efecto del momento de aplicacion del benzoato de - IRAC

Transcripción

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA PARA GRADUADOS
INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC)
EFECTO DEL MOMENTO DE APLICACIÓN DEL
BENZOATO DE ESTRADIOL COMO INDUCTOR DE
LA OVULACIÓN EN UN PROTOCOLO DE IATF
SOBRE LA TASA DE PREÑEZ EN VACAS DE
CARNE.
JUAN SALVADOR ANDRADA
Para optar al Grado Académico de Especialista en Reproducción Bovina.
Córdoba – 2015
INDICE
1. RESUMEN…………………………………………………………………………..3
2. INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………..4
2.1 HIPÓTESIS DE TRABAJO………………………………………………………..5
2.2 OBJETIVO GENERAL…………………………………………………………….5
2.3 OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………………………….....6
3. MATERIALES Y MÉTODOS……………………………………………………..6
3. 1. ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO………………………………………….6
3. 2. TRATAMIENTOS…………………………………………………………………6
3. 3. ANÁLISIS DE DATOS…………………………………………………………...8
4. RESULTADOS……………………………………………………………………...8
5. DISCUSIÓN………………………………………………………………………..12
6. CONCLUSIONES………………………………………………………………....12
7. BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………………………..13
1. RESUMEN
El presente trabajo tuvo como objetivo comparar las tasas de preñez con la aplicación
de Benzoato de Estradiol (EB) a las 24 y 32 horas de retirado el dispositivo intravaginal y
del Cipionato de Estradiol (ECP) al momento de retiro del dispositivo. Para ello, se
utilizaron 200 vacas de carne con cría con 60 días postparto y una condición corporal (CC)
mínima de 2,5 (escala 1:5). Previo al inicio del tratamiento todas las vacas fueron revisadas
mediante ultrasonografía (Mindray® DP30 Vet) para determinar el porcentaje de
ciclicidad. Luego las mismas fueron bloqueadas para su posterior análisis. En el Día 0,
todas las vacas recibieron un dispositivo impregnado con progesterona DIB (0,5 gr,
Syntex®, Argentina) junto con 2 mg de EB (Gonadiol, Syntex®). El Día 8 recibieron una
dosis de 500 µg de prostaglandina (PGF, Ciclase, Syntex®) junto con el retiro del
dispositivo intravaginal. Las vacas del Grupo ECP recibieron en el Día 8 (junto con la
PGF) 1 mg de ECP (Cipiosyn, Syntex®). Las del grupo EB 24, recibieron una dosis de 1
mg de EB 24 horas pos retiro del DIB, mientras que las del Grupo EB 32, recibieron una
dosis de 1 mg de EB 32 horas pos retiro del DIB. Todas las vacas fueron inseminadas a
tiempo fijo entre las 52 y 56 horas de retirado el DIB. En el mismo momento de la IATF
se realizó ecografía para medir el tamaño del folículo preovulatorio. Treinta días después
junto con el diagnóstico de gestación se midió el tamaño del cuerpo lúteo mediante
ultrasonografía. Los datos fueron evaluados estadísticamente por el Software, Infostat
(Universidad Nacional de Córdoba).
Palabras clave: Inseminación artificial a tiempo fijo – EB – ECP - Vacas de carne.
2. INTRODUCCIÓN
La sincronización de la ovulación en el ganado tiene como objetivo facilitar los
programas de inseminación artificial. Por otra parte, la simplicidad y eficiencia en los
tratamientos son características esenciales para aplicar esta técnica (Johnson y Jones, 2005).
La mayoría de los tratamientos con los que se cuenta en la actualidad son eficientes,
obteniéndose porcentajes de preñez de alrededor del 50 % en el caso de los rodeos de carne
(Cutaia, 2006). Los factores que afectan los resultados que se pueden obtener luego de
implementar una IATF son la condición corporal, nutrición, edad, número de partos, estrés,
pérdida de dispositivos y calidad seminal.
Progestágenos más estradiol se han utilizado con éxito para inducir y sincronizar celo y
ovulación en el ganado. Una de las ventajas de la utilización de progestágenos para el
control del estro es la inducción a la ciclicidad en vacas en anestro (Fike et al., 1997).
Una desventaja de la utilización de progestágenos es producir la ovulación de
ovocitos subfértiles al crear folículos persistentes (Ahmad et al., 1995; Kinder et al., 1996).
Sin embargo, los folículos persistentes se pueden evitar mediante la inducción de la
atresia del folículo dominante. La combinación de estos produce una regresión del folículo
dominante presente en este momento a causa de la disminución de las concentraciones de
FSH y LH circulante. Existen distintos esteres de estradiol como lo son el estradiol 17 β ,
benzoato, valerato o cipionato de estradiol. El ECP (Colazzo et al., 2003) al tener un vida
media más larga produce un dispersión en el día de la emergencia de la nueva onda. El EB
(Sa Filho et al., 2004) presenta una vida media más corta induciendo eficazmente la
emergencia de la nueva onda folicular alrededor de los 3 a 4 días de comenzado el
tratamiento tanto en Bos Taurus como Bos Indicus (Bo et al., 1995; Sa Filho et al., 2005)
Esto se logra cuando se combina al progestágeno con una inyección intramuscular de
estradiol (Burke et al., 1998).
En los protocolos de sincronización, el estradiol es normalmente inyectado en el momento
de la inserción de un dispositivo de progesterona (Martínez et al., 2000., 2005; Mapletoft et
al., 2003), que es eliminado 7 u 8 días más tarde, en el momento de la administración de
prostaglandina.
En la actualidad el EB se aplica al final del tratamiento, 24 horas de retirado el
dispositivo intravaginal para sincronizar la ovulación (Baruselli et al., 2001; Bo et al.,
2002) en donde las vacas son inseminadas en un intervalo de 52 a 56 horas de retirado el
dispositivo sin afectar las tasas de concepción. Recientemente, diversos estudios han
demostrado que la utilización de cipionato de estradiol (ECP) presenta resultados similares
que el EB para la sincronización de la ovulación, con la diferencia de que el ECP se aplica
en el mismo momento en que se retira el dispositivo, facilitando el manejo, ya que evitamos
un encierre en los animales (Colazo et al., 2003; Marquez et al., 2004; Penteado et al.,
2005; Ayres et al., 2006).
Diferentes trabajos han demostrado que existe una gran correlación entre el tamaño del
folículo preovulatorio y la tasa de preñez debido a que mientras más grande es el folículo
preovulatorio más grande va a ser el cuerpo lúteo que se va a formar, por lo tanto habrá
mayores niveles plasmáticos de progesterona (Kastelic et al., 1990; Battocchio et al., 1999 ;
Son et al., 1995).
2.1 HIPOTESIS
El retraso de la aplicación del benzoato de estradiol por 8 horas resultaría en un aumento
del tamaño del folículo preovulatorio y consecuentemente del tamaño del cuerpo lúteo y un
aumento en las tasas de preñez en vacas de carne en IATF.
2.2 OBJETIVO GENERAL
El objetivo de este trabajo es evaluar el efecto del retraso de la aplicación del Benzoato de
Estradiol en el tamaño del folículo preovulatorio y los porcentajes de preñez en vacas de
carne inseminadas a tiempo fijo.
2.3 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
-Evaluar el tamaño del folículo preovulatorio al momento de la inseminación artificial.
-Evaluar el tamaño de cuerpo lúteo al momento del diagnóstico de gestación.
-Mejorar la tasa de preñez con el retraso de la aplicación del benzoato.
-Evaluar una alternativa de manejo con respecto a la aplicación del benzoato.
3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO
El estudio realizado se llevó a cabo en el establecimiento Don Isidoro ubicado en la
provincia de la Rioja-Argentina situada en el centro-oeste del país. El mismo cuenta con
una superficie de 3000 hectáreas dividida en potreros para rotación del rodeo; la pastura
con la que se maneja el rodeo es principalmente el buffel grass. El clima en la mayor parte
del territorio es semiárido continental y árido de montaña, con escasa humedad, debido a
que los vientos húmedos provienen del anticiclón del atlántico sur y cuando llegan a esta
provincia lo hacen con poca humedad y fuerte radiación solar. En las zonas bajas los
veranos son muy calurosos y los inviernos son cortos, con moderadas temperaturas. Las
precipitaciones no superan los 400 mm anuales, con excepción de algunos parajes
montañosos, donde son algo más importantes.
3.2 DETERMINACIONES O TRATAMIENTOS
Para el estudio se utilizaron 200 vacas de carne con cría con 60 días pos parto. Las
vacas fueron seleccionadas por ciclicidad (presencia de un cuerpo lúteo) o folículo > a 10
mm en sus ovarios por mediante ultrasonografía (Mindray® DP30 Vet) y una condición
corporal (CC) mínima de 2,5. Luego las mismas fueron divididas aleatoriamente en tres
grupos homogéneos para su posterior análisis. En el Día 0, todas las vacas recibieron un
dispositivo impregnado con progesterona DIB (0,5 gr, Syntex®, Argentina) junto con 2 mg
de EB (Gonadiol, Syntex®). El Día 8 recibieron una dosis de 500 µg de prostaglandina
(PGF, Ciclase, Syntex®) junto con el retiro del dispositivo intravaginal. Las vacas del
Grupo ECP recibieron en el Día 8 (junto con la PGF) 1 mg de ECP (Cipiosyn, Syntex®).
Figura 1. Protocolo de sincronización utilizando ECP (cipionato de estradiol) al momento de retiro de
dispositivo intravaginal.
Las del grupo EB 24, recibieron una dosis de 1 mg de EB 24 horas pos retiro del DIB.
Figura 2. Protocolo de sincronización utilizando EB (benzoato de estradiol) a las 24h de retirado el
Las del Grupo EB 32, recibieron una dosis de 1 mg de EB 32 horas pos retiro del DIB.
Figura 3. Protocolo de sincronización utilizando EB (benzoato de estradiol) a las 32h de retirado el
Todas las vacas fueron inseminadas a tiempo fijo entre las 52 y 56 horas de retirado el
DIB. En el mismo momento de la IATF se realizó ecografía para medir el tamaño del
folículo preovulatorio. Treinta días después junto con el diagnóstico de gestación se midió
el tamaño del cuerpo lúteo mediante ultrasonografía. El trabajo fue realizado en dos
réplicas de 100 animales utilizando en la primera aquellas que se encontraban aptas al
momento de la revisación y en la segunda las que salieron vacías a la primera inseminación
y las que ya estaban aptas para ser utilizadas. Los datos fueron evaluados estadísticamente
por el Software, Infostat (Universidad Nacional de Córdoba)
3.3 ANÁLISIS DE DATOS
Los datos fueron analizados mediante Chi-cuadrado en caso de preñez y para el tamaño
de cuerpo lúteo como de folículo preovulatorio mediante análisis de la varianza utilizando
el programa Infostat (Universidad Nacional de Córdoba)
4. RESULTADOS
Primer Replica
Se utilizaron 87 vacas quedando 13 sin utilizar por no reunir las condiciones
establecidas. Los tamaños medios observados de folículo dominante (TFD) al momento de
la inseminación fueron de 12,44 mm (EB 32 h), 11,59 mm (EB 24 h) y 11,71 mm (ECP
0h). Los tamaños medios observados de cuerpo lúteo (TCL) al momento del diagnóstico
fueron de 20,53 mm (EB 32 h); 18,73 mm (EB 24 h) y 18,77mm (ECP 0 h). En el análisis
estadístico no se encontraron diferencias significativas entre los tres grupos (p > 0,05).
Tabla 1. Promedio de tamaño de folículo dominante (TFD) al momento de la inseminación artificial a tiempo
fijo (IATF) y del tamaño de cuerpo luteo (TCL) al diagnostico de gestación 30 días pos IATF.
GRUPOS
N
TFD
N
TCL
Benzoato de estradiol 32 hs
25
12,44 ± 0,5
15
20,53 ± 0,7
27
11,59 ± 0,5
15
18,73 ± 0,7
Cipionato de estradiol 0 hs
26
11,71 ± 0,5
13
18,77 ± 0,7
(p >0,05).
El porcentaje de preñez obtenido en el grupo de tratamiento con EB 32 hs fue de 52 %
mientras que en el de EB a las 24 h fue del 55 %. Por último en las tratadas con ECP 0h se
encontró un porcentaje de preñez del 48 %. Si bien en el análisis estadístico no se
encontraron diferencias significativas entre los tres grupos de estudio (p > 0,05), se pudo
observar una tendencia de diferencia entre el grupo de EB 24 h y de ECP 0 h (p > 0,06)
Tabla 2. Porcentajes de preñez obtenidos en vacas de carne con dos inductores de ovulación (EB y ECP)
aplicados en distintos momentos.
GRUPOS
N
PREÑADAS
% PREÑEZ
29
15
52 %ab
29
16
55 %b
29
14
48 %a
Los porcentajes con distinta letra tienden a diferir (p=0,0689).
Segunda Réplica
Aquí se utilizaron 85 vientres, quedando en esta oportunidad 15 sin utilizar. Los
tamaños medios de folículo dominante encontrados (TFD) al momento de la inseminación
fueron de 12,62 mm (EB 32 h), 12,33 mm (EB 24 h) y 12,4 mm (ECP 0 h). Los tamaños
medios observados de cuerpo lúteo (TCL) al momento del diagnóstico fueron de 17,25mm
(EB 32 h); 19,05 mm (EB 24 h) y 17,36 mm (ECP 0 h). En el análisis estadístico no se
encontraron diferencias significativas entre los tres grupos (p > 0,05).
GRUPOS
N
TFD
N
TCL
21
12,62 ± 0,4
12
17,25 ± 1,0
27
12,33 ± 0,4
20
19,05± 1,1
21
12,43± 0,4
11
17,36 ± 0,8
(p >0,05).
Los porcentajes de preñez obtenidos fueron en el grupo de tratamiento con EB 32 h de
46 %, en el grupo de EB 24 h fue de 69 % y por último en el grupo de ECP 48 h fue de 39
%. En el análisis estadístico no se encontraron diferencias significativas entre los tres
grupos de estudio (p > 0,05), sin embargo se pudo observar diferencia significativa entre el
grupo de EB 24 h y de ECP 0 h (p = 0,03).
GRUPOS
N
PREÑADAS
% PREÑEZ
28
13
46 %ab
29
20
69 % b
28
11
39 % a
Los porcentajes con distinta letra tienen diferencia significativa (p=0,0343).
General
En la sumatoria de las dos replicas se utilizaron 172 vacas encontrándose que los
tamaños medios de folículo dominante (TFD) fueron al momento de la inseminación de
12,48 mm (EB 32 h); 11,98 mm (EB 24 h) y 12,03 mm (ECP 0 h). Los tamaños medios
observados de cuerpo lúteo (TCL) al momento del diagnóstico fueron de 19,07 mm (EB 32
h); 18,91 mm (EB 24 h) y 18,13mm (ECP 0 h).
GRUPOS
N
TFD
N
TCL
46
12,48 ± 0,3
27
19,07 ± 0,6
54
11,98 ± 0,3
35
18,91 ± 0,6
47
12,03 ± 0,3
24
18,13 ± 0,7
(p >0,05).
Los porcentajes de preñez obtenidos fueron en el grupo de tratamiento con EB 32 h de
49 %, en el grupo de EB 24 h fue de 62 % y por último en el grupo de ECP 0 h fue de 44%.
En el análisis estadístico no se encontraron diferencias significativas entre los tres grupos
de estudio (p > 0,05). Se pudo observar una tendencia de diferencia entre el grupo de EB 24
h y de ECP 0 h (p > 0,06).
GRUPOS
N
PREÑADAS
% PREÑEZ
57
28
49 % ab
58
36
62 % b
57
25
44 % a
Los porcentajes con distinta letra tienden a diferir (p=0,0625).
5. DISCUSIÓN
Este ensayo tuvo como objetivo principal comparar distintos momentos de aplicación
de dos sales de estradiol tanto como el cipionato y benzoato en cuanto a los tamaños de
folículos, cuerpos lúteos y tasa de preñez en vacas de carne. De los 200 vientres con los
cuales se pensaba realizar este estudio se tuvieron que descartar 28 por no reunir las
condiciones, esto puede haber sido consecuencia de las condiciones climáticas y
alimenticias en las cuales se encontraba el rodeo al momento de comenzado el ensayo dado
que el mismo se realizó en la provincia de La Rioja en una época en la que se esperaba una
mejor oferta forrajera, lo que no fue así. En cuanto a los protocolos usados tradicionalmente
como lo son el benzoato de estradiol a las 24 h del retiro del dispositivo y el cipionato de
estradiol al momento del retiro del dispositivo no se encuentran diferencias en los
resultados entre ambos como lo han demostrado numerosos estudios que se han realizado a
los largo de varios años. Aplicar el EB a las 32 h surge como una opción de manejo de los
rodeos y de las condiciones externas (clima, mano de obra, instalaciones, etc.) que pudieran
llegar a afectar la colocación a las 24 h. También el rango horario para realizar la tarea es
mucho más grande, en donde se pueden programar mejor los trabajos, se pueden subdividir
los lotes, y trabajar en horarios en los que el clima no afecta tanto. Otra de las opciones que
se estudiaron aquí es el aumento que podría llegar a tener el folículo preovulatorio al
aplicar más tarde este inductor de la ovulación y en consecuencia tener un mayor diámetro
del cuerpo lúteo posterior. Habría que seguir trabajando con esta opción con un mayor
número de animales para ver si continúa la igualdad de los resultados en los distintos
momentos de aplicación y sobre todo si continúan las diferencias encontradas en las tasas
de preñez entre el benzoato aplicado a las 24 h y el cipionato aplicado a las 0 h.
6. CONCLUSIONES
En conclusión se puede decir que no hay diferencias en el tamaño del folículo
preovulatorio, el tamaño del CL y las tasas de preñez entre los distintos momentos de
aplicación del benzoato de estradiol (a las 24 h o a las 32 h), lo cual flexibiliza su
aplicación, sin afectar el resultado reproductivo. Tampoco se observan diferencias en
cuanto al tamaño del folículo preovulatorio y tamaño de CL en la aplicación del cipionato
de estradiol a las 0 h. Sin embargo se encontró una tendencia de diferencia en las tasas de
preñez entre el benzoato aplicado a las 24 h y el cipionato a las 0 h en las dos replicas y en
el análisis general.
7. BIBLIOGRAFÍA
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