Virtual Slides – Practicality and Potential Microscopía Virtual
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Virtual Slides – Practicality and Potential Microscopía Virtual
11/21/2007 Virtual Slides – Practicality and Potential Microscopía Virtual – Practicidad y Potencial Bruce Williams, DVM, DACVP Chair, AFIP Dept. of Telemedicine [email protected] Agradecimientos • John Gilbertson M.D., Massachusetts General Hospital • Yukako Yagi Yagi, MS MS, Massachusetts General Hospital • Michael Descour, Ph.D., dMetrix, Inc. Microscopía Virtual ScanScope CS System Representación virtual de la información visual contenida en un portaobjetos bj http://www.zeiss.com http://www.aperio.com http://www.dmetrix.net “Any field, any magnification” NanoZoomer Digital Pathology (NDP) System “Cualquier campo, cualquier magnificación” i-SCAN http://sales.hamamatsu.com http://www.bioimagene.com Usos Actuales: La microscopía virtual en nuestros dias - - - Realizar una copia digital, exacta y con valor diagnóstico de uno más cortes histológicos, en un contenedor conveniente y económico Magnificación de 20X como ampliación básica. Magnificaciones mayores disponible a través de duplicación de lentes. Con la tecnología CCD/CMOS actual, se puede tener un muestreo razonable de ~ 0.4-0.5 um/pixel Con estos parámetros, los equipos mas sofisticados capturan en ~ 5-10 minutos/muestra • Educacional – – – – Reemplazo de los cortes histológicos tradicionales Base de datos para muestras raras Estandarización de las observaciones Pruebas de destrezas electrónicas • Consultas – – – – En tiempo real Recorte de biopsias pequeñas donde el taco esta agotado Recorte de una muestra única Muestras de archivo • Investigación – Cualquier aplicación que utilice la computadora como ayuda en el diagnóstico 1 11/21/2007 Tecnologías convencionales para la captura y visualización de todo el corte histológico El microscopio matricial - Una matriz de 80 objetivos no esféricos, que es tan extensa como el portaobjetos y cubre toda el área de la muestra. Cada lente tiene su propia cámara - señal de cada c d cámara/lente c / e e puede La se ser procesada en paralelo - Los microscopios matriciales escanean las muestras a 20x en menos de un minuto - El mercado tiene los sistemas mas caros “Traceado óptico sencillo” • Método por Embaldosado – Una muestra típica abarca 700 micrómetros por lado – Escaneo lento de la muestra • Escaneo por “Línea” con un detector linear de la matriz - Ancho típico de la hilera es de 1000 micrómetros – Considerablemente más rápido • Ambos métodos requieren un solapamiento entre las imágenes adquiridas - Requerimiento de engarce (Stitching) – Alta precisión de mecanismo de microscopio (no comercialmente disponible) Algunas Preocupaciones en Microscopía Virtual – – – – – – TAMAÑO DE ARCHIVO Tamaño del archivo Velocidad de captura (Throughput) Resolución Foco Presentación Integración LIS y disponibilidad de metadatos Los almacenamientos poseen costos prohibitivos? • ¿El almacenamiento de terabytes de datos de imágenes es muy caro? • Servicio de Patología de alto rendimiento Æ 40000 casos/año • ~ 2 muestras/caso • ~ 2 sq cm / caso • ~ 1 GB/caso • 40000 GB / año = 40 TB TIEMPO DE ESCANEO MAS RAPIDO 500 • No tiene sentido almacenar muestras virtuales que no fueron utilizadas en el diagnóstico de un caso 10 • La necesidad de almacenamiento aumentará con el tiempo: siempre existirán portaobjetos y las imágenes digitales serán muy útiles • ¿Cuales son los costos actuales de almacenamiento de las muestras montadas en portaobjetos y la recuperación en el retraso de tiempo y del personal? 1 1994 HORAS 1998 2000 2002 2004 2005 MINUTOS SEGUNDOS 2 11/21/2007 • Se utilizaron equipos WSI de alta velocidad • Estos representan intercambios entre la calidad de la imagen y la velocidad de captura Borde del cubreobjetos ||| ||||| |||| |||||| • Existieron un par de propuestas de WSI que fueron utilizadas desde 1999 para mejorar los tiempo de captura Algoritmos para la Detección de Tejido S06-10 000 A 2 1 H&E H Patrick k Patient Tiempos de Escaneo Decrecientes Tejido • Siempre debemos recordar que a medida que avanza la tecnología estos “trucos” pueden convertirse en “triviales” o probablemente innecesarios Suciedad • El área de tejido es << que el área del vidrio • Una cámara de baja resolución y con vista panorámica toma una imagen de la muestra completa • Los algoritmos permiten diferenciar lo que es tejido de lo que es vidrio, suciedad u otros artefactos • Los sistemas sólo capturarán el área que corresponda al tejido • Pero la detección de tejido puede ser difícil y potencialmente catastrófica si no se identifica un área de tejido • Los sistemas de alta velocidad no “paran y enfocan” con cada disparo (snapshot) • Utilizando la baja resolución y la imagen panorámica, el sistema elige entre 10 – 80 puntos • Sobre estos se realiza el proceso de autoenfoque tradicional • El sistema reconoce, entonces, cual es la exacta distancia de trabajo necesaria para que esos puntos estén en foco • Para muestras difíciles, se podrá realizar el enfoque de manera manual ||| |||| |||| |||||| S06 6-1000 A 2 1 H&E Pattrick Patient Pre-enfocado Pre-enfocado ¿Cuan rápido debes ser? ||| |||| |||| |||||| S06-1000 A 2 1 H&E Patrick Patient • Superficie de foco Estimada Punto Focal • Esto funciona mejor de lo que puedan pensar • Pero el foco sigue siendo la fuente dominante de los problemas de calidad de las imágenes • Un intercambio entre la velocidad y la precisión S Superficie fi i Real R l de d Foco F Tejido Punto Focal Utilizando estos datos, el sistema estima una “superficie de foco” sobre la muestra, de manera que si la lente del objetivo “toca” la muestra, la imagen siga estando en foco • Para educación – no muy rápido debido a que se escanea de a muestra. La calidad es el factor más importante. • Para consultas – Su producción WSI debe estar disponible para el diagnóstico lo mas pronto posible • La eliminación de gran cantidad de información no deseada esta relacionada con la capacidad de los equipos modernos 3 11/21/2007 Mostrando la Muestra Virtual S06-1000 A 2 1 H&E Patrick Patient CCD ||| |||| |||| |||||| • Considere una muestra con un cm cuadrado de tejido: 6.6 µm Pixel El Microscopio Virtual Imaging Device Image Server He’s panning to the left! Entire Image 20x Sección 0.33 µm 10,000 µm • Es escaneado a 0.33 µm por pixel Here are the appropriate tiles El archivo de imagen piramidal • “Moviendo arriba y abajo” la pirámide permite un zooming rápido entre las magnificaciones virtuales, simplemente desplazándose entre las láminas Higher Resolution, Smaller Field Los datos de multi-resolución • El WSI is preprocesado en el servidor a datos de multiresolución • En los casos mas sencillos, la imagen base (mayor resolución) es muestreada t d repetidamente tid t (combinando 4 pixels en la mayor resolución a 1 pixel en la menor, resulta en una imagen que tiene la ½ de la resolución y un ¼ de tamaño de la muestra original Los principales componentes son: Current View • “Sub-image level access” El cliente reclama (y el servidor envía) solo los datos necesarios del área solicitada por el patólogo Para poder realizar un paneo rápido, cada lámina de la pirámide esta formada por pequeñas baldosas. Las baldosas son unidades que pueden ser enviadas al clientes desde el servidor Zooming Las imágenes están almacenadas en el servidor en un formato multi resolución (la pirámide tif) • – Pre-procesamiento de la imagen – Arquitectura Cliente-servidor en los que el servidor envía solo las partes de la imagen requeridas por el cliente High resolution/ Narrow FOV Lower Resolution, Wider Field • El Microscopio Virtual es un software que permite al usuario panear y agrandar la muestra digital, de manera similar a como ser haría en un microscopio físico Image Client • Esto crea una imagen de alta resolución (~ 30,000 x 30,000 pixels) • Como se muestra en la pantalla del patólogo, con una resolución de 1200x800? • Las baldosas tienden a ser pequeñas. Su valor real está determinado por la calidad/potencia de la red, el servidor y la PC Lower Resolution/ Wider FOV Microscopía Virtual in Educación • Puede distribuir hasta las muestras más raras • Mucho uc o mayor ayo costo costoeficiencia para las conferencias • Permite las conferencias simultaneas en varios países 4 11/21/2007 5 11/21/2007 Muestras completas en Educación – Lecciones aprendidas Microscopía Virtual en la Consulta • Incrementos económicos crecientes • Los patólogos no son buenos manejando dinero • El acceso variará ampliamente entre los distintos patólogos ól – Sistemas operativos – Ancho de banda • Algunos problemas no podrán ser resueltos – esté preparado para consultado a su departamento de IM Virtual Slides in Education DOD Int'l Civ US Civ VA 250 200 100 50 0 2001 2002 2003 2004 2005 2006 Fo llo wu p Re qu es ts 150 " 300 ge s 350 Static (n=2642) Robotic (n=893) Wholeslides (n=360) ef er ra ls/ "H ed 400 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% D 450 isa gr ee m en t 500 ¿En que resultan los cortes completos? D Demanda de Telemedicina 2001-2006 6 11/21/2007 Consulta de cortes completos – Lecciones aprendidas • Las muestras virtuales no son apropiadas para todas las prácticas comerciales Implementación • Costos – Soporte – Capacidad de almacenamiento y conexión en la red – Capacidad C id d de d escaneo (cuantos ( sistemas i robotizados, b i d cuan rápidos son) – Sistemas auxiliares (código de barras; calidad de la muestra, Integración real de APLIS) – Clinical champions – The “novelty factor” • Consultar los problemas del IM antes de embarcarse en el tema – Seguridad del sistema – Ancho de banda y almacenamiento • Financiar o justificar el costo del sistema WSI – Todavía se necesitan los especimenes montados en vidrio • El escaneo no es trabajo del patólogo Microscopía Virtual en Resumen Los sistemas ópticos tradicionales serán cada vez mejores: • - Avance general de la tecnología - Mejores computadoras - Mejores cámaras - Mejores, precisos y más rápidos microscopios - Mejores rangos dinámicos, - Pixels más pequeños - CCD más grandes Fortalezas – La calidad de la imagen es de calidad aceptable para el diagnóstico – Proceso de captura automatizada de las imágenes g – Herramienta útil para la enseñanza y archivo de información – Ahorrador de costos significativo en la enseñanza de la histología y la patología, conferencias, etc – Diversas plataformas comerciales – Puede ser útil para la consulta en tiempo real • Debilidades/limitaciones – Costo – Ausencia de análisis costo/beneficio – Elevada necesidad de i f infraestructura t t de d almacenamiento y de velocidad apropiada de red – Necesidad de conocimientos técnicos – Todavía se necesita el portaobjetos – No sirve para todos los paradigmas (eje Z- no capturado de rutina) – Interoperatividad no disponible actualmente para metadata 7