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Revista Dental de Chile 2016; 107 (1) 8-12 Trabajo de Investigación Autores: Comparación de la microfiltración en restauraciones oclusales de resinas Bulk-Fill utilizando adhesivo universal con diferente modalidad de acondicionamiento ácido. Microleakage comparation on Bulk fill occlusal restorations using universal adhesive with different etching modes. 1 Patricio Vildósola Grez. 1 Sara Rodriguez Dueri. 2 Evelyn Arce Baeza. 2 Sharon Cordich Leiva. 3 Macarena Urzúa Grez. 1 Docente Integral y Odontogeriatría. Facultad Odontología, Universidad Andrés Bello. Santiago, Chile. Licenciada en Odontología. Universidad Andrés Bello. Santiago, Chile. 2 3 Cirujano Dentista. Universidad de los Andes. Santiago, Chile. Resumen Objetivo: Comparar el grado de microfiltración marginal de restauraciones oclusales realizadas con dos resinas BulkFill, Filtek BulkFill (FK) y Tetric-N Ceram BulkFill (TN) utilizando adhesivo universal con modalidad grabado-lavado y autograbado. Materiales y métodos: Fueron seleccionados 60 terceros molares extraídos sanos de pacientes entre 20-30 años. En cada diente un solo operador realizó 2 cavidades oclusales estándares de 4 mm. en sentido vestíbulo-palatino o lingual, 3,5 mm. en sentido mesio-distal y 4 mm. de profundidad. Posteriormente aleatoriamente se restauraron las 2 cavidades en el mismo diente con las 2 diferentes resinas FK y TN conformando 4 grupos de estudio (n por grupo=30): FK+ modalidad autograbado (grupo FA), FK + modalidad grabado-lavado (grupo FG), TN + modalidad autograbado (grupo TA), TN + modalidad de grabado-lavado (grupo TG). En cada grupo se utilizó adhesivo universal (Single Bond Universal, 3M/ESPE) y el proceso fue realizado según las instrucciones de los fabricantes, en la cual se fotopolimerizó con una lámpara LED de 1200 Mw/cm2. Cada diente fue colocado en agua destilada por 24 horas a 37 Cº y posteriormente se realizó 500 ciclos de termo ciclado en una solución de azul de metileno al 2%. Cada restauración fue cortada en la mitad en sentido mesio-distal y se observo bajo microscopia óptica de 4x calculándose el porcentaje de profundidad de penetración del colorante a lo largo de las paredes. Se utilizó el test de Kruskal Wallis y Mann Whitney con un nivel de significancia del 95%. Resultados: La mediana y desviación estándar (±) medida en porcentaje de microfiltración marginal fue para FA 35,50 (±32,55), FG 28,04 (±28,50), TA 13,88 (±15,66) y TG 9,17(±12,95) existiendo diferencia significativa entre los grupos FA-TA, FA-TG, FG-TA y FG-TG (p<0,05). Conclusión: En cavidades oclusales hubo diferencia significativa con un menor porcentaje de microfiltración marginal del grupo de resina TN en ambas modalidades de acondicionamiento ácido comparada con la resina FK. No hubo diferencia significativa entre modalidad grabado-lavado y autograbado entre un mismo grupo de resina Bulkfill. Palabras claves: Resina compuesta BulkFill, Microfiltración marginal, Adhesivo universal. Summary Objective: Compare the degree of marginal microleakage on two different composite restorations Bulk Fill, Filtek Bulkfill (FK) and Tetric-N Ceram BulkFill (TN) with modality etch-and-rinse and self-etch using universal adhesive (Single Bond Universal 3M / ESPE, Germany). Materials and Methods: Were selected 40 third molars extracted were formed in four groups randomly: Filtek BF + self-etch technique (FA group), Filtek FB + etch-and-rinse technique (FG group), Tetric N- Ceram FB + self-etch technique (TA group), Tetric N- Ceram FB + etch-and-rinse technique (TG group). One operator performed on each tooth two occlusal cavities 4 mm. deep, and then the restoration of each group was performed according to manufacturer’s instruction. Subsequently each tooth was placed in a solution of methylene blue 2% for 12 hours, and then they went under 500 cycles of thermocycling. After that, each restoration was evaluated, under light microscopy with 4x, the depth percentage of dye penetration along the side walls. For data analyses was used the ShapiroWilk test, Anova and the Tukey test with a significance level of 95%. Results: TA (41.81%) and TG (32.43%) had the lowest percentages of microfiltration than FA groups (15.55%) and FG (12.95%). In each BF resin there were no significant differences in the degree of between etch-and-rinse and self-etch (Mann-Whitney p>0.5). Conclusions: Resin Tetric N-Ceram BF has less marginal microleakage in Class I cavities and depth of 4 mm. than Filtek BF resins. Different brands of BF had no significant difference in marginal microleakage in technique of etch-and-rinse and self-etch. Key words: Adhesion, Universal Adhesive, Composite Resin Bulk fill, Marginal Microfiltration. 8 Revista Dental de Chile 2016; 107(1) Introducción Actualmente la resina compuesta (RC) es el principal material de elección de restauración directa, principalmente por ser un material estético y por el esfuerzo de los fabricantes de realizar una constante mejora de sus propiedades(1). A pesar de lo anterior, una de las causas de fracaso más comunes de las RC sigue siendo la caries secundaria, debido principalmente a la falla adhesiva que puede ocurrir entre la interfase dienterestauración y que en el transcurso del tiempo provoca microfiltración marginal, siendo un nicho para el desarrollo de bacterias cariogénicas en donde existe evidencia que ha demostrado que la RC acumula mayor biofilm de bacterias que otros materiales de restauración(2)(3)(4). Una de las causas de la mencionada microfiltración marginal es la contracción de polimerización, la cual ocurre en todos los materiales en base a resina siendo influenciada por el factor de configuración cavitaria o factor C(3). Este factor C está dado por la proporción entre el número de superficies adheridas y superficies libres, de esta manera al existir un menor número de superficies libres, menor será la capacidad de la resina de escurrir y liberar estrés de contracción de polimerización, existiendo probablemente una menor capacidad adhesiva entre el diente y la RC. De este modo, las preparaciones biológicas oclusales son una de las de mayor nivel de factor C, por lo que representa el mayor desafío en la técnica restauradora con RC(5). Por otro lado, una de las soluciones para reducir este fenómeno de stress de contracción de polimerización es la aplicación en múltiples incrementos de no más de 2 mm., sin embargo esta técnica puede tener ciertas desventajas como por ejemplo, el aumento del tiempo clínico de restauración cuando es comparado con otro tipo de materiales y la posibilidad de incorporar burbujas en cada incremento, provocando efectos secundarios como perdida de la resistencia del material o sensibilidad postoperatoria(6). Actualmente en el mercado se han desarrollado unas nuevas RC llamadas BulkFill (BF), las cuales pueden ser utilizadas en un solo incremento de hasta 4 mm., debido principalmente a modificaciones realizadas en cuanto al relleno, monómero y la mejora del espectro de absorción(7)(8)(9). Estas RC a nivel in-vitro han demostrado tener un comportamiento biomecánico adecuado y similar a las RC convencionales, sin embargo algunos estudios han demostrado que pueden existir diferencias entre las diferentes marcas comerciales de resinas BK, siendo necesario desarrollar evidencia en cuanto a ese tema con diferentes tipos de estudios(10). Sumado a lo anterior, actualmente han aparecido los llamados adhesivos universales, los cuales pueden utilizarse con modalidad grabado-lavado o autograbado. Estudios previos han demostrado cierta controversia en cuanto a la capacidad adhesiva a los diferentes sustratos del tejido dentario como es el esmalte y la dentina, sin embargo el consenso es que no hay diferencia cuando se compara con la modalidad grabadolavado y la versión autograbado con grabado selectivo de esmalte(11,12). Por consiguiente las resinas BK sumado a la aplicación del adhesivo universal podría ser de interés debido al ahorro de tiempo y la probabilidad de tener menores efectos secundarios con respecto a las RC convencionales no existiendo hasta ahora evidencia con respecto al comportamiento entre ambos materiales. Por estas razones el principal objetivo de este estudio fue comparar el porcentaje de microfiltración marginal de restauraciones realizadas con dos diferentes resinas compuestas BulkFill utilizando adhesivo universal con modalidad grabado-lavado y autograbado. Por no tener antecedentes actuales se propone una hipótesis nula en donde no existe diferencia significativa del grado de microfiltración marginal entre dos resinas Bulk Fill con modalidad grabado-lavado y autograbado. Material y método Este estudio fue realizado en la Facultad de Odontología de la Universidad Andrés Bello, sede Santiago. Se utilizaron 60 terceros molares sin caries de pacientes sanos entre 20-30 años. A los pacientes donantes se les realizó un proceso de consentimiento informado, a los cuales se les explicó detalladamente el motivo y condiciones del estudio, para luego aceptar y firmar la donación de los dientes. Este estudio fue aprobado por el Comité de ética de la Facultad de Odontología de la Universidad Andrés Bello. Cada diente fue limpiado retirando los restos de tejido blando remanente, con una cureta periodontal N° 3-4 (Hu-Friedy, EE.UU.) y escobilla dura con agua, para luego ser mantenidos en suero fisiológico al 0,9% durante máximo un mes. Sorensen, Brasil), cambiando la fresa cada 7 preparaciones cavitarias. Para la medición de las cavidades se utilizó una sonda periodontal Carolina del Norte milimetrada (Hu-Friedy, EE.UU). Para la conformación de los grupos de estudio, estos fueron distribuidos de forma aleatoria en donde en un mismo diente se restauró con ambas marcas comerciales. Se conformaron 4 grupos de 30 preparaciones restauradas según los siguientes grupos (Figura 2): • Grupo FA: Filtek Bulk Fill Color A3 (3M/ ESPE, USA) + Single Bond Universal (3M-ESPE, USA). Técnica adhesiva autograbado. • Grupo FG: Filtek Bulk Fill Color A3 (3M/ ESPE, USA) + Single Bond Universal (3M-ESPE, USA). Técnica adhesiva Grabado – Lavado. • Grupo TA: Tetric N- Ceram Bulk Fill Color IVA (Ivoclar- Vivadent, Liechtenstein) + Single Bond Universal (3M-ESPE, USA). Técnica adhesiva autograbado. • Grupo TG: Tetric N – Ceram Bulk Fill color Figura 1. Medidas estándares de las preparaciones cavitarias oclusales. Un operador realizo en cada diente dos preparaciones cavitarias (en mesial y en distal) estandarizadas en la cara oclusal en dirección apico-coronal 4 mm., en mesio-distal 3,5 mm. y vestíbulo- platino/lingual 4 mm. (Fig. 1). Para la realización de las preparaciones cavitarias se utilizó una turbina Midwest Push (Kavo, Brasil) con abundante refrigeración y una piedra de diamante redonda ISO 014 (KG 4 mm. 3,5 mm. 4 mm. Revista Dental de Chile 2016; 107(1) 9 IVA (Ivoclar- Vivadent, Liechtenstein) + Single Bond Universal (3M-ESPE, USA). Técnica adhesiva Grabado-Lavado. Todas las preparaciones cavitarias fueron restauradas en un solo incremento y fueron fotopolimerizadas por 20 segundos con una lámpara LED calibrada a una intensidad de 1200 MW/cm2 (Bluephase G2, LED, Ivoclar Vivadent, Liechtenstein). En la técnica adhesiva de autograbado se aplicó el adhesivo universal, frotando de forma activa en esmalte y dentina por 20 segundos, soplando 5 segundos y fotopolimerizando por 20 segundos. En el caso de la técnica adhesiva lavado-grabado se acondicionó la preparación cavitaria con acido ortofosfórico al 37% por 15 segundos, luego se lavo por 30 segundos y se seco gentilmente, para luego aplicar el mismo protocolo del adhesivo universal explicado anteriormente. durante 30 minutos en un nuevo recipiente con tinción de azul de metileno al 2% a 25ºC. Para el corte de las muestras, se realizaron cubos de acrílico autocurable (Marche, Chile) de un grosor de 5 mm. en las raíces de cada uno de los dientes, para facilitar el corte del diente en la máquina recortadora. Se conservaron las muestras en un envase de plástico hermético con agua destilada, hasta el momento de su corte. Las muestras fueron seccionadas longitudinalmente en la mitad del eje axial de las restauraciones en dirección mesio-distal utilizando un micrótomo a baja velocidad refrigerado con agua (Isomet 5000, Buehler, USA). En cada corte se observó la interfaz de las restauraciones bajo 4x con lupa estereoscópica (Opti-vision serie Figura 2: Esquema de conformación de los grupos de estudio. La terminación se realizó con fresas de acabado de grano fino (KG Sorensen, Brasil) y con gomas de pulir (Enhance, Dentsplay, USA). Luego de realizadas las restauraciones, las piezas dentarias fueron selladas a nivel del ápice, con una capa de vidrio ionómero (Chemfil, Denstplay, USA), luego se aplicó doble capa de esmalte de uñas cosmético transparente a todo el diente dejando un margen de 2 mm. desde el borde de las restauraciones, permitiendo un sello hermético e interfiriendo con el paso posterior de la tinción por esta vía. Los dientes fueron conservados en frascos de plástico en agua destilada, por un tiempo de 24 horas a temperatura de 37°C en una incubadora (N-Biotek, modelo NB-203XL, Korea) para simular las condiciones orales(13). Luego se colocaron los dientes en un recipiente con agua con tinción de azul de metileno al 2% y fueron sometidos a envejecimiento artificial, mediante termociclado manual, correspondiente a 500 ciclos en agua entre 5 °C y 55 °C por 30 segundos cada uno(14). Luego los dientes fueron mantenidos SZ-6745, USA) y se registro una fotografía. Las imágenes se guardaron y analizaron utilizando el software de análisis de imágenes (Micrometrics SE Premium, Accu-Scope Inc. USA). Se calculo el porcentaje de penetración del colorante de las paredes vestibular y palatina-lingual respecto a la longitud total de la interfaz de la restauración (0100%) desde oclusal hacia apical (Fig. 3). Luego se registraron las mediciones en una tabla de datos, para realizar los análisis estadísticos mediante el programa SPPS 15.0 (IBM Corp, USA). Para el análisis de los datos se utilizó el test de Shapiro-Wilk, y los test de Kruskall Wallis-Mann Whitney, con un nivel de significancia del 95%. 60 dientes 30 dientes Grupo FA (n=30) Grupo TA (n=30) 30 dientes Grupo FG (n=30) Grupo TG (n=30) Figura 3. Corte coronal con medición de porcentaje de microfiltración marginal bajo aumento 4x. Resultados En el análisis descriptivo del total de 60 muestras como se observa en la Tabla 1, la mediana y la desviación estándar (±) medida en porcentaje de microfiltración marginal fue para FA 35,50 (±32,55), FG 28,04 (±28,50), TA 13,88 (±15,66) y TG 9,17(±12,95) (Grafico 1). El test de Shapiro Wilk mostro como resultado una distribución anormal (p>0.05) en los distintos grupos. Whitney mostro diferencia significativa entre los grupos FA-TA, FA-TG, FG-TA y FG-TG (p<0,05) (Tabla 2). Tabla 1: Estadística descriptiva del porcentaje de microfiltración marginal de cada grupo. El test de Kruskal Wallis mostró una diferencia significativa entre los grupos (p<0,05). El análisis de cada grupo entre si mediante el test de Mann 10 No se observó diferencia significativa entre en los grupos FA-FG y TA-TG (p>0,05) Revista Dental de Chile 2016; 107(1) Grupo Promedio Mediana Desv. estándar FA 41.81 35.45 ±32.55 FG 32.43 28.04 ±28.50 TA 13.81 13.88 ±15.66 TG 13.47 9.17 ±12.95 Gráfico 1: Gráfico de cajas de la microfiltración marginal de cada grupo de estudio. 100.00 90.00 Grupos Significancia 70.00 FA-FG 0,214 60.00 FA-TA 0,001* FA-TG 0,000* FG-TA 0,039* 20.00 FG-TG 0,006* 10.00 TA-TG 0,413 80.00 50.00 40.00 % Microfiltración Tabla 4: Resultado del test Mann-Whitney entre cada grupo. 30.00 0.00 FA FG GRUPOS TA TG *P<0,05 Discusión En este estudio se evaluó la microfiltración entre dos resinas BulkFill, con diferente modalidad de grabado, utilizando adhesivo universal. Según los resultados obtenidos nosotros rechazamos la hipótesis nula, porque la comparación entre las dos resina BK con diferente modalidad de grabado mostró diferencia significativa en la microfiltración, en la cual la resina TN tuvo un menor porcentaje de microfiltración que la resina FK. El presente estudio fue realizado intentando estandarizar los factores que pueden influir en la integridad de la fase de adhesión entre diente-restauración como podrían ser los diferentes adhesivos, las técnica adhesiva y los tipos de preparaciones cavitarias(15(16). Por las razones mencionadas anteriormente se eligió preparaciones oclusales estandarizadas en donde básicamente su configuración cavitaria en cuanto a su relación con el factor de contracción de polimerización o factor C es elevado, el cual puede influenciar en la magnitud del stress en resinas posteriores, con un gran potencial de falla adhesiva con la subsecuente formación de brecha marginal y/o poros que conlleva clínicamente a la microfiltración marginal(17,18), por lo que la configuración cavitaria seleccionada fue sometida a una condición extrema desde el punto de vista de adhesión en especial si la aplicación fue en un solo incremento como las resinas BK. La resina FK es una resina relativamente mas nueva en el mercado que las otras existente resinas BK. Dentro de los principales componentes de la resina FK, el fabricante declara poseer un monómero de nueva generación llamado AUDMA, el cual es un monómero de alto peso molecular que ayuda a moderar la contracción de polimerización, y un monómero DDDMA que aumenta la movilidad molecular ofreciendo una menor viscosidad que otro materiales sumado a una menor reacción de exotermia comparada con resinas convencionales(19). En el caso de la resina TN, el fabricante declara dentro de sus componentes tener monómeros de dimetracrilato (Bis-Gma, UDMA), un booster de iniciación de polimerización llamado Ivocerin y un filtro de contaminación de luz que le permite una mayor reactividad a la luz de fotocurado (370 a 460 nanómetros) sin detrimento del tiempo de trabajo clínico(20). Por esto al ser un estudio en donde se aplicó las dos marcas de resinas BK en preparaciones estandarizadas y con una misma marca de adhesivo universal con ambas técnicas adhesivas, la posible explicación a la diferencia encontrada entre ambas marcas de resina BK en la modalidad de autograbado y grabado-lavado, podrían ser principalmente a dos factores: la diferencia existente en sus componentes como podrían ser los monómeros, lo cual se recomienda realizar un estudio del grado de contracción de polimerización de los diferentes monómeros en las mismas condiciones; y en los componentes de iniciación de polimerización, en el cual se utilizó la unidad de fotocurado Bluephase de la misma marca comercial de la resina TN (Ivoclar-Vivadent), esto último podría ser relevante debido ha que se ha relatado que los materiales de restauración BK podrían tener diferentes tipos de fotoiniciadores lo cual requiere unidades de curado adecuados para su fotoactivación según su marca comercial(21), sumado a que podría haber alguna influencia del color de la resina compuesta en el grado de conversión de polimerización, debido a que los colores utilizados en las resinas pueden ser no comparables (IVA versus A3)(22). Por estas mismas razones explicadas anteriormente es que seria altamente recomendable realizar estudios a futuro en donde se comparen estas mismas resinas utilizando las unidades de fotocurado recomendadas por cada fabricante y además evaluar si existe alguna diferencia en el grado de conversión y/o microfiltración de los diferentes unidades de colores disponibles en cada marca de resina BK. Este estudio in vitro además compara las dos resinas BK con diferentes técnicas adhesivas y que según nuestros resultados no mostraron diferencias significativas en el acondicionamiento ácido total con el autograbado al utilizar la misma marca de resina BK(23). Estudios realizados por Heintze y col.(24) comparó el uso de BK con técnicas grabadolavado y autograbado llegando a conclusiones concordantes con nuestros resultados, sumado a que Loguercio y col.(23) han relatado que la aplicación de forma activa del adhesivo universal (utilizado en este estudio) en su modalidad de autograbado mejora el comportamiento adhesivo a nivel del esmalte siendo similar a la modalidad de acondicionado con ácido ortofosfórico al 37%. Sin embargo, en el mismo trabajo de Heintze dan prioridad a realizar una técnica de grabado total o selectivo para una mayor adhesión, esto debido a que los sistemas adhesivos de grabado-lavado condicionan el esmalte con ácido fosfórico al 37% creando un patrón micro-retentivo para que el adhesivo pueda adherirse de mejor manera, en contraste con los sistemas adhesivos de autograbado, en donde la adhesión es sobre la base de desmineralización ácida suave, creando enlaces químico débiles con la hidroxiapatita(24). A pesar de lo mencionado anteriormente es necesario profundizar la investigación tanto in vitro como clínica sobre cual modalidad de grabado o acondicionado permite un mejor comportamiento adhesivo en este tipo de materiales debido a la existente controversia en especial si es a largo plazo. Por otro lado el presente estudio utilizó un mismo adhesivo universal para realizar las dos técnicas de acondicionamiento ácido y así estandarizar el sistema adhesivo evitando que el adhesivo por si mismo pudiese influenciar en los resultados de la microfiltración. Es interesante destacar que el Revista Dental de Chile 2016; 107(1) 11 adhesivo universal utilizado de la misma marca de la resina BF (FK) tuvo una mayor microfiltración marginal que la resina BK (TN) de diferente marca comercial. A pesar de lo mencionado anteriormente los fabricantes recomiendan utilizar un adhesivo y resina de la misma marca comercial, sin embargo según Song y col.(25) no existen diferencias en el comportamiento adhesivo entre usar un adhesivo de una marca determinada con otra resina de diferente marca, debido a que el comportamiento adhesivo de los materiales dependen de ellos y no de su interacción, por lo que a la luz del presente estudio probablemente la diferencia encontrada entre las resinas FK y TN pudiese ser debido al comportamiento del material restaurador que por el adhesivo o la modalidad de acondicionamiento ácido. Según estudios el almacenamiento en agua es la metodología in vitro más utilizada para simular la degradación de un material adhesivo sumado a que el almacenamiento en suero fisiológico puede entregar información acerca de la degradación de la parte orgánica de la capa híbrida(8). A pesar de este envejecimiento térmico mediante termociclado a 500 ciclos, según la norma ISO, algunos estudios han cuestionado este tipo de prueba concluyendo que este número de ciclos es probablemente demasiado bajo para lograr un efecto de envejecimiento cercano a lo que ocurre a nivel clínico, por esta razón se recomendaría realizar un mayor número de ciclos cercanos a los 5000 y con carga mecánica para poder acercarse mas a la realidad clínica y evaluar de mejor manera que ocurre en la interfase diente-restauración(26). A pesar de la metodología presentada este estudio tiene ciertas limitaciones como cualquier investigación in vitro. En el presente estudio se realizó un envejecimiento artificial en donde las muestras se almacenaron en suero fisiológico por 24 horas en una estufa a 37° grados y se aplicó un termociclado en agua según la norma ISO(14). Otras limitaciones que se pueden mencionar fueron: realizar un análisis del poder estadístico post-hoc el cual el tamaño muestral para poder determinar las diferencias o no entre los grupos podría haber sugerido un mayor numero de muestras, habría sido ideal realizar las 4 preparaciones en un diente para poder determinar como unidad estadística el diente en si mismo y por último que solo se realizó la evaluación de la microfiltración con microscopia convencional y que estudios han sugerido realizarlo bajo microscopia electrónica de barrido. Por las razones expuestas anteriormente y que solo se realizó un análisis de la microfiltración de estas dos resinas, es que estos resultados deben ser tomado con cautela y que sería necesario evaluar otros aspectos como la contracción de polimerización, el análisis de la adhesión-capa hibrida mediante microscopia electrónica de alta resolución y bajo condiciones de envejecimiento de las muestras para poder determinar si el material de FK y TN tienen alguna diferencia en su comportamiento in vitro. Sumado a lo anterior siempre es necesario realizar estudios clínicos del comportamiento de los materiales debido que algunos autores como Heintze y van Meerbeek, han relatado que ciertas metodologías y pruebas de laboratorio no son necesariamente extrapoladas al comportamiento clínico real que ocurre en la cavidad oral(26)(27)(28). Conclusiones De acuerdo con los resultados obtenidos en este estudio, bajo las condiciones y limitaciones en que fue realizado, es posible concluir que en cavidades oclusales hubo diferencia significativa con un menor porcentaje de microfiltración marginal del grupo de resina TN en ambas modalidades de acondicionamiento ácido comparada con la resina FK. No hubo diferencia significativa entre modalidad grabado-lavado y autograbado entre un mismo grupo de resina Bulkfill. 11.Rosa WL, Piva E, Silva AF. Bond strength of universal adhesives: A systematic review and meta-analysis. J Dent 2015;43:765-76. 12.Chen C, Niu LN, Xie H, Zhang ZY, Zhou LQ, Jiao K, et al. Bonding of universal adhesives to dentine - old wine in new bottles? J Dent 2015;43:525-36. 13.Amaral FL, Colucci V, Palma-Dibb RG, Corona SA. Assessment of in vitro methods used to promote adhesive interface degradation: A critical review. J Esthet Restor Dent 2007;19:340-53; discussion 54. 14.Materials ID. 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