LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS

Transcripción

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS
TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
Dra. MARIA ANTONIA MALAJOVICH
Coordinadora de Biotecnología
Instituto de Tecnologia ORT de Rio de Janeiro (Brasil)
Diretora Científica de la ANBIO (Associação Nacional de Biossegurança, Brasil)
ORGANIZACIÓN DEL TEXTO
PREOCUPACIÓN POR LA SEGURIDAD Y CULTURA DE SEGURIDAD
RIESGO DE ACCIDENTES
RESPONSABILIDAD DEL PROFESOR
SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE BIOLOGÍA
AMBIENTE DEL LABORATORIO
SALIDAS DE CAMPO
EXPERIMENTOS CON SERES VIVOS
Plantas
Animales
Tejidos y fluidos
SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA
MICROORGANISMOS PARA ACTIVIDADES PRÁCTICAS
ACTIVIDADES POSIBLES EN CADA NIVEL DE ENSEÑANZA
Enseñanza Infantil y Fundamental 1
Enseñanza Fundamental 2 y Media
Enseñanza Media (Técnica), Terciaria, Graduación Universitaria
NORMAS DE TRABAJO STANDARD
ASPECTOS ESPECÍFICOS LIGADOS A LA ENSEÑANZA DE BIOTECNOLOGÍA
A TRABAJAR CON PATÓGENOS, TAMBIÉN SE ENSEÑA.
PASAR DE NB 1 A UN NB 2 NO ES TAN SIMPLE
CULTIVOS DE TEJIDOS
CONSIDERACIONES FINALES
BIBLIOGRAFÍA
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
2
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
PREOCUPACIÓN POR LA SEGURIDAD Y CULTURA DE SEGURIDAD
Insertas en la sociedad a través de la imposición de normas y reglamentaciones,
las medidas de seguridad buscan la protección de la salud del individuo, del grupo,
de la comunidad y del ambiente. Circunscriptas a problemas bien definidos, dichas
medidas solo estarán incluidas dentro de nuestro patrimonio cultural cuando estén
presentes en los modelos de enseñanza, como parte del sistema educativo.
RIESGO DE ACCIDENTES
¿Cuál es el número real de accidentes en el laboratorio de enseñanza? Se sabe
que está relacionado con el número de alumnos en el laboratorio y la disciplina del
aula (ruido, risas, conversaciones fuera del tema). El riesgo aumenta con la
improvisación y con la falta de reflexión sobre el desarrollo de la secuencia de
acciones descriptas en el protocolo.
Todos los manuales de actividades contienen largas listas de recomendaciones que
dependen no sólo del buen sentido, sino de la experiencia personal del docente.
Actitudes medianamente rígidas pueden parecer contradictorias con las tendencias
educativas modernas, donde el alumno es estimulado a construir el conocimiento
a partir de su propia experiencia. El abandono de las normas también puede ocurrir
por rebeldía de los alumnos o por dificultad del profesor en asumir la autoridad.
Lamentablemente, tanto el exceso como la falta de ponderación terminan sirviendo
como disculpa para limitar el acceso de los alumnos a las actividades prácticas.
RESPONSABILIDAD DEL PROFESOR
La construcción de una cultura de seguridad no puede estar limitada a dar una
clase al inicio del año. Antes del inicio de cualquier actividad dentro del laboratorio,
el Profesor debe instruir a los alumnos acerca de posibles riesgos. La supervisión
de la actividad debe incluir conductas tales como no dejar a los alumnos solos en
el laboratorio, no permitir la entrada a los alumnos una vez iniciado el trabajo, etc.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
3
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
En muchos centros educativos, la responsabilidad del Profesor abarca también la
elección de las actividades experimentales y su adaptación a condiciones locales,
que es donde surgen las preguntas fundamentales.
¿La actividad
propuesta
coloca a los participantes en peligro? ¿La actividad propuesta perjudica a la
comunidad o al medio ambiente? La respuesta permite iniciar acciones para
prevenir y minimizar los riesgos, incluso sabiendo que el riesgo 0 no existe, ni en
la vida cotidiana ni en la situación de enseñanza.
SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE BIOLOGÍA
La comprensión del mundo natural se construye progresivamente, a lo largo de la
Enseñanza Fundamental y Media, mediante una aproximación concreta a los
fenómenos y objetos naturales. Las actividades prácticas son indispensables
porque además de motivar a los alumnos, el “aprender haciendo” estimula su
curiosidad sobre el mundo que los rodea.
Un establecimiento educativo que quiera estimular las actividades prácticas tendrá
que asegurar al Profesor una carga horaria que permita la organización y el
acompañamiento de los experimentos, un presupuesto adecuado, una asistencia
técnica compatible con el objetivo y grupos poco numerosos.
Actividades como observar, medir, experimentar y construir modelos son
realizadas en el aula de clases, en el laboratorio o en el exterior de la escuela, en
condiciones que deben ser analizadas cuidadosamente. El reconocimiento y la
evaluación de los riesgos permite al Profesor seleccionar las actividades y
desarrollarlas con seguridad.
AMBIENTE DEL LABORATORIO
El laboratorio de Biología debe estar instalado en un ambiente bien ventilado y
contar con piletas, agua, gas y electricidad. Debe contar con suficiente espacio
para el crecimiento de especímenes vivos para el estudio en las aulas.
Si en el mismo laboratorio se desarrollan actividades de química, se debe preveer
la instalación de una ducha y de un lava-ojos en el mismo laboratorio o bien cerca,
en un lugar al que se llegue rápidamente (20 segundos).
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
4
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
El alumno debe estar informado acerca de los riesgos inherentes a la manipulación
de algunas sustancias químicas (inflamabilidad, reactividad, toxicidad, corrosión)
así como de su responsabilidad en relación con los desechos.
Obsérvese que en Internet existen manuales excelentes sobre seguridad en el
laboratorio de Química, como el School Chemistry, Laboratory Safe Guide del
National Institute for Occupational Safety and Health.
Se discute si el laboratorio debería estar abierto a profesores y alumnos fuera del
horario de clase. Se admite como respuesta que eso depende de la presencia de
un responsable.
SALIDAS DE CAMPO
La persona responsable debe identificar y excluir las actividades que presenten
riesgos, organizar actividades compatibles con las aptitudes físicas de los alumnos
y disponer de teléfonos de auxilio. También debe estar familiarizado con las plantas
y animales peligrosos del área y tener alguna formación en primeros auxilios.
Ni el trayecto, ni el horario pactado deben alterarse a menos que surja algún
imprevisto que justifique los cambios, recomendándose conservar la calma frente
a cualquier situación inesperada.
Las salidas de campo deben respetar la fauna, la flora y los ambientes frágiles. No
es necesario tomar muestras ni retirar especímenes de la naturaleza. En el
ambiente educativo, las colectas son actualmente reemplazadas por fotografías,
con resultados excelentes. Algunas de las recomendaciones de Gerald Durrell al
naturalista amateur continúan vigentes:
1. En su búsqueda por una especie, no perturbe todos los sitios potenciales
habitables. Por ejemplo, no revise todas las hierbas toras en descomposición en
un bosque, ni investigue todos los huecos de los árboles.
2. No grite ni haga ruido innecesario. El ruido ahuyenta a los animales.
3. Deje las cosas como las encontró: piedras que haya tomado del lugar o hierbas
que haya recogido de un lago.
4. No deje basura en el campo, principalmente en los manantiales.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
5
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
5. Tenga cuidado con no provocar un incendio. Todo el año, vastas áreas de bosque
y selvas se pierden por la falta de cuidado por parte de las personas que realizan
picnics o campamentos.
6. No comente a cualquiera donde vio algo de interés. Recuerde que un secreto
del que muchos tienen conocimiento ya no es más un secreto. Coméntelo solo a
las personas que respetarán el sigilo de la información.
EXPERIMENTOS CON SERES VIVOS
Plantas
En los experimentos con seres vivos, las plantas son la mejor opción. De todos
modos, deben evitarse aquellas que son tóxicas y alertar a los alumnos en relación
con las semillas comerciales que son tratadas con pesticidas.
Los hongos, esporas y polen pueden provocar alergias, de modo que se debe evitar
o reducir su diseminación por el aire.
Animales
En la Enseñanza Fundamental la crianza de animales es una forma de estimular la
observación y la educación para el respecto de la vida en todas sus formas. Se
recomienda que la crianza se limite a animales invertebrados que no presenten
ningún peligro. Algunos invertebrados permiten estudios de comportamiento
relacionados con la alimentación (tenebrios) y la reproducción (drosófilas).
Criados en un espacio que reproduzca su ambiente natural, los animales deben
recibir los cuidados adecuados (agua y alimento, condiciones de temperatura,
iluminación) también en feriados, vacaciones escolares y recesos.
Los experimentos con animales van de la observación a la disecación. ¿Llevan al
conocimiento de la Biología? ¿Son apropiados para la clase y para la edad de los
alumnos? Estos aspectos deben ser analizados cuidadosamente.
Francia autoriza la experimentación en invertebrados y formas embrionarias de
vertebrados ovíparos. También lo permite cuando se trata de observaciones que
no provoquen ningún sufrimiento ni daño. Se considera una falta grave matar a
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
6
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
un animal frente a los alumnos para la disección.
La disección se debe limitar a los órganos (corazón) o animales ya muertos (peces,
mariscos), comprados en establecimientos comerciales. Actualmente, hay mucho
material en la web para sustituir las disecciones.
Tejidos y fluidos corporales
No presentan riesgos los tejidos vegetales, la carne o derivados de la carne
obtenidos
en
restaurantes
o
comercios
de
alimentos,
cabellos,
dientes
(esterilizados previamente), tejidos fosilizados o especímenes arqueológicos y
preparados histológicos (tejidos fijados).
Las muestras de fluidos y secreciones humanas incluyen sangre, células de la
mejilla, heces, saliva, moco, semen, sudor y orina. Tanto las muestras como las
células extraídas de esas muestras pueden transmitir enfermedades. Por ser
potencialmente infecciosas deben ser sustituidas por otros materiales o por otras
actividades virtuales.
La sangre es especialmente peligrosa ya que tanto el contacto directo como
indirecto puede transmitir patógenos como el HBV (virus de la hepatitis B) y el HIV
(virus de la inmunodeficiencia humana). Se debe excluir toda manipulación de
sangre en la escuela, a menos de obtener una muestra segura, esto es que haya
pasado por todos los controles habituales, en un centro especializado.
En relación con el uso del microscopio, nunca usar luz solar como fuente de
iluminación y evitar el acceso a los estudiantes con infecciones oculares. Antes de
usar un colorante, se debe verificar su toxicidad.
MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA
La renovación de los programas de enseñanza de Biología mediante la introducción
de tópicos de Biotecnología nos exige repensar el trabajo experimental, una
actividad fundamental para la compresión y el dominio de la tecnología.
Consideramos que dentro de esta área específica, la formación de una cultura de
la seguridad debe comenzar cuanto antes, en los primeros niveles de enseñanza,
a lo largo del camino de la especialización los riesgos irán en aumento.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
7
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
MICROORGANISMOS PARA ACTIVIDADES PRÁCTICAS
La introducción de actividades prácticas con microorganismos es cada vez más
frecuente en los cursos de Biología en la Enseñanza Fundamental y Media. Existen
diversas listas de microorganismos, elaborados por instituciones de tradición y
prestigio, o por sociedades científicas que pueden ser utilizadas en actividades
escolares (MISAC, ASE, NABT). Estas listas, disponibles en Internet, indican
algunas aplicaciones posibles y aportan información sobre el cultivo y el
mantenimiento de los linajes.
Los microorganismos están clasificaciones en grupos de riesgo, siendo estas
categorías usadas (en países de la Unión Europea, WHO) como parte de la
validación que permite determinar el nivel de bioseguridad apropiado ( NB1, NB2,
NB3, NB4). Un nivel de bioseguridad es definido por una combinación de prácticas
y procedimientos de laboratorio, equipamiento de seguridad (barreras primarias)
e instalaciones de laboratorio (barreras secundarias).
Los microorganismos ideales para la enseñanza son los clasificados dentro del
Grupo de riesgo 1, nivel de bioseguridad NB1. Se trata de microorganismos que
hasta el momento no causan enfermedades para el hombre (bajo riesgo individual
y colectivo) y que no representan riesgos para el ambiente (Lactobacillus,
Lactococcus, Saccharomyces, varias especies de Bacillus, cepas no patogénicas de
Escherichia coli, etc.).
Los microorganismos “seguros” entran y salen de las listas divulgadas por las
autoridades, siendo aconsejable que el Profesor se mantenga actualizado. El uso
de Serratia marcescens está actualmente desaconsejado por haber sido causa de
algunas infecciones hospitalarias. Algunas especies de Aspergillus y de Penicillium
no son más consideradas peligrosas siempre que se respeten las buenas prácticas.
Se discute el cultivo de microorganismos ambientales, aceptable en placa cerrada
(recuento de organismos o de colonias), pero que debería ser objeto de mayores
cuidados, si fuera abierta o repicada, requiriendo el uso obligatorio de guardapolvo
(delantal) y lentes de protección, en gabinetes de inoculación.
Obsérvese que los microorganismos considerados seguros no presentan riesgos
para las personas sanas cuando se mantienen las prácticas de laboratorio
adecuadas, pero pueden ser peligrosos para las personas con baja inmunidad.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
8
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
Dentro del grupo de riesgo 1, hay microorganismos y actividades adaptados a cada
franja etaria y nivel de aprendizaje (Básico, Fundamental, Medio, Técnico,
Graduado Superior).
ACTIVIDADES POSIBLES EN CADA NIVEL DE ENSEÑANZA
Enseñanza Infantil y Fundamental 1
Incluye alumnos menores de 11 años y docentes sin ningún entrenamiento
especial.
Las actividades prácticas involucran microorganismos que entran en la elaboración
y composición de alimentos humanos, y aquellos que crecen naturalmente en
material vegetal en descomposición.
El cultivo es realizado en las sustancias en las que esos microorganismos crecen
naturalmente, tales como pan, vino, frutas, vegetales, leche, queso, yogurt,
hierbas, césped, etc. Los cultivos se incuban a temperatura ambiente, salvo en el
caso de la preparación de yogurt que ocurre a 43 ºC, utilizando como starter un
producto comercial con lactobacilos.
Enseñanza Fundamental y Media
Incluye alumnos entre 11 y 16 años y Profesores de Ciencias con algún
entrenamiento específico (Biología, Física, Química) y, eventualmente, la
supervisión de algún profesor de Biología.
Los agentes biológicos posibles son microorganismos comerciales provenientes de
colecciones de cultivos o con requisitos particulares (salinidad, pH, temperatura).
Microorganismos del ambiente, exceptuando los del cuarto de baño, pueden ser
cultivados. En relación con la superficie corporal, el cultivo estará limitado a los
microorganismos de las manos.
Los medios de cultivo admiten en la composición agar y nutrientes, excluyendo
aquellos que seleccionan microorganismos potencialmente patógenos para el
hombre (agar sangre, agar Mc Conkey).
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
9
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
Los cultivos se incuban a 30ºC, una temperatura en que los microorganismos
permitidos crecen bien. Las excepciones son las bacterias lácticas del yogurt
(43ºC, starter), Streptococcus thermophilus (50ºC), Bacillus stearothermophilus
(60ºC) y líneas debilitadas de Escherichia coli (37ºC).
Se minimiza el riesgo de cultivar microorganismos nocivos mediante la elección
cuidadosa de las fuentes y el cultivo en recipientes cerrados y sellados, que
permanecerán así hasta que los cultivos sean esterilizados. En caso de abrir los
recipientes, se deben exterminar los microorganismos 24 hs antes, con un papel
de filtro embebido en formol (40%). Los repiques quedan excluidos.
Como barrera primaria, se aconseja el uso de guardapolvo (delantal). Barreras
secundarias incluyen un laboratorio con piletas y la previsión de tratamiento
específico en caso de derrame. La esterilización del material de descarte es
indispensable (autoclave/ olla a presión).
Enseñanza Media (Técnica), Terciario, Graduación Universitaria
Incluye alumnos mayores de 16 años y Profesores con entrenamiento específico y
calificación en técnicas de esterilidad.
Las limitaciones en relación a los agentes biológicos, medios de cultivo e incubación
son equivalentes a las descriptas en el nivel anterior. De todos modos,
dependiendo del curso, organismos del ambiente y del cuerpo pueden ser
cultivados en placas, que permanecerán cerradas.
El uso de guardapolvos se considera obligatorio como barrera primaria. Las
prácticas de laboratorio patrón (standard) y una técnica aséptica experimentada
son condiciones importantes.
En relación con las barreras secundarias no hay modificaciones respecto del nivel
anterior.
Las normas correspondientes a los 3 niveles de enseñanza se encuentran
resumidas en la tabla 1.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
10
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
LAS NORMAS DE TRABAJO STANDARD
1. Acceso al laboratorio con vestimenta adecuada. Quitarse joyas (pendientes,
collares) y también sombreros y gorros. No usar ropas demasiado largas ni
zapatos abiertos (sandalias). Recoger el cabello. Usar guardapolvo de algodón.
2. Acceso al laboratorio limitado o restringido cuando los experimentos están en
marcha (Decisión del Profesor).
3. Tener la certeza de haber comprendido bien el procedimiento antes de
comenzar.
4. Lavarse las manos antes y después de realizar el procedimiento.
5. No fumar, beber, comer, chupar caramelos, morder lápices, ponerse lentes de
contacto o cosméticos.
6. Mantener la mesada bien organizada.
7. Utilizar las técnicas asépticas apropiadas para trabajar con cultivos bacterianos,
microbiológicos o virales.
8. No pipetear con la boca, minimizar la formación de aerosoles.
9. Limpiar la mesada al menos 1 vez al día y cada vez que se produzca un derrame
con un desinfectante apropiado.
10.Limpiar y descartar adecuadamente el material utilizado.
Corresponde al Profesor limitar el acceso al laboratorio durante el desarrollo de las
actividades, sin permitir a los alumnos llegar tarde o salir antes de terminada la
clase, y por su parte no dejar a los alumnos solos.
Estas normas representan un cambio de comportamiento en el laboratorio, tanto
para los docentes como para los alumnos.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
11
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
Tabla 1: Normas de seguridad en los diferentes niveles de enseñanza.
Enseñanza
Fundamental I
Fundamental II y Media
Media Técnica
(11 a 17 años)
Terciaria
Universitaria
Agentes
biológicos
Prácticas y
procedimientos
Barreras
primarias
Alimentos y material
vegetal en
descomposición
Colecciones de cultivos
Colecciones de cultivos
M’os com requerimientos raros
M’os com requerimientos raros
M’os ambientales
M’os ambientales
Medios naturales
Agar y nutrientes
Agar y nutrientes
T = 300C
y recipientes cerrados
T = 300C
y recipientes cerrados
T = 300C y recipientes cerrados
Ninguna
Guardapolvo opcional
Guardapolvo obligatorio
Se pueden hacer repiques
Prácticas standard de laboratorio
Técnicas de esterilidad
Barreras
secundarias
Ninguna
Laboratorio (pileta, autoclave,
tratamiento p/ derrames, etc.)
Laboratorio (pileta, autoclave,
tratamiento p/ derrames, etc.)
Abreviación M’os = Microorganismos
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
12
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
ASPECTOS ESPECÍFICOS DE LA ENSEÑANZA DE BIOTECNOLOGÍA
Se aconseja trabajar con microorganismos comerciales o provenientes de
colecciones de cultivos, especialmente con requerimientos poco comunes.
Para el Profesor, no siempre es fácil obtener linajes microbianos de fuentes
seguras. En varios países, existen bancos de recursos biológicos que los proveen
gratuitamente o por un precio módico. En Brasil, la Fiocruz y la Fundación André
Tosello disponen de algunos linajes, pero la fuente principal suele ser algún centro
universitario.
De modo general, se aconseja evitar los cultivos anaerobios. Las excepciones son
la fermentación alcohólica y la producción de biogas. En este último caso los
excrementos de animales deben ser sustituidos por cortes de pasto inoculados con
compost. Organismos parcialmente anaerobios como los que crecen en las
columnas de Winogradsky no presentarían problemas.
Otras recomendaciones son la de evitar cultivos en gran escala que produzcan
antibióticos (penicilina) e iniciar las fermentaciones con un volumen de inóculo en
crecimiento activo, equivalente al 20% del volumen total. Los medios de cultivo
deben ser esterilizados antes de usar, así como el material que será descartado.
A TRABAJAR CON PATÓGENOS, TAMBIÉN SE ENSEÑA.
El trabajo con patógenos es inconcebible en la enseñanza básica, fundamental o
media y también en la Media Técnica, en que los alumnos son menores de edad.
No obstante, dicha experiencia es necesaria en algunas áreas de formación
profesional, ya sea a nivel técnico o nivel superior. ¿Cuándo se debe exponer el
alumno al trabajo con patógenos? ¿En qué modo?
Para muchos autores, un curso básico de introducción a la microbiología debería
utilizar exclusivamente organismos no patogénicos. Se trate de un curso de grado
o de post-grado, el alumno debe aprender primero a utilizar las técnicas de
esterilidad en la preparación y manipulación de cultivos con agar, y analizar las
condiciones necesarias para el crecimiento de microorganismos y a diseñar y
conducir experimentos que permitan evaluar el efecto de agentes antimicrobianos.
Un curso básico tiene como objetivo el desarrollo de las habilidades esenciales,
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
13
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
conocidas como “práctica segura”, en relación con las técnicas generales de
crecimiento, identificación y recuento de microorganismos.
También se propone desarrollar algunos procesos conceptuales, tales como la
naturaleza de la investigación microbiológica y la organización de documentación
y del registro de los experimentos.
Todo debe ser repasado, desde el material hasta las condiciones de trabajo. Dejar
caer tapones, pipetas o ansas de inoculación son errores frecuentes en los cursos
de iniciación. La capacidad de concentración suele verse reducida en clases llenas,
con asistentes apenas mejor preparados que los alumnos. Antes de trabajar con
patógenos, el alumno debe adquirir varias habilidades y mostrar cierto grado de
madurez.
PASAR DE NB 1 A NB 2 NO ES TAN SIMPLE
El NB1 representa un nivel básico de contención, que depende de prácticas
microbiológicas standard, sin más barreras que una pileta para el lavado de las
manos.
El laboratorio NB2 consiste en instalaciones, equipamientos y procedimientos que
permiten el trabajo con agentes infecciosos de riesgo moderado, presentes en la
comunidad y asociados a enfermedades humanas de severidad variable. Estos
laboratorios se utilizan en la enseñanza o en el diagnóstico clínico.
Las instalaciones son de acceso restringido, cuentan con gabinetes de bioseguridad
apropiados y con equipamientos para la esterilización de los desechos y material
de descarte. Las barreras primarias y secundarias son específicas. Se contempla
un control eficiente de insectos y roedores.
De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud, el nivel NB2 difiere del NB1
en varios puntos:
1. El personal de laboratorio recibe un entrenamiento específico para manipular
los agentes patogénicos.
2. El laboratorio está dirigido por científicos con experiencia en la manipulación de
agentes patogénicos.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
14
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
3. El acceso al laboratorio está limitado cuando el trabajo está en marcha.
4. Se prepara y adopta un manual de bioseguridad específico del laboratorio.
5. Los procedimientos capaces de generar aerosoles potencialmente infecciosos
son realizados en gabinetes de seguridad de clase I o II u otro equipamiento de
contención primaria. El personal recibe entrenamiento específico en el uso
adecuado del equipamiento de contención y emplea estrictamente las prácticas
microbiológicas recomendadas.
CULTIVOS DE TEJIDOS
Además de requerir reactivos caros y equipamientos sofisticados, los cultivos de
tejidos animales no deben ser realizados en el laboratorio de enseñanza porque
existe el riesgo de estar infectados por patógenos. De todos modos, el cultivos de
tejidos vegetales es suficiente para mostrar los principales aspectos tecnológicos
y sus dificultades. Los medios son simples, pero se debe tener cuidado con la
manipulación de las hormonas, algunas de las cuales pueden ser tóxicas (o
cancerígenas?).
CONSIDERACIONES FINALES
En la enseñanza, el dinero es un factor limitante. Las inversiones generalmente
están destinadas a la construcción de laboratorios de investigación o de
diagnóstico clínico. Los laboratorios más antiguos, donde se desarrollas las clases
prácticas, no siempre son apropiados. Faltan gabinetes de seguridad y material de
protección. Sabemos que conciliar la falta de recursos con la necesidad de
formación práctica y de actividades experimentales no es una tarea simple. De
todos modos, en un establecimiento de enseñanza, la educación para un
comportamiento responsable incluye varios actores: las autoridades deben
garantizar y exigir el seguimiento de normas de seguridad; los profesores tienen
la responsabilidad directa del cumplimiento de dichas normas; los técnicos y los
alumnos de mantener actitudes positivas y hábitos relativos a la cultura de la
seguridad.
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
15
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
BIBLIOGRAFÍA
AIHA LABORATORY HEALTH AND SAFETY COMMITTEE WEB SITE
http://www2.umdnj.edu/eohssweb/aiha/accidents/index.htm
AMERICAN BIOSAFETY ASSOCIATION
http://www.absa.org/abomenu.html
AMERICAN PHYSIOLOGICAL SOCIETY. Questions people ask about animals in research.
http://www.the-aps.org
AMERICAN SOCIETY OF MICROBIOLOGY (ASM). Biosafety standards and training.
Microbe 2:12, 2007
ANDRIEU J-L ET AL. Risques biologiques. Les cahiers de prévention, CNRS, 2002
http://www.sg.cnrs.fr/cnps/guides/doc/risquebio/cahierpreventionrisquesbio.pdf
ASE SAFEGUARDS IN SCIENCE COMMITTEE. Microorganisms for Investigations in Schools
& Colleges.
http://www.ncbe.reading.ac.uk/NCBE/SAFETY/PDF/Microbes.pdf
ASSOCIAÇÃO NACIONAL DE BIOSSEGURANÇA (ANBIO)
http://www.anbio.org.br
ASSOCIAÇÃO NACIONAL DE BIOSSEGURANÇA (ANBIO). Instrução Normativa CTNBio nº
6, de 28.02.97.
http://www.anbio.org.br/legis/instrucao6.htm
BIOLOGY LABS ONLINE
http://www.biologylab.awlonline.com/
BIOSAFETY PROGRAM. Role of aerosols and their significance.
http://www.lbl.gov/ehs/biosafety/Biosafety_Training/html/aerosols.shtml
CASE C. Hand washing. Access Excellent Classic Collection, 1996
http://www.accessexcellence.org/AE/AEC/CC/hand_background.php
CASE C. & J.DOUTHWRIGHT (1995) Point/Counterpoint: Microbiological Safety in the
Undergraduate Teaching Laboratory. Focus on Microbiology Education.
CENTER FOR PUBLIC HEALTH PREPAREDNESS – KENT STATE UNIVERSITY. Safety First.
http://cphp.kent.edu/Middle.htm
DURRELL G. O naturalista Amador. São Paulo, Livraria Martins Fontes Editora Ltda.,
1984.
EWALD H.T et al. Micro-organisms for education, 1997.
http://www.science-projects.com/safemicrobes.htm
FUNDAÇÃO OSWALDO CRUZ (FIOCRUZ) / INSTITUTO NACIONAL DE CONTROLE EM
QUALIDADE DE SAÚDE (INCQS). Coleção de microrganismos de referência utilizados em
controle da qualidade (Catálogo).
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
16
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
HORN, TOBY MOGOLLON; FRAME, KATHY Working with DNA & Bacteria in Precollege
Science Classrooms, NABT, 1993
http://www.nabt.org
INSTITUTE OF LABORATORY ANIMALS RESOURCES OF THE NATIONAL RESEARCH
COUNCIL (ILAR). Guide for the Care and Use of Laboratory Animals in Precollege
Education, 2006.
http://dels.nas.edu/ilar_n/ilarhome/Principles_and_Guidelines.pdf
JOHNS HOPKINS UNIVERSITY/DEPARTMENT OF BIOLOGY/UNDERGRADUATE COURSES.
Virtual Lab demonstrations.
http://www.bio.jhu.edu/Undergrad/Default.html
KELLER M.J. Faster, Safer, Better: recommendations for DNA electrophoresis in the
teaching lab. The American Biology Teacher 71:4, 2009
LABORATORY HEALTH & SAFETY COMMITTEE
http://www2.umdnj.edu/eohssweb/aiha/accidents/index.htm
LAXON J. & SUCHMAN E. Safety Recommendations from the Concurrent Sessions on
Safety in the Microbiology Teaching laboratory at the Undergraduate Education
Conference 2003. Focus on Microbiology Education 10:1, 2003
MALDARELLI G. et al. (2009) Journal of Microbiology & Biology Education 10-:51-57
MANGAN K. & M.PHILPOTT. Point/Counterpoint: The Use of BSL-2 Organisms in the
Microbiology Classroom. Focus on Microbiology Education 11:2, 2005
MASTROENI M.F. Biossegurança aplicada a laboratórios e serviços de saúde. Segunda
Edição. São Paulo, Editora Atheneu, 2006.
MASTROENI M.F. A difícil tarefa de praticar a biossegurança. Tendências. Ciência e
Cultura 60:2, 2008.
MICROBIOLOGY IN SCHOOLS ADVISORY COMMITTEE (MISAC). Microbiology fact sheets
for schools - Safety Guidelines.
http://www.ncbe.reading.ac.uk/NCBE/SAFETY/PDF/Topics15.pdf
MINISTÉRIO DA SAÚDE – Secretaria de Ciência, Tecnologia e Insumos estratégicos –
Departamento de Ciência e Tecnologia. Classificação de Risco dos Agentes Biológicos.
Série A. Normas e Manuais Técnicos. Brasília – DF, 2006
NATIONAL ASSOCIATION OF BIOLOGY TEACHERS (NABT) http://www.nabt.org
NATIONAL CENTRE FOR BIOTECHNOLOGY EDUCATION (NCBE). Safety in the school
laboratory.
http://www.ncbe.reading.ac.uk/NCBE/SAFETY/menu.html
NATIONAL INSTITUTE FOR OCCUPATIONAL SAFETY AND HEALTH. U.S. Chemistry.
Laboratory Safety Guide, 2007.
http://www.cdc.gov/niosh/docs/2007-107/pdfs/2007-107.pdf
OBSERVATOIRE NATIONAL DE LA SÉCURITÉ DES ÉTABLISSEMENTS SCOLAIRES ET
D’ENSEIGNEMENT SUPÉRIEUR. Risques et Sécurité en Sciences de la Vie et de la Terre et
en Biologie-Écologie.
http://ons.education.gouv.fr
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br
17
LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS
ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE Manual de segurança biológica em laboratório – 3a
edição, Genebra 2004
http://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/BisLabManual3rdwebport.pdf
PANEC M. Online Science Laboratory Courses: by what criteria? Focus on Microbiology
Education 13:2, 2007
RÉSEAU RESSOURCE RISQUE BIOLOGIQUEhttp://www.3rb-bgb.com/
ROY K. Targeting Biosafety for High School Level Biotechnology and Microbiology Courses
Safe Science Series: Article # 18. National Science Education Leadership Association NSLA – The Navigator, Fall 2000
SANTILLO H., DOS SANTOS D.H. E A.J.LEITE RODRIGUES. Situação de Biossegurança
encontrada nos laboratórios de biologia do Campus. UEG.
http://www.prp.ueg.br/06v1/ctd/pesq/inic_cien/eventos/sic2005/arquivos/biologicas/situ
acao_biosseguranca.pdf
SCIENCE EDUCATION SECTION AND MANPOWER BUREAU Learning and Teaching
Resources on Safety in Science Laboratories, 2004.
http://cd1.edb.hkedcity.net/cd/science/laboratory/SAFETY/safety_exemplars_e.pdf
SCLEGEL E.F.M. & J.L. MUÑOZ JORDÁN. A classroom transformed into a lab:
microbiology for elementary school. Focus on Microbiology Education10:2, 2004
SCOTT WEESE J. Evaluation of bacterial & Fungal culture practices in School classrooms.
The American Biology Teacher 71:3, 2009
SINGER S., HILTON M.L. e SCHWEINGRUBER H. America’s Lab report – Investigations in
High School Science Committee on High School Science Laboratories: Role and Vision,
National Research Council, 2005
SMITH H. A case for Microbiology in Secondary Education and Implications for
undergraduate educators. Focus on Microbiology Education 14:1, 2007
SOCIETY FOR GENERAL MICROBIOLOGY (SGM). Micro-organisms for investigations in
schools & colleges, 2001.
http://www.microbiologyonline.org.uk/forms/bpmlist.pdf
SUCHMAN E. & J. LAXON. Update of biosafety level designations. Focus on Microbiology
Education, 5/1/2004.
http://www.microbelibrary.org
THE BIOTECHNOLOGY PROJECT
http://matcmadison.edu/biotech/resources/methods/labManual/unit_2/exercise_4.htm
THE LABORATORY SAFETY INSTITUTE
http://www.labsafetyinstitute.org/Resources.html
THOMPSON C. Biosafety levels – What we need to know about them in teaching Labs.
Focus on Microbiology Education, 10:3, 2004
VIRTUAL STEM CELL LABORATORY
http://www.childrenshospital.org/research/Site2029/mainpageS2029P23sublevel39.html
Guía 67
María Antonia Malajovich / Guías de actividades
Biotecnología: enseñanza y divulgación
http://www.bteduc.bio.br

Documentos relacionados