Prácticas de investigación para estudiantes internacionales

Prácticas de investigación para estudiantes internacionales

PRÁCTICAS DE INVESTIGACIÓN PARA ESTUDIANTES INTERNACIONALES AVANZADOS
Laboratorio de Bioquímica y Biología Molecular - Centro de Investigación y Desarrollo en
Inmunología y Enfermedades Infecciosas:
“Desarrollo de una plataforma para la generación de vacunas orales”
El objetivo principal de la vacunación contra las enfermedades infecciosas es proporcionar
protección a través de la inducción de respuestas inmunes "apropiadas y eficaces". Sin
embargo, mientras que la inmunización parenteral habitual es generalmente eficaz en las
infecciones sistémicas, a menudo no logra establecer respuestas protectivas en las superficies
mucosas, donde los agentes infecciosos suelen iniciar la infección. Por lo tanto, la inmunización
mucosal es crucial para la prevención de enfermedades infecciosas. El objetivo principal de
este proyecto es desarrollar un sistema totalmente adaptable para la producción sencilla y
económica de vacunas orales. Este objetivo se basa en las siguientes premisas: (1) Giardia es
el único parásito protozoario capaces de colonizar el lumen del intestino delgado superior de
huéspedes vertebrados, donde la digestión de alimentos tiene lugar. En ese ambiente hostil,
Giardia está protegido por una capa densa que comprende Proteínas Variables de Superficie
(VSP), que cubren toda la superficie del parásito. Las VSPs poseen, la región N-terminal rica
en cisteína extracelular y un dominio C-terminal conservado que incluye una región
transmembrana y una cola citoplásmica corta. La porción extracelular de VSPs contiene
múltiples motivos CXXC, donde C es cisteína y X cualquier otro aminoácido, que hacen a las
VSPs altamente resistentes al pH, a la digestión por proteasas intestinales,a cambios de
temperatura, además de ser altamente inmunogénicas. (2) Por otra parte, es bien sabido que
las primeras vacunas exitosas fueron basadas en formulaciones del patógeno atenuados en
vivo o inactivado, es decir, "partículas" de origen natural. El desarrollo de vacunas compuestas
por partículas similares a virus (VLP) demuestra el potencial de estas partículas como
inmunógenos. Las VLPs pueden inducir respuestas inmunes amplias, incluyendo respuestas
de células T y B. VLP también puede ser explotado como plataformas para la presentación de
epítopes extraños sobre o en partículas quiméricas. Estas ventajas han hecho de las VLP
candidatas vacunales atractivas, varias de las cuales se encuentran actualmente en el
mercado. Sin embargo, las vacunas basadas en VLP sólo han sido administradas
parenteralmente, mostrando las mismas desventajas que cualquier otra vacuna administrada
mediante inyección. Nuestra hipótesis es que las vacunas orales eficaces pueden ser
generadas mediante la combinación de los beneficios de las VSPs de Giardia como agentes
protectores con las ventajas de VLPs como inmunógenos eficaces. Los resultados iniciales
utilizando VLP recubiertos de VSP que transportan antígenos del virus de la influenza
mostraron que esta vacuna de partículas favorece la captación y procesamiento de los
antígenos de la gripe en el intestino, lo que genera inmunidad protectora a nivel sistémico y
local en la mucosa.
Áreas de investigación
Biología molecular, inmunología, bioquímica.
Metodología y Equipamiento
El laboratorio de Bioquímica y Biología Molecular de la Facultad de Medicina de la UCC y del
Centro
de
Investigación
y
Desarrolloen
Inmunología
y
enfermedades
Infecciosas
(CIDIE/CONICET) posee: seis freezers (cuatro de -20° C y tres de -80° C), 8 heladeras, 3
tanques de nitrógeno líquido, 6 termocicladores dos de ellos con bloque doble, dos con
capacidad de gradiente de temperatura, un bloque reemplazable para estudios de PCR in situ,
y dos termocicladores para PCR en tiempo real (Real time PCR).Además, posee un
microscopio invertido de epifluorescencia Leica IRBE con la cámara de captura de imágenes
Hamamatsu ORCA ER II además de otros microscopios invertidos de rutina y dos microscopios
directos para los procedimientos de cultivo, un citómetro BD Accuri, un fermentador electrónico;
un equipo de ELISpot, 2 centrífugas de refrigeradas, 3 micro-centrífugas refrigeradas, un
equipo con cámara digital para el análisis de geles de electroforesis, 5 incubadoras a 37° C,
incluyendo 3 con atmósfera de CO2, tres gabinetes de flujo laminar verticales y uno horizontal,
dos centrífugas de mesa; 3 autoclaves, una de ellas eléctrica de mesada; 4 fuentes de
alimentación, aparatos de electroforesis, 2 balanzas, 4 trans-iluminadores (2 con luz ultravioleta
y 2 con luz blanca), una Speed Vac, un electroporador, un cross-linker a UV, varios baños de
agua, y los pequeños equipos necesarios (microcentrífuga pequeña de mesada, un sonicador,
pipetas, multicanales, etc.). Un cromatografo AKTA. También posee 3 sistemas de alojamiento
de los animales para el manejo de roedores libres de patógenos específicos. Cuenta además
con 14 computadoras con software original y acceso a Internet de banda ancha.
Científicos y colaboradores
Nuestros colaboradores con los cuales realizamos tareas conjuntas de investigación y
educativas están en Twincore, Hannover Medical School, Alemania (Dr. Tim Sparwasser, Dra.
Luciana Berod) y en INSERM/CNRS/UPMC París Francia (Dr. David Klatzmann)
Recursos Humanos
El grupo de investigación en este momento consiste en investigadores, estudiantes de
doctorado, investigadores posdoctorales y técnicos de investigación apoyados por el
CONICET.
Publicaciones recientes
- Disruption of antigenic variation proves crucial for effective parasite vaccine. Rivero, F.D.,
Saura, A. Prucca, C.G., Carranza, P.G., Torri, A., and Lujan, H.D. Nature Medicine 16, 551-556
(2010).
- Acanthamoeba sp. keratitis: first case confirmed by isolation and molecular typification in
Bahía Blanca, Buenos Aires Province, Argentina Gertiser ML, Giagante E, Sgattoni E, Basabe
N, Rivero F, Luján H, Occhionero M, Paniccia L, Visciarelli E, Costamagna SR. Rev Argent
Microbiol. 2010 Apr-Jun;42(2):122-5
- The biology Functional characterization of methionine sulfoxid reductase a from trypanosoma
spp. Arias DG, Cabeza MS, Erben ED, Carranza PG, Lujan HD, Tellez Iñon MT, Iglesias AA,
Guerrero SA. Free Radical Biology & Medicine. Enero 2011 1:50(1).
- Regulation of antigenic variation in Giardia lamblia. Prucca CG, Rivero FD, Luján HD. Annu
Rev Microbiol. 2011; 65:611-30. Review.
- Mechanisms of adaptation in the intestinal parasite Giardia lamblia. Luján HD. Essays
Biochem. 2011; 51:177-91 .
- Intestinal the ubiquitin-activating enzyme (e1) of the early- branchingeukaryote Giardia
intestinalis shows unusual proteolytic modifications and play important roles during encystation.
Niño CA, Prucca CG, Chaparro J, Luján HD, Waserman M. Acta Trop. 2012 Apr 4.
- Immunity to protozoan parasites. Lopes MF, Zamboni DS, Lujan HD, Rodrigues MM. J
Parasitol Res. 2012; 2012:250793. Epub 2012 May 3.
- Trying to get rid of protozoan parasites. Lujan HD. Curr Opin Microbiol. 2012 Aug;15(4):447-8.
Epub 2012 Jul 24.
- In silico analysis of trypanosomatids helicases. Gargantini PR, Lujan, HD, Pereira CA. FEMS
Microbiol Lett. 2012 Jul 27
Contacto
Dr. Hugo Daniel Luján
Centro de Investigación y Desarrollo en Inmunología y Enfermedades Infecciosas
Av. Armada Argentina 3555. CP X5016HDK Córdoba, Argentina
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Área de Cooperación Internacional e Intercambio Académico
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