Biopsia Muscular

CONGRESO EVELAM 2013
DICIEMBRE DE 2013
CANCÚN, Q.R.
BIOPSIA
MUSCULAR
Dr. Luis A. Ruano Calderón
Clínica Neurológica
Hospital General de Durango
Secretaria de Salud de Durango
Durango, México
BIOPSIA MUSCULAR
• Es uno de los procedimientos diagnósticos
más frecuentemente utilizado en la
evaluación de miopatias.
• La utilidad y campo diagnóstico varia de
36% a 69% de casos.
BIOPSIA MUSCULAR
• Estudio necesario para establecer diagnóstico definitivo en
miopatías
• Es indispensable que sea precedida por una historia clínica
completa, y estudios neurofisiológicos cuando sea necesario
• Poco útil en enfermedades de placa neuromuscular, salvo
síndromes miasténicos y en miotonias
• El estudio histopatológico puede ser complementado con estudios
bioquímicos o genéticos.
Diagnóstico de miopatias
Pacientes con diagnóstico de miopatía
Datos epidemiológicos
Historia Clínica
Examen físico detallado
EMG+CPK
BIOPSIA
MUSCULAR
Biopsia muscular
• Indicaciones.
– Presencia de síntomas negativos y/o
positivos.
– CPK elevada.
– EMG: patrón miopático.
– Enf. sistémica que involucra al músculo.
Biopsia muscular: utilidad
Inflamatorias
• Polimiositis
• Dermatomiositis
• Miositis por cuerpos de
inclusión
• Vasculitis
• Miofascitis
• Mialgia eosinofilia
• HIV
• HTLV-I
• Triquinosis
• Toxoplasma
• Cisticercosis /equinococosis
/tripanosomiasis.
No inflamatorias
• Distrofia muscular
• Mitocondrial
• MCI
• Miotónica proximal
• Congénita
• Metabólica.
Biopsia muscular: NO indicada
• Diagnóstico por neurofisiología.
– MG, trastornos miotónicos.
• Diagnóstico por estudio genético.
FSH
• Neuropatía periférica.
– Excepto en enfermedades sistémicas que produzca
neuropatía y miopatía.
Biopsia muscular
• Buena realización y preparación.
– Evita una 2a Bx.
• Conocer las indicaciones.
– Evita Biopsias innecesarias.
• EMG previa ayuda.
BIOPSIA MUSCULAR
• Selección del músculo a biopsiar:
- Enfermedad crónica  afección moderada
- Enfermedad aguda o subaguda  afección moderada
o severa
- Específicos: bíceps, deltoides, quadriceps
- Estudios de imagen: TAC, RM
- Evitar: EMG, inyecciones, trauma.
BIOPSIA MUSCULAR
BIOPSIA MUSCULAR
•
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•
•
•
Abierta
Invasiva
Costosa
Necesidad de infraestructura
Necesidad de personal entrenado
(procesamiento e interpretación)
BIOPSIA MUSCULAR
BIOPSIA MUSCULAR
BIOPSIA MUSCULAR
• Técnica abierta
• Proceso inmediato de montaje y
congelación
• Muestras para:
– Tinciones histológicas
– Bioquímica
– Estudios inmunogenéticos
– Parafina
– Microscopía electrónica
BIOPSIA MUSCULAR
• Técnica:
- Tinciones  cortes en frío (isopentano)
- Reacciones enzimáticas  cortes en frío
- Inmunohistoquímica  cortes en frío o parafina
- Estudios bioquímicos e inmunogenéticos  congelado
en N
- Microscopia electrónica  glutaraldheido
- Inflamación  parafina
BIOPSIA MUSCULAR
BIOPSIA MUSCULAR
Tinciones histológicas
H/E
TG
PAS
ORO
Biopsia muscular
• Lesiones morfológicas:
- modificación de tamaño de fibras
- aumento y/o centralización nuclear
- necrosis
- regeneración
BIOPSIA MUSCULAR
Datos a Valorar:
- Alteración del tamaño de las fibras: atrofia, hipertrofia
- Forma de las fibras: redondeadas, anguladas
- Centralización nuclear ( > 3% sugiere miopatía)
- Imagen de necrosis, fagocitosis, regeneración
- Cambios crónicos distróficos: fibrosis, infiltración grasa
- Presencia de vacuolas
- Depósitos anormales: glucógeno, lípidos, amiloide
- Infiltrados inflamatorios: tipo celular y localización
- Alteraciones de la arquitectura intrafibrilar (reacciones enzimáticas):
alteraciones mitocondriales, cuerpos centrales, fibras en diana, fibras borradas,
fibras lobuladas, cuerpos citoplasmáticos
- Predominio o atrofia selectiva de un tipo de fibras
Hematoxilina/eosina
Morfología general
Núcleo.- posición y número
Citoplasma
Tricrómico modificado
Morfología
Agregados
Mitocondrias
Agregados tubulates
Fibras rojas rasgadas
BIOPSIA MUSCULAR
Tinciones histológicas
H/E
Fibras hipertrofiadas
Distrofia muscular
H/E
Tamaño de las fibras (atrofia musculare espinal)
H/E
Vacuolas
Vacuolas bordeadas
H/E
Fibras en diana
Fibras anguladas
NEUROPATIA
H/E
Miofascitis
Polimiositis
H/E
Centralización nuclear
Necrosis de fibra
Tricrómico modificado
Normal
Acúmulos anormales
(Bastones)
Fibras rojas rasgadas
PAS
Cuerpos de Lafora
Rojo Oleoso (ORO)
Biopsia muscular
• Reacciones enzimáticas:
- diferenciación del tipo de fibras
- demostración de acúmulos anormales
intrafibrilares
- ausencia de reacción focal o completa
BIOPSIA MUSCULAR
Reacciones enzimáticas:
DPNH
SDH
DPNH
Refleja concentración de mitocondrias
Tipo de fibras (I.- obscuras / II.- claras)
SDH
Tiñe mitocondrias
MENADION
Tiñe túbulos
FOSFORILASA
Enzima metabólica
ATPasa
ATPasa 4.35
Tipo I.- obscuras
Tipo II.- claras
ATPasa 4.63
Tipo I.- obscuras
Tipo II.- claras
ATPasa 9.4
Tipo I.- claras
Tipo II.- obscuras
COX
Enzima mitocondrial
SDH
DPNH
fibras rojas rasgadas
(fibras azules rasgadas)
Central core
Lobuladas
En diana
ATPasa 9.4
Diferencia en tamaño por atrofia II
MIOPATIAS
• Congénitas:
- Centronuclear
- Central core
- Nemelínica
MIOPATIAS
• Metabólicas:
- Mitocondriales
- Lípidosis
- Glucogenopatías
MIOPATIAS
• Inflamatorias:
- Polimiositis
- Dermatomiositis
- Miositis por cuerpos
de inclusión
MIOPATIAS
• Distrofias:
- Cinturas
- FSH
- Miotónica
- Distales
BIOPSIA MUSCULAR
Distrofia
Mitocondriopatía
Inflamatoria
Inmunohistoquímica de proteínas
Estudios bioquímicos de cadena respiratoria
Inmunohistoquímica de células inflamatorias
BIOPSIA MUSCULAR
Distrofia de
cinturas
Inmunohistoquímica
de proteínas
musculares
BIOPSIA MUSCULAR
(Inmunohistoquímica)
BIOPSIA MUSCULAR
(Inmunohistoquímica)
Biopsia muscular: Inmunoensayos
comerciales.
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LG 2D
LG 2E
LG 2C
LG 2F
LG 2B
Miyoshi
LG 2A
Miofibrilar
Distrofia congénita
Emery-Dreifuss
LG 1B
a-sarcoglicano
b-sarcoglicano
g-sarcoglicano
d-sarcoglicano
Disferlina
Disferlina
Calpaina
Desmina
Merosina
Emerina
Laminina A/C
Biopsia muscular
• Estudios bioquímicos:
- deficiencia o ausencia de enzimas específicas
- cuantificación de complejos de cadena
respiratoria
- cuantificación de proteínas estructurales de la
fibra muscular.
BIOPSIA MUSCULAR
• Microscopia electrónica:
- características ultraestructurales
- NO siempre indicada
- Miopatías congénitas
- Enfermedades mitocondriales
- Apoyo: miositis por cuerpos de inclusión
BIOPSIA MUSCULAR
Microscopia electrónica
BIOPSIA MUSCULAR
Bastones
BIOPSIA MUSCULAR
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Utilidad diagnóstica
Según sospecha clínica
Indicación precisa
Toma adecuada
Proceso adecuado e inmediato
Panel de técnicas completo (mínimo
indispensable)
GRACIAS
[email protected]