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CT Almacenamiento y estabilidad Kit de colesterol total (Método CHOD-POD) Hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, si se almacena sin abrir entre 2 y 8 °C, protegido de la luz. Información para pedidos Nº de cat. Tamaño de envase TC0102 R 4 × 40 ml TC0103 R 6 × 40 ml TC0104 R 6×60 mL TC0105 R 4 × 250 ml Una vez abierto, los reactivos se mantienen estables durante 28 días si permanecen refrigerados en el analizador o un frigorífico. Evite la contaminación de los reactivos. No congele los reactivos. Absorbancia del blanco de reactivo La absorbancia del blanco del reactivo a 510 nm debe ser < 0,3 A. Finalidad de uso Pruebas in vitro para la determinación cuantitativa de la concentración de CT en suero y plasma en sistemas fotométricos. Resumen 1, 2, 3 El colesterol es un componente principal de la membrana celular y las lipoproteínas, siendo además precursor de la síntesis de hormonas esteroides y ácidos biliares. El colesterol es transportado en sangre por una lipoproteína de baja densidad. Materiales necesarios pero no incluidos 1. El calibrador y los controles que se indican a continuación. 2. Solución de 9 g/l de NaCl. 3. Equipos de laboratorio general. Recogida y preparación de muestras 1. dietas bajas en grasa. Puede utilizar suero, heparina o plasma EDTA como muestra. No se recomienda el uso de sangre entera y hemólisis. Utilice preferentemente El nivel del colesterol total de un paciente se utiliza en exámenes de diagnóstico precoz de ateroesclerosis y para controlar el efecto clínico de medicamentos o 4, 5 suero recién extraído. 2. Utilice los tubos o contenedores de recogida apropiados y siga las instrucciones del fabricante, evite el efecto de los materiales de los tubos u otros contenedores de recogida. Método 3. Método de colesterol oxidasa- peroxidasa (CHOD-POD) Centrifugue las muestras que contienen precipitados antes de realizar el ensayo. 4. Principio de la reacción Estabilidad: de 5 a 7 días entre 2 y 8 °C CHE Éster de colesterol + H2O 3 meses a -20 °C Colesterol + Ácido graso CHO Procedimiento del ensayo Δ4-colestenona + H2O2 Colesterol + O2 Blanco Muestra R 1.000 μl 1.000 μl Agua dest. 10 μl - Muestra - 10 μl POD 2H2O2 + 4-aminoantipirina + Fenol Quinoneimina + 4H2O Mediante la catálisis de CHE y CHO, se cataliza el éster de colesterol para obtener H2O2, que oxida la 4-aminoantipirina con fenol para formar una tintura Mezclar en profundidad a 37 °C y leer la absorbancia después de 10 minutos. de quinoneimina. El aumento de la absorbancia es directamente proporcional a ΔA = [muestra ΔA]- [blanco ΔA] la concentración de colesterol. En este documento se incluyen hojas de aplicación para los analizadores de la serie BS. Consulte el manual de funcionamiento correspondiente para obtener las Reactivos instrucciones de ensayo de cada analizador. Componentes y concentraciones R: Tampón de fosfato 100 mmol/l Fenol 5 mmol/l 4-aminoantipirina 0,3 mmol/l de NaCl para realizar la calibración de dos puntos. La trazabilidad del Colesterol esterasa > 150 KU/l calibrador múltiple se puede consultar en las instrucciones del mismo de la Colesterol oxidasa > 100 KU/l Peroxidasa Calibración 1. empresa Mindray. 2. 5 KU/l Conforme a los procedimientos de control de calidad. 1. Exclusivo para uso diagnóstico in vitro. 2. Tome las precauciones necesarias para la utilización de reactivos de laboratorio. Contiene conservantes. No ingerir. Evite el contacto con la piel y las membranas mucosas. 4. El desecho de todos los materiales se debe realizar conforme a las directrices locales. 5. Los usuarios profesionales que lo soliciten disponen de hojas de datos de seguridad de los materiales. Preparación del reactivo El reactivo simple está listo para su utilización. Frecuencia de calibración: Después de un cambio de lote de reactivos. Advertencias y precauciones 3. Se recomienda utilizar un calibrador humano múltiple de Mindray y 9 g/l Control de calidad Se deben analizar al menos dos niveles de material de control con cada lote de muestras. Además, estos controles se deben realizar con cada nueva calibración, cada nuevo cartucho de reactivo y después de los procedimientos de mantenimiento o solución de problemas específicos, como se detalla en el manual del sistema correspondiente. Se recomienda utilizar el de control de ensayo humano de Mindray para comprobar el rendimiento del procedimiento de medición; también se pueden utilizar otros materiales de control apropiados. Cada laboratorio debe establecer su propio esquema de control de calidad interno, así como los procedimientos de acciones correctivas, si los controles no se mantienen dentro de las tolerancias aceptables. 2011-02 V5.0 Español CT Página 1 de 2 N/P: 046-000322-00(5.0) CT Cálculo 1. El analizador calcula automáticamente la concentración de CT de cada muestra Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and apolipoproteins. En: Burtis CA, Ashwood ER, editores. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3ª después de la calibración. ed. Filadelfia: W.B Saunders Company; 1999. p. 809-61. Factor de conversión: mg/dl x 0,026= mmol/l 2. O bien: Muestra C = (muestra ΔA/calibración ΔA)× calibración C Recommendation of the Second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevention of coronary heart disease in clinical practice. Eur Heart J 1998; 19: 1434-503. Intervalos de referencia 3 3. Cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos de referencia en función de la población de pacientes. Los intervalos de referencia medidos a 37 °C que se Verlagsgesellschaft; 1998. 4. enumeran a continuación están tomados del material de referencia: Tipo de muestra Unidades SI Suero y plasma ≤ 5,2 mmol/l Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1ª ed. Frankfurt: TH-Books Pisani T, Gebski CP, Leary ET et al. Accurate Direct Determination of Lowdensity Lipoprotein Cholesterol Using an Immunoseparation Reagent and Enzymatic Cholesterol Assay. Arch Pathol Lab Med 1995; 119:1127. 5. Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3ª ed. Filadelfia, Pa: WB Saunders Company, 1995:130–131. 6. Características de rendimiento CLSI. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement A continuación, se ofrecen datos de rendimiento representativos obtenidos del Methods; Approved Guideline-Second Edition. Documento del CLSI EP5-A2 sistema de Mindray (analizadores de la serie BS y reactivo de CT de Mindray). Los ISBN 1-56238-542-9. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA resultados pueden variar si se utiliza un instrumento diferente, otro laboratorio o 19087 EE.UU., 2008. procedimiento manual. © 2011 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Reservados todos los derechos. Limitaciones e interferencia Se ha comprobado la interferencia de las siguientes sustancias mediante esta metodología. Criterio: Recuperación dentro del ± 10% del valor inicial. Sustancia Nivel de prueba Efecto observado Lipemia 500 mg/dl NSI* Hemoglobina 500 mg/dl NSI * NSI: Sin interferencia significativa (dentro de ± 10%) Intervalo de linealidad El sistema de Mindray proporciona los siguientes intervalo de linealidad: Unidades Tipo de muestra Unidades SI convencionales Suero y plasma de 3,85 a 769,23 mg/dl de 0,1 a 20,0 mmol/l Si el valor de la muestra supera 20,0 mmol/l, se debe diluir la muestra con una solución de 9 g/l de NaCl (p. ej., 1 + 1) y repetir el ensayo, y el resultado se debe multiplicar por 2. Sensibilidad analítica y límite de detección La concentración de CT más baja que se puede medir, distinta de cero, es 0,1 mmol/l con una fiabilidad del 99,7%. Precisión El rendimiento de la precisión obtenido mediante la recomendación EP5-A2 aprobada por el CLSI para el control del suero en ensayos se muestra en la siguiente tabla6. U: mmol/l Nivel II Tipo de imprecisión Media En secuencia Nivel III DE CV% 0,112 2,606 Media DE CV% 0,038 0,524 Entre 0,014 0,324 0,016 0,219 Entre días 0,006 0,142 0,033 0,446 En dispositivo 0,113 2,630 0,053 0,722 secuencias 4,3 7,282 Comparación de métodos En una comparación entre el sistema de Mindray (analizadores de la serie BS de Mindray y reactivo de CT de Mindray) (y) y el sistema Hitachi/Roche (CT de Hitachi /Roche) (x) con 40 muestras se obtuvo la siguiente correlación (mmol/l): y=0.9872x+0.0721, R2 = 0.999. Los detalles de los experimentos de comparación se encuentran a disposición de quien así lo solicite. Referencias 2011-02 V5.0 Español CT Página 2 de 2 N/P: 046-000322-00(5.0)