Comparación funcionalidad inmune no

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Comparación funcionalidad inmune no-viral versus viral en SFC.
Nicole Porter1*, Athena Lerch1, Leonard A. Jason1, Matthew Sorenson1, Mary Ann Fletcher2, and Joshua
Herrington1 1DePaul University and 2University of Miami
Participantes con SFC fueron agrupados en categorías de fatiga de comienzo viral y no-viral y
valorados por expresión diferencial de marcadores inmunológicos.
Se valoraron células mononucleares de sangre periférica por expresión fenotípica diferencial de
las glicoproteínas de adherencia en la superficie en linfocitos en circulación.
El grupo viral en comparación con el grupo no-viral demostró significativas elevaciones de varios
subgrupos de tipo Th1, incluyendo: % y nº de células CD4+, CD2+CD26+, CD2+CD4+CD26+,
CD4+ CD26+ y células naíves Th2 (CD4+ CD45RA+CD62L+).
De los restantes hallazgos significativos, el grupo no-viral demostró significativas elevaciones en
comparación con el grupo viral para los siguientes subgrupos tipo Th1: % y nº de células CD8+,
% de células supresoras T-citotóxicas (CD3+8+) y % y nº de células de memoria Th1
(CD8+CD45RA-CD62L-). El grupo viral demostró un patrón de activación diferente de él del
grupo con etiología no-viral, como evidenciado por un % y nº elevado y fuera de rango de células
CD4+, el % de CD2+CD26+ y el % de células naíves Th2 (CD4+CD45RA+CD62L+). Ambos
grupos demostraron reducción fuera del rango de citotoxicidad de células Natural Killer y % de
células B-1 (CD5+CD19).
Además, ambos grupos demostraron un % elevado y fuera de rango de CD2+CD8+CD26+, % de
subgrupo de memoria Th1 (CD4+CD45RA-CD62L-), % de memoria y células naíves Th1
(CD8+CD45RA-CD62L-, CD8+CD45RA+CD62L-), % y nº de células memoria Th2
(CD4+CD45RA-CD62L+) y % de células memoria y naíves Th2 (CD8+CD45RA-CD62L+,
CD8+CD45RA+CD62L+). Estos hallazgos implican que el mecanismo homeostático responsable
de la regulación de las respuestas inmunes Th1 (cell mediadas) y Th2 (humoral) está alterado en
el SFC. Se discuten las implicaciones de estos hallazgos.
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El SFC ha sido vinculado con la exposición a varios virus y otros agentes infecciosos,
comenzando muchas veces después de infección primaria con aguda Mononucleosis,
enfermedad de Lyme y fiebre Q, entre otras. Adicionalmente las infecciones agudas
por enterovirus pueden persistir en pacientes resultando en manifestaciones del SFC.
Infección con o la reactivación de estos virus y posiblemente otros (por ej., HSV-1,
HHV-6, Epstein Barr virus y Citomegalovirus) puede estar implicada en las crisis y las
remisiones de la patogénesis del SFC.
Varios estudios han documentado hallazgos de disminución de la citotoxicidad de las
células natural killer y la reducción de la expresión de la perforina, tanto en las células
NK, como en las células T citotóxicas. Un estudio describió la activación del sistema
inmune en el SFC como evidenciada por reducciones de las poblaciones de las células
natural killer (NK) y el incremento de la expresión de los receptores HLA-DR y CD38 en
las células NK. También se han encontrado otras irregularidades, como activación
inmune e inflamación crónica, como evidenciado por la disfunción de las células B y la
modulación de la actividad de las células T mediada por anticuerpos de las células NK.
El SFC puede ir acompañado de un incremento de la translocación de lipopolisacáridos
(LPS) de endotoxinas del intestino debido al incremento de la permeabilidad. Esta
translocación de LPS desencadena una sistémica respuesta inmune caracterizada por
inflamación crónica central. Cuando la LPS se vuelve sistémica, la microglia es activada
y puede llevar a la producción crónica de citocinas proinflamatorias, posiblemente
resultando en dificultades cognitivas, alteraciones del sueño, etc. Si no se trata, las
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enterobacterias pueden jugar un papel en el mantenimiento de una respuesta
autoinmune tipo Th2. Los enterovirus también pueden jugar un papel en la
patogénesis del SFC.
El comienzo del SFC también puede ser precipitado por incidentes no-virales
resultando en un daño difuso al sistema nervioso central, como agudo trauma en la
cabeza y exposición tóxica a productos químicos. Pall y Saterlee (2001) encontraron
que la exposición a pesticidas, hidrocarbonos clorinados y otros orgánicos volátiles
puede llevar a elevaciones del óxido nítrico/peroxinitrito mediante la estimulación
de receptores muscarínicos de acetilcolina, que puede jugar un papel en el desarrollo
del SFC.
Por esto una infección vírica puede representar uno de varios agentes con potencial
para inducir síntomas del SFC. El estudio presente investigó las diferencias en la
expresión del clúster de marcadores de diferenciación entre una muestra de pacientes
con SFC diagnosticado que tenían una etiología viral o no-viral.
Método
Participantes
Se reclutó un total de 114 participantes. Se sacó sangre periférica antes de hacer
estudio psicológico.
Se informaron como porcentajes del total de los linfocitos, los resutlados del recuento
total de células T (CD3+ T-cells), células T helper/inductoras (CD3+CD4+), células T
citotóxicas (CD3+CD8+), células B (CD19+) y las células natural killer (CD3-CD56+).
Diferencias sociodemográficas
No se vieron diferencias entre ambos grupos respecto a raza, género, edad, estado
marital, estado socioeconómico o duración de la enfermedad.
Sin embargo, el % de participantes que informó trabajar a tiempo completo, difería
según el tipo de etiología, trabajando significativamente menos personas a tiempo
completo con comienzo viral (9%) versus los con comienzo no-viral (26%). Este hallazgo
sugiere que las personas con etiología viral pueden estar más deterioradas que las con
etiología no-viral.
Los grupos también diferían respecto la presencia de personas que viven en su casa
con severa fatiga, extremo agotamiento o agotamiento durante más de 6 meses.
Significativamente más personas del grupo viral (24%) reportaron cohabitar con
personas con severa fatiga durante 6 meses o más que los miembros del grupo noviral (10%).
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Estos hallazgos demuestran que en el grupo viral, vivir cerca de otras personas con
enfermedad fatigante (posiblemente resultante de exposición viral) puede jugar un
papel en el comienzo o el mantenimiento de la enfermedad.
Subgrupos activados en etiologías SFC viral vs. no-viral
El grupo viral demostró significativas elevaciones en los siguientes subgrupos de tipo
Th1 respecto el grupo no-viral: % y nº de células CD4+ (11% y 20% respectivamente),
de las células CD2+CD26+ (9% y 16% respectivamente), de las células CD2+CD4+CD26+
(17% y 26%), de las células CD4+ CD26+ (17% y 26%); y los siguientes subgrupos tipo
Th2: células CD4+CD45RA+CD62L+ (52%).
De los restantes hallazgos significativos, el grupo no-viral demostró significativas
elevaciones en los siguientes subgrupos tipo Th1 con respecto al grupo viral: % de las
células CD8+ (-15%), de las células T-citotóxicas supresoras (CD3+8+) (-15%), y el % y el
nº de las células CD8+ CD45RA- CD62L (-18% y -28% respectivamente).
Patrones elevados
El grupo viral demostró un patrón de activación diferente del grupo no-viral: % y nº de
las células CD4+, % de las CD2+CD26+ y % de las células naíves Th2
(CD4+CD45RA+CD62L+).
Ambos grupos demostraron reducción fuera de rango de la citotoxicidad de las células
Natural Killer (CD3-CD56+) (reducida en 80.7% de la muestra total) y % de células B-1
(CD5+CD19+) (reducidas en 71.1% de la muestra total).
Además, ambos grupos demostraron un % elevado y fuera de rango de las
CD2+CD8+CD26+ (elevadas en 83.3%), % del subgrupo CD4 anchored Th1 memory
(CD4+CD45RA-CD62L-) (elevado en 71.9% de la muestra), % de las células CD8
anchored Th1 memory y naives (CD8+CD45RA-CD62L-, CD8+CD45RA+CD62L-)(elevadas
en 93.9% y 62.3%), % y nº de las células CD4 anchored Th2 memory (CD4+CD45RACD62L+)(elevadas en 95.6% y 62.3%), y el % de las células CD8 anchored Th2 memory y
naíves (CD8+CD45RA-CD62L+, CD8+CD45RA+ CD62L+) (elevadas en 97.4% y 93.0%).
CD4/CD8 Ratio
El CD4/ CD8 % pos ratio del grupo viral estaba dentro del rango normal, pero
acercándose al límite superior en comparación con el grupo no viral.
Se encontró una significativa diferencia entre ambos grupos en el % de las células CD4+
y CD4+/μl, (la etiología viral tenía recuentos fuera del rango normal) y se demostró un
incremento estadísticamente significativo del nº y el % de las células CD4+ en
comparación con el grupo de etiología no-viral (11% y 20% respectivamente).
También se observaron diferencias entre ambos grupos para el % de las células CD8+;
sin embargo las células CD4+ estaban dentro del rango normal. Una predominancia de
la actividad de las CD4+ sobre la de las CD8+ sugiere inflamación y incremento de la
reactividad inmune.
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Diferencias entre grupos en las subescalas del cuestionario SF-36.
Se observaron también significativas diferencias entre ambos grupos para las
puntuaciones de las subescalas para el Funcionamiento Físico y el Funcionamiento
Social del formulario SF-36, en el cual el grupo viral demostró más deterioro en ambas
mediciones que el grupo no-viral.
Discusión
El objetivo de este estudio fue determinar si había evidencia fenotípica de infección
viral anterior en personas con SFC.
Comparaciones entre ambos grupos demostraron en el grupo con comienzo viral un
patrón de incremento de expresión de marcador celular para células CD4 positivas y
incremento del % de las células CD2+CD26+ y Th2 naïve (CD4+CD45RA+CD62L+).
Estos hallazgos sugieren un incremento de la vigilancia inmune. En esta muestra, el
grupo viral demostró elevaciones en este subgrupo y en el de CD4+ y CD2+CD26+, lo
cual sugiere un proceso incesante de inflamación sistémica.
El incremento de la proliferación de las células CD4+ sugiere reactividad inmune e
inflamación.
En este estudio encontramos elevados recuentos del subgrupo CD2+CD26+ en el grupo
con etiología viral, y recuentos normales en el grupo no-viral, indicando una activación
del compartimento de linfocitos. La expresión anormal de este marcador también ha
sido asociada con el desarrollo de cáncer y otras enfermedades autoinmunes.
El grupo viral en comparación con el no-viral demostró significativas elevaciones en
varios subgrupos tipo Th1 y Th2.
También hay significativas diferencias entre ambos grupos donde los hallazgos en el
grupo no-viral indican tener una respuesta patogénica más fuerte en el grupo noviral, y al contrario, la posibilidad de una tendencia hacia una comprometida de
respuesta en el grupo viral. Esto indica una fuerte respuesta pro-inflamatoria en las
personas con comienzo no-viral cuando se compara con un grupo de respuesta más
Th2 en las personas con comienzo viral.
Ambos grupos demostraron reducciones en la citotoxicidad de las células Natural Killer
(CD3- 56+) y reducciones en el % de las células B-1 (CD5+ CD19+), de manera que la
actuación de estos parámetros no estaba dentro del rango normal y regulado a la baja.
Se espera que la reducida citotoxicidad afecte de manera adversa a la eficacia con la
que los sistemas inmunes innatos e adaptivos responden a virus y otros agentes
patogénicos, ya que las células NKs son conocidas mediadoras de ambos sistemas. En
pacientes con SFC puede haber un incremento susceptibilidad a la infección por
polisacáridos bacterianos que contienen antígenos a carbohidratos, como evidencian
las células B-1 reguladas a la baja con fenotipos CD5+ CD19+ en ambos grupos.
En esta muestra encontramos que la activación inmune era una característica común
en ambos grupos como evidenciada por hiperplasia, o un incremento de la
proliferación de varios subgrupos de linfocitos. Esta activación era más pronunciada en
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el grupo con etiología viral, que además demostró elevaciones en la proporción de
subgrupos de células CD4+, CD2+CD26+ y Th2 naïve (CD4+CD45RA+CD62L+).
Los hallazgos presentes apoyan la premisa que reducciones de la eficacia con las que
las células Natural Killer son capaces de eliminar células diana concomitante con
elevaciones en activados subgrupos de células T, puede contribuir al mantenimiento
de la inflamación y de la activación inmune.
Reducciones en el subgrupo CD5+CD19+ en ambos grupos también sugieren una
comprometida integridad del estómago/ tracto intestinal y un incremento de la
susceptibilidad a la infección bacteriana, lo cual puede contribuir al mantenimiento de
los síntomas.
Resumiendo nuestros hallazgos son compatibles con los datos que indican que la
infección viral latente está asociada con varios subgrupos de células-T memoria T. La
disminución de las células-T naïves es consistente con cambios inmunoscentes en los
cuales se cree que el repertorio de células-T está dominado por linajes de células-T
específicos de virus.
Viralmente iniciados efectores también pueden ser capaces de escapar a mecanismos
apoptósicos y finalmente diferenciar en células memoria. Es entonces aparente que la
exposición viral podría interactuar con características de predisposición genética para
obtener un curso de inflamación crónica en asociación con la supresión de selectos
subgrupos de células en personas con SFC. Esto entonces argumenta para un curso
diferencial en el desarrollo del SFC, contribuyendo la exposición viral al desarrollo de la
enfermedad en un subgrupo de personas.
Estos hallazgos demuestran la necesidad de un estudio continuado de la exposición
viral en personas con SFC; porque, aunque estas vías pueden no incluir a todos los
casos, es aparente que para un subgrupo significativo el comienzo viral es obvio.