, J' 0,19 0,92 0,91 0,63 0,47 Berger-Parker, d 0,86 0,83 0,48 0,37 Simpson, C 0,16 0,19 0,39 0,52 Shannon-Wiener, H' 7 8 4 7 Riqueza específica 0,74 0,83 0,47 0,87 Margalef, D CH-I = cebo humano Intradomiciliario. CH-P= cebo humano peridomiciliario. CDC-I= trampa de luz CDC Intradomiciliario. CDC-P= trampa de luz CDC Peridomiciliario. Tabla 11. Diversidad beta de similaridad empleando el índice de Sörensen cuantitativo Indice de Sörensen cuantitativo (IScuantitativo) CH-I CH-P CDC-I CDC-P CH-I 89,93 55,17 62,81 CH-P CDC-I CDC-P 52,83 60,73 78,60 - CH-I = cebo humano Intradomiciliario. CH-P= cebo humano peridomiciliario. CDC-I= trampa de luz CDC Intradomiciliario. P-CDC-P= trampa de luz CDC Peridomiciliario. 42