NIVELES DE ACTIVIDAD DE ALFA GLUCOSIDASA NEUTRA EN

NIVELES DE ACTIVIDAD DE ALFA GLUCOSIDASA NEUTRA EN

NIVELES DE ACTIVIDAD DE ALFA GLUCOSIDASA NEUTRA EN EL
PLASMA SEMINAL DE PACIENTES CON Y SIN ALTERACIONES
ECOGRÁFICAS DE EPIDÍDIMO
Di Sisto Gustavo1; Gatica Sosa Claudia2; Molina Rosa I3.
1-Área Endocrinología, Laboratorio Central, Hospital San Luis.
Héroes de Malvinas 110, San Luis Capital, CP5700.
TE: 02652-15540365 - E-Mail: [email protected]
2- Área de Morfología. Departamento de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Facultad de
Química, Bioquímica y Farmacia. Universidad Nacional de San Luis, San Luis.
3- Laboratorio de Andrología y Reproducción- LAR - Córdoba – ARGENTINA
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RESUMEN
Introducción: El epidídimo participa en la maduración, adquisición de la movilidad y
capacidad fertilizante de los espermatozoides. La determinación α-glucosidasa neutra
(AGN) se utiliza como marcador de la función epididimaria y constituye un método no
invasivo, rápido y sensible para diferenciar azoospermia secretora de azoospermia
obstructiva.
Objetivos: Determinar si los niveles de alfa glucosidasa neutra
de pacientes con
ecografías normales y anormales de epidídimo muestran diferencias significativas.
Metodología: 68 voluntarios, a los que se les realizó: un espermograma, la
determinación de AGN y una ecografía de bolsa escrotal.
Resultados: No se encontró una diferencia significativa en los niveles de AGN según
los pacientes tuvieran ecografía normal o anormal (p=0,243). Se corroboró que la edad
de los pacientes no influye en los niveles de AGN (r=0,17; p=0,16).
Conclusión: La determinación de AGN demuestra no ser suficiente por sí sola para
alertar acerca de la presencia de quistes de epidídimo. La ecografía de la bolsa escrotal
continúa siendo una herramienta insustituible en el diagnóstico urológico.
Palabras Claves: Alfa Glucosidasa Neutra, Ecografías, Epidídimo, Semen.
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INTRODUCCIÓN
El semen está constituido por espermatozoides suspendidos en las secreciones de los
testículos y el epidídimo, las cuales en el momento de la eyaculación se combinan con
las secreciones de la próstata, vesículas seminales y glándulas bulbouretrales (1- 3). La
realización del espermograma puede proporcionar información valiosa acerca de
problemas en la función testicular y glándulas anexas (1-3). En el plasma seminal, que
surge luego de la separación del componente celular, se encuentran diferentes
componentes
que se originan en órganos o compartimentos del sistema reproductor
masculino, que pueden ser utilizados como marcadores funcionales de los mismos.
Entre ellos, la alfa glucosidasa neutra (AGN) para epidídimo; la fructosa para vesículas
seminales; citrato, zinc y fosfatasa ácida prostática para próstata; muco proteínas e
inmunoglobulina A secretora para glándulas bulbouretrales y
transferrina para
testículos (1-3).
El epidídimo juega un rol muy importante en
la maduración, adquisición de la
movilidad y capacidad fertilizante de las células germinales, esto se debería a cambios
que produce la secreción epididimaria en la membrana espermática. La determinación
de AGN es útil para evaluar su funcionamiento (4-12).
Si bien varios autores han reportado una disminución de los parámetros seminales con
el avance de la edad, la secreción de AGN no se ve afectada por este factor en
pacientes menores de 50 años (14, 15).
La disminución de este marcador bioquímico en el plasma seminal de pacientes con
oligo o astenozoospermia, puede reflejar una obstrucción parcial o una deficiencia
funcional del epidídimo (1-13).
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La determinación de AGN constituye un método no invasivo, rápido y sensible para
diferenciar la azoospermia secretora de la tipo excretora e identificar una obstrucción
parcial a nivel del epidídimo (1-13).
Valorando la actividad de AGN se podría evitar una biopsia, debido a su alta fiabilidad
diagnóstica. Los bajos niveles de AGN en el plasma seminal pueden estar relacionados
con epididimitis y se han asociado con defectos en la maduración espermática. En tanto,
niveles altos de actividad de AGN se correlacionaron con una marcada capacidad de
unión de los espermatozoides humanos a la zona pelúcida (4-13).
La masa extra-testicular
más frecuente son los quistes simples de epidídimo que
contienen un líquido seroso. Las lesiones son benignas y no suelen producir síntomas
más allá de los relacionados con el efecto del crecimiento de la masa quística. En la
mayoría de los casos se presenta como un quiste único que se desarrolla en la parte
engrosada o cabeza del epidídimo, pero pueden existir varios quistes dentro de un
mismo epidídimo (16-20).
La ecografía constituye uno de los aportes más importantes en el diagnóstico urológico,
siendo considerada en la actualidad como la técnica inicial de diagnóstico por imagen
en un gran número de patologías urológicas. Por otra parte esta técnica permite detectar
lesiones focales y difusas, patologías traumáticas, peri-testiculares
y anomalías
congénitas, así como realizar una evaluación del crecimiento testicular (16-20).
OBJETIVOS
Debido a que no existen reportes que asocien los niveles de AGN en el plasma seminal
con el resultado de estudios por imágenes destinados al diagnóstico de quistes de
epidídimo, nos propusimos determinar si los niveles de actividad de la AGN en el
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plasma seminal de individuos con ecografías normales
y anormales de epidídimo
muestran diferencias significativas.
Como segundo objetivo nos planteamos corroborar que la edad del hombre (entre los
20 y los 50 años) no tiene incidencia en la secreción de AGN, como ha sido reportado
por algunos autores (14,15).
MATERIALES Y MÉTODOS
Población del estudio
El estudio incluyó sesenta y ocho (68) hombres voluntarios sanos que concurrieron al
Área de Endocrinología del Laboratorio Central del Hospital San Luis, con edades
comprendidas entre los 20 y 50 años. Todos los individuos mostraron parámetros
seminales normales según establece el Manual de la Organización Mundial de la Salud
(OMS) (1).
A cada individuo se le practicó una ecografía de bolsa escrotal. Según su resultado, los
individuos fueron divididos en dos grupos: aquellos con ecografía normal (ausencia de
quistes de epidídimo) (EN) y con ecografía anormal (presencia de
quistes de
epidídimo) (EA).
Determinación de Alfa Glucosidasa Neutra
Las muestras de semen fueron obtenidas por masturbación después de tres días de
abstinencia sexual, recogidas en frascos estériles, descartables y conservadas durante
30 minutos a 37ºC para su licuefacción total. Luego se tomó una alícuota, que fue
centrifugada 10 minutos a 1000g. El sobrenadante conteniendo el plasma seminal, se
conservó a -20°C hasta su procesamiento, para la determinación de AGN.
Para la determinación de actividad de AGN se siguió la recomendación del Manual de
la OMS (1), realizando la inhibición de la isoforma ácida de la enzima con
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duodecilsulfato de sodio (SDS, pH 6,8). Posteriormente, la actividad enzimática fue
calculada a partir de una curva estándar con p-nitrofenol (PNP) liberado del sustrato
sintético p-nitrofenol-D-glucopiranósido (PNPG), siendo 1 unidad de AGN=1µMol de
PNP
producido/
min
a
37°C.
La
producción
de
PNP
fue
determinada
espectrofotométricamente a 405 nm, luego de detener la reacción con carbonato de
sodio. El factor de corrección empleado que incluyó el volumen del semen, el volumen
total del ensayo y el tiempo de la reacción (120 min) fue de 0,6194. La actividad de
AGN fue expresada en mU por volumen de eyaculado (mU AGN/Eyaculado) (1, 4-13).
Se empleó mU AGN/ Eyaculado para la expresión de los resultados debido a que el
volumen que aporta el epidídimo al volumen total eyaculado es insignificante (1-3). Se
tomó como valor de referencia el propuesto por el Manual de la OMS: mayor a 20 mU
AGN/Eyaculado (1).
Análisis estadístico
Se realizó
un
análisis descriptivo de la variable AGN para los dos grupos,
discriminados según los resultados de las ecografías (EN y EA). Debido a las diferentes
distribuciones de las variables y para observar asociaciones entre diferentes variables, se
realizaron análisis de correlación de Spearman y pruebas U de Mann-Whitney, según
correspondió.
Por último se realizó un análisis de correlación de Spearman, para observar asociación
entre mU AGN/Eyaculado y las edades de los pacientes.
RESULTADOS
Del total de 68
voluntarios estudiados, se establecieron
dos grupos: uno
con
ecografías normales (EN) integrado por 50 individuos (73%) y otro con ecografías
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anormales (EA) integrado por
18 individuos (27%). Siendo la presencia de quistes
simples y pequeños de epidídimo la única alteración que mostraron
todos los
individuos con ecografía anormal. En la tabla 1 se muestran los resultados de niveles
de AGN en ambos grupos.
Ecografía Normal
Ecografía Anormal
29,04*
20,83*
(16,2-49,7)
(13,4-32,0)
Mediana de Niveles de AGN
(Q1-Q3)
Tabla 1. Análisis descriptivo para niveles de AGN individuos discriminados según
resultados de las ecografías. * los resultados se expresan en mU AGN/Eyaculado.
No se observó una diferencia estadística significativa en los valores de AGN entre los
grupos estudiados (U=366; p=0,243).
Figura 1
mU AGN/Eyaculado
145,9
109,4
73,0
36,5
0,0
EN
EA
Resultados de las ecografías
Figura 1: Gráfico de dispersión de niveles de AGN (expresados como mU
AGN/Eyaculado), en función de los dos grupos en estudios (EN versus EA).
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Figura 2
146
mU AGN/Eyaculado
117
88
58
29
0
EN
EA
Resultados de las ecografías
Figura 2: Valores de Mediana y Q1-Q3 de los niveles de AGN (expresados como mU
AGN/Eyaculado), en función de los grupos en estudio (EN versus EA).
No se observó correlación entre los valores de AGN y la edad de los sujetos estudiados
(r=0,17; p=0,16) (Figura 3).
Figura 3: Gráfico de niveles de AGN (expresados como mU AGN/Eyaculado), según
edades de los individuos estudiados.
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DISCUSIÓN
En nuestra población en estudio se observó que el porcentaje de individuos que
presentaron ecografías anormales fue del 27%, coincidiendo con lo reportado por otros
autores (15).
En este trabajo se propuso determinar si los niveles de actividad de AGN en plasma
seminal presentan diferencias significativas en individuos agrupados según posean
ecografías normales o anormales de epidídimo. No
significativa
se encontró una diferencia
en los niveles de AGN en plasma seminal entre los dos grupos de
individuos estudiados. Se puede atribuir esto a que los quistes simples de epidídimo, al
ser lesiones benignas y asintomáticas que se hallan en forma fortuita en las ecografías,
no modifican los parámetros bioquímicos seminales, salvo en el caso de que posean un
gran tamaño y obstruyan la vía.
Se confirmó que la edad de los individuos en estudio (rango de 20 a 50 años) no influye
significativamente en los niveles de actividad de AGN en plasma seminal, tal como ha
sido reportado por otros autores (14,15)
CONCLUSIONES
Los resultados nos permiten concluir que la determinación de AGN demuestra no ser
suficiente por sí sola para alertar acerca de la presencia de quistes de epidídimo.
Por lo antes expuesto, la ecografía de la bolsa escrotal continúa siendo una herramienta
insustituible en el diagnóstico urológico como ha sido reportado por otros autores.
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