LightCycler® Multicolor Compensation Set
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LightCycler® Multicolor Compensation Set
LightCycler® Multicolor Compensation Set Para uso con el equipo LightCycler® 2.0 (número de serie 1415001 y posterior) 5 Tests REF 04 484 355 001 Para diagnóstico in vitro. USO PREVISTO LightCycler® Multicolor Compensation Set compensa la diafonía específica entre el equipo y el canal del espectro de emisiones de las distintas sondas marcadas en el equipo LightCycler® 2.0. Cuando se utiliza LightCycler® Multicolor Compensation Set junto con el equipo LightCycler® 2.0 y LightCycler® Test Kits para diagnóstico in vitro (no disponible en todos los países), siga estrictamente las instrucciones de uso de estos kit. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA LightCycler® Multicolor Compensation Set genera un archivo de compensación de color para compensar la diafonía observada entre los canales independientes cuando se utilizan distintas sondas marcadas en aplicaciones de varios colores. Aunque los filtros ópticos de cada canal de detección están optimizados para el espectro de emisiones de los marcadores, se observa una diafonía residual. PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO LightCycler® Multicolor Compensation Set está diseñado para los 5 canales distintos del equipo LightCycler® 2.0 (canales 530, 610, 640, 670, 705), que se corresponden con los marcadores fluorescentes. Se debe realizar un nuevo experimento de compensación de color cada 6 meses. El protocolo para el experimento en el equipo LightCycler® 2.0 requiere la macro de compensación multicolor, componente de SeptiFast Software Set (P/N: 04 705 220 001). REACTIVOS LightCycler® Multicolor Compensation Set P/N: 04 484 355 001 5 pruebas [1] CCB Tampón Tris-HCl < 1% Brij < 0,1% solución de magnesio 1 x 100 µl [2] CC530 Tampón Tris-HCl < 1% Brij < 0,1% solución de magnesio < 0,001% oligonucleótidos marcados 1 x 100 µl [3] CC610 Tampón Tris-HCl < 1% Brij < 0,1% solución de magnesio < 0,001% oligonucleótidos marcados 1 x 100 µl [4] CC640 Tampón Tris-HCl < 1% Brij < 0,1% solución de magnesio < 0,001% oligonucleótidos marcados 1 x 100 µl [5] CC670 Tampón Tris-HCl < 1% Brij < 0,1% solución de magnesio < 0,001% oligonucleótidos marcados 1 x 100 µl [6] CC705 Tampón Tris-HCl < 1% Brij < 0,1% solución de magnesio < 0,001% oligonucleótidos marcados 1 x 100 µl 1 ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES • Para diagnóstico in vitro. • No pipetee con la boca. • No se debe comer, beber ni fumar en las áreas de trabajo del laboratorio. Deben usarse guantes desechables sin talco, batas de laboratorio y protección ocular cuando se manipulen las muestras o los reactivos del kit. Lávese a conciencia las manos después de manipular las muestras y los reactivos de las pruebas. • No mezcle reactivos de kit distintos. • Elimine los reactivos no utilizados así como los desechos y las muestras según las reglamentaciones nacionales, federales, estatales y locales. • No utilice los kit con posterioridad a la fecha de caducidad. • Puede solicitar hojas de datos de seguridad del material (Material Safety Data Sheets, MSDS) en las oficinas locales de Roche. • Deben usarse guantes desechables, batas de laboratorio y protección ocular cuando se manipule cualquier reactivo. Evite el contacto de estos materiales con la piel, los ojos o las membranas mucosas. En caso de contacto, lave inmediatamente la zona afectada con abundante agua. Pueden producirse quemaduras si se deja sin tratar. Si se derrama alguno de estos reactivos, dilúyalo con agua antes de limpiarlo con un paño. REQUISITOS DE ALMACENAMIENTO Y MANIPULACIÓN • Almacenar a una temperatura de entre -15 y -25°C. • No utilizar después de la fecha de caducidad. MATERIALES SUMINISTRADOS LightCycler® Multicolor Compensation Set P/N: 04 484 355 001 5 pruebas MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS Posibilidad de compra a Roche Equipo LightCycler® 2.0 y programa 4.05.415 o versiones superiores 03 531 414 201 Capilares del LightCycler® (20 µl) 11 909 339 001 Centrífuga del carrusel del LightCycler 2.0 03 709 582 001 SeptiFast Software Set 1.0 o versiones superiores 04 705 220 001 INSTRUCCIONES DE USO Preparación Descongele los componentes de LightCycler® Multicolor Compensation Set, mézclelos suavemente y centrifúguelos unos instantes. Coloque seis capilares LightCycler® (20 µl) en los adaptadores para capilares. Dispense 20 µl de cada componente en cada uno de los capilares. Cierre cada capilar con el dispositivo para taponar capilares y colóquelos en el carrusel de muestras del LightCycler® en el siguiente orden. • Posición 1 del rotor: CCB (vial 1) • Posición 2 del rotor: CC530 (vial 2) • Posición 3 del rotor: CC610 (vial 3) • Posición 4 del rotor: CC640 (vial 4) • Posición 5 del rotor: CC670 (vial 5) • Posición 6 del rotor: CC705 (vial 6) Nota: no reduzca el volumen. 5. Realice la centrifugación con la centrífuga para el carrusel del LightCycler 2.0 e introduzca el carrusel de muestras del LightCycler® en el equipo LightCycler® 2.0. Nota: no modifique el orden de los reactivos del rotor. 1. 2. 3. 4. Inicio y almacenamiento del experimento de compensación del color (CCR) Para instalar y utilizar el experimento MCC_1.0_04484355001 o posterior de la macro SeptiFast, consulte el Manual de usuario del equipo LightCycler® 2.0, concretamente el capítulo “Ejecución de una macro de Roche”. Nota: no utilice el campo <assay lot number>. Si desea añadir el número del lote del ensayo al experimento, introduzca la información en el campo correspondiente del editor de muestras. 1. Guarde el experimento (p.ej., con el siguiente nombre SeptiFast_CCE_AAMMDD-xx, A= año, m= mes, d= día, xx= número de experimento). 2. Cuando finaliza el experimento se crea un informe automáticamente. 3. Imprima el informe. Creación de un objeto CC (CCO) 1. Active el modo de análisis de compensación del color y pulse el botón <save CC object>. 2. Cree un nombre como se indica a continuación para que el software SIS pueda llevar a cabo una identificación sin ambigüedades: SeptiFast_CCO_AAMMDD-xx (A= año, m= mes, d= día, xx= número de experimento, p.ej., SeptiFast_CCO_050313-01). 3. Este objeto se utiliza para realizar otros análisis de ensayos con LightCycler® SeptiFast Kit MG o LightCycler® SeptiFast mecA Kit MG. Validación del experimento • • Si el informe correspondiente a LightCycler® Multicolor Compensation Set contiene etiquetas (p.ej., <User Developed or Modified Test Method>), significa que el experimento no es válido. Repita el experimento. Si el control negativo (NC) o el control de reactivo (RC) de LightCycler® SeptiFast Test MG no son válidos de forma reiterada, significa que es probable que el archivo de compensación multicolor del LightCycler® no sea correcto. Repita el experimento de compensación multicolor o póngase en contacto con su representante de Roche. 2 3 Ú Distributed by Fabricado en Alemania para: Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ 08876 EE.UU. Roche Diagnostics Indianapolis, IN 46256 USA (For Technical Assistance call the Roche Response Center toll-free: 1-800 526 1247) Roche Diagnostics H7V 4A2 Laval, Quebec (For Technical Assistance call: Pour toute assistance technique, appeler le: 1-877 273 3433) Roche Diagnostics (Schweiz) AG CH-6343 Rotkreuz Roche Diagnostics F-38240 Meylan Roche Diagnostics GmbH D-68298 Mannheim, Germany Distributore in Italia: Roche Diagnostics SpA Piazza Durante 11 I-20131 Milano Roche Diagnostics S.L. E-08006 Barcelona Distribuidor em Portugal: Roche Farmacêutica Química, Lda P-2700 Amadora C Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Alemania, +49 621 7590 ROCHE, LIGHTCYCLER, MGRADE y SEPTIFAST son marcas comerciales de Roche. ROCHE RESPONSE CENTER es una marca de servicio de Roche. © 2005, by Roche Molecular Systems, Inc. Todos los derechos reservados. 10/2005 04623916001-01 4