microbiología Rápida

Transcripción

microbiología Rápida
MICROORGANISMOS DETECTABLES:
Detección de microorganismos mediante medida indirecta de la
producción de CO2.
Bacterias Gram Negativas
Cuantificación de esporoformadores aeróbicos.
Control de Esterilidad.
Cuantificación de Enterobacterias.
Cuantificación de Coliformes y E.coli.
Cuantificación de Enteroccocos.
Detección de Salmonella.
Detección de Staphylococcus aureus.
Detección de Listeria.
Cuantificación de mohos y levaduras.
Cuantificación de Bacillus cereus.
Cuantificación de Clostridium
Cuantificación de Clostridium perfringens.
APLICACIONES GENERALES:
Enumeración TVC.
Screening de patógenos.
Test de esterilidad.
Control de Puntos Críticos de Superficies ( HCCP).
Control medioambiental.
Ensayo de eficacia de conservantes.
Test de inhibición.
Evaluación de procesos de esterilización.
Estudios de inactivación.
Screening y caracterización de agentes antimicrobianos.
Ensayos de toxicidad y mutagenicidad.
Ensayos respiración de suelos ( biomasa).
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APLICACIONES
SISTEMA BAC-TRAC
APLICACIONES BAC TRAC
PRODUCTOS CÁRNICOS:
Actividad microbiana total.
Detección de coliformes.
Detección de enterobacterias.
Detección de Listeria.
Detección de Stap. aureus.
LECHE Y LACTEOS:
Cuantificación de carga microbiana total.
Detección de coliformes.
Presencia/Ausencia de Enterobacterias en leche en polvo.
Contaminación de Gram (-) en leche final.
Contaminación de bacterias psycotrophicas.
Medida de actividad de cultivos iniciales para postres.
Cuantificación de carga microbiana total en leche cruda.
HELADOS:
Cuantificación de carga microbiana total.
HUEVOS Y DERIVADOS DELHUEVO:
Cuantificación de carga microbiana total en derivados líquidos y
congelados.
PESCADOS , DERIVADOS Y MARISCOS:
Detección de Salmonella en productos pesqueros.
CACAOS Y PASTAS:
Detección de formadores de esporas en chocolates y pastas.
ZUMOS DE FRUTAS, VEGETALES Y ESPECIES:
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APLICACIONES ESPECÍFICAS:
Cuantificación de TVC en zumos de frutas.
Cuantificación de mohos y levaduras en zumos de frutas.
Cuantificación de TVC, lactobacilos y levaduras en concentrados de
tomate.
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APLICACIONES BAC TRAC
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AGUAS :
Cuantificación de coliformes en aguas de bebida usando combinación de
filtración en membrana e impedancia.
Detección de Salmonella.
CEREALES:
Detección de lactobacilos esporulantes.
VINO:
Cuantificación de levaduras.
Cuantificación de microorganismos aeróbicos.
Ensayos de masa microbiana activa en el vino.
ALIMENTOS ANIMALES:
Detección de Salmonella en alimentos para animales.
PRODUCTOS COSMETICOS Y FARMACEUTICOS:
Test de preservantes.
Test de esterilidad en cosméticos.
Cuantificación de TVC, mohos y levaduras.
SUELOS:
Determinación Actividad Microbiana en suelos.
HIGIENE:
Control de esterilidad de plantas de proceso.
Enumeración de TVC en torundas de algodón.
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APLICACIONES BAC TRAC
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FUNDAMENTO TÉCNICO Y VALIDACIONES OFICIALES
DEL SISTEMA DE MICROBIOLOGÍA RÁPIDA
BacTrac
La detección de microorganismos por impedancia eléctrica del sistema BacTrac
rra
ac
c se
se
fundamenta en la medida de su actividad metabólica. De este modo, mucho antes
nte
nt
es
s de
de
que una colonia pueda ser visible en un medio de cultivo sólido, es posible detectar
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c
ar la
la
actividad de los microorganismos.
Existen dos métodos diferentes de detectar microorganismos por Impedancia: Directa
rre
ec
ctta
ao
Indirecta.
IMPEDANCIA DIRECTA:
La detección de microorganismos por Impedancia Directa se basa
bas
basa
a en
en
la capacidad de los microorganismos de metabolizar las moléculas
del
lla
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s de
dell
medio de cultivo, para crecer. Los nutrientes del medio de cultivo
cu
c
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vo
o
(glúcidos, proteínas...) son moléculas eléctricamente neutras o están
es
e
sttá
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n
débilmente ionizadas. Estas moléculas son metabolizadas por
or
or los
los
microorganismos en crecimiento, y transformadas en moléculas
as
a
s más
má
más
s
pequeñas, con polaridad y/o carga eléctrica, como por ejemplo
o ácido
ác
áciid
do
o
láctico, acético, cítrico, aminoácidos...
El efecto final de esta actividad metabólica es un incremento
o de
de la
nte
nt
e dos
do
dos
s
conductividad eléctrica del medio de cultivo, medible mediante
electrodos sumergidos en el medio de cultivo.
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FUNDAMENTO TECNICO Y VALIDACIONES
ES
ES
medio cultivo
_
+
+
+
+
+ _
+ resistencia
-
+
De este modo se puede establecer una correlación
el
ela
ac
ciió
ón
n
entre cambios en la impedancia eléctrica
a y la
concentración inicial de microorganismos en
en la
la
muestra: cambios rápidos de la conductividad
idad del
de
d
ell
medio de cultivo son debidos a elevadas
ev
e
vada
adas
s
poblaciones microbianas, y lentos, a una menor
me
men
no
orr
carga microbiana inicial.
Del mismo modo la no variación de la impedancia
dan
da
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cia
ia
del medio de cultivo a lo largo del tiempo es
es una
una
indicación de ausencia de microorganismos
niis
n
sm
mos
os
viables.
capacitancia
fig.1 Esquema del movimiento de cargas en un medio de
cultivo al paso de la corriente eléctrica enter dos polos
opuestos.
IMPEDANCIA INDIRECTA:
Algunos microorganismos, como los mohos y levaduras, de crecimiento
lento, pueden ser detectados más rápidamente registrando la
producción de CO2 debida a su metabolismo.
Para registrar la producción de CO2 la muestra se inocula en un vial junto
con el medio de cultivo. Este vial se introduce a su vez en una celdilla que
contiene una solución de KOH (potasa).
El CO2 generado por los microorganismos se irá disolviendo en la potasa,
modificando su impedancia.
La reacción química entre el CO2 y el KOH se basa en la siguiente reacción
química:
CO2 + 2 OH- → CO32- + H2O
El BacTrac registra en continuo los cambios producidos generando una
curva que permite cuantificar los microorganismo presentes en función
de la generación de CO2.
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Fuente eléctrica
FUNDAMENTO TECNICO Y VALIDACIONES
ES
ES
La típica curva de medida del BacTrac puede dividirse en 3 fases:
• Fase inicial o de adaptación.
• Fase exponencial.
• Fase estacionaria
Fase Inicial
Fase Estacionaria
Threshold
Fase Exponencial
h
Rango para análisis
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VISUALIZACION DE DATOS:
Durante la fase de adaptación o inicial, los microorganismos adaptan su metabolismo
lis
lism
mo
o a
los substratos presentes en el caldo nutriente, y su tasa de crecimiento es muy baja.
jja
a..
A partir de ese momento comienza la fase de crecimiento exponencial, en la que
qu
que
e se
se
produce la detección de la señal por el equipo BacTrac
Finalmente, como consecuencia de la limitación de nutrientes o debido a la acumulación
ulla
u
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ciió
ón
n
de productos tóxicos del metabolismo, el crecimiento exponencial cesa dando lugar
garr a un
ga
un
periodo de transición denominado fase estacionaria, cesando el metabolismo
mo
mo de
de
generación de nuevos metabolitos, motivo por el cual la curva avanza paralela al eje
ej
eje
e del
de
dell
tiempo.
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FUNDAMENTO TECNICO Y VALIDACIONES
ES
ES
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VENTAJAS DEL ANÁLISIS POR IMPEDANCIA:
La detección de contaminación microbiana por impedancia elimina la necesidad
dad de
de
dilución o separación de los microorganismos, reduciendo considerablemente el tiempo
ttiie
em
mp
po
o
de preparación de la muestra.
nd
n
da
a de
de
Los caldos utilizados en el análisis por impedancia responden mejor a la demanda
proliferación de los microorganismos que los medios semisólidos de agar. La tasa
as
a
sa
a de
de
ttiie
em
mp
po
o
proliferación se acelera y el tiempo de análisis se reduce. Una reducción del tiempo
mayor se logra gracias a la sensibilidad de la detección eléctrica.
La detección de la señal eléctrica debida a contaminación microbiana es determinada
na
nada
da a
cargas microbianas muy bajas, en comparación con el método de placa, donde
nd
nde
e se
se
requiere una proliferación del orden de 108 - 109 CFU/ml para poder detectar una colonia
col
colo
on
niia
a
visible. La detección por impedancia es del orden de 1000 veces más sensible que
ue
u
e por
po
porr
placa.
En general, el tiempo total de análisis por impedancia no excede de 24 horas. En
En la
la
mayor parte de los casos los resultados se obtienen sólo en unas pocas horas, con
con la
la
ventaja de que los resultados se obtienen más rápido cuanto mayor es la contaminación
na
nac
ciió
ón
n
de la muestra.
Junto con la simplificación y automatización de la documentación, las ventajas
del
as
a
s de
d
ell
análisis por impedancia se pueden resumir de la siguiente forma:
•
•
•
•
•
Automatización de un proceso basado en la técnica más contrastada:
stta
s
ad
da
a::
Microbiología Clásica
Significante reducción del tiempo de detección
Simplificación en la preparación de la muestra para determinaciones
ac
aciio
on
ne
es
s
cuantitativas.
Reducción de materiales y tiempo de trabajo.
Certificación y Validación en Normas Oficiales DIN y AFNOR:
FN
F
NO
OR:
R:
Adjuntamos las Normas Oficiales y Validaciones que amparan al sistema
iis
stte
em
ma
a
BacTrac:
France
AFNOR, NF V08-105
for the use of impedance technology in the analysis of food
and animal feeds
AFNOR NF V08-106
impedance detection of E.coli in seafood
AFNOR Validation
Impedance method for the detection of Enterobacteriaceae in dairy
products, according to ISO 16140
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FUNDAMENTO TECNICO Y VALIDACIONES
ES
ES
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Germany
DIN Standards and $35 LMBG official method for foods
DIN 10115 General Impedance Standard, §35 LMBG:
L00.00-53
DIN 10120 Salmonella Standard, §35 LMBG: L00.00-67
United Kingdom
The processed Animal Protein Order 1989, Salmonella in animal
feeding stuffs
Austria
ÖNORM-DIN 10115
General Impedance Standard, part of the official Codex for
testing of foods
C.I.S.
GHOSSTANDARD
STATE SANITARY SURVEILLANCE ORGANISATION,
approved method
•
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Generación automática de documentación no manipulable
FUNDAMENTO TECNICO Y VALIDACIONES
ES
ES
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SISTEMA DE MONITORIZACION EN TIEMPO REAL DE LA
CONTAMINACION MICROBIANO EN PRODUCTOS
ALIMENTARIOS
BAC-TRAC
El sistema determinación rápida de carga microbiana BacTrac, consta de un bloque
incubador termostatizado, celdillas reutilizables de medida y paquete informático.
El sistema completo permite el recuento de microorganismos (Bacterias
Bacterias Aerobicas
Totales, Mohos y Levaduras, Entrobacterias, Enterobacter sakazakii
(Cronobacter), Coliformes, E. coli, Salmonella, Listeria, S. aureus, DEnterococcos, Pseudomonas aeruginosa, Clostridia, Clostridium perfringens,
Bacillus cereus, Bacterias Termorresistentes, Psicrófilos, Bacterias Lácticas,
etc) en muestras Alimentarias, así como test de Esterilidad, de una forma rápida y
sencilla.
El sistema único BacTrac, se fundamenta en el registro en continuo del crecimiento
de los microorganismos de la muestra, lo que permite una rápida detección
microbiana, especialmente más rápida cuanto más contaminada está.
El sistema microbiológico BacTrac está Validado por las Normas Oficiales AFNOR y
DIN para el Recuento de microorganismos en matrices alimentarias y detección de
contaminación con Salmonella, así como Validación AFNOR según ISO 16140 para
Recuento de Enterobacter sakazakii (Cronobacter) en Leche y Leches materno
infantiles, E. coli en marisco, así como de D-Enterococcos y E, coli en Aguas.
Es el único sistema de microbiología Rápida disponible, capaz de detectar
Patógenos, Termorresistentes, Bacterias anaeróbicas y Levaduras en menos de
24 horas!!!
• Bloque incubador capaz de realizar simultáneamente
21 muestras de 10ml.
• Ordenador Personal integrado
• Métodos de trabajo:
∗ Bacterias Aerobicas Totales
∗ Mohos y Levaduras
∗ Entrobacterias
∗ Enterobacter sakazakii (Cronobacter)
∗ Coliformes
∗ E. coli
∗ Salmonella
∗ S. aureus
∗ D-Enterococcos
∗ Pseudomonas aeruginosa
∗ Clostridia
∗ Clostridium perfringens
∗ Bacillus cereus
∗ Bacterias Termorresistentes
∗ Psicrófilos
∗ Bacterias Lácticas
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MICROTRAC 4200
• Incluye dos “software”, Bac-Trac y Bac-assist, ambos basados en SO Windows.
∗ BacTrac: Control en tiempo real del Equipo.
∗ BacAssist: Análisis de muestras ya realizadas y guardadas en PC.
• Visualización de resultados. Ofrece:
∗
∗
∗
∗
Gráficas de crecimiento microbiano
Resultado de contaminado/estéril en muestra directa o filtrada.
Número de CFU en la muestra original.
Análisis de muestras ya evaluadas para informes de Históricos.
• Posibilidad de ampliación mediante cambio por un sistema BacTrac 4300 de 64
muestras y doble bloque (para incubación simultánea a dos temperaturas
diferentes) descontando íntegramente el valor del MicroTrac. Esta oferta
solamente es válida durante el primer año de adquisición del MicroTrac
• Unidad de estabilización eléctrica Salicru SPS 1500 TOP
• Curso teórico-práctico de formación en el manejo del equipo en su laboratorio de
aplicaciones
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BACTRAC 4300
• Bloque incubador capaz de realizar 64 muestras de 10ml divididas en dos
bloques de 32 muestras para dos temperaturas diferentes.
• Dos Temperaturas de Incubación: especial para detección de Patógenos y
Levaduras Simultáneamente.
• Ordenador (PC) con Sistema Operativo “Windows“ (CD-ROM, Monitor, Teclado,
Ratón e Impresora Color) incluyendo “software” Bac-Trac y Bac-assist basados
en “Windows”.
• Métodos de trabajo:
∗
∗
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∗
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∗
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∗
∗
∗
∗
∗
∗
∗
Bacterias Aerobicas Totales
Mohos y Levaduras
Entrobacterias
Enterobacter sakazakii (Cronobacter)
Coliformes
E. coli
Salmonella
Listeria
S. aureus
D-Enterococcos
Pseudomonas aeruginosa
Clostridia
Clostridium perfringens
Bacillus cereus
Bacterias Termorresistentes
Psicrófilos
Bacterias Lácticas
∗
∗
∗
∗
Gráficas de crecimiento microbiano
Resultado de contaminado/estéril en muestra directa o filtrada.
Número de CFU en la muestra original.
Análisis de muestras ya evaluadas para informes de Históricos
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• Visualización de resultados:
• Diseño Modular:: Posibilidad de ampliación conectando hasta doce bloques
conjuntamente.
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aplicaciones

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