Ainara Egia

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Ainara Egia

IV Congreso de la Red Nacional de Biobancos.
Madrid, 18-19 Octubre.
IMPLEMENTACIÓN DE UN NUEVO PROTOCOLO DE
RECOGIDA DE TEJIDO PROSTÁTICO PARA
INVESTIGACIÓN
Egia A.1, Ugalde A.2, Fernandez S.2, Castillo M.3,
Castro E.1, Del Villar A.1, Cordon-Cardo C.3, Bilbao R. 1
1Biobanco Vasco
para la Investigación, 2Hospital Universitario
Basurto, Bilbao, 3Mont Sinai Hospital, New York
DEMANDA DESDE INVESTIGACIÓN
• Sangre, orina….
• Tejido parafinado, en OCT
•…
www.bioef.org
www.biobancovasco.org
DEMANDA DESDE INVESTIGACIÓN
• Sangre, orina….
• Tejido parafinado, en OCT
•…
Tejido
Fresco
…
Proteómica
Metabolómica
Transcriptómica
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PROBLEMÁTICAS DEL TEJIDO PROSTÁTICO
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1. Las áreas con patologías neoplásicas en la pieza en fresco
NO SON MACROSCÓPICAMENTE DISTINGUIBLES.
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Pieza quirúrgica de colon que
presenta adenocarcinoma.
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Pieza quirúrgica de una próstata
con adenocarcinoma.
2.
Tiempo de isquemia (caliente y fría)
por la cirugía Robótica
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transcurrido
(Da Vinci)
2.
Tiempo de isquemia (caliente y fría)
por la cirugía Robótica
transcurrido
(Da Vinci)
3. Manipulación de la muestra: Tinta china y Ac. Acético.
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PROTOCOLO DE RECOGIDA DE TEJIDO
PROSTÁTICO EN FRESCO
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Redirigir el uso del…
PUNCH DERMATOLÓGICO 4 mm
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1
2
• Medir la próstata
• Marcar con tinta
3
4
• Fijar la tinta con Acético
• Corte sagital
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5
6
• Punch de un lóbulo
• Aislar punch
7
• Corte longitudinal del punch
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8
• Primera mitad, bloque de Parafina
9
10
• Marcaje con Eosina en zona de punch
• Mitad de tejido en fresco para Biobanco
11
• Congelación rápida
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12
• Almacenaje a -80ºC
Adenocarcinoma de próstata. 4 X
Adenocarcinoma de próstata. 20X
Tejido prostático benigno. 4 X,
Tejido prostático benigno. 20X
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CALIDAD DE LA MUESTRA (RNA)
Muestras contaminadas con tinta china y acético durante
la manipulación de la pieza. Gradiente de contaminación
de izq (menos) a drcha (más).
Primera separación de fases. Sin restos de tinta
en la fase acuosa.
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CALIDAD DE LA MUESTRA (RNA)
> Muestras contaminadas con tinta china y acético
durante la manipulación de la pieza. Gradiente de
contaminación de izq (menos) a drcha (más).
RIN
6.4
6.9
7.5
6.3
8.4
> Primera separación de fases. Sin restos de
tinta en la fase acuosa.
7.6
28s
18s
Gel del RNA obtenido de las muestras.
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Electroferogramas obtenidos de las muestras.
CONCLUSIÓN
 Ventajas adquiridas con el protocolo:
Permite aumentar el número de muestras (punch) por pieza.
Mayor % de muestra neoplásica obtenida.
Diagnóstico más preciso de la muestra congelada en el Biobanco.
Se preserva la calidad del RNA de las muestras.
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CONCLUSIÓN
 Ventajas adquiridas con el protocolo:
Permite aumentar el número de muestras (punch) por pieza.
Mayor % de muestra neoplásica obtenida.
Diagnóstico más preciso de la muestra congelada en el Biobanco.
Se preserva la calidad del RNA de las muestras.
 Protocolo aplicable a otros tejidos con difícil visualización
macroscópica de la zona tumoral.
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AGRADECIMIENTOS
 Servicio de Urología del Hospital Universitario de Basurto (HUB)
 Servicio de Anatomía Patológica del HUB
 Jon Diez Beldarrain (Reportaje fotográfico del protocolo)
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Muchas Gracias! Eskerrik asko!
Ainara Egia
944 00 64 26
[email protected]

Ainara Egia

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