Diapositiva 1 - Laboratorio de Medicina

Diapositiva 1 - Laboratorio de Medicina

Validación de un ensayo cualitativo para HIV I/II.
S. Biondini, M.E. Almagro.
Laboratorio de Medicina – Bs.As. - Argentina
Introducción:
El proceso de validación es un paso fundamental en la implementación de un nuevo método ya que permite verificar las
especificaciones del fabricante y evaluar si las mismas se ajustan al propósito previsto del ensayo..
Objetivo:
El objetivo del presente trabajo es evaluar al performance de un ensayo cualitativo que usa materiales de control, donde la
respuesta se obtiene a través de un instrumental (Elecsys HIV Combi / Modular Analytics E170).
Los parámetros de calidad evaluados son sensibilidad (S) especificidad (E), porcentaje de falsos positivos (FP), porcentaje de
falsos negativos (FN), zona de resultados indeterminados o de no confiabilidad (ZNC), VPP (valor predictivo positivo) y VPN
(valor predictivo negativo) y precisión
Materiales y métodos:
Para la determinación de S,E, FP,FN,VPP y PPN, , se utilizó una tabla de contingencia 2x2 según el documento de la CLSI
EP12-A2. Las poblaciones analizadas fueron 150 pacientes sanos (no reactivos) que concurrieron al laboratorio para examen
pre-ocupacional y 50 pacientes con diagnóstico confirmado de HIV (clínica y Western Blot) en seguimiento.
La evaluación de precisión se realizó ensayando durante 20 días los tres niveles de control :PreciControl HIV Combi, Roche
Diagnostics, C1( control negativo), C2 , C3( controles positivos) por duplicado. Se estimó el CVi (intra corrida) y CVt ( total)
de acuerdo a la guíade la CLSI EP 5-A2, a través del programa EP Evaluator Release 8 (Rhoads). Los datos obtenidos
fueron contrastados frente a las especificaciones del fabricante para el mismo material de control.
La precisión en regiones cercanas al CO (cut-off) se evaluó usando diluciones de un material de valor conocido (control
positivo provisto en el kit de reactivos). Las diluciones de trabajo (1/16 y 1/32) fueron seleccionadas a través del desarrollo de
un perfil de precisión cercano al CO.
La ZNC se estimó a través del cálculo del CV% del CO. Para ello se utilizaron datos de calibraciones (Cal 1 y Cal 2 HIV
Combi, Roche Diagnostics) y la ley de propagación de errores.
Resultados:
Los resultados obtenidos se muestran en las siguientes tablas:
Tabla 1:
Fuente
S%
E%
FP%
FN%
VPP%
VPN%
Declarado por fabricante (inserto)
100
99.63
ND
ND
ND
ND
Verificado en LM
100
99.30*
0.7
0
98.8
100
Tabla 2: Ensayo de precisión
Fuente
Declarado por
fabricante
Verificado en LM
CV
CVi %
CVt %
CVi %
CVt %
C1
11.6
12.4
8.2
10.9
C2
3.6
5.9
3.4
4.5
*Ambas poblaciones están normalmente distribuías, difieren de 1 entre si.
C3
1.5
4.3
1.8
3.8
Dil * 1/16
Dil* 1/32
ND
ND
4.10
4.09
ND: no declarado
Tabla 3: Zona de resultados indeterminados o zona de no confiabilidad
Fuente
ZNC
Declarado por fabricante
10%
Verificado en LM
7%
Discusión:
De acuerdo a los datos obtenidos, se verifica que el método cumple con las especificaciones de desempeño declaradas por el
fabricante para los parámetros de performance evaluados.
En el caso de la especificidad, las diferencias observadas se atribuyen al tamaño de la muestra poblacional usada para la
evaluación
Conclusiones:
En los métodos cualitativos, los valores cercanos al CO son críticos ya que de ellos depende la correcta interpretación del
resultado. Por esta razón, el desempeño debe ser evaluado a través de estudios de precisión en dichas zonas y determinación
de la zona de no confiabilidad. Por otra parte, se debe verificar que las especificaciones de especificidad y sensibilidad dadas
por el fabricante sean reproducibles con el instrumental del laboratorio.
Agradecemos la colaboración y capacitación recibida del Dr.Gabriel Migliarino