XIX° SILAE Congress “Fernando Cabieses Molina”

Transcripción

Abstract book of
XIX° SILAE Congress
“Fernando Cabieses Molina”
Villasimius, Cagliari - ITALY
6 - 10 september 2010
Edit by: Vincenzo Barbarulo & Luca Rastrelli
© SILAE 2010 - www.silae.net
ISBN: 88-8160-218-0
Edit by:
Vincenzo Barbarulo and Luca Rastrelli
© SILAE 2010
“Società ItaloLatinoamericana di Etnomedicina”
www.silae.net
Revisione: 1.28
06 Giugno 2011
2:39:33
ISBN: 88-8160-218-0
Introduction
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Abstract book of
XIX° SILAE Congress
“Fernando Cabieses Molina”
Content
Introduction................................4
Program......................................14
Plenary........................................17
Oral Presentations.....................33
Posters........................................121
Index...........................................385
3
SILAE - Abstract Book of XIX° Congress “Fernando Cabieses Molina” - ISBN: 88-8160-218-0
Introduction
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Introduction
)HUQDQGR&DELHVHV0ROLQD
Nació en Mérida, Yucatán, México, hijo de Eduardo
Cabieses Valle Riestra peruano y Alicia Molina Font
yucateca.
Cursó estudios de ciencias biológicas y medicina en la
Universidad Nacional Mayor de San Marcos, de 1937 a
1945. Se perfeccionó en neurología y neurocirugía en la
Universidad de Pennsylvania. A su regreso al Perú en
1950 introdujo el tratamiento quirúrgico de los aneuriFernando Cabieses
smas cerebrales y la cirugía de la epilepsia. En 1956 recibió el grado
Molina
de doctor en medicina por la UNMSM. Dictó cursos de su especialidad
en la Universidad de Miami y fue distinguido como profesor honorario por las
universidades nacionales de Trujillo (1962), Cajamarca (1963), Cuzco (1982) y
Lambayeque (1985). Además, es Doctor Honoris Causa por la Universidad Inca Garcilaso de la
Vega (2006) y fue Rector Fundador de la Universidad Científica del Sur.
Miembro de la American Medical Association, del American College of Surgeons y de numerosas instituciones académicas. Fue director del Museo Peruano de Ciencias de Salud (1976-1990).
Impulsó la fundación y fue el primer director del Museo de la Nación, de 1988 a 1990.
Cabieses trabajó a lo largo de su vida en integrar y hacer crecer nuevas ideas que usualmente
interpretan con éxito la realidad de su entorno. Su personalidad creativa se muestra desde su
tesis para obtener el título de Médico Cirujano, en la que comprobó por primera vez que la forma
tradicional indígena de consumir coca no era una narcodependencia, no producía ningún daño y
favorecía el trabajo en grandes alturas sobre el nivel del mar, destruyendo la creencia común del
indígena narcotizado.
Recién graduado realizó una investigación experimental para comprender los sistemas de
adaptación que facilitan el funcionamiento cardio-respiratorio en el llamado “soroche”. Este
trabajo, que resultó sumamente valioso para la aviación, le valió una invitación a los laboratorios
Randolph Field (Texas) donde se realizan estudios similares.
Luego fundó el Servicio de Neurocirugía del Instituto de Enfermedades Neoplásicas y con sus
discípulos fundó servicios similares en el Hospital del Niño, el Hospital Loayza, el Hospital Dos de
Mayo, el Hospital Militar, el Hospital Naval y el Hospital de Aeronáutica, desarrollando además
servicios de consultoría en numerosas provincias del país.
A partir de 1953 Cabieses se dedicó al estudio de la historia de la medicina en el Perú, publicando libros que muestran que lo que era considerado historia se encontraba vigente en las
zonas rurales, lejos de los centros de la medicina desarrollada. Por esta razón, fundó el Instituto
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de Medicina Tradicional, el cual ha facilitado la articulación de la medicina oficial con la medicina
tradicional, mejorando la atención de la salud en las zonas alejadas y promoviendo el estudio y la
identificación de plantas medicinales para ser industrializadas y exportadas (uña de gato, maca,
sangre de grado, etc.). Labor a la que se ha unido la Universidad de Salerno, a través de la
fundación de la Sociedad Italo-Latinoamericana de Etnomedicina (SILAE) integrada por
científicos peruanos, italianos y de la mayoría de los países centro y sudamericanos.
Con más de 80 años el doctor Cabieses presidió desde 1998 la comisión organizadora de la
Universidad Científica del Sur. En esta universidad logró romper esquemas en la formación
académica de los futuros médicos peruanos. Consciente de la deshumanización y de la excesiva
tecnificación en el entrenamiento médico, ideó un novedoso programa de prácticas supervisadas
en clínicas, hospitales y centros médicos a través de un convenio de cooperación para la
enseñanza universitaria de la nueva medicina. Así, sin tener un centro médico universitario u
hospital universitario propio, la universidad logró optimizar los recursos existentes en la sociedad
peruana.
Durante el I Congreso Peruano de Plantas Medicinales y Fitoterapia, realizado en la ciudad de
Lima (2000), se brindó al Dr. Cabieses un reconocimiento a su trayectoria nacional e internacional
en el campo de la investigación, docencia y difusión del conocimiento de las plantas medicinales
del Perú. En mérito a su permanente contribución al intercambio cultural y la comprensión de los
pueblos de Israel y Perú, fue nombrado Presidente del Consejo Internacional del Instituto Cultural
Israel-Iberoamérica. De otro lado, ha sido nombrado Amauta por las universidades de Cuenca y
Pontificia Universidad Católica de Ecuador. Este premio, que alude a la sapiencia ancestral, fue
entregado, en palabras de los representantes de las universidades, “a uno de los pocos sabios
vivientes de Latinoamérica”.
Ha recibido las siguientes condecoraciones: Palmas Magisterialesen el Grado de Amauta 1956;
Condecoración Daniel A. Carrión; Orden Hipólito Unanue en el Grado de Gran Oficial 1990; Premio
Nacional de Cultura Garcilaso De la Vega1961; Premio Hipólito Unanue a la Mejor Edición
Científica en Medicina 1984; Premio Roussel 1994; Medalla de Honor del Gobierno de Ucrania por
su contribución a la salud de las victimas de Chernóbil; entre muchas otras.
Ha publicado 36 libros y más de 300 artículos científicos.
Para todos los que lo conocimos como discípulos, colegas, colaboradores y amigos, su sensible
desaparición representa una pérdida importante por sus reconocidas condiciones y capacidades
personales en beneficio de la salud pública, la ciencia, la cultura peruana y todas aquellas manifestaciones a las que se entregó con absoluta prodigalidad.
§
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La Química del Pensamiento
Dr. Fernando Cabieses
Cuando uno comienza hablar de las complejidades químicas del funcionamiento cerebral, tiene
la tentación inicial de comenzar a describir la abigarrada química de la comunicación entre
neurona y neurona y corre el peligro de olvidar que todo ese complicadísimo manojo de reacciones químicas puede resumirse re-cordando que toda la química del cerebro se reduce al metabolismo de la glucosa mediante su combustión oxigenada. Esto puede parecer una verdad de perogrullo; pero lo cierto es que, aunque exploremos todos los cientos de reacciones metabólicas del
tejido nervioso que constituye ese órgano magnífico que llamamos cerebro, el conjunto final de
tan complejo funcionamiento químico, el uso de la glucosa y del oxigeno, termina siendo una
función respiratoriay energética tan sencilla como eso: glucosa + oxígeno = energía neurológica +
CO2. Así de sencillo. El pensamiento, una de las funciones del cerebro, se detiene cuando el
aprovisionamiento de glucosa o la falta de oxígeno en el cerebro caen por debajo de límites
críticos. El cerebro no puede seguir funcionando si deja de recibir oxígeno por más de dos minutos o si no le damos por lo menos el 20% de todo el oxígeno
que cosechan los pulmones. Esa es, en pocas palabras, la
química del pensamiento.
Pero es verdad que una simplificación tan radical nos hace
olvidar prontamente de los maravillosos fenómenos químicos
que nos permiten explorar una espesa selva de reacciones
intrínsecas que trataré de resumir aquí, simplemente para
compartir con las mentes expertas de esta digna audiencia, la
abigarrada constelación de intercambios moleculares y iónicos
que dan por resultado eso que llamamos pensamiento.
Por lo pronto, no dejaremos pasar la oportunidad de recordar la comunicación intrínseca entre
las neuronas que se lleva a cabo mediante sencillas señales eléctricas ocasionadas por el desplazamiento de los iones de sodio y de potasio, tanto entre neurona y neurona como dentro de las
unidades neuronales mismas, atravesando las membranas celulares o viajando en los espacios
intraneuronales con la producción de fenómenos eléctricos deiversos que han sido ya objeto de
profundos estudios físicos eléctricos diversos que han sido ya objeto de profundos estudios
físicos que ahora nos permiten conocer muy de cerca y muy profundamente las comunicaciones
eléctricas en la comunicación interneuronal. Durante mucho tiempo se pensó que estos
fenómenos eléctricos eran la esencia de toda la comuni-cación neurológica. Ahora sabemos que
en la comunicación entre las neuronas, los fenómenos físicos de los intercambios iónicos no
existen aisladamente sino que las señales que permiten la interrelación neuronal funcionan
dentro de un sistema muy complejo donde, al lado de los desplazamientos iónicos, hay otros
mecanismos que complican indeciblemente el panorama de la química del pensamiento.
No vamos a revisar ahora cómo hemos llegado a la conclusión que el cerebro está formado por
un fabuloso número de células diversas: neuronas de diversos tipos, neuroglias, células vasculares etc. Seguidores de los magníficos trabajos de Ramón y Cajal y de Golgi, lograron determinar la
presencia de los puntos de contacto entre las neuronas que fueron llamadas sinapsis; y en el
estudio de estos órganos de comunicación se ha logrado, desde 1921, encontrar los llamados
intermediarios químicos, cuyo mecanismo de acción está ya claramente identificado y determinado.
El primer intermediario químico fue identificado por Otto Loewi y por Henry Dale y se llamó
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acetil-colina. Pronto se descubrió la presencia de otro neurotransmisor, la noradrenalina, y en el
término de unas cuantas décadas los neuroquímicos contamos ya con substancias diferentes que
llenan esta función en número creciente (más de 30). Algunas que transmiten mensajes excitantes y otras que transmiten mensajes inhibitorios.
Teniendo en cuenta que el número de sinapsis de cada neurona puede fácilmente pasar del
centenar, y que una misma neurona puede estar especializada en un neurotransmisor o tener
relación con varios diferentes, la mente se detiene absorta al tratar de imaginar las diversas
combinaciones que pueden producirse en las diez mil millones de neuronas que constituyen un
cerebro humano.
Porque no solamente hay señales eléctricas comunicantes, lo cual es un proceso físico-químico
de movilización iónica; no solamente hay varias docenas de transmisores químicos que excitan o
inhiben las zonas sinápticas, sino que existen, además, otra categoría de comunicación química
mediante las llamadas neuro-hormonas que son difundidas más lenta y más ampliamente sobre
grupos neuronales vecinos o familias neuronales activadas por vía sanguínea o por simple
infiltración regional. Ejemplo de esto son algunos péptidos, como la oxitocina y la vasopresina y
varios otros que complican al colmo el cuadro químico local de diversas zonas cerebrales.
Cada una de estas substancias, ya sean nuerotrasmisoras o neurohormonas, son instrumentos
de diversas funciones cerebrales que continúan siendo estudiadas por los neurofisiólogos, y a
partir del siglo XIX, los psicólogos han emprendido un fructífero trabajo de
exploración sobre la fenomenología del pensamiento humano. Y sobre la base
de estos hallazgos se han encontrado relaciones muy estrechas entre determinados trastornos del comportamiento (ansiedad, depresión, miedo, etc.) o
puntos esenciales en la patología del pensamiento (esquizofrenia, etc.) y las
variaciones funcionales o patológicas en la química cerebral, de tal forma que,
lentamente, vamos construyendo un mapa químico y fisiológico del cerebro
que nos permite ir explorando con seguridad y confianza la farmacología de la
actividad psicológica, lo que ha abierto todo el fructífero campo de la psicofarmacología.
Los nuevos sistemas de obtención de imágenes, especialmente la tomografía computarizada,
la resonancia magnética, la tomografía de positrones y la resonancia magnética funcional, ha
revolucionado ahora la investigación de las funciones cerebrales, especialmente esta última.
Consiste en obtener imágenes del cerebro durante determinados circunstancias funcionales. Las
imágenes logran identificar la localización exacta de la porción anatómica del cerebro que está
funcionado durante determinado momento fisiológico. Esto significa que un amplio grupo de
neurofisiólogos ya está sometiendo a sus sujetos de experimentación al resonador magnético,
obteniendo la imagen de la localización anatómica de la zona funcionante.
Se obtiene la imagen que mayor oxígeno o que mayor glucosa está consumiendo en ese
preciso momento. Es maravilloso y se está mapeando el cerebro humano con este ingenioso
método y, como siempre sucede, estamos regresando a la antigua búsqueda. Estamos buscando
la parte más sencilla de la química del pensamiento: el consumo de glucosa y de oxígeno.
Resumen de la conferencia expuesta durante el XXII Congreso Peruano de Química, Lima, octubre de 2004
§
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In ricordo di Fernando Cabieses Molina
Francesco De Simone
I
l mio primo viaggio in Perù risale alla fine di giugno del 1988, in occasione del II
Congresso internazionale di Medicina Tradizionale. Ero rientrato da poco da una mia
visita in Cina, Shanghai e Pechino, su invito del carissimo amico Zhou Zhong-Liang, col
quale da anni ero impegnato in un intenso programma di ricerca su piante impiegate nella medicina popolare, in Cina e nellÍtalia del Sud. Due colleghi europei, uno di Napoli ed uno di Parigi, mi
suggerirono allora la partecipazione al Congresso di Lima come occasione per allargare
lórizzonte su panorama ampio e interessantissimo dellÁmerica latina, a partire dal Perù, che di
quel continente è certamente la nazione più stimolante ed intrigante. Già allora mi parlarono del
dott. Cabieses, direttore del Museo de la Naciòn, come di una persona è uno scienziato da conoscere assolutamente.
Due anni più tardi lÁmbasciatore dÍtalia a Lima, il dr. Bernardino Osio, uno di quei diplomatici
di grandissima cultura e squisita signorilità che onorano il nostro paese, mi disse che aveva
parlato di me col dott. Cabieses, consigliandomi di incontrarlo, e analoga raccomandazione mi
rivolse un mio vecchio e caro amico di Salerno, il dott. Sabatino Della Monica, ambasciatore della
Comunità Europea per il Perù e la Bolivia, casualmente incontrato pochi giorni dopo nella sede
del patto Andino. Realizzai così il mio primo incontro con Fernando Cabieses.
Andai a trovarlo al Museo de la Naciòn: mi ricevette con grande cortesia, con estrema signorilità e mi accompagnò nella visita al Museo illustrandomi e facendo rivivere con le sue parole la
storia gloriosa di questo grande paese. Si percepiva subito il fatto di trovarsi di fronte a una
persona eccezionale, per cultura, per capacità scientifiche, per qualità umane. Uomo di grande
carisma, aveva grandi capacità organizzative, e ispirava una naturale e profonda carica di simpatia. Aveva una rete enorme di amicizie, con personalità di altissimo livello, di diverse nazioni di
ogni continente. Cittadino del mondo, era legatissimo al suo paese e ne viveva con partecipazione e compassione le vicende politiche e sociali. Leggeva e interpretava i problemi e le difficoltà,
ma su tutto spalmava un senso di ottimismo e una grande gioia di vivere. Nacque da allora una
amicizia solida, profonda, affettuosa, con una frequenza di incontri assolutamente eccezionali,
tenuto conto della grande distanza dei nostri paesi. Oramai, a partire dalla mia prima visita del
1988, si era stabilita una intensa collaborazione scientifica fra il mio gruppo di ricerca, col coinvolgimento di altri gruppi italiani ed europei, e alcune Università ed enti peruviani. Ai contatti iniziali
con la Universidad Nacional Mayor de San Marcos in Lima (il Rettore Josè Amiel, i dottori Nancy
Lozano, Tommaso Olcese, Emma Cerrate, Ramon Pereyra), con la Pontificia Università Cattolica
(Olga Lock), con la Università Agraria La Molina, con la Università di Lima, la San Antonio Abad di
Cusco (Rosa Urrunaga), si erano aggiunti lÍPIFA (padre Edmundo Szeliga), lÍnmetra, Istituto di
Medicina Tradizionale, diretto da Cabieses con il fedele collaboratore Manuel Fernandez, e altri
ricercatori delle Università di Piura, di Iquitos, di Arequipa. Nel 1990 avevo avuto líncarico di
organizzare il V Congresso della Società Italiana di Fitochimica, in una splendida isola della baia di
Napoli. Accanto ai grandi nomi del mondo scientifico europeo, Nordamericano e Cinese, Cabieses
ottenne un grande successo con una conferenza sulle Piante Magiche dellÁntico Perù. Era un
periodo molto bello della mia vita, e ricordo ancora con nostalgia i giorni trascorsi con Fernando e
la moglie Carmela. Fra i gruppi di ricerca italiani e peruviani le numerose collaborazioni scientifiche producevano un numero sempre maggiore di pubblicazioni.
Decidemmo così di organizzare un primo convegno, che si tenne a Salerno, una città del
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meridione dÍtalia, dove era nata la celebre Scuola Medica Salernitana, vicino alla città di Amalfi, la
più antica repubblica marinara italiana. La data scelta fu il 12 Ottobre 1992, 500 mo anniversario
della scoperta dellÁmerica da parte di un italiano della città di Genova, “Genova la Superba”,
altra gloriosa repubblica marinara nel medioevo italiano. Lo ebbi lónore di organizzarlo e di
presiederlo. Nel corso del Congresso, fu deciso di creare una Società Italo Peruviana di
Etnomedicina e di istituzionalizzare lo svolgimento di Congressi con periodicità annuale. Fu così
programmato per il 1993 lo svolgimento di un secondo congresso a Lima, dedicandolo ad
Antonio Raimondi. Fernando fu designato Presidente della Società e del Congresso.
A Lima, aumentando il numero dei ricercatori e delle nazione dellárea Andina partecipanti, il
nome della società fu cambiato in Società Italo-Andina di Etnomedicina. Successivamente la
partecipazione sempre più massiccia dei ricercatori provenienti praticamente da tutti i paesi del
continente latinoamericano, dal Messico al Cile, con un numero di partecipanti che a volte ha
superato anche le 400 persone, ha portato alla definitiva denominazione della Società ItaloLatinoamericana di Etnomedicina, SILAE: lingue ufficiali, Italiano, Spagnolo, Portoghese.
Della Società SILAE Fernando Cabieses è stato per anni Presidente autorevole, aprendo poi la
strada ad altri Presidenti, ricercatori tutti di grande prestigio, quali Plutarco Narajo dellÉcuador,
Massayoshi Yoshida del Basile, Juàn Garbarino del Cile, Jeanette Mendez del Venezuela, Paola
Vita-Finzi italiana, e poi Wagner Villegas del Brasile, attuale presidente.
Questi Congressi costituiscono oramai un appuntamento fisso, ogni anno, nel mese di
Settembre, in Italia negli anni pari, in America Latina negli anni dispari. Nel Settembre 2009 si
svolgerà a Cuba il XVII Congresso, e nel Settembre 2010 il XVIII Congresso si terrà a Cagliari,
Sardegna, Italia: tale congresso sarà dedicato a Fernando Cabiese Molina, che amava lÍtalia e in
modo particolare la Campania e la Sardegna.
Fernando era diventato col tempo un simbolo, un ponte che legava le nostre realtà europee
alla grande cultura e tradizionale latinoamericana. Quando fondò a Lima la Universidad Cientìfica
del Sur e ne divenne Rettore, questo nuovo giovane Ateneo fu il centro di incontri, di progetti, di
programmi. Lì si sono incontrate un numero enorme di persone, di tante diverse nazioni: tutte le
personalità di grande valore scientifico ed umano, eccellenti nei più disparati settori, dalla letteratura alla medicina, dallárcheologia alla botanica, dalla chimica allántropologia, dallíndustria alla
politica, dalléconomia al diritto.
La sua energia era pari alle sue curiosità e ai suoi interessi scientifici: mai stanco, mai depresso,
mai deluso. Nel periodo più intenso della mia vita, è stato un compagno di strada e un punto di
riferimento costante e insostituibile, pieno di gioia di vivere e di un ottimismo che lo portava
sempre a fissare nuove mete, nuovi appuntamenti per un futuro che sembrava non dovesse finire
mai. Poi è arrivato lúltimo appuntamento. A questo incontro si è presentato sereno, per aggiungere un ultimo capitolo al libro della sua vita. Noi che abbiamo avuto la fortuna e il privilegio di
essere stati suoi amici, gli rivolgiamo un estremo saluto, con rimpianto e con affettuoso rispetto.
Salerno, luglio 2009
Francesco De Simone
§
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En memoria de Fernando Cabieses Molina
Francesco De Simone
M
i primer viaje a Perú fue a fines de junio de 1988, en occasion del II Congreso
Internacional de Medicina Tradicional. Acabo de regresar de mi visita a China,
Shanghai y Pekin invitado por el queridìsimo amigo cercano Zhou Zhong-Liang, con
quien durante años estaba comprometido en un intenso programa de investigación de plantas
usadas en la medicina popular China y en Italia en el sur, cuando dos colegas europeos, uno de
Nápoles y uno de París, me sugirieron participar en el Congreso de Lima como una ocasiòn de
ampliar el horizonte del panorama vasto y mui interesante de América Latina, partiendo de Perú,
que es la nación más estimulante e interesante de ese continente. Desde entonces me hablaron
del dr. Cabieses, director del Museo de la Nación, como de una persona y un científico que
conocer de todas maneras.
Dos años más tarde, el Embajador de Italia en Lima, dr. Bernardino Osio, uno de esos
diplomáticos de gran cultura y exquisito caballerosidad que honran nuestro país, me dijo que
había hablado de mì con el dott. Cabieses y me aconsejo buscarlo; la misma recomendación me la
hizo un viejo y querido amigo de Salerno, el dott. Sabatino Della Monica, embajador de la comunidad europea en el Perú y Bolivia, que encontrè de casualidad algunos dìas despuès en la sede del
Pacto Andino. Realicè asì mi primer encuentro con Fernando Cabieses Molina.
Fui a buscarlo al Museo de la Nación, donde me recibió con gran cortesìa y extrema caballerosidad y me acompañò en la visita del museo ilustràndome y hacièndome revivir con sus palabras la
historia gloriosa de este gran paìs. Se percibìa enseguida el hecho de encontrarse frente a una
persona excepcional por su cultura, sus capacidades cientìficas y cualidades humanas, un hombre
de gran carisma, que tenìa tambièn grandes habilidades organizativas e inspiraba una natural y
profunda carga de simpatìa. Tenìa una red enorme de amistades con personalidades de altìsimo
nivel en diferentes naciones de cada continente; ciudadano del mundo, estaba muy ligado a su
paìs y vivìa con participaciòn y pasìon sus vicisitudes polìticas y sociales, leìa e interpretaba los
problemas y las dificultades, pero sobre todo eso vertìa un sentido de optimismo y alegrìa de
vivir. Naciò desde entonces una amistad sòlida, profunda, afectuosa con una frecuencia de
encuentros absolutamente excepcionales, teniendo en cuenta la gran distancia entre nuestros
paìses. A partir de esa primera visita de 1988, se estableciò una intensa colaboratiòn cientifica
entre mi grupo de investigaciòn con la partecipaciòn de otros grupos italianos y europeos y
algunas universidades y entidades peruanas. A los contactos iniciales con la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos (el rector Josè Amiel y los Dres, Nancy Lozano, Tomàs Olcese, Emma
Cerrate, Ramòn Pereyra), con la Universidad Catòlica (Dra. Olga Lock) con la Universidad Agraria
de la Molina, con la Universidad de Lima, con la Universidad San Antonio Abad de Cuzco (Rosa
Urrunaga), se habìan sumado el INCENTRA, el Instituto De Medicina Tradicional, dirigido por el dr.
Cabieses con su fiel colaborador Manuel Fernàndez y otros investigadores de la Unoversidad de
Piura, Iquitos y Arequipa. En 1990 tuve el encargo de organizar el V Congreso de la Sociedad
Italiana de Fitoquìmica en una estupenda isla en la bahìa de Nàpoles, junto con grandes nombres
del mundo cientìfico europeo, norteamericano y chino. Cabieses tuvo gran exìto con una conferencia sorbre las plantas màgicas del antiguo Perù. Fue una etapa muy bella de mi vida, y recuerdo con nostalgia los diàs transcurridos con Fernando y su esposa Carmela.
Las numerosas colaboraciones cientìficas entre los grupos de investigadores italianos y peruanos producìan un nùmero siempre mayor de publicaciones, por lo que decidimos organizar el
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primer encuentro que tuve lugar en Salerno, una ciudad al sur de Italia donde habìa nacìdo la
cèlebre Escuela de Medicina Salernitana, cerca de la ciudad de Amalfi, la màs antigua repùblica
marina italiana. La fecha escogida fue el 12 de octubre 1992, de Amèrica por parte de un italiano
de la ciudad de Gènova (Gènova la soberbia), otra gloriosa repùblica marina de la Edad Media
italiana. Yo tuve el honor de organizarlo y presidirlo, y en el transcurso del Congreso se decidiò
crear la Sociedad Italo-Peruana de Etnomedicina e institucionalizar la organizaciòn de congresos
con periodicidad anual. Asì, se programò para 1993 la organizaciòn de un segundo congreso en
Lima, dedicando a Antonio Raymondi. Fernando fue nombrado presidente de la Sociedad y del
Congreso en Lima, aumentando el nùmero de investigadores y de las naciones del àrea andina
participantes.
El nombre de la Sociedad fue cambiado por Sociedad Italo-Andina de Etnomedicina.
Sucesivamente, la participatiòn siempre màs numerosa de investigadores provenientes pràticamente de todos los paìses del continente latinoamericano, desde Mèxico hasta Chile, con un
nùmero de participantes que a veces superò las 400 personas, ilevò a la denominaciòn definitiva
de la Sociedad como Sociedad Italo-latinoamericana de Etnomedicina (SILAE), con los idiomas
oficiales de castellano, italiano y portuguès. Fernando Cabiesas fue durante años presidente de la
SILAE con mucha autoridad y abriendo camino para otros investigadores, todos de gran prestigio, como Plutarco Naranjo de Ecuador, Massayoshi Yoshida de Brasil, Juan Garbarino de Chile,
Jeannette Mèndez de Venezuela, Paola Vita Finzi de Italia, Wagner Villegas de Brasil (actual
presidente). Estos congresos constituyen una cita fija cada año en el mes de setiembre, en Italia
los años pares y en Amèrica Latina los años impares.
En setiembre del 2009 se llevarà a cabo en Cuba el XVII Congreso, y en setiembre del 2010 el
XVIII Congreso serà en Cagliari, Cerdeña. Italia. Este Congreso serà dedicado a Fernando Cabieses
Molina, quien con el tiempo se volviò un sìmbolo, un puente que unìa nuestra realidad europea a
la gran cultura y tradiciòn latinoamericana. Cuando fundò en Lima la Universidad Cientifica del
Sur y fue su rector, este nuevo joven ateneo fue el centro de encuentros, de proyectos y de
programas; allì se encontraban un nùmero enorme de personas de diferentes naciones, todas
personalidades de gran valor cientìfico y humano en los màs diversos sectores, desde la literatura
a la medicina, desde la arqueologìa a la bòtanica, desde la quìmica a la antropologìa, de la industria a la politìca, de la economìa al derecho. Su energìa astaba a la par con sus curiosidades e
intereses cientìficos, nunca cansado, nunca deprimido, nunca desilusionado. En el perìodo màs
intenso de mi vida, fue un compañero en el camino y un punto de referencia costante e insustituible, lleno de allegrìa de vivir y de un optimismo que lo llevaba siempre a fijar nuevas metas,
nuevas citas para un futuro que parecìa no terminarìa nunca.
Luego llegò la ùltima cita a este encuentro, al cual se presentò sereno, trabajando hasta el final
para añadir un ùltimo capìtulo al libro de su vida. Nosotros, que hemos tenido la suerte y el
privilegio de haber sido sus amigos, le enviamos un extremo saludo con nostalgia y afectuoso
respeto.
Salerno, julio de 2009
Francesco De simone
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Program
6-10 september 2010
Lunedì 6 settembre
Ore 14.00-19.00
• Registrazione dei Partecipanti
• Sistemazione nell'ATAHOTEL TANKA VILLAGE RESORT (Villasimius)
• Allestimento degli Stand per gli Espositori
Ore 20.00
• Cena di Benvenuto ATAHOTEL TANKA VILLAGE RESORT
Ore 22.00
• Piano Bar
Martedì 7 settembre · Inaugurazione XIX CONGRESSO SILAE
Inaugurazione
Interverranno:
• S.E. Amb. Paolo Bruni Segretario Generale IILA
• Prof. Filippo Maria Pirisi Preside Facoltà di Farmacia di Cagliari
• Prof. Massimo Curini Presidente SILAE
• Prof. Francesco De Simone Past President SILAE
• Prof. Paola Vita-Finzi Past President SILAE
• Prof. Ruben Torrenegra Vice Presidente SILAE
• Prof. Alberto Angioni Presidente Comitato Organizzatore
• Prof. Luca Rastrelli Presidente Comitato Scientifico
Lettura Inaugurale
Prof. Francesco De Simone
“Il Contributo alla Etnomedicina del Prof. Fernando Cabieses Molina”
Università degli Studi di Salerno
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Martedì 7 settembre • Antropologia e Etnobotanica
Ia SESSIONE
Ore 10.30 Lettura Plenaria:
Prof. Marcello Nicoletti
“Il valore della qualità e della sua determinazione nei prodotti di origine naturale”
Università Sapienza di Roma
Ore 11.00-13.00 Comunicazioni Orali
Ore 13.00-13.30 Comunicazioni orali - Discussione
IIa SESSIONE
Prof. Vincenzo De Feo
“L’etnobotanica nella salvaguardia della biodiversità”
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università degli Studi di Salerno
Ore 15.30- 18.45 Comunicazioni orali
Ore 18.45- 19.15 Discussione
Mercoledì 8 settembre• Etnofarmacologia e Etnomedicina
Ia SESSIONE
Prof. Jose' Antonio Gonzalez Leavaut
Plantas Medicinales Cubanas
Centro de Química Biomolecular Cuba
Ore 10.00 -13.30 Comunicazioni orali
Ore 13.30 -14.00 Comunicazioni orali - Discussione
IIa SESSIONE
Prof. Ruben Torrenegra
Universidad de Ciencias Aplicadas y Ambientales, U.D.C.A, Colombia
Ore 16.00-20.00 Sessione Poster - Presentazione orale (5') di Lavori Selezionati
Ore 17.00 Riunione Internazionale Gruppo di Lavoro STRESS OSSIDATIVO
Presiede Prof. Eugenio Luigi Iorio International Observatory of Oxidative Stress, Italia
Ore 18.30 Riunione Internazionale Gruppo di Lavoro ETNOVETERINARIA
Presiede Prof. Lorella Severino Università di Napoli, Facoltà di Veterinaria
Giovedì 9 settembre • Fitochimica e Farmacognosia
Ia SESSIONE
Prof. Irmgard Merfort
Institute of Pharmaceutical Science, Department of Pharmaceutical Biology and Biotechnology, Freiburg, Germany
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IIa SESSIONE
Prof. Gilda Guimaraes Leitao
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Brasile
Ore 19.00 Riunione Plenaria Soci della Società Italo-Latinoamericana di Etnomedicina - SILAE
Ore 20.30 ATAHOTEL TANKA VILLAGE RESORT - Social Dinner
Venerdì 10 settembre • Chimica degli Alimenti
F.D. Saura-Calixto
“Frutas tropicales como fuente de ingredientes funcionales: propiedades y aplicaciones en nutrición y salud”
Dept. Metabolismo y Nutrición, ICTAN- IF, CSIC, Spanish Council for Scientific Research, Spain.
Ore 12.45 -13.15 Comunicazioni orali Discussione
Ore 13.15 Chiusura dei Lavori
Ore 14.00 Pranzo di Chiusura
Attività sociali
• Cena di Benvenuto presso l'ATAHOTEL TANKA VILLAGE RESORT
• Cena Sociale presso l'ATAHOTEL TANKA VILLAGE RESORT
• Pranzo di Chiusura presso l'ATAHOTEL TANKA VILLAGE RESORT
• Concerto gruppo etnico Musica Regionale Sarda
Ogni sera:
• ore 21.30-23.00 Piano Bar
• ore 23.00 Discoteca
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Il valore della qualità e della sua determinazione nei prodotti
di origine naturale
Marcello Nicoletti
Università Sapienza di Roma
[email protected]
T
ra gli effetti imprescindibili della globalizzazione dobbiamo sicuramente annoverare
l’aumento della competitività, che, quando strettamente riferito al prezzo del prodotto,
comporta la compressione qualsiasi e selvaggia dei costi. Sull’altare del profitto la vittima sacrificale è la qualità, con conseguenze che vanno dalla sfera dell’utilità fino a quella etica. Se questo
può essere più o meno accettabile per alcune categorie di prodotti, tuttavia diventa particolarmente importante quando di mezzo c’è la salute.
La necessità di assicurare la qualità dei prodotti farmaceutici si è aggravata con il recente
affacciarsi sul mercato di nuove proposte commerciali, nate dall’impiego moderno dei prodotti
naturali, principalmente di origine vegetale. Si va dagli integratori alimentari ai prodotti erboristici, senza dimenticare i fitoterapici e nutraceutici ed altri ancora, dai gemmoderivati ai cosmeceutici. Il settore nel suo insieme naviga felicemente, usufruendo finora di una congiuntura
altamente positiva, tanto da poter registrare in Italia un saldo positivo di +11,2%, in netta controtendenza con gli altri prodotti farmaceutici e nonostante la negativa congiuntura economica.
Al centro di qualsiasi approccio, determinante per qualsiasi futuro, base per ogni eventuale
ragionamento, la qualità, che a sua volta poggia su una unica pietra fondante: la certezza della
composizione e della determinazione della variabilità. Nell’assenza di queste certezze la possibilità di clamorosi incidenti appare sempre più inevitabile, come nel caso della presenza di sostanze
di sintesi in preparati vegetali o di ingredienti diversi da quelli dichiarati in composizione.
Stiamo di fatto parlando dei controlli necessari per ottenere qualità e sicurezza, la tappa
imprescindibile perché il settore dei botanicals possa sopravvivere e svilupparsi nella giusta
direzione. La collocazione riduttiva di questi prodotti come alimenti non ha fatto latro che aggravare la situazione. Soprattutto dal punto di vista analitico non è possibile trattare gli integratori
alimentari ed i prodotti erboristici come degli alimenti. Una volta accertati i contenuti in metalli
pesanti, pesticidi e composti nutrizionali, quali proteine e carboidrati, ne sappiamo meno di prima
e soprattutto non ricaviamo alcuna informazione veramente utile, come la presenza dei principi
attivi che sono della droga vegetale essenza vitale e caratterizzazione unica.
Sebbene esista una importante esperienza analitica nel campo fitochimica, tuttavia, per il
successo di un approccio generalizzato, è necessario evitare strumenti troppo sofisticati o
specifici o costosi o incomprensibili se non per pochi addetti specializzati. Viene quindi proposto,
con una serie di dati analitici e di esempi, nonché sulla base dell’adozione da parte delle
Farmacopee come quella cinese, l’impiego della HPTLC (Cromatografia su Strato Sottile ad Alta
Prestazione). La cromatografia HPTLC, nata quale miglioramento della TLC, può vantare diversi
punti a suo favore: analizza praticamente l’intera composizione dell’estratto, si adatta perfettamente alla complessità della matrice vegetale, ha un basso costo per ciascuna analisi e per la
strumentazione di base, possibile accoppiamento con altre tecniche analitiche. Si evitano costose
strumentazioni molto sofisticate, ma altrettanto delicate e quindi soggette a continua manutenzione. La facile interpretazione perfino visiva e diretta del risultato permette una convincente
semplicità, ed ancora la possibilità di attuare direttamente l’analisi anche per chi non è in possesso di un PhD. Ma soprattutto grazie all’impiego di specifiche strumentazioni, quali quelle svilup-
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pate dalla CAMAG, ha raggiunto il necessario grado di ripetibilità e affidabilità, uscendo definitivamente dalla fase artigianale della TLC per entrare di fatto in quella tecnologica.
Il vantaggio centrale è la possibilità di ottenere il fingerprint. L’insieme delle sostanze presenti
in una droga vegetale o in un estratto, distribuite in una lastrina come singole macchie per
ciascun componente, costituisce il curiculum identificativo, individuale, unico di una droga o di un
estratto. Esattamente come nel caso dell’impronta di un dito si confrontano le curve ed i punti di
intersezione con le impronte di un data base, così nella HPTLC si confrontano facilmente le
macchie significative. Naturalmente, la composizione di una pianta varia facilmente, ma fortunatamente le differenze sono generalmente di tipo quantitativo, ovvero le macchie sono le stesse,
ma differiscono nell’intensità. Verranno presentate diverse applicazioni riguardanti prodotti
commerciali in vendita e discussi valore ed attendibilità dei risultati.
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L’etnobotanica nella salvaguardia della biodiversità
Vincenzo De Feo
[email protected]
L’
etnobotanica consiste nello studio degli usi di piante indigene da parte dei nativi, o in
termini più ampi, nello studio delle relazioni fra popoli e piante. Perciò, questa scienza
investe un ampio ventaglio di interessi, dalla ricerca archeologica sugli usi delle piante da parte
dei popoli antichi fino alle più recenti applicazioni biotecnologiche di specie vegetali. Appare
quindi evidente l’importante ruolo dell’etnobotanica sia nello studio delle piante utili, ed in
particolare di quelle medicinali, sia, più in generale, nella conoscenza e nella salvaguardia delle
conoscenze dell’uomo sulla natura.
Fin dall’inizio della civiltà, infatti, ogni popolazione ha sviluppato conoscenze relative alle
piante utili e queste conoscenze, profondamente radicate nelle culture autoctone, investono
molti aspetti della vita quotidiana, sia di tipo pratico che rituale, primi fra tutti il mantenimento
della salute, la cura dalle malattie, il rapporto con il sacro. L’etnobotanica comprende sia la
botanica antropologica che la botanica biologica, che focalizza l’attenzione sullo studio delle
piante utili e può certamente offrire materiale di elezione per ricerche di tipo fitochimico e
farmacologico e costituisce un approccio privilegiato per lo studio e lo sviluppo di nuovi principi
attivi. La conoscenza delle piante medicinali in molte civiltà è senz’altro legata al concetto di
sacro ed esse costituiscono parte della cosmogonia tradizionale; la loro importanza è accresciuta
dal fatto che spesso le relazioni tra la gente e la natura sono più chiare e le piante contribuiscono
a formare l’identità culturale delle popolazioni che le conoscono e le usano. In molte civiltà un
ruolo molto importate è rivestito dalle piante “magiche”. L’uso di queste specie è socialmente
accettato e spesso c’è spesso una stretta correlazione fra il soprannaturale e gli stati alterati di
coscienza prodotte dal loro uso.
In una serie di studi etnobotanici condotti sull’uso tradizionale di piante medicinali nelle Ande
peruviane settentrionali sono stati raccolti dati sull’uso rituale di piante magiche appartenenti a
differenti famiglie e soprattutto al genere Brugmansia (Solanaceae). Successivi studi fitochimici e
farmacologici hanno confermato che queste piante agiscono realmente sul Sistema Nervoso
Centrale. Lo studio delle piante usate nel curanderismo del Perù settentrionale ha permesso così
non solo di trovare modelli per lo sviluppo di nuovi farmaci ma anche di difendere un notevole
patrimonio di biodiversità.
Anche nei Paesi sviluppati l’etnobotanica, attraverso lo studio degli usi, delle tradizioni, dei
rituali collegati all’uso delle piante contribuisce alla conoscenza del patrimonio culturale legato
all’identità culturale delle civiltà e, più in generale, alla conoscenza ed alla salvaguardia della
biodiversità.
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Plantas medicinales cubanas
Dr. José Antonio González Lavaut, Lic. María Isabel Domínguez Mesa
Centro de Química Biomolecular
Calle 200 y Ave. 21, Atabey, Playa, Ciudad de la Habana, Cuba
[email protected]
L
as especies vegetales han formado parte de los sistemas de la medicina tradicional sofisticada y tiene la existencia de miles de años. Encuentran hoy utilidad extendiéndose su uso,
e incluso, constituyen terapias preferidas para el tratamiento de algunas dolencias y enfermedades. La flora de Cuba posee un número elevado de géneros de plantas, cuyas especies poseen
propiedades medicinales reconocidas (descritas aprox. 1700, algunas de ellas endémicas).
De los países Antillanos, la flora cubana es la más rica en especies; además, posee un alto por
ciento de especies endémicas (51,3%). Sin embargo, no se ha explotado todo el potencial que
poseen. En Cuba muchas de las plantas medicinales de uso tradicional han pasado a formar parte
del Cuadro Básico de Medicamentos integrado por 32 productos elaborados a partir de las 26
plantas medicinales aprobadas para uso en humanos por el centro regulatorio estatal (CECMED).
El desarrollo científico de nuestros centros de investigaciones ha permitido evaluar la actividad
farmacológica de la mayoría de las plantas incluidas en el Cuadro Básico, así como su registro en
el CECMED. En el combate contra los microorganismos, el desarrollo científico ha propiciado el
interés por las plantas medicinales y las sustancias naturales bioactivas para combatir algunos
virus y hoy se investiga fuertemente en este campo. Los virus representan un reto importante
para la ciencia médica. Los conocimientos etnomédicos constituyen un instrumento de
información muy potente que permite guiar, con cierta discriminación, las investigaciones
científicas actuales en la búsqueda de nuevas terapias. Así se estudian especies atractivas desde
el punto de vista científico-productivo-comercial. Las propiedades etnomédicas de las plantas
cubanas han propiciado un impulso importante para satisfacer las necesidades y estimular la
conveniencia del uso y la transformación de los bioactivos en compuestos de utilidad terapéutica.
§
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Quimica y actividad biologica de chromolaenas colombianas,
fuente de flavonoides
Ruben D. Torrenegra, G. Oscar, E. Rodriguez A.
Grupo de Investigación Productos Naturales (PRONAUDCA), Bogotá, Colombia
E
l género Chromolaena está constituido por cerca de 200 especies distribuidas en América
del Sur, América Central y el oeste de India. Fue separado de Eupatorium por Robert King
& Harold Robinson, quienes basaron esta separación en descripciones morfológicas de varias
especies, estudios cromosómicos y biogeográficos. Las especies de este género se distinguen por
la presencia de involucros cilíndricos formados por filarias deciduos, agudos o redondeados, y
por un receptáculo que usualmente es plano en la parte superior. Está constituido por plantas
herbáceas o arbustos erectos o dispersos en el suelo. Tallos generalmente pubescentes. Hojas
simples, generalmente opuestas, sesiles o pecioladas, láminas foliares generalmente elípticas u
ovaladas, algunas veces lineares, glabras, glandulares o pubescentes, comúnmente con triple
venación, márgenes casi enteras o lobuladas.
Del género Chromolaena se han estudiado las especies, leivensis, opadoclinia, odorata, arnottiana, morii, collina, connivens, glaberrima, pseudoinsignis chasleae, y se han determinado
compuestos de tipo: sesquiterpenos, triterpenos, flavonoides principalmente flavanonoles,
sesquiterpenlactonas, alcaloides pirrolidínicos, diterpenos, ent-clerodanos, prostaglandinas
provenientes de ácidos grasos libres, chalconas metiladas, germacrenolidos y derivados del
labdano.
Se han realizado estudios de actividad biológica casi todos en Chromolaena odorata, pocos en
Chromolaena hirsute, y Chromolaena moritziana se ha reportado: actividad pesticida, actividad
repelente, efecto antiprotozoario, actividad insecticida, actividad tripanozoica, actividad antibacterial, actividad antimicobacterial, citotoxicidad, efectos antioxidante, mutagenicidad,
proliferación de queratocitos humanos y proliferación de fibroblastos entre otros.
• Taleb-Contini et al. (2004) evaluaron el efecto antiprotozoario de extractos totales y flavonoides purificados de Chromolaena hirsuta (Asteraceae), y determinaron la actividad antiprotozoaria contra tripomastigotes de Tripanosoma cruzi y promastigostes de Leishmania amazonensis; encontraron que los extractos crudos redujeron significativamente la viabilidad de los
parásitos, mientras que los flavonoides mostraron un efecto antiproliferativo de los mismos.
• Phan TT. et al. (2001) observaron que compuestos fenólicos de Chromolaena odorata como
ácidos fenolicos, p-hidroxibenzoicos, p-coumaricos, flavonas, flavanonas y chalconas protegen
las células dérmicas del daño oxidativo y reparan afecciones cutáneas.
• Bouda H. et al. (2001) observaron el efecto de aceites esenciales provenientes de hojas de
Chromolaena odorata en la mortalidad de Sitophilus curculionidae (Coleoptera) con una DL 50 de
6.78%.
• Thang P.T. et al. (2001) evaluaron el efecto antioxidante de los extractos de Chromolaena
odorata en la protección de fibroblastos dermales humanos en contra del daño producido por el
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peróxido de hidrógeno y la hipoxantina xantina oxidasa. Los resultados mostraron que para los
fibroblastos, la toxicidad de peróxido de hidrógeno o hipoxantina xantina oxidasa en las células
dependen de la dosis y para los queratinocitos, la relación dosis/dependiente de oxidante toxicidad fue comprobado sólo con peróxido de hidrógeno.
• Phan TT. et al. (2000), en su estudio, demostraron que el extracto Eupolin incremento la
expresión de varios componentes del complejo de adhesión y fibronectina por los queratinocitos
humanos; encontraron incremento en la expresión (dependiente de la dosis), de las integrinas b1
y b4 por el extracto en bajas concentraciones (0.1 y 1 μg/ml), pero la expresión se redujo a dosis
mayores de Eupolin (10μg/ml a 150μg/ml).
• Phan TT. et al. (1998) estudiaron la proliferación de fibroblastos y células endoteliales tratadas con extractos foliares (EtOH:H2O), de Chromolaena odorata (Eupolin). El mayor crecimiento
de los fibroblastos y las células endoteliales se encontró en concentraciones de 10μg/ml y
100μg/ml de extracto Eupolin, pero a concentraciones superiores a 250μg/ml observaron toxicidad.
En nuestro grupo de investigación, PRONAUDCA, se han estudiado especies Colombianas de
Chromolaenas y de las partes aéreas de Chromolaena leivensis se han aislado los flavonoides: 3,5dihidroxi-7-metoxiflavanona; 3,5-dihidroxi-7-metoxiflavona y 3,5,7-trihidroxi-6-metoxiflavona,
Las pruebas antitumorales realizadas con los flavonoides 3,5-dihidroxi-7-metoxi-flavanona y
3,5-dihidroxi-7-metoxiflavona con diferencias en la saturación de los carbonos C2 y C3 del anillo C,
permitieron establecer la relación entre la estructura y su actividad antitumoral. Este estudio
muestra que el flavonoide 3,5-dihidroxi-7-metoxiflavona (flavona) a diferencia del 3,5-dihidroxi-7metoxi-flavanona (flavanona) induce en la línea celular K562 (eritroleucemia) un cambio significativo de la polaridad de la membrana mitocondrial después de 8 horas de tratamiento, que se
mantiene a las 12 horas y que conduce a una disminución de la viabilidad celular. Aunque no se
observa una actividad definida de este flavonoide sobre el ciclo celular, se detectan claramente
las células apoptóticas entre 48 y 72 horas de cocultivo, luego de la activación de endonucleasas
efectoras, lo cual sugiere que la actividad antitumoral requiere la instauración en el anillo C de la
flavona.
En el estudio de la actividad antitumoral e inmunorreguladora de Chromolaena perglabra y
Chromolaena tacotana: se evaluó la actividad directa de los compuestos sobre líneas de células
tumorales bien caracterizadas, determinándose la inducción de apoptosis y los efectos sobre el
ciclo celular .
Se utilizaron flavonoides purificados de Chromolaena perglabra y Chromolaena tacotana
porque algunos de estos compuestos inhiben la proliferación del cáncer in vitro, otros poseen
una actividad antiproliferativa específica en las células de la leucemia humana.
Flavonoides purificados CT5-K2 (3,5-dihidroxi-7-metoxi-flavanona), CT4-J4 (3,5-dihidroxi-7metoxiflavona) de Chromolaena tacotana y CP8 (3,5,4´-trihidroxi-7-metoxiflavona), CP7
(3,5,7,3´,4´-pentahidroxiflavona y 5,7,3´,4´-tetrahidroxiisoflavona) de Chromolaena perglabra
utilizando la técnica azul de trypan a 24 y 48 horas, con concentraciones de los flavonoides
menores o iguales a 100μg/ml mostraron que las células K562 (eritroleucemia) presentan porcentajes de viabilidad del 90%, lo cual indica que los flavonoides a estas concentraciones no son
citotóxicos, como controles se utilizaron: EtOH, DMSO, etopoxido y vincristina.
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TORRENEGRA Rubén D., Guzmán Antonio J., Rodríguez Oscar E., 2007 SCIENTIA ET TECHNICA ISSN 0122-1701, EDICION
ESPECIAL ,, Análisis fitoquímico de la especie colombiana Chromolaena subscandens (Hieron.) R.M. King & H. Rob.
Y determinación de su actividad antimicrobiana, XIII; No 33; pág. 271
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Studies on traditional medicinal plants from Europe and Brasil
Irmgard Merfort
Inst. Pharm. Science, Dept. Pharm. Biol. Biotechnology, University Freiburg, Germany
A
n increasing number of biologicals including antibodies and growth factors have been
introduced in the market. Nevertheless, natural compounds from plants still play an
important role in the search for bioactive compounds serving as possible leads for the development of therapeutic drugs. Besides looking for natural compounds as leads our research also
focuses on creating a scientific basis for traditional medicinal plants. This can be done if the
effective compounds and the molecular mode of action have been found and the efficacy has
been proven. In the talk two successful examples are presented, in which the effective compounds have been elucidated and a contribution to the anti-inflammatory mode of action is given
and one example decribes the “proof of principle” where a natural compound is used as a lead.
Parapiptadenia rigida (Benth.) Brenan (Fabaceae), popularly known in Brazil as “Angico vermelho”, is a perennial tree native in South America. Preparations from its bark are used in traditional
medicine because of its astringent, expectorant, antiseptic and antihemorrhagic properties [1-3],
but no detailed phytochemical analysis has yet been performed. To increase our knowledge on
the biologically active compounds from P. rigida, the ethanolic extract of its bark was phytochemically analysed and 15 catechin derivatives were isolated and identified by 1D and 2D NMR (1H,
13C, COSY, HSQC, HMBC, NOESY) and ESI-MS spectroscopy analyses. 3”,4’-O-methyl-apocynin,
3”,4’-O-methyl-apocynin-B, epigallocatechin-(4β-8)-4’-O-methyl-gallocatechin, 4’-O-methylgallocatechin-(4α-8)-4’-O-methyl-gallocatechin, and (-)-epigallocatechin-3-O-ferulate have been
found for the first time and 4’-O-methyl-(-)-epigallocatechin-3-O-gallate for the first time from
natural sources, in addition to the four known compounds 4’-O-methyl-gallocatechin, 4’-Omethyl-epigallocatechin, 3’-O-methyl-(-)-epicatechin, and (-)-epigallocatechin-3-O-gallate. The
extract and some of the catechin derivatives were studied for their wound healing effect in the
scratch assay and gave promising results which suggest that plant preparations from P. rigida
and their effective ingredients may have beneficial effects as a wound healing remedy.
Arnica montana is a further example where the effective compounds are known and several
studies on the anti-inflammatory mode of action have been performed. Arnica preparations have
long been used for the symptomatic treatment of rheumatic complaints and recent clinical trials
have demonstrated the beneficial effects of Arnica preparations in the treatment of osteoarthritis (OA). The efficacy of Arnica is presumed to be mainly due to its anti-inflammatory properties
and inhibition of the transcription factor NF-κB. Here further insights are provided into its molecular mode of action. Arnica preparations suppress MMP1 and MMP13 mRNA levels in bovine and
human articular chondrocytes in a concentration-dependent manner and in a low concentration
range. This suppression may be due to inhibition of DNA binding of the transcription factors AP-1
and NF-kB. Interestingly, sesquiterpene lactones present in the preparations were always more
active than the pure compounds, demonstrating the advantage of using plant preparations [4].
As mentioned above effective compounds can also serve as interesting leads. Here, an example of an elastase inhibitor derived from Verbesina turbacencis is presented. Human neutrophil
elastase (HNE) is involved in the regulation of inflammatory processes and controlled by endogenous proteinase inhibitors. Abnormally high levels of HNE can cause degradation of healthy
tissues contributing to inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis, but also delayed
wound healing. Continuing our research to look for HNE inhibitors the recently developed
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binding mode model was used for a group of cinnamic acid derivative elastase inhibitors and
bornyl-(3,4,5-trihydroxy)-cinnamate was created. This ligand exhibited improved binding affinity
predicted by means of free energy calculations. An organic synthesis scheme for the ligand was
developed and its inhibitory activity was tested towards the isolated enzyme. Its IC 50 value was
found to be 3 times lower than that of the starting compound, which agrees well with the computational result showing the high potential of free energy calculations as a tool in drug development [5].
References
1. Torres, CM & Repke, DB. NY: Haworth Press, 2006.
2. Souza, GC. et al. (2004) Rev. Bras. Pl. Med. 6:83-91.
3. Souza, GC. et al. (2004) J. Ethnopharmacol. 90:135-143.
4. Jäger, C., et al., (2009) Planta Med. 75:1-7
5. Steinbrecher et al., (2008) Bioorg. Med. Chem. 16:2385-2390
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Uso da cromatografia contra-corrente no isolamento de
substânicas de origem vegetal
Gilda Guimarães Leitão
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Av. Carlos Chagas Filho, 373,
Bloco H, Centro de Ciências da Saúde, Ilha do Fundão, 21.941-902, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
[email protected]
A
cromatografia contra-corrente (CCC) é essencialmente uma forma de cromatografia de
partição líquido-líquido, na qual a fase líquida estacionária é retida no aparelho sem o uso
de suportes sólidos. Dessa forma, não há perdas por adsorção e evita-se a degradação de
substâncias por meio de reações indesejadas com o suporte sólido, muito comum no caso de
sílica. O princípio da separação envolve a partição de um soluto entre duas fases imiscíveis e a
proporção de soluto que passa para cada uma das fases é uma função do seu coeficiente de
partição (K).
A técnica da cromatografia contra-corrente tem sido bastante utilizada na separação de
produtos naturais, principalmente no isolamento de substâncias polares, apesar de não ser
restrita a esse tipo de substâncias. Nesta apresentação são mostrados exemplos de separações
isocráticas e através de gradientes. Triterpenos damarânicos da partição em diclorometano de
folhas de Cabralea canjerana (Meliaceae), fração ativa em testes contra Mycobacterium tuberculosis, foram isolados com o sistema de solventes hexano-acetato de etila-metanol-água 1:1,5:2,5:1
v:v:v:v, fase aquosa como fase móvel.O ácido shoreico foi o principal triterpeno deste extrato.
Apresentamos também o isolamento de sesquiterpenos do tipo triquinânico do óleo essencial de
Anemia tomentosa com sistema de solventes não-aquoso, composto de hexano-acetonitrila.
Quatro sesquiterpenos foram isolados, inclusive um inédito. O extrato em acetato de etila desy
mesma samambaia, A. tomentosa, forneceu flavonóidfes que forma isolados em modos de
eluição normal e isocrático. No modo de eluição por gardiente, um maior número de substâncias
pode ser isolada. As separações foram feitas nos aparelhos da P.C. Inc (Multilayer Coil SeparatorExtractor) r Quattro HT-Prep, da AECS em colunas de 80ml e 95ml respectivamente; com rotação
de 850rpm coletando-se frações de 4ml e fluxo de fase móvel de 2ml/min. Todas as separações
levaram cerca de três horas (exceto no caso dos gradientes), com consumo de solvente inferior a
2l. Esses exemplos mostram a versatilidade da cromatografia contra-corrente no isolamento de
produtos naturais, além das vantagens da economia de tempo e solvente.
Agradecimentos: CNpq, FAPERJ e CAPES.
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Frutas tropicales, antioxidantes y fibra dietetica antioxidante:
propiedades y aplicaciones en nutricion y salud
F.D. Saura-Calixto
Dpto. Metabolismo y Nutrición, ICTAN. Consejo Superior de Investigaciones Científicas
Ciudad Universitaria, 28040 Madrid
[email protected]
L
a fibra dietética y los antioxidantes son dos constituyentes de los alimentos vegetales que
tienen un papel esencial en salud gastrointestinal y en disminución de factores de riesgo
de enfermedades crónicas (1), y que tanto en investigación como en desarrollo de productos se
abordan separadamente.
En este contexto, surge la fibra dietética antioxidante que combina en un solo producto los
efectos de la fibra y los antioxidantes naturales (2). Las fibras antioxidantes contienen al menos
un 50% de fibra dietética y una capacidad antioxidante/secuestrante de radicales libres mínima
equivalente a 50-100 mg de vitamina E por gramo de fibra. Esta capacidad antioxidante, que no
presentan las fibras del mercado actual, es debida a el alto contenido de compuestos
polifenólicos asociados a la matriz de fibra (3).
La fibra antioxidante libera sus antioxidantes gradualmente en el intestino delgado y en el
colon produciendo un estatus antioxidante y protector de radicales libres en la mucosa intestinal.Estudios clínicos realizados con voluntarios han demostrado que los polifenoles de la fibra
antioxidante son biodisponibles y su ingesta conlleva una elevación en la capacidad antioxidante
plasmáticas y una disminución significativa en parámetros de riesgo de enfermedades cardiovasculares (4)
Las frutas tropicales son una fuente idónea de fibra antioxidante. Precisamente las primeras
fibras de este tipo se encontraron en mango, piña y guayaba. Recientemente se han reportado
otras numerosas frutas tropicales no tradicionales con características muy adecuadas para la
obtención de fibra antioxidante y/o antioxidantes naturales (5)
En esta ponencia se revisaran las propiedades y aplicaciones potenciales de la fibra antioxidante como suplemento dietético y como ingrediente funcional en alimentos, y se reportará su
contenido en frutas tropicales no tradicionales seleccionadas.
Referencias
1. Saura-Calixto F et al. Dietary fiber and associated antioxidants in fruit and vegetables. In “Fruits and Vegetable
Phytochemicals”. Wiley- Blackwell Pub, Iowa, USA. Chapter 8 , pp 223-234 , 2010
2. Alexander, C. Two for the price of one: antioxidant dietary fiber. FoodEng.Ingr.2007,32, (1), 18.
3. Goñi, I and Saura-Calixto, F . Antioxidant dietary fibre Concept and properties Agro Food Industry Hi-Tech 2009; 20:
20-22
4. Pérez-Jiménez, J et al. Effects of grape antioxidant dietary fiber in cardiovascular disease risk factors. Nutrition
2008; 24 : 646-53
5. M.S. Rufino et al. Bioactive compounds and antioxidant capacity of 18 non-traditional tropical fruits from Brazil.
Food Chem. (in press)
§
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Composición química del aceite esencial de las hojas y frutos
de Morella Funckii (myricaceae)
Ciro Rodríguez-Villanueva1, Pablo A. Chacón-Morales1, Juan M. Amaro Luis1,
Luis B. Rojas2, Rosa Aparicio2
2
1
Laboratorios de Productos Naturales. Facultad de Ciencias.
Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia. Universidad de Los Andes. Mérida. Venezuela
[email protected]
Myricaceae es una pequeña familia de Agiospermas, cuya delimitación genérica ha sido muy
controvertida; en la actualidad se reconocen sólo cuatro géneros: Myrica, Morella, Comptonia y
Canacomyrica. Las especies iberoamericanas inicialmente incluidas en el género Myrica fueron
transferidas recientemente al género Morella, y dichos cambios estuvieron sustentados por datos
fitoquímicos, en particular por la composición de sus aceites esenciales. En los géneros Myrica y
Morella, el estudio de estos aceites ha adquirido gran importancia, a tenor de la amplia variedad
de actividades biológicas y farmacológicas que los mismos poseen. Por otro lado, es bien sabido
que algunos individuos de estos géneros contienen substancias astrigentes en la corteza de sus
raíces; sus frutos se han utilizado en la medicina popular para varios propósitos, pero sobre todo,
han sido empleados para la extracción de ceras aromáticas. En conexión con lo anterior, iniciamos un proyecto centrado en el estudio sistemático de los aceites esenciales de las especies
venezolanas del género Morella. En esta ponencia damos cuenta de los resultados obtenidos en
el análisis de los aceites de las hojas y frutos de la Morella funckii (A. Chev.) C. Parra, especie
ampliamente distribuida en los páramos de los Andes
Venezolanos. Las hojas frescas de esta planta (≈ 1 Kg) y los frutos
(≈ 800 g) debidamente triturados, se sometieron por separado
a hidrodestilación por 4 horas, utilizando una trampa de
Clevenger. Los aceites extraídos fueron analizados por
Cromatografía de Gases acoplada a espectrometría de masas en
un equipo Hewlett Packard, mod. 5973. Haciendo uso de la base
de datos WILEY275.L, se identificaron 13 compuestos en el aceite
de frutos, observándose como mayoritarios α-bisabolol [1]
(73.21%), óxido de bisabolol B [2] (6,45%) y α-pineno (5.24%). En el
aceite de las hojas se identificaron 23 compuestos, siendo igualmente mayoritarios los sesquiterpenos [1] (70,48%) y [2] (7,30%),
además del 2,4-dimetil-2,4-heptadienal (5,12%) y el cis-α-bisaboleno [3] (4.07%).
Se discuten los espectros de RMN uni- y bidimensionales del -bisabolol [1]. En la actualidad se
adelantan estudios sobre la actividad biológica de estos aceites, dado que es bien conocido que
los sesquiterpenos [1] y [2] son los principales responsables de la actividad espasmolítica y
antiinflamatoria de la manzanilla (Matricaria recutita).
Proyecto financiado por el MCT (Subvención N° 2008000937)
Palabras Clave: Morella, Myrsinaceae, aceite esencial, GC-MS
¬
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Alternariol e derivados produzidos por Phomopsis sp., um
fungo endofítico de Senna Spectabilis
Vanessa M. Chapla1, Lisinéia M. Zanardi1, Dulce H. S. Silva1, Márcia N. Lopes1,
Vanderlan da S. Bolzani1, Angela R. Araujo1
1
NuBBE - Instituto de Química, UNESP, CEP 14801-970, Araraquara, SP, Brasil
Fungos endofíticos são microorganismos que habitam, assintomaticamente, os espaços inter e
intracelulares dos tecidos de um vegetal, durante todo ou parte de seu ciclo de vida.1 Esses
fungos têm se revelado uma fonte prolífica de metabólicos especiais novos e bioativos, podendo
produzir de toxinas a antibióticos, hormônios de crescimento e outras substâncias de interesse
biotecnológico. Dentro deste contexto, esse trabalho descreve o isolamento e a determinação
estrutural das substâncias produzidas pelo fungo endofitico Phomopsis sp. cultivado em milho.
Phomopsis sp. foi inoculado em placa de Petri por sete dias a t.a., utilizando batata dextrose
ágar (BDA) como meio de cultura. A seguir, pequenos discos do micélio foram inoculados em
frascos de Erlenmeyers contendo 90g gramas de milho e 75mL de água, previamente esterilizados e submetidos a cultivo no modo estacionário por 21 dias a 26°C. Terminado o período de
incubação, as culturas sólidas foram trituradas, e extraídas com MeOH (3 x 250mL), o micélio
filtrado e o solvente evaporado fornecendo 9,15g de extrato bruto. Este foi submetido a uma
partição com ACN e HEX, fornecendo os respectivos extratos brutos.
O extrato ACN (2,90g) foi fracionado em coluna de sílica gel (eluente CHCl 3:CH3OH em ordem
crescente de polaridade) fornecendo 31 subfrações, que foram codificadas M-1 a M-31 e reunidas
após criteriosa analise por CCDC. A subfração M(18-20) foi submetida a CLAEprep (Phenyl,
H2O:CH3OH (60:40 até 0:100% em 40'+10' em 0:100%, fluxo 10mL.min -1, γ=235nm) e forneceu a
citocalasina H (1), citocalasina J (2), 5'-epialtenuene (3) e o alternariol monometil éter (4). As
frações M-25 e M-30 foram recristalizadas com CHCl3 e forneceram o alternariol (5) e o 2-hidroxialternariol (6), respectivamente. As estruturas das substâncias isoladas, foram identificadas por
RMN 1 e 2D, espectrometria de massas e comparação com a literatura.
A substâncias 4 e 5 são micotoxinas encontradas em alimentos, sendo que o consumo destes
esta associado uma maior incidência de câncer de esôfago, devido às propriedades mutagênicas
e genotoxicas5. Este fato sugere uma interação ecológica entre Phomopsis sp. e Senna spectabilis, uma vez que na época da coleta, a espécie encontrava-se saudável. Esperamos com esse
trabalho estar contribuindo para melhor compreensão sobre a relação dos fungos endofíticos
com as espécies vegetais hospedeiras.
Agradecimentos
BIOTA e BIOprospecTa/FAPESP pelo auxílio financeiro e à CAPES e CNPq pelas bolsas de estudos concedidas.
Referências
1. GUNATILAKA, A. A. L. J. Nat. Prod. 2006, 69, 509-526.
2. CHAPLA, V. M. et al. In: BCNP, 2009.
3. CHAPLA, V. M. et al. In: SBQ-Nacional, 2009.
4. SILVA, G. H. 2005. 306p. Tese de doutorado em Química- Instituto de Química -UNESP.
5. PFEIFFER, E. et al. Mol. Nutr. Food Res., 2007, 51, 307-316. ¬
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Antihypertensive and vasorelaxant activities of Aspidosperma
Tomentosum are mainly through calcium channel blockade
Furtado F. F.1, Tenório E. P.2, Sant’Ana A. E. G.3, Aquino P. G. V.3,
Araújo-Júnior J. X.2,3, Ribeiro Ê. A. N.2, Medeiros I. A.1
1
Laboratório de Tecnologia Farmacêutica/ Universidade Federal da Paraíba, 58059-900
João Pessoa-PB, Brazil
2
Escola de Enfermagem e Farmácia/UFAL, Cidade Universitária, 57092-970, Maceió-AL, Brazil
3
Instituto de Química e Biotecnologia/UFAL, 57072-970, Maceió-AL. Brazil
The aim of the present study was to evaluate the possible mechanism of the vasorelaxant
action of ethanolic extract from Aspidosperma tomentosum (EEAT) in isolated rat mesenteric
artery rings, and to establish its antihypertensive activity in vivo. The EEAT relaxed, in a concentration and equipotent manner, Phe pre-contracted rat mesenteric artery rings both with intact
(EC50 = 37.07 ± 4.72 μg/mL) and denuded endothelium (EC 50 = 32.93 ± 3.16 μg/mL). These results
demonstrated that the vascular endothelium is probably not participating in the vasorelaxant
response induced by EEAT. In preparations pre-incubated with KCl 20 mM without endothelium
the vasorelaxant activity was not changed (EC 50 = 37.42 ± 8.4 μg/mL). In endothelium removal
mesenteric rings, application of the Phe (10 -9 -10-5 M), induced contractions in a concentrationdependent manner. These contractions were reduced in presence of EEAT. In rings precontracted with KCl 80 mM, indicating a blockade of Ca 2+ influx through Cav (EC50= 26.38 ± 3.1
μg/mL). In rings pre-contracted with PGF2α (EC50 = 44.88 ± 11.9 μg/mL), the relaxation was similar
to the one obtained with Phe or KCL 80 mM. The addition of the CaCl 2 (1-30 mM) in solution
without Ca2+ resulted in contraction-dependent of the concentration in the rings of mesenteric
artery. These contractions were significantly reduced in the presence of the EEAT, reaffirming the
possibility of the blockade of the Cav. In pre-contracted preparations with BayK 8644 an activator of Cav-L, the EEAT induced relaxation in a equipotent manner (EC 50 = 34.59 ± 4.48 μg/mL),
indicating to be the blockade of the Cav a probable mechanism in which the EEAT induces vasorelaxation. The EEAT also reduced the Phe induced transient contraction in Ca 2+-free solution,
however it did not promote alterations of the transient contractions induced by caffeine, suggesting that the EEAT promotes inhibition of the of Ca 2+ release just of the IP3-sensitive stores. The
antihypertensive effect of EEAT was determined in spontaneously hypertensive rats (SHR). A
single oral administration of the extract (200 mg/kg) exhibited a significant decrease in mean
arterial pressure in SHR rats. Our results suggest that EEAT induce vasorelaxation through an
blockade of Ca2+ channels and inhibition of the mobilization of Ca 2+ of the IP3-sensivite Ca2+ stores
and also causes an antihypertensive effect.
Financial support: CNPq, FAPEAL and PPSUS-MS
Acknowledgements
FAPEAL, CNPq, UFAL, PPSUS-MS ¬
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Valutazione del grado di sovrappeso e del rischio di contrarre
malattie metaboliche in bambini della scuola primaria
Lillà Lionetti1, Gina Cavaliere1, Ilaria Soriente1, Paolo Attianese2
1
Dipartimento delle Scienze Biologiche, Università degli Studi di Napoli “Federico II”
2
[email protected]
Introduzione
L’epidemia globale dell’obesità infantile è associata ad un aumento del numero di casi di
sindrome metabolica. In Italia, la regione Campania ha la più elevata percentuale di bambini in
sovrappeso ed obesi. Identificare i bambini a rischio di contrarre malattie metaboliche è importante per la prevenzione di tali patologie in età evolutiva ed in età adulta. E’ stato suggerito che il
rapporto circonferenza vita/altezza può essere un utile indice di predizione del rischio metabolico
anche in età evolutiva.
Scopo
Lo scopo di questo lavoro è stato quello di individuare i bambini a rischio di contrarre malattie
metaboliche non solo tra i bambini in sovrappeso ed obeso ma anche tra i bambini normopeso.
Disegno Sperimentale e Metodi
Sono stati esaminati 491 bambini, 257 di sesso maschile e 234 di sesso femminile, dell’età
compresa tra gli 8 ed i 9 anni frequentanti il terzo e quarto anno della scuola primaria dei circoli
didattici di Nocera Inferiore (provincia di Salerno, Campania). Sono stati misurati il peso, l’altezza
e la circonferenza vita. Sono stati quindi determinati l’indice di massa corporea (kg/m2) ed il
grado di sovrappeso in base ai percentili di Cacciari (2006). E’ stato determinato anche il rapporto
circonferenza vita (cm)/ altezza (cm) e sono stati considerati i valori di cut-off di 0,5 per il rischio
moderato e di 0,65 per il rischio elevato di andare incontro a malattie metaboliche.
Risultati
Il 51,1% dei bambini esaminati è risultato normopeso, il 7,1% sottopeso, il 27,1% sovrappeso ed il
14,1% obeso con minime differenza tra il campione maschile e quello femminile. Secondo il rapporto vita/altezza l’87% dei bambini obesi presentava un rischio metabolico moderato e il restante
13% un rischio metabolico elevato. Il 75% dei bambini in sovrappeso ed il 12,4% dei bambini normopeso presentava un rischio metabolico moderato (14,5% delle femmine e 10,3% dei maschi normopeso). Nessun bambino sovrappeso o normopeso presentava un rischio metabolico elevato.
Conclusione
L’utilizzo del rapporto vita/altezza ha permesso di evidenziare che la totalità dei bambini obesi,
la maggior parte dei bambini sovrappeso e una percentuale non trascurabile (12,4%) di bambini
normopeso presentano una distribuzione di grasso corporeo tale da far aumentare il rischio di
contrarre malattie metaboliche. L’utilizzo del rapporto vita/altezza può essere utile nella identificazione dei bambini da sottoporre ad interventi di educazione alimentare al fine di prevenire lo
sviluppo di malattie metaboliche non solo tra i bambini sovrappeso o obeso ma anche tra i
bambini normopeso. ¬
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Evaluation of the antiinflammatory properties of extracts
from leaves of Samanea Saman
Antony de Paula Barbosa, Bernadete Pereira da Silva, José Paz Parente
Laboratory of Medicinal Plant Chemistry, Natural Products Research Nucleus, Health Sciences Centre, Federal
University of Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brazil
Samanea saman (Leguminosae) is a tree, native of the New World, widely distributed in tropical
regions, especially in Brazil. In the popular utilization is used to treat skin infections, gastric
inflammation and parasitic infestations, but there is no report in literature on its phytochemical.
In order to confirm the utilization of this species in the traditional medicine, the antiinflammatory
activity of the chloroform extract was investigated using an acute inflammation model. The
phytochemical screening revealed the presence of alkaloids, flavonoids and triterpenes as the
main components of the chloroform extract, which showed a significant antiinflammatory
potential in comparison with the reference compound dexamethasone. The extract exhibited a
moderate control of the initial phase of inflammation, provoking an inhibition of edema formation similar to the reference compound dexamethasone. However, the extract exhibited lesser
activity when compared with control in the delayed phase of inflammation. The results obtained
suggest a significant antiedematogenic property of the chloroform extract of Samanea saman,
justifying the use of this plant in the traditional medicine for the treatment of inflammatory
conditions. ¬
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Trofofitohidrogeoterapiacuantica
Pedro Aquilino Bonilla
Frente Comunitario Científico para el Salto Cuantico en la Salud (FRECOCICUAS)
Distrito Capital - Caracas - Venezuela
Telfs. (0416)8294980 - (0426)9065784 - (0212)4942512
[email protected], [email protected]
Al juntar las palabras y términos que se usan para definir estudios determinados y sus objetivas
aplicaciones lo hago para indicar el método o sistema que he utilizado y aplico con seguridad de
su eficacia durante cuarenta (40) años, a las personas de todas las edades por mi tratadas para
aliviar y curar sus dolencias y/o enfermedades así como también mantener un estado optimo de
salud y en todo caso restablecer y mantener el funcionamiento del sistema inmunológico del
organismo o cuerpo humano, en muchos casos con la desconfianza de sus resultados por la
persona tratada y sus familiares, pero para ellos, como ultima instancia al no lograr resultados,
solución, alivio o cura a sus dolencias ante la ineficacia de los medicamentos alopáticos y/o
farmacológicos utilizados por la medicina convencional. Esto es Trofología,(alimentación)
Fitoterapia,(plantas medicinales) Hidroterapia,(agua) Geoterapia (grea virgen, lodo, barro, arcilla,
piedras , cristales de cuarzo) y Cuàntica (mente, energía y vibraciones). Todo siempre con el
cuido de que no hay efectos colaterales si se lleva un orden con conocimiento científico por el
estudio, saberes ancestrales, las experiencias vividas y más que con la esperanza la seguridad de
su efectividad comprobada sin omitir resultados positivos inesperados e inexplicables en algunos
casos. ¬
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Multimedia sobre el uso científico de las frutas. Principales
resultados en la provincia de Guantánamo
Msc. Marlenis Cala Cala, Lic. Karel Lamoru Moreira, Katia Vazquez Cala,
Anna Andrade Lacosta
Unidad de ciencia y tecnologia Ministerio de Ciencia Tecnologia y Medio Ambiente
13 norte, e/ ahogados y el 1 este. Guantanamo. Cuba
[email protected]
El equilibrio nutricional del organismo humano juega un papel muy importante en la salud, es
por ello que se elaboró una multimedia para el uso científico de las frutas a través de una de las
terapias de la Medicina Natural, la Frutoterapia, técnica terapéutica, basada en las sustancias
medicinales de las frutas como son las vitaminas, proteínas, sales minerales, oligoelementos,
entre otras., que ayudan a metabolizar los azúcares, los lípidos y las proteínas, además de actuar
en los órganos afectados.
Está conformada por cuatro tópicos técnicos: Generalidades, Usos y propiedades fitoterapeutitas de 75 frutas, Fruta y Belleza y Fruta y Salud. Es destacar que la información base del producto
informático, fueron tomados del libro El poder curativo de 105 frutos del autor colombiano
Albert Morales. En cada uno de los tópicos antes mencionados obreros, técnicos y profesionales
de cualquier pueblo y comunidad pueden encontrar los beneficios y las limitantes del consumo
de las frutas.
Aspecto muy importante en la Multimedia resultan los datos agrotécnicos (época de
plantación, distancia de plantación, plantas por hectáreas, entrada en producción en meses/años,
rendimiento medio en t/ha y la época de cosecha) y las imágenes de las principales especies
cultivadas en el país, lo que ha propiciado realizar proyectos y programas de reforestación y
forestación para elevar e incrementar las frutas exóticas dada lo exigencia de los sectores de la
salud, la industria y el turismo, para incrementar la calidad de la salud humana y animal, diversificar los productos para las posibles exportaciones a los países Latinoamericanos, Europa. ¬
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Evaluación de la fitoterapia en la Red Pública del Brasil
Ely Eduardo Saranz Camargo, Anselmo Gomes de Oliveira
Faculdade de Ciências Farmacêuticas - UNESP - Araraquara - SP
[email protected]
En Brasil, vários municípios y estados, implantaron programas de distribución de plantas
medicinales y medicamentos fitoterápicos, com el objetivo de garantizar el acceso al medicamento. En este sentido, fueron encaminados formulários y tambiém fueron realizadas visitas in
loco a los principales programas de fitoterapia del país. Entre los programas visitados, se destaca
el de Farmácias Vivas, en el Estado de Ceará, creado en 1985. Con la publicación de una Ley
estadual, el programa expandió para 31 municípios del estado, que adoptaron el modelo inicial
del programa. Otros programas de destaque son el de Ipatinga, interior del Estado de Minas
Gerais, Rio de Janeiro y del Distrito Federal, donde se verificó que todos poseem oficinas farmacéuticas y huerta para el cultivo de las espécies medicinales.
Los resultados obtenidos por los formulários, no fueron diferentes de los observados en las
visitas técnicas, donde del total enviado fueron devolvidos 36% e de esos, 55% están en actividad
en el país. Las regiones nor-este y sud-este concentran el mayor número de programas y tiempo
mayor de actividad. Sin envargo la región sud-este también se destaca en número de programas
que abandonaron sus actividades. Los motivos relacionados a la implantación de los programas
fueron atribuídos a la demanda de la población en utilizar plantas medicinales y fitoterápicos. La
iniciativa que llevó a la implantación de los programas fué atribuída en aproximadamente 58%, a
los gestores, a pesar de las dificuldades encontradas en la implantación, em 91% de ellos, atribuyeron a la falta de recursos financieros.
Así mismo, esos municípios usaron recursos própios para efectivar los serviciós. Un factor
bastante fuerte, que asegura su continuidad, atribuye-se en aproximadamente 50% de ellos, estar
em relación directa con asociaciones y con comunidades. En aproximadamente 80% de los
programas los médicos que no aderieron a los servicios de fitoterapia, atribuyem al hecho de no
poseer conocimientos, y 71% presentaron como estratégia para aumentar la adesión de prescriptores, cursos de capacitación. Desa forma, esos programas presentan como medidas para
evaluación de la eficácia de los fitoterápicos, las consultas médicas. Sin envargo, todos los
municípios que poseen programas de fitoterapia utilizam las informaciones de los pacientes para
evaluación de la eficácia de las plantas medicinales y fitoterápicos. De los 36% de los programas
en actividad, 50% cultivan espécies medicinales y aun del total, aproximadamente 67% realizam
contról de calidad en las plantas medicinales y en los fitoterápicos. Sin envargo en casi todos los
programas el contról de calidad no atiende a la legislación vigente.
Con la aprovación reciente de la Política Nacional de Plantas Medicinales por el govierno
brasilero, la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária, juntamente con el Ministério da Saude,
viene promoviendo discusiones a fin de intentar desarrollar uma legislación específica para
regular el sector, y con eso se espera que muchos otros programas puedan ser implantados,
consolidando el uso de las plantas medicinales y medicamentos fitoterápicos en el Sistema Único
de Salúd.
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MATOS, FJ Matos. Farmácias vivas: sistemas de utilização de plantas medicinais projetado para pequenas
comunidades. 3 ed. Fortaleza: EUFC, 1998, 220 p.
SACRAMENTO, H. T., 2000. Fitoterapia nos Serviços Públicos do Brasil. Coordenação Nacional de Plantas Medicinais
em Serviços Públicos - Brasil. Secretaria Municipal de Saúde de Vitória - ES. ¬
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C-glycoside flavonoids from the scapes of Syngonanthus
Nitens: isolation and structural elucidation based on a
preliminary liquid chromatography-electrospray ionization
tandem mass spectrometry profiling
Felipe Hilario1, Mariana Pacifico1, Assunta Napolitano2, Milena Masullo2,
Wagner Vilegas1, Sonia Piacente2, Lourdes Campaner dos Santos1*
1
São Paulo State University - UNESP, Institute of Chemistry, Organic Chemistry Department, CP 355, CEP 14800-900,
Araraquara, SP - Brazil
2
Università degli Studi di Salerno, Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, via Ponte Don Melillo, 84084 Fisciano (SA) Italy
Syngonanthus nitens (Bong. Ruhland) or Golden grass is a grass-like species of Eriocaulaceae [1]
which exists in the region of Jalapão, state of Tocantins, Brazil - the region is part of the Brazilian
cerrado. The handcrafts made from coils of S.nitens scapes, that are sewn tightly together with
buriti palm (Mauritia flexuosa) strips, represent important source of income in Jalapão [2].
With the aim to define the metabolic profile of S.nitens scape, an analytical approach using
HPLC-ESI-ITMS technique was developed. The analysis of TIC chromatogram owed to methanolic
extract of S.nitens scape highlighted the presence of different compounds belonging to flavone
and flavanone classes. In particular, careful study of HPLC-ESIMS n spectra of respective ion peaks
allowed identifying these molecules as C-glycosilated flavonoids.
To confirm these results, a phytochemical procedure was developed to isolate each compound, and NMR mono- and bidimensional experiments were carried on to unambiguously assign
the chemical structure of each metabolite. Although flavones have been previously described in
Eriocaulaceae family, to the best of our knowledge this is the first report of flavone molecules in
S. nitens.
References
[1] Giulietti A.M., Scatena V., Sano P.T., Parra L.R., Queiroz L.P., Harley R.M., Menezes N., Yseppon A.M.B., Salatino A.,
Salatino M., Vilegas W., Santos L.C., Ricci C.V., Bonfim M.C.P., Miranda E.B. (2000) In Monocots: Systematics and
evolutions. (Ed). CSIRO Publishing, Austrália. 580-588
[2] Schmidt, I.B. Etnobotânica e Ecologia Populacional de Syngonanthus nitens: Sempre-viva utilizada para artesanato
no Jalapão, Tocantins. 2005. Dissertação (Mestrado em Ecologia) - Universidade de Brasília, 2005.
Acknowledgements
FAPESP, CNPq, CAPES and PROPG-UNESP ¬
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Potencial uso de la raíz de Ruellia Tuberosa L. en la diabetes y
en la nefropatía diabética
Ciangherotti Carlos1, Maldonado Ana-Maria2, Usubillaga Alfredo4, Cegarra Jesus5,
Orsini Giovannina3, Guerrero-Analco Jose6, Salazar-Bookaman Margarita1,
Mata Rachel6, Israel Anita
1
Unidad de Cultivo Celular
Unidad de Neuropéptidos
3
Herbario Ovalles Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela
4
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia
5
Herbario (MER), Facultad de Ciencias Forestales y Ambientales,
Universidad de Los Andes, Mérida Venezuela
6
Departamento de Farmacia, Facultad de Química, Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), México City,
D.F. México
2
Ruellia tuberosa L. (Acanthaceae), llamada yuquilla, en Venezuela, es una planta utilizada
popularmente para el tratamiento de la diabetes. En los últimos años hemos estudiado la actividad farmacológica del extracto acuoso de la raíz de esta especie (RT). En un modelo de ratas con
diabetes inducida por estreptozotocina, la administración oral del RT produjo una disminución
significativa de la glicemia en comparación con el grupo control. Asimismo, en ratas normales fue
capaz de producir un efecto hipoglicemiante. En condiciones de hiperglicemia el riñón sufre
daño, mediado principalmente por un aumento del estrés oxidativo y de la expresión de
proteínas de la matriz extracelular, conduciendo a la fibrosis y esta a la proteinuria, siendo este
último parámetro un importante marcador de la lesión renal. Recientemente, en nuestro laboratorio fue demostrada la actividad antioxidante del RT in vitro, por lo que evaluamos el efecto del
extracto sobre el daño renal en ratas con diabetes inducida por la estreptozotocina. El tratamiento fue administrado una vez al día durante 4 semanas y la proteinuria fue determinada de
manera basal y al final de cada semana de experimentación, utilizando el método espectrofotométrico de Pesce y Strande (1973). El extracto acuoso de R. tuberosa L. produjo un efecto
antiproteinúrico a partir de la segunda semana de experimentación. Adicionalmente, la RT
produjo un efecto protector in vitro sobre la citotoxicidad inducida por altas concentraciones de
glucosa en células de epitelio renal en cultivo, así como también revirtió la disminución de la
actividad de las enzimas antioxidantes: catalasa y superoxido dismutasa inducida por la alta
glucosa. Estos resultados sugieren que además de la actividad antidiabética, esta especie es un
potencial protector del daño renal producido durante la diabetes, contribuyendo a la validación
del uso tradicional de la planta.
Palabras claves: Ruellia tuberosa, Diabetes, Daño renal, proteinuria, enzimas antioxidantes. ¬
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Sustainable production of galanthamine by both in vitro
culture and agricultural crops of highly galanthaminecontaining plants (suprogal)
L. Torras-Claveria1, S. Berkov1, A. Zacharaki1, J. Bastida1, F. Viladomat1, C. Codina1
1
Department of Natural Products, Plant Physiology and Edaphology, Faculty of Pharmacy, University of Barcelona,
Avda. Joan XXIII s/n, 08028, Barcelona, Catalonia, Spain
Amaryllidaceae type alkaloids are known to be responsible for many pharmacological activities
such as antiviral, antitumour or inhibition of acetylcholinesterase. One of them, galanthamine, is
used and marketed for the treatment of Alzheimer’s disease. SUPROGAL is a collaborative
research project funded by the European Commission focused on the sustainable production of
galanthamine by both in vitro culture and agricultural crops of highly galanthamine-containing
plants. Although galanthamine is obtained by organic synthesis and is the subject of various
patents, the commercial manufacturing process is very complex and costly. Thus, galanthamine is
also being extracted from natural sources such as Leucojum, Galanthus and Narcissus species,
which belong to the Amaryllidaceae plant family. Both Galanthus and Leucojum plants are very
widespread in the Eastern European countries whereas Narcissus plants are mainly distributed in
the Mediterranean region. For industrial purposes, L. aestivum plants are gathered from wild
populations in their natural habitat, which is causing increasing problems regarding quality of the
plant material as well as depletion pressure on the natural populations of L. aestivum. The different partners that constitute the consortium are AgroBioInstitute (Bulgaria), BioPlanta
(Germany), Bulphytooils (Bulgaria), Holland BioDiversity (Netherlands), Ludwig (Netherlands)
and VitroFlora (Poland). All of them are working in close collaboration to achieve the main aim of
the project, carrying out specific tasks and activities, such as micropropagation and in vitro
culture of amaryllidaceous plants, in vitro biomass production, conventional propagation and
cultivation, extraction and purification of galanthamine, and marketing. In this project, the
Faculty of Pharmacy of the University of Barcelona is involved in the analysis of galanthamine and
related alkaloids in the propagated and cultivated plants and in the in vitro obtained plant materials, as well as looking for new sources of galanthamine.
Plants of the genus Narcissus are well-known for their ornamental value, resulting in the
development of a large number of cultivars. Additionally, they have been found to exhibit notable acetylcholinesterase inhibitory activity (López et al., 2002). In this work, GC-MS analysis,
which is a proven fast and reliable method for the identification of Amaryllidaceae alkaloids
(Berkov et al., 2008), has been used to determine both the alkaloid profile and galanthamine
content in different Narcissus cultivars in the search for new sources of galanthamine or related
compounds.
Bulbs of Narcissus cultivars were purchased from Dutch breeders and planted in December
2010 in the greenhouse of the Faculty of Pharmacy, University of Barcelona. Samples of each
cultivar were collected in the flowering period, dried immediately under vacuum at 60 ºC, and
milled. 50 mg of each sample were macerated with methanol at pH 8 during 2 hours, with codeine as the internal standard. The extract was acidified and non polar compounds were removed with CHCl3. The extract was then basified and the alkaloids extracted with CHCl3 to be used
for GC-MS analysis. Alkaloids were identified by comparing their GC-MS spectra and Kovats
Retention Index (RI) with those of authentic Amaryllidaceae alkaloids previously isolated by our
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group from other plant species and identified by spectrometric methods (NMR, UV, CD).
In this communication some preliminary results about the alkaloid profile of seven Narcissus
cultivars, ‘Hispanicus Max’, ‘Ara’, ‘Rip Van Winkle’, ‘Pumilus’, ‘February Gold’, ‘Rijnveld’s Early
Sensation’ and ‘Pinza’, are presented. The results reveal that the alkaloid composition markedly
differs among the cultivars. More than 10 Amaryllidaceae alkaloids have been identified in each
cultivar, most of them belonging to the galanthamine, haemathamine and lycorine types.
Although galanthamine is the only alkaloid occurring in all the varieties of Narcissus analysed, its
content differs considerably among them. The current work is focused on the quantitative
determination of galanthamine and other related alkaloids in these Narcissus cultivars, as well as
the evaluation of their acetylcholinesterase inhibitory activity.
References
Berkov S., Bastida J., Viladomat F., Codina C. (2008). Analysis of galanthamine-type alkaloids by capillary gas
chromatography-mass spectrometry in plants. Phytochemical Analysis 19: 285-293.
López S., Bastida J., Viladomat F., Codina C. (2002). Acetylcholinesterase inhibitory activity of some Amaryllidaceae
alkaloids and Narcissus extracts. Life Sciences 71: 2521-2529.
This project is funded by the European Commission within the “Research for SMEs” programme (project No. 219795).
The authors thank all the partners of the SUPROGAL consortium for their collaboration in supplying plant material,
and also Dr. Asunción Marín from the Scientific-Technical Services, University of Barcelona, for performing the
GCMS analyses. ¬
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2
Efecto de derivados de tetrahidroquinolinas sobre la
Homeóstasis Intracelular del Ca2+ en queratinocitos
Colman L.1,2, Felibertt P.1, Pimentel A.1, Rojas H.2, Sojo F.3, Arvelo F.3,
Kouznetsov V.4, Bello J.4, Merchan D.4, Benaim G.1,3
1
Instituto de Estudios Avanzados, IDEA.Caracas, Venezuela
Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas, IVIC - Caracas, Venezuela
3
Instituto de Biología Experimental - Universidad Central de Venezuela
4
Laboratorio de Química Orgánica y Biomolecular, Univ.Industrial Santander, Bucaramanga, Colombia
[email protected]
2
La señalización mediada por Ca 2+ provee un mecanismo central en el crecimiento,
diferenciación y apoptosis de queratinocitos. Además, este proceso es importante para la carcinogénesis, ya que se ha sugerido que la liberación del Ca 2+ de reservorios intracelulares como el
retículo endoplasmático facilita el desarrollo del cáncer de piel. Los tratamientos ampliamente
utilizados en contra del cáncer como la quimioterapia y radioterapia, aunque representen una
alternativa para el control de los pacientes que sufren de esta dolencia, no satisfacen completamente las expectativas para controlar esta enfermedad, debido a que la efectividad de estos
varía con cada tipo de cáncer. Por otra parte, la erradicación total de un cáncer diseminado
resulta difícil, puesto que constantemente se seleccionan sub-poblaciones con ventajas adaptativas que poseen la facultad de resistir al tratamiento, por lo que, la resistencia a las drogas
antineoplásicas limita la eficacia de estos agentes, y por consiguiente el resultado de un fracaso
terapéutico. Es por esta razón que se justifica un mayor esfuerzo por encontrar nuevos compuestos con actividad antineoplásicas En este sentido, las tetrahidroquinolinas conforman una
importante clase de compuestos naturales o sintéticos que han mostrado un amplio rango de
actividades biológicas, entre las que se incluyen antimalárica y antitumoral, entre otras. El objetivo de este trabajo es discernir el posible rol de dos tetrahidroquinilonas sobre la regulación del
Ca2+ intracelular, utilizando una línea celular de queratinocitos de ratón (CarC), la cual posee un
elevado grado de tumorigenicidad. En este trabajo utilizamos compuestos citotóxicos naturales
JS-86 y AR-99: 2,4-diaril-tetrahidroquinolinas sustituidas, provenientes de un compuesto fenilpropano denominado trans-Isoeugenol, el cual es una sustancia natural aislada por lo general de
plantas de clavo de olor (Eugenia caryophyllata) y canela ( Cinnamomum verum). La
determinaión del Ca2+ intracelular se llevo a cabo mediante el uso del indicador de Ca 2+ fluorescente Fura 2, y su localización intracelular mediante microscopia confocal con un sistema de
perfusión rápida. Se determinó la actividad de la Ca 2+-ATPasa del retículo (sarco)endoplasmático
en presencia de estos compuestos, así como la fragmentación del ADN nuclear (TUNEL). Los
resultados indican que ambos compuestos inducen la liberación de Ca 2+ estimulando el vaciado
de los almacenes intracelulares, en su mayor parte del retículo endoplasmático. Logramos
determinar que el mecanismo de acción es, al menos en parte, a través de la inhibición directa de
la actividad de la Ca2+-ATPasa del retículo (sarco)endoplasmático, por estos compuestos ( 80% y
90% con el JS-86 y AR-99 respectivamente). Ambos compuestos inducen la fragmentación del
ADN nuclear, sugiriendo la inducción de la apoptosis celular, como consecuencia de la liberación
de Ca2+ del retículo endoplasmático. ¬
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Sintesis verde de aminofosfinas quirales
Sandra Cruz Cruz1, Ulises A. Peña Rosas2, Guadalupe Hernández Téllez2,
Alejandro Ruiz Tagle3, René Gutiérrez Pérez2
1
Depto. de Ingeniería Química, Universidad Politécnica de Tlaxcala, Av. Universidad Politécnica de Tlaxcala No.1, San
Pedro Xalcatzinco, Tepeyanco, Tlax., México
2
Lab. Síntesis de Complejos, Fac. Ciencias Químicas, Universidad Autónoma de Puebla, A. P. 1067, C. P. 72001, Puebla,
Pue., México
3
Depto. de Microbiología, Fac. Ciencias Químicas, Universidad Autónoma de Puebla, Ciudad Universitaria, Puebla,
Pue., México
Los compuestos que contienen enlaces P-N son muy importantes debido a su versatilidad
estructural, y además tienen una gran cantidad de aplicaciones, por ejemplo como conductores
iónicos de materiales, como ligantes poliméricos para la preparación de nuevos catalizadores, y
materiales térmicamente estables. Existen varios métodos para la síntesis de aminofosfinas que
involucran varios pasos, formándose subproductos y por lo general los rendimientos no son muy
buenos. Sin embargo, con el empleo de la Química Verde y en particular con la técnica de medio
seco, la reacción procede eficazmente con altos rendimientos y bajo consumo energético. En
este trabajo se reporta la síntesis en ausencia de disolvente de nuevas aminofosfinas quirales a
partir del tricloruro de fosforo con las aminas primarias ópticamente puras (R) y (S)-(+)-1feniletilamina (a), (R) y (S)-(-)-1-(4-metilfenil)etilamina (b), (R) y (S)-(-)-(1-naftil)etilamina (c), (R) y
(S)-(+)-1-ciclohexiletilamina (d), (1S, 2S, 3S, 5R)-(+)-isopinocanfeilamina (e) y (-)-cis-mirtanilamina
(f) [Ecuación 1].
Ecuación 1. Formación de aminofosfinas N-trisustituídas quirales.
La estructura de los compuestos se estableció por resonancia magnética nuclear de 1H y 13C,
espectroscopía infrarroja y espectrometría de masas. Los compuestos sintetizados han mostrado
actividad antimicrobiana probada contra levaduras de los géneros Sacharomyces y Candida, de
acuerdo con las recomendaciones del CLSI estadounidense (Clinical and Laboratory Standards
Institute). ¬
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2
Brazilian “cerrado” plants: a reservator of molecules with antitubercular activity
Clarice Q.F. Leite1,*, Fernando R. Pavan1, Karina de Prince1,
Daisy N. Sato2, Wagner Villegas5, Sergio R. A. Leite5
1
Faculdade de Ciências Farmacêuticas, UNESP, CEP 14801-902, Araraquara, Brazil
2
Instituto Adolfo Lutz, Ribeirão Preto, CEP 14085-410, Ribeirão Preto, Brazil
3
Departamento de Química, Universidade Federal de São Carlos, CP 676, CEP 13565-905, São Carlos, Brazil
4
Instituto de Química de São Carlos, Universidade de São Paulo, CP 780, 13560-970, São Carlos, Brazil
5
Instituto de Química de Araraquara, UNESP, CEP 14801-902, Araraquara, Brazil
*[email protected]
Worldwide, tuberculosis (TB) remains the most frequent and important infectious disease
causing morbidity and death. Among all countries in the Americas, Brazil reports the secondhighest TB mortality and morbidity, comprising a prevalence of 62/100.000. The global resurgence of TB and the rapid emergence of MDR-TB, underscore the importance of the development of new antituberculous drugs. Plants have provided many drugs in the past, and they
remain a rich source of novel compounds. Plant extracts are among the most attractive sources
for developing new drugs and have been shown to produce promising results in the treatment of
several diseases. Our research group deals in projects that integrate the chemical and anti-TB
activity of plants that compose the bioma of the Brazilian Cerrado, a savannah like vegetation.
Many of those plants are commonly used as natural remedies by people living in these areas to
treat many illnesses. To perform the phytochemical step we used chromatographic techniques,
and to determine the structure of the isolated substances we used mainly spectrometric methods. To evaluate the activity of the extracts, enriched fractions and pure substances against M.
tuberculosis, we used the resazurin microtiter assay (REMA) and M. tuberculosis H37Rv ATCC
27294 strain. In total we already studied 77 extracts from 39 plants, distributed into 20 families.
From all extracts assayed 23% showed promising activity, with minimum inhibitory concentrations
(MIC) bellow or equal to 125 g/mL. The triterpene bassic acid from B. fagifolia showed strong
antitubercular activity with MIC values of 2.5 g/mL, comparable to MICs of some first-line antituberculosis drugs. The results indicated that plants of “cerrado” present fractions and compounds with promising anti-tuberculosis activity.
Financial support:
FAPESP, PADC ¬
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2
Correlation study between MTT and Clonogenic Surviving
Assays using compounds extracted of Casearia sylvestris
(Salicacea) in HepG2, MRC5 and XP4PA cell lines
Oliveira A. M.1, Varanda E. A.2, Santos A. G.3, Cavalheiro A. J.4, Bolzani V. S.4,
Soares C. P.1
1
Clinical Analysis, College of Pharmaceutical Sciences, São Paulo State Univ., Brazil
Biological Sciences, College of Pharmaceutical Sciences, São Paulo State Univ., Brazil
3
Princípios Ativos Naturais e Toxicologia, College of Pharmaceutical Sciences, São Paulo State Univ., Brazil
4
Núcleo de Bioensaios, Biossíntese e Ecofisiologia de Produtos Naturais, Chemistry Institute, São Paulo State Univ.,
Brazil
2
Casearia sylvestris have been used in Brazil as popular medicine for treating ulcer, inflammation
and tumor. The cytotoxicity of compounds is often used to perform later studies. While the MTT
assay assess the viability of the cells, the clonogenic surviving assay, is based on the ability of
cells to form colonies. The aim of the present study was to compare MTT and clonogenic surviving assays performed in HepG2 (human hepatocarcinoma), MRC5 (lung fibroblast) and XP4PA
(deficient in nucleotide DNA repair) cell lines using five different compounds extracted of C.
sylvestris. The C. sylvestris compounds tested were: ethanolic extract, casearins B, D and X as well
as caseargrewiin F. To the MTT assay, 2.5x105 cells were seeded in a 96 wells plate, after that, the
cells were treated with five different concentrations of C. sylvestris compounds during 24h and
48h. Then, the cell cultures were incubated for 3h with the MTT salt (5mg/mL). The formazan
salts were diluted in dimethylsulfoxide (DMSO) and the optical density was determined using a
plate reader at 595 nm. To the clonogenic surviving assay the cells were treated the same way
described above to the MTT assay but we selected three concentrations based on IC 20 previously
obtained in MTT assay. After the treatments, the negative control cells were counted in a
Neubauer chamber and the final volume to obtain 1000 cells was calculated. This cell volume for
each treatment was seeded in a 60 mm culture dishes and the cells were allowed to form colonies during 6 days. The colonies were stained and those with more than 15 cells were counted at
16X of magnification. To compare the assays we performed the correlation study using the
Pearson Coefficient (R). To the HepG2 cell line we observed correlation between the assays
using: caseargrewiin F at 24h (R =0.97) and at 48h (R=0.92). To the 24 h of treatment in MRC5 cell
line the assays were correlated to: ethanolic extract (R=0.99), casearin B (R=0.85), casearin D (R
=0.84) and casearin X (R=0.97). To the MRC5 cell line treated at 48h only caseargrewiin F demonstrated correlation (R=0.99). To XP4PA cell line treated for 24h casearina B (R=0.97) and casearina X (R=0.97) showed correlation between the assays. To the XP4PA treatments at 48h the
correlation was found to: ethanolic extract (R=0.94), casearin D (R=0.94) and casearin X
(R=0.99). Based on these results we can conclude that the correlation between MTT and clonogenic surviving assays depends on the cell lines, exposure time and compounds used.
Financial support:
FAPESP (2008/58908-0), Biota-FAPESP (2003/02176-7) and Fundunesp (00797-DFP). ¬
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2
The monoamine oxidase inhibition and neuroprotective
properties of flavonoids from Calceolaria chelidonioides
Hugh O’Sullivan1, Gavin Davey1, Fabio de Sousa Menezes2
1
2
Institute of Neurosciences, Trinity College Dublin, Ireland
School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Faculty of Health Sciences, Trinity College Dublin, Ireland
The plant compounds flavonoids have been attracting attention as potential therapeutic
agents in a range of neurodegenerative diseases. This is due to their ability to inhibit certain
enzymes such as monoamine oxidase and also because of their antioxidant properties. Recently
the flavonoids apigenin, catechin, luteolin, quercetin and rutin were isolated from the medicinal
plant Calceolaria chelidonioides. This study examined the effect of time on their percentage
inhibition of MAO A and B using discontinous radiochemical assays. It also examined the ability of
these flavonoids to prevent cell death and lactate dehydrogenase (LDH) release in pheochromocytoma 12 (PC12) cells treated with 2mM 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP +). The results showed
a significant increase in their percentage inhibition of MAO A and MAO B over time. It also showed that luteolin, quercetin, rutin and the crude extract of Calceolaria chelidonioides could
significantly increase the viability of PC 12 cells treated with MPP +. Apigenin and catechin did not
significantly increase the viability of PC 12 cells treated with MPP +. No flavonoids could significantly prevent the release of LDH in MPP + treated cells. The percentage cell viability of apigenin,
luteolin, quercetin and rutin was not seen to change over a range of concentrations from 100μM
to 1nM. The percentage cell viability of the crude extract of Calceolaria chelidonioides was not
seen to change over a range of concentrations from 100μg/ml to 1ng/ml. In conclusion the percentage inhibition by all flavonoids of MAO A and B was time dependent and should be taken
into account during future studies. Luteolin, quercetin, rutin and the crude extract of Calceolaria
chelidonioides may have potential as neuroprotective agents. ¬
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Buddleja davidii: Chemical Study and Cytotoxicity Evaluation
Liam A.J. O’Sullivan1, Cathal Cadogan2, Fabio de Sousa Menezes2
2
1
Department of Pharmacy and Pharmacology, University of Bath, UK
School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Faculty of Health Sciences, Trinity College Dublin, Ireland
The genus Buddleja is comprised of over 100 species, mostly found in the tropical and subtropical regions of Asia, South America and parts of Africa. Buddleja davidii Franch., although indigenous to China and Japan, has become naturalised in many temperate regions. In Europe and
North America, this ornamental plant has been introduced because of its showy purple flowers,
pleasant honey-like smell and ability to attract species of apis and lepidotera, and is commonly
found in stony wasteland and scrubland. Samples of B. davidii flowers were subject to hydrodistillation and analysis of the essential oil included n-alkanes and terpenoids. The irregular terpene
oxoisophorone and the monoterpene linalool may be responsible for the attraction of the
flowers to lepidotera. Extracts of flowerings collected from the banks of the Dodder River,
Dublin 6, were obtained by ethanol maceration, and underwent liquid-liquid partitioning between distilled water and hexane, dichloromethane, ethyl acetate and n-butanol. The antioxidant
activity of these partitions was evaluated spectrophotometrically by a DPPH assay, and showed
that the most polar extracts, ethyl acetate and butanol extracts, exhibited the highest level of
free radical scavenger activity. Relative to Ginko biloba, which has an EC50 in the region of 40μg
ml-1 whereas the EC50 of the ethyl acetate extract was shown to be around 79μg ml -1, therefore
less potent in its antioxidant activity for this methodology. The cytotoxicity of the extracts were
evaluated against human mammary carcinoma cell lines, with successive dilutions of the partitioned extracts, and assessed for viability using MTT and Neutral Red assay systems. The dichloromethane extract was the most cytotoxic with an EC 50 of around 22μg ml-1 and the remaining
partitions exhibited EC50 around 31-36μg ml-1. Column chromatography was used to fractionate
the dichlormethane and ethyl acetate partions of the extract, and underwent mono and bidimensional NMR spectrometry techniques. Isolated compounds included a flavonolignan like structure
and an iridoid from the dichloromethane partition and a flavonoid and an iridoid from the ethyl
acetate partition, which is in agreement with previously published compounds. ¬
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Obtención de nuevos agentes antimicobacterianos a partir de
modelos naturales y de síntesis
Esther del Olmo1, R. Escarcena1, L. Bustos1, J. Pérez-Meseguer2, B. Alanis2,
G. Molina-Salinas3, S. Said-Fernández3, A. San Feliciano1, N. Waksman2
2
1
Depto. de Química Farmacéutica, Facultad de Farmacia, CIETUS, Universidad de Salamanca, España.
Depto. de Quím. Analítica, Facultad de Medicina, Univ. Autón. de Nuevo León. Monterrey, N.L., México
3
Centro de Investigaciones Biomédicas del Noreste, IMSS, Monterrey, NL, México
Introducción
La tuberculosis (TB) sigue siendo una importante causa de muerte en todo el mundo. En el
2007 la TB causó la muerte de 1,7 millones de personas; entre ellas casi medio millón, infectadas
por el VIH. El empleo de los fármacos establecidos, como isoniazida, rifampicina y etambutol
(EMB), muy útiles y efectivos en el pasado, resulta ineficaz frente a cepas multirresistentes
(MDR) y la co-infección TB-SIDA y otras causas, han promovido la aparición de cepas extremadamente resistentes (XDR) de Mycobacterium tuberculosis (MTB). Estas circunstancias hacen
necesario el desarrollo de nuevos fármacos más eficaces. El grupo de investigación de QF de la
USAL lleva varios trabajando en la búsqueda de nuevas moléculas que impidan el crecimiento de
estirpes MDR de MTB. Partiendo de modelos de síntesis (EMB) y sustancias naturales con actividad anti-MTB, se han sintetizado derivados más potentes y selectivos.
Objetivo
A) Tomando como base las estructuras de EMB y esfingosina se pretende obtener diversos
aminoalcoholes y diaminas de síntesis, con un tamaño de cadena variable y diversas agrupaciones sobre las funciones alcohol y amina.
B) Partiendo del serrulatano natural elisabethanol se pretende realizar transformaciones sobre
la molécula para mejorar su potencia anitmicobacteriana.
Discusión y Resultados
A) Se han sintetizado más de 60 derivados de aminoalcoholes y diaminas con cuatro tamaños
de cadena (10, 14, 16 y 18 átomos de carbono), que se han ensayado in vitro frente a cepas de
MTB H37Rv (sensible) y MDR. Dos compuestos fueron seleccionados para realizar ensayos in vivo
sobre ratones infectados con cepas sensibles y MDR.
B) A partir de corteza de la raíz de Leucophyllum frutescens se aisló, purificó e identificó elisabethanol, obteniéndose más 30 compuestos de semi-síntesis que fueron evaluados frente a cepas
H37Rv de MBT.
Conclusiones
A) Se ha establecido el tamaño de cadena óptimo en relación a la potencia antimicobacteriana, y seleccionado dos compuestos para estudios in vivo
B) Se han realizado transformaciones sencillas de la estructura de elisabethanol y obtenido
compuestos que han superado la potencia anti-MTB del producto natural.
Financiación
A) Trabajo realizado en el marco de la Cooperación Iberoamericana para el Desarrollo CYTED.
Proyecto X.11: PIBATUB. Proyecto MEC AGL 2005 02168 GAN. L.B. y R.E agradecen la beca BS-
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USAL y el contrato de la Red RICET (RD06-0021-0022)
B) Trabajo realizado en el marco de la Red de cooperación “Síntesis y Estudio de la Actividad
Biológica de Productos Naturales”, aprobada por el PROMEP, convocatoria 2008. ¬
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Cranberry in pediatria: efficacia clinica e revisione della
letteratura
Dessì A., Atzei A., Fanos V.
Dipartimento di Scienze Pediatriche, Patologia e TIN, Puericultura e Nido, Università di Cagliari, Italy
Background
Le infezioni delle vie urinarie (IVU) in pediatria sono molto frequenti: all’età di 7 anni l’8% delle
femmine e il 2% dei maschi ha presentato almeno un episodio delle vie urinarie, rappresentando
l’infezione batterica di maggior riscontro in presenza di febbre. I bambini che hanno già avuto
un’infezione delle vie urinarie hanno un rischio di re-infezione del 10-30%. Le IVU nei primi mesi di
vita, specie se ricorrenti, rappresentano un elemento clinico importante per ulteriori indagini e
diagnosi di eventuali malformazioni delle vie urinarie. Per recidivanza s’intende il ripresentarsi di
infezioni causate sempre dallo stesso germe, mentre per ricorrenza il ripetersi di IVU determinate
da microrganismi differenti.
Attualmente l’approccio preventivo ancora più seguito è rappresentato dalla somministrazione
preventiva di antibiotici (antibioticoprofilassi), ma i molteplici effetti collaterali, la crescente
selezione di batteri antibioticoresistenti e l’impatto economico della terapia hanno indotto la
ricerca di modalità alternative di prevenzione delle infezioni urinarie. A tale orientamento ha
contribuito in maniera importante il bisogno sempre crescente di “naturalità” della popolazione,
a fronte di una medicalizzazione eccessiva, o percepita come tale, in particolari periodi della vita,
come la gravidanza o l’infanzia.
L’impiego del succo di mirtillo (Cranberry) rientra tra queste possibili soluzioni che possono
potenzialmente affiancare o, in alcuni casi, vicariare le procedure tradizionali.
Sappiamo da anni che il Cranberry è utilizzato ampiamente per la prevenzione e il trattamento
delle IVU.
Il Cranberry, grazie al suo contenuto di proantocianidine, può bloccare i batteri e impedire loro
di legarsi alle cellule del corpo. Ora, i ricercatori hanno scoperto che il Cranberry può anche
bloccare alcuni batteri (Haemophilus influenzae) che causano otiti e meningiti. Il Cranberry è privo
di effetti collaterali e può essere particolarmente benefico per i bambini, in particolare quelli
soggetti a IVU.
I risultati del nostro studio potrebbero consentire ai pediatri di valutare la possibilità di somministrare ai bambini con IVU ricorrenti, un prodotto naturale ed economico come il Cranberry, il cui
uso non comporta rischio di resistenza antimicrobica o infezioni micotiche.
Obiettivi
Valutare l’efficacia del succo di Cranberry nella prevenzione delle IVU in pediatria attraverso
una revisione della letteratura.
Strategia di ricerca
Abbiamo cercato in PUBMED, EMBASE, nella Cochrane Central Register of Controlled Trials
(Central Cochrane Library), su Internet ed esaminato la bibliografia di review.
Raccolta e analisi dei dati
Sono state raccolte informazioni su: metodi, ricercatori, pazienti, interventi, antibiotici utilizza-
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ti, effetti collaterali, aderenza alla terapia e risultati.
Principali risultati
Negli studi pediatrici esaminati, i prodotti a base di Cranberry hanno ridotto significativamente
l’incidenza di infezioni del tratto urinario a 12 mesi (RR 0,65, IC 95% 0,46-0,90) rispetto al placebo/controllo. Il Cranberry è risultato il prodotto più efficace nel ridurre l’incidenza delle infezioni del tratto urinario nei bambini con infezioni ricorrenti del tratto urinario. Taluni studi non
sono stati inclusi nella meta-analisi a causa di questioni metodologiche e/o mancanza di dati
disponibili. Tuttavia, solo uno ha riportato un risultato significativo per l’esito della IVU sintomatica.
Conclusioni
Alcune prove dimostrano che il Cranberry può ridurre il numero di IVU sintomatiche nel corso
di un periodo di 12 mesi, in particolare nei bambini con IVU ricorrenti. Il significante numero di
abbandoni/ritiri indica che il succo di Cranberry non è gradito ai bambini per lunghi periodi. Non è
chiaro quale sia il dosaggio ottimale e/o la formulazione posologica (ad esempio, succo o sciroppo) anche se va detto che lo sciroppo fornisce maggiori garanzie in termini di dosaggio per Kg
di peso.
La letteratura finora esaminata, ha fornito risultati incoraggianti.
Il Cranberry potrebbe essere una possibile valida alternativa alla tradizionale antibioticoprofilassi, una volta esclusa una causa organica, come, per esempio, un reflusso vescicoureterale (una
malformazione delle vie urinarie), se il bambino presenta cistiti recidivanti e ricorrenti. Altri
utilizzi potenziali potrebbero riguardare i lattanti oltre i tre mesi con reflusso di grado leggero,
normalità ecografica e con genitori attenti, informati e collaboranti. Infine il Cranberry potrebbe
essere associato all’antibiotico nella gestione della IVU acuta.
Sono comunque auspicabili ulteriori studi per confermare l’efficacia e la tollerabilità anche in
età pediatrica.
Bibliografia
1Cuzzolin L, Atzei A, Fanos V. Off-label and unlicensed prescribing for newborns and children in different settings: a
review of the literature and a consideration about drug safety. Expert Opin Drug Saf. 2006;5(5):703-18.
2Fanos V, Atzei A, Zaffanello M, Piras A, Cataldi L. Cranberry and prevention of urinary tract infections in children. J
Chemother. 2006;18 Spec no 3:21-4.
3Fanos V, Cataldi L. Antibiotics or surgery for vesicoureteric reflux in children. Lancet. 2004;6-12;364(9446):1720-2.
4Ferrara P, Romaniello L, Vitelli O, Gatto A, Serva M, Cataldi L. Cranberry juice for the prevention of recurrent urinary
tract infections: a randomized controlled trial in children. Scand J Urol Nephrol. 2009;43(5):369-72.
5Foo LY, Lu Y, Howell AB, Vorsa N. A-Type proanthocyanidin trimers from cranberry that inhibit adherence of
uropathogenic P-fimbriated Escherichia coli. J Nat Prod. 2000;63:1225-8.
6Gray M. Are cranberry juice or cranberry products effective in the prevention or management of urinary tract
infection? J Wound Ostomy Continence Nurs. 2002;29(3):122-6.
7Guay DR. Cranberry and urinary tract infections. Drugs. 2009;69(7):775-807.
8Howell AB. Bioactive compounds in cranberries and their role in prevention of urinary tract infections. Mol Nutr
Food Res. 2007;51(6):732-7.
9Howell AB. Cranberry proanthocyanidins and the maintenance of urinary tract health. Crit Rev Food Sci Nutr.
2002;42(3 Suppl):273-8.
10Li M, Andrew MA, Wang J, Salinger DH, Vicini P, Grady RW, Phillips B, Shen DD, Anderson GD. Effects of cranberry
juice on pharmacokinetics of beta-lactam antibiotics following oral administration. Antimicrob Agents Chemother.
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11Mathers MJ, von Rundstedt F, Brandt AS, König M, Lazica DA, Roth S. [Myth or truth. Cranberry juice for prophylaxis
and treatment of recurrent urinary tract infection]. Urologe A. 2009 Oct;48(10):1203-5,1207-9.
12Ruth G Jepson, Jonathan C Craig: Cranberries for preventing urinary tract infections. Cochrane Database of
Systematic Reviews 2008, Issue 1. Art. No.: CD001321. DOI: 10.1002/14651858.CD001321.pub4. ¬
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Biotransformation of ent-16-Oxo-17-norkauran-19-oic Acid by
Fusarium proliferatum
Alessandra Duarte Rocha, Geandson C. Santos, Nelson G. Fernandes,
Ludwig H. Pfenning, Jacqueline Aparecida Takahashi,
Maria Amélia Diamantino Boaventura
Departamento de Química - Universidade Federal de Minas Gerais
Gibberella fujikuroi is a fungal species that may involve a series of asexual lineages such as F.
proliferatum1, and has been extensively used for the biotransformation of ent-kaurane diterpenes. One of the most interesting chemical modifications performed in ent-kaurane diterpenes by
fungi is the hydroxylation of methylene inactivated groups 2, since it has been reported frequently
that hydroxylated kaurane diterpenes are bioactive3. In this work, we report successful hydroxylation of ent-16-oxo-17-norkauran-19-oic acid (1) by Fusarium proliferatum into a new C-2 hydroxylated derivative, determined as ent-2a-hydroxy-16-oxo-17-norkauran-19-oic acid (2).
A suspension containing 1 g of ent-kaur-16-en-19-oic acid, isolated from the aerial parts of
Wedelia paludosa (Asteraceae) - BHCB 19033 - and 3.2 g (16.0 mmol) of NaIO 4 were added in 100
mL of THF-H2O (1:1) and also a crystal of OsO 4. After overnight stirring at room temperature,
work-up (NaHSO3 treatment) followed by flash column chromatography, 346 mg of ent-16-oxo17-norkauran-19 oic acid (1) were obtained. This compound exhibited spectroscopic data consistent with literature values.4 Incubation of 0.37 g of ent-16-oxo-17-norkauran-19-oic acid (1) with
Fusarium proliferatum furnished a single compound (2, 64.6 mg) that crystallized as thin white
needles, after column chromatography of the crude biotransformation extract. The structure of
this compound was determined by detailed analysis of the 1D and 2D NMR ( 1H, 13C, DEPT, HMBC,
HSQC and NOESY) spectroscopic data. The proposed structure of 2 was confirmed by singlecrystal diffraction analysis. Compound 2 was evaluated on the growth of the radicals and shoots
of Lactuca sativa (lettuce) at concentrations of 10 -4, 10-6 and 10-8 M, according to methodology
previously described.5 Compound 2 was less active than the control on the radical growth and
presented a different behavior towards the shoots in relation to gibberellic acid, being an inhibitor at the higher tested concentration and stimulating the growth at lower concentrations.
References
1
Jeney, A.; Beki, E.; Mule, G.; Hornok, L. Eur. J. Plant Pathol. 2004, 110, 619-625;
2
Vieira, H. S., Takahashi, J. A., Pimenta, L. P. S., Boaventura, M. A. D. Z. Naturforsch. C, 2005, 60, 72 - 78;
3
Weng, Z.-Y.; Huang, S.-X.; Li, M.-L.; Zeng, Y.-Q.; Han, Q.-B.; Rios, J. L.; Sun, H.-D. J. Agric. Food Chem. 2007, 55, 60396043;
4
Castellaro, S. J.; Dolan, S. C.; MacMillan, J.; Willis, C. L. Phytochemistry 1990, 29, 1823-1831;
5
Boaventura, M. A. D.; Pereira, R. G.; Freitas, L. B. O.; Reis, L. A.; Vieira, H.S.J. Agric. Food Chem. 2008, 56, 2985- 2988 ¬
58
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2
Regulation of Leukocytes recruitment by Indigo alkaloids in
rat pleurisy, a classic model of inflammation
Dunder R.J.1, Socca E.A.R.2, Luiz-Ferreira A.2, Manzo L.P.1, Takayama C.2,
Almeida A.C.A.2, De Faria F. M.1, Consoni S.2, Souza-Brito A.R.2
2
1
Department of Pharmacology UNICAMP, St. Tessália Vieira de Camargo, 126 Campinas (SP) Brazil CEP 13084-971
Department de Anatomy, Cell Biology, Physiology e Biophysics Av. Bertrand Russel, s/nº Campinas (SP) Brazil CEP
13083-865
Leukocytes migration, especially, neutrophils is responsible for tissue damage that occurs in
chronic inflammation such as arthritis and ulcerative colitis. Carrageenin, when injected into the
pleural cavity causes several injuries that attract mono and polymorphonuclear cells to the
inflammatory site. The drugs of first choice NSAIDs can provoke gastric injuries, in this context
the research with plants become so interesting. Some plants have secondary metabolites with
anti-inflammatory properties such as alkaloids. In this study evaluated the therapeutic potential
of Indigo alkaloids derived from Indigofera truxillensis Kunth (Indigofereae). Male Unib:WH rats
were separated and treated in groups; Indigo, at doses of (1,5; 3,0 and 6,0 mg/kg), Saline (0,9%)
as negative control, Indomethacin (INDO) (5 mg/kg), Dexamethasone (DEXA) (2,0 mg/kg) as
positive control and Shan group that received saline 0,9% on pleural cavity. All the groups received an injection of 0,2ml λ-CAR 1% into the pleural cavity 1 hour after treatment. Four hours later,
the animals were sacrificed and their pleural cavities were washed with PBS 5 ml (heparinized 5
U/ml). Pleural exudates were used to count total cells in Neubauer chamber. For differential
account, 200 μl of pleural exudates were used in a cytocentrifuge at 430 G and stained by rosenfeld blue. To confirm leukocytes infiltration, a flux cytometer (FACSCalibur 3-colors), with FSC X
SSC parameters, analyzed in linear scale (10000 events/ second) and the histograms were analyzed by CellQuest software (Becon-Dickinson, San Jose, CA, USA), Statistical analyses, ANOVA
followed by Dunnett’s test. The results showed that Indigo reduced total account significantly
(p<0.0001) at three doses (39, 40 and 48,4% respectively), positive controls showed 70% for DEXA
and 46,4% for INDO, for differential account, Indigo reduced polymorphonuclears by 46, 49,5 and
58 %. The positive controls inhibited the neutrophil infiltration by 66% (DEXA) and 43% (INDO).
The eosinophil infiltration inhibition by Indigo was of 54; 57 and 61%; DEXA and INDO showed 63
and 40% respectively; the mononuclears were reduced by Indigo by 30% (1,5 and 3,0 mg/kg), the
positive controls inhibited by 66% DEXA and 43% INDO. The analyses of flux cytometer confirmed
the reduced infiltration by Indigo alkaloids. The results showed that Indigo alkaloids decreased
cellular infiltration, in special, polymorphonuclears, this information suggests that Indigo alkaloids have a great potential as an anti-inflammatory agent.
Acknowledgements
FAPESP ¬
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2
Determinación de Compuestos volátiles en frutas de Passiflora
edulis f. edulis por SPME/GC-MS
Dr. Armando A. Durant
Departamento de Bioquímica. Facultad de Ciencias.
Universidad de Panamá
[email protected]
La maracuyá es un fruto ampliamente distribuido en varios países de la América Latina Tropical.
La maracuyá es una fruta de importancia comercial que no solamente se consume en jugos, sino
que actualmente son varios los productos de interés comercial derivados de esta fruta. Las
propiedades organolépticas responsables del “flavor” de la fruta están asociadas a los compuestos volátiles presentes en ella. Es así, que se han caracterizado en diferentes trabajos los compuestos volátiles presentes en la “maracuyá amarilla” (Passiflora edulis f. flavicarpa); sin embargo,
son casi nulos los trabajos destinados a determinar la naturaleza de los compuestos volátiles
presentes en el “maracuyá morado” (Passiflora edulis f. edulis).
La microextracción en fase sólida (SPME) es una técnica poderosa para la extracción de sustancias volátiles presentes en diferentes matrices. La técnica goza de amplia aceptación, y muchas
son las aplicaciones de la misma en diferentes áreas. Entre las ventajas de la técnica están el ser
totalmente amigable con el medio ambiente, económica y rápida. La separación de los compuestos volátiles retenidos en la fibra de SPME, se puede realizar mediante cromatografía de gases,
con detector de masas (GCMS). El uso del GC-MS no permite la separación de los compuestos
volátiles contenidos en la matriz analítica, sino que también admite la determinación inequívoca
de los compuestos separados, basado su espectro de masas.
En el presente trabajo se presenta la puesta a punto de la SPME/GC-MS para la determinación
de los compuestos volátiles, responsables del “flavor” en frutas maduras de Passiflora edulis f.
edulis. ¬
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2
Phytotoxic activity of aerial parts exudates of Salvia spp: data
collection and advanced statistical analysis
M. Giacomini1, A. Bisio2, E. Giacomelli2, S. Pivetti1, S. Bertolini1, D. Fraternale3,
D. Ricci3, G. Romussi2, N. De Tommasi4
1
Dipartimento di Informatica, Sistemistica e Telematica, Università di Genova, Via all’Opera Pia;
2
Dipartimento di Chimica e Tecnologie Farmaceutiche e Alimentari, Università di Genova,
Via Brigata Salerno 16147 Genova, Italia;
3
Dipartimento di Scienze dell’Uomo, dell’Ambiente e della Natura, Università di Urbino,
Via Bramante 28 Urbino, Italia;
4
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo 84084 Salerno, Italia
The outlook to use crop residues, cover crops and plant residues with high content of allelochemicals into the soil, as well as extracts of allelopathic plants, can provide selective weed
control through the release of allelochemicals [1-3] and can contribute to the maintenance and
the development of sustainable agro-ecosystems. As Salvia exudates in a screening work have
shown to possess inhibitory activity on the germination of Papaver rhoeas L. and Avena sativa L.
[4], a database for fast and efficient data collection among the various collaborating groups to be
used in the following research steps to define the allelopathic potential of these species has been
developed (Fig. 1).
Fig. 1 Logic scheme of the developed database
Through web-based tools we can exchange in a secure and safe way structured data in order
to speed up their treatment. The germination experimental results are automatically placed in
the database structure, together with morphological data collected on the subsequent growth
of seedlings (height, length of cotyledon, root length, seedlings fresh and dry weight). In addition, this structure are complemented by algorithms for calculating the indexes usually reported
in the literature (Total Germination - G T , Speed of Germination - S, Speed of Accumulated
Germination - AS, Coefficient of the Rate of Germination - CRG), new indexes defined by us [5]
(Weighted Average Damage - WAD, Differential Weighted Average Damage - DWAD, Germination
Weighted Average Velocity - GWAV) and other variables usually recorded in experiments of
phytotoxicity (LC50, LC90). Moreover, algorithms have been designed to calculate the one-way
ANOVA followed by Duncan’s multiple range test to automatically highlight significant differences between the species (Fig. 2, Tab. 1). As all these indexes are not in a full agreement it is not
possible with inferential statistics only to give a comparative description of the activity or the
different species. For this reason, further analysis, based on the artificial neural network ap-
61
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proach, has been done. In fact, previous experience of some authors [6-8], evidenced that this
approach can be very valuable in scenarios where a great amount of quantitative data are used
to yield evidence based conclusions.
At present tools that enable scientists to use the most modern techniques of data mining
applied to relationally structured data are available. So the nature of the relational database
structure allowed us to apply native methods of data mining to identify hidden relationships and
connections within the full set of data, providing that these algorithms are fed by high valuable
data from the information content point of view. For this reason we have created an algorithm
associated with the database to filter incoming data according to their significance information,
both within and among the attributes.
Fig. 2 Petri dish experiments
Evaluation of germination speed of Papaver and Avena in response to the various Salvia exudates (Salvia namaensis, 1;
S. fallax, 2; S. disermas, 3; S. chamaedryoides, 4; S. confertiflora, 5; S. x jamensis, 6; S. buchananii, 7; S. wagneriana, 8; S.
scabra, 9; S. miniata, 10; S. cacaliaefolia, 11; S. adenophora, 12; S. rutilans, 13;). Mean GWAV plus standard deviation is
reported.
Tab. 1 One-way ANOVA followed by Duncan’s test applied at the case illustrated in Fig. 2
The filtering criteria are based on the awareness that germinal values are null the first days
after sowing and that the variables fresh weight and dry weight are highly correlated. Moreover,
some rows and columns have been excluded because of a variation coefficient smaller than 10%
(within one element), and of a correlation greater than 90% with another element (only one
element over two are maintained with the considered set). Among all possible data mining
algorithms present in literature, we have applied neural networks in the form of self-organizing
maps (SOMs), also called Kohonen maps. The SOMs are single layer feed-forward neural networks where the output neurons are organized in grids [9]. Each SOM is trained using unsupervised learning to produce a representation of the training samples in a low dimension space while
preserving the topological properties of the input space.
After the application of SOMs, clusters we have applied the k-means algorithm to define
neurons. It is notorious from literature that the result of applying k-means algorithm depends
greatly on the centroids initial choice. For this reason, we have chosen as centroids 5 neurons
randomly selected to avoid any bias and we repeated the clustering 100 times.
Using the skimmed files we have began the clustering, setting the epochs number to 200 for
62
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the first phase (rough training phase) and to 1000 for the second phase (fine tuning phase); the
number of neurons was set to 90 and the maximum number of clusters to search equal to 5.
Fig. 4
An example of tests of clustering results is shown in Fig. 4
Since 5 was the maximum number of clusters to be searched, the algorithm in some cases
found 3 or 4 clusters, when convergence was reached in advance. Table 2 resumes clustering
tests results.
N. Cluster
Cases
Avena (petri)
Avena (pot)
Papaver (petri)
Papaver (pot)
2
-
96%
80%
-
3
20%
-
14%
-
4
20%
-
1%
30%
5
60%
4%
5%
70%
Tab. 2 Percentage of cluster numerosity among the 100 tests we made
The clustering were found to be fairly homogeneous although the tests are independent of
each other. In fact, as said above, the order of neurons is randomized for each test to ensure that
the tests have the same input data but in random order, so that the operation of clustering does
not depend from the order of input data.
As in half the cases we have obtained a limited statistical evidence we are currently developing
an algorithm based on the Kohonen map topology and inspired by the Indicator Value Analysis
method of Dufrène and Legendre [10] to receive a ranking of the activity of the various Salvias
species.
Also this new set of calculation rely on the relational structure of the DB, so we can assess that
the present tool can be taken as a prototype for a fast and efficient management of such type of
data. Further application of this tool will be able to prove also its versatility.
References
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De Tommasi N. Attività fitotossica di specie di Salvia FITOMED 2010- VI Congresso Intersocietà sulle Piante
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[5] Bisio, A., Fraternale, D., Giacomini, M., Giacomelli, E., Pivetti, S., Russo, E., Caviglioli, G., Romussi, G., Ricci, D., De
Tommasi, N., 2010. Phytotoxicity of Salvia spp. Exudates. Crop Protection. Sent for publication
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Marine Bacteria Based on Their Fatty-Acid Composition. IEEE Transactions on Biomedical Engineering 44, 1185-1191.
[8] Giacomini, M., Ruggiero, C., Calegari, L., Bertone, S., 2000. Artificial neural network based identification of
environmental bacteria by gas-chromatographic and electrophoretic data Journal of Microbiological Methods. 43,
63
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Heidelberg, New York, 1995, 1997, 2001, 3rd edition.
[10] Dufrene M., Legendre P. (1997) Species assemblages and indicator species: the need for a flexible asymmetrical
approach. Ecological Monographs, 67: 363. ¬
64
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2
Generación de un banco de germoplasma “in vitro” de plantas
medicinales presionadas de la Región Central de Argentina
Lorena Palacio, Marta Goleniowski
Ministerio de Ciencia y Tecnología de Córdoba, Ceprocor - Argentina
Del total de 9689 especies de plantas vasculares de la Flora Argentina, el 18% se encuentra
representado en Córdoba (1960 taxones) distribuido en 142 familias. Con respecto a la flora
medicinal, se estiman cerca del millar para Argentina. A través de una compulsa bibliográfica
realizada para Córdoba, se puede decir que la flora medicinal cordobesa estaría integrada por
unas 602 especies (Goleniowski et al., 2006; Barboza et al., 2006).La zona central de Argentina
posee una elevada riqueza de especies nativas medicinales y aromáticas (ENMA, incluyendo
aromáticas, medicinales, y especies con valor ornamental) siendo muchas de ellas endémicas.
Existen más de 300 especies dentro de este grupo cuya recolección se realiza directamente del
ambiente natural y en general, en forma extractiva.Tanto las industrias alimenticias, farmacéuticas y cosméticas utilizan cada vez más los beneficios de los principios activos de las distintas
especies para la elaboración de sus productos. La mayor demanda del mercado ha fomentado la
recolección indiscriminada y, como consecuencia, la disminución de las poblaciones naturales, en
especial de aquellas especies endémicas y con áreas de distribución más restringidas (FAO, 1986).
El Plan de Acción Mundial de la FAO (1996), establece como una de sus cuatros grandes prioridades la conservación de las especies. Esta organización considera como paso inicial en este tipo de
conservación, iniciar estudios e inventarios de las especies y realizar el monitoreo del estado de
conservación, para preservar principalmente las especies nativas presionadas. Como parte de las
tareas involucradas en los proyectos financiados por el COFECYT y el CONICET algunas especies
medicinales y aromáticas nativas como Hedeoma multiflorum, Lippia turbinata, A. polystachya,
Larrea divaricata y Thelesperma megapotamicum son conservadas en nuestro laboratorio, mediante protocolos de cultivados “in vitro”.
Referencias
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324-341.
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pteridófitas y antófitas silvestres o naturalizadas. Museo Botánico de Córdoba:Córdoba, 2006.
[3] FAO.1996. Global Plan of Action for the Conservation and Sustainable Utilization of PlantGenetic Resources for
Food and Agriculture and the Leipzig Declaration Adopted by the International Technical Conference on Plant
Genetic Resources, Leipzig, Germany 17-23 June1996. Food and Agriculture Organization of the United Nations,
Rome Italy. ¬
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Studio fitochimico della Polyscias guilfoylei (W.Bull) L.H.Bailey
M. J. Gualtieri, N. Malafronte, M.S. Pesca, F. Dal Piaz, N. De Tommasi
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università degli Studi di Salerno,
Via Ponte Don Melillo, 84084 Fisciano (SA) - Italia
[email protected]
Nell’ambito di una ricerca su nuovi metaboliti bioattivi da piante appartenente alla famiglia
delle Araliaceae acclimatate presso il Giardino Botanico di Palermo, [1,2] è stato effettuato un
studio fitochimico delle parti aeree di Polyscias guilfoylei (W.Bull) L.H.Bailey, una pianta mai
studiata precedentemente. Piante della famiglia delle Araliaceae sono da tempo utilizzate nella
medicina tradizionale asiatica per il trattamento di numerose patologie, tra le quali dolore, artrite
reumatica, fratture, distorsioni, e lombaggine [3]. Lo studio fitochimico degli estratti butanolici
ottenuti dalle parti aeree di P. guilfoylei ha portato all’isolamento di tre nuove saponine oleaniche
(1-3), insieme a quattro saponine già note in letteratura.
Il materiale vegetale essiccato è stato finemente polverizzato e sottoposto a macerazione
esaustiva con MeOH al 70%. L’estratto metanolico grezzo è stato essiccato, risospeso in acqua
distillata, e successivamente è stato sottoposto a ripartizione tra cloroformio, etilacetato, e nbutanolo.
La purificazione di ciascun residuo è stata eseguita con diverse tecniche cromatografiche, tra
cui Sephadex LH-20, colonna di gel di silice, DCCC e HPLC. La caratterizzazione strutturale delle
saponine isolate è stata ottenuta mediante tecniche spettroscopiche quali 1D-NMR ( 1H, 13C, DEPT,
TOCSY, ROESY) ed esperimenti 2D-NMR (DQF-COSY, HSQC, HMBC), ed analisi ESIMS e metodi
chimici.
Poichè è stato dimostrato che le saponine triterpenoidiche possiedono attività citotossica [2,
4], è stata valutata l’attività antiproliferative dei composti isolati nelle seguenti linee cellulari:
J774.A1, HEK-293, e WEHI-164.
Bibliografia
[1] N. De Tommasi, C. Pizza, A. Bellino, P. Venturella, J.Nat. Prod., 1997, 60, pag. 663-668.
[2] G. Cioffi, A. Braca, G. Autore, I. Morelli, A. Pinto, F. Venturella, N. De Tommasi Planta Med., 2003, 69, pag. 1-7.
[3] G.X. Li, Pharmacology, toxicity, and clinic of traditional Chinese medicine. Tianjin Science and Technique Traslation
Publishing House, Tianjin, PR China, 1992.
[4] L.N. Atopkina, G.V. Malinovskaya, G.B. Eliakov, N.I. Uvarova, H.J. Woerdenbag, A. Koulman, N. Pras, P. Potier
Planta Med. 1999, 65, pag. 30-34 ¬
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Etnobotánica médica de las especies de “muérdagos”
(loranthaceae sensu lato) entre indígenas y criollos de
Argentina
Gustavo F. Scarpa*, Cecilia Montani**, Mariangeles Gaviorno**
*
Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos (CONICET), Buenos Aires
**
CONICET-Universidad Nacional de San Juan. Argentina
La mayoría de los estudios fitoquímicos y farmacológicos sobre especies de “muérdagos”
(Loranthaceae sensu lato) de Argentina no aprovechan los conocimientos populares respecto a
las aplicaciones medicinales de estas plantas en Argentina, señalando que estos son escasos o
nulos. Sin embargo, trabajos etnobotánicos publicados en los últimos años y datos inéditos hasta
hoy revelan una situación marcadamente diferente. El objetivo de esta contribución es brindar
una actualización sobre la etnobotánica médica de las especies de lorantáceas -sensu lato- de
Argentina y efectuar un análisis preliminar de las particularidades culturales de su uso medicinal.
Para ello se presentan aquí datos originales inéditos de aplicaciones medicinales de estas especies por grupos indígenas y criollos de la Argentina, conjuntamente con datos extraídos de
fuentes bibliográficas confiables tanto desde el punto de vista de la información botánica como
de su contextualización etnomédica. Los primeros se obtuvieron a partir de trabajos de campo
etnobotánicos con campesinos y aborígenes toba-pilagá y chorote del Chaco noroccidental
argentino y con criollos de la provincia de San Juan. Sobre una matriz de presencia-ausencia que
indica los tipos de aplicaciones etnomédicas que practica cada grupo humano, se aplicó la técnica
de ordenamiento de Cluster sobre la base del algoritmo “average linkage” y el índice de distancia
de Jaccard. Se registraron 45 datos totales sobre la etnobotánica médica de 8 especies de
Loranthaceae sensu lato para el tratamiento de 24 tipos de trastornos. Las especies con mayor
número de usos medicinales son Struthanthus uraguensis (18); Tripodanthus acutifolius (10) y
Phoradendron liga (8). Se destacan sus aplicaciones sobre el aparato reproductor (como
oxitócicos, emenagogos y abortivos), sobre el sistema circulatorio (regulador de la presión
sanguínea) y como antitérmicos (febrífugo, contra insolación). El dendrograma obtenido permite
diferenciar tres grupos de usos medicinales en función del/los grupo/s humano/s que las practican: indígenas, criollos y mixtos. En términos cuantitativos, sin embargo, se evidencia un marcado contraste entre los usos indígenas y criollos ya que la proporción de aplicaciones compartidas es insignificante. Los primeros emplean estas plantas mayormente contra afecciones de la
piel, como antitérmicos y contra trastornos del aparato reproductor; mientras que los criollos lo
hacen principalmente contra esta última clase de enfermedades y contra afecciones del sistema
circulatorio. Las aplicaciones externas entre los indígenas alcanzan el 40 % de los usos, mientras
que entre los criollos esta proporción sólo es del 15 %. Estos resultados presentan un marcado
interés no sólo para la recuperación del patrimonio etnomédico de los pueblos mencionados,
sino también por las potencialidades que aportaría para investigaciones de carácter
farmacobotánico y médico-farmacológico que se están desarrollando con renovado interés sobre
las especies de “muérdagos” a lo largo del mundo. Esto pone de relieve la importancia de realizar
un estudio etnobotánico exhaustivo que incluya las 16 especies de lorantáceas restantes, que
incluya otras regiones y otros grupos humanos de la Argentina.
Palabras claves: Etnobotánica médica, Argentina, Loranthaceae, indígenas. ¬
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Citotoxicidad, union a receptores cb2 y mecanismo de accion
del decatrienato de bornilo en celulas tumorales
Alejandro Olmos Guzmán1, Alejandra Leon3, David Raya Gonzales3,
Ma. Eugenia Morales López1, Alberto Flores García3, Rosa E. del Rio3,
Marco Cajero Juárez2, Rafael Salgado García3, Zurisaddai Hernandez3,
Mauro M. Martínez Pacheco3
1
Facultad de Ciencias Médicas y Biológicas
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia-CMEB
3
Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, Morelia - Mich
2
Marco Teórico
la alcamida decatrienato de bornilo (DB) obtenida de Heliopsis longipes (A. Gray) Blake, una
planta endémica de México, utilizada como analgésico, anestésico local y antimicrobiano en
padecimientos gastrointestinales y vías respiratorias altas. Esta muestra una estructura química
similar al bornil-δ-(8)-tetra hidrocannabinol, un canabionoide que posee efectos anticancerigenos
y simpático-miméticos complejos en el sistema nervioso central, sistema cardiovascular y respiratorio, los cuales no la hacen una opción terapéutica viable. Los canabinoides obtenidos de
Cannabis sativa, son metabolitos que se unen a los receptores canabinoides tipo 2(RCB2) e
inducen una sobreproducción de la proteína Jun D para producir apoptosis y muerte en células
cancerígenas de glándula mamaria. Los macrófagos humanos poseen receptores RCB2 que se
unen a canabinoides y son utilizados para detectar y medir la unión de canabinoides a estos
receptores, una prueba ampliamente usada. Sin embargo otras alcamidas como el DB pueden
unirse a los RCB2 que se sobre expresa en células tumorales de cáncer de glándula mamaria y
tener el efecto anticancerígeno y sin causar los efectos secundarios sobre SNC.
Objetivo
Determinar si existe unión del DB al receptor CB2 en macrófagos humanos y Estudio por
computadora de homología de ligandos y unión a receptor CB2.
Material Y Metodos
El crustáceo Artemia salina fue obtenido en el mercado local y la línea célular tumoral MCF-7
(epitelio adenocarcinoma ductal hormono dependiente) del ATCC. Se realizó una tercera prueba
en macrófagos para determinar la unión del DB al receptor CB2, se evaluó su capacidad de
quimiotaxis y de fagocitosis además del estudio de homología y unión a receptores CB2 por
computadora. En los dos primeros casos fueron tratados con DB y afinina, otra alcamida de H.
longipes. Se determinó la concentración letal media (CL 50) en el crustáceo y la concentración
inhibitoria media (CI50) en células MCF-7.
Resultados
la citotoxicidad del DB y afinina (CL 50) en A. salina fue de 7.9 μg/ml y 0.33 μg/ml para afinina,
respectivamente. La CI 50 del DB y la afinina en células MCF-7 fueron de 24 μg/ml y 22 μg/ml,
respectivamente. El control positivo de citotoxicidad fue el 5-fluoracilo. Además el DB mostró
una capacidad inhibitoria de la función de fagocitosis y quimiotaxis en los macrófagos humanos
además de positividad en el estudio computarizado.
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Conclusion
El decatrienato de bornilo ejerce un efecto citotóxico en A. salina y en células tumorales MCF-7,
en la prueba indirecta con macrófagos y modelaje a computadora los resultados comprueban la
hipótesis de la unión del DB con el receptor CB2. Esto indica que el DB es una opción tangible y
viable para la terapéutica contra el cáncer de glandula mamaria que deberá seguirse estudiando.
Agradecimientos
Los autores agradecen a la UMSNH por el financiamiento a este trabajo (UMSNH 2.1 MMP 2009). AOG es medico
interno de pregado. ¬
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2
Síntesis verde de nuevas bisiminas quirales derivadas del 2,5tiofenodicarboxaldehido
Ma. Guadalupe Hernández Téllez1, René Gutiérrez Pérez1, Ulises Peña Rosas1,
Jaime Vázquez Bravo2
1
Laboratorio de Síntesis de Complejos, Facultad de Ciencias Químicas, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla,
Puebla, Pue - México
2
Universidad de la Cañada, Teotitlán de Flores Magón, Oax. México.
Esta investigación trata de la síntesis de nuevas bisiminas quirales a partir del 2,5Tiofenodicarboxaldehido con las aminas primarias ópticamente puras a) (S)-(-)-1-feniletilamina, b)
(S)-(-)-(4-metilfenil)etilamina, c) (S)-(-)-1-(1-naftil)etilamina. Utilizando el método en ausencia de
disolvente, que es un método de la Química Verde, lo cual permite desarrollar procesos que
reducen o eliminan el uso y generación de sustancias peligrosas para la salud humana y el medio
ambiente, además presenta interesantes ventajas como alta eficiencia, fácil separación y
purificación, así como rendimientos altos.
Las bisiminas muestran un comportamiento versátil de coordinación en la formación de complejos metálicos y, en este contexto, el potencial de la complejación como una aportación a la
medicina es un área de investigación que ha crecido enormemente en los últimos años.
Estructura cristalina de [b].
La estructura de los compuestos se estableció por estudios espectroscópicos y además la
estructura del compuesto [b] fue corroborada por difracción de R-X. ¬
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2
The novel field of redoxomics
MD PhD Eugenio Luigi Iorio
International Observatory of Oxidative Stress. Salerno - Italy
www.oxidativestressobservatory.org
The unbalance between pro-oxidant and antioxidant processes, often described as oxidative
stress (OS) (1) may represent an emerging health risk factor. Indeed it is associated to many
diseases, including cardiovascular diseases, neurodegenerative disorders, cancer and so on (2).
Unfortunately OS don’t show any specific clinical picture so that it can be detected only by means
of biochemical tests (3). In this scenario, the systematic evaluation in biological samples of
primary oxidant chemical species (OCS) and their derivatives, like hydroperoxides, as well as the
dosing of antioxidant compounds/activities, like selenium and glutathione peroxidase, respectively, are not a terminal “ring” in the diagnostic chain on informational flow in biological systems
(DNA -> RNA -> PROTEINS ->METABOLITES -> OXIDANTS) but can take a “central” place compared to genomics, transcriptomics, proteomics and metabolomics (4). For this reason very recently we introduced the novel concept of “redoxomics” (5), that is a term previously and ambiguously used to identify only some oxidised by-products in the field of proteomics (6).
Redoxomics is a novel branch of “applied biochemistry” and “molecular diagnostics” having
the following aims: I) to analyse the structure, the physiological role and the distribution of OCS
and antioxidant systems in a living organism; II) to identify the reciprocal interactions of oxidant
and antioxidant systems - in the general flow of information - in a biological system (cell, tissue,
organ, apparatus, system, whole organism) in a defined step of its development, in basic conditions as well as after potentially stressful stimuli; III) to evaluate the implications of these findings
by the view-point of epidemiology, patophysiology, clinics, pharmacology and so on.
The ambitious goal of redoxomics (as well as for other “-omics” in other fields) is “to map”
dynamically - by means of all the available and sophisticated analytical techniques, from electron
spin resonance to imaging - the whole oxidative-antioxidant repertoire, i. e. the “redoxoma” of a
living unit in different conditions (5). This “integrated” approach by allowing to monitor every
qualitative/quantitative changes of oxidative balance can help the clinicians to find the optimal
and the “personalised” solution to correct any eventual abnormality of redox status associated
to human or animal disease (5, 7, 8). Redoxomics analysis include as screening tests for oxidative
stress measurement the d-ROMs test and the newly developed anti-ROM test (9, 10).
References
1. Halliwell B, Gutteridge JMC. Free radicals in biology and medicine. 2nd Edn, Clarendon Press, Oxford. 1989
2. Favier A. Oxidative stress in human diseases. Ann Pharm Fr. 2006. 64 (6): 390-396.
3. Regano N, Iorio El, Guglielmi A, Mazzuoli S, Francavilla A, Fregnan S, Leogrande G, Guglielmi Fw. The assessment of
oxidative stress in clinical practice and its importance in nutrition. Nutritional Therapy & Metabolism. 2008. 26 ( 4):
149-162.
4. Iorio EL, Ferreri C. Lipidomica. In Trattato Italiano di Medicina di Laboratorio, Angelo Burlina, Piccin, Padova;
2009;341-360).
5. Iorio EL, Marin MG. Redoxomics. An integrated and practical approach to genomics, metabolomics and lipidomics
to manage oxidative stress. 2008. Gen-T. 2: 67.
6. Dalle-Donne I, Scaloni A, Butterfield DA. Redox proteomics: from protein modifications to cellular dysfunction and
diseases. 2006. Wiley Press, New York.
7. Iorio EL. Oxidative stress assessment in Animals. Actuality and perspectives. Proceedings “67° Convegno Nazionale
Unione Zoologica Italiana”. Napoli (Italy). 2006, September 12nd-15th. Pp. 28.
8. Iorio EL, Cinquanta L, Pisano R. A diagnostic algorithm to manage oxidative stress. Australasian J Cosmet Surg.
2006. 2 (1) : 26-30.
9. Alberti A, Bolognini L, Macciantelli D, Carratelli M. The radical cation of N,N-diethyl-para-phenylendiamine: a
possible indicator of oxidative stress in biological samples. Res Chem Intermed. 2000. 26 (3): 253-267.
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10. Carratelli M, Porcaro R, Ruscica M, De Simone E, Bertelli AAE, Corsi MM. Reactive Oxygen Metabolites (ROMs) and
prooxidant status in children with Down Syndrome. International Journal of Clinical Pharmacology Research. 2001.
21 (2): 79-84. ¬
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2
Photobiological responses on structural, phytochemical and
pharmacological aspects of a popularly Brazilian medicinal
plant developed in vitro
Andrea Furtado Macedo1, Marcos Vinícius Leal-Costa2, Eliana Schwartz Tavares2,
Márcia Maria de Souza4, Karina L. da Silva4, Rivaldo Niero4, Valdir Cechinel-Filho4,
Celso Luiz Salgueiro Lage3, Maria Aparecida Esquibel3
1
Laboratório Integrado de Biologia Vegetal, Departamento de Botânica, IBIO, UNIRIO
2
Laboratório de Anatomia Vegetal, Departamento de Botânica, CCS, UFRJ
3
Laboratório de Fisiologia Vegetal, IBCCfo., CCS,UFRJ
4
Núcleo de Investigações Químico-Farmacêuticas (NIQFAR), Curso de Farmácia-CCS, Universidade do Vale do Itajaí
(UNIVALI)
Alternanthera brasiliana is a Brazilian plant occurring in several regions, being known as “penicilina” or “terramicina”, and widely used by rural communities as a medicinal agent. Some experimental investigations have confirmed that this plant exhibits important biological activities,
including antiviral and anti-inflammatory properties. We investigated the influence of light quality
on the leaf of Alternanthera brasiliana Kuntze (Amaranthaceae) developed in vitro. We also
analyzed the phytochemical profile of the methanolic extracts as well as the analgesic activity in
two chemical models of pain in mice, writhing and capsaicin tests. Methanolic extracts from A.
brasiliana plantlets cultured under different spectral quality of lights were analyzed by two
chemical nociception models in mice. Growth parameters including specific leaf mass, thickness,
and leaf density were lowest in plants grown under red light. Blue light induced the largest
number of leaves/plant, and the largest thickness and area of the lealade. Green and red lights
induced the smallest leaf areas. The thickness of the abaxial-face epidermis and spongy parenchyma of the plants was significantly reduced in plants grown under red light. The thickness of
the palisade parenchyma and upper epidermis were significantly increased in plants grown under
blue light, compared to the other fluorescent-light treatments. The specific spectral band also
influenced the differentiation of mesophyll cells. In the dark and under red light, the mesophyll
was homogenous; and in the dark and under green light, the leaves were more compact. Under
blue light, the cells displayed the characteristic palisade morphology. The results showed that the
increase of a specific parenchyma type was related to a specific spectral band. All spectral-quality
treatments reduced the numbers of stomata and trichomes. The results for green light were in
some respects similar to those for red light, and in other respects similar to those for blue light,
probably because phytochromes and cryptochromes are green-light receptors. The results
showed a highest biomass yield in plantlets developed under blue and white light treatments.
The most active extract against writhing test at 10 mg/kg, given intraperitoneally, was that one
from plants grown under red light, which caused 85.0 % of inhibition. The hydroalcoholic extract
from the whole native plant and callus a and b (previous work) caused 66.8, 66.6 and 50.4 % of
inhibition, respectively. This study indicated that Alternanthera plants have strong morphological
plasticity induced by light. The results suggest that high-quality Alternanthera can be achieved by
culturing the plants in vitro under a combination of blue and red light. Production of plants of A.
brasiliana by using different kind of lights, especially red light, may be an important strategy to
obtain compounds with analgesic potential whose structures and mechanism of action should be
studied more in detail.
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Acknowledgements
This study was funded by a PhD fellowship and financial support from CAPES- PROAP/PROEX, CNPq, and
UNIVALI/Brazil. The authors are grateful to Prof. Dr. A. Reis for botanical identification. ¬
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Etnobotanica de especies de familia lycopodaceae utilizadas
por los rikuyhampiyachak de la etnia saraguro, Loja - Ecuador
Manuel Antonio Lozano1, Chabaco Armijos1, Omar Malagón1, Francesco Bracco2,
Giovanni Vidari3, Paola Vita Finzi3
1
Planta de Productos Naturales (UTPL), Loja - Ecuador
2
Departimento de Ecologia del Territorio Univ. Pavia
3
Departimento de Chimica Organica de la Univ. Pavia
La investigación permitió generar un inventario de especies de la familia Lycopodiaceae utilizadas por 10 Rikuyhampiyachack (visionarios) de la etnia Saraguro en la provincia de Loja, las cuales
son empleadas en la sanación de enfermedades de carácter mitológico como la “Shuka”, “mal
aire”, “vaho de agua”,”espanto”, “malhecho”, para visionar y como purgante. Para obtener la
información se aplicó una encuesta semiestructurada de TRAMIL modificada, a diez
Rikuyhampiyachack.
Nueve especies de Lycopodiaceae utilizadas en la medicina ancestral por el pueblo Saraguro
fueron reportadas: Huperzia compacta (Waminga verde), Huperzia cf. columnaris (Waminga oso),
Huperzia espinosana (Waminga oso hembra ó musgo), Huperzia weberbaneri (Waminga suca),
Huperzia crassa (Waminga amarilla), Huperzia sellifolia, (Waminga rojo), Huperzia sp1 (Trencilla
verde), Huperzia sp2 (Trencilla amarilla), Huperzia tetragona (Trencilla rojo).
Todos las utilizan en maceración en alcohol. En el caso de usarlas como purgante la planta es
machacada y mezclada con alcohol y aceite de almendra para ser bebidas.
De las especies reportadas la Huperzia tetragona, Huperzia crassa, Huperzia sellifolia, Huperzia
weberbaneri han sido citadas (Andrade 2007) en un estudio realizado con los Rikuyhampiyachack
de la parroquia San Lucas. Otra especie la Huperzia sellifolia es citada por (Morocho 2006) en un
estudio realizado en Saraguro. Mientras que las especies Huperzia compacta, Huperzia espinosana, Huperzia columnaris, no han sido reportadas en estudios anteriores. Según Vacacela (2008),
Huperzia espinosana, Huperzia sellifolia, Huperzia weberbaneri, Huperzia compacta se utilizan para
curar los malos aires, como purgantes de hígado y riñones, también ayudan a despertar las
neuronas, lo que coincide con los resultados encontrados.
De acuerdo el catalogo de Plantas Vasculares del Ecuador Jørgensen & León (1999) en la
provincia de Loja se encuentran 28 especies del genero Huperzia, de las cuales 9 según el estudio
son utilizadas en la medicina ancestral por los Rikuyhampiyachak
Los valores de nivel de uso significativo NUS para casi todas las especies supera el 20%, por
tanto merecen su evaluación y validación científica. [1] En relación al índice de valor de uso IVU
los valores calculados están entre 0,4 y 1,9. Las especies con mayor valor son: Huperzia sp1,
Huperzia tetragona y la Huperzia compacta; lo que significa que las 3 son reconocidas por su
acción terapéutica por los Rikuyhampiyachack; es decir tienen un elevado grado de creencia
popular por sus propiedades curativas. [2]
Según la (UICN) se consideran como especies vulnerables: Huperzia columnaris, Huperzia
compacta, Huperzia espinosana.
Referencias
[1] Bermúdes & Velazqués, 2002. Etnobotánica médica de una comunidad campesina del estado de Trujillo Venezuela,
usando técnicas cuantitativas, Rev. Farmacia, Vol 44,6 p.
[2] Bruni A., Ballero M., Poli F. 1997. Cuantitative etnopharmacological study of the Campidano Valley and Urzulei
district, Sardinia, Italy. J. of Etnopharm.57: 97-124. ¬
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2
Aproximación a las creencias sanadoras con plantas y
simbolismos mágicos- religiosos en Santa Rita. Estado Aragua
Venezuela
Nubilde Martínez1,2, Yorbhys Castañeda3, Gardenia Benítez4, Daisy Meza5,
Ligia Soto6
1
Universidad de Carabobo. Sede Aragua. Facultad de Ciencias de la Salud. Escuela de Medicina “Dr.Witremundo
Torrealba” Dpto. de Farmacología y Fisiopatología.
2
Instituto de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Carabobo Sede Aragua (BIOMED-UC) Sección
Fitofarmacología.
3
Dpto. de Morfología Microscópica.
4
Dpto. de Salud Pública.
5
Evaluadora de la Dirección de Docencia y Desarrollo Curricular.
6
Metodología de la Investigación. Facultad de Ciencias Económicas y Sociales Sede Aragua
Esta investigación se plantea desde la Epistemología de lo Complejo aplicando la metódica de
la Hermenéutica a través de los relatos de vida de los informantes, que no son más que los
relatos cotidianos sobre como se sienten ellos al utilizar sus métodos de sanación. Se construye
desde la lógica de lo vivido, lo cotidiano y lo subjetivo, de como los informantes utilizan las
plantas y los modos de curación de sus patologías en el fundamento de sus creencias mágica religiosas, cuyo interés es el significado dado por los sujetos participantes en las acciones y
sucesos que constituyan la trama de su vida cotidiana. Se llevó un registro de los testimonios
mediante la entrevista focalizada para recoger las narraciones de vida de los tres informantes
relacionados con los procesos de sanación. Esta investigación se desarrolló en un pueblo llamado
Santa Rita, parroquia capital del Municipio Francisco Linares Alcántara, lugar de asentamiento de
los informantes que aportaron sus vivencias. Ellos forman parte de una población estimada de
79.885 habitantes para el año 2008 (INE). Los tres (3) informantes son pacientes diabéticos y
pertenecen al club “Buena Vida “, donde todos sus integrantes son pacientes diabéticos. La
validez y la confiabilidad estuvieron dadas por la coherencia entre las narraciones de los/las
informantes y la interpretación de las investigadoras que se sumergieron en los relatos de vida
contrastando o triangulando a través de la participación y de la observación directa de la realidad, a partir de la cual se reflejó la imagen clara del fenómeno estudiado. Las patologías que
mayormente manifestaron padecer los informantes fueron: niveles de azúcar en la sangre alta,
nervios, insomnio, gripe, cólicos, parásitos, quemaduras, mal de ojo y culebrilla. Revelaron que
utilizaban los medicamentos que los médicos les recetaban acompañados de plantas, unas en
forma de cocimientos de hojas, tallos, frutas, flores y raíces; otras en forma de infusión como la
cayena, para tratar el insomnio y los nervios; otras plantas las utilizan externamente como
cristales de sábila para tratar las quemaduras. Pero refieren que todo ésto va acompañado de
oraciones, como en el caso de la culebrilla, mal de ojo y cólicos o empachos. Los informantes
también comentaron sobre como preparaban las plantas, cantidad que utilizaban y los efectos
que producían. Se presentan conclusiones. ¬
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2
Caracterización de dispersiones sólidas de metronidazolpolietilenglicol 6000 para mejorar la velocidad de dispersión
del fármaco
Ruth Meléndrez L.1, Marco Antonio González Coronel1, J. Albino Moreno R.1,
Marcos González F.2, Lòpez Àvila Hugo1
1
Facultad de Ciencias Químicas
Facultad de Ciencias de la Computación.
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Edificio 179, Av. San Claudio y 14 Sur, Col. San Manuel Puebla, Puebla,
CP. 72570 México
[email protected]
2
Existen estudios de sistemas farmacéuticos que se emplean para mejorar las propiedades
fisicoquímicas de los fármacos, uno de ellos, las dispersiones sólidas requieren de un acarreador
para lograr tal fin. El polietilenglicol 6000 (PEG6000) se le utiliza como acarreador, presenta una
alta hidrofilicidad y es empleado en la industria farmacéutica como excipiente y principio activo.
En el presente trabajo el PEG6000 se fundió con el metronidazol para la formación de dispersiones sólidas. Dicho fármaco es antiparasitario e insoluble en agua por lo que genera problemas
de biodisponibilidad en el organismo. Se prepararon dispersiones sólidas con relación de 1:0.25;
1:0.50; 1:0.75 de metronidazol:PEG6000. Todas las muestras presentan cierta cristalinidad, de
acuerdo a los estudios de Calorimetría Diferencial de Barrido y Difracción de Rayos X, muestrando que el metronidazol puede estar retenido en el volumen de estructura del PEG6000. La
evaluación de la velocidad de dilución de las soluciones sólidas manufacturadas en tabletas,
principalmente la que presenta la relación 1:0.50 respecto a las comerciales muestran un perfil de
liberación superior en un intervalo de 45 y 90% al de las comerciales de 29 y 56%.
Los resultados experimentales fueron sometidos a un análisis de regresión simple, las cuales
generaron 3 matrices de datos y la correspondiente al metronidazol comercial, que permitirán
determinar si hay cambios significativos en las soluciones sólidas y el metronidazol comercial,
esto se puede corroborar a través de la comparación por parejas de los valores medios de las
muestras generadas. El problema de cómputo para comparar los valores medios de 2 muestras
se sintetiza en obtener la matriz de covarianza de la matriz de datos de cada muestra para
después obtener una estimacion de ambas matrices, de esta matriz se obtiene su inversa y
finalmente se calculan los estadísticos de Hottelling T 2 y F para datos multivariados para demostrar si hay diferencias en los vectores de medias.
Referencias
1.Huan-Qiu Li Æ Zhu-Ping Xiao Æ Rui-Qin Fang, Hai-Liang Zhu, J Chem Crystallogr 38, 461-466, 2008.
2.Butler James Matthew, Method of producing a solid dispersion of a poorly water soluble drug, Pharmaceutical
Patents, 5985326, 2-7, 1998.
3.Herbert A, Lieberman, Rieger M. Martin and Banker Gilbert S, Pharmaceutical Dosage Forms Disperse System, 3, 8793, 2000. ¬
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2
Caratterizzazione del profilo fenolico mediante HPLC-PDA-MS
e NMR di un estratto idroalcolico di Citrus aurantium var.
amara e valutazione dell’attività antiinfiammatoria
T. Mencherini1, L. Campone1, A. Piccinelli1, R. Celano, P. Picerno1, F. Sansone1,
M. García Mesa2, D. M. Armenteros2, M. A. Alfonso2, R. Aquino1, L. Rastrelli1
1
Università degli Studi di Salerno, Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Fisciano (SA) - Italia
2
Departamento de Bioquímica, Instituto National de Angiología y Cirurgía Vascular - Cuba
I frutti di varie specie di Citrus sono una ricca fonte di composti bioattivi, come flavonoidi e
cumarine, con numerosi effetti benefici per la salute, basati sulla loro dimostrata attività antiossidante, antiinfiammatoria e antiaggregante piastrinica. Inoltre, i flavonoidi riducono la fragilità
capillare con un’azione protettiva sull’endotelio vascolare.1 A queste proprietà è legato il potenziale uso di estratti di Citrus nel trattamento delle malattie vascolari.2 Citrus aurantium var. amara,
comunemente conosciuto come arancio amaro, è una delle specie più abbondanti del genere
Citrus diffusa nelle regioni tropicali e subtropicali. A Cuba, il decotto ottenuto dalle foglie e dalle
cortecce è usato come antipiretico, antispasmodico e tonico; 3 mentre l’estratto idroalcolico
(EtOH 70%) ottenuto dalle bucce dei frutti di C. aurantium var. amara (Naranja agria) è utilizzato,
come tintura nell’insufficienza venosa cronica.4
In questo studio è stato determinato il profilo fenolico della tintura di Naranja agria prodotta
presso i laboratori dell’Istituto Nazionale di Angiologia e Chirurgia Vascolare di Cuba. L’analisi
qualitativa e quantitativa è stata effettuata mediante HPLC-PDA-MS. Sono stati caratterizzati 11
composti identificati come flavanoni (neoeriocitrina, naringina, neoesperedina e neoesperedina
di-ossalato), flavoni (nobiletina, neodiosmina e vicenina II), cumarine (8-(3-β-D-glucosil-2-idrossi-3metilbutil)-7-metossicumarina, meranzina idrata e isomeranzina) e una furanocumarina (6',7'diidrossibergamottina). Le strutture proposte sono state confermate con l’isolamento dei composti dalla tintura mediante tecniche cromatografiche (Sephadex LH-20, HPLC-IR) e la caratterizzazione mediante tecniche spettroscopiche (1D e 2D-NMR). Per supportare l’uso nella medicina
tradizionale, è stata valutata la capacità della tintura di inibire in vivo l’aumento della permeabilità
vascolare e l’edema indotto da istamina e destrano nella zampa di ratto. I risultati mostrano una
significativa riduzione dell’edema nei ratti trattati con tintura di Naranja agria (ID 50 119.6 mg/Kg)
per via orale (con un effetto massimo dopo 7 giorni di trattamento) rispetto agli animali di controllo (in cui viene somministrata solo acqua), confermando il buon potenziale antiinfiammatorio
della tintura a supporto dell’uso tradizionale a Cuba nel trattamento dell’insufficienza venosa
cronica.
Bibliografia
1.Benavente-García, O.; Castillo, J. J. Agric. Food Chem. 2008, 56 (15), 6185-6205
2.Middleton, E. Jr.; Kandaswami, C.; Theoharides, T. C. Pharmacol. Rev. 2000, 52(4), 673-751
3.Torres Jiménez, I. B.; Quintana Cárdenes, I. J. Rev Cubana Plant Med 2004, 9(1)
4.García Mesa, M.; Armenteros Herrera, D. M.; Mahía Vilas M.; Coma Alfonso, C.; Hernández Carretero, J.; Díaz Batista,
A.; Fernandez Montequini, J. Rev. Cubana Angiol. y Cir Vasc 2002, 3(2), 39-46. ¬
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2
Carotenoides en frutas silvestres y poco cultivadas de Panamá
Enrique Murillo
Laboratorio de Bioquímica y Nutrición, Universidad de Panamá, Panamá
[email protected]
Recientes estudios han reconocido los beneficios de las frutas y vegetales, en la reducción del
riesgo de enfermedades crónicas y degenerativas (cáncer, enfermedades cardiovasculares y
degenerativas). Las frutas, han despertado especial interés por sus propiedades nutracéuticas,
asociadas con el alto contenido de sustancias biológicamente activas (ácido ascórbico, compuestos fenólicos, carotenoides, etc.). En las regiones tropicales existe una gran diversidad de frutas,
que solo son consumidas por los animales silvestres, aborígenes o campesinos y otras que son
poco cultivadas (olvidadas o huérfanas). Estas frutas constituyen una gran reserva de sustancias
bioactivas, cuantitativa y cualitativamente. Por tal razón, en nuestros laboratorios estudiamos los
carotenoides de las frutas silvestres y poco cultivadas. Considerando su composición de carotenoides, las frutas se agruparon en: 1) fuentes de β-Caroteno y β-criptoxantina. La mayoría de las
frutas estudiadas, poseen un El contenido de β- caroteno en la mayoría de las frutas estudiadas,
se encuentra en el rango de muy alto (>2mg/100g). Además, el contenido de β-caroteno del
membrillo y la chunga es mayor que el encontrado en la zanahoria y otros alimentos ricos en
carotenoides provitamina A. En los casos como el corozo, maracuyá chino, sastra y jobo, el alto
contenido de β-criptoxantina aumenta considerablemente su actividad provitamina A. 2) Fuentes
de Zeaxantina y luteína. Es conocido que la zeaxantina y la luteína son los principales pigmentos
de la mácula y que su baja ingesta se relaciona relaciona con el aumento del riesgo de
Degeneración Macular. Sastra, Corozo, Membrillo y Sapote son las frutas con mayor contenido
de zeaxantina (>2mg/100g). Mientras que la luteína solo es muy alta en Sastra. 3) fuentes de
Licopeno. El Cerezo de monte es la única fruta silvestre que contiene cantidades importantes de
licopeno, pero las cantidades son sorprendentemente altas, este carotenoide representa cerca
del 90% de los carotenoides totales. Cuando el contenido de licopeno de esta fruta, se compara
con el tomate (46.2 contra 3.1), encontramos que su contenido de licopeno es diez veces mayor.
Esto es importante, ya que el consumo de licopeno asocia con un menor riesgo en el desarrollo
de algunos tipos de cáncer. 4) Carotenoides con anillos κ. En las frutas tropicales silvestres,
además de encontrar “buenos” carotenoides, también se pueden encontrar nuevos carotenoides. Este es el caso del Mamey rojo (Pouteria sapota), una fruta nativa de América Central, donde
hemos encontrado varios nuevos carotenoides, con anillo κ no hiroxilado. Esta es una nueva
familia de carotenoides, que nos permite plantear una nueva desviación metabólica. En donde
los 5,6- epóxidos de β-caroteno y de β-criptoxantina, por arreglo pinacol, se transforman en
carotenoides con anillo κ. hidroxilados, en la pulpa del mamey rojo, se debe a la coincidencia de
dos eventos metabólicos poco comunes: 1) gran actividad de enzimas que catalizan la
epoxidación los anillos β no hidroxilados y 2) la alta actividad de enzimas que catalizan el arreglo
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pinacol de los epóxidos. Esto da como resultado la biosíntesis de carotenoides poco comunes,
con anillos κ. ¬
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Etnomedicina de comunidades afrodescendientes del cerro de
las mojarras en el occidente colombiano
Nayive Pino Benítez
Universidad Tecnológica del Chocó, bloque 6, Laboratorio 316, Grupo Productos Naturales
Quibdó, Chocó, Colombia, CENIVAM
Este trabajo se enfoca en conocer principalmente enfermedades y forma de tratamiento que
usan comunidades afrocolombianas teniendo en cuenta su acervo cultural. Estas comunidades
están asentadas en la llanura aluvial del río San Juan frente a los cerros de las Mojarras cuya
altitud llega a los 400m, en el departamento del Chocó ubicado en la esquina noroccidental de
Sur América, presenta condiciones climáticas muy particulares, clima cálido superhúmedo (promedios anuales de 26ºC de temperatura, hasta 11.632 mm de precipitación, humedad relativa de
90%) ubicado a los 4º 10' y 8º 10' latitud norte y entre los 76º y 78º longitud oeste. El marco
metodológico se fundamenta en las experiencias e informaciones de las comunidades siguiendo
los parámetros de Gary (1995), se registraron los datos relevantes del grupo étnico como edad,
sexo, experiencia en el tratamiento de enfermedades, plantas, parte usada, formas de
preparación y dosis, tal como lo sugieren Adu- Tutu et al.,(1979). El proceso duró seis meses, se
desarrolló en varias fases: socialización de la propuesta con los miembros del consejo comunitario, autoridades locales y ambientales; talleres, visitas directas, charlas, y encuestas semiestructuradas a los conocedores locales designados por la comunidad (curanderos, yerbateros y
amas de casa), considerando lo etiológico (origen o causa de las enfermedades), lo nosológico
(sintomatología) y lo terapéutico (forma de curación). Se entrevistaron 65 personas, cuyo análisis
arrojó 13 enfermedades más frecuentes (gripe, asma, paludismo, calor en el cuerpo, frio en la
cintura (impotencia sexual), pasmo, parásitos, tifo, limpieza de la matriz, retener amenazas de
aborto, fiebres, lombrices y brujerías), usando para su tratamiento fauna (5spp) y 85 plantas,
siendo 25 las más frecuentes: Ambrosia cumanensis, Borojoa patinoi, Bidens cynapiifolia, Bidens
pilosa, Columnea picta, Citrus limon, Columnea rubriacuta, Conobea scopariodes, Chenopodium
ambrosiodes, Drymonia sp, Gonzalagunia asperula, Gliricidia sepium, Hedichium coronarium, Justicia
pectoralis, Palicourea acetosoide, Passiflora quadrangularis, Plectranthus amboinicus, Peperomia
pellucida, Miconia reducens, Neurolaena lobata, Ocimum spp, Piper spp, Pereskia bleo, Siparuna
gigantotepala, Tripogandra serrulata. Es relevante el uso de plantas mágico-religiosas en el
tratamiento de muchas enfermedades.
Literatura Citada
1.Adu-Tutu, M., Afful, Y., Asante-Appiah, K., Leberman, D., Hall, J.B. & Elvin-Lewis, M. 1979. Chewing stick usage in
southern Ghana. Economic Botany 33 (3): 320-328.
2.Gary M. 1995. Ethnobotany. A methods manual. Royal Botanic Gardens, Kew, UK. Chapman & Hall, London. 268 pp.
¬
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2
Fitofarmacia en el Peru
Katia Peralta Hinojosa1, Fritz Choquecillo Peña2
2
1
Instituto Peruano de Investigación Fitoterápica Andina (IPIFA)
Instituto de Química Aplicada a la Farmacia, Facultad de Farmacia
Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima - Perú
El presente trabajo tiene por objeto exponer el modo de empleo de las plantas medicinales del
área Andino-Amazónica, legado por la experiencia ancestral de los antiguos peruanos,
adecuándolo al contexto científico de nuestros días. Empleo que es complementado con un
estudio sistémico, químico-biológico, orientado a la validación de estas plantas medicinales. Con
la colaboración del Instituto de Química Aplicada a la Farmacia, se hicieron los correspondientes
estudios fitoquímicos (screening y determinación porcentual de los principios activos), lo que nos
ha permitido realizar proyecciones para establecer formas farmacéuticas adecuadas.
Las especies que por los estudios realizados consideramos de más interés y con mayores
expectativas en el proceso de integración de la Medicina Tradicional y la Medicina Académica,
son las que en el cuadro siguiente aparecen señaladas con un asterisco, las mismas que serán
desarrolladas más ampliamente en el presente trabajo.
ESQUEMA DE TRATAMIENTO MEDICO CON PLANTAS MEDICINALES DEL AREA ANDINO-AMAZONICA
FASES TERAPEUTICAS
1. Depurativa
2. Curativa
3. Preventiva
1. Plantas Depurativas (+ Dieta)
Manayupa - Desmodium molliculum *
Flor de Arena - Tiquilia paronichioides *
Hercampuri - Gentianella alborosea *
Sanguinaria - Alternanthera iresine
Canchalagua - Pectis trifida
Cola de Caballo - Equisetum arvense
2. Plantas Curativas
Agracejo - Berberis vulgaris *
Pajarrobo - Tessaria integrifolia *
Cuti Cuti - Notholaena nivea *
Yacòn - Smallanthus sonchifolius *
Estevia - Stevia rebaudiana *
Mucura - Pettivera alliacea
Chuchuhuasi - Maytenus laevis *
Yawar Ch’onqa - Oenothera rosea *
Asmachilca - Eupatorium triplinerve
Muña Muña - Minthostachys setosa
Arrayán - Eugenia mirtomimeta
Molle - Schinus molle *
Sangre de Drago-Croton draconoides *
Pasuchaca - Geranium ayabacense *
Guaco - Micania cordifolia
Ubos - Spondias mombin *
Guanabana - Annona muricata *
Achiote - Bixa orellana *
Renaco - Clusia insignis
Mullaca - Müehlenbeckia vulcanica *
Huamanripa - Vaccinium crenatum
Escorzonera - Eryngium weberbaueri
Paicco - Chenopodium ambrosioides L
Uña de Gato - Uncaria tomentosa *
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3. Plantas Preventivas
Maca - Lepidium meyenii Walp *
Quinua - Chenopodium quinoa *
Kiwicha - Amaranthus caudatus *
Copaiba - Copaifera officinalis
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Chuchuhuasi - Maytenus laevis
Kañiwa - Chenopodium pallidicaule *
Camu Camu - Myrciaria dubia *
Sacha Inchi - Plukenetia volubilis * ¬
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2
Therapeutic use and secretory cells of Myrrhinium
atropurpureum (Myrtaceae) endemic species collected in Rio
de Janeiro
1
Cristiane Pimentel Victório, 2Rosani do Carmo de Oliveira Arruda
1
Centro Universitário Estadual da Zona Oeste, Rio de Janeiro (UEZO), Brasil
2
Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro (UNIRIO)
[email protected]
Atlantic coast restinga in Brazil is among the world’s biodiversity hotspots. This ecosystem
presents a diverse flora where Myrtaceae is the most important families of this plant community.
In this study we investigated the leaf anatomy, focus in secretory cells and their secreted compounds, of Myrrhinium atropurpureum Schott restricted to Rio de Janeiro restingas - collected in
Marambaia restinga. This species is a large evergreen shrub or small tree, reaching from 1.5 to 5
m high. The studied species was selected based on its importance native source of medicinal
compounds. Leaf secretory structures were described using light microscopy, and histochemical
tests were performed from fresh leaves to identify the secondary metabolites: Sudans, Oil red O,
Nile blue, sulphuric acid and sodium hydroxide. To observe secretory cells, fixed plant samples
were dehydrated in graded ethanol-butanol series, embedded in paraffin, and sectioned. The
following reagents were employed: Sudans, Oil red O and Nile blue to evaluate lipophilic compounds and terpenoids. Leaf volatiles have been characterized by gas chromatography after
simultaneous distillation-extraction. A bibliographic review about medicinal use of this species
was employed. In Brazil, M. atropurpureum is known as “pau-ferro”, “carrapato” and “mirtilo”.
The main use observed is as astringent and antimicrobial. Leaf analysis showed several cavities in
mesophyll that are the main sites of lipophilic and terpenoid production, additionally, phenolic
compounds were also detected. The major volatiles were monoterpenes (±70%). Taken together,
the popular use and the scientific investigation of leaves and secondary metabolites we have an
indication about compounds involved in therapeutical effects. ¬
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2
In vitro trypanocidal, leishmanicidal and antitumoral activities
of acetogenins isolated of Annona cornifolia A. St. -Hil.
(Annonaceae)
L.A.R.S. Lima1,*, T.M.A. Alves2, C.L. Zani2, A.L.T. Rabello2, P.A. Sales Júnior2,
A.J. Romanha2, M.A.D. Boaventura3, L.P.S. Pimenta3
1
Campus Centro-Oeste Dona Lindu, Universidade Federal de São João Del-Rei, 35501-296 Divinópolis, MG, Brazil
2
Centro de Pesquisas René Rachou, Fiocruz, 30190-002 Belo Horizonte, MG, Brazil
3
Departamento de Química, Instituto de Ciências Exatas, Universidade Federal de Minas Gerais, 31270-901 Belo
Horizonte, MG, Brazil
[email protected]
Protozoan parasites belonging to the genera Leishmania and Trypanosoma (order
Kinetoplastida, family Trypanosomatidae) occurs in the tropical and sub-tropical areas of the
world, where they cause severe diseases with huge medical, social, and economic impact to
millions of people. Among the many different strategies for drug discovery, screening the local
biodiversity for bioactive natural products using appropriate bioassays is an interesting alternative for researchers in affected areas, especially in countries with a rich biodiversity.
Many phytochemical studies on the Annonaceae species have been reported and have become
associated with pharmacological studies. Annona is far the greater genus in this family and has a
wide use in tradicional medicine. Annona cornifolia A. St.-Hil. is an annual perennial small tree,
found in Brazilian savanna, and popularly known as “araticum-mirim”. The orange ripe fruit flesh
is sweet, and aromatic. The green fruit is popularly used against ulcer. Previous papers reported
the isolation of acetogenins from A. cornifolia A. St.-Hil. (Lima et al., 2009). Hence, aiming to
continue working with the phytochemical and biological evaluations of this species, we investigated the trypanocidal, leishmanicidal and antitumoral activities of acetogenins isolated from A.
cornifolia A. St.-Hil.
Eight annonaceous acetogenins isolated from seeds of A. cornifolia A. St. -Hil. namely a mixture
of two acetogenins 4-desoxilongimicin B (1) and folianin A (2), esquamocin M (3), annofolin (4),
glaucanisin (5), parviflorin (6), annotacin (7) and a mixture of acetogenins glaucanisin (5) and
glaucanetin (8) were evaluated in assays such as trypanocidal, leishmanicidal and antitumoral
against three human tumour cell lines such as UACC-62 (human melanoma), TK-10 (human renal
carcinoma) and MFC-7 (human breast cancer). In antitumoral assay, the acetogenins were more
active against MCF-7, indicated seletivity for these tumour cell lines. The acetogenins annofolin
(4), glaucanisin + parviflorin (5+6) and glaucanin + glaucanetin (5+8) inhibited growth cell line TK10, while annofolin (4) also was actived against UACC-62. The acetogenins 4-desoxylongimicin B +
folianin A (1+2), annofolin (4), glaucanisin + parviflorin (5+6) and glaucanin + glaucanetin (5+8)
were more active against Trypanosoma cruzi. In addition, the compounds annofolin (4) and
annotacin (7) were active from amastigote-like forms of Leishmania amazonensis. Dose-response
experiments with the active compounds confirmed these preliminary results. We found that
annonaceous acetogenins could kill until 87% of the amastigote-like forms of Leishmania amazonensis and 100% forms of Trypanosoma cruzi, when tested at 20 μg/ mL. These results suggest
that acetogenins are attractive lead compounds that deserve further investigation aiming at
developing new drugs to treat trypanosomiasis, leishmaniasis, and cancer.
Ref. Lima et al. Food Chem. 122 (2010) 1129-1138.
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Acknowledgements
FAPEMIG for financial support (grant CEX - PPM-00546-09). ¬
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Actividades biológicas antioxidantes, protectoras de estrés
oxidativo y anticancerígenas de la mora (Rubus adenotrichus)
Gabriela Azofeifa1, Silvia Quesada1, Cecilia Díaz1,2, Ana Mercedes Perez3
1
Departamento de Bioquímica, Escuela de Medicina, Universidad de Costa Rica,
[email protected]
2
Instituto Clodomiro Picado, Facultad de Microbiología, Universidad de Costa Rica.
3
Centro de Investigación en Tecnología de Alimentos CITA, Universidad de Costa Rica.
La mora (Rubus adenotrichus) nativa de México hasta Ecuador, es conocida en Costa Rica como
mora vino y se consume ampliamente como jugo. El consumo de alimentos ricos en polifenoles,
como la mora, ha sido asociado en la literatura científica con posibles efectos beneficiosos para la
salud. Estudios fitoquímicos muestran la presencia de antocianinas y elagitaninos como compuestos fenólicos de mayor concentración en Rubus adenotrichus.
En este trabajo se realizó una extracción de polifenoles de mora utilizando acetona, acetato de
etilo y purificando en una columna XAD-7. Los polifenoles fueron recuperados con metanol,
liofilizados y analizados mediante HPLC, evidenciando un extracto rico en antocianinas y elagitaninos (AE).
La actividad barredora de radicales fue evaluada por medio del método de DPPH en el extracto
AE, obteniendo un IC50 de 2,57±0,11μg/ml. Además se analizó su efecto protector al estrés oxidativo inducido por hidroperóxido de tert-butilo (TBHP) en homogenizados de hígado de rata, por
medio de la detección de especies reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS). Concentraciones
mayores a 25μg/ml mostraron efectos protectores significativos (p<0.05) en la peroxidación
lipídica al compararse con los controles.
El efecto citotóxico de la fracción AE fue evaluado en líneas celulares tumorales humanas. La
línea tumoral de colon (SW-620) y la línea de hepatocarcinoma (HEP-G2), presentaron LD 50 de
98,9 ± 19μg/ml y 128,7 ± 19,2μg/ml respectivamente. Estos valores muestran diferencias significativas (p<0.05) con la línea control no tumoral (Vero) que presenta un LD 50 de 267,8 ± 17.2μg/ml.
La línea celular de adenocarcinoma estomacal (AGS) fue menos sensible al efecto citotóxico de la
fracción AE y el valor de LD50, 211,4 ± 18,5μg/ml, no muestra diferencias estadísticamente significativas con el control no tumoral.
Los resultados obtenidos mediante las distintas metodologías muestran que los polifenoles
presentes en la mora costarricense tienen un potencial de defensa antioxidante, protector de la
peroxidación lipídica y un potencial citotóxico en líneas tumorales. Estos hallazgos permiten dar
un valor agregado a este producto por sus posibles beneficios a la salud, lo que puede ser utilizado para promover su consumo. ¬
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2
Contribucion de las infusiones y jarabes de plantas
medicinales en la disminución de la morbilidad de cuadros
gripales en los niños de edad escolar de tres regiones del
estado de Michoacan. México
M.T. Álvarez Ramírez1, C.G. Linares Reyes1, L.A. Hernández Camargo1,
M. T. Flores Álvarez2
1
Lab. Parasitología y Nutrición de Facultad de Biología. Morelia, Mich
2
Facultad de Medicina. “Dr. Ignacio Chávez”. Morelia, Mich
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo
Es común la presencia de cuadros gripales durante los cambios de estación del año, su etología
y el número de ellos varían según las condiciones ambientales y climatológicas de cada una de
estas tres regiones participantes, lo común entre ellas, que poseen un río, que le puede favorecer
ó disminuir sus cuadros gripales, dependiendo de la calidad de su agua que humidifica el medio
ambiente, favoreciendo la respiración. Por otro lado, estas regiones también cuentan con una
gran tradición herbolaria propia, que utilizan durante estos procesos gripales, disminuyendo
considerablemente el índice de morbilidad, principalmente en los niños, Estas infusiones y
jarabes de frutas, condimentos y plantas silvestres que se utilizan como preventivos y curativos.
Son ricos en vitaminas, bioflavonoides, terpenos etc. El objetivo fue determinar que plantas
medicinales se utilizaron durante los cuadros gripales y su efecto, en la disminución de morbilidad en niños de edad escolar de tres regiones: La Piedad (R1) Uruapan (R2) y (R3) Morelia.
Participaron 540 niños de 3 escuelas, divididos en los seis grados escolares con edades de 6 a 12
años. La etiología de su gripe se determinó por la citología nasal (cn) en tinción de Eosina/Azul de
Metileno a cada participante, más un cuestionario personalizado. Se aplico el análisis estadístico
ANDEVA. Los resultados mostraron que los niños que tomaron infusiones y jarabes a tiempo con
plantas medicinales, su índice de morbilidad fue de 4 y 5 días en el 85% (459/540)., Mientras que
los 81 niños (15%) que no consumieron ningún te ó jarabe se complico su cuadro gripal y fue de 8
a 15 días, requiriendo atención médica. Los agentes etiológicos fueron principalmente cn fue de
tipo viral y bacteriano, en segundo lugar el alérgico. Los niños de 7 y 11 años presentaron mayor
índice de morbilidad, así como la zona R2 con P<0.01 respecto a R1 y R3. Las infusiones de hojas,
corteza, pericarpio y jarabes de frutos de plantas fueron los siguientes; Cinnamomun verun,
Matricaria chamonilla, Menta sativa, Crataegus pubercens, Rubus liebmannii, Plantago australis,
Lopezia racemosa, Eucatiptus robusta, Cestrum thyrsoideum, Persea americana, lepechinia caulescens, Quercus rugosa, Cupressus lindleyi, Gnaphalium salicifolium, G. semiamplexicaule, G. attenuatum, Cirsium ehrenbergii, C. subcoriaceum, Bidens odorata, B. ferulifolia, Verbena bipinnatifida,
Heterrotheca inuloides, Prunus serótina, Prunus domestica, Malus silvestris, Punica granatum,
Prunus pérsica, Citrus auratifolia, C. reticulata, C. auratium, C. Limetta, C. sinnesis, Psidium guajava
mas 25 p. La gran mayoría de las plantas contiene vitaminas y Bioflavonoide, terpenos etc., que
colaboran como reguladores del sistema inmune del niño, principalmente en procesos inflamatorios que se caracterizan estos cuadros gripales, Así también, actúan como antivirales, antibacterianos y reguladores y en el proceso de control y eliminación de los agentes etiológicos, colaborando en la homeostasis del organismo de él.
(Proyecto CONACYT. No. 115897.) ¬
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Estudios fitoquimicos desarrollados en el Laboratorio Central
de Farmacologia
Hiran Ramón Cabrera Suárez1, Francisco J. Morón Rodriguez1,
Maria del Carmen Victoria Amador1, Ana Ibis García Hernadez1, Ana Iris Frías2,
Neivys Delgado2, Armando Cuellar2
1
Laboratorio central de farmacología universidad medica de la habana, Carvajal s/n y Agua Dulce,
Cerro Ciudad de la Habana, Cuba
[email protected]
2
Facultad de Biología Universidad la Habana Calle 25 y J, Vedado, Plaza de la revolución, Ciudad de la Habana, Cuba
3
Instituto de Farmacia y Alimentos Universidad de la Habana, Calle 222 La Lisa, Ciudad de la Habana, Cuba
Introducción
El laboratorio central de farmacología posee dentro de su objeto social las investigaciones
química y farmacológica de plantas medicinales por lo que esta presentación tiene como objetivo: explicar las investigaciones fitoquímicas llevada a cabo en el laboratorio central de
farmacología durante el periodo 2009 2010.
Desarrollo
Las investigaciones fitoquímica que se llevaron a cabo durante ese periodo centraron sus
estudios en validar la composición química de plantas medicinales concebidas en el programa
TRAMIL, así como se trabajo en proyectos de colaboración con la facultad de biología dirigida a la
obtención de fracciones y metabolitos activos de algas marinas que crecen en Cuba y metabolitos presentes en plantas medicinales que participan en la protección de DNA. Por otra parte se
realizaron estudios farmacognósticos de cetáceas cubanas y se trabaja en el diseño de
biotransformación enzimático del triterpenos obtenidos de plantas medicinales que forman
parte de la flora de nuestro país.
Conclusiones
Las investigaciones fitoquímica en el laboratorio central de farmacología han permitido conocer los metabolitos que pudieran estar involucrados en la actividad farmacológica de las plantas
medicinales que se han trabajado en nuestro laboratorio durante este periodo así como permite
profundizar en los posible mecanismo de acción vinculados a los mismos.
Palabra claves: Laboratorio Central de Farmacología, Fitoquimica, Farmacología, plantas medicinales. ¬
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2
Estudio etnomedicinal de las mesas con San Pedro. II mesas de
Don Marcos Carbajal F., año 2009
Carbajal F. Marcos1, Jorge Carbajal R.2, Victor Reyna Pinedo3
1
Curandero especialista en Mesas con San Pedro y agricultor
(Provincia de Pacasmayo, Departamento de La Libertad, costa norte del Peru)
2
Asistente en Mesas con San Pedro y antropólogo. Director de la Casa-Museo Antonio Raimondi
(San Pedro de Lloc, Pacasmayo)
3
Profesor Principal, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Ingeniería, Lima
Desde hace siglos en toda la costa y sierra del norte peruano los curanderos realizan sesiones
nocturnas, denominadas Mesas con San Pedro, en las cuales tanto el curandero como los participantes ingieren la bebida “San Pedro”. Cada semana se realizan más de un centenar de estas
sesiones, y uno de los motivos por los cuales las personas asisten a ellas es para el diagnóstico y
tratamiento de enfermedades.
El objetivo de nuestra investigación es verificar las propiedades de curación que curanderos y
pacientes atribuyen al tratamiento en Mesas con San Pedro.
En esta ponencia se presentan los resultados del trabajo realizado por el maestro curandero
don Marcos Carbajal Felipe (82 años) durante el año 2009. Los resultados del año 2008 fueron
publicados el año pasado (Reyna, Carbajal & Carbajal, 2009)* y presentados en el XVIII Congreso
Italo-Latinoamericano de Etnomedicina (Cuba, Set’2009).
Durante el año 2009 se realizó el registro de las personas (363) que participaron en las Mesas
que realizan los especialistas tradicionales don Marcos Carbajal Felipe y Jorge Carbajal Rodríguez,
con un total de 55 sesiones, habiendo atendido a 227 personas diferentes, de las cuales 98 (43,2
%) asistieron por afecciones de salud.
La metodología utilizada se desarrollo a través de la observación participativa en las Mesas con
San Pedro, haciendo el seguimiento de los pacientes con consentimiento informado.
Es la primera vez que se realiza un registro detallado, durante todo un año, de todos los
pacientes que asistieron a las Mesas con San Pedro de un reconocido curandero del norte del
Perú.
Los resultados obtenidos en esta investigación, y aquellos registrados durante el
año 2008, permiten verificar las propiedades terapéuticas que se atribuyen a las Mesas con San
Pedro. En esta ponencia se describen tres de los casos en los cuales hemos verificado el restablecimiento de pacientes enfermos.
Referencias
Reyna P., V., M. Carbajal F. y J. Carbajal R., Cultura y Droga (Colombia), Año 14 (Nº 16), 79-88 (2009). ¬
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La parte amino de las alcamidas deriva de los aminoácidos
valina y fenilalanina en la planta Acmella Radicans
Ríos-Chávez P.1, Cortez-Espinosa N.1, Ramírez-Chávez E.2, Molina-Torres J.2
1
2
Facultad de Biología, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, Edificio B4, Cd
Universitaria, Morelia, Mich. Departamento de Biotecnología y Bioquímica CINVESTAV-IPN U. Irapuato, Gto.
[email protected]
Las alcamidas son metabolitos secundarios que comprenden un grupo de aproximadamente
200 estructuras conocidas y distribuidas a lo largo del reino vegetal. Las alcamidas presentan
diferentes actividades: insecticida, antibacteriana, anti-fúngica e anti-inflamatoria.
Sin embargo su ruta de síntesis no ha sido elucidada por lo que el objetivo del presente trabajo
fue determinar si los aminoácidos valina y fenilalanina son precursores de la parte amino de la Nisobutil-2E, 6Z, 8E-decatrienamida (afinina) y de la N-(2-feniletil)-2Z, 4E-octadienamida, N-(2feniletil) non-2E-en-6,8, diinamida y 3-fenil-N-(2-feniletil)-2-propenamida; así como determinar la
presencia de las enzimas valina y fenilalanina descarboxilasas. Con respecto al primer punto, se
utilizaron plantas de dos meses de edad de Acmella radicans crecidas en medio MS líquido que
fueron incubadas con el aminoácido valina deuterada o fenilalanina deuterada durante una
semana. Transcurrido este tiempo se realizó la extracción y cuantificación de las alcamidas por
GC/MS. Al analizar los cromatogramas correspondientes a las diferentes alcamidas se encontró la
presencia de dos picos, uno con un tiempo de retención que corresponde a la alcamida no
deuterada y otro pico con un tiempo de retención menor al anterior que corresponde a la alcamida deuterada. Al analizar los espectros de masas de cada una de las alcamidas, se encontró
que el ion molecular, así como los fragmentos que presentaban la parte N-isobutilamina y la Nfeniletilamina se incrementaron en 8 unidades que corresponden a los 8 deuterios de la L[2H8]valina o L-[2H8]fenilalanina; indicando que estos dos aminoácidos son los precursores de la
fracción amino de las alcamidas. También se determinó la actividad de la valina y fenilalanina
descarboxilasa en la planta A. radicans, para esto se cuantifico el producto de la reacción la
isobutilamina y la feniletilamina respectivamente. ¬
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Chemical composition and cytotoxic activity of the essential
oil from the leaves of Casearia Lasyophylla
Marcos José Salvador1, João Ernesto De Carvalho2, Alberto Winiewski-Jr3,
Candida A. L. Kassuya4, Élide P. Santos5, Dilamara Riva6,
Maria Élida Alves Stefanello6
1
Curso de Farmácia-DBV/IB-UNICAMP
2
CPQBA-UNICAMP
3
DQ-UFSE
4
Ciências da Saúde-UFGD
5
DB-UFPR
6
DQ-UFPR
Casearia species (Salicaceae) has been used in folk medicine in Brazil against snake bite and for
the treatment of skin diseases and ulcers. Several pharmacological activities have been demonstrated to species of this genus, including anti-inflammatory, anti-ulcer and antitumoral (Santos
et al., 2010). Casearia lasyophylla Eichler is a tree found in the South Region of Brazil for which
chemical or pharmacological studies were not found. Leaves were collected in Curitiba, Paraná
state, Brazil. The fresh material was submitted to hydrodistillation in a Clevenger apparatus for 2
h. The oil obtained was analyzed by capillary GC/FID and GC/MS. The leaf oil was screened for invitro cytotoxic against U251 (glioma), UACC-62 (melanoma), MCF-7 (breast), NC1-ADR/RES
(ovarian-resistant), NCI-H460 (lung), PC03 (prostate), OVCAR-3 (ovarian), HT-29 (colon) and K562
(leukemia) human tumor cells. The cells were exposed to various concentrations of oil in DMSO
and the cell proliferation was determined by spectrophotometric quantification of the cellular
protein content using sulforhodamine B (Skehan et al., 1990). The experiments were carried out
in triplicate and the concentration necessary to total growth inhibition (TGI) was calculated in
g/mL. Doxorubicin was used as positive control. The data were analyzed using ANOVA and the Ftest used to determine any difference among the groups. Results: The yield of oil was 0.02%.
Forty-seven compounds were identified, representing 87.1% of total of oil. The main components
were germacrene D (18.6%), β-caryophyllene (14.7%), δ-cadinene (6.2%) and α-cadinol (5.4%). The
oil showed cytotoxic activity against all cell lines, with TGI lower than 100 g/mL, with exception of
NCI-H460 cell line for which the TGI was 191.31μg/mL. The observed activity could be related to
high content of germacrene D and β-caryophyllene, compounds know as cytotoxic (Palazzo et
al., 2009).
Financial support
CNPq, FAPESP and FAEPEX-UNICAMP ¬
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Sviluppo e caratterizzazione di una matrice
maltodestrine/pectine mediante spray-drying come carrier di
fitoestratti
P. Picerno, T. Mencherini, F. Sansone, M. R. Lauro, R. P. Aquino
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno
Un estratto secco, interessante per la bioattività e ricchezza in attivi, può rappresentare una
materia prima poco gradita alle Aziende cosmetiche e/o farmaceutiche in quanto difficile da
incorporare in una formulazione perchè non completamente idrosolubile, con caratteristiche
organolettiche non sempre piacevoli e possibilità di fenomeni degradativi. Pertanto, obiettivo del
nostro lavoro è stato lo sviluppo di una nuova matrice polimerica (pectine di mela e maltodestrine) per spray-drying1 adatta alla veicolazione di estratti secchi in grado di migliorare le caratteristiche tecnologiche e la manipolazione a livello industriale. È stato utilizzato come modello un
estratto secco di F.ancylantha Hiern (Rubiaceae), comunemente conosciuto come tè Makoni,
prodotto nella regione Manicaland dello Zimbawe e diffuso in tutto il mondo come bevanda
medicinale. Il tè Makoni, che ha riscosso negli ultimi anni un grande interesse sul mercato internazionale dei prodotti alimentari speciali e di integrazione, possiede proprietà antiossidanti, è privo
di caffeina, ma ricco in proteine, composti fenolici e zinco. Lo Zn è un elemento essenziale che
stimola la crescita, la riproduzione e lo sviluppo del sistema immunitario, e l’integrità della pelle.
Tuttavia non sono presenti in letteratura lavori sulla composizione chimica e l’efficacia biologica
del tè e/o della pianta. Nella prima fase del lavoro si è proceduto alla caratterizzazione chimica e
biologica dell’estratto ETOH:H2O (7:3) di un campione commerciale di tè Makoni. 2,3 Mediante
tecniche cromatografiche e spettroscopiche, sono stati isolati ed identificati otto composti: tre
nuove (1-3) e una nota (4) saponina, derivate dall’acido oleanolico, e quattro composti polifenolici (5-8). Il confusoside (5), la davidigenina (6) e 7-O-β-D-glucopiranosil-7,3',4'-triidrossiflavone (7)
rappresentano i maggiori componenti dell’estratto (rispettivamente il 10.7, 2.7 e 2.2 % p/p da
analisi quantitativa HPLC-DAD). Sia l’estratto che il composto 7 hanno mostrato una significativa
attività free-radical scavenging, valutata mediante il DPPH test (EC50= 80.4 e 28.4μg/ml, rispettivamente, in comparazione con l’ α-tocoferolo 10.1 g/ml). La davidigenina (6) ha mostrato un interessante effetto battericida, espresso come MIC (Minima Concentrazione Inibente) e valutato
mediante il metodo delle micro diluizioni in brodo, su alcuni batteri Gram + (MIC tra 0.12-0.25
mg/ml), A. niger (MIC 0.12 mg/ml), e C. albicans (MIC 1 mg/ml). Nella seconda fase del lavoro
l’estratto è stato veicolato in una matrice maltodestrine/pectine tramite tecnologia Spray-drying.
Le microparticelle ottenute sono state caratterizzate in termini di resa del processo, efficienza di
incapsulazione, morfologia (SEM, FM), dimensioni, caratteristiche organolettiche (sniffing test),
velocità di dissoluzione dell’estratto in vitro, stabilità chimico-fisica (secondo le linee guida ICH) e
funzionale (attività antiossidante). I microsistemi sono risultati stabili, idrosolubili, con inalterata
attività biologica, migliorate caratteristiche organolettiche e stabilità. Il prodotto in polvere si
presenta di più agevole utilizzo ed incorporazione in formulazioni cosmetiche e/o farmaceutiche.
Bibliografia
1.F. Sansone, P. Picerno, T. Mencherini, F. Villecco, A. D’Ursi, R. Aquino, M. R. Lauro.J. Food Eng. 2010.
2.T. Mencherini, P. Picerno, P. Del Gaudio, M. Festa, A. Capasso, Rita Aquino. J. Nat. Prod. 73 (2), 247-51, 2010.
3.R. Aquino, T. Mencherini Eur. Pat. Appl. EP 2005111134, 2007. ¬
93
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2
Técnicas in vitro y ex vitro para la conservación y propagación
de especies de interés medicinal de la Flora Bonaerense
Sharry S., Adema M., Basiglio Cordal M.A., Villarreal B., Nikoloff N., Briones V.,
Abedini W.
Centro Experimental de Propagación Vegetativa (C.E.Pro.Ve).
Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, Universidad Nacional de La Plata. CICPBA. Diagonal 113 N° 469. La Plata,
Buenos Aires. Argentina
[email protected]
La humanidad ha utilizado las plantas para curarse durante toda su historia. La incidencia de los
productos de origen vegetal en la terapéutica ha variado a lo largo de los tiempos de acuerdo
con los avances del conocimiento científico. Existen en la Argentina numerosas especies forestales nativas que constituyen una importante fuente de productos vegetales y son utilizadas
tradicionalmente con aplicaciones medicinales. Algunas de estas especies están siendo sometidas a un intenso proceso extractivo en su hábitat natural que puede afectar su diversidad genética. El objetivo de este trabajo fue el establecimiento de sistemas de propagación vegetativa
para tres especies forestales nativas de interés medicinal. Esto permitirá la rápida obtención de
individuos para conservar germoplasma.
El presente trabajo incluyó las siguientes especies de reconocido uso en medicina popular y sus
aplicaciones: Erythrina crista-galli “seibo” (astringente, cicatrizante, bronquiolítico); Acacia caven
“espinillo” (cicatrizante, antirreumático, digestivo, diurético) y Salix humboldtiana “sauce criollo”
(antipirético, sedante, antiespasmódico, astringente). La metodología abarcó la
micropropagación de seibo, la macro y micropropagación de Salix humboldtiana y la embriogénesis somática de Acacia caven. Se ajustó el protocolo de regeneración de seibo a partir de secciones nodales de plántulas obtenidas de semillas germinadas in vitro. Se logró la macropropagación
por enraizamiento de estacas de sauce criollo y en relación al cultivo in vitro de esta especie se
obtuvieron plantas completas tanto por organogénesis directa como indirecta. Se optimizó el
protocolo de embriogénesis somática para Acacia caven lo que condujo a la obtención de un alto
porcentaje de embriones en diferentes estados de desarrollo. Mediante la utilización de técnicas
de propagación vegetativa podemos conservar recursos forestales nativos de uso medicinal y
aportar accesiones al banco de Germoplasma de Especies Forestales Nativas ubicado en el
CEPROVE. ¬
94
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2
Four novel interconverting flavanone glucosides from Lippia
Salviaefolia cham
Cristiano S. Funari1, Thais G. Passalacqua1, Daniel Rinaldo1, Maria C. M. Young2,
Assunta Napolitano3, Michela Festa3, Sonia Piacente3, Cosimo Pizza3,
Dulce H. S. Silva1*
1
Institute of Chemistry, Sao Paulo State University - UNESP, Araraquara, SP, CP 355, 14801-970, Brazil
2
Seçao de Bioquimica e Fisiologia de Plantas, Instituto de Botanica
Sao Paulo, SP, CP 4009, CEP 01061-970, Brazil
3
via Ponte Don Melillo 84084 Fisciano (SA), Italy
Lippia genus occurs in Central and South America and in tropical Africa, with Brazil comprising
ca. 70% of Lippia species. They are used in folk medicine for gastrointestinal and respiratory
dysfunctions and hypertension. Few pharmacological studies have been reported for Lippia
species, mainly focused in antimicrobial and larvicidal effect of their essential oils. As part of our
bioprospection program, leaves and stems of Lippia salviaefolia have been investigated as their
extracts displayed potent antioxidant activity in preliminary assays using a TLC assay with βcarotene as spray reagent.
The bioassay guided fractionation led to isolation of phenylpropanoids (1-3), dihydrochalcones
(4, 5), a flavanonol (6) and a epoxylignan (7) in addition to a four novel interconverting flavanone
glucosides: (2S)-3',4',5,6-tetrahydroxyflavanone-7-O-β-glucopyranoside (8a), (2R)-3',4',5,6tetrahydroxyflavanone-7-O-β-glucopyranoside and (8b), (2S)-3',4',5,8-tetrahydroxyflavanone-7-Oβ-glucopyranoside (9a) and (2R)-3',4',5,8-tetrahydroxyflavanone-7-O-β-glucopyranoside (9b).
nitial interconversions were observed for the four isomers after reinjection during the HPLCUV-DAD analysis. Additionally, HPLC-CD-DAD experiments confirmed the occurrence of two
epimer pairs, since each band pair presented the same UV spectrum and opposite Cotton effects
in CD analysis. Further 1D and 2D NMR analysis and comparison with the HPLC-CD-DAD data
allowed the establishment of the absolute configuration of compounds 8 - 9. The isolated compounds were assayed on intracellular reactive oxygen species (ROS) test and their effects in
human embryonic kidney HEK-293 and human melanoma M14 cancer cell growth were evaluated.
Compounds 5 and 6 were able to counteract the elevation of ROS induced by the oxidant t-BOOH
in HEK-293 cells while compound 5 at 1 μM strongly protected HEK293 cells from the ROS damage. Compound 6 exhibited significant inhibitory effect at 20-40 μM in both HEK-293 and M14
cells growth and induced apoptosis with significant effect at 20 μM just in M14 cells, suggesting a
selective action versus malignant cells.
References
1. Gaffield, W., 1970. Circular dichroism, optical rotatory dispersion and absolute configuration of 3-hydroxyflavanones
and their lycosides. Tetrahedron 26, 4093-4108
2. Liu, Q., Dixon, R.A., Mabry, T.J. 1993. Phytochemistry, 34(1), 167-170
3.Pratt, D.E, Miller, E.E.A. J. Am. Oil Chemical Soc. 61, 1064, 1984
4. Nicoletti, I., Migliorati, G., Pagliacci, M.C., Grignani, F., Riccardi, C., J. Immunol. Methods (1991) 139: 271-279.
Acknowledgements
FAPESP, CNPq and CAPES for financial support.
Keywords: antioxidant, Lippia, flavanone glucoside, ROS, cell growth inhibition, HEK-293 cells, M14 cells. ¬
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2
Phenolic chemical composition of Petroselinum Crispum and
their effect on homeostasis
Douglas S. Chaves1, Flávia Frattani3, Mariane Assafim3, Ana Paula de Almeida2,
Russolina B. Zingali3, Sônia S. Costa1
LPN-Bio, NPPN, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Brazil
2
CEQOFFUP - CEQUIMED-UP, Universidade do Porto, Portugal
3
LabHemoVen, IBqM, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Brazil
1
Introduction
Nowadays there is a strong need to discover new antithrombotic compounds (1). Petroselinum
crispum (Apiaceae), an aromatic herb known as parsley, is used as condiment and as medicinal
for treating blood disturbs. The aim of this study was the assessment of an antithrombotic
potential of P. crispum aqueous extracts as well as the chemical identification of their bioactive
substances.
Materials and Methods
The aerial parts from parsley (Pc) were collected out of blooming season and submitted to a
decoction. The aqueous extract was fractionated by partition with organic solvents and further
purified by chromatography. A phenolic profile was evaluated using HPLC-DAD. The fractionation
was monitored by inhibition of plasma clotting (aPTT and PT) and platelet aggregation in vitro
(adenosine diphosphate - ADP - inductor) assays
Discussion
This study led us to the isolation of apigenin 7-O-apiofuranosyl-(1->2)-O-glucopyranoside
(apiina), apigenin 7-O-glucoside (cosmosiin), oxypeucedanin hydrated (coumarin) and 5,7,4`trihydroxyflavone (apigenin). These flavones and coumarin were previously described for the
species (2). The structural elucidation was based on spectroscopic methods. Two other flavones
were identified through HPLC-DAD based on literature data (2). Pc showed no inhibition of
anticoagulant action when compared with the control. Antiplatelet action was observed for Pc
(IC50 = 1.81 mg/mL) and apigenin (IC 50 = 0.036 mg/mL) both using ADP as inductor of platelet
aggregation.
Conclusions
Our data suggest that Pc and apigenin interfere on homeostasis, through platelet inhibition
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which were previous described. The evaluation of apiin, cosmosiin and coumarin effect on the
coagulation process is underway in the laboratory.
Acknowledgments and Financial Support
CAPES
1.Jin, Y-R., Basic & Clinical Pharmacology & Toxicology, 100, p.170-75, 2007
2.Luthria, D.L. Food Chemistry, 107, p.745, 2008. ¬
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2
Actividad citotóxica y antitumoral de flavonoides Chromolaena
Leivensis
Ruben Dario Torrenegra Guerrero, Oscar Eduardo Rodriguez Aguirre
Universidad De Ciencias Aplicadas y Ambientales U.D.C.A, Bogota, Colombia.
Grupo Productos Naurales, Pronaudca
En la región Cundiboyacense Colombiana, crecen silvestres Chromolaena perglabra, C. tacotana,
C. bullata, C. subscandens, C. leivensis y C. scabra, entre otras. El estudio de las partes aéreas de
Chromolaena leivensis (COL535219) colectada en la via chizaca (Cundinamarca), permitió aislar e
identificar por espectroscopía UV, 1 HRMN 13 CRMN los flavonoides: 3,5-dihidroxi-7metoxiflavanona; 3,5-dihidroxi-7-metoxiflavona y 3,5,7-trihidroxi-6-metoxiflavona, Las pruebas
antitumorales realizadas con los flavonoides 3,5-dihidroxi-7-metoxi-flavanona y 3,5-dihidroxi-7metoxiflavona con diferencias en la saturación de los carbonos C2 y C3 del anillo C, permitieron
establecer la relación entre la estructura y su actividad antitumoral. Este estudio muestra que el
flavonoide 3,5-dihidroxi-7-metoxiflavona (flavona) a diferencia del 3,5-dihidroxi-7-metoxiflavanona (flavanona) induce en la línea celular K562 (eritroleucemia) un cambio significativo de
la polaridad de la membrana mitocondrial después de 8 horas de tratamiento, que se mantiene a
las 12 horas y que conduce a una disminución de la viabilidad celular. Aunque no se observa una
actividad definida de este flavonoide sobre el ciclo celular, se detectan claramente las células
apoptóticas entre 48 y 72 horas de cocultivo, luego de la activación de endonucleasas efectoras,
lo cual sugiere que la actividad antitumoral requiere la instauración en el anillo C de la flavona.
3,5-dihidroxi-7-metoxiflavona
3,5-dihidroxi-7-metoxiflavanona
3,5,7-trihidroxi-6-metoxiflavona
Bibliografia
1. ASAKAWA, JOSHINORI et al, 1971, Bulletin of the Chemical Society of Japan, Vol.44 (1), 297-297.
2. GOEL, R. N. et al 1957, New synthesis of tamaraxetin, alpinone and izalpinin, Springer India, in co-publication with
Indian Academy of Sciences ISSN-0253-4142 V. 47, N. 3 P.191-195.
3. KING R.M. et al, 1970. Phytologia, 20 (3), 196-209.
4. PHAN T.T. et al. 2000. Eur J Dermatol. 10 (7), 522.
5. THANG PT, et al. 2001. Burns. 27 (4), 319 - 327. ¬
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2
Evaluación antibacteriana de extractos alcaloideos de
Erythrina sp.
Gustavo Valencia del Toro1, Luís Alberto González Trejo1,
María Eugenia Garín Aguilar2
1
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología, IPN. Av. Acueducto S/N la Laguna Ticomán
07340, México D.F.
2
Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM. México
Erythrina es un género representado por árboles y arbustos con inflorescencias de estructura
característica, semillas de color rojo o anaranjado, en México recibe diferentes nombres tales
como colorín, pemoche, etc. En algunas comunidades del país se ha reportado el uso medicinal
de las plantas de éste género, la etnia Tenek del estado de San Luis Potosí ha mencionado el
efecto tranquilizante de las inflorescencias de pemoche, en Durango, las semillas de E. flabelliformis son utilizadas como un remedio contra el dolor de muelas y la infusión de las hojas es usada
por los Indios Seri de Sonora para curar la diarrea. Se han reportado estudios sobre los efectos
antibacterianos de extractos y compuestos obtenidos de la corteza y raíz de plantas del género
Erythrina, dicho efecto se ha atribuido principalmente a los flavonoides, sin embargo, a pesar de
que en las semillas los compuestos más estudiados son los alcaloides, no se han realizado estudios sobre el probable efecto antibacteriano de los mismos.
Los alcaloides de plantas del género Erythrina han sido caracterizados por su efecto sobre el
sistema nervioso central, y se han realizado estudios sobre conducta agresiva, memoria y aprendizaje en modelos animales. En el presente trabajo se evaluó la actividad antibacteriana de los
extractos alcaloideos de semillas de plantas de Eyithrina sp.
Las semillas se recolectaron y molieron, posteriormente se realizó la extracción usando el
dispositivo de Soxhlet. Se obtuvieron los extractos crudos hexánicos y metanólicos, a partir de
ellos, se realizaron extracciones ácido-base y se obtuvieron los extractos alcaloideos hexánicos,
metanólicos y de hidrolizados.
Para corroborar la presencia de alcaloides se obtuvieron cromatogramas en capa fina de los
extractos obtenidos, revelando con el reactivo de Dragendorff, posteriormente, se realizó la
prueba de Kirby-Bauer para evaluar su actividad antibacteriana contra bacterias Gram positivas
(Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus ATCC 12398) y bacterias Gram negativas (Enterobacter
agglomerans ATCC 27155, Shigella dysenteriae INDRE B2188, Yersinia enterocolitica, Klebsiella
rhinoescleromatis y Klebsiella pneumoniae ATCC 13884), además se procedió a obtener la
concentración mínima inhibitoria (MIC) de cada uno de los extractos trabajados.
Los rendimientos obtenidos fueron de 0.17% para el extracto hexánico, 0.16% para el
metanólico y 0.11% para el hidrolizado. El intervalo de tamaño de los halos de inhibición para las
bacterias Gram+ fue de 11 a 22 mm y para las bacterias Gram negativas fue de 7.66 a 33 mm,
asimismo, el intervalo de la MIC en las bacterias obtenida fue de 0.250 a >2 mg/mL. El análisis
estadístico indicó que el efecto antibacteriano obtenido con los tres extractos probados fue
similar. También se detectó que las bacterias mayormente afectadas por lo tres extractos fueron
E. agglomerans, S. aureus y S. disentereae. Será necesario aislar los alcaloides de dichas fracciones
para identificar a los que presentan el efecto antibacteriano. ¬
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2
Gallotannins from Astronium genus by MALDI-TOF-MS
Viviane C. da Silva1, Daniela Eletto2, Assunta Napolitano2, Clenilson M. Rodrigues1,
Lourdes C. dos Santos1, Sonia Piacente2, Cosimo Pizza2, Wagner Vilegas1
1
UNESP, São Paulo State University, Institute of Chemistry, CP 355, CEP 14800-900, Araraquara, SP, Brazil
UNISA, Universita degli Studi di Salerno, Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, via Ponte Don Melillo,
84084 Fisciano (SA), Italy
2
Hydrolyzable tannins represent a large group of polyphenolic compounds that are widely
distributed in the plant kingdom. These metabolites consist of gallic acid, associated with polyols
or glycosides, typically with β-D-glucopyranose in ester form (gallotannins). The galloyl groups
may be further esterified or oxidatively crosslinked to yield more complex hydrolysable tannins in
plants (ellagitannins). They have great variation in structure and concentration within and among
plant species. One alternative to analytical approaches for the characterization of tannins is
matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry (MS),
that allows the analysis of macropolymers and reveals information about their chain lengths.
With this technique, fragmentation of the analyte molecules upon laser irradiation can be substantially reduced by embedding them in a light adsorbing matrix. The species Astronium urundeuva (Anacardiaceae), known as ‘aroeira’ and A. graveolens (‘guaritá’), are used in the folk
medicine to treat allergy, inflammation, diarrhoea and ulcer [1]. They were analyzed using MALDITOF-MS (Micromass - Waters), in order to obtain qualitative information about the polymeric
composition.
Results showed that A. graveolens and A. urundeuva are composed by gallotannins, which were
characterized by their mass spectra with a series of peaks separated by 152 Da that corresponds
to a mass difference of one galloyl group between each compound. Tri-, tetra-, penta-, extending
up to trideca-galloyl glucose in A. urundeuva, gallotannins were detected as their [M + K] + adducts at m/z 827.1, 979.1, 1131.1, 1283.1, 1435.1, 1587.1, 1739.1, 1891.1, 2044.1 and 2195.1 Da, respectively. The results from the application of MALDI-TOF-MS clearly demonstrate its power as a tool
to characterize the nature of tannins providing a fingerprint of polymeric content present in
these plant species, without the need of preparative chromatographic separation. This result can
also be used to explain the antiulcer activities observed, because it has been shown that the
secondary metabolites are key-compounds that may be correlated to the bioactivities.
Acknowledgements
1. FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo) and CNPq (Conselho Nacional de Desenvolvimento
Científico e Tecnológico)
Reference
1.Viana, G. S. B. et al. (1997), Phytother. Res., 11, 118. ¬
100
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2
Ayunoterapia
Antonio J. Castro Gómez
Centro de Investigaciones en Terapias Complementarias, Hovinat, Venezuela
[email protected]
El ayuno utilizado desde la antigüedad en primer lugar por los animales y el hombre, con el
propósito definido de ayudar al organismo a realizar en forma optima las funciones de reparación
y eliminación.
Plutarco consideraba que abstenerse de alimentos durante un día era preferible a cualquier
medicamento para curar la mala salud, e Hipócrates recomendaba ayunar durante las fases
críticas de una enfermedad. El gran médico Árabe Avicena indicaba a sus pacientes ayunos de
tres a cinco semanas, en tanto que Paracelso, el médico suizo del siglo XVI, consideraba esta
practica como el mejor remedio posible para todas las enfermedades.
Palabras Claves: Ayuno ¬
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2
Desarrollo de un producto antiinflamatorio y un producto
fotoprotector a partir de dos plantas nativas de Bolivia
Giovanna Almanza1*, Lily Salcedo1, Yonny Flores1, Oscar Mamani1, Cecilia Curi1,
Zilma Escobar1, Angela San Martin1, Eduardo Gonzales1, Esther Valenzuela1,
Dalton Salinas1, Enrique Ocampo2, Roger Cabezas2, Mauricio Saavedra2,
Gloria Rodrigo1
1
Universidad Mayor de San Andrés (UMSA), La Paz, Bolivia
[email protected]
2
Laboratorios Farmacéuticos LAFAR S.A., La Paz, Bolivia
En base a la gran Biodiversidad Vegetal de Bolivia, el reconocido uso de sus plantas medicinales
y el crecimiento del mercado de productos naturales a nivel internacional, se estableció un
acuerdo de colaboración entre la Universidad Mayor de San Andrés de La Paz, Bolivia y la empresa farmacéutica local LAFAR S.A., con el principal objetivo de desarrollar productos naturales
con actividad terapéutica o cosmética a partir de plantas nativas de Bolivia.
Con este propósito, se evaluaron los extractos etanólicos y etéreos de 20 plantas medicinales
reconocidas por el Ministerio de Salud de Bolivia, mediante un análisis fitoquímico preliminar y
una evaluación de su actividad antioxidante por el método ABTS. En base a estos datos y una
revisión de sus antecedentes químicos, biológicos y etnobotánicos se seleccionaron dos especies: Baccharis latifolia (Chillkha) y Baccharis papillosa (Jathun thola), que presentaron una alta
actividad antioxidante que correlaciona con una alta presencia de flavonoides en sus extractos
etanólicos y con su uso tradicional como antiinflamatorios de uso tópico. Ambas especies fueron
sometidas a diversos estudios: caracterización anatómica y morfológica, aislamiento e
identificación de flavonoides y compuestos relacionados, estudios de genotoxicidad en bacterias
y de toxicidad aguda en ratones, ensayos de actividad antiinflamatoria in vivo y estudios de
fotoprotección UVA y UVB por espectrofotometría. Los resultados obtenidos para ambas especies fueron muy interesantes, por lo que los extractos más activos, controlados químicamente
por métodos HPLC, fueron pasados a la empresa farmacéutica LAFAR S.A. donde se elaboraron
cremas antiinflamatorias y fotoprotectoras, a diversas concentraciones, con carácter experimental. Estas cremas fueron sometidas a diversos estudios pre-clínicos y clínicos con muy buenos
resultados, particularmente para la crema antiinflamatoria de B. latifolia, que muestra una actividad comparable al control, indometacina y para la crema fotoprotectora de B. papillosa, que
muestra mayor actividad que el producto comercial Ray Block, utilizado como control.
En Bolivia, se cuenta con una reglamentación específica para Medicamentos Naturales
Tradicionales, que considerando el importante potencial fármaco-botánico de las plantas medicinales así como su uso milenario, solo exige, además de los estudios a nivel pre-clínico que garanticen la seguridad y eficacia del producto, un ensayo clínico. La crema antiinflamatoria de B. latifolia ha concluido con éxito este ensayo clínico por lo que actualmente se esta elaborando la
monografía farmacológica necesaria para la obtención del registro del producto para su uso a
nivel local. ¬
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2
Flavonoides de Exellodendron coriaceum (Chrysobalanaceae).
Actividad Hipoglicemiante
Diana Carrasco1*, Jeannette Méndez1, Alessandra Braca2, Marinella De Leo2,
Freddy González-Mujica3, Sandra Duque1
1
Laboratorio de Productos Naturales, Escuela de Química, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela,
Apartado Postal 47102, Caracas 1020-A, Venezuela
2
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Pisa, via Bonanno 33, 56126, Pisa, Italy
3
Instituto de Medicina Experimental, Sección de Bioquímica Médica, Facultad de Medicina, Universidad Central de
Venezuela. Caracas, Venezuela
Chrysobalanaceae es una familia de plantas superiores, que crece principalmente en las regiones tropicales y subtropicales y que está constituida por 17 géneros y más de 400 especies. En
Venezuela están reportados 7 géneros, cinco de los cuales han sido estudiados desde el punto de
vista químico y su actividad biológica, por nuestros grupos de investigación, desde el año 1993.
Los resultados indican que estas plantas son ricas en Flavonoides y triterpenos y además son
poseedoras de diferentes actividades biológicas, entre las que cabe destacar: antiviral, citotóxica,
antibacterial, leishmanicida, hipotensora, antioxidante e hipoglicemiante.
En el presente trabajo, presentamos es estudio de Exellodendron coriaceum (Benth.).
Reportamos el aislamiento de siete Flavonoides del extracto n-butanòlico, de las partes aéreas
de E. coreaceum. Los primeros cuatro compuestos fueron identificados como: quercetina-3-O-β-Dgalactopyranosido (1), quercetina-3-O-α-L-arabinopyranosido (2), quercetina-3-O-αLrhamnopyranosyl-(1->2)-α-L-rhamnopyranosido (3), y quercetina-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1>6)-β-Dgalactopyranosido (4), mientras que los restantes, debido a la poca cantidad de muestra,
fueron caracterizados parcialmente, como derivados metoxilados y/o glicosilados de quercetina
con glucosa, galactosa o arabinosa, como restos de azúcar. Los Flavonoides 3 y 4, son reportados
por primera vez en la familia.
Todos los compuestos fueron ensayados con el método de Glucosa 6 fosfatasa. Los resultados
indican una actividad inhibitoria de la enzima, cuando se usan microsomas intactos, con un
porcentaje del 65%. De acuerdo a nuestro conocimiento, este es el primer reporte sobre la
química y actividad biológica de E. coriaceum. ¬
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2
Contribución al estudio de los alcaloides esteroidales del
Solanum Hypomalocophyllum bitter
Libia Alarcón1, Alexis Peña2, Alfredo Usubillaga3
1
Universidad Nacional Experimental de los Llanos Occidentales Ezequiel Zamora (UNELLEZ).
Programa de Ciencias del Agro y del Mar. San Carlos Edo. Cojedes-Venezuela.
2
Universidad de Los Andes (ULA). Núcleo Rafael Rangel (NURR).
Departamento de Biología y Química. Trujillo-Venezuela.
3
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis. ULA, Mérida-Venezuela.
[email protected]
Resumen
Los alcaloides 4-ceto esteroidales son una clase especial de sustancias que poseen un grupo
cetónico en el carbono 4 de su esqueleto esteroidal. Hasta el momento han sido aislados de dos
especies, el Solanum hypomalocophyllum Bitter, pequeño árbol nativo de los Andes venezolanos
que crece específicamente en los estados Mérida, Táchira por encima de los 2500 metros sobre el
nivel del mar y el Solanum ecuadorense arbusto que crece en los Andes del norte de Ecuador por
encima de los 3000 metros sobre el nivel del mar. Los alcaloides 4-ceto, pertenecen al grupo de
los alcaloides esteroidales, metabolitos de gran interés por sus propiedades biológicas.
En el presente trabajo se estudiaron los alcaloides esteroidales presentes en el Solanum
hypomalocophyllum Bitter. De los frutos verdes se aislaron cinco alcaloides esteroidales sus
estructuras fueron establecidas como: (20S, 5R)-23,26-epimino-3β-hidroxi-5αH-colestan-23(N)eno-4,22-diona [I], (22R, 25R)-16α-acetoxi-22,26-epimino-3β,23β-dihidroxi-5αH-colestan-4-ona [II],
(22R, 25R)-22,26-epimino-3β,23β-dihidroxi-5αH-colestan-4-ona [III], (23R, 25R)-3β,23β-dihidroxi5αH-espirosol-4-ona [IV], (22R, 25R)-22,26-epimino-3β,16α,23β-trihidroxi-5αH-colestan-4-ona [V].
De las hojas de la misma especie se aisló un alcaloide esteroidal glicosídico cuya estructura fue
establecida como: (25R, 22R)-22,26-epimino-3β-O-β-D-glucopiranosil-23β-hidroxi-5αH-colestan-4ona [VI]. Todas las estructuras fueron establecidas con base a un estudio detallado y sistemático
de los espectros de RMN unidimencionales y bidimencionales. El compuestos VI se reporta por
primera vez como producto natural. ¬
104
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2
Effect of standard -20ºc frozen storage on proteolytic activity,
texture and tissue quality of giant squid (Dosidicus Gigas)
muscle
Dublán García O.1*, Gómez-Oliván L.M.1, Quintero-Salazar B.2, Romero Castillo C.A.3
1
Facultad de Química, Universidad Autónoma del Estado de México
Paseo Colón y Paseo Tollocan S/N, Toluca 50120
2
Centro de Investigación y Estudios Turísticos, Facultad de Turismo, UAEM
3
Instituto Irlandés. Fuente de Leones 107, Col. Lomas Hipódromo, Estado de México. CP. 53950
*
[email protected]
Giant squid (Dosidicus gigas) is a cephalopod of the Ommastrephes genus found in abundance
in the Pacific coast of Mexico, mainly in the Gulf of California. Usually is transported on ice,
despite the fact that this method promotes considerable quality deterioration due to high
proteolytic activity. Several authors have reported that the existence of proteases in squid
muscle can cause myosin degradation and suggested that the proteolysis might influence the
textural quality of cooked squid meat. The objective of this work was to study the effect of
frozen storage at -20ºC on proteolytic activity and structural changes in giant squid muscle.
Animals were caught in average 12 hours before sampling, and packed in individual plastic bags
and stored at -20ºC during three months and the samples were taken until analysis. The extraction of proteases was carried out with 25 mM phosphate buffer, pH 7, 0.9% NaCl. Protease
activity was determined by Kunitz (1947) and Anson (1980) methods, using 1% casein and hemoglobin in 25 mM phosphate buffer, pH 7 as substrate for alkaline and acidic proteases respectively. Changes in the microscopic structure were analyzed each month of storage at -20ºC in a
scanning electron microscopy (SEM). Temperature and pH optimum of the maximum enzymatic
activity were determined, finding 35ºC as the maximum enzymatic activity and pH optimum
activity was at a pH 2.7, 3.1, 6.1, 7.3 and 7.6 . Proteolytic activity was decreasing during storage;
however the residual activity caused changes in miofibrillar structure. SEM showed disturbances
in tissue structure increasing damage during frozen storage. Biochemical parameters such as
changes (decreases) in the enzymatic activity of seafood muscles, or in the susceptibility of
seafood proteins to the effects of various proteolytic enzymes, are sensitive indicators for
monitoring protein denaturation as a consequence of conformational changes that may occur
during frozen storage that give information about the best way to storage seafood.
Keywords: squid, proteolytic activity, SEM. ¬
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In vitro anti-Neisseria gonorrhoeae activity of Albizia
Gummifera and Croton Macrostachyus
Mesfin Tefera (BSc, MSc)
Ethiopia
Introduction
Neisseria gonorrhoeae is a sexually transmitted bacterial pathogen for which there is an increasing antimicrobial resistance concern. Frequency of isolation of multi drug resistant strains is
increasing rendering a potential ‘Super bug’ status for N. gonorrhoeae.
Material & methods
Agar dilution method was used to evaluate in vitro anti N. gonorrhoeae activity of crude and
solvent fractions of Albizia gummifera and Croton macrostachyus plants widely used in the
Ethiopian folk medicine for the treatment of gonorrhea or syphilis. Crude hydro-alcoholic (2080%) extracts of both plants were effective against the test organisms and their minimum inhibitory concentrations (MICs) were between 250-500 μg/ml. Sequential solvent-solvent extraction
method was then used to partition crude extracts of each plants into chloroform, n-butanol and
aqueous fractions and their anti N. gonorrhoeae activity was determined.
Result & Discussion
Chloroform and n-butanol fractions were identified to be more active ones in C. macrostachyus
with MIC values between 125-250 μg/ml. The most active fraction in A. gummifera was identified
to be the n- butanol fraction, which also had MIC values between 125-250 μg/ml. aqueous fractions of A. gummifera exhibited activity at MIC values of 500-1000 μg/ml. However, aqueous
fraction of C. macrostachyus had no growth inhibition effect when tested at 125-1000 μg/ml
gradient of concentrations. Chemical screening indicated the presence of secondary metabolites
mainly saponins (in A. gummifera), alkaloids, phenols, sterols/terpens and glycosides in both
plants.
Conclusion
This implies presence of bio active compounds and the need for further activity-guided fractionation and purification of the most active fraction(s) to localize and identify active constituents
from the complex matrix by excluding ubiquitous and non active components. Our results also
substantiate the ethno-botanical use of these medicinal plants for the treatment of gonococcal
infections.
Keywords/ Phrases: Antimicrobial resistance, Medicinal plants, Natural products, Neisseria gonorrhoeae ¬
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Las alcamidas de plantas y su bioactividad en diversos
organismos
Jorge Molina Torres, Enrique Ramírez Chávez
Laboratorio de Fitobioquímica. Departamento de Biotecnología y Bioquímica. CINVESTAV Unidad Irapuato. Km 9.6
Libramiento Norte, CP 36821. Irapuato, Guanajuato. México
Las alcamidas en la naturaleza se encuentran principalmente en tres grupos: como productos
naturales, principalmente en plantas con una distribución restricta aunque presentes en al menos
diez familias de plantas que frecuentemente se han utilizado en la herbolaria medicinal de
diferentes culturas; como mensajeros a distancias cortas en animales y plantas, las denominadas
N-acil etanol aminas (sic) representadas principalmente por la anandamida originalmente descritas como los canabinoles internos por su capacidad de unirse a los receptores canabinoides CB1 y
CB2; y como factores quorum sensing en microorganismos las acil homoserina lactonas.
En este panorama las alcamidas presentes en plantas han mostrado una gran capacidad de
interactuar con diversos organismos (receptores) en forma específica. Las interacciones son
selectivas y se observan desde bacterias (Gram +, Gram -), hongos, insectos, animales superiores
y plantas, induciendo en estas últimas la expresión genes de mecanismos de defensa específicos.
¬
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2
Authorization of the traditional knowledge associated access
for bioprospecting purposes: the case of ufrj and the
association of the oriximiná quilombola communities
Oliveira D.R.1,3*, Leitão S.G.1, O´Dwyer E.C.2, Leitão G.G.3, ARQMO4
1
Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS, Bloco A 2o andar, sala 10, Ilha do Fundão,
21941-590, Rio de Janeiro, RJ.
2
Departamento de Antropologia e Programa de Pós-graduação em Antropologia, Universidade Federal Fluminense,
Campus Gragoatá, Bloco O, sala 325, 24210-350, Niterói, RJ.
3
Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS, Bloco H, Ilha do Fundão,
21941-590, Rio de Janeiro, RJ,
4
Associação de Comunidades Remanescentes de Quilombos do Municipio de Oriximiná (ARQMO),
Rua 24 de dezembro, n. 3068, 68.270-000, Oriximiná, PA.
Abstract
The traditional knowledge associated (CTA) and the genetic heritage access have being well
discussed in Brazil since Convention on Biological Diversity, in 1992, due to the necessity of
equitable and fair sharing of the benefits, and the prior purveyor authorization. This way this
purveyor has his rights recognized. However only 10 years later, the first legislation about the
subject was published (MP 2186-16, 2001), and 15 years later, the first authorization to CTA access
for bioprospecting in Brazil, involving anthropologic appraisal and benefit sharing contract
between university (UFRJ) and community, just for this work “Bioprospecção de espécies
Farmacologicamente Ativas Utilizadas Medicinalmente por Comunidades Quilombolas de
Oriximiná (PA), Brasil” carried out by our group. The “remanescent of quilombos” or “quilombolas communities” are ethnic groups, with historical background, with their specific territorial
relations, with the presumption of black ancestry, related to resistance to oppression suffered
historical. In Oriximiná these communities began in the 18 th century when Portugal to prevent the
invasion of Dutch, British and French in the Amazon, encouraged the colonization of the lower
Amazon region of Pará, using as a labor force tens of thousands of African slaves on the plantations of cocoa, coffee and cotton. However the slaves fled to remote areas, especially for lakes
and waterfalls difficult to locate and access. Many of these communities are still today in full
contact with the biodiversity in places far from the urban area of Oriximiná. These communities
survive largely on fishing, hunting and subsistence agriculture and the only source of income is
the extraction of the chestnut of Pará that provide only few months in the year. Thus, the aim of
this work is to discuss, through a case study, involving the Federal University of Rio de Janeiro
and the Association of Remaining Communities of Quilombo of the City of Oriximiná, the difficulties to get the authorization of access with the directing council of the genetic heritage, the
anthropologic appraisal and the benefit sharing contract. Although it’s well-known the unpreparedness of the government to deal with the subject, many times harming and making impracticable the national research, on the other hand has the rights of the communities that must be
respected, searching that the access brings benefits to the purveyor of the CTA. Thus, the guarantee of these benefits must come through the fulfilment of the current law, that still needs to
be perfected. Nowadays, the return of benneficits to tradicional knowleadges may be the only
way to rpeserve the Amazon Rain Forest.
Key-words: Bioprospecting; anthropologic appraisal; Genetic heritage; Traditional knowledge associated; informed
consent; benefit sharing contract.
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CNPq e FAPERJ. ¬
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Efecto analgésico del extracto de hoja de Eupatorium
Glabratum en la prueba de hot plate
Guadalupe García1, Isabel Martínez1, Arianna Bravo1, Tom Scior1,
Julio C. Pardo2, Rosa E. del Río2
1
Facultad de Ciencias Químicas, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Ciudad Universitaria,
Puebla, Pue. México
2
Instituto de Investigaciones Químico Biológicas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo
Ed. B-1, Ciudad Universitaria, Morelia, Mich. México
[email protected]
El dolor se inicia por eventos que suceden en la piel o en tejidos internos como vísceras, huesos
o músculos, pero se requiere que el sujeto esté consciente y por lo tanto es una experiencia
subjetiva que funciona como un medio natural de defensa. En la experimentación con animales,
las mediciones de dolor se basan en las respuestas objetivas del sujeto cuando es sometido a una
agresión nociceptiva, dichas respuestas son muy semejantes entre humanos y animales. Los
modelos más empleados están basados en el uso de estímulos térmicos, como la prueba de hotplate.
En México, Eupatorium glabratum ha sido utilizada popularmente por sus efectos analgésicos
sin embargo, poco se conoce acerca de dichos efectos. De aquí el interés de evaluar la actividad
analgésica de E. glabratum en la prueba hot plate. Para ello, se administró (i.p.) el extracto de
hoja solubilizado en aceite de sésamo a dosis de 100 y 150 mg/kg a ratas hembras de la cepa
Sprague Dowley y el grupo control fue administrado (i.p.) con 3.5ml/kg de aceite de sésamo. Los
extractos de hojas se obtuvieron por maceración en CH 2Cl2 y fueron analizados por resonancia
magnética nuclear para ver la naturaleza de los componentes, encontrándose compuestos
derivados del timol, con estructura muy similar a los aislados por F. Bohlmann 1.
Los resultados obtenidos indicaron que la administración de 100mg/kg de extracto de E.
glabratum causa un aumento en los tiempos de latencia (p<0.05) cinco horas posteriores a la
administración con una duración del efecto de cuatro horas. Sin embargo dicho efecto parece no
ser dependiente de la dosis, ya que a una dosis de 150mg/kg, el efecto analgésico presenta menor
duración y tiempos de latencia similares (p<0.05) a dosis de 100 mg/kg. El grupo control mantuvo
valores de tiempo de latencia constantes.
Los compuestos identificados podrían estar involucrados en el mecanismo de la analgesia
presentada o junto con otros compuestos presentes que actuarían de manera sinérgica. Este
hallazgo apoya el uso popular de esta planta para el tratamiento del dolor.
Referencias
1. Bohlmann F., Jakupovic J. y Lonitz M. (1977) Über Inhaltsstoffe der Eupatorium Gruppe; Chem. Berichte, 110, 301-314. ¬
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2
Evaluación del efecto antiproliferativo y citotóxico de plantas
de la etnofarmacopea del estado de sonora, méxico
Robles-Zepeda R.E.1, Rascón-Valenzuela L.A. 1, Morales-Chávez S.D. 1,
Velázquez-Contreras C.A. 1, Garibay-Escobar A. 1, Jiménez-Estrada M.2
1
Departamento de Ciencias Químico Biológicas, División de Ciencias Biológicas y de la Salud,
Universidad de Sonora. Encinas y Rosales Hermosillo, Sonora, México. C.P. 83000.
2
Departamento de Productos Naturales, Instituto de Química, Universidad Nacional Autónoma de México.
Cd. Universitaria, México, Distrito Federal, C.P. 04510
Resumen
Actualmente el estudio de compuestos naturales con actividad biológica es la base para la
elaboración de nuevos fármacos. En México existe una gran tradición en el uso de las plantas
medicinales para tratar diversos males entre ellos el cáncer. En el presente trabajo se presentan
los resultados del efecto antiproliferativo y citotóxico de los extractos metanólicos de las plantas
Acalypha califórnica (Hierba del Cáncer), Acalypha pringlei (Hierba del Cáncer), Asclepias subulata
(Candelilla), Krameria grayi (Cosahui), Euphorbia xantii (Jumetón) y Aloysia sonorensis (Canelilla)
en las líneas celulares M12.A k C3F6 y L929. La actividad antiproliferativa de los extractos
metanólicos a concentraciones de 100, 200, 400 y 800 mg/mL fue evaluada mediante citometría
de flujo y por el método del MTT [3-(4,5- dimetiltiazol-2-il) 2,5 bromuro difeniltetrazolio], el efecto
citotóxico se evaluó mediante la observación microscópica de los cambios inducidos por los
extractos sobre las células. Los extractos metanólicos de las plantas A. califórnica, A. pringlei,
Euphorbia xantii y Aloysia sonorensis mostraron buen efecto antiproliferativo contra ambas líneas
celulares con una IC50 entre 100 y 200 μg/mL, mientras que Krameria grayi y Asclepias subulata,
mostraron un menor efecto, >200 y >800 μg/mL, respectivamente. Adicionalmente, se observó
que todos los extractos metanólicos con actividad antiproliferativa inducen cambios
morfológicos sobre la línea celular M12.Ak.C3F6, haciendo que las células pierdan su adherencia y
morfología alargada característica. Los extractos evaluados en este trabajo presentaron actividad antiproliferativa y concuerda con el uso dado algunas de éstas en la etnofarmacopea sonorense. Una caracterización de los principios activos de algunas de estas especies está en desarrollo. ¬
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Nuevos sesquiterpenos obtenidos por reordenamientos
moleculares de la 7β-hidroxi-9-oxo-longipin-2-en-1-ona
Pablo Chacón-Morales, Ciro Rodríguez-Villanueva, Juan M. Amaro-Luis, Alí Bahsas
Laboratorio de Productos Naturales. Departamento de Química. Facultad de Ciencias
Universidad de Los Andes. Mérida. Venezuela-5101
[email protected]
Los sesquiterpenos son terpenos conformados por quince átomos de carbono, los cuales se
pueden acomodar de muchas formas para generar una gran diversidad estructural de esqueletos.
Muchos sesquiterpenos son sustancias biológicamente activas, tal es el caso de la vitamina A o
de la artemisinina, el antimalárico presente en Artemisia annua. En un intento de búsqueda de
nuevos sesquiterpenos naturales o semisintéticos potencialmente activos desde el punto de vista
biológico o farmacológico, hemos centrado nuestra atención en los sesquiterpenos de la serie
del longipinano, los cuales son los metabolitos secundarios más representativos del género
Stevia; la mayoría de ellos poseen grupos hidroxilos esterificados, que incorporan restos angelato, tigliato o acetato, los cuales condicionan su posible actividad biológica. Dado que los longipinanos poseen un anillo ciclobutánico y están altamente funcionalizados, son moléculas interesantes para estudiar reordenamientos moleculares y conversiones de grupos funcionales. Debido
a esto se procedió a realizar la hidrólisis básica de una fracción cruda procedente del extracto en
CH2Cl2 de las hojas de Stevia lucida Lagasca rica en diésteres de 7α,9β-dihidroxi-logipin-2-en-1-ona,
con la finalidad de obtener el correspondiente 7,9-diol [1]. Este
producto fue tratado con el reactivo de Collins, el cual, selectivamente oxidó el hidroxilo en C-9 para generar la dicetona [2]. Esta
sustancia fue sometida a reflujo en benceno utilizando una trampa
Dean-Stark en presencia de ácido p-toluensulfónico monohidratado.
La reacción fue monitoreada por TLC, observándose la formación de
tres nuevos productos ([3], [4] y [5]), los cuales fueron separados
mediante PLC. Estos compuestos fueron caracterizados mediante
Espectroscopía de Infrarrojo (IR) y Resonancia Magnética Nuclear
(RMN) uni- y bidimensional. El producto [3] corresponde a la
deshidratación del sustrato [2].
Los compuestos [4] y [5] se obtienen mediante reordenamientos moleculares y sus esqueletos
son nuevos para la ciencia. En la actualidad se adelantan estudio sobre la actividad biológica de
estos derivados
Proyecto financiado por el MCT
Subvención N° 2008000937
Palabras Claves: Stevia, longipinenos, reordenamientos moleculares, RMN
¬
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2
Extracts from Alternanthera maritima (amaranthaceae) as
natural photosensitizers in photodynamic antimicrobial
chemotherapy against yeast
Nathalia L. Andreazza1, Tadia F. Lapinski2, Adriana Gasparetto2, Stella R. Zamuner3,
Sonia Khouri3, Egberto Munin4, Marcos J. Salvador1
1
UNICAMP, Campinas, SP, Brasil
UNOCHAPECÓ, Chapecó, SC, Brasil
3
UNIVAP, São José dos Campos, SP, Brasil
4
UNICASTELO, São José dos Campos, SP, Brasil
[email protected]
2
Human infections constitute a great health problem. Several antifungal drugs are currently
available, but their uses are limited by a number of factors, such as low potency, poor solubility,
microbial resistance, and drug toxicity. Therefore, the search for new and more effective antimicrobial agents and the development of alternative therapies, are necessary. This study investigated the effect of using extracts from Alternanthera maritima (Amaranthaceae) on the viability of
fungus at photodynamic antimicrobial chemotherapy. Crude hexane and ethanol extracts of A.
maritima were produced and presented absorption at 650-700 nm. For bioassays, each extract
were tested against C. dubliniensis 778157 or 777 107 CFU/mL) in a 96-well microtiter plate. The
irradiation was with a 685 nm diode laser with an output power of 35 mW, which was distributed
through the well cross section yielding an energy dosage of 28 J/cm 2. In each assay, one plate
was subjected to irradiation, and one was not. For each active sample, the number of colonyforming units per milliliter (CFU/mL) was obtained, and data were analyzed by the Tukey test.
The chemical compositions of the extracts were determined by chromatographic and spectroscopic techniques. The results suggest inhibition of the growth of C. dubliniensis when irradiated
with a diode laser in the presence of hexane and ethanol extracts from A. maritima as photosensitizers. Laser irradiation alone or crude extracts did not significantly reduce the number of
CFU/mL. Steroids, triterpenes, and flavonoids were identified in the analyzed extracts. In conclusion, the photoactivation of crude hexane and ethanol extracts of A. maritima by red laser
radiation at 685 nm promoted an antimicrobial effect, showing that these natural products can
be used as photosensitizers in PACT. Despite the positive results, further investigations are
necessary to confirm the potential of these products for application as photosensitizers in PACT.
Financial support: CNPq, FAPESP and FAEPEX-UNICAMP
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2
3β-acetoxi-20(s)-tirucalla-8,24-dieno, un nuevo triterpeno de
Stevia serrata cav. (asteraceae)
Juan Manuel Amaro Luis, Ciro Rodríguez-Villanueva, Alí Bahsas,
Graciela Díaz de Delgado, José Miguel Delgado
Laboratorios de Productos Naturales y Laboratorio de Cristalografía
Facultad de Ciencias. Universidad de Los Andes. Mérida. Venezuela
[email protected]
Los triterpenos tetracíclicos con el esqueleto básico del cicloperhidropentanofenantreno
(esqueleto esteroidal) conforman un amplio grupo de productos naturales que destacan por su
amplia gama de actividades biológicas y farmacológicas 1. Continuando con nuestro programa de
investigación centrado en la búsqueda de principios activos de plantas de los Andes Venezolanos,
en la presente ponencia describimos el aislamiento y la caracterización estructural de un nuevo
diterpeno de la serie del tirucallano, presente en la Stevia serrata Cav. (Asteraceae). Las raíces de
esta planta (1,5 Kg) se secaron a la sombra durante dos semanas, y luego se extrajeron con
acetona a la temperatura ambiente hasta agotamiento. La disolución obtenida fue filtrada y
posteriormente concentrada al vacío para dar un extracto, el cual fue preadsorbido en gel de
sílice y luego cromatografiado en columna al vació (VCC), utilizando este mismo adsorbente. Las
fracciones obtenidas, una vez analizadas por TLC, fueron sometidas a procesos de fraccionamiento utilizando diversas técnicas cromatográficas. Las separaciones y purificaciones se lograron mediante filtración en columna de sephadex LH-20 o por cromatografía preparativa en placas
de gel de sílice, y posterior cristalización. De esta manera se logró purificar un sesquiterpeno de
la serie del longipinano identificado como rasteviona, y dos triterpenos: epifriedelinol y un nuevo
compuesto tetracíclico de la serie del tirucallano. La estructura de este nuevo triterpeno se
determinó sobre la base de estudios espectrales, utilizando métodos convencionales [IR, UV, EM,
RMN-1H y RMN-13C] y técnicas bidimensionales de RMN [1H, 1H-COSY, HMQC y HMBC].
Su configuración absoluta fue finalmente determinada mediante un estudio de difracción de
rayos X, concluyéndose que la misma corresponde al 3β-acetoxi-20(S)-tirucalla-8,24-dieno [1]. Se
adelantan algunos resultados relativos a la actividad antimicrobiana de este triterpeno.
Proyecto financiado por el Ministerio de
Ciencia y Tecnología, Misión Ciencias,
Alternativas Nacionales para
el
Tratamiento de Malaria, Leishmaniasis,
Chagas, TBC… Subvención N° 2008000937
1. Dzubak et al., 2006. Pharmacological
activities of natural triterpenoids and their therapeutic implications. Nat. Prod. Reports, 23, 394-411
Palabras Clave: Stevia, triterpeno, tirucallano, RMN, Rayos X
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Contributions of two sensory methods to differentiate
Meliponini pot honey
Patricia Vit*,1, Isbelia González1, Rosires Deliza2,3
1
Departamento Ciencia de los Alimentos, Facultad de Farmacia y Bioanálisis
Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela
2
Embrapa Labex Europe
3
Institut National de la Recherche Agronomique
Centre des Sciences du Goût et de l’Alimentation, Dijon, France
Sensory profile of pot honey produced by stingless bees (Meliponini) faces challenges uncommon to Apis mellifera honey, which has been characterized based on the botanical origin along
the years. The vast biodiversity of Meliponini introduces the need of entomological origin of the
honey produced by a 500 species of stingless bees in the tropics and subtropics. In this work we
compare the information achieved by classic quantitative descriptive analysis (QDA) addressed
to the product by a trained panel and free choice profile (FCP) approach, based on consumer’s
perception, i.e. non trained panel. The starting point for QDA of pot honey was the odor-aroma
wheel generated by the International Honey Commission for A. mellifera honey. Eight panelists
were trained with familiar descriptors and further descriptors for Meliponini pot honey were
generated. The result was a set of fermented, beehive and primitive families that were not
necessary to describe commercial unifloral honeys. These differences were attributed to the
entomological origin, both to the collecting and processing behavior of stingless bees, additionally to the extraction methods. Meliponini honeys were mostly described as sweet and sour,
and sometimes also astringent. The most frequent odour-aroma family was floral and fruity.
Some bee species had a distinctive fermented and primitive nose, even if more aromas (128) than
odors (101) were perceived. Previous contact with a descriptor and memory effects based on
complex interactions in nose and mouth were important to build up the new reference of sensory families, subfamilies and descriptors needed to portray pot honey. For the FCP, eight untrained panelists compared pot honey produced by five species of stingless bees, generating own
lists of descriptors and a subsequent duplicate quantification was done using a 10-cm unstructured line scale anchored with words weak and strong, on the left and right side, respectively. The
data analyses allowed honeys to be successfully separated in terms of their sensory characteristics at the genus level (Melipona, Scaptotrigona, Trigona) by statistical analysis. Both DQA and
FCP were useful sensory methods to describe and differentiate honey stored in cerumen pots by
stingless bees.
Keywords: Apis, free choice profile, honey, Meliponini, quantitative descriptive analysis, sensory
Aspergillus oryzae ¬
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Extrato de Vochysia tucanorum Mart. em camundongos
portadores do tumor sólido de Ehrlich melhora parâmetros
indicadores do estado caquético.
Dokkedal A. L. D., Marques R. J., Violato N. M., Saldanha L. L., Bosqueiro J.R.
Departamento de Ciências Biológicas Faculdade de Ciências UNESP - Brazil
O Cerrado figura entre os ecossistemas mais degradados do planeta, sendo um dos “hot
spots” mundiais de biodiversidade. Vochysia tucanorum (Vochysiaceae) é uma árvore típica do
bioma cerrado. Várias espécies deste gênero são utilizadas na medicina tradicional de comunidades da América do Sul. Triterpenos pentacíclicos têm confirmada ação antineoplásica, inibindo a
proliferação e o desenvolvimento de células tumorais. Aliado a isso, sabe-se que terpenoides
aliviam o quadro catabólico associado ao câncer, tanto pela produção modulada de espécies
reativas, quanto pela supressão de mediadores inflamatórios. A ausência de toxicidade aguda
torna o extrato de V. tucanorum objetivo de teste em camundongos portadores do tumor sólido
de Ehrlich (TSE), uma vez que em estudos prévios foram observados altos distúrbios metabólicos
em animais portadores do TSE. Assim, a partir do conhecimento dos constituintes químicos da
fração butanólica do extrato metanólico (VBu) de V. tucanorum, foi avaliada a potencialidade de
sua utilização como agente antineoplásico. A VBu foi fracionada através de diferentes técnicas
cromatográficas, como cromatografia em coluna de sílica gel, cromatografia em camada delgada,
cromatografia em contra-corrente por gotejamento e cromatografia líquida de alta eficiência. A
análise das substâncias isoladas foi realizada através de ressonância magnética nuclear de 1H e 13C
(em 500 MHz), utilizando-se experimentos uni- e bidimensionais. A avaliação dos efeitos da
administração de VBu foi realizada em camundongos Swiss machos com 45 dias, divididos em
quatro grupos experimentais (N=10 para cada grupo), sendo dois grupos controle, um deles
tratado com salina (CS 100 μL/kg.dia) e outro com VBu (CV 400mg/kg.dia), e dois grupos portadores de tumor, um deles tratado com salina (TS 100 μL/kg.dia) e outro com VBu (TV 400mg/kg.dia);
todos os animais foram tratados por 14 dias por gavagem e eutanasiados ao 14º dia da inoculação
do tumor. Foram analisados o peso tumoral e corpóreo, a ingestão alimentar, o peso da gordura
retroperitoneal e o conteúdo total de insulina no pâncreas. Os resultados revelaram que camundongos portadores do tumor sólido de Ehrlich exibiram diminuição no peso do tumor no grupo
tratado TV (P<0,01 para TV comparado à TS); houve diminuição do peso de TS em relação a todos
os grupos (P<0,001 para TS em relação a todos os grupos). Não houve diferença de peso
corpóreo entre TV e os grupos controles. A ingestão alimentar foi maior nos grupos tratados TV e
CV quando comprados à animais controle (P<0,05). Houve aumento significativo no peso da
gordura retroperitoneal e do conteúdo total de insulina pancreática de animais tratados TV em
relação ao grupo controle TS (P<0,05 e P<0,01 respectivamente). O estudo químico revelou a
presença de triterpenos pentacíclicos, como ácido betulínico, ácido epi-betulínico, eritrodiol,
ácido ursólico, ácido oleanólico. Diante do exposto pudemos concluir que V. tucanorum melhorou parâmetros indicadores do estado caquético em portadores do TSE tratados, provavelmente
devido à presença de triterpenos. Por isso torna-se evidente a necessidade de estudos adicionais
que possam vir a elucidar os possíveis mecanismos de efeito do VBu em células tumorais.
Apoio: FAPESP ¬
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Estudio etnobotánico de especies medicinales en la Estación
Experimental Caparo del Estado Barinas, Venezuela
Vanessa Hernández1, Flor Mora1, Pablo Meléndez1
1
Departamento de Farmacognosia y Medicamentos Orgánicos, Facultad de Farmacia
Universidad de Los Andes, Mérida, 5101,Venezuela
La Estación Experimental de Caparo, está ubicada en la población, El Cantón-Limoncito,
Municipio Andrés Eloy Blanco, sur-oeste del Estado Barinas, de los llanos occidentales de
Venezuela. Tiene una superficie aproximada de 9000 ha. El área pertenece a una llanura aluvial,
altitud es de ~140msnm. La mayoría de la población se encuentra muy alejada de los centros de
atención médica primarios, está en situación irregular (invasiones) y viven bajo evidente condiciones de pobreza, con altos índices de morbi - mortalidad y riesgo de desalojo.
El objetivo de este trabajo es la creación de una base de datos de las especies medicinales de
uso en el tratamiento de las enfermedades que más comúnmente ataca a esta población. El
conocimiento sobre el uso de estas plantas es transmitido de generación en generación. Se
realizaron entrevistas directas informales al azar a 45 familias, recolección de ejemplares vegetales “in situ” y posterior identificación, revisión bibliográfica, y registro fotográfico con cámara
digital. Dentro de las familias mejor representadas se encuentran: Plantaginaceae, Labiatae,
Asphodelaceae, Piperaceae, Gramineae, Chenopodiaceae, Fabaceae, Sterculiaceae, Costaceae,
Euphorbiaceae, Malvaceae, Moraceae, Leguminosae, Adoxaceae, Annonaceae, Anacardiaceae,
Solanaceae, Myrtaceae, Tiliaceae, Araceae. Entre los principales usos terapéuticos están: antiinflamatorio, antibiótico, antiséptico, analgésico, antiepiléptico, desparasitante, antirreumático,
antigripal, astringente, diurético, depurativo, digestivo, hepático, laxante y sedativo.
Los habitantes de la comunidad en un 95% utilizan las plantas medicinales del lugar como
tratamiento primario, el restante 5% de la población optan por la medicina tradicional. Tanto
hombres como mujeres mostraron tener conocimiento sobre plantas medicinales, la población
ha adoptado el uso de plantas medicinales con la finalidad de mejorar sus dolencias. ¬
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Phyllanthus orbicularis kunth: una alternativa para la
obtención de compuestos antivirales
Roque A.1, del Barrio G.1, Álvarez A.L.1, Acosta M.1, Parra F.2
1
Dpto. Microbiología y Virología. Facultad de Biología. Universidad de la Habana. Calle 25 #455 e/ J e I. Vedado,
Plaza de la Revolución. Ciudad de la Habana, Cuba
2
Instituto Universitario de Biotecnología de Asturias. Universidad de Oviedo
Calle Fernando Bongera. 33006. Oviedo. España
[email protected]
Introducción
Phyllanthus orbicularis Kunth (Phyllanthaceae) es una planta endémica cubana, empleada
tradicionalmente para el tratamiento de diversas enfermedades, entre las que se incluyen la
diabetes, ictericia..
Objetivo
Evaluar la citotoxicidad y la actividad antiviral del extracto acuoso de P. orbicularis frente a un
panel de virus que incluye miembros de la familia Herpesviridae, Poliovirus 1 (PV1), Mengovirus,
Adenovirus 7, Virus de la Hepatitis B (VHB) y Vesivirus del conejo
Metodología
El ensayo de citotoxicidad se realizó empleando la técnica del MTT en diferentes cultivos
celulares (Vero, MDBK, HeLa, HEL, Hep-2 y PLC/PRF/5). La determinación de la actividad antiviral
se realizó a través de la inhibición del efecto citopático (ECP) para cada virus ensayado en la línea
correspondiente, con excepción del virus de la hepatitis B (VHB), para el que se empleó como
criterio de actividad la inhibición de la producción del AgsHB en las células PLC/PRF/5. Se realizaron ensayos de acción virucida y de tiempo de adición con herpesvirus y poliovirus.
Resultados
Los valores de CC50 variaron entre 144.7±3.6 μg/mL y 1500.49 ± 37.8 μg/mL, en dependencia de
la línea celular. El extracto fue activo frente a todos los herpesvirus ensayados, con índices
selectivos (IS) entre 8.7 y 37.6. De igual forma fue efectivo frente Poliovirus tipo 1 (IS= 9.1), y HBV
(IS=12.9). No se obtuvo actividad frente a Mengovirus, Adenovirus 7 ni Vesivirus del conejo. Los
resultados alcanzados en los ensayos virucida y de tiempo de adición revelan que la droga pudiera actuar en etapas tempranas del ciclo replicativo de herpesvirus y poliovirus, aunque en PV1
esta acción es solo de un log de reducción y se manifiesta con una concentración de 1000 μg/mL.
Estos resultados sugieren que la actividad antiviral de P. orbicularis puede estar dada por la
acción de más de un compuesto químico en interacción con el ciclo replicativo viral. ¬
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Isomerización del ácido ent-kaur-16-en-19-oico
Julio Rojas1, Rosa Aparicio2, Alexis Peña3, Thayded Villasmil3, Deysis Peña3,
Alfredo Usubillaga2*
1
Postgrado En Química de Medicamentos, Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
2
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
3
Postgrado Interdisciplinario de Química Aplicada, Facultad de Ciencias,
[email protected]
El ácido kaurénico (1a) es un diterpeno tetracíclico que posee un metileno terminal en Δ 16. Se
ha aislado de Espeletia tenore1, un ácido isomérico que posee un doble enlace endocíclico Δ 15,
denominado ácido isokaurénico (2a). El ácido kaurénico posee actividad biológica interesante,
pero la del ácido isokaurénico no ha sido estudiada. Con el objeto de aislar suficiente cantidad de
2a para estudios biológicos y para obtener derivados portadores de funciones hidroxi, aldehído o
ácido carboxílico en C-17, se estudió la isomerización 1a. Al tratar durante 2 hr con 3 gotas de
HCl:H2O (10:1) a temperatura ambiente una solución del éster metílico 2 (1b) en CH2Cl2 se obtiene
un 17% de 2b (éster metílico del ácido isokaurénico). El rendimiento aumenta con el tiempo y a las
5 hr la concentración de 2b es del 37% y la de 1b 47%, pero simultáneamente se forma como
subproducto el ácido 16-α-OH-kauránico (3) que a las 5 hr alcanza una concentración del 11%. A fin
de evitar la formación de 3 se realizó la isomerización en ausencia de agua, utilizando CF 3COOH.
En este caso a las 2 h de reacción se había formado un 62% de 2b y quedaba 36% de 1b. También se
observó un 1% de 3. Se cree que este subproducto (3) se forma en presencia de humedad y por
consiguiente se están haciendo ensayos en condiciones anhidras. El curso de la reacción se siguió
mediante cromatografía de gases/masas.
Agradecimiento
CEP y CDCHT, Universidad de Los Andes, Mérida Venezuela.
1. Usubillaga, A.; Morales, A. 1970. Rev. Latinoamericana de Química, 1, 128-132.
2. Viloria, E.; Rojas, L. y Usubillaga, A. 1997. J. High Res. Chrom. 20:50-51. ¬
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Study the extract of Terminalia catappa linn. on diabetes in
rats
Ferreira A. K. B.1, Costa D. L.2, Sant’Ana A. E. G.1, Humberto M. M. S., Grillo L. M.2,
Araújo-Júnior J. X.1,2, Ribeiro Ê. A. N2
1
Escola de Enfermagem e Farmácia/UFAL, Cidade Universitaria, 57092-970, Maceió-AL, Brazil
2
Instituto de Química e Biotecnologia/UFAL, 57072-970, Maceió AL, Brazil
Introduction
Terminalia catappa L. originating in Malaysia is a tree of coastal regions tropicais (1) found in
the Brazilian coast including in the state of Alagoas. In Brazil it is used in folk medicine to treat
respiratory diseases, to fight dysentery and diarréias (2). A pharmacological evaluation showed
antidiabetic activity of aqueous extracts of leaves (3). This study was aimed to investigate the
hypoglycemic effect of ethanol extract from the stem bark of Terminalia catappa (TCEE).
Methods
The Diabetes was induced with alloxan (40 mg/Kg). Diabetes was identified by measuring
fasting plasma glucose levels 7 days after alloxan injection. Animals with plasma glucose levels
190 mg/dL were selected and used for this study. The male Wistar rats were randomly divided in
the four (n = 5 rats per group): Group I (non-diabetic control), group II (untreated diabetic
control), group III (diabetic control treated with insulin, 4UI s. c.) and Group IV (diabetic treated
with TCEE, 200 mg / kg orally for daily for 15 days). The study was approved by the Ethics
Committee of the Federal University of Alagoas (010151/2008-82).
Results
Treatment of diabetic rats with TCEE for 15 days caused a significant decrease in the blood
glucose (156 ± 36 mg/dL**) compared with the diabetic control (366 ± 48 mg/dL). The insulin was
used as reference and showed hypoglycemic effect.
Discussion
The findings showed that the TCEE has beneficial effects, in reducing the elevated blood
glucose level of alloxan-induced-diabetic rats.
Financial support
CNPq, FAPEAL and PPSUS-MS.
Acknowledgements
FAPEAL, CNPq, UFAL, PPSUS-MS.
References
1. Fan, Y. M. et al., Fitoterapia, v. 75, p. 253, 2004.
2. Cruz, G. L. Dicionário das plantas úteis do Brasil, 2ª ed. p. 48, 1982.
3. Ahmed, S. M. et al., Iranian J Pharmacol & Therapeutics, v. 4, p 36, 2005 ¬
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Evaluación del efecto hipoglicémico en ratas de tres plantas
utilizadas por la población costarricense en diabetes mellitus
Cristina Herrera1*, Pedro García1, Franklin Binns1, Francisco Alvarado1, Luis Poveda2
1
Instituto de Investigaciones Farmacéuticas INIFAR, Facultad de Farmacia, Universidad de Costa Rica
San José, Costa Rica
2
Herbario Juvenal Valerio Rodríguez, Escuela de Ciencias Ambientales,
Universidad Nacional Heredia, Costa Rica
[email protected]
En la flora costarricense hay plantas de uso popular en Diabetes mellitus cuya actividad hipoglicemiante ha sido reportada en la literatura científica, tal es el caso de Neurolaena lobata (gavilana), Momordica charantia (sorosí), Chrysophyllum cainito (caimito) y Tradescantia zebrina (cucaracha). Sin embargo, Witheringia solanacea (sulfatillo), Hymenaea courbaril (guapinol) y Licania
arborea (alcornoque) son plantas utilizadas para la misma patología, pero no existen reportes
científicos que respalden su uso. Por lo tanto, el objetivo del presente trabajo fue determinar la
actividad hipoglicemiante de extractos acuosos de hojas de H. courbaril, L. arborea y tallos de W.
solanacea, además de dos extractos no polares de tallos de W. solanacea (éter:metanol 9:1 y
hexano). Se aplicó un modelo de sobrecarga de glucosa en ratas, para el cual se utilizaron animales en ayuno por 15 horas a los cuales se les administró por VO las sustancias de prueba y diez
minutos después se les administró 2g/kg de glucosa VO. La glicemia se midió con un glucómetro
marca GlucoSure Plus®, previamente validado por método de glucosa oxidasa, en sangre obtenida de la vena coccígea cada media hora durante dos horas. Se utilizó glibenclamida 5 mg/kg VO
y solución salina como controles. En el caso de los extractos acuosos de H. courbaril y L. arborea
no se observó un efecto hipoglicemiante con respecto al control con solución salina a dosis
iguales e inferiores a 1000 mg/Kg. Por el contrario, el extracto acuoso de tallos de W. solanacea
mostró un efecto hipoglicemiante dosis dependiente, donde con una dosis de 1000 mg/kg se
observó una disminución significativa (p<0,05) de los niveles de glicemia en todos los tiempos
con respecto al control con solución salina, mientras que con una dosis de 500 mg/kg se observó
una disminuyó significativa (p<0,05) de los niveles de glicemia solamente a los 60 minutos. Por
otro lado, con una dosis de 250 mg/kg no se obtuvo diferencias significativas, aunque se observa
una tendencia de valores de glicemia menores al control a los 60 minutos. El tamizaje fitoquímico
cualitativo del extracto acuoso de tallos de W. solanacea indican la presencia de glicósidos
antracénicos, saponinas y taninos en el extracto. De los extractos no polares de W. solanacea,
solamente el extracto éter:metanol (9:1) mostró una disminución significativa (p<0,05) de los
niveles de glicemia a los 60 minutos a una dosis de 250 mg/kg VO. Los resultados de este trabajo
demuestran el efecto hipoglicémico de W. solanacea lo que respalda su uso popular y advierte de
un posible efecto tóxico hipoglicémico; sin embargo, se requiere de más estudios que confirmen
su actividad hipoglicemiante, efectividad y seguridad, así como estudios para determinar los
componentes activos y mecanismos de acción involucrados. ¬
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Actividad antiproliferativa de extractos metanólicos de seis
plantas mexicanas sobre cultivos de células de carcinoma
escamoso de cérvix
Carmen Avelino-Flores1, Carmen Cruz-López1, Julio Reyes-Leyva2
1
Centro de Investigación en Biotecnología Aplicada, Instituto Politécnico Nacional, Carretera estatal Sta. Inés
Tecuexcomac-Tepetitla Km 1.5, Tepetitla, 90700, Tlaxcala
mavelinofl[email protected], [email protected]
2
Centro de Investigación Biomédica de Oriente, Instituto Mexicano del Seguro Social. Km 4.5 Carretera AtlixcoMetepec, CP 74360 Metepec, Puebla, México
[email protected]
Una de las principales causas de muerte a nivel mundial es el cáncer; en México, ésta representa la tercera causa de muerte y el cáncer de cérvix ocupa el segundo lugar como causa de
muerte en mujeres. Los tratamientos empleados son muy costosos, con frecuencia afectan la
calidad de vida del paciente y los tumores pueden presentar resistencia a los quimioterápicos;
por esta razón se hace necesaria la investigación de nuevos principios que puedan ser una
alternativa en el tratamiento de este padecimiento. El presente trabajo tiene por objetivo evaluar
la actividad de extractos metanólicos de seis plantas mexicanas sobre la proliferación de una
línea celular de carcinoma escamoso de cérvix (SiHa).
Las plantas se seleccionaron de acuerdo a su uso tradicional o quimiotaxonomía y fueron
Argemone mexicana, Cuphea aequipetala, Euphorbia prostrata, Selaginella lepidophylla, Turnera
difussa y Verbesina persicifolia (recolectadas del centro del país). Los extractos metanólicos se
obtuvieron por maceración a temperatura ambiente de las partes aéreas. Para probar la actividad
antiproliferativa, cada extracto fue resuspendido en DMSO (0.1% concentración final), para
obtener concentraciones finales de 0.1-100 g/ml en medio DMEM adicionado con glucosa 7 g/L,
10% de suero fetal bovino y antibiótico. Las células se expusieron a las diferentes dosis de extracto por 72 horas, incubándose a 37º C en atmósfera húmeda con 5% de CO 2; se empleó como
testigo positivo Sulfato de bleomicina a dosis de 100 μg/ml, la proliferación celular se midió con el
ensayo colorimétrico MTT. Sólo los extractos de las plantas C. aequipetala, S. lepidophyla y V.
persicifolia inhibieron la proliferación de las células SiHa a un valor comparable con el testigo
positivo; los extractos de las otras plantas presentaron una mínima actividad antiproliferativa
inferior al 50% a la dosis de 100 μg/ml.
Las concentraciones inhibitorias medias (ID 50) calculadas para los extractos más activos,
fueron: para C. aequipetala 56.81 μg/ml, para S. lepidophyla 56.1 μg/ml y para V. persicifolia 23.97
μg/ml con el extracto de hojas y 53.20 μg/ml con el extracto de tallos. Se puede concluir que el
extracto metanólico de las hojas de V. persicifolia, presentó la menor ID50 con un valor comparable al sulfato de bleomicina, por lo que esta especie está siendo analizada químicamente para
determinar la presencia de un posible principio activo, esta planta es ampliamente utilizada y ha
sido poco estudiada; por ello representa una buena alternativa para el desarrollo posterior de un
fitofármaco. ¬
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3
Saving time and costs in phytochimical sciences by the
establishment of international multidisciplinary network
Ammar Bader
Department of Pharmaceutical Sciences, Faculty of Pharmacy
Al-Zaytoonah Private University of Jordan
P.O. Box 130, 11733-Amman, Jordan
Phytochemistry is a wonderful science that involves many branches of allied sciences such as
botany, ecology, chemistry, biochemistry, pharmacology, ethno-medicine, microbiology, phycology, entomology and biotechnology. The classic aim of phytochemistry is the isolation and
characterization of secondary metabolites from natural origin, this process requires high cost
and long time, in many cases this process is not reproducible due to extrinsic and intrinsic factors, in addition the final pure and identified compound dies inside few pages of published
article, the proposal for the establishment of international multidisciplinary network can provide
scientists important data saving enormous costs and time. This scientific network can be performed by restricted area of researchers or by amplified one. According to literatures survey only
few percentage of natural compounds were reinvestigated biologically and their chance to be
reinvestigated is linked to the interactivity of certain networks between researcher of different
fields. Advanced biotechnology and is the pressing prospective for phytochemistry. ¬
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3
Estudio de los componentes volátiles de la Trixis inula que
crece en Mérida - Venezuela
Berrios C., Rojas L., Carmona J., Usubillaga A.
Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes
Mérida, Venezuela. Urb. Campo de Oro
[email protected]
El género neotropical Trixis pertenece a la familia Compositae, este comprende 37 especies.
Algunas de estas han sido estudiadas, por ejemplo: de la especie Trixis pallida se obtuvieron 7
conocidos trixannolides y 17 nuevos trixanolides, de la Trixis vauthieri se aislaron flavonoides y se
determinó actividad Tripanocida, en otras especies se han encontrado trixikingolides y derivados
del germacrene.
En el presente estudio se reporta la composición química de los componentes volátiles de la
especie Trixis inula que crece en Mérida, estado Mérida. El mismo consistió en aislar los aceites
esenciales por arrastre con vapor de agua utilizando una trampa de Clevenger, estos se identificaron por GC-MS, empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un
inyector automático, utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0,25 mm, 0,25 μm). Se
empleó una temperatura inicial de 60ºC (1 min) y luego se calentó a razón de 4 °C/min hasta 260ºC
(20 min). Se inyectó una muestra de 1,0 μL de una solución al 2% del aceite esencial en n-heptane
con reparto de 100:1. Se utilizó una temperatura de inyección de 200ºC. La identificación de los
componentes de los aceites se realizó mediante comparación computarizada de los espectros
obtenidos con los espectros de una Librería Wiley (6ta Edición). Se determinaron los índices de
Kováts analizando conjuntamente las muestras con una mezcla de n-alcanos. Se obtuvo un
rendimiento de 0,03% y se identificaron 29 componentes, el aceite está formado básicamente por
sesquiterpenos, los mayoritarios resultaron ser: germacreno D (44,09%), biciclogermacreno
(7,47%), valenceno (5,90%).
Referencias
Claudia Kotowicz, Luis R. Hernández, Carlos M. Cerda-García-Rojas, Margarita B. Villecco, César A. N. Catalán, and
Pedro Joseph-Nathan. J. Nat. Prod., 2001, 64 (10), pp 1326-1331) (Trixis pallida)
Antônia Ribeiro, Dorila Piló-Veloso, Alvaro J. Romanha and Carlos L. Zani. J. Nat. Prod., 1997, 60 (8), pp 836-838.
(Trixis vauthieri)
Ferdinand Bohlmann, Antoinette Suwita, Jasmin Jakupovic, Robert M. King and Harold Robinson. Trixikingolides and
germacrene derivatives from Trixis species. Phytochemistry. Volume 20, Issue 7, 1981, Pages 1649-1655 ¬
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Diterpenoidi clerodanici dall’essudato di parti aeree di Salvia
chamaedryoides Cav.
A. Bisio1, D. Fraternale2, G. Damonte3, E. Giacomelli1, A. Salis3, D. Ricci2, S. Cafaggi1,
G. Romussi1, N. De Tommasi4
1
Dipartimento di Chimica e Tecnologie Farmaceutiche e Alimentari
Università di Genova, Via Brigata Salerno 16147 Genova, Italia
2
Dipartimento di Scienze dell’Uomo, dell’Ambiente e della Natura
Università di Urbino, Via Bramante 28, Urbino, Italia
3
Dipartimento di Medicina Sperimentale e Centro di Eccellenza per la Ricerca Biomedica
Università di Genova, Viale Benedetto XV 7, 16132, Genova, Italia
4
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche
Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084 Salerno, Italia
Il prodotto di secrezione esterna delle strutture ghiandolari epidermiche è coinvolto nelle
interazioni pianta-pianta e pianta-ambiente [1], e i suoi composti fitotossici vengono rilasciati
dalla superficie delle foglie per volatilizzazione, dilavamento e come prodotti di decomposizione
[2]. Salvia chamaedryoides Cav [3], è una specie messicana il cui essudato delle parti aeree ha
mostrato attività erbicida contro Papaver rhoeas L. e Avena sativa L. nei test preliminari
(Germinazione Totale - GT [4] di Papaver 0.33±0.6 in esperimenti in capsula Petri a 5 mg/L e
0.00±0.0 in esperimenti in vaso a 40 mg/L; GT di Avena 0.00±0.0 in esperimenti in capsula Petri a 5
mg/L e 0.67±1.5 in esperimenti in vaso a 40 mg/L; LC 50 su Papaver 1.6±0.28 mg/L in esperimenti in
capsula Petri e 4.60±0.71 mg/L in esperimenti in vaso; LC 50 su Avena 5.6±2.4 in esperimenti in
capsula Petri e 3.9±0.7 mg/L in esperimenti in vaso). Per l’isolamento dei composti superficiali
fogliari, le parti aeree fresche (4.9 kg) sono state immerse in CH 2Cl2 per 20 s. Dopo filtrazione, il
solvente di estrazione è stato allontanato sotto vuoto e si è ottenuto l’essudato (41 g). 20.5 g di
essudato è stato sottoposto a ripetute cromatografie su colonna di Sephadex LH-20 e gel di
silice; esperimenti HPLC-MS e MS 2 su gruppi di frazioni isolate, seguiti da RP-HPLC semipreparativa, hanno portato, sino ad ora, all’isolamento di due composti diterpenoidici clerodanici
(1 e 2). Il composto 1 è stato identificato come tilifodiolide, sulla base dei dati 1H- e 13C-NMR,
ampiamente concordanti con quanto riportato in letteratura [5]. Il composto 2 è stato identificato tramite UV, IR, NMR (TOCSY, COSY, HSQC, HMBC, ROESY), analisi ESI-TRAP-MS e HR-MS.
Bibliografia
[1] E. Werker In: Advances in Botanical Research. Vol. 31. San Diego: Academic Press, 2000, 77-111;
[2] C.H. Chou In: Allelopathy - A Physiological Process with Ecological Implications, MJ Reigosa, et al. Eds., Springer:
Dordrecht, The Nederlands, 2006, 1-10;
[3] Epling, C. (1940) A Revision of Salvia, subgenus Calosphace. In: Repertorium Specierum Novarum Regni
Vegetabilis. Vol.110. Fedde F., University of California Press: Berkley, California;
[4] Chiapusio, A.M. Sanchez, M.J. Reigosa, L. Gonzalez, F. Pellissier Journal of Chemical Ecology, 1997, 23, 2445-2453;
[5] L. Rodriguez-Hahn, R. O’Reilly, B. Esquivel, E. Maldonado, A. Ortega, J. Càrdenas, R.A. Toscano. 1990. J. Org. Chem.
55: 3522-3525. ¬
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3
Derivati fenolici da Ruprechtia polystachya Griseb.
(Polygonaceae)
Alessandra Braca1, Maryan Bruzual De Abreu1, Abeer Temraz2,
Freddy Gonzalez-Mujica3, Nunziatina De Tommasi4
1
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Pisa, Via Bonanno 33, 56126 Pisa, Italia
[email protected]
2
Faculty of Pharmacy, Al Azhar University, Nasr-City, 11371 Cairo, Egitto
3
Instituto de Medicina Experimental, Facultad de Medicina, Universidad Central de Venezuela,
Apartado Postal 50587, Caracas, Venezuela
4
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Salerno, Via Ponte Don Melillo, 84084 Fisciano, Salerno, Italy
Il genere Ruprechtia è uno dei generi più piccoli e meno studiati della famiglia delle
Polygonaceae e comprende solo 17 specie ampiamente distribuite in centro e sud America. 1 R.
polystachya Griseb. è un albero che cresce principalmente nelle foreste tropicali del nord
Argentina, Uruguay, Paraguay, sud Brasile e Bolivia, ma può acclimatarsi anche in climi più temperati, ad esempio nella regione mediterranea dove è presente come pianta ornamentale. Con
questo scopo è menzionata sia in Spagna, che in Egitto, dove al Cairo è stata censita in un recente
rilevamento delle specie arboree e arbustive presenti nei giardini storici della città. 2
L’indagine fitochimica di R. polystachya rientra quindi in un progetto di ricerca volto allo studio
di varie specie vegetali acclimatate presso l’El Zoharia Research Garden del Cairo, Egitto. Nessun
indagine chimica è stato finora riportato su tale specie, mentre i pochi precedenti studi sul
genere riportano la presenza di steroli, acidi polifenolici e xantoni. 1,3 Le foglie essiccate e macinate sono state estratte con solventi a polarità crescente. Attraverso adeguate tecniche cromatografiche quali gel-filtrazione e HPLC su fase inversa, sono stati isolati numerosi composti
appartenenti alla classe dei flavonoidi (tra cui soprattutto flavonoli, diidroflavonoli e catechine) e
derivati fenolici. Fra i flavonoidi purificati, molti sono glicosilati e in particolare tutte le porzioni
zuccherine sono costituite esclusivamente da ramnopiranosio, arabinopiranosio e arabinofuranosio.
La determinazione strutturale di tutti i composti è stata effettuata con l’ausilio di tecniche
spettroscopiche NMR mono- e bidimensionali fra cui ( 1H, 13C, 1D-TOCSY, DQF-COSY, HSQC, HMBC,
2D-NOESY) e di spettrometria di massa (ESIMS e HRESIMS). I composti 5-metil-2-(2-metilbutiril)
floroglucinolo 1-O-(6'’-O-β-D-apiofuranosil)-β-D-glucopiranoside e (2R,3R)-diidrokaempferolo 3-O(4-sulfo)-α-L-arabinopiranoside sono risultati essere dei nuovi metaboliti naturali.
I composti ottenuti sono stati testati come inibitori della glucosio-6-fosfatasi, 4 enzima che
gioca un ruolo chiave nella regolazione omeostatica del glucosio nel sangue, per valutare un loro
possibile impiego nel trattamento del diabete. L’effetto inibitorio più alto è stato mostrato dai
flavonoli, seguiti dalle catechine e dai diidroflavonoli.
Bibliografia
1. Pettit GR, Meng Y, Herald DL, Graham KAN, Pettit RK, Doubek DL. J. Nat. Prod. 2003, 66, 1065-1069.
2. Hamdy RS, Adb El-Ghani MM, Youssef TL, El-Sayed M. African J. Agric. Res., 2007, 2, 610-648.
3.Woldemichael GM,Franzblau SG, Zhang F, Wang Y, Timmermann BN. Planta Med. 2003, 69, 628-631.
4. Estrada O, Hasegawa M, Gonzalez-Mujica F, Motta N, Perdomo E, Solorzano A, Mendez J, Mendez B, Zea EG.
Phytotherapy Res. 2005, 19, 859-863. ¬
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Estudio de los componentes volátiles del Chrysophyllum
caimito L.
Bracho I.1*, Rojas L.2, Carmona J.3, Usubillaga A.2
1
Postgrado Interdisciplinario de Química Aplicada, Facultad de Ciencias
2
Instituto de Investigaciones
3
Jardín Botánico, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de los Andes, Mérida - Venezuela
*
[email protected]
El Chrysophyllum caimito es un árbol tropical de la familia Sapotaceae, es originario de la
América Central y del Caribe. El fruto es de un sabor exquisito y se consume habitualmente como
fruta fresca, la decocción de la corteza es usada en caso de fiebre y como carminativo. Un estudio, de los componentes volátiles de los frutos, realizado en Cuba reportó como componentes
mayoritarios: (E)-2-hexenal, 1-hexanol, limoneno, linalool, α-copaeno y ácido hexanoico. En el
presente trabajo se estudia por primera vez, en Mérida-Venezuela, los componentes volátiles de
las hojas de esta especie; 600g fueron sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de
Clevenger, obteniéndose 0,016% de rendimiento. El aceite fue analizado por GC-MS en un equipo
HP 6980 acoplado a un HP 5973 espectrómetro de masas, equipado con una columna HP-5 (30 m,
0,25 mm, 0,25 μm). Se empleó una temperatura inicial de 60ºC (1 min) y luego se calentó a razón
de 4 °C/min hasta 260ºC (20 min). Se inyectó 1,0 μL de una solución al 2% del aceite esencial en nheptane con reparto de 100:1. Temperatura de inyección 200ºC. Los Índices de Kováts se determinaron en un cromatografía de Gases (CG) marca Perkin Elmer, modelo Autosystem. Se lograron
identificar 12 componentes, los cuales representan el 99,02%. Los Componentes mayoritarios
resultaron ser: 3-hexen-1-ol (26,4%), undecanal (6,1%), dodecanal (14,2%) y tridecanal (33,5%) y
ácido hexanoico (3,2%). Este último componente se encuentra presente en los frutos de la especie estudiada en Cuba y en las hojas de la estudiada por nosotros.
Referencias
1. Pino, J; Marbot, R.; Rosado, A. (2002). Volatile constituents of star apple (Chrysophyllum cainito L.) from Cuba.
Flavour and Fragrance Journal Vol 17(5), 401-403. ¬
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Estudio de la composición química del aceite esencial de
Achyrocline ramosissima (Schultz-Bip.) Britton ex Rusby
Diolimar Buitrago1, Antonio Morales1, Luis Rojas1, Pablo Meléndez2
1
2
Herbario MERF. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes
Apartado Postal 5101. Mérida-Venezuela
El género Achyrocline (Less) D.C., pertenece a la familia Asteraceae, subfamilia Asteroideae,
tribu Gnaphalieae. Sus especies se distribuyen desde el Sur de México hasta gran parte de Sur
América, sobre todo en los Andes. En Venezuela, se han localizado 10 especies representadas en
la región andina en alturas mayores de 800 m s.n.m. Como continuación de nuestras investigaciones sobre la flora venezolana, se decidió estudiar la composición química del aceite esencial de
Achyrocline ramosissima (Schultz-Bip.) Britton ex Rusby, hierba ramificada, erecta, de tallos
tenuemente blanco lanosos, hojas alternas sésiles y flores blancuzcas hasta amarillo. Esta especie
es usada en medicina tradicional para tratamiento de la tos. El material vegetal se recolectó en la
vía de los pueblos del Sur, Edo. Mérida-Venezuela y sus partes aéreas fueron sometidas a
hidrodestilación utilizando la Trampa de Clevenger. La separación de los componentes se realizó
en un Cromatógrafo de Gases Hewlett Packard HP 6890 acoplado a un Detector de Masa Hewlett
Packard modelo 5973 equipado con una columna HP-5MS de 30m 0.25mm. El programa utilizado
fue el siguiente: temperatura inicial 60 °C (1 min), luego se incrementó hasta 260 °C a razón de 4
°C/min (20 min). La identificación de sus componentes se efectúo mediante comparación computarizada con una librería Wiley MS Data. Se determinaron los índices de Kovats analizando conjuntamente la muestra con una mezcla de n-alcanos (C7-C22). El aceite esencial obtenido presentó
un rendimiento de 0,1%, identificándose como componentes mayoritarios: 1,2-(4a,8-dimetil2,3,4,4a,5,6,7,8-octahidro-2-naftalenil)-2-propanol (31.69%), β-cariofileno (8,61%), Guaiol (3.95%), βeudesmol (3,55%), selina-3,7(11)-dieno (2,99%). ¬
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3
Síntesis y caracterización de N´-[5-(4-nitrofenil)furan-2ilmetileno]-N,N-difenilhidrazona
Blanca M. Cabrera-Vivas1, Angel Mendoza2, Ruth Meléndrez-L1,
Teresa Pacheco-Álvarez1, J. M. Hernández-Pérez1, J. C. Ramírez G.1
2
1
Centro de Química. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, México
Las hidrazonas son compuestos nitrogenados con un doble enlace C-N el cual es formado por
la eliminación de una molécula de agua cuando reacciona una hidrazina con un compuesto
carbonílico1. En este trabajo se obtuvo un compuesto nuevo de fórmula C 23H17N3O3 cuando se
hizo reaccionar 5-(4-nitrofenil)furan-2-carbaldehido y N,N-difenilhidrazina adoptando una
configuración E. Fig. 1
Las difenilhidrazonas, debido a su estructura electrónica pueden ser utilizadas como agentes
transportadores de huecos en fotoconductores orgánicos en capa, que son empleados en
procesos electrográficos en impresoras y fotocopiadoras 1. En la industria como plastificantes,
estabilizadores de polímeros, antioxidantes e iniciadores de la polimerización 2-3. Las hidrazonas
hidroxiladas, presentan actividad biológica y se utilizan como herbicidas, insecticidas y estimulantes del crecimiento de plantas 4. En la industria farmacéutica, estos compuestos poseen una
amplia difusión para el tratamiento de la esquizofrenia, como antibióticos específicos contra
diversas otras enfermedades. Existe una intensa investigación de los complejos obtenidos con
metales como Pt, Cu, Pd, Mn, etc. y diversas hidrazonas para ser utilizados como agentes anticancerigenos5.
No obstante que hay una extensa variedad de compuestos con la función hidrazona, a la fecha
existen escasos estudios geométricos, los cuales pueden dar información sobre la actividad
industrial biológica y farmacológica que presentan este tipo de compuestos.
Fig. 1. Estructura de la hidrazona determinada por difracción de RX
Referencias
1. Kobotayeva, N. S.; Mikubayeva, E. V.; Svarovskaya, N. V.; Sirotkina, E. E.
Proceedings-KORUS 2001, the Korea-Russia International Symposium on Science and Technology, 5th, Tomsk, Russian
Federation, 2001,(2001),2,146-149.
2. G. K. Barlow, J. D. Boyle, N. A. Cooley, T. Ghaffar, D. F. Wass, Organometallics, 2000,19,1470-1476.
3. J. G. Knight, S. Dohherty, A. Hariman, E. G .Robins, M. Betham, G. R. Eastham, R. P. Tooze, M. R. J. Elsegood, P.
Champkin, W. Clegg, Organometallics, 2000,19,4957-4967.
4. Abel Ros, Elena Diez, Eugenia Marques-Lòpez, Eloisa Martìn-Zamora, Juan Vàzquez, Javier Iglesias-Siguenza, Rafael
R. Pappalardo, Eleuterio Alvarez, Josè M. Lassaletta, Rosario Fernàndez. Tetrahedron: Asymmetry 19(2008)9981004.
5. J. Higgin, L. Neoly, S. Fricker, J. Inorg. Biochem., 1993,49,149-156. ¬
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3
Actividad fungicida de maytenus urquiolae mory
Carlos Romeu Carballo1, Jorge Roberto Palacios1, Clara Nogueiras Lima2,
Alexander Fernández3
1
Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a B y 5a F, Playa, Ciudad de La Habana.
Cuba. CP 11600
[email protected]
2
Centro de Estudios de Productos Naturales, Universidad de La Habana. Facultad de Química. Calle Zapata s/n, entre
Mazón y G, Vedado, Plaza, CP 10400, Ciudad de La Habana, Cuba
[email protected]
3
Empresa Comercializadora de Pinar del Río. Carretera al central José Martí Km1
San Cristóbal, Pinar del Río
[email protected]
La familia Celastraceae incluye 98 géneros con aproximadamente 1264 especies. Dentro de esta
familia el género Maytenus tiene una larga historia de uso popular en la medicina y en la agricultura. La especie Maytenus urquiolae Mory es un árbol endémico de Cuba y poco estudiado, fue
localizado en 1993 en el municipio Mantua de la provincia Pinar del Río. En el presente trabajo se
evalúa la actividad fungicida in vitro de extractos obtenidos a partir de la corteza de la raíz y tallo
frente a los hongos fitopatógenos Fusarium oxisporum, Sclerotium rolfsii y Alternaria solani. El
extracto obtenido a partir de la corteza del tallo con la mezcla n-hexano: éter etílico (1:1) inhibió
el crecimiento miceliar de Sclerotium rolfsii en un 47,17% mientras que el extracto etanólico
obtenido a partir de la corteza de raíz inhibió el crecimiento miceliar de Alternaria solani en un
53,3%. ¬
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Evaluación de la actividad de propóleos cubanos sobre
Leishmania amazonensis y Trichomonas vaginalis
Monzote L.1, Sariego I.1, García M.1, Cuesta-Rubio O.2, Campo M.2, Márquez I.2,
Piccinelli A.3, Rastrelli L.3
2
1
Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”, Habana, Cuba
Instituto de Farmacia y Alimentos, Universidad de La Habana, Cuba
3
Universitá degli Studi di Salerno, Italia
Los productos naturales y sus derivados han constituido una fuente muy importante de agentes terapéuticos. En este trabajo se analiza por primera vez la actividad de 18 muestras de
propóleos cubanos, pertenecientes a tres tipos químicamente diferentes (1), sobre protozoos
usando Leishmania amazonensis como modelo intracelular y Trichomonas vaginalis como modelo
extracelular. Todas las muestras de propóleos causaron efecto inhibitorio sobre los amastigotes
intracelulares de L. amazonensis, pero se apreció citotoxicidad sobre macrofagos peritoneales de
ratones BALB/c. Solo 5 muestras disminuyeron la viabilidad de T. vaginalis a concentraciones
menores de 10 μg/mL. No se apreció correlación entre el tipo de propóleos y la actividad apreciada. Los propóleos cubanos mostraron actividad tanto sobre los modelos intraceluraes como
extracelulares.
Literatura
1. Cuesta-Rubio O.; Piccinelli A. L.; Campo Fernandez M.; Marquez Hernandez I.; Rosado A.; Rastrelli L. Chemical
characterization of Cuban propolis by HPLC-PDA, HPLC-MS, and NMR: the brown, red, and yellow Cuban varieties
of propolis. Journal of Agricultural and Food Chemistry 2007, 55, 7502-7509.
¬
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Estudio de la actividad antiviral para el virus de la hepatitis b
(HBV) en plantas medicinales de la Argentina
Gagey D.1, Retta D.2, Sülsen V.2, Muschietti L.2, Martino V.2, Campos R.1, Cavallaro L.1
1
2
Cátedra de Virología
Cátedra de Farmacognosia, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires
Buenos Aires, (1130) Argentina.
Introducción
El virus de las hepatitis B (HBV) infecta crónicamente a 400 millones de personas en el mundo y
más de 500.000 individuos mueren anualmente por cirrosis y carcinoma hepatocelular asociado a
HBV. Existen 5 análogos de nucleósidos y el interferón aprobados para el tratamiento de las
infecciones crónicas, sin embargo la resistencia asociada a tratamientos prolongados plantea la
necesidad de nuevos antivirales con distinto mecanismo de acción que puedan ser utilizados en
monoterapia o en forma combinada con los ya existentes.
El objetivo de este trabajo fue estudiar la actividad in vitro anti HBV de siete plantas medicinales Argentinas pertenecientes a la familia Asteraceae: Bidens subalternans, Eupatorium buniifolium, Baccharis gaudichaudiana, Pluchea sagittali, Ambrosia tenuifolia, Tagetes minuta y Tessaria
absinthioides.
Materiales y Métodos: Screening inicial
monocapas de células HepG2 2.2.15 (células que producen partículas de HBV infectivas) en
placas de 96 pocillos fueron tratadas durante 9 días con diferentes concentraciones de infusión
(I), extracto acuoso (EA) o extracto orgánico (EO) de cada una de las plantas, con cambios de
medio cada 3 días. El día 9 se cosecharon los sobrenadantes de cultivo y se determinó la citotoxicidad por el método de MTS/PMS. A concentraciones no citotóxicas en los sobrenadantes de
cultivo se determinó la producción viral mediante la detección de HBsAg por el método de ELISA.
Confirmación de la actividad antiviral
monocapas de células HepG2 2.2.15 en placas de 24 pocillos fueron tratadas durante 9 días,
cambiando el medio cada 3 días, con diluciones seriadas de EA de Tagetes minuta, a partir de la
concentración no citotóxica. En los sobrenantes correspondientes al día 9 post-tratamiento se
determinó la producción de HBV mediante cuantificación del DNA HBV por PCR en tiempo real y
de HBsAg por ELISA.
Resultados
Los extractos orgánicos presentaron mayor citototoxicidad que los extractos acuosos y las
infusiones. De las 7 plantas estudiadas sólo el EA y la I de T. minuta presentaron un efecto inhibitorio dosis dependiente sobre la producción del HBsAg.. Se obtuvo una reducción de 41,24 y
40,64% para 1 mg/mL , 23,07 y 21,84% para 500μg/mL, 16,08 y 19,03% para 250 μg/mL y 3,04 y 4,39%
para 125 μg/mL para el EA y la I, respectivamente. La determinación de los niveles de DNA HBV
por PCR en tiempo real no mostró diferencias en las células tratadas respecto de los controles sin
tratar. La determinación de HBsAg confirmó los valores de inhibición obtenidos en el screening.
Conclusiones
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Este trabajo representa la primera evaluación de plantas medicinales argentinas con el virus de
la hepatitis B. Los resultados obtenidos demuestran que en EA y la I de Tagetes minuta existen
una actividad inhibitoria de la producción de HBsAg. El fraccionamiento bioguiado de dichos
extractos permitirá aislar e identificar el/los compuestos potencialmente activos con el aumento
de la actividad antiviral específica. Se rá importante extender el estudio a otras especies del
género y con los compuestos activos determinar el mecanismo mediante el cual se ejerce la
inhibición. ¬
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Estudio de la actividad antipoliovirus de Eupatorium
buniifolium
Visintini Jaime M.F.1*, Sülsen V.2*, Campos R.H.1, Muschietti L.2**, Cavallaro L.1**
1
Cátedra de Virología, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires
Junin 956,1130, Buenos Aires, Argentina
2
Cátedra de Farmacognosia, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires
Junin 956,1130, Buenos Aires, Argentina
(*)
y (**) posiciones equivalentes
Eupatorium buniifolium H. et Arn. (Asteraceae) es un arbusto conocido vulgarmente como
“romerillo,” “romerillo colorado,” o “chilca” que crece principalmente en el norte y centro de la
Argentina, sur de Brasil y Bolivia, Paraguay y Uruguay. La decocción de las partes aéreas de esta
planta se utiliza, en forma tradicional, contra dolores reumáticos, en afecciones gastrointestinales y como desinfectante. En estudios previos hemos comprobado, en esta especie, la presencia
de flavonoides, derivados del ácido hidroxicinámico y diterpenos del tipo ent-labdanos (1,2) y
actividad antiviral contra el virus Herpes simplex (3).
El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad de E. buniifolium contra el virus de la poliomielitis humana tipo 2 (PV-2) y tipo 3 (PV-3).
Metodología
Preparación del extracto: el material vegetal seco y molido (500 g) se extrajo por maceración
con una mezcla de CH2Cl2:MeOH (1:1) (2 x 1000 ml) a temperatura ambiente durante 24 h. Se
combinaron los extractos orgánicos (EO) y se llevaron a sequedad en un evaporador rotatorio a
menos de 40°C.
Fraccionamiento guiado por bioensayo: aproximadamente 20 g de EO se fraccionaron por
cromatografía preparativa en columna utilizando Silicagel 60 como fase estacionaria y eluyendo
sucesivamente con hexano, hexano: EtOAc (1:1), EtOAc, EtOAc:MeOH (1:1) y MeOH. De este
fraccionamiento se obtuvieron 5 fracciones finales (F1-F5).
Ensayo de citotoxicidad: La evaluación de citotoxicidad en células Vero de EO y las fracciones
(F1-F5) se realizó mediante el método de MTS/PMS (Promega).
Ensayo de actividad antiviral: La actividad antiviral de EO y de las fracciones fue evaluada
frente a los virus PV-2 (cepa Sabin) y PV-3 (cepa Sabin) por los métodos de reducción del efecto
citopático viral (ECP) y por reducción de placas virales (UFP/ml) en células Vero.
Resultados: para EO se determinó una concentración citotóxica 50 (CC 50) de 78,6 ± 0,6 μg/ml y
respecto a la actividad antiviral se obtuvieron valores de concentración efectiva 50 (CE 50) de 14,25
± 0,50 μg/ml para PV-2 y de 4,75 ± 0,35 μg/ml para PV-3. De las 5 fracciones evaluadas, sólo F 2,
eluida con hexano: EtOAc (1:1), resultó activa frente a PV-2 y PV-3, con una CE 50 de 6,25 ± 0,30
μg/ml y 3,50 ± 0,40 μg/ml, respectivamente.
Se pudo demostrar que EO y F2 no ejercen actividad virucida sobre PV-2 a las concentraciones
de 10 X CE50 y 20 X CE50.
Con el objetivo de estudiar preliminarmente el tiempo de acción de la droga se evaluó el efecto
de EO en la etapa de adsorción y post-adsorción del PV-2 a las células Vero. Se demostró que la
presencia de EO durante la adsorción no interfiere el proceso, mientras que cuando EO se agrega
post-adsorción ejerce una inhibición del 92-96%, efecto similar al obtenido cuando EO está presente durante todo el ciclo viral.
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Conclusiones: de acuerdo a los resultados obtenidos se concluye que el extracto orgánico de E.
buniifolium contiene compuestos con actividad inhibitoria sobre la replicación de PV-2 y PV-3 y
que dicha actividad se ejercería en alguna de las etapas del ciclo viral que ocurren dentro de la
célula infectada. Se continúa con la identificación del/los compuestos activos, presentes en F 2, y
con el estudio detallado del mecanismo de acción antiviral.
Referencias
1. Muschietti L., Martino V., Ferraro G. y Coussio J., 1994. 5,7,5'-trihydroxy-3,6,2',4'-tetramethoxyflavone from
Eupatorium buniifolium. Phytochemistry, 36(4):1085-1086.
2. Muschietti L., 2002. Estudio de la Composición Química y Actividades Biológicas de Eupatorium buniifolium Hook et
Arn. Tesis de Doctorado. Cátedra de Farmacognosia, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos
Aires, Buenos Aires.
3. García G., Campos R., de Torres R., Broussalis A., Ferraro G., Martino V. y Coussio J., 1990. Antiherpetic activity of
some Argentine medicinal plants. Fitoterapia, 61(6):542-546. ¬
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Evaluación de la actividad antimicrobiana de los metabolitos
secundarios obtenidos por fermentación en medio sólido de
Penicillium roseopurpureum nativo del Páramo de Guasca,
Cundinamarca - Colombia
Garcia Andrea, Robles Jorge, Segura Lina
Departamento de Química, Pontifica Universidad Javeriana.
Los metabolitos secundarios, o compuestos naturales son sustancias que han reportado gran
cantidad de utilidades por su actividad biológica; debido a la amplia biodiversidad colombiana,
existe gran interés en la investigación de sustancias con actividad biológica de origen natural. La
cepa nativa del hongo Penicillium roseopurpureum aisladas de suelos paramunos en Guasca,
(Cundinamarca) ha sido objeto de estudios en los que se ha demostrado la producción de sustancias con actividad antimicrobiana por fermentación líquida en batch; numerosos estudios demuestran que para la producción de metabolitos bioactivos, el rendimiento de las fermentaciones, la
actividad biológica y la estabilidad de compuestos como antibióticos y alcaloides a incrementado
cuando se emplea fermentación sólida. Debido a esto, en el presente trabajo se propone detectar si los metabolitos de Penicillium roseopurpureum nativo del páramo de Guasca
(Cundinamarca) obtenidos por fermentación en medio sólido tienen actividad antimicrobiana.
Para esto, se realizó la selección de tres sustratos reportados en la bibliografía (arroz, avena y
cebada), suplementados con solución de microelementos y se desarrolló un trabajo preexperimental llevando a cabo fermentaciones de 100g durante 13 días; se realizó la extracción de
los metabolitos mediante el lavado de biomasa con Tween 80 al 0,1% (v/v) en agua destilada y
posterior extracción líquido- liquido en embudo de decantación de la solución de lavado obtenida, la biomasa seca fue extraída mediante soxleth con acetato de etilo y éter de petróleo como
solventes; el sustrato avena fue descartado con base en cantidad de pruebas antimicrobianas
positivas y la cantidad de extracto obtenido frente a los demás sustratos.
Las fracciones de de arroz-tween-éter, arroz-biomasa-acetato, y cebada-biomasadiclorometano tuvieron actividad inhibitoria sobre las cuatro especies de bacterias evaluadas, así
mismo, las fracciones Arroz-biomasa-éter y cebada-biomasa-acetato presentaron inhibición del
100% frente a F. oxysporum; estos resultados coinciden con lo obtenido en las pruebas preliminares donde el mayor número de resultados positivos contra bacterias se obtuvo con las fracciones
de la fermentación en arroz, así mismo, las cromatografías en capa fina de las fracciones obtenidas evidencian la producción de sustancias diferentes en los medios de cultivo evaluados. La
actividad antifúngica obtenida correspondió a una inhibición del 100% en una concentración de
7,1mg/mL de extracto obtenido a partir de 3 kg de medio.
Estas fracciones fueron corridas en cromatografía de gases y comparadas con base de datos,
donde se encontraron tres sustancias comunes en los extractos: Tetrametilpirazina, Pyrrolo [1,2α]pirazina-1,4-diona, y 1,3-butanodiol. Es posible que las pirazinas sean las moléculas responsables
de la actividad antimicrobiana, debido a que ya existen reportes al respecto. ¬
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Efecto del extracto acuoso de la raíz de Ruellia tuberosa sobre
las enzimas antioxidantes en ratas diabéticas
Maldonado A.M., Ciangherotti C., Silva J.A., Camacho E., Matos M.G., *Israel A.
Universidad Central de Venezuela, Facultad de Farmacia, Laboratorio de Neuropéptidos
Caracas - Venezuela
[email protected] *tutor
La Ruellia tuberosa es una especie perteneciente a la familia Acanthaceae cuyo extracto acuoso
de la raíz es utilizado popularmente por la población venezolana por su actividad antidiabética.
En el presente estudio se evaluará la acción de dicho extracto sobre los niveles de glucosa
sanguínea, las enzimas antioxidantes [catalasa (CAT) y superoxido dismutasa (SOD)] y el posible
efecto protector sobre daño glomerular renal (proteinuria) en la diabetes mellitus inducida in
vivo. Se emplearon ratas Sprague-Dawley de 230-250 g, a las cuales se les indujo diabetes experimental mediante la administración de estreptozotocina (70 mg/Kg, i.p.). Se monitorearon los
niveles de glucosa durante 5 días, hasta alcanzar ≥ 250 mg/dL. La mitad de los animales controles
y la mitad de los diabéticos fueron tratados durante 30 días con el extracto acuoso de raíz de
Ruellia tuberosa (10 mg/Kg, i..p.). Se recolectaron muestras de orina de 24 horas y se monitorearon los niveles de glucosa sanguínea, cada semana. Se sacrificaron los animales por decapitación
y se extrajeron los riñones para la determinación de la actividad de las enzimas antioxidantes
mediante espectrofotometría. Nuestros resultados demuestran que la diabetes inducida por
estreptozotocina produce proteinuria, la cual disminuye significativamente a partir de la tercera
semana de tratamiento con la Ruellia tuberosa. La diabetes experimental produjo una reducción
significativa de la actividad CAT y SOD comparada con los animales control y este efecto no fue
alterado por el tratamiento con el extracto acuoso de de raíz de Rubelia tuberosa. Aunque se
desconoce el mecanismo mediante el cual el extracto acuoso presenta actividad antidiabética y
nefroprotectora, los hallazgos anteriormente citados son considerados una introducción importante para futuras investigaciones en los que se considere este recurso etnobotánico como
posible tratamiento para la diabetes mellitus.
Palabras claves: Daño renal, Diábetes Mellitus, Ruellia tuberosa, microalbuminuria, estrés oxidativo. ¬
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3
Análisis Fitoquímico de la Xanthomendoza medozae y
Xanthoparmelia tasmanica
Elena A. Cóndor Cuyubamba1, María del Pilar Caramantín Soriano2
1
Universidad Nacional de Ingeniería, Lima, Perú
2
Universidad de Talca, Talca, Chile
El Perú es un país con diversos ecosistemas con una alta diversidad de líquenes, con muy pocos
estudios químicos, biológicos y fisicoquímicos a nivel de sus extractos y sus metabolitos.
No obstante a nivel mundial, se sabe de la utilización de los extractos para tratar algunas
enfermedades en medicina tradicional, entre las que se destacan las afecciones renales, respiratorias y estomacales. En cuanto a los metabolitos aislados sobresale la gran cantidad de compuestos tipo fenólico, los cuales presentan un gran número de actividades biológicas en especial la
antioxidante. Del mismo modo existen reportes de los usos a nivel industrial para la elaboración
de productos cosméticos.
En este trabajo se realizó el análisis fitoquímico (método Rodina & Coussio - 1969) de dos
líquenes procedentes del departamento de Junín, provincia de Jauja: Xanthomendoza medozae y
Xanthoparmelia tasmanica, en las cuales se determinó la presencia de: Aminogrupos primarios y/o
secundarios, triterpenos y esteroides. Además, quinonas, antronas y antranoles para el caso de la
Xanthomendoza medozae y grupos fenólicos, leucoantocinidinas, catequinas y alcaloides para el
caso de la Xanthoparmelia tasmanica. ¬
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3
Catálogo y estudio farmacognóstico de plantas medicinales
del distrito de Llacanora, provincia de Cajamarca,
departamento de Cajamarca - Perú
Jurado Teixeira Bertha, Condori Peñaloza Evelyn Maribel,
Castañeda Valencia Gloria Maria
El distrito de Llacanora, de la provincia de Cajamarca es un distrito turístico, poseedor de un
valle fértil y paisajes pintorescos. Recurren en gran número a la medicina tradicional para la cura
de sus males, por ello el consumo de plantas medicinales es amplio y muy variado para las diferentes enfermedades. No existe documentación científica que recopile y revalore el uso, lo que
podría perderse con el paso de los años. La forma de transmisión del conocimiento es netamente
oral, pudiéndose perder en el tiempo, lo que sería perjudicial por poseer especies potenciales en
su mayoría para la búsqueda de nuevas terapias y fármacos.
Es por ese motivo que hemos decidido realizar el presente trabajo la cual consistió en recolectar las plantas medicinales y seleccionar aquellas de mayor uso y realizar los estudios
farmacognósticos preliminares respectivos, cortes histológicos de la(s) droga(s); así mismo la
realización de un catálogo en donde se plasmó todo el saber tradicional del Distrito de Llacanora.
Todo ello con el fin de obtener datos de campo y de laboratorio que servirán para posteriores
estudios que validen los usos tradicionales atribuidos en la comunidad.
Fueron realizadas 58 entrevistas semi-estructuradas dirigidas a la Curandera del lugar y reconocida por la comunidad. Fueron colectadas, herborizadas y clasificadas taxonómicamente 53
plantas. Las especies fueron colectadas en los viajes al interior del lugar, guiadas por la Curandera
y miembros de su familia, del mismo modo algunas especies fueron proporcionadas por
lugareños, sobre todo aquellas que se encontraban en zonas muy alejadas y de difícil acceso. Las
familias botánicas más citadas fueron Asteraceae, Fabaceae, Lamiaceae y Solanaceae. Los metabolitos más representativos fueron los compuestos fenólicos, triterpenoides y esteroides,
alcaloides y saponinas. Los cortes histológicos fueron realizados a la parte de la planta que es
utilizada para las preparaciones medicinales (droga), siendo en su mayoría las hojas. ¬
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3
Los efectos antiespasmódicos de Aloysia polystachya y Aloysia
gratissima se potencian en las tinturas y son debidos a
antagonismo no-competitivo de acetilcolina y calcio
Andrea Berardi1,2, M.G. Volonté1, Alicia E. Consolini1,2
2
Cátedra de Farmacología, 1Magister en Plantas Medicinales
Depto de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata
La Plata Argentina
[email protected]
Varias plantas del género Aloysia (Verbenaceae) son utilizadas como eupépticas en
Sudamérica. Sin embargo, el mecanismo farmacológico es conocido hasta el momento sólo para
A. citriodora (Ragone et al. 2007). En este trabajo, evaluamos los efectos of A. polystachya y A.
gratíssima, respectivamente conocidos como “burrito” y “palo amarillo” sobre la contractilidad
de intestino de rata “in vitro”. Muestras comerciales de las hojas de cada especie de Aloysia se
prepararon como extracto acuoso (Ea) por decocción y se liofilizaron (rendimiento: 11%). Además,
se prepararon las respectivas tinturas (T) por maceración al 20% en etanol de 70º, las cuales
fueron diluidas o concentradas para el test, expresando las concentraciones en mg hojas/ml. Se
aislaron trozos de duodeno de rata que se colocaron en cubas con solución Tyrode (Ca” 1.8 mM,
pH 8.2) a 37ºC burbujeadas con aire. Se midió la fuerza contráctil con transductores isométricos
WPI, con adquisición de datos A/D en programa Eagle. Se realizaron curvas dosis-respuesta (CDR)
de acetilcolina (Ach) y de Cl2Ca en medio de 80 mM K, antes y después del agregado de los Ea o T.
Los Ea de A. polystachya inhibieron no-competitivamente las curvas dosis-respuesta de acetilcolina (CDR-Ach) hasta un 40% del efecto máximo (E max) con una concentración inhibitoria al 50%
(CI50) de 1.80±0.27 mg liof./ml (n=9). El Ea de A. gratissima también inhibió la CDR-Ach pero sólo
hasta un 70% E max con CI25% de 0.28±0.08 mg liof./ml (n=12). Las T también inhibieron nocompetitivamente las CDR-Ach hasta un 30-40% con una IC50 de 3.14±0.58 mg/ml (n=8) para TA .polystachya y 6.46±2.28 mg/ml (n=7) para T-A. gratissima. En HPLC con columna RP-18, fase
móvil 2-propanol:THF:agua (5:15:85) pH 4.85, los Ea no muestran picos de vitexina ni isovitexina
corridos como referencia.
Para evaluar el mecanismo de la interferencia con la CDR-Ach, se estudió: a) el efecto sobre las
contracturas tónicas inducidas por Tyr-K+ 80 mM: Ea-A.gratissima relajó de modo concentracióndependiente, pero Ea-A. polystachya no tuvo efecto, mientras ambas T relajaron la contractura
tónica; b) el efecto sobre CDR de Ca2+: mientras el Ea-A. polystachya apenas inhibió la CDR-Ca2+ la
T-A. polystachya la inhibió no-competitivamente hasta un 30% Emax con una CI50 de 17.9± 0.8 μg/ml
(n=4). Similarmente, la T-A.gratissima inhibió no-competitivamente la CDR-Ca 2+ hasta un 20%
Emax con una CI50 de 9.28±1.43 μg/ml (n=8).
Conclusiones:
1) los Ea de ambas Aloysia son antiespasmódicos intestinales debido a que interfieren con la
contracción colinérgica mediante bloqueo no-competitivo del influjo de calcio a la célula.
2) este efecto es mayor en las tinturas (T) que en los Ea, por lo que la maceración en etanol 70º
debe extraer y enriquecerse en los principios activos responsables del efecto, tales como compuestos propios de la esencia.
3) la potencia antiespasmódica de los Ea de estas dos especies de Aloysia es comparable a la
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de A. citriodora (“cedrón”, CI50 1.34 mg liof/ml), pero a diferencia de éste, A. polystachya y A.
gratissima no poseen vitexina, por lo que su actividad se debería a otros compuestos.
Referencias
Ragone y col. J. Ethopharmacol. 113: 258-266, 2007
Agradecimientos
subsidio X-513, UNLP (2009-2012). ¬
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3
Transmissão vertical do vírus da imunodeficiência humana
(HIV)
Geysa Aguiar Romeu1, Ana Kellen Mota da Costa1, Anna Cristina Matos Rolim2,
Djamile Cordeiro de Matos3, Vânia Cordeiro de Matos1,
Arlândia Cristina Lima Nobre Moraes1, Liduína de Fátima Pinheiro Barreto4
1
Universidade de Fortaleza e Hospital Distrital Gonzaga Mota Messejana - Fortaleza - Ceará - Brasil
2
Hospital “Peninsula Regional Medical Center” -Salisbury, MD, USA
3
FCFar-UNESP: R. Expedicionários do Brasil, 1621, CEP 14801-902, Araraquara, São Paulo, Brasil
4
Hospital Distrital Gonzaga Mota Messejana - Fortaleza - Ceará - Brasil
Os padrões de disseminação da infecção pelo HIV mudaram devido ao predomínio da forma de
transmissão heterossexual, sendo decisivos para o aumento da incidência de casos de Aids em
mulheres e, em conseqüência, o aumento da transmissão vertical da infecção pelo HIV. Este
trabalho tem como objetivo relacionar as estratégias de prevenção da transmissão vertical com a
sorologia para HIV dos neonatos atendidos em um hospital público da rede municipal de
Fortaleza, no estado do Ceará, Brasil. O estudo do tipo quantitativo, documental, prospectivo foi
realizado no período de março de 2008 a junho de 2009. Analisaram-se 87 prontuários de recém
nascidos de mães portadoras de HIV sendo que 12 (13,8%) foram excluídos devido a informações
incompletas. O perfil materno encontrado foi de mulheres solteiras, com uma idade média de
27,2 anos, de cor branca ou parda, com ensino fundamental ou médio e desempregadas. Em
relação às estratégias utilizadas para prevenção da transmissão vertical, 50 (66,7%) gestantes
realizaram o teste anti-HIV; 52 (69,3%) usaram antiretrovirais durante o pré-natal; 56 (74,7%)
realizaram um parto cesáreo programado; 53 (70,7%) usaram AZT injetável no parto e 68 (90,7%)
suspenderam o aleitamento materno. O AZT solução oral foi utilizado por 70 (93,3%) neonatos.
Verificou-se que 3 (4,0%) recém nascidos tiveram o diagnóstico final de infecção pelo HIV. Desses,
duas gestantes realizaram todas as estratégias para a prevenção da transmissão vertical e uma
não realizou nenhuma das estratégias. Conclui-se, portanto, que há necessidade de melhoria no
atendimento no pré-natal e as gestantes precisam ser mais bem orientadas a respeito da
prevenção da transmissão vertical. ¬
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3
Efeito de β-D-galactose sobre a citotoxicidade e produção de
mediadores imunológicos por abrina e pulchelina em
macrófagos e esplenócitos murinos
Djamile Cordeiro de Matos1, Lívia Carolina de Abreu Ribeiro1, Lucas Souza Ferreira1,
Marisa Campos Polesi1, Iracilda Zeppone Carlos1
1
FCFar-UNESP: R. Expedicionários do Brasil, 1621, CEP 14801-902, Araraquara, São Paulo, Brazil
Introdução
A partir das sementes das espécies sub-arbustivas brasileiras Abrus precatorius (jequiriti) e
Abrus pulchellus subsp. tenuiflorus (pertencentes à família Papilionoideae, tribo Abrae e ao
gênero Abrus), obtêm-se abrina (A. precatorius) e pulchelina (A. pulchellus). A abrina e pulchelina
são proteínas inativadoras de ribossomos (RIPs) tipo II que possuem afinidade por β-D-galactose,
carboidrato presente na superfície de muitas células eucarióticas; esta característica atribui às
RIPs a capacidade de se ligar a glicoproteínas e glicolipídeos presentes na superfície das células,
sendo então internalizadas por diferentes mecanismos. O sistema imune é uma complexa rede
de células e mediadores altamente efetiva e dinâmica que protege o hospedeiro de patógenos. A
resposta imune inata atua através de macrófagos, células apresentadoras de antígenos (APCs)
derivadas da medula óssea que podem apresentar antígenos e expressar moléculas coestimuladoras. Uma vez ativados, liberam espécies reativas de oxigênio e nitrogênio (como o
óxido nítrico - NO) e citocinas. O NO apresenta diversas atividades, dentre elas antibacteriana,
antiparasitária e antiviral.
Métodos
Fêmeas Balb/c foram sacrificadas em câmara de CO 2 e foram obtidos macrófagos peritoneais.
Os macrófagos foram cultivados em presença de abrina ou pulchelina acrescido ou não de β-Dgalactose em meio RPMI acrescido de antibióticos e soro fetal. Foram utilizados LPS e somente
RPMI como controles positivo e negativo respectivamente (dados não mostrados). Realizou-se
teste de citotoxicidade por MTT nesta cultura de macrófagos peritoneais após 24 horas em
presença dos estímulos citados acima, e foi determinada a produção de óxido nítrico em sobrenadante desta cultura através da utilização de reagente de Griess. Não foi observado um efeito
inibidor de β-D-galactose sobre a citotoxicidade de abrina e pulchelina em cultura de macrófagos
peritoneais: a viabilidade celular de macrófagos expostos a 2,5 pg/mL de abrina ou de pulchelina
foi de aproximadamente 97% em ambas as situações (p>0,05), e quando acrescido de β-Dgalactose, a viabilidade em macrófagos foi 98% e 91%, respectivamente (p>0,05). Contudo
observou-se uma significante diminuição da produção de óxido nítrico quando os macrófagos
foram cultivados em presença de abrina ou pulchelina, simultaneamente a β-D-galactose. Abrina,
na ausência de β-D-galactose, estimulou a produção de 50,52 μmol/mL, e na presença de β-Dgalactose estimulou 8,61 μmol/mL (p<0,001); enquanto pulchelina estimulou 34,47 μmol/mL, e na
presença de β-D-galactose estimulou 0,23 μmol/mL (p<0,001).
Conclusão
A presença de galactose não interfere nos mecanismo de toxicidade de abrina e pulchelina,
mas interfere na capacidade das RIPs de modularem o sistema imune.
Os autores são gratos à Fundação de amparo à pesquisa do Estado de São Paulo - FAPESP pelo apoio financeiro. ¬
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3
Efecto de la viabilidad celular de kaurenos sobre células
mononucleares humanas de sangre periférica (CMSP)
Alfredo Usubillaga1, Indra Cordero1, Grecia M. Corao2, José Ángel Cova3
1
2
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Mérida
Grupo de Investigación en Cultivos Celulares, Laboratorio de Bioquímica de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis.
Universidad de Los Andes. Mérida
3
Instituto de Inmunología Clínica de la Universidad de los Andes. Mérida, Venezuela
Los kaurenos son conocidos como agentes con variada actividad farmacológica. Con el fin de
realizar estudios futuros de actividad antitumoral, se exploró la posible actividad citotóxica sobre
células mononucleares humanas de sangre periférica (CMSP), separadas por la técnica de FicollHypaque, ajustadas a 2 x 106 cel/mL e incubadas con los kaurenos en estudio a las concentraciones de 3x10-5, 30 x10-5, 300 x10-5, 3000 x10-5 μmol/pozo por 48 horas. De un total de diez derivados
ent-kaurénicos examinados el ácido 15,16-epoxi-17-acetoxi-kaur-19-oico resultó ser el menos
tóxico de todos los kaurenos estudiados con una viabilidad celular de 99 y 94% a las concentraciones de 3x10 -5 , 30 x10 -5 μmol/pozo respectivamente. El éster 2,3,4,6-tetra-O-acetil-β-Dglucopiranosil del ácido 15-oxo-kaurénico mostró baja toxicidad a todas las concentraciones
estudiadas (44% de viabilidad a la concentración más alta). Por otra parte el ácido kaurénico no
presentó efecto citotóxico a ninguna concentración. Entre los kaurenos más tóxicos a todas las
concentraciones se encuentran el acetato de kaurenol y el acido 16α-hidroxi-kauránico, mientras
que el acido grandiflorénico, el acido kauránico y el kaurenol fueron tóxicos solamente a la más
alta concentración estudiada. Los ácidos 15α-hidroxi-kaurénico y 15α-acetoxi kaurénico y
kauránico fueron tóxicos solo a concentraciones altas. La más alta toxicidad la exhibió el kaurenol 2,62% de viabilidad a 3000 x10-5 μmol/pozo. De acuerdo a estos los resultados, el acido kaurénico, el acido 15,16-epoxi-17-acetoxi-kaur-19 oico, podrían ser empleados con fines de estudios
farmacológicos in vitro y a futuro con fines terapéuticos en humanos, sin riesgo tóxico, tomando
en consideración las concentraciones a ser utilizadas. ¬
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Aspectos fitoquimicos y biologicos de fracciones de extractos
polares de Chiliotrichum diffusum (asteraceae)
Alcalde S.M.1, Taira C.A.2, Cordoba O.L.3, Flores M.L.4
1
Farmacología I
Química Biológica II
4
Farmacognosia
CRIDECIT - FCN - UNPSJB, Km 4, 9000, Comodoro Rivadavia, Chubut. 2Farmacología, FFyB-UBA
Junín 956, Buenos Aires. Argentina.
1
[email protected]
2
catira@ffyb.uba.ar
3
[email protected]
4
[email protected]
3
Chiliotrichum diffusum, “mata negra”, es una especie arbustiva que habita áreas conocidas
como humedales, en el Suroeste de la Patagonia Argentina. Sus hojas y flores han sido utilizadas
por la comunidad indígena “Onas” en la provincia de Tierra del Fuego de este país, en rituales y
en medicina tradicional1.
Nuestros estudios efectuados sobre ejemplares colectados durante el período estival en la
localidad de 28 de Noviembre (Santa Cruz, Argentina), secados a temperatura ambiente al abrigo
de la luz, molidos y tamizados, demostraron que, al igual que otras especies de las Asteraceae, C.
diffusum biosintetiza sustancias fenólicas de estructuras variables 2,3. Estas sustancias además de
ser marcadores quimiotaxonómicos, evidencian propiedades biológicas importantes tales como
actividad antioxidante y antitumoral. A su vez la actividad antioxidante guarda relación con otras
propiedades farmacológicas como antiinflamatoria y protectora frente a problemas cardiovasculares.
Para este trabajo se realizó la evaluación fitoquímica de dos fracciones obtenidas por partición
con diclorometano a partir de extractos polares: DM-PA (diclorometano de partes aéreas totales
PA) y DM-DF (diclorometano del decocto de flores DF), con el fin de determinar los flavonoides
biosintetizados. En cuanto a las propiedades biológicas, se analizó la actividad antioxidante,
determinando el porcentaje de inhibición del DPPH (2,2`-difenil-1-picril hidrazilo) y posteriormente, cuantificando dicha actividad.
Los perfiles cromatográficos de ambas fracciones evidenciaron la posible presencia de apigenina; DM-PA mostró además luteína y tricetina, mientras que DM-DF, miricetina. El análisis de los
espectros corroboró la presencia de apigenina, pero además evidenció gosypina, herbacetina 8CH3-éter, morina, isoramnetina y quercetina en DM-PA.
Los resultados de la actividad antioxidante fueron muy importantes. El porcentaje de inhibición
del DPPH con la fracción DM-PA, fue de 92,67% y con DM-DF, de 69,07%. Teniendo en cuenta
estos porcentajes, se determinó la SC 50 en ambos casos, resultando para DM-PA, una SC 50= 5,18
μg/ml y para DM-DF, 35 μg/ml.
Los flavonoides son considerados uno de los grupos de metabolitos secundarios más prometedores en la búsqueda de antioxidantes naturales. Sustancias puras tales como quercetina,
quercitrina, apigenina, han evidenciado una importante actividad frente a radicales libres, por lo
que la presencia de ellas en extractos de plantas de la medicina tradicional podría guardar
relación directa con los usos etnomédicos descriptos.
En conclusión, los flavonoides caracterizados en las fracciones de mediana polaridad procedentes de extractos polares de las partes áreas totales y del decocto de flores de Chiliotrichum
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diffusum, se relacionan con la actividad antioxidante determinada. Los resultados obtenidos
constituyen un nuevo aporte al conocimiento integral de la flora de la región patagónica de
Argentina.
Referencias
1. Vera, J.C. Anales del Instituto de la Patagonia, Universidad de Magallanes, Chile, Serie Ciencias Humanas 22: 155-68,
1993-1994.
2. Alcalde, Sandra M.; Susana B. Gorzalczany; María L. Flores; Osvaldo L. Córdoba; Christian Höcht & Carlos A. Taira.
Bol. Latinoam. Caribe Plant. Med. Aromaticas, 6 (6): 315-16, 2007.
3. Alcalde, Sandra M., Carlos A. Taira, Christian Höcht, Osvaldo L. Córdoba & María L. Flores. Lat. Am. J. Pharm., 29 (2):
284-8, 2010. ¬
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3
Estudio integral fitoquímico y biofarmacológico preliminar de
especies de Ulva (Ulvaceae - Chlorophyta) de las costas del
Golfo San Jorge
Uhrich A.V.1, Flores M.L.2, Córdoba O.L.3
1
Farmacología II
Química Biológica II
3
Farmacognosia
Facultad de Ciencias Naturales - CRIDECIT - Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco
km 4, 9000, Comodoro Rivadavia, Chubut - Argentina
[email protected]
2
Las costas patagónicas de la República Argentina presentan una gran biodiversidad,
destacándose las algas marinas. El Golfo San Jorge posee características particulares dada su
ubicación geográfica, mostrando zonas con impacto antrópico. Existen escasos estudios integrales que comprendan análisis químicos, biofarmacológicos y su relación con los aspectos
ecológicos de especies de algas verdes de ésta región.
El género Ulva, perteneciente a las Chlorophyta (algas verdes), ha sido descripto en la medicina
tradicional china para el tratamiento de la gota, para reducir la fiebre y el dolor y como diurético;
también para el tratamiento de la hiperlipidemia, insolación y enfermedades urinarias. Tales
propiedades motivaron el estudio de especies de nuestra región.
Las especies de Ulva se colectaron en dos plataformas de abrasión del Golfo San Jorge: Punta
Borja (45º 52' S, 67º 28' W), playa con fuerte contaminación antrópica y Punta Maqueda (46º 01' S,
67º 35' W), libre de contaminación antrópica.
Las especies determinadas mediante clasificación sistemática fueron Ulva rigida y Ulva lactuca
en ambas plataformas de abrasión y en todas las estaciones del año.
Los ejemplares de cada especie fueron secados a temperatura ambiente, bajo techo y al abrigo
de la luz del sol. Posteriormente se molieron en un molino de paletas con tamiz de malla 20 y se
extrajeron con etanol de 96ºC a 65ºC. Los extractos se fraccionaron mediante tratamiento en
medio ácido y calor, cambios de pH y partición con solventes de distinta polaridad. Los lípidos se
extrajeron con CHCl3-MeOH (2:1) y los pigmentos con acetona. Las fracciones fueron analizadas
cualitativamente para la identificación de grupos químicos. Además se determinaron los perfiles
cromatográficos para los principales grupos detectados.
Los estudios de actividad biológica comprendieron: 1) actividad antioxidante mediante el
método de inhibición del DPPH; 2) actividad inhibitoria del desarrollo radicular de semillas de
trigo, utilizando vinblastina como patrón positivo.
Todas las especies analizadas evidenciaron un patrón metabólico complejo, destacándose
derivados fenólicos, lípidos, hidratos de carbono y esteroides. Algunas mostraron además
sustancias nitrogenadas.
El analisis cromatográfico de flavonoides sugirió la posible presencia del biflavonoide kayaflavona en todas las muestras analizadas. Este hecho resulta muy interesante ya que no se ha
descripto la presencia de biflavonoides en algas marinas. Solo existe escasa información que
describe algunos flavonoides en las algas.
La actividad antioxidante fue moderada, mientras que la inhibición del desarrollo radicular
sugiere una posible actividad antitumoral importante y de tipo dosis dependientes.
Los resultados descriptos demuestran variaciones estacionales y entre especies de tipo
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química (para fenoles y lípidos) y de la capacidad inhibitoria sobre el desarrollo radicular. Se
continúa en la purificación de los constituyentes principales y la búsqueda de una posible
aplicación de los mismos en Salud. ¬
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3
Modo de vida: economia familiar y salud
Reinaldo Corrêa Costa
Laboratório de Estudos Sociais/LAES, Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia/ INPA, Av. André Araújo, 2936,
69060-001, Manaus, AM, Brasil
[email protected]
Algunas son las dimensiones del modo de vida, entre ellas están la economía familiar y la salud.
Como modo de vida, entendemos: lo que se produce, como se produce y para que se produce.
Modo de vida y etnociéncia se entre cruzan en la forma de un saber práctico y concreto del
cuotidiano (historia en movimiento) para resolver problemas y desafíos creados en los lugares
donde las personas viven y circulan, son estrategias de reproducción de los modos de vida. Eso
incluye elementos vividos por los grupos sociales con el mercado, la salud y su propia cultura.
Estudios hechos en el Estado del Amazonas (Apuí y Manaus) y en el Estado de Pará (Altamira y
Vitória do Xingu) muestran que la sóciodiversidad utiliza la biodiversidad cuotidianamente con
fines directos e indirectos en la salud y en la economía familiar, con el intuito de mantener los
miembros de la familia sanos para el trabajo que sustenta la propia familia. Con base en el entendimiento de como los territorios son formados en el circuito productivo de la vida, renta familiar
y sus estructuras de reproducción social tenemos la unidad territorial de trabajo familiar (UTTF),
sea en la forma de propiedad, lote, gleba, pose entre otras; el espacio productivo y de
preservación (una reserva de floresta para uso de la familia); los tipos de trabajo y cultivo y; los
espacios heredados de la naturaleza. Para el entendimiento de las UTTF es necesario conocer la
relación entre sociedad y naturaleza, y como las actividades de los modos de vida utilizadas en
los circuitos y escalas de mercado de la producción familiar campesina se interrelacionan, pues
venden y compran productos que circulan en diferentes esferas sociales y económicas (base
local, regional y mundial). El entendimiento de la realidad social y económica del modo de vida
identifica los principales procesos de trabajo de los sistemas productivos, los centrales y periféricos, así como los puntos fuertes y flacos de cada uno, y con eso tenemos la dimensión (social,
familiar, económica y ecológica) de las formas de uso y manoseo de la naturaleza biodiversa en el
contexto del modo de vida con uso de plantas medicinales en el sistema productivo. Las plantas
medicinales son elementos de mayor valor cultural para el tratamiento de enfermedades y es
dominante en relación a los alopáticos; las enfermedades son combatidas, generalmente, con
más de una planta y en la mayoría en forma de tés; las familias de plantas más utilizadas son:
Fabaceae, Rubiaceae, Asteraceae y Piperaceae; malaria, diarrea, y enfermedades del sistema
respiratorio (gripe, neumonía, tuberculosis...) son las que más ocurren. Generalizando hay un
conflicto por el conocimiento, entendido como: a) herencia para toda la humanidad, para el bien
de todos y que no puede ser monopolizada y; b) que debe ser protegido como conocimiento
propio de cada pueblo que lo creó y lo utiliza, una propiedad cultural.
Patentes/Propiedad
Conocimiento Tradicional
Industrias Farmacéuticas
153
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Las sociedades campesinas utilizan la biodiversidad cuotidianamente en sus modos de vida, en
sus existenciales culturales y usos económicos y se territorializaron en sus paisajes propios y
característicos. Así, tener condiciones reales de reproducción de los modos de vida es el instrumento político, económico y cultural para conservar y proteger los sistemas naturales de producir biodiversidad para la sóciodiversidad.
Palabras-clave: Modo de vida, naturaleza, campesinos;
Agradecimientos
CT-Agro/CNPq/MCT, PPBio/INPA/CNPq/MCT. ¬
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3
Etnoconocimiento y mercado de bioproductos en manaus/am
Reinaldo Corrêa Costa
Laboratório de Estudos Sociais/LAES, Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia/ INPA
Av. André Araújo, 2936, 69060-001, Manaus, AM, Brasil
[email protected]
El campesino es la base del conocimiento y de la materia-prima de la cadena productiva de los
denominados bioproductos. A partir de la producción campesina relacionada al mercado de
bioproductos (cosméticos y fitoterápicos) en Manaus-AM, formanse las conexiones que resultan
en una espacialidad campo-ciudad. A cada etapa del proceso de producción, surgen agentes
económicos, conectados por la materia-prima que también agrega valores a la mercadería con
Ciencia y Tecnología (C&T) y también incluye el etnoconocimiento.
El mercado de los bioproductos en Manaus-AM está en crecimiento. Entre los bioproductos
más comercializados en la ciudad están los fitoterápicos y fitocosméticos. Muchas de las
materias-primas transformadas (extractos, aceites esenciales y vegetales) necesarios para la
producción de tales productos son hechos fuera del Amazonas, pues no hay una infra-estructura
industrial en el Estado que proporcione la producción de los semi-elaborados y por eso la
materia-prima bruta es exportada y retorna como semi-elaborada, base de la industria de bioprodutos. Con el crecimiento de este mercado, es necesario el desenvolvimiento y la diseminación
de nuevas técnicas/tecnologías, principalmente para la extracción de aceites vegetales y aceites
esenciales, las materias-primas que los empresarios consideran como el mayor costo para la
producción, eso ocurre debido a las pocas industrias en Manaus que realizan tal extracción.
Hay facilidades para obtener materia-prima in natura en el Amazonas, por causa de la floresta
biodiversa amazónica y de la fuerza de trabajo campesina existente, pero hay poca o baja cantidad de capital investido objetivamente en la actividad, la tríade tierra (floresta biodiversa),
trabajo (campesino) y capital (industrias) en cada uno de sus elementos posee densidades
desiguales actuando más sobre la floresta y, principalmente, en el trabajo campesino. El proceso
de extracción de la renda de la tierra y dar más-valía, en ese caso ocurre por la intensidad de
tecnologías utilizadas, que agregan un plus a la mercadería que no llega al campesino. Al salir del
trabajo familiar campesino el producto se torna una mercadería poseedora de un valor de cambio, y de un precio que dinamiza la circulación (desigual y territorial) del dinero en el espacio.
Conforme uno de los entrevistados, el facto de muchos arriesgárense en este mercado deriva
de una noción de que es simple producir bioproductos, pues creen ser necesaria apenas la
materia-prima, la tecnología y la fuerza de trabajo. Desconocen que entre otras cosas es importante que las empresas de bioproductos sean evaluadas y certificadas por la ANVISA (Agencia
Nacional de Vigilancia Sanitaria), que afirma, en los casos de los medicamentos fitoterápicos, que
“la eficacia y la seguridad deben ser validadas a través de levantamientos
etnofarmacológicos, documentaciones tecnocientíficas en bibliografía e/ou
publicaciones indexadas y/o estudios farmacológicos y toxicológicos pre-clínicos y
clínicos”.
(Medicamentos Fitoterápicos, ANVISA)
Palabras-clave: campesinos, materia-prima, bioproductos, etnoconocimiento
Agradecimientos
CT-Agro/CNPq/MCT, PPBio/INPA/CNPq/MCT ¬
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3
Sintesis verde de nuevas ferrocendicarboxamidas quirales
Sandra Cruz Cruz1, Ulises A. Peña Rosas2, Guadalupe Hernández Téllez2,
Alejandro Ruiz Tagle3, René Gutiérrez Pérez2
1
Depto. de Ingeniería Química, Universidad Politécnica de Tlaxcala,
Av. Universidad Politécnica de Tlaxcala No.1, San Pedro Xalcatzinco, Tepeyanco, Tlax., México.
2
Lab. Síntesis de Complejos, Fac. Ciencias Químicas, Universidad Autónoma de Puebla,
A. P. 1067, C. P. 72001, Puebla, Pue., México.
3
Depto. de Microbiología, Fac. Ciencias Químicas,
Universidad Autónoma de Puebla, Ciudad Universitaria, Puebla, Pue., México.
El ferroceno y sus derivados tienen numerosas aplicaciones en química biológica, ciencia de
materiales, catálisis asimétrica, etc. Por sí solo ha sido usado como citotóxico y agente antianémico y, por otra parte, sus derivados han mostrado actividad anticancerígena y como antimaláricos.
Este trabajo reporta la síntesis de nuevas ferrocendicarboxamidas quirales utilizando la
química verde y, en particular, la técnica en medio seco, mediante 2 reacciones consecutivas a
partir del ácido ferrocendicarboxílico, con cloruro de tionilo para formar el dihalogenuro de ácido
[Ecuación 1] y posteriormente se agregan las aminas primarias ópticamente puras (R) y (S)-(+)-1feniletilamina (a), (R) y (S)-(-)-1-(4-metilfenil)etilamina (b), (R) y (S)-(-)-(1-naftil)etilamina (c), (R) y
(S)-(+)-1-ciclohexiletilamina (d), (1S, 2S, 3S, 5R)-(+)-isopinocanfeilamina (e) y (-)-cis-mirtanilamina
(f), para obtener la correspondiente dicarboxamida [Ecuación 2].
Ecuación 1. Síntesis del halogenuro de ácido
Ecuación 2. Síntesis de las amidas N, N´ disustituídas quirales.
La estructura de los compuestos se estableció por resonancia magnética nuclear de 1H y 13C,
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espectroscopía infrarroja y espectrometría de masas. Los compuestos sintetizados han mostrado
actividad antimicrobiana probada contra levaduras de los géneros Sacharomyces y Candida, de
acuerdo con las recomendaciones del CLSI estadounidense (Clinical and Laboratory Standards
Institute). ¬
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3
Propriedades antiinflamatórias de extratos obtidos a partir de
Qualea multiflora (Vochysiaceae) sobre a imunidade inata
Camila Bernardes de Andrade Carli1, Ana Lúcia Martiniano Nasser2, Marcela Bassi1,
Wagner Vilegas2, Iracilda Zeppone Carlos1
1
Departamento de Análises Clínicas, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade Estadual Paulista,
Caixa Postal 502, 14801-902, Araraquara, SP, Brasil,
2
Departamento de Química Orgânica, Instituto de Química, Universidade Estadual Paulista,
Caixa Postal 355, 14801-970, Araraquara, SP, Brasil
O gênero Qualea é encontrado no cerrado brasileiro e é utilizado empiricamente pela
população contra ulceras e inflamações. No entanto poucos estudos sobre sua toxicidade e
atividade farmacológica têm sido realizados. Com o objetivo de contribuir para o conhecimento
científico dos efeitos biológicos de Qualea multiflora, foram realizados ensaios para determinação
da citotoxicidade e atividade antiinflamatória dos extratos metanólico e clorofórmico desta
planta. Desta maneira, a atividade antiinflamatória foi avaliada através da determinação da
inibição de NO (técnica de Griess), IL-1 e IL-12 (ensaio de ELISA) em culturas de macrófagos
peritoneais murinos em presença dos extratos de Q. multiflora e LPS. Os resultados mostraram
intensa inibição da produção de NO, IL-1 e IL-12 pelos macrófagos expostos aos extratos de Q.
multiflora. Os dois extratos apresentaram atividade inibitória da produção destes mediadores, no
entanto, o extrato clorofórmico apresentou melhor atividade quando comparado ao extrato
metanólico. Estes promissores resultados sugerem o possível uso de Q.multiflora no controle de
inflamações.
Palavras chaves: Macrófagos, oxido nítrico, interleucina-1, interleucina-12, Qualea multiflora. ¬
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3
Produto fermentado de soja altera o crescimento de neoplasia
mamária murina experimental
Lívia Carolina de Abreu Ribeiro, Lucas Souza Ferreira, Djamile Cordeiro de Matos,
Pâmela Alegranci, Marcela Bassi Quilles, Aline Tansini,
Camila Bernardes de Andrade Carli, Danielle Cardoso Geraldo Maia,
Marisa Campos Polesi, Elizeu Antonio Rossi, Iracilda Zeppone Carlos
Faculdade de Ciências Farmacêuticas - UNESP
(Rua Expedicionários do Brasil, n 1621, Centro, Araraquara, São Paulo, Brasil. CEP: 14801-360)
Introdução
Um câncer é gerado pela proliferação celular descontrolada. Os macrófagos ativados se
polarizam e são capazes de gerar uma resposta imune celular, induzindo as células T para um
padrão Th1, eficaz na eliminação de tumores; ou ativar uma resposta imune humoral, induzindo
Th2, ineficiente contra o câncer. Na teoria, uma imunoterapia eficiente poderia alterar a ativação
das células envolvidas na resposta imune e gerar uma inflamação voltada para um padrão de
resposta celular. Dentre as possíveis imunoterapias, encontra-se o consumo de alimentos funcionais. A soja parece apresentar potencial de prevenir o câncer de mama. Além disso, as bactérias
probióticas também parecem atuar neste sentido. Neste trabalho, procuramos observar o
potencial do produto de soja fermentado por Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus
helveticus ssp jugurti 416 em modular o sistema imune e exercer influência no desenvolvimento
de câncer de mama experimental
Métodos
Camundongos Balb/c fêmeas de 6 semanas de idade foram divididas em dois grupos de 6
animais cada, com acesso irrestrito a água e ração. Um dos grupos recebeu 0,5 mL de solução
salina (grupo SS) por gavagem, enquanto o outro grupo recebeu 0,5 mL de produto fermentado
de soja (PFS), diariamente por um total de 40 dias. No 10° dia, os animais foram inoculados com
células LM3 (1,25x104 células) de adenocarcinoma mamário murino no flanco traseiro. Ao final do
período de estudo, os animais foram sacrificados em câmara de CO 2 e foram obtidos os
macrófagos peritoneais, os linfócitos esplênicos e o tumor. Os macrófagos e os linfócitos foram
cultivados separadamente em presença de estimulantes (LPS e ConA (ambos da Sigma), respectivamente) por 24 horas. Então o sobrenadante da cultura foi colhido e as citocinas foram dosadas
utilizando-se kits de ELISA de captura da BD Biosciences. Foi observado o volume tumoral e
foram feitos cortes histológicos para quantificação das células apoptóticas através do kit In Situ
Cell Death Detection (Roche), em microscópio de fluorescência em aumento de 1000x.
Resultados
PFS apresentou um volume tumoral final significativamente menor (1,45 ± 0,39 cm 3) em
relação a SS (3,68 ± 0,76 cm3) (p<0,05). Conforme esperado, o número de células apoptóticas
tumorais de PFS (3,80 ± 0,29 células/campo) foi significativamente maior em relação a SS (0,79 ±
0,25 células/campo) (p<0,05). Quanto a resposta imune, o consumo de PFS eleva significativamente a produção de TNF-α (132,40 ± 14,25 pg/mL) a partir da cultura de macrófagos peritoneais
em relação a SS (77,11 ± 5,10 pg/mL) (p<0,001). Interessantemente, os linfócitos esplênicos de PFS
apresentaram uma redução dos níveis de IFN-γ (62,61 ± 14,10 pg/mL) em relação a SS (169,40 ±
159
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20,07 pg/mL) (p<0,05), e uma redução dos níveis de IL-5 (60,84 ± 6,32 pg/mL) em relação a SS
(232,10 ± 38,73 pg/mL) (p<0,001), mas sem afetar a produção de IL-4 (PFS: 59,01 ± 7,25 pg/mL; SS:
54,38 ± 5,92 pg/mL) (p>0,05).
Conclusões
Estes resultados indicam que o produto fermentado de soja pode exercer influência no desenvolvimento tumoral de forma benéfica ao hospedeiro, mas não fica claro se esta ação ocorre
devido a sua atuação no sistema imune. ¬
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3
Endophytic fungus Phomopsis stipata:
analysis of production, anti-Mycobacterium tuberculosis
activity and citotoxicity of its extracts
S.R.A. Leite2*, K.A. Prince1, R. Sordi2, F.R. Pavan1, A.C.B. Santos1, A.R. Araújo2,
G.H. Silva2, C. Q. F. Leite1*
1
Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Rodovia Araraquara - Jaú km 01, CEP 14801-902
Araraquara, SP, Brazil
2
Instituto de Química, Unesp, Rua prof. Francisco Degni, S.N., CEP 14800-060, Araraquara, SP, Brazil
*[email protected]
Mycobacterium tuberculosis, the pathogenic agent of tuberculosis (TB), is responsible for death
of 2-3 million people annually and for global economic toll of ~$12 billion each year. The emergence of new resistant stumps to the usual medicines worsened such picture, demanding the
search of new tuberculostatic drugs. Natural products may play important roles in the chemotherapy of TB. Our purpose is the determination of anti-M. tuberculosis activity of the fungus
Phomopsis stipata (Lib.) B. Sutton, 1967 (Diaporthaceae), isolated from leaves of Styrax camporum Pohl (Styracaceae) and cultivated in different media. We compared the antimycobacterial
activity and cytotoxicity of crude ethyl acetate extracts obtained from the different cultures and
determined the chemical composition of extracts. Both assays were performed by reduction of
resazurin and measurement of the fluorescence of product. The extracts from fungus cultivated
in Corn Medium and Potato Dextrose Broth presented the smallest values of MIC (31.25 and 62.5
μg/mL, respectively) and low cytotoxicity (IC50>250.0 and>500.0 μg/mL, respectively) consequently with high selectivity index (SI = MIC/IC 50). This indicates that these extracts are promising
sources of anti-M. tuberculosis agents. HPLC analysis and 1H NMR data suggested the presence of
koninginins of the class of hexaketides as major compounds in these extracts. They are substances belonging to the group of polyketides. Polyketides are natural compounds containing alternating carbonyl and methylene groups (β-polyketones), biogenetically derived from repeated
condensation of acetyl coenzyme A (via malonyl coenzyme A), and usually the compounds
derived from them by further condensations. Koninginins with antibacterial and mycotoxical
activities were already described. However no mention of antimycobacterial activity associated
to such compounds is reported in the last 13 years. Further studies are needed to isolate the
koninginins and determine their structures and anti-TB activity.
Acknowledgements
This study was supported by FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São
Paulo, Brasil). ¬
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3
Chemical Investigation and Antitumor Activity of Extracts
from Piper cabralanum C.DC. (PIPERACEAE)
Davyson de Lima Moreira1, Cecília de Andrade Berhing1,2,
Vinícius Machado da Fonseca1,2, Gleyce Moreno Barbosa3,
Carla Holandino Quaresma3, Maria Auxiliadora Coelho Kaplan2
1
Departamento de Produtos Naturais, Instituto de Tecnologia de Fármacos - Far-Manguinhos/ FIOCRUZ,
Rio de Janeiro, Brazil
2
Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais (NPPN), Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ),
Rio de Janeiro, Brazil
3
Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brazil
The family Piperaceae is composed by 5 genera (Piper, Peperomia, Pothomorphe, Ottonia and
Sarcorhachis) and approximately 2000 species with a cosmopolitan distribution and great occurrence in Rio de Janeiro State, Brazil. A great number of species of Piperaceae have been used in
folk medicine to treat respiratory disorders and parasites infections. Many extracts of Piperacea
as well as some of compounds isolated from this family have shown interesting biological activities, including antitumor, antiinflamatory and antiparasital properties. In Brazil, the estimates for
the number of new cases of cancer published by the Brazilian National Cancer Institute (2008)
were 231,860 for men and 234,870 for women. Regarding to leukemia, the figures for new cases
were around 5,220 for men and 4,320 for women. At present, there are several natural substances with antitumor activity, therefore, new alternatives for the treatment of cancer are clamant.
This study aimed to evaluate the antitumor (antileukemic) activity of extracts and fractions of
Piper cabralanum C.DC. (Piperaceae) as well as to investigate chemically the active fractions. P.
cabralanum leaves were collected near the city of Teresópolis, dried and powdered affording
400g, which were subsequently extracted by maceration with methanol. The methanol extract
(72g) was submitted to liquid-liquid partition with n-hexane, ethyl acetate and n-butanol, yielding, respectively, 16.0g, 14.3g and 4.5g. The methanol extract and the fractions were diluted
with mixtures of water and DMSO at final concentrations ranging from 150μg/mL to 1.5mg/mL to
proceed with the cytotoxic activity against human leukemic cell strains and their multidrug
resistance counterpart, K-562 and k-562-Lucena-1 (trypan blue and the colorimetric assay MTT
were used). The n-hexane fraction was purified by column chromatography over silica gel. The
non-polar fraction from 1 to 7 and 18 were analyzed by TLC and GC-MS. Both cell strains (K-562
and Lucena-1) were sensitive to the methanol extract at a concentration of 400μg /mL. The nhexane fraction also showed a cytotoxicity at 500 g/mL (MIC) in either cell strains. The other
fractions of the crude methanol extract did not show a relevant antitumor effect (MIC>1.5g/ mL).
The purification of the n-hexane fraction over silica gel column afforded mixtures that were
identified by GC-MS as hydrocarbons (C 10-C31), sesquiterpenes (E-caryophyllene, α-selinene,
guaiazulene, α-humulene, calamenene) and steroids (sitosterol, stigmasterol and campesterol),
as well as pure squalene. These initial results show significant antitumor properties for the
extracts of leaves from P. cabralanum, including a multidrug resistant leukemic human cell straim.
Moreover, the active substances were found in this study to be concentrated in the n-hexane
fraction (non-polar compounds). ¬
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3
Composição Química e Atividade Antimicrobiana dos Óleos
Essenciais de Ocimum selloi Benth e de Hesperozygis myrtoides
(Lamiaceae)
Márcia Martini1, Humberto R. Bizzo2, Davyson de L. Moreira3, Celuta S. Alviano4,
Daniela S. Alviano4, Suzana G. Leitão1
1
Faculdade de Farmácia, DPNA, UFRJ, Rio de Janeiro.
Embrapa Agroindústria de Alimentos, Rio de Janeiro.
3
Departamento de Produtos Naturais, FIOCRUZ, Rio de Janeiro.
4
Instituto de Microbiologia Professor Paulo de Goes, UFRJ, Rio de Janeiro.
2
Os gêneros Ocimum e Hesperozygis pertencem à família Lamiaceae e contam com cerca de 160
e 6 espécies, respectivamente. Ocimum selloi é amplamente utilizada na medicina tradicional,
inclusive na região Serrana do Estado do Rio de Janeiro, onde é comercializada em feiras-livres.
Já a espécie Hesperozygis myrtoides é encontrada na região de Aiuruoca/ MG, onde cresce em
altitude de 1800m. Folhas de O. selloi e de H. myrtoides foram coletadas e submetidas à
hidrodestilação em aparelho de Clevenger modificado. Os óleos essenciais obtidos foram analisados por CG-DIC e CG-EM em aparelhos equipados com coluna HP-5 (30m x 0,32mm x 0,25μm),
com programação de temperatura de 60°C a 240°C, 3°C.min -1.
A atividade antimicrobiana dos óleos essenciais foi avaliada através da técnica de difusão em
agar (drop test) frente a cepas de Candida albicans tipo B ATCC 36802, Staphylococcus aureus
MRSA (BMB9393), Escherichia coli, Aspergillus niger e Lactobacillus casei. A zona de inibição
gerada após aplicação de 1μl do óleo essencial puro obtido de cada espécie vegetal ou em
combinação (Tabela 1), foi medida em centímetros. Como controles positivos foram usadas
soluções de anfotericina B, meticilina e vancomicina. O óleo essencial de O. selloi apresenta-se
incolor, com odor característico de “anis” e com rendimento variando de 0,2% a 0,5%. Análises
cromatográficas evidenciaram uma composição química bastante semelhante para os óleos
analisados dos diferentes indivíduos de O. selloi, com a presença de metilchavicol em alta
concentração (92,7% a 95,9%). Já o óleo de H. myrtoides apresenta-se incolor, com odor
característico de “menta”, com rendimento variando de 1,0% a 1,7% e constituintes majoritários a
pulegona (44,4%) e a isomentona (32,7%). O óleo essencial de O. selloi mostrou boa atividade
antimicrobiana, principalmente em relação à cepa resistente de C. albicans (Tabela 1).
Amostra
C. albicans
S. aureus
E. coli
A. niger
L. casei
Halos de Inibição em cm
O. selloi (A)
1,2
0,3
0,5
0,7
0,5
H. myrtoides (B)
1,5
1,2
0,8
-
0,8
A + B (4:1)
1,3
0,6
0,6
0,8
0,6
A + B (3:1)
1,2
0,6
0,6
0,7
0,6
A + B (2:1)
1,2
0,8
0,6
0,7
0,7
A + B (1:1)
1,2
0,6
0,7
0,7
0,8
Tabela 1 - Atividade antimicrobiana dos óleos essenciais de O. selloi e H. myrtoides
O óleo de H. myrtoides apresentou excelente atividade contra esta mesma cepa. A
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combinação desse óleo com o de O. selloi não alterou a atividade contra C. albicans, em nenhuma
das concentrações testadas. Considerando que o ensaio por difusão em agar é apenas qualitativo, experimentos complementares são necessários para quantificar o potencial antimicrobiano
desses óleos essenciais.
Apoio
CNPq ¬
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3
Efficacia terapeutica delle acque sulfuree-bicarbonate-alcaline
nel trattamento della psoriasi
V. Panico1, V. Nastos2, L. Russo3, S. Morelli4, A. Vassallo3, F. De Simone3,
M. De Fina4, M. De Fina4, L. Rastrelli3
1
Direttore Sanitario Terme Capasso di Contursi Terme (SA)
Internista Centro Medico di Atene, Clinica Psichico, Atene, Grecia
3
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Facoltà di Farmacia, Università degli Studi di Salerno,
Via Ponte Don Melillo, 84084, Fisciano, Salerno, Italy
4
Master in Idrologia e Medicina Termale e dello Sport, Dipartimento di Scienze Farmaceutiche,
2
La psoriasi è una dermopatia eritematosquamosa ad andamento cronico con remissioni alternate a riacutizzazioni. La psoriasi non è una malattia univoca, ma comprende diverse forme cui
corrispondono altrettante manifestazioni diverse. Circa 3 italiani su 100, di età superiore a 25 anni,
soffrono di psoriasi.
In questo studio si è voluto valutare l’efficacia, nella cura delle psoriasi, delle acque termali
sulfuree-bicarbonato-alcaline delle Terme Capasso, site in Contursi Terme (Salerno). Sono stati
arruolati 28 pazienti affetti da psoriasi nell’anno 2008.
L’età dei soggetti arruolati era compresa tra 30 e 47 anni così suddivisi: 12 uomini e 16 donne.
La standardizzazione della gravità dei pazienti è avvenuta utilizzando il “Psoriasis Area and
Severità Index” (PASI) ed una classificazione italiana che teneva conto anche degli aspetti psicologici e sociali della malattia.
Ogni giorno e per 12 giorni consecutivi tutti i pazienti hanno effettuato una balneoterapia in
vasca ad acqua ferma. Alla fine del ciclo di terapia termale i risultati clinici sono stati i seguenti:
per i 3 uomini e le 3 donne con psoriasi di grado lieve si è avuto una completa remissione della
manifestazione psoriasica; i pazienti affetti da psoriasi di grado moderato (7 uomini e 9 donne), 5
uomini e 6 donne hanno fatto registrare una remissione della patologia mentre i restanti 2 uomini
e 3 donne, hanno fatto registrare un miglioramento delle lesioni. Nei pazienti affetti da psoriasi di
grado moderato-grave (2 uomini e 4 donne) solo 1 uomo e 2 donne hanno raggiunto risultati
clinici soddisfacenti.
Successivamente nell’anno 2009 sono stati trattati ben 38 pazienti di cui 20 affetti da psoriasi
di grado moderato (12 uomini e 8 donne) e 18 pazienti affetti da psoriasi di grado moderato grave
(10 uomini e 8 donne) di età compresa tra 30 e 55 anni.
I pazienti in esame sono stati sottoposti a due cicli di 12 giorni ciascuno di balneo terapia di
balneoterapia, il primo ciclo nel mese di Maggio ed il secondo nel mese di Ottobre; tra un ciclo e
l’altro i pazienti non assunto alcun tipo di farmaco, era ammesso solo l’uso di oli emollienti a base
di germe di grano per idratare la cute.
I risultati dopo questi due cicli di balneoterapia intervallati da almeno 15 giorni di elioterapia
sono stati sorprendenti.
Dei 20 pazienti con patologia di grado moderato ben 8 ( 3 uomini ed 1 donna) hanno presentato una remissione completa della malattia; 9 una regressione allo stadio lieve (6 uomini e 5
donne) e 3 hanno presentato solo un miglioramento delle lesioni (3 uomini e 2 donne).
Dei 18 pazienti del gruppo moderato grave 4 (2 uomini e 2 donne) hanno presentato una
remissione clinica della patologia; 7 (5 uomini e 2 donne) sono stati classificati come affetti da
lesioni lievi; 3 (2 uomini ed 1 donna) sono passati allo stadio moderato mentre 4 (1 uomo e 3
165
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donne) sono rimasti nello stadio moderato grave facendo registrare solo un miglioramento delle
lesioni senza una significativa riduzione dell’estensione delle aree cutanee interessate dalla
psoriasi.
Dai risultati ottenuti da questi studi osservazionali si conferma chiaramente l’efficacia della
balneoterapia termale con acqua sulfurea-bicarbonato-alcalina. ¬
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3
Le acque sulfuree come coadiuvante nei disturbi vulvo-vaginali
in età post-menopausale
V. Nastos1, V. Panico2, L. Russo3, F. De Simone3, S. Morelli4, L. Cerrato4, B. Salvati4,
L. Rastrelli3
1
2
Direttore Sanitario Terme Capasso di Contursi Terme (SA)
3
4
Master in Idrologia e Medicina Termale e dello Sport, Dipartimento di Scienze Farmaceutiche,
Lo scopo dello studio è stato quello di valutare l’efficacia terapeutica delle acque sulfureebicarbonato-alcaline provenienti dalle Terme Capasso, site in Contursi Terme (Salerno), come
coadiuvante nei disturbi vulvo-vaginali delle donne in età post-menopausale (secchezza vaginale).
La durata dello studio ha avuto la durata di 12 mesi; sono state arruolate 45 pazienti suddivise
in tre gruppi sottoposti a 12 giorni di trattamento, in 2 cicli terapeutici. Le pazienti in esame non
dovevano aver in corso o terminato da poco (2 settimane) terapie farmacologiche anche per
altre patologie; il tampone vaginale doveva essere negativo; le pazienti dovevano essere assolutamente in età post-menopasusale; il disturbo doveva rientrare in una scala visual-analogica
predeterminata in prossimità del fondo scala (8-10).
Il primo gruppo comprendeva 15 pazienti sottoposte a lavande terapeutiche con acque termale
in associazione a fermenti lattici; il secondo gruppo 15 pazienti sottoposte a lavande con acqua di
rubinetto e fermenti lattici; il terzo gruppo 15 pazienti sottoposte a lavande con acqua termale
più placebo.
Dopo sei mesi in assenza di alcuna terapia farmacologica è stato praticato un secondo ciclo di
terapia rispettando gli stessi pregressi arruolamenti.
I risultati osservati sono stati i seguenti: sia il gruppo I che il gruppo III hanno avuto una remissione sintomatologia migliore di quella del primo ciclo; il solo uso di fermenti lattici (II gruppo)
non ha sortito risultati degni di nota sia dopo il primo che dopo il secondo ciclo.
Possiamo affermare che la terapia con solo acqua termale è un valido supporto terapeutico
naturale e non invasivo che pur non comportando risultati duraturi migliora rapidamente la
sintomatologia in esame, ci riserviamo qualora i risultati lo comprovassero, di poter affermare
che più cicli intervallati da riposo terapeutico, possono risolvere più efficacemente la patologia o
ridurre drasticamente il numero di recidive. ¬
167
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3
Ethnopharmacology in Dublin: Surveys on the medicinal plants
use profile
Francis Cunningham1, Fabio de Sousa Menezes1
1
School of Pharmacy and Pharmaceutical Scieces,Faculty of Healty Sciences
Trinity College Dublin, Ireland
A field study was carried out on 18 natural health shops in Dublin area to assess the use of
medicinal plants and other natural medicines. Store assistants were interviewed and asked
questions from a previously prepared questionnaire. Results were evaluated and statistically
analysed. Questions asked included best sellers, new products on the market, common prescribers, ailments for which plants are required, among others. Results indicated that Echinacea is
the best seller, nutritionists accounted for approximately one third of the medical profession that
prescribed plants, and cold and flu were the main pathologies for what natural approach was
searched for. It could be notice that people in the greater Dublin area use medicinal plants either
as a complement or as the only source of treatment. ¬
168
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3
Essential oil analysis of Curcuma mangga (Zingiberaceae)
Ikarastika Rahayu1,2, Niko Radulovic3, Polina Blagojevic3, Fabio de Sousa Menezes1
1
School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Faculty of Health Sciences
2
Universiti Malaysia Kelantan, Malaysia.
3
Department of Chemistry, Faculty of Science and Mathematics, University of Nis, Serbia
Curcuma mangga Val. & Zijp. (Zingiberaceae), has long been used as a folk medicine and locally
known amongst Malays as “temu pauh,” and Thais as “Kamin Khao” or its generic name “mango
turmeric” or “mango ginger” because of its mango-like smell. Curcuma, a genus of the family
Zingiberaceae, comprises about 70 species distributed over the tropics from India, Burma,
Indochina, Thailand, Malaysia to Queensland and the Pacific Islands. Most of the species can also
be found in the mountainous area around the world. The rhizomes and leaves of the plants
contain volatile oils on steam distillation or solvent extraction which contribute to their medicinal
importance.
Their active constituents have been classified into the fractions of curcumin and the essential
oils. Instead of have been used as vegetable or food decoration in Thai cuisine, its rhizomes are
also widely used as traditional medicine for relieving stomach complaints, gastric ulcer, chest
pain, fever, and general debility. Besides, it has also been used in postpartum care, specifically to
aid womb healing. In the Malay Peninsula and Indonesia, it has been used for curing fevers, and
for abdominal problems, while in some parts it is used externally against evil spirit. It has been
reported that the ethanol extract of C. mangga showed antifungal activity against three plant
pathogens. The essential oil of its dried rhizome was isolated using simultaneous hydrodistillation. The oil was analysed by GC and GCMS. The rhizome oil contained 97 constituents,
comprising 89.5% of the oil. The major compounds identified as myrcene (46.5%), β-pinene
(14.6%), perillene (4.2%), caryophyllene oxide (3.01%), α-pinene (2.46%), γ-bicyclohomofarnesal
(2.3%), Caryophyllene (or alpha-humulene) (2.2%) and β-Ocimene (2.0%). ¬
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3
Essential oil analysis of Nepeta x fassenii
Kevin Rabbitt1, Niko Radulovic2, Polina Blagojevic2, Fabio de Sousa Menezes1
1
School of Pharmacy and Pharmaceutical Scieces,Faculty of Healty Sciences
Trinity College Dublin, Ireland.
2
Department of Chemistry, Faculty of Science and Mathematics, University of Nis, Serbia
Nepeta x fassenii is a hybrid species of a garden origin grown as a ground cover, belonging to
the family Lamiaceae. The members of this group are known as catnip or catmint because of the
purported effect on cats, pleasantly stimulating cats’ pherormonic receptors, typically resulting
in temporary euphoria. According to traditional herb medicine, catnip tends to have a sedative
effect on humans. The oil isolated from catnip by steam distillation is referred as repellent against
insects, in particular mosquitoes, cockroaches and termites. The main constituent are nepetalactones, these have previously been isolated from some other Nepeta species which have feline
attractant and insect repellent effects in addition to some other effects. Some Nepeta species are
used in folk medicine particularly due to their diuretic and bacteriostatic activities. In this way,
Nepeta x fassenii was collected in the botanic gardens, Trinity College, Dartry, Dublin 6. The
essential oil of its dried aerial parts was isolated using simultaneous hydro-distillation. The oil was
analysed by GC and GCMS. The oil contained 109 constituents, comprising 95.9% of the oil. The
major compounds identified as 4aα, 7α, 7aα-nepetalactone (67.8%), 1,8-Cineole (6.6%),
Germacrene D (4.8%), β-pinene (2.7%), (E)-β-Ocimene (2.6%), 4aα, 7β, 7aα-nepetalactone (2.3%)
and (E)-β-Farnesene (1%). ¬
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3
Antioxidant activity of Urera baccifera (Urticaceae)
Frances Mannion1, Fabio de Sousa Menezes1
1
School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Trinity College Dublin
Faculty of Health Sciences, Ireland
Aerial parts of Urera baccifera Gaud. were collected in Brazil, extracted and tested for their
antioxidant activity. The crude ethanol extract and its hexane, dichloromethane, ethyl acetate,
butanol partitions and the final aqueous residue were prepared and tested for antioxidant
activity the stable free radical 2, 2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH). Based upon the results, it
was found that the ethyl acetate partition showed the greatest antioxidant activity with a lower
EC50 value than the other partitions. The ethyl acetate was the only one to show a visible reduction in colour of the DPPH molecule. To correlate with this activity, other tests were performed
like the total phenolic content measurement. The ethyl acetate partition was found to have the
highest value of total phenolics, followed by the butanol partition. This suggests that the plant
can have a certain amount of plant polyphenols such as flavonoids. Another method used to
correlate with these previous results from U. baccifera was the estimation of flavonoid content.
The amount of flavonoids expressed as Rutin equivalent was also calculated and was shown to
be most elevated with the ethyl acetate partition. Urera baccifera has previously been tested for
anti-inflammatory activity and antiviral activity and is currently being researched in order to
isolate and identify its active constituents. This is the first report showing antioxidant activities
for U. baccifera extracts. ¬
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3
Preparation of new lupeol derivatives modified with
fullerene-C60: evaluation of antimalarial activity
Rodrigues S. B. V., Freitas R. P., Alves R. B., Duarte L. P., Silva G. D. F., Paula R. C.,
Varotti F. P.
Departamento de Química, ICEx, Universidade Federal de Minas Gerais,
Av. Antônio Carlos, 6627 CEP 31270-901, Belo Horizonte, MG, Brazil
The Celastraceae family includes approximately 1210 species, most of all in tropical and subtropical regions, which have been used in traditional medicine due its pharmacological activies. 1 The
Maytenus genus contains species with analgesic properties being used as remedies for oral
and/or topical administration 2, and also used to treat infections. 3 In this work branches of
Maytenus sacilifolia were studied and led to the isolation of the pentacyclic triterpene lupeol from
its hexanic and ethyl-acetate extracts. Lupeol is well known to possess several activities such
anti-inflammatory, anti-viral, anti-malarial and others. 4 Aiming to increase its pharmacological
properties new molecular hybrids with fullerene-C60 were synthesized. The fullerenes are a group
of spherical molecules discovered in 1985 and largely studied since then, being the fullerene-C 60
the most important representative of the group. Among its properties it is highlighted biological
activities such as anti-HIV, anti-microbial, anti-apoptosis, neuroprotective and others.5 Linking
two molecules with pharmacological activities to achieve new molecules with a higher activity is
the process known as molecular hybridization. In this work, novel hybrids were synthesized by
the linkage of lupeol malonates onto the surface of the fullerene-C 60 through Bingel cyclopropanation. The malonates were synthesized in order to contain one or two lupeol molecules. The
anti-malarial activity of the hybrid containing two lupeol molecules and the malonates were
evaluated on Plasmodium falciparum clone W2 (chloroquine-resistant). The activity of the hybrid
was not higher than the activity of lupeol or fullerene-C 60 alone, probably due its low solubility in
polar solvents. Studies for the synthesis of new lupeol-fullerene conjugates more soluble are
being conducted in our laboratory. (FAPEMIG and CNPq).
References
1. Simmons, M.P.; Cappa, J. J. ; Archer, R. H. ; Ford, A. J.; Eischtesdt, D.; Clevinger, C. C.; Mol. Phyl. Evol. 2008, 48, 745.
2.Sosa, S.; Morelli, C. F.; Tubaro, A.; Cairoli, P.; Speranza, G.; Manitto, P.; Phytomedicine, 2007, 14, 109.
3. Estevam, C. S.; Cavalcanti, A. M.; Cambuí, E. V. F.; Araujo Neto, V.; Leopoldo, P. T. G.; Fernandes, R. P. M.; Araujo, B.
S.; Porfírio, Z.; Sant’Ana, A. E. G. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2009, 19, 299.
4. Chatuverdi, P.; Bhui, K.; Shukla, Y.; Cancer Letters, 2008, 263, 1-13.
5. Bosi, S. ; Ros, T. ; Spalluto, G. ; Prato, M, European Journal of Medicinal Chemistry, 2003, 38, 913. ¬
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3
Efecto analgésico del extracto de hoja de Eupatorium
glabratum en la prueba de hot plate
Guadalupe García1, Isabel Martínez1, Arianna Bravo1, Tom Scior1, Julio C. Pardo2,
Rosa E. del Río2
1
Facultad de Ciencias Químicas, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla,
Ciudad Universitaria, Puebla, Pue. México
2
Instituto de Investigaciones Químico Biológicas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
[email protected]
El dolor se inicia por eventos que suceden en la piel o en tejidos internos como vísceras,
huesos o músculos, pero se requiere que el sujeto esté consciente y por lo tanto es una experiencia subjetiva que funciona como un medio natural de defensa. En la experimentación con animales, las mediciones de dolor se basan en las respuestas objetivas del sujeto cuando es sometido a
una agresión nociceptiva, dichas respuestas son muy semejantes entre humanos y animales. Los
modelos más empleados están basados en el uso de estímulos térmicos, como la prueba de hotplate.
En México, Eupatorium glabratum ha sido utilizada popularmente por sus efectos analgésicos
sin embargo, poco se conoce acerca de dichos efectos. De aquí el interés de evaluar la actividad
analgésica de E. glabratum en la prueba hot plate. Para ello, se administró (i.p.) el extracto de
hoja solubilizado en aceite de sésamo a dosis de 100 y 150 mg/kg a ratas hembras de la cepa
Sprague Dowley y el grupo control fue administrado (i.p.) con 3.5ml/kg de aceite de sésamo. Los
extractos de hojas se obtuvieron por maceración en CH 2Cl2 y fueron analizados por resonancia
magnética nuclear para ver la naturaleza de los componentes, encontrándose compuestos
derivados del timol, con estructura muy similar a los aislados por F. Bohlmann 1.
Los resultados obtenidos indicaron que la administración de 100mg/kg de extracto de E.
glabratum causa un aumento en los tiempos de latencia (p<0.05) cinco horas posteriores a la
administración con una duración del efecto de cuatro horas. Sin embargo dicho efecto parece no
ser dependiente de la dosis, ya que a una dosis de 150mg/kg, el efecto analgésico presenta menor
duración y tiempos de latencia similares (p<0.05) a dosis de 100 mg/kg. El grupo control mantuvo
valores de tiempo de latencia constantes.
Los compuestos identificados podrían estar involucrados en el mecanismo de la analgesia
presentada o junto con otros compuestos presentes que actuarían de manera sinérgica. Este
hallazgo apoya el uso popular de esta planta para el tratamiento del dolor.
Bibliografia
2. Bohlmann F., Jakupovic J., Lonitz M. (1977) Über Inhaltsstoffe der Eupatorium Gruppe; Chem. Berichte, 110, 301-314 ¬
173
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3
Estudio del efecto diurético del extracto acuosos de
Sansevieria trifasciata en ratas
Arianna Bravo1, Isabel Martínez1, Guadalupe García1, Tom Scior1, Ramón Guzman2,
Rosa E. del Río2
1
Facultad de Ciencias Químicas, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla,
Ciudad Universitaria, Puebla, Pue. México
2
Instituto de Investigaciones Químico Biológicas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
[email protected]
El termino diuresis significa un incremento en el volumen de orina. Este incremento se logra
empleando fármacos conocidos como diuréticos. Estos ajustan el volumen y la composición de
los líquidos corporales en diversas situaciones clínicas, como son la hipertensión, insuficiencia
cardiaca, insuficiencia renal. El estudio del posible efecto diurético del extracto de Sansevieria
trifasciata, podría ofrecernos una molécula capaz de ayudar en el tratamiento de diversos procesos patológicos, en los que la primera línea de tratamiento son los diuréticos y validar su uso en la
medicina popular.
Los diuréticos tienen efectos sobre las proteínas de transporte de membrana específicas en las
células epiteliales tubulares renales. Otros ejercen efectos osmóticos que previenen la resorción
de agua en los segmentos permeables de la nefrona, inhiben enzimas o interfieren en la acción
de receptores hormonales en las células epiteliales renales. Casi todos actúan al interferir con
algún mecanismo de reabsorción de Na+ filtrado. Como los diuréticos de Asa (furosemida), que
inhiben selectivamente los cotransportadores Na +-K+-2Cl- de la rama ascendente gruesa del asa
de Henle. Otro grupo los diuréticos tiacidicos, actúan sobre el túbulo contorneado distal, promoviendo la perdida de NaCl por la orina al inhibir los cotransportadores Na +- Cl-.
Para evaluar el probable efecto diurético de Sansevieria trifasciata, se empleó una variación de
la caja metabólica para la obtención de las muestras de orina, se utilizaron ratas hembras de la
cepa Sprague Dawley con pesos entre 180-230g. El extracto acuoso de Sansevieria trifasciata se
obtuvo licuando cantidades conocidas de la planta en un volumen determinado de agua. La
administración fue por vía oral empleando cánulas de acero inoxidable, las dosis empleadas
fueron de 0.1, 0.4, 3, 8 y 10 g/kg de peso, como control positivo se utilizó el diurético de Asa
Furosemida administrado por vía intraperitoneal a una dosis de 5mg/kg de peso. Los sujetos
controles recibieron solución salina isotónica en volúmenes equivalentes empleados para la
administración del extracto. Además de realizarse la determinación del volumen urinario basal en
todos los animales antes de la administración de los tratamientos.
Los resultados de la administración de diferentes dosis del extracto acuoso de Sansevieria
trifasciata, no mostro diferencia significativa respecto a el grupo control (p>0.05), para el caso
del grupo control positivo administrado con furosemida se obtuvo diferencia estadísticamente
significativa contra el grupo experimental (p<0.05). Los resultados obtenidos indican que las
diferentes dosis empleadas de Sansevieria trifasciata no tienen efecto diurético en ratas. ¬
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3
Contribución al estudio de los alcaloides steroidales del
Solanum hypomalocophyllum Bitter
Libia Alarcón1, Peña Alexis2, Alfredo Usubillaga3
1
Universidad Nacional Experimental de los Llanos Occidentales Ezequiel Zamora (UNELLEZ).
Programa de Ciencias del Agro y del Mar. San Carlos Edo. Cojedes-Venezuela.
2
Universidad de Los Andes (ULA). Núcleo Rafael Rangel (NURR). Departamento de Biología y Química
Trujillo-Venezuela
3
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis. ULA, Mérida-Venezuela
[email protected]
Los alcaloides 4-ceto esteroidales son una clase especial de sustancias que poseen un grupo
cetónico en el carbono 4 de su esqueleto esteroidal. Hasta el momento han sido aislados de dos
especies, el Solanum hypomalocophyllum Bitter, pequeño árbol nativo de los Andes venezolanos
que crece específicamente en los estados Mérida, Táchira por encima de los 2500 metros sobre el
nivel del mar y el Solanum ecuadorense arbusto que crece en los Andes del norte de Ecuador por
encima de los 3000 metros sobre el nivel del mar. Los alcaloides 4-ceto, pertenecen al grupo de
los alcaloides esteroidales, metabolitos de gran interés por sus propiedades biológicas. En el
presente trabajo se estudiaron los alcaloides esteroidales presentes en el Solanum hypomalocophyllum Bitter. De los frutos verdes se aislaron cinco alcaloides esteroidales sus estructuras
fueron establecidas como: (20S, 5R)-23,26-epimino-3β-hidroxi-5αH-colestan-23(N)-eno-4,22-diona
[I], (22R, 25R)-16α-acetoxi-22,26-epimino-3β,23β-dihidroxi-5αH-colestan-4-ona [II], (22R, 25R)22,26-epimino-3β,23β-dihidroxi-5αH-colestan-4-ona [III], (23R, 25R)-3β,23β-dihidroxi-5αHespirosol-4-ona [IV], (22R, 25R)-22,26-epimino-3β,16α,23β-trihidroxi-5αH-colestan-4-ona [V]. De las
hojas de la misma especie se aisló un alcaloide esteroidal glicosídico cuya estructura fue establecida como: (25R, 22R)-22,26-epimino-3β-O-β-D-glucopiranosil-23β-hidroxi-5αH-colestan-4-ona [VI].
Todas las estructuras fueron establecidas con base a un estudio detallado y sistemático de los
espectros de RMN unidimencionales y bidimencionales. El compuestos [VI] se reporta por
primera vez como producto natural. ¬
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3
Mangiferina, una xantona de origen natural con grandes
potencialidades terapéuticas. Algo más que el componente
mayoritario del extracto de la corteza de Mangifera indica l.
(Vimang)
Dr. René Delgado-Hernández
Laboratorio de Farmacología Molecular, Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos,
CIDEM, 26 y Boyeros, Plaza, Ciudad Habana
Presidente de la Sociedad Cubana de Farmacología
[email protected]
La mangiferina (MF), una xantona glicosilada, ha sido obtenida de las hojas y la corteza de
Mangifera indica L, así como de otras plantas. Su estructura química, donde se destacan varios
grupos catecólicos, cumple con los requisitos que se han descrito para lograr alta biodisponibilidad por vía oral y potente actividad antioxidante. La aglicona que se produce a partir de la MF
(noratiriol), después de la pérdida del resto glicosídico por la hidrólisis que debe ocurrir durante
el metabolismo, tiene un efecto potente en la captación de oxígeno singlete y otras manifestaciones antioxidantes. Resulta interesante analizar la cantidad de reportes sobre la actividad
biológica de la MF, obtenida de fuentes naturales muy diversas, un resumen de lo cual se realiza
en el presente trabajo, con particular énfasis en los resultados de grupos de investigación cubanos que trabajan en el desarrollo de nuevos productos fitofarmacéuticos a partir de la mangiferina como componente activo mayoritario. Efecto antioxidante y analgésico, antihiperglicemiantes, antiaterogénicos, antihiperlipidémicos, también se reportan efectos inmunomoduladores y
anti-inflamatorios. Más recientemente se han determinado sus efectos antiapoptóticos, neuroprotectores, manifestados estos últimos en el bloqueo de procesos de exitotoxicidad inducida
por agonistas glutamatergicos. MF también demostró efecto inmunoprotector a través de la
inhibición del estrés oxidativo en linfocitos, neutrófilos y macrófagos. En otros estudios, MF tuvo
una actividad inhibitoria del crecimiento de fibrosarcoma ascítico en ratones. Mediante tratamientos con MF, tanto in vivo como in vitro, aumentó la citotoxicidad contra células esplénicas y
macrófagos de ratones normales y con tumores implantados.
El tratamiento in vitro con MF de las células esplénicas de ratones a los que se les implantó el
tumor aumentó la citotoxicidad de estas células tumorales, tanto en aquellas sensibles como en
las resistentes a células naturales asesinas (NK). En estos experimentos, la MF también
antagonizó el efecto citopático del HIV. Esta xantona, a concentraciones desde 1 hasta 100 mM,
inhibió el aumento de iNOS y TNFα en macrófagos de rata estimulados in vivo y después in vitro
con LPS e interferón gamma. A concentración de 100 mM redujo las concentraciones de sus
ARNm. Sin embargo, a esta concentración aumentó los valores del transcripto primario del factor
de crecimiento tumoral-beta (TGF-β). El estudio de los mecanismos de acción de la MF como
inmunomodulador y anti-inflamatorio, ha permitido comprobar su efecto inhibitorio sobre la
expresión de diversos genes relacionados con la vía de señalización del NF-κB. En tal sentido,
bloqueó la activación de NF-κB inducido por TNF y los genes dependientes de NF-κB como ICAM1 y COX-2. El efecto estuvo mediado por la inhibición de la activación de IKK y subsiguiente
bloqueo de la fosforilación y degradación de IκBα. Además, la MF inhibió la fosforilación de p65
inducida por TNF, así como la translocación al núcleo y la activación de NF-κB inducida por otros
agentes pro-inflamatorios como PMA, ceramide y LPS. MF se reporta como el componente
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mayoritario del Vimang, un extracto acuoso estandarizado obtenido en Cuba de la corteza del
árbol del mango, donde aparece entre un 10 y un 20%. Estos estudios, sus potencialidades terapéuticas y las nuevas investigaciones que se realizan en el campo de la neuroprotección y el
cáncer, serán expuestos en este trabajo, como una contribución al conocimiento del amplio
campo de acción farmacológica de la mangiferina y de extractos naturales que la contienen,
como es el caso del Vimang, que se desarrolla y comercializa en Cuba. ¬
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3
Mecanismo de acción del aceite esencial de Aloysia triphylla
sobre Staphylococcus aureus: Evaluación del tiempo de
muerte, lisis celular y microscopia electrónica
Oliva M., Carezzano E., Gallucci N., Casero C., Zygadlo J., Demo M.
Dpto. Microbiol. Inmunol. Fac. Cs. Ex., Fc-Qcas. y Nat. Universidad Nacional de Río Cuarto
Córdoba. Argentina
[email protected]
Introducción
Distintos aceites esenciales (AE) derivados de plantas aromáticas poseen actividad antimicrobiana. Estos compuestos producen daños en la estructura de la membrana microbiana, modifican
la hidrofobicidad de la superficie de la misma y modulan el “quorum sensing”. Los AE de Aloysia
triphylla tienen la particularidad de inhibir a bacterias Gram positiva, Gram negativa y hongos
unicelulares, destacándose la acción inhibitoria sobre Staphylococcus aureus. Esta especie es
causante de muchas patologías que afectan al hombre y animales y ha sido descripta como
agente etiológico tanto en procesos supurativos como en toxoinfecciones alimentarias. Existen
muchos tratamientos contra cepas causantes de estas enfermedades, pero no contra S. aureus
resistentes a un amplio espectro de antibióticos utilizados a gran escala en hospitales.
Objetivo
Estudiar los mecanismos de acción del aceite esencial de Aloysia triphylla sobre S. aureus.
Materiales y Métodos
Ejemplares de A. triphylla fueron obtenidos de un cultivar de La Paz (Cba). Los AE se obtuvieron por hidrodestilación y fueron analizados por Cromatografía gaseosa y Espectrometría de
masas (GC-MS). La cepa utilizada fue S. aureus y se analizó el efecto del inóculo sobre la
Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) y Concentración Bactericida Mínima (CBM). Se determinó
la lisis celular bacteriana por microscopía electrónica, se realizaron los ensayos de muerte microbiana en función del tiempo (TM).
Resultados y discusión
Entre los terpenos identificados en el AE se destacan componentes comunes tales como
limoneno (2,9%), neral (20%), geranial (29,2%), espatulenol (8,9%) y óxido de cariofileno (7%), los
cuales coinciden con los reportados por otros autores para esta especie. El valor de CIM obtenido
sobre S. aureus para una concentración celular inicial (CCI) de 9,2 x 10 6 ufc/ml fue de 0,18 mg/ml,
para una CCI de 2,23 x 105 ufc/ml fue de 0,092 mg/ml y para 4,6 x 10 4 ufc/ml la CIM fue de 0,023
mg/ml. El valor de CBM para todas las CCI ensayadas fue de 5,92 mg/ml. El efecto fue bactericida
y produjo lisis celular el cual fue observado con microscopía electrónica de transmisión: la bacteria presentó pared celular más delgada con desprendimiento, invaginación, separación de la
membrana y expulsión del contenido celular. El TM que fue requerido para ejercer la acción cida
(CBM =5,92 mg/ml) a una CCI de 9,2 x 106 ufc/ml fue de 3h 30 min. A concentraciones mayores del
aceite el tiempo de muerte fue de 20 min para 28,12 mg/ml y 5 min para 56,25 mg/ml. El AE de A.
triphylla a bajas concentraciones ejerce acción inhibitoria y la CBM es independiente del inóculo
ejerciendo su acción bactericida a distintos tiempos mostrando un efecto lítico. Los resultados
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demuestran una efectiva acción del este aceite sobre la cepa probada por lo tanto el AE de A.
tryphylla podría ser utilizado como un quimioterápico altamente eficaz, particularmente contra
cepas de S. aureus multirresistentes a antibióticos. ¬
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3
Acción antimicótica del aceite esencial de Aloysia triphylla
sobre especies de Candida aisladas de patologías humanas
Carezzano E., Oliva M., Gallucci N., Casero C., Demo M.
Dpto. Microbiol. Inmunol. Facultad Cs. Ex., Fc-Qcas. y Nat.. Universidad Nacional de Río Cuarto
Córdoba. Argentina
[email protected]
Introducción
Las plantas aromáticas constituyen un grupo de vegetales que producen metabolitos secundarios tales como aceites esenciales (AE) que son una mezcla fragante de líquidos. Aloysia triphylla
(L`Her.) Britton (cedrón) es un arbusto aromático localizado en regiones de América del Norte y
del Sur. Tiene importancia en el mercado nacional e internacional por los atributos sensoriales y
medicinales de sus AE. Estos principios activos presentan propiedades terapéuticas contra
bacterias, virus, hongos y protozoos. Las infecciones oportunistas causadas por diferentes
especies de Candida, particularmente en pacientes inmunodeprimidos y neonatos, son muy
difíciles de tratar con las drogas convencionales debido a los efectos secundarios, a la elevada
toxicidad de las mismos y la resistencia desarrolladas por estas levaduras. Surge la necesidad de
investigar nuevas alternativas para el tratamiento de infecciones fúngicas. A. triphylla podría ser
utilizado como fitoterápico para combatir las candidiasis.
Objetivo
Determinar la actividad antimicrobiana (AA) del AE de A. triphylla sobre diferentes especies de
Candida aisladas de caso clínicos humanos.
Se obtuvo AE de A. triphylla por hidrodestilación de muestras de un cultivar ubicado en La Paz
(Córdoba, Argentina). La AA fue evaluada utilizando: C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, C.
krusei, C. guillermondii, C. parapsilosis y C. tropicalis resistentes a fluconazol (150 mg/ml). Se
determinó la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) por técnica de microdilución en caldo y la
Concentración Fungicida Mínima (CFM).
Resultados y Discusión
El AE de cedrón presentó actividad antimicótica sobre todas las especies ensayadas. Los
valores de CIM obtenidos estuvieron en el rango de 0.035 mg/ml a 0.14 mg/ml.
Especie
CIM (mg/ml)
CFM (mg/ml)
C. albicans
0.035
4.60
C. dubliniensis
0.035
9.21
C. glabrata
0.143
2.3
C. krusei
0.071
2.3
C. guillermondii
0.071
18.42
C. parapsilopsis
0.071
18.42
C. tropicalis
0.143
2.3
Tabla 1: Concentración Inhibitoria Mínima y Concentración Fungicida Mínima del aceite esencial de A. triphylla sobre
especies de Candida
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Se destaca el efecto fungicida sobre todas las especies de Cándida (CFM: 2.3 mg/ml a 18.42
mg/ml) particularmente las bajas concentraciones de AE requeridas para inhibir a C. albicans y C.
dubliniensis (CIM: 0.035 mg/ml) (Tabla 1).
C. albicans es uno de las especies patógenas más frecuentes en el hombre que causa diversas
infecciones en la piel, cavidad oral, esófago, tracto intestinal, vagina y sistema circulatorio. C.
dubliniensis ha sido descripta como patógeno emergente y como agente causal de infecciones en
pacientes con HIV y en inmunocomprometidos. Las plantas aromáticas presentan propiedades
etnofarmacológicas ofreciendo una enorme posibilidad de encontrar nuevas estructuras
químicas con propiedades antifúngicas. Dentro de estas especies medicinales, el AE de A. triphylla es un producto natural que podría ser utilizado para el tratamiento de patologías causadas
por Candida. ¬
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3
Validación del uso etnofarmacológico de Polygonum
acuminatum y Polygonum persicaria por sus propiedades
antifúngicas
Derita M.1,2, Vera N.2, Zacchino S.1
1
Farmacognosia, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Suipacha 531, 2000 Rosario,
Argentina. Tel/fax: +54-341-4375315
2
Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia, Ayacucho 471, 4000 SM de Tucumán, Argentina
[email protected]
El género Polygonum L. (Polygonaceae) está representado en Argentina por 21 especies,
algunas de las cuales han sido usadas en la medicina tradicional de nuestro país para tratar
problemas de la piel, infecciones vaginales y otros usos relacionados con actividad antifúngica. 1
Estudios previos de la actividad antifúngica del género dan cuenta de que extractos de P. ferrugineum y P. punctatum poseen una muy buena actividad frente a hongos patogénicos para el
humano atribuida a la presencia de chalconas sustituídas 2 y de poligodial,3 respectivamente.
En el presente trabajo, extractos diclorometánicos de hojas de P. acuminatum Kunth y P.
persicaria L. (especies no estudiadas hasta el momento) fueron evaluados por su actividad
antifúngica mediante el método de microdilución en caldo 4 según lineamientos del CLSI (Clinical
& Laboratory Standards Institute).
Los resultados mostraron que las especies fúngicas más susceptibles fueron los dermatofitos
Microsporum gypseum, Trychophyton rubrum y Trychophyton mentagrophytes [Concentraciones
Inhibitorias mínimas (CIMs) entre 15,6 y 1000μg/mL]. El fraccionamiento bioguiado de los extractos de ambas especies llevó al aislamiento de dos dialdehidos sesquiterpénicos: poligodial (1) e
isopoligodial (2). En el caso de P. persicaria se encontraron además tres chalconas activas: pinostrobina (3), flavokawina B (4) y cardamonina (5).
2
1
3
4
5
Las CIMs de estos metabolitos secundarios presentaron rangos entre 16,5 y 250μg/mL, resultando susceptibles las levaduras Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae, Cryptococcus neoformans y especies del género Aspergillus además de los dermatofitos que ya eran susceptibles a los
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extractos. Estos resultados muestran que el espectro de acción antifúngica de los compuestos
puros aislados es mayor que el de los extractos crudos, manifestando una vez más la importancia
del fraccionamiento bioguiado en la búsqueda de compuestos activos. Además, queda validado
el uso etnofarmacológico de ambas especies en afecciones relacionadas con infecciones
fúngicas.
Bibliografia
1Martínez, R., Bonplandia 1964, 322.
2López, S. et al, Phytochemistry 2006, 2152.
3Kubo, I. et al, J Nat Prod 1988, 22.
4CLSI Method M-27-A2 y M-38-A, Vol 22(15), 1.
Agradecimientos
CONICET, ERASMUS MUNDUS Lot 18, ANPCyT, UNR y UNT. ¬
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3
Relevamiento etnofarmacobotánico y caracteres anatómicos
de “suelda consuelda”: Catasetum macroglossum Rchb. f.
(Orchidaceae)
Ramos Corrales P.1,2, Colares M.2, Di Bernardi T.2, Debenedetti S.2, Spegazzini E.2,
Rosella M.2
1
2
Secretaria Nacional de Ciencia y Tecnología (SENACYT), Ecuador
Universidad Nacional de La Plata, Buenos Aires, Argentina CP 1900
Introducción
Ecuador es considerado uno de los países que poseen la mayor biodiversidad del mundo, y
donde la población local mantiene sus tradiciones ancestrales en lo referente al uso de remedios
naturales (Naranjo y Escaleras, 1995). Se realizo el relevamiento etnobotánico de las especies
vegetales utilizadas en la medicina tradicional del cantón Quevedo, siendo C. macroglossum la
única especie de Orchidaceae citada. Dado que no existen datos científicos acerca de su
anatomía y a fin de validar el uso popular de esta especie y proveer elementos que puedan
contribuir a su identificación y control de calidad, se realizó, continuando el trabajo presentado
en SILAE 2009, la observación con microscopio óptico (MO) y microscopio electrónico de barrido
(MEB) de los elementos histológicos presentes en distintos órganos de C. macroglossum.
El presente trabajo se llevó a cabo en tres zonas del cantón de Quevedo en la provincia de Los
Ríos, Ecuador, entre los años 2008 y 2009 mediante la realización de un estudio
etnofarmacobotánico por el método de asociación de ideas, (Arruda Camargo, 1998). Las entrevistas a los “sanadores” fueron filmadas, con su consentimiento informado. Simultáneamente se
realizaron encuestas a otras 76 personas de diferente formación académica y nivel social,
indagándolos respecto a sus conocimientos sobre el uso tradicional de plantas medicinales y
especialmente acerca de la “suelda consuelda”. Las observaciones microscópicas con MO se
efectuaron sobre hojas diafanizadas y cortes transversales de hojas, raíz y pseudobulbos de C.
macroglossum, coloreados con safranina-fast green. Las observaciones y fotomicrografías se
efectuaron en el Servicio de Microscopía Electrónica de Barrido del Museo de La Plata.
Resultados
Los sanadores citaron 69 especies a las que se les atribuyen propiedades medicinales, de las
cuales C. macroglossum fue la única de la familia Orchidaceae. Las otras 76 encuestas, revelan
que todos los entrevistados conocían a C. macroglossum como “suelda consuelda”, la empleaban
para las mismas dolencias, difiriendo solamente en la manera de utilizarla. La presencia en las
hojas de rafidios, disposición y porcentaje de los dos tipos de estomas presentes; stegmata,
papilas y muy escasos tricomas, sumado a las características del velamen y pseudovelamen y
presencia de idioblastos traqueoidales en la raíz, fueron los caracteres diagnósticos más importantes.
Conclusiones
C. macroglossum, planta autóctona que crece en las cuatro regiones naturales del país, fue la
única especie de Orchidaceae citada por los “sanadores” y demás habitantes entrevistados,
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quienes la conocían por el mismo nombre vulgar y la utilizaban en forma tópica por sus propiedades antirreumáticas y antiinflamatorias. Los elementos histológicos descriptos pueden ser
caracteres de diagnóstico útiles para la identificación de C. macroglossum y eventualmente
contribuir a su control de calidad.
Referencias
1. Arruda Camargo, M.T. 1998. Plantas medicinais e de rituais afro-brasileiros II: Estudo etnofarmacobotanico. Ícone
editora. São Paulo, Brasil
2. Naranjo, P., Escaleras, R. 1995. La Medicina Tradicional en el Ecuador. Corporación Editora Nacional, Quito, p. 192cc
¬
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3
Anatomia foliar y caulinar de dos especies medicinales nativas
de Argentina: Mikania micrantha y Mikania cordifolia
(Asteraceae)
Colares M.1, Arambarri A.1, Rosella M.2, Di Bernardi T.2, Spegazzini E.2
2
1
Cátedra de Morfología Vegetal, Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales
Cátedras de Farmacobotánica y Farmacognosia, Facultad de Ciencias Exactas.
Universidad Nacional de La Plata, CP 1900, Buenos Aires, Argentina
Introducción
El género Mikania Willd. (Asteraceae) comprende cerca de 430 especies de plantas perennes
trepadoras de las regiones tropicales y subtropicales de América. En Argentina está representado
por 35 especies (Zuloaga et al., 2008). Mikania micrantha Kunth. y Mikania cordifolia (L. f.) Willd.
“guacos” son trepadoras herbáceas que crecen en la provincia de Buenos Aires que presentan
reconocidas propiedades medicinales como alexítera, antirreumática, antiespasmódica, antiinflamatoria, expectorante y broncodilatador (Carollo, 2008). Esto las hace potencialmente útiles
para la elaboración de medicamentos fitoterápicos, por lo cual hemos establecido las
características micrográficas que permitan su segura identificación.
Material fresco colectado en las Reservas Naturales Integrales de Punta Lara e Isla Martín
García (Buenos Aires, Argentina) se fijó en formalina aceto-alcohólica (F.A.A.). Un ejemplar de
cada especie fue depositado en el Herbario (LPAG), del Área de Botánica, Facultad de Ciencias
Agrarias y Forestales, UNLP Para estudios epidérmicos se empleó la técnica de diafanización de
Dizeo de Strittmatter (1973). Se efectuaron cortes transversales con micrótomo Ranvier de tallos,
pecíolo y lámina, empleándose diferentes técnicas de coloración y montaje. Para las observaciones se utilizó un microscopio óptico Leitz SM Lux equipado con cámara clara y se obtuvieron
imágenes con un microscopio óptico Gemalux equipado con una cámara color PAL CCD capturadas y digitalizadas por medio del software Hyper Media Center. En los esquemas se emplearon
los símbolos de Metcalfe & Chalk (1950).
Resultados
Sobre material de hojas diafanizadas de ambas especies se analizaron las células epidérmicas y
ornamentación cuticular; asimismo, se determinó el tipo de estomas y tricomas. Se calcularon los
Índices de Estomas (Salisbury, 1927) y de Empalizada (Zorning & Weiss, 1925). Mediante los cortes
transversales se analizaron las estructuras de lámina, pecíolo y tallo, las cuales fueron esquematizadas y capturadas y digitalizadas.
Conclusiones
Analizada la epidermis foliar y las estructuras anatómicas de lámina, pecíolo y tallo de M.
micrantha y M. cordifolia hemos determinado características que permiten la diferenciación entre
ambas especies (índice de estomas, de empalizada, tricomas) cuando las mismas se encuentren
enteras, fragmentadas o pulverizadas
Referencias
1. Zuloaga F., O. Morrone & M.J. Belgrano (eds.) Catálogo de las plantas vasculares del Cono Sur 2: 1-2286.
186
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2. Carollo, C. A. Analise fitoquímica e avaliação dos efeitos dos tipos de adubação, da radiação solar e do estresse
hídrico, no acúmulo de metbólitos secundários em espécies do gênero Mikania. Tese de Doutorado .Universidade
de São Paulo.2008.
3. Dizeo de Strittmatter C. 1973. Bol. Soc. Argent. Bot. 15: 126-129.
4. Salisbury E. 1927. Phil. Trans. R. Soc. Lond., Ser B 216: 1-65.
5. Zorning & Weis. 1925. Beitrage Zur. Anatomie des Laubblattes offzineller und Pharmázeutisch gebráuchlicher.
Compositern-Drogen. ¬
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3
Cytotoxic evaluation of a 9,10-phenanthrene derivative
isolated from the bark of Banisteriopsis anisandra (A. Juss) B.
Gates (Malpighiaceae)
Boaventura Maria Amélia, Freitas Luiza Baptista de Oliveira, Ditzz D.,
Lopes Mirian Teresa Paz
Introduction
Banisteriopsis anisandra (A. Juss) B. Gates, popularly known as “cipó de prata” (“silver liane”)
or “perinha”, occurs in Cerrado region of Brazil 1. The macerate of its leaves is employed in folk
medicine as topical antimycotic. The aim of this work was to evaluate the cytotoxic activity of a
9,10-phenanthrene derivative isolated from the bark of B. anisandra against a tumoral and nontumoral cell line.
Experimental
4,6 mg of hexanic extract of bark of B. anisandra were chromatographed through silica gel
column, eluted with hexane-CH 2Cl2 (1:1) to afford a fraction rich in a yellow substance. This
fraction (56 mg) was then chromatographed through thin layer preparative chromatography on
silica gel, eluted with hexane-ethyl acetate (85:15), to afford 32,4 mg of a pure yellow solid,
identified using 1D and 2D NMR techniques as 2,8-dihydroxy-6-methoxy-7-methyl-9,10dihydrophenanthrene-1-carbaldehyde.
The cytotoxicity assay was evaluated using the MTT assay 2, with the following cell lines: human
malignant melanoma (MeWo) and Chinese hamster ovary cells (CHO). The pure substance was
tested in the concentrations of 5, 10, 20 and 30μg/mL. The extent of MTT reduction to formazan
within cells was measured by absorbance at 600 nm using a scanning microplate reader. Cultures
used as controls did not receive the sample. The percentages of inhibition of cell viability were
calculated with the values of viability of cell exposed to the sample and with non-exposed cells,
using the software GraphPad Prisma 5.0. The 50% inhibitory concentrations for cellular population
(IC50) were calculated by nonlinear regression in the same software.
Results and Discussion
The substance 2,8-dihydroxy-6-methoxy-7-methyl-9,10-dihydrophenanthrene-1-carbaldehyde
demonstrated a promising activity against human malignant melanoma (MeWo) (5,1μg/mL). On
the other hand, it was cytotoxic towards the Chinese hamster ovary cells (CHO), a normal cell
line.
Referencias
1. Gates, B.. Banisteriopsis, Diplopterys (Malpighiaceae). Fl. Neot. Monograph, New York Botanical Garden, Nova
Iorque, p. 150-152, 1982.
2. Denizot, F.; Lang, R.. Rapid colorimetric assay for cell growth and survival-modification to the tetrazolium dye
procedure giving improved sensitivity and reliability. J. Immun. Meth., vol. 89, p. 271-277, 1986. ¬
188
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3
Encapsulamento de aromas/aditivos naturais para aplicação
em matrizes alimentares
Sandra Dias Santos1, Sandrine da Ressurreição1, David Gomes1,
Cristiana Valente Santos1, Rui Filipe Marques1, Aida Moreira da Silva1,
Manuela Pintado3
1
2
Escola Superior Agrária de Coimbra, Instituto Politécnico de Coimbra
Departamento de Engenharia Química, Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra
3
Escola Superior de Biotecnologia, Universidade Católica Portuguesa
O objectivo principal deste trabalho passa pelo desenvolvimento de diferentes produtos
alimentares, mais atractivos e agradáveis do que os clássicos equivalentes, e que complementem
o seu valor nutritivo intrínseco com novas valências funcionais úteis para a saúde, como seja o
incremento da actividade antioxidante. A escolha dos produtos a modificar recaiu sobre três
produtos lácteos, nomeadamente o queijo fresco, o queijo de barrar e a manteiga, tendo em
conta a prática experimental à escala piloto disponível na ESAC. A modificação destes três
produtos passou essencialmente pela adição de compostos aromáticos naturais (coentro e
salsa), não só pela já demonstrada aceitabilidade ao paladar português, mas também tendo em
conta o seu potencial antioxidante e antimicrobiano. Aqueles aromas foram adicionados aos
produtos lácteos em duas formas distintas: sob a forma de plantas frescas, cultivadas na ESAC,
previamente lavadas, desinfectadas e destroçadas em pedaços de tamanho grosseiramente
controlado, e na forma de óleos essenciais aqui extraídos (clevenger) a partir das mesmas
plantas. A incorporação dos pedaços de plantas naqueles produtos lácteos, com uma distribuição
tão boa quanto possível para não afectar as características reológicas de cada produto final, foi
conseguida numa fase do processamento em que a consistência do produto, por si só, ajudava à
retenção dos aditivos vegetais. A adição dos óleos essenciais passou pelo seu aprisionamento em
microcápsulas, usando em particular ciclodextrinas. O produto final foi avaliado sensorialmente,
através de um painel de provadores não treinado. ¬
189
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3
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE Y ANTIBACTERIAL DEL EXTRACTO
ETANOLICO DE LAS HOJAS DE Machaerium Floribundum
(Benth)
*
Díaz Lorena1, De Montijo Soumi1, Medina Ana1, Marti-Mestres Gilberte2,
Vian Laurence2, Meléndez Pablo1
1
Facultad de Farmacia y Bioanálisis Universidad de Los Andes. Mérida Venezuela 5101
2
Facultad de Farmacia. Universidad de Montpellier I. Montpellier, Francia
*[email protected]
Los antioxidantes previenen el daño tisular causado por los radicales libres y estimulan la
recuperación del tejido cutáneo. Propionibacterium acné y Staphylococcus epidermidis han sido
reconocidas como bacterias implicadas en el proceso inflamatorio del acné. En este estudio se
evaluó la actividad del extracto etanolico de las hojas de Machaerium floribundum sobre la
viabilidad de células de fibroblastos dérmicos tratadas con peróxido de hidrogeno, la capacidad
secuestrante de radicales libres por el método del 2,2-difenil-2-picrihidracil (DPPH), el Poder
reductor y el efecto antibacteriano sobre Propionibacterium acné y Staphylococcus epidermidis. El
material vegetal fue recolectado en la Estación Experimental de Caparo de la Universidad de Los
Andes en el estado Barinas, Venezuela, secado a 45 C por 72 horas y molido. El extracto etanólico
se preparo por maceración a temperatura ambiente y en la oscuridad por 8 días, se filtro, y el
solvente se evaporo a 45ºC en rotavapor. La protección sobre la viabilidad celular se determinó
en fibroblastos (BALB/c 3T3), tratados con peróxido de hidrogeno y cultivados en medio DMEM
[1]. El% de viabilidad se evaluó después de 24 horas de incubación a 37°C por el Test de Rojo
Neutro [2]. La actividad antioxidante se valoró por el Test DPPH [3] y fue complementada por la
determinación del Poder reductor [4]. La actividad antibacteriana fue determinada por el Método
de difusión en agar [5] y se evidenció por la presencia de halos de inhibición. El extracto de
Machaerium floribundum mostro un porcentaje viabilidad de las células de fibroblastos de 90% a
62,5ug/ml y alcanzo una actividad secuestrante del radical libre DPPH mayor del 90% a 100μg/ml,
mostrando CI50 de 34μg/ml. El poder reductor fue dependiente de la concentración. Los resultados indicaron que el extracto presento un alto potencial secuestrante de radicales libres a concentraciones relativamente bajas y mostro buena actividad antibacteriana contra
Propionibacterium acné y Staphylococcus epidermidis.
Referencias
1. Kofi Annan, Houghton Peter. (2008) Antibacterial, antioxidant and fibroblast growth stimulation of aqueous
extracts of Ficus asperifolia miq. And Gossipium arboretum L Wound-healing plants of Ghana. Journal
Ethnopharmacology, 119, 141-144.
2. Test Method protocol for the NHK Neutral Red Uptake Cytotoxicity -Validation Study. Phase III (2003) National
Institute of Environmental Health Sciences(NIEHS). Department of Health and Human Services.
3. Goupy p, Hugues M, Boivin P, Amiot M. (1999) Antioxidant composition and activity of barley (Hordeum vulgare)
and malt extracts and of isolated phenolic compounds. Journal of the Science of Food and Agriculture, 79, 1625-1634.
4. Palanisamy M, Chi-Lin Wu, Hui-Ting Chang, Shang-Tzen Chang. (2008) Antioxidant activity of the ethanolic extract
from the bark of Chamaecyparis obtuse var. formosana. Journal of the Science of Food and Agriculture, 88, 14001405.
5. Hayes A.J , Marcovic B. (2002) Toxicity of Australian essential oil Backhousia citriodora (Lemon myrtle). Part 1.
Antimicrobial activity and in vitro cytotoxicity. Food and Chemical Toxicology. 40, 535-543. ¬
190
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3
A study on the hypoglycaemic activity of Bauhinia variegata
Mary Veronica Clancy1, Trevor Hodgkins1, Fabio de Sousa Menezes2
2
1
Department of Botany, Faculty of Sciences, Trinity College Dublin, Ireland.
School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Faculty of Health Sciences,
Bauhinia variegata is a member of the Fabaceae and is distributed pantropically. It is found in
Brazil, India, the Americas, Asia and Africa. The medium sized tree boasts large showy flowers
that range in colour from pale pink and blue to magenta. The lobed leaves give rise to the
Brazilian name “pata-de-vaca”, which means literally “cows foot”. B. variegata is consumed as a
tea to treat diabetes type 1 by indigenous people in Brazil and other countries. Diabetes is a
widespread disease that is characterised by significantly raised blood glucose levels. It is thought
that flavonoids are responsible for this hypoglycaemic activity. A crude ethanol extract of B.
variegata was the substrate for different chromatographic techniques. Following many separation procedures, the structures of two flavonoids were determined by NMR assay: Rutin and
Afzelechin. A rat/mouse insulin ELISA kit was used to determine if B. variegata displays hypoglycaemic activity. The results showed that increasing concentrations of the ethanol extract of B.
variegata yielded increasing observed insulin levels. 10, 50 and 100μg ml -1 of sample produced
observed insulin concentrations of 0.232, 0.350 and 0.530ng ml -1 respectively (when compared
with DMSO used as control = 0.195ng ml-1). The results from the ELISA kit show that the purified
extract, at different concentrations, stimulates the release of insulin from pancreatic cells. This
study confirms that Bauhinia variegata displays hypoglycaemic activity which could be explained
partially by the presence of flavonoids. ¬
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3
Effect of standard -20ºc frozen storage on proteolytic activity,
texture and tissue quality of giant squid (Dosidicus gigas)
muscle
*
Dublán García O.1, Gómez-Oliván L.M.1, Quintero-Salazar B.2, Romero Castillo C.A.3
1
Facultad de Química, Universidad Autónoma del Estado de México.
2
Centro de Investigación y Estudios Turísticos, Facultad de Turismo, UAEM.3Instituto Irlandés.
Fuente de Leones 107, Col. Lomas Hipódromo, Estado de México. CP. 53950
*
[email protected]
Giant squid (Dosidicus gigas) is a cephalopod of the Ommastrephes genus found in abundance
in the Pacific coast of Mexico, mainly in the Gulf of California. Usually is transported on ice,
despite the fact that this method promotes considerable quality deterioration due to high
proteolytic activity. Several authors have reported that the existence of proteases in squid
muscle can cause myosin degradation and suggested that the proteolysis might influence the
textural quality of cooked squid meat. The objective of this work was to study the effect of
frozen storage at -20ºC on proteolytic activity and structural changes in giant squid muscle.
Animals were caught in average 12 hours before sampling, and packed in individual plastic bags
and stored at -20ºC during three months and the samples were taken until analysis. The extraction of proteases was carried out with 25 mM phosphate buffer, pH 7, 0.9% NaCl. Protease activity
was determined by Kunitz (1947) and Anson (1980) methods, using 1% casein and hemoglobin in
25 mM phosphate buffer, pH 7 as substrate for alkaline and acidic proteases respectively.
Changes in the microscopic structure were analyzed each month of storage at -20ºC in a scanning
electron microscopy (SEM). Temperature and pH optimum of the maximum enzymatic activity
were determined, finding 35ºC as the maximum enzymatic activity and pH optimum activity was
at a pH 2.7, 3.1, 6.1, 7.3 and 7.6 . Proteolytic activity was decreasing during storage; however the
residual activity caused changes in miofibrillar structure. SEM showed disturbances in tissue
structure increasing damage during frozen storage. Biochemical parameters such as changes
(decreases) in the enzymatic activity of seafood muscles, or in the susceptibility of seafood
proteins to the effects of various proteolytic enzymes, are sensitive indicators for monitoring
protein denaturation as a consequence of conformational changes that may occur during frozen
storage that give information about the best way to storage seafood.
Keywords: squid, proteolytic activity, SEM. ¬
192
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3
Effect of soybean on the gelling properties on prototype
“surimi”
*
Dublán García O., Zamudio Quintana D., Hernández Navarro Ma.D.,
Gómez-Oliván L. M., Santamaría González G. O.
Paseo Colón y Paseo Tollocan S/N, Toluca México C.P. 50120
*
[email protected]
The importance of fish proteins is increasing due to its increased commercial availability to get
surimi using fish meat as the raw material. The giant squid (Dosidicus gigas) and rainbow trout
(Oncorhynchus mykiss) are highly available in Mexico with a high nutritional value and low economic value; however, squid is scarely used due its low gellification capacity. Adding ingredients
such as soybean can be used to improve the mechanical and functional properties of gels. The
objective of this study was to evaluate the effect of soybean on the gelling properties of mixtures of squid-trout to develop a “surimi” prototype. Myofibrillar proteins were extracted by
solubilization of squid or trout in a high ionic strength solution. Protein extracts were adjusted to
25 mg/mL of soluble protein, and mixed in different proportions 90:10, 35:65, 50:50, 65:35, or
10:90, respectively. The best proportion was blended with soybean in different concentrations
0.0, 1,0, 1,5, 2,0 and 2.5%. Gels were formed by heating protein extract from 24°C to 80°C at a rate
of 1°C/min, and kept at 4°C/24 hrs. Gel strength and deformation curves using a texturometer,
with 50% penetration at 25 mm/sec were obtained. The highest gel strength was obtained with
trout; the best textural properties with squid-trout was 25:75% with mean values of 1,85 N
(P<0,001). By combining myofibrillar protein squid and trout with soybean, the best textural
properties was at 2% soybean. The prototype selected obtaining the best textural properties was
compared with a commercial prototype surimi, having similar textural characteristics, mainly
related to the hardness of the gels (2,85 N) (P<0,001). Optical microscopy showed good interactions between meat proteins and vegetal proteins. Information obtained in this work provides an
alternative use of giant squid or rainbow trout as analogs substitutes to develop new functional
food as surimi, in addition soybean as technological additive.
Keywords: trout, soybean, squid ¬
193
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3
Effects of adding inulin on rainbow trout
(Oncorhynchus mykiss) surimi gels
Dublán García O.1*, Vera Hernández O.E.1, Quintero-Salazar B.2,
Gómez-Oliván L.M.1, Romero Castillo C.A.3
1
2
Centro de Investigación y Estudios Turísticos, Facultad de Turismo, UAEM
3
Instituto Irlandés. Fuente de Leones 107, Col. Lomas Hipódromo, Estado de México. CP. 53950
*
[email protected]
Inulin has been used in many countries to replace fat or sugar and reduce the calories of foods
such as ice cream, dairy products, confections and baked goods, however, in some studies, it has
been used as gellificant due to its structure. The objective of this work was to study the addition
of inulin on gels from surimi made with rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) with the purpose of
achieving a better understanding of the phenomena to improving gels. Post rigor muscles of
trout were partially trimmed of fat and epymysial connective tissue. Myofibrillar proteins were
extracted by solubilization in high ionic strength solution. Protein extracts were adjusted to 25
mg/mL of soluble protein. Gels were formed by heating protein mixtures from 24 up to 70° C at a
rate of 1° C/min, and then kept at 4° C during 24 hrs. On the other hand, 25 mg/mL of soluble
protein was mixed with inulin (0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3%), and carry out the gels. Deformation
curves were recorded in gels in a texturometer EZTest Shimadzu (Japan), with 50% penetration at
2.5 mm/sec. The highest gel strength was obtained in gels containing 2,5% inulin (P<0.01). Optical
microscopy showed that trout myofibrillar proteins interacted cooperatively with inulin to form a
stable gel matrix. Information obtained in this study can be used to obtain a better understanding of the seafood gelling process in presence of inulin.
Keywords: inulin, trout, gellification. ¬
194
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3
Short process for manufacturing Oaxaca cheese by direct
acidification
Colín-Cruz M. A., Portilla-Mancilla I. D., Alvarado-López A.N., Espinoza-Herrera N.A.,
Dublán-García O.
Departamento de Alimentos, Facultad de Química, Universidad Autónoma del Estado de México
Paseo Colón y Paseo Tollocan S/N, Toluca 50 000
Oaxaca cheese is a typical Mexican pasta filata. It is one of the most consumed cheeses in
Mexico. Farmhouse cheese is manufactured using naturally acidified milk; in industrial process
milk is pasteurized and starters are used in order to get milk acidification. In both processes, time
for getting pH (5.2-5.3) is long (5 hours or more). The aim of this study was manufacturing
Oaxaca cheese by direct acidification in order to reducing time of manufacture.
Sets of 15 L of milk were pasteurized (73°C, 15 s), and lactic acid, chlorhidric acid and citric acid
were used for reducing pH at 5.6. Pure chymosin was used for clotting milk. A control cheese was
manufactured using a starter (Lc. lactis ssp lactis and Lc. lactis ssp cremoris). Chemical (AOAC),
texture (EZTest Shimadzu) and sensorial analysis (preference test) were carried out in cheeses
during storage (4°C), at days 1, 8, 15 and 22. No differences in moisture, fat and protein were
observed in cheeses manufactured by direct acidification; moisture in control was higher.
Firmness was lower and cohesiveness and adhesiveness were higher in control; the opposite was
observed in direct acidification cheeses. Acceptability was better in control, and among direct
acidification cheeses, those manufactured with citric acid had the best acceptability. Oaxaca
cheese is used as an ingredient in typical Mexican foods, so, taste couldn’t be very important
because it is masked by other components of food. During storage, little changes were observed
in texture and sensory parameters of direct acidification cheeses. Shelf life in control cheese is of
3 weeks, while in direct acidification cheeses was extended to 5 weeks. Direct acidification
reduces time of manufacture in more than 60% and allows keeping texture for a long time. These
results could be of interest for artisans who use (long) natural acidification.
Keywords: direct acidification, Oaxaca cheese. ¬
195
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3
Red mangrove protects gastric mucosa through increase of
COX-2 and EGF expression
de-Faria F.M.2, Silva M.A.3, Luiz-Ferreira A.1, Almeida A.C.A.1, Dunder R.J.2,
Takayama C.1, Socca E.A.R.1, Vilegas W.3, Souza-Brito A.R.M.S.1
1
Depto. de Anatomia, Biologia Celular, Anatomia e Fisiologia e Biofísica, Instituto de Biologia,
UNICAMP, Campinas/SP, Brasil
2
Depto. de Farmacologia, Faculdade de Ciências Médicas, UNICAMP, Campinas/SP, Brasil
3
Depto. de Química Orgânica, Instituto de Química, UNESP, Araraquara/SP, Brasil
Background
The pharmacological research has been focusing on the folk medicine knowledge in the order
to establish the scientific basis of their pharmacological effects. Nowadays, tannins play a prominent role because of its high antioxidant capacity. Rhizophora mangle is well known in the
Caribbean folk medicine for its anti-inflammatory, antifungal, antibacterial, anti-ulcer, antihypertensive and antioxidant properties.
Objectives
This study aimed to evaluate the role of R. mangle bark buthanolic fraction (fr-BuOH) on the
expression of COX-2 and EGF.
Methods
The acetic acid-induced gastric ulcer model were carried out the determine the mechanisms
besides the anti-ulcer effects of fr-BuOH (0,5 mg.Kg -1). Western blot analysis were done to
evaluate the expression of COX-2 and EGF on gastric mucosa of male unib:WH rats (180-200g)
submitted to experimental ulcer model.
Results
It was found that the fr-BuOH providing protection to gastric mucosa through the increase of
COX-2 and EGF expression. The both, COX-2 and EGF play an important role on the homeostasis
of the gastric mucosa promoting mucous generation, blood flow and cell recruitment. Several
studies has been shown the importance of the increased COX-2 expression in wound healing of
the injuried gastric mucosa, moreover, the enhance of COX-2 expression are linked to the EGF
expression. Are known that COX-2 controls mucosa protection mechanisms like re-epithelization,
agiogenesis e adaptative cytoprotection.
Acknowledgements: FAPESP ¬
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3
La biodiversidad como fuente de sustancias de valor agregado
Fernando Echeverri, Sandra Zapata, James Jiménez, Winston Quiñones
Universidad de Antioquia y ECOFLORA
Grupo de Química Orgánica de Productos Naturales-SIU
AA 1226-MEDELLIN-COLOMBIA
[email protected]
La biodiversidad se ha enfocado principalmente como fuente de moleculas bioactivas, es decir,
sustancias que poseen una acción modificadora importante sobre un sistema bioquimico, humano, animal o vegetal, como tal ha sido el origen de muchos medicamentos y sustancias
tóxicas. No obstante existe otro renglón muy importante de materiales, cuya peso especifico en
la industria farmoquímica es muy importante, pero que ha permanecido desapercibido. Ese
renglón se relaciona con insumos indispensables en la industria cosmética, alimentos y bebidas.
En este caso en particular se ha estudiado la obtención, caracterización y aplicaciones de varios
tipos de sustancias tales como Colorantes, Surfactante y Cera, de fuentes naturales sostenibles y
con procesos ecológicamente limpios y seguros..
Agradecimientos
1. Los autores agradecen a la Universidad de Antioquia y ECOFLORA (Cloombia) la financiación de los trabajos
mencionados ¬
197
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3
Etnofarmacognosia de Schinus patagonicus
(anacardiaceae)
Toledo I.B.1,2, Kritsanida M.3, Michel S.3, Tillequin F.3, Cordoba O.L.4, Flores M.L.1,2
1
Farmacognosia
Carrera de Doctorado en Farmacia
4
Química Biológica II, CRIDECIT - FCN - UNPSJB, Km 4, 9000,
Comodoro Rivadavia, Chubut, Argentina
1
[email protected]
3
Laboratoire de Pharmacognosie, UMR CNRS 8638,
Université Paris-Descartes, 4 av. de l’Observatoire, 75006 Paris, Francia
2
La familia Anacardiaceae, a la que pertenece Schinus, incluye aproximadamente unas 600
especies. El área de distribución abarca ambientes variados, lo cual supone una variabilidad
también importante en cuanto a los patrones biosintéticos. En cuanto a Schinus, para la región
patagónica en el Distrito Golfo San Jorge y en la Comarca Andina, se han definido entre otras
especies, Schinus johnstonii F.A. Barkley y S. patagonicus (Phil.) I.M. Johnst. & Cabrera, respectivamente. Muchas de las especies vegetales nativas han sido usadas con fines medicinales por
distintas culturas (especialmente por tehuelches y mapuches), destacándose entre otras Schinus
patagonicus, “laura”, “litrecillo”, que habita la comarca andina y se destaca en medicina tradicional como antirreumático y antiséptico. En este trabajo presentamos resultados del estudio de S.
patagonicus. Para ello se colectaron las hojas en el período estival de 2008, en la Comarca Andina
de Chubut, en Trevelin Departamento de Futaleufú. El material se secó a temperatura ambiente y
al abrigo de la luz, se molió y tamizó, se extrajo con etanol de 96° y se fraccionó mediante cambios de pH y partición con solventes (1). Por otra parte se efectuó una extracción exhaustiva con
solventes de polaridad creciente (2). Para las fracciones polares se desarrollaron perfiles
cromatográficos de flavonoides. Las fracciones clorofórmica (de 1) y de éter de petróleo (de 2),
fueron subfraccionadas mediante cromatografías en columna convencional, agrupando las
semejantes según los perfiles planares sobre TLC y analizándolas por RMN y MS. Los extractos
etanólico y acuosos fueron además analizados mediante el método de inhibición del DPPH a fin
de analizar las propiedades antioxidantes. Las fracciones polares, etanólica y acuosas, evidenciaron flavonoides destacándose flavonas y flavonoles, entre ellos quercetina y derivados glicosilados. A partir de una columna preparativa realizada con la fracción clorofórmica, se obtuvieron 17
fracciones, de las cuales una de ellas se volvió a purificar mediante una segunda columna, obteniéndose un producto puro de naturaleza terpénica coincidente con el lupeol. Otra columna,
efectuada con el extracto de éter de petróleo exhaustivo, dio lugar a 60 fracciones, varias de las
cuales se analizaron mediante 1H-RMN, 13C-RMN, RMN bidimensional. Se pudo determinar la
presencia de dos probables compuestos, uno del grupo de los terpenos (relacionado con el
lupeol) y otro con una estructura esteroidal.
El estudio de actividad antioxidante evidenció 94 - 99% de inhibición del DPPH, lo cual guarda
relación con los flavonoides evidenciados en los perfiles cromatográficos.
Los resultados obtenidos muestran un perfil biosintético complejo para S. patagonicus, a la vez
que sugieren una estrecha relación entre los compuestos hasta ahora detectados, con los usos
etnofarmacognósticos descriptos. Por ello continuamos avanzando en el estudio ya que consideramos que una profundización en el conocimiento químico y biofarmacológico, en relación al
hábitat y a la época del año, permitirá orientar el uso tradicional de la especie vegetal hacia un
uso racional y científico. ¬
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3
Plantas medicinales de la patagonia austral: una vision desde
la etnofarmacognosia
Monier P.1, Alcalde D.P.1, Escobar Daza M.D.1, Cangiano A.M.1, Uhrich A.V.2,3,
Pinto Vitorino G.3,4, Cordoba O.L.5, Enrici A.6, Flores M.L.1,3
1
Farmacognosia,
Farmacología II,
3
Carrera de Doctorado en Farmacia,
4
Química Medicinal,
5
Química Biológica II,
CRIDECIT - FCN - UNPSJB, Km 4, 9000, Comodoro Rivadavia, Chubut
6
Antropología y Estética, UNPA, Río Gallegos, Santa Cruz. Argentina.
1,3
2
La utilización de las plantas medicinales se practica de diferentes formas en todo el mundo,
formando parte en algunas sociedades, en las que cohabitan pueblos originarios y pueblos
inmigrantes occidentales de cosmovisión científica-tecnológica, de sistemas de Medicina
Tradicional Complementaria que coexisten con la Medicina convencional. Tales sistemas tradicionales se basan generalmente en el uso de productos naturales nativos o aclimatados (pero
ligados a la cultura y ambiente nativos), los cuales han sido empleados por culturas originarias
locales a partir de sus curanderos y machis, en un sentido médico diferente, puesto que la
práctica obedece a un ritual en el que se cree en una energía que sólo el médico nativo aporta y,
que en muchos casos, se ha transmitido hasta nuestros días. Cuando una persona describe el uso
de una planta, expresa en forma explícita y/o implícita conceptos y categorías de su propia
cultura. El nivel socioeconómico, la edad, la etnia y la profesión o actividad, son variables que
influyen en la distribución del conocimiento y en la creencia acerca del uso de las plantas medicinales de una comunidad.
La Etnofarmacognosia intenta rescatar no solo el uso tradicional de una especie, sino la forma
y el porqué de ese uso en el contexto cultural y ambiental en donde se localiza, considerando
además los metabolitos producidos, a fin de alcanzar un conocimiento integral que lleve a validar
la especie y generar pautas de uso racional en cuanto al cumplimiento de protocolos de lo que se
entiende por “cura”. Las culturas originarias que poblaron la Patagonia Austral aprovecharon los
recursos y transmitieron su importancia a sus descendientes, incluso hasta nuestros días.
Resultan destacables especies de la medicina tradicional tehuelche y tehuelche-mapuche, de las
cuales gran parte carecen de estudios que avalen sus usos etnofarmacéuticos. Teniendo en
cuenta esos aspectos, presentamos avances en el estudio de Colliguaya integerrima
(Euphorbiaceae), Suaeda divaricata (Chenopodiaceae) y Chuquiraga avellanedae (Asteraceae). La
partes usadas se colectaron en verano en el Distrito Golfo San Jorge; se secaron, molieron,
extrajeron con solventes polares y evaluaron mediante cromatografía, espectrofotometría y
bioactividad (citotoxicidad, antibiótica, antioxidante, antitumoral), según los principales usos
descriptos (antisépticos, para tumores y antiinflamatorios). C. integerrima, duraznillo patagónico,
colliguay, usada como antiséptico, antitumoral y en problemas odontológicos con aplicación
tópica, destacó derivados de kaempferol, datiscetina, taninos y carbohidratos. Presentó actividad antibacteriana frente a P. aeruginosa, E. coli y S. aureus (CIM= 0,25; 0,25; 0,50 mg/ml, respectivamente); la inhibición radicular, que infiere efecto antitumoral, fue de 95% con diluciones de
0,5% con efectos semejantes a la Vinblastina. La actividad antioxidante resultó importante, con
SC50<0,1μg/ml. S. divaricata, jume, antiescorbuto y antifebril, mostró flavanonoles y alta citotoxi-
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cidad. C. avellanedae, quilimbay, usada en gargarismos para afecciones de garganta y como
estimulante, presentó derivados de kaempferol y quercetina, carbohidratos y proteínas. La
capacidad antioxidante fue significativa, SC 50<10μg/ml. Los resultados alcanzados se relacionan
con los usos tradicionales, constituyendo un desafío para profundizar la investigación y validar
científicamente las especies. ¬
200
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3
Antiproliferative activity of diterpenes from Peltodon longipes
Fronza M.1, Günther S.2, Murillo R.3, Lamy E.4, Heinzmann B.5,
Laufer S.6, Merfort I.1*
1
2
Inst. Pharm. Science, Pharm. Bioinformatics, University Freiburg, Germany
3
Escuela de Quimica and CIPRONA, Universidad de Costa Rica, San José, Costa Rica
4
Dept. Environmental Health Science, University Freiburg, Germany
5
Departamento de Farmácia Industrial, Universidade Federal de Santa Maria, Brazil
6
Dept. Pharm./Medicinal Chemistry, University of Tübingen, Germany
*
[email protected]
Peltodon longipes (Labiatae), also known as “baicuru amarelo” in south of Brazil, has been
used in folk medicine as an anti-inflammatory and antiseptic remedy (1). The effective compounds responsible for these effects are still unknown. Here we report the isolation and structure elucidation of 12 diterpenes from the abietane type. 12,14-dihydroxy-11-methoxyabieta8,11,13-trien-7-one was isolated for the first time, whereas the other diterpenes have already been
known. Structure elucidation was based on 1D-( 1H and 13C) and 2D NMR experiments (COSY,
HMQC, HMBC and NOESY) as well as EIMS. Cytotoxic activity of these compounds was evaluated
by MTT against two different cancer cell lines, MIA PaCa-2 (Human Pancreatic Carcinoma Cell
Line) and MV3 (Human Melanoma Cell Line). 7α-acetoxyroyleanone, the major compound,
showed the highest cytotoxic activity with an IC50 value of 4.7 and 7.5μM, respectively. Moreover,
studies of 7α-acetoxyroyleanone on the cell cycle resulted in an significant arrest in the S-phase
after 24 h of treatment. However, those cyclin dependent kinases that mainly regulate the cell
cycle were only slight inhibited. Interestingly, some diterpenes preferentially inhibited
topoisomerase-I in the relaxation assay and gave lower IC 50 values (2.8 and 4.7μM) than the
known classical topoisomerase-I inhibitor camptothecin (IC 50 28μM). Docking experiments
revealed that these diterpenes may target topoisomerase-I differentially to camptothecin. While
camptothecin stabilizes type I topoisomerase-DNA complexes, there is evidence that the diterpenes compete with DNA for topoisomerase binding through direct interaction.
References
1. Mentz, L.A. et al. (1997) Caderno de Farmácia, 13: 25-48.
Acknowledgement
1. Financial support from the government Baden-Württemberg (Zukunftsoffensive IV) is gratefully acknowledged. ¬
201
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3
Evaluation of anti-mycobacterium tuberculosis activity of crude
extracts from penicilium oxalicum
Clarice Q.F. Leite1*, Caroline Fontanari2, Luiz A.B. Moraes2, Leticia S. Sato1,
Fernando R. Pavan1
1
2
UNESP, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, SP, Brazil
USP, Departamento de Química, Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto
*
[email protected]
Tuberculosis (TB) remains an important public health problem worldwide and the epidemiology of TB is severely affected by the development of multi-drug resistance. Natural products
and/or their semi-synthetic derivatives can lead to novel antimycobacterial drugs. This study
aimed to evaluate the antitubercular activity against Mycobacterium tuberculosis H37Rv (ATCC
27294) of crude extracts from Penicilium oxalicum. P. oxalicum was fermented at four different
culture media. The bioactives compounds in the crude extracts were identified through bioautography assay coupled the mass spectrometry (MS) by easy ambient sonic spray ionization (EASI)
methodology. Dereplication analysis using ESI-MS and MS/MS enabled the identification of four
alkaloids compounds. Fifteen crude extracts showed anti-M. tuberculosis activity ranging from
MIC of 62.5 to>250μg/mL. The better results of 62.5μg/mL were verified for corn hominy extract.
This investigation constitutes the first report of a chemical and antitubercular study in different
culture media from P. oxalicum.
Financial support
1. FAPESP and CNPq. ¬
202
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3
Potencialidades biológicas de triterpenos quinonametídeos e
alcalóides sesquiterpênicos piridíndicos de Maytenus ilicifolia
Vânia Aparecida de Freitas Formenton Macedo dos Santos1,
Maria José Soares Mendes Giannini2, Ana Marisa Fusco-Almeida2,
Márcia Aparecida Silva Graminha2, Regina Maria Barretto Cicarelli2,
Ana Maria Soares Pereira3, Maysa Furlan1
1
NuBBE, Dep. Química Orgânica, Instituto de Química, UNESP-Araraquara, SP, Brasil
2
Faculdade de Ciências Farmacêuticas, UNESP-Araraquara, SP, Brasil
3
Depto de Biotecnologia - Universidade de Riberão Preto - UNAERP - Riberão Preto - SP, Brasil
Maytenus ilicifolia Martius é uma espécie medicinal nativa, da região Sul do Brasil, popularmente conhecida como “espinheira-santa”1. É explorada economicamente, devido a sua aplicabilidade na medicina popular e na indústria de Fitoterápicos, principalmente pela potente ação
antiulcerogênica, tendo sua ação comprovada no tratamento de úlceras gástricas. Em 1988, foi
aprovado seu uso como fitoterápico, pela Central de Medicamentos 2. Atualmente, muitas
indústrias farmacêuticas produzem e comercializam fitofármacos contendo essa espécie 3. Nesse
contexto, Maytenus ilicifolia (Celastraceae) se mostrou promissora para o estudo químico e
biológico, e suas raízes foram selecionadas devido a ocorrência de duas classes de substâncias
que tem apresentado potencialidades biológicas importantes, incluindo os triterpenos
quinonametídeos e os alcalóides sesquiterpenicos piridínicos. O estudo fitoquímico das raízes de
Maytenus ilicifolia culminou no isolamento de quatro alcalóides piridínicos sesquiterpênicos e de
dois triterpenos quinonametídeos. A identificação das estruturas químicas foi realizada por
análises de EM e RMN.
Essas substâncias foram submetidas á avaliação antifúngica frente aos fungos Candida albicans
(Ca), C. krusei (Ck), C. parapsilosis (Cp), e Cryptococcus neoformans (Cn); leishmanicida frente á
Leishmania amazonensis (La) e Leishmania chagasi (Lc); frente á cepa Y de Tripanossoma cruzi (Y) e
frente às seguintes linhagens tumorais: B16 (melanoma), Hela (colo uterino) e U343 (astrocitoma
cerebral). Os dados de bioatividade revelaram potente ação antifúngica, antitumoral e tripanocida dos triterpenos quinonametídeos, quando comparado aos respectivos controles positivos,
fluconazol, antinomicina, pentamidina, anfotericina e benznidazol, respectivamente, enquanto
um alcalóide sesquiterpênico piridínico apresentou ação três vezes mais potente que o padrão
positivo (pentamidina), frente a L. chagasi. O presente trabalho descreve os triterpenos
quinonametídeos e os alcalóides piridínicos sesquiterpênicos como constituintes do metaboloma
de M. ilicifolia corroborarando o potencial farmacológico notável da “espinheira-santa” e a
possibilidade de extensão do seu uso terapêutico no combate a doenças negligenciadas, em
pacientes imunodeprimidos e como agente antitumoral.
Referencias
1. Leite, J. P et al., Journal of Agricultural and Food Chemistry, v. 49, p. 3796-3801, 2001.
2. Di Stasi, L. C et al., Journal of Ethnopharmacology, v. 77, p. 41-47, 2001.
3. Soares, L. A. L. et al., Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, v. 36, p. 787-790, 2004.
Palavras chaves: tripanocida, leishmaniose, antifúngica, antitumoral, Maytenus ilicifolia ¬
203
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3
Estrategia estatal para la reproducción de plantas medicinales
de la Selva Baja Caducifolia Infiernillo-Zicuirán Reserva de la
Biosfera
García Calderón María Alfa,
[email protected]
Chávez Garibay Luis Raúl,
[email protected]
Facultad de QFB de la UMSNH, Av. Tzintzuntzan No. 173, Col. Matamoros, Morelia, Mich, CP. 58240
Moreno Díaz Juan,
[email protected]
Jacinto Díaz Wendolín,
[email protected]
Secretaria de Desarrollo Rural del Estado de Michoacán, Boulevard Arriaga Rivera No. 825,
Col. Chapultepec Oriente
Introducción
México se caracteriza por su diversidad en ecosistemas, además tiene la envidiable particularidad de poseer alrededor de 62 pueblos indígenas que conforman el mapa de su diversidad étnica.
La Selva Baja caducifolia decretada reserva de la biosfera en el estado de Michoacán se debió a la
gran diversidad registrada para la zona y la información en especies florísticas de las cuales 85
son endémicos a la depresión del balsas y 79 se encuentran en la nom-059-semarnat-2001,
protección ambiental-especies nativas de México de flora y fauna silvestres-categorías de riesgo y
especificaciones para su inclusión, exclusión o cambio-lista de especies en riesgo (nom-059semarnat-2001) en alguna categoría de protección; económicamente se trata de una zona en
marginación, con indicadores de desarrollo en niveles bajos, en la zona hay graves problemas de
salud, con alta incidencia de diferentes parasitosis, sobre todo en la población infantil. Se requiere con urgencia un grupo de proyectos que como el presente coadyuven a la preservación
del ecosistema. La reproducción de de plantas medicinales de la región que sean viables y la
capacitación a los productores interesados son el complemento necesario para cumplir con los
tratados internaciones sobre estas aéreas consideradas reserva de la biosfera.
Materiales y métodos
Colecta y recopilación de información genética en el territorio seleccionado, reproducción de
plantas, capacitación y difusión de las actividades. La investigación deberá dividirse en cuatro
ejes, botánico-taxónomo, farmacológico, medicamentoso y agronómico. Colectar los materiales
necesarios del campo para la reproducción y extracción en el laboratorio, para la reproducción se
realizaran pruebas de germinación en micro vivero, se ejercitará con los productores involucrados el mejor método de reproducción, se realizará la reproducción. La capacitación para productores sobre la importancia de las plantas medicinales de la región y su preservación así como su
uso racional.
Discusión
Las plantas se clasificaron de acuerdo a las enfermedades para las que fueron recomendadas,
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de cada enfermedad se escogieron las de mayor viabilidad para ser reproducidas, nos encontramos en ésta fase en el proyecto, la capacitación de los productores la realizamos en escala
primero con los técnicos y en un mes estaremos con 40 productores de la región.
Conclusión
Tenemos 70 plantas medicinales con información etnomédica tradicional de la Colección de
Plantas Medicinales de la Selva Baja Caducifolia de la Región Zicuirán-Arteaga, en reproducción a
pequeña escala, detectadas en su hábitat, estamos investigando la información científica sobre
las mismas.
Bibliografía
1. Comisión Nacional de Áreas Naturales Protegidas, 2006. “Estudio Previo Justificativo para el establecimiento de la
Reservad de la Biosfera Zicuirán Infiernillo”, México, D.F., pp. 181 + XXV anexos
2. “Colección de plantas medicinales de la Selva Baja Caducifolia de la región Zicuirán- Arteaga”, Fac. de QFB de la
UMSNH ¬
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3
Antimicrobial activity of Eupatorium spp
Edgar Garcia Sanchez, C.B. Ramirez Lopez, R.E. Martinez Muñoz, L.U. Román,
J.D. Hernandez Hernandez, M.M. Martinez Pacheco, R.E.N. del Rio
Instituto de Investigaciones Quimico Biologicas. Universidad Michoacana de San Nicolas de Hidalgo, Edificio B-1,
Ciudad Universitaria, Francisco J. Mujica s/n. Col. Felicitas del Rio, Morelia,
Mich, Mexico. C.P. 58060
[email protected]
The resistance of pathogens caused by the excessive and often inappropriate use of antibiotics
is a global problem. So, it is necessary to search for antibiotic news and effectives with less lateral
effect. An alternative is the use of secondary metabolites, where plants are an important biosource of antimicrobial components such as in the species of the genus Eupatorium. In them have
been identified bioactive components and others have uses in traditional medicine in different
parts of the world including Mexico. In this country the flora is estimated between 20,000 to
30,000 species. The Central West Mexican area is important for its great plant biological diversity
with approximately 5,000 species. A lot of them belong to Eupatorium genus and some of them
are native species. In general, of species of this genus little is known about of its phytochemical
and bioactive compounds. This is a reason for to considerer to natives Eupatorium spp as source
of bioactive compounds between them the secondary metabolites with antimicrobial activity.
The aim this work is to know the antimicrobial activity of native Eupatorium spp.
Key word: Eupatorium, resistance, pesticide, secondary metabolite
Acknowledgements
1. The authors are grateful with UMSNH for to financial support for to work. CBRL and EGS are CONACyT scholarship
holders ¬
206
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3
Bloqueo de receptores nicotínicos con el alcaloide erisodina y
su efecto en la memoria de corto y largo plazo
María Eugenia Garín Aguilar1, Gerzon García Martínez1,
Ana Laura Barrientos Miranda1, Gustavo Valencia del Toro2,
Marcos Soto Hernández3, Roberto A. Prado Alcalá4
1
Facultad de Estudios Superiores Iztacala-UNAM, Av. de los Barrios Num. 1.
Los Reyes Iztacala, Tlalnepantla Edo. Méx. 54090, México
2
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología IPN
3
Colegio de Postgraduados, Unidad Montecillo
4
Instituto de Neurobiología, Campus UNAM-Juriquilla.
Evidencias experimentales señalan la participación de los receptores nicotínicos neuronales
sobre la consolidación de la memoria en la prueba de evitación pasiva. Uno de los fármacos
empleados para tal fin es dihidro-β-eritroidina (DHβE), que presenta afinidad tanto a receptores
α7 como a receptores α4β2. En otro estudio se indicó que erisodina, alcaloide aislado de semillas
del género Erythrina, presenta una afinidad siete veces mayor al receptor α4β2. Con la finalidad
de determinar la participación diferencial de los receptores α7 y α4β2 en la memoria de corto
(MCP) y en la memoria de largo plazo (MLP), en este estudio se evaluó el efecto del bloqueo de
receptores α7 y α4β2 del hipocampo ventral sobre el aprendizaje de evitación. Por lo que grupos
independientes de ratas macho Wistar (n=10) fueron sometidos a cirugía estereotáxica
implantándoles cánulas bilaterales dirigidas al hipocampo ventral (AP=5.1, ML=4.8, V=7.4).
Después de ocho días de recuperación, los animales recibieron microinyecciones de nicotina (2.0,
3.0, 4.0μg/μL/min), DHβE (2.0, 4.0μg/μL/min), erisodina (1.0, 2.0μg/μL/min) y el grupo control
recibió 1.0μL/min de solución salina. Justo quince minutos después de la infusión de los fármacos
los animales fueron entrenados en la cámara de evitación, recibiendo un choque eléctrico de 0.75
mA. Una retención inmediata se evaluó a los 30 minutos del entrenamiento (MCP) y otra, 24
horas post-entrenamiento (MLP). Las latencias de adquisición, escape y retención fueron analizadas con la prueba estadística de Kruskal-Wallis y como prueba post hoc la U-Mann Whitney; en
todas las comparaciones p<0.05 fue considerada para indicar significancia estadística. Los resultados mostraron que la dosis alta del agonista nicotina (4μg/μL) no deterioró la MCP ni la MLP;
mientras que los antagonistas DHβE y erisodina deterioraron el aprendizaje de evitación interfiriendo con ambas memorias; el deterioro en la MLP fue mayor con erisodina que el observado
con DHβE. Finalmente, el estudio aportó información que sugiere que los receptores nicotínicos
α4β2 y α7 del hipocampo ventral participan en la modulación del aprendizaje de evitación, e hizo
evidente la habilidad de erisodina para diferenciar la participación de los receptores α4β2 en la
memoria de largo plazo.
1. Proyecto apoyado por PAPCA-FES Iztacala No. 42 y 78 y PAPIIT-IN212906 DGAPA, UNAM. ¬
207
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3
Actividad espasmolítica e hipotensora del extracto acuoso y
metanólico de hojas de Alternanthera repens
María Eugenia Garín Aguilar1, Diego Armando Alvarado Hernández1,
Itzel Rovira Álvarez2, David Segura Cobos1, Gustavo Valencia del Toro3
1
Facultad de Estudios Superiores Iztacala-UNAM, Av. de los Barrios Num. 1.
Los Reyes Iztacala, Tlalnepantla Edo. Méx. 54090, México.
2
Facultad de Ciencias, UNAM.
3
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología IPN.
La hipertensión arterial sistémica (HAS) es un importante problema de salud pública, y una de
las enfermedades crónicas de mayor prevalencia en México. Está asociada con el desarrollo de
enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares. A pesar de disponer de numerosos
fármacos antihipertensivos, es práctica común de la población mexicana atender los problemas
de HAS con el uso de plantas medicinales. Alternanthera repens se recomienda en nuestro país
para tratar padecimientos digestivos como diarrea, dolor de estómago e inflamación intestinal.
En este estudio, la actividad espasmolítica de esta planta se evaluó registrando in vitro los cambios peristálticos producidos sobre cortes de íleon de rata. Se realizaron curvas concentraciónrespuesta induciendo espasmos con cloruro de potasio, cloruro de calcio o serotonina en ausencia y presencia del extracto acuoso y del extracto metanólico de las hojas de A. repens.
Para evaluar el efecto hipotensor, se indujo hipertensión arterial a ratas Wistar (300-350g)
administrando por vía oral (75 mg/kg/día, vía oral) L-Name durante 5 días. Al final del tratamiento
los animales se anestesiaron con pentobarbital sódico (45 mg/kg, vía i.p.) y se les canuló la vena
femoral y la arteria carótida. Se registró la presión arterial sistólica (PAS) con un transductor de
presión conectado a un fisiógrafo y se realizaron curvas dosis respuesta aplicando dosis de 5 a 20
mg/kg (i.v.) del extracto metanólico. Un grupo de ratas normotensas (sin L-Name) se sometieron
al mismo registro recibiendo las mismas concentraciones de extracto. Los resultados sobre
peristalsis muestran que el extracto acuoso (0.56, 1.095, 2.09 mg/ml) y metanólico (0.245, 0.476,
0.909 mg/ml) de las hojas de A. repens relajaron el intestino pre-contraído con cloruro de potasio, cloruro de calcio ó serotonina. Por otro lado, se observó un efecto antihipertensor dependiente de la dosis de extracto metanólico. La dosis de 10 mg/kg de este extracto en los organismos normotensos causó un descenso de 34.5 ± 3.5 mmHg y en los hipertensos de 76 ± 15 mmHg
evidenciando que la administración i.v. del extracto metanólico de las hojas de A. repens
disminuyó de manera significativa la PAS de ratas normotensas e hipertensas.
Proyecto apoyado por PAPCA-FES Iztacala No. 42 y 78 y PAPIIT-IN212906 DGAPA, UNAM. ¬
208
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3
Contenido de polifenoles y actividad antioxidante de
Syringodium filiforme (cymodoceaceae)
Kethia L. González García1*, Olga Valdés Iglesias1, Abilio Laguna1,
Maylín Díaz Martínez1, José Antonio González Leavaut2
1
Centro de Bioproductos Marinos (CEBIMAR), Departamento de Química; Loma y Ave. 37, Nuevo Vedado,
Ciudad Habana, Cuba. CP: 10600.
2
Centro de Química Biomolecular (CQB), Calle 200 y Ave. 21, Atabey, Playa, Ciudad Habana, Cuba
[email protected], *[email protected]
La fanerógama marina Syringodium filiforme, conocida comúnmente como Hierba Manatí,
crece en los fondos marinos tropicales asociada a la especie Thalassia testudinum. En el tamizaje
fitoquímico se detectó la existencia de altas concentraciones de flavonoides, triterpenos, polifenoles, antocianinas, azúcares reductores y alcaloides en las diferentes fracciones obtenidas. A
partir del extracto total se obtuvo varias fracciones que corroboraron la presencia de los grupos
químicos por evaluación ultravioleta-visible, fundamentalmente en las estructuras típicas de los
flavonoides. Se determinó cuantitativamente el contenido de polifenoles totales en las fracciones de S. filiforme, utilizando el pirogalol como patrón de referencia; así como el contenido de
clorofilas a y b, y el nivel de antocianinas. La actividad antioxidante se determinó por el método
del 1,1-difenil-2-picrilhidrazilo (DPPH). El extracto total y la fracción metanólico mostraron elevada
actividad antioxidante, mientras que la correspondiente de éter de petróleo mostró actividad
moderada y la fracción clorofórmica y el precipitado remanente no muestran actividad. Estos
resultados predicen las potencialidades de la especie para su uso nutracéutico. ¬
209
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3
Evaluación del efecto hipocolesterolémico de 4 plantas de la
flora cubana
Yisel González Madariaga*, María Boffill Cárdenas, Damaris Quesada La Rosa,
Arianna Valido, Orestes Castillo Alfonso, Carmen Sánchez Álvarez,
Belkis Verdecía Machado, Freisman Blanco Machado
MSc. Bioquímica. Investigador auxiliar. Profesor auxiliar.
Unidad de Toxicología Experimental. Universidad de Ciencias Médicas de Villa Clara
[email protected]
La Unidad de Toxicología Experimental tiene dentro de su principal línea de trabajo la
evaluación fármaco-toxicológico de plantas medicinales. En el presente trabajo se evaluaron 4
plantas medicinales cubanas: Solanum melongena, Cissus sicyoides, Plantago major y Achyrantes
áspera, en un modelo de hipercoleseterolemia. Se utilizaron ratas Sprague Dawley a los que se les
administraron una dieta consistente en grasa de cerdo al 20% y sacarosa al 30% durante los dos
meses que duró el estudio. Los extractos blandos de las plantas se administraron a dosis de 400 y
800mg/kg/pv, excepto para el Plantago major que solo se evaluó a 800mg/kg/pv. Los resultados
mostraron la efectividad de la dieta empleada para lograr un estado de hipercolesterolemia. El
análisis patológico macro y micro no mostró daño significativo en los órganos. Se observó un
incremento de los TAG excepto en los casos del Achyranthes aspera y el Plantago major a
800mg/kg/pv. Ninguna de las plantas mostró tener efecto hipocolesterolémico. En el caso del
Achyranthes aspera a 800mg/kg/pv se observó una elevación significativa de la glicemia y una
reducción de este parámetro en la Solanum melongena a 400mg/kg/pv, aunque no se alcanzaron
niveles patológicos de glicemia en el modelo experimental en ninguna de sus etapas. ¬
210
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3
Aspectos etnobotanicos del género Valeriana en la estepa
patagónica argentina
Gratti A.1, Beeskow A.2, Fernández S.1
1
LAPRONAP (Laboratorio de Productos Naturales Patagónicos)
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PATAGONIA SAN JUAN BOSCO
Km.4 - Comodoro Rivadavia - Chubut - Argentina
[email protected]
2
CENPAT- CONICET- Bvard Brown 2915-9120 Puerto Madryn. Argentina
El género Valeriana (Valerianaceae) presente en casi todo el territorio argentino, está representado en la Patagonia por veinte especies, distribuidas mayormente en el sector andinopatagónico. Valeriana carnosa Smith y Valeriana clarionifolia Phill, representantes de distribución
esteparia del género en Patagonia, son reconocidos por el poblador con el nombre común de
ñanco -lahuen o ñanku-lawén y otros nombres comunes como: yerba del aguilicho, remedio del
águila, estiércol del paisano.
Como parte de un estudio integral de evaluación ecológica y etnobotánica de las especies
esteparias del género se abordó el estudio etnofarmacológico. La información obtenida procede
de diversas fuentes: 1. encuestas semiestructuradas realizadas a conocedores y responsables de
herboristerías, 2. referencias bibliográficas y 3.consulta de bibliografía etnobotánica en general y
etnofarmacológica en general.
Los resultados revelaron el uso indistinto de ambas especies de Valeriana por los pobladores,
para el tratamiento de diferentes afecciones, incluyendo el tratamiento de afecciones digestivas,
dolores de cabeza, desórdenes nerviosos del corazón, dolores reumáticos e insomnio.
Sobre forma de preparación y de uso surge la infusión para consumo y también para el uso
externo; informándose la preparación de una infusión de esta planta a la que se añadía huesos
fósiles y piedra bezoar del guanaco, para aliviar enfermedades del estómago.
Del análisis surge que los usos de estas especies son similares al resto de Valerianáceas, principalmente sedante y anti-espasmódicas. Investigaciones realizadas sobre las especies nativas
informan la presencia de principios activos similares a la especie V. officinalis, inscripta en diversas
farmacopeas para su uso oral como tranquilizante e inductora del sueño en el humano.
La importancia de las especies esteparias del género Valeriana en la medicina tradicional local y
el amplio espectro de afecciones para las cuales se utilizan, justifica una futura evaluación
fitoquímica y farmacológica comparativos, con el propósito de identificar los correspondientes
principios activos. ¬
211
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3
Determinación de la actividad antiinflamatoria del extracto
acuoso de la corteza de Croton gossypiifolius (euphorbiaceae)
Varela M., Machiste M., Pastorello M., Suarez A., Israel A.
Laboratorio de Neuropéptidos. Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela
[email protected]
El género Croton (Euphorbiaceae) agrupa cerca de 1300 especies en el mundo, de las cuales 79
se pueden encontrar en Venezuela. Los efectos farmacológicos de algunas especies de este
género ya han sido estudiados. El aceite esencial de Croton nepetaefolius evidenció actividad
analgésica en un modelo experimental en ratones; asimismo se han logrado aislar algunos
diterpenoides kauránicos del extracto metanólico de Croton tonkinensis que muestran la capacidad de inhibir la producción de óxido nítrico inducido por lipopolisacáridos en microglía, lo que
sugiere una posible actividad antiinflamatoria en el sistema nervioso central. La especie Croton
gossypiifolius (CG) se encuentra ampliamente distribuida en Venezuela y hasta el presente no se
ha reportado ningún estudio farmacológico referente a esta especie. Por ello, evaluamos la
actividad antiinflamatoria del extracto acuoso de la corteza de esta planta mediante el método
de inducción del edema en la aponeurosis plantar por carragenina. Se utilizaron ratas macho, de
la cepa Sprague-Dawley, de pesos comprendidos entre 200 y 250 g, las cuales se dividieron en 3
grupos experimentales: 1. Control (carboximetilcelulosa al 2%, p.o.); 2. Fenilbutazona (80 mg/Kg,
p.o.) y 3. Extracto acuoso de corteza de CG. Posterior al tiempo de efecto pico de cada compuesto, se inyectó la carragenina en la aponeurosis plantar de la pata trasera derecha de cada rata.
Se registró el edema desarrollado mediante un plestimómetro, antes, 1, 3, 5 y 24 horas después
de la inyección de la carragenina. El extracto inhibió la inflamación a las 3 y a las 5 horas respectivamente, efecto similar al observado con la fenilbutazona, utilizado como antiinflamatorio de
referencia. Estos resultados sugieren la presencia de compuestos hidrosolubles presentes en CG
con actividad antiinflamatoria significativa, contribuyendo al conocimiento de las propiedades
farmacológicas de las especies del género Croton. ¬
212
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3
Action mechanism possible of the bornyl decatrienate in the
cytotoxicity
Alejandro Olmos Guzman1, Ma. Eugenia Morales Lopez1, R. E. Martinez Muñoz2,
O.A. Ron Echeverria2, Zurisaddai Hernandez Gallegos2, Mauro M. Martinez Pacheco2
2
1
Facultad de Ciencias Medicas y Biologicas
Instituto de Investigaciones Quimico Biologicas. Universidad Michoacana de San Nicolas de Hidalgo, Edificio B-1,
Ciudad Universitaria, Francisco J. Mujica s/n. Col. Felicitas del Rio, Morelia
Mich, Mexico. C.P. 58060
[email protected]
The alcamide bornyl decatrienate (DB) obtained Heliopsis longipes (A. Gray) Blake, an endemic
plant from Mexico, used in traditional medicine as an analgesic, local anesthetic and antimicrobial
stomach-gut disorders and upper airway. The bornyl decatrienate exerts a cytotoxic effect on A.
salina and MCF-7 tumor cells. Additionally, the DB shows a similar chemical structure to bornyl-δ(8)-tetrahydrocannabinol, a cannabinoid that has anticancer effects and sympathetic-mimetic
complex effects in the central nervous system, stimulates appetite, mood and induced effects on
memory issue, which do not make it a treatment option. However, other alcamid as DB can join
RCB2 receptor being over expressed in tumor cells of mammary gland cancer. RCB2 is considered
for have anticancer effects and CNS not side effects such as metabolites of Cannabis sativa. We
obtaining evidence in the indirect test with macrophages and in silico modeling that support the
hypothesis of DB receptor linked to CB2 and shows a greater specificity of binding to this receptor. ¬
213
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3
Evaluación del efecto citotóxico y antiproliferativo del
extracto acuoso de Cestrum buxifolium kunth sobre células
epiteliales renales y células de cáncer de mama
Habballah Karim1, Tarantino Rina1, Ciangherotti Carlos1, Buitrago Diolimar2,
Salazar-Bookaman Margarita1
1
2
Unidad de Cultivo Celular, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela
Instituto de Investigaciones Farmacéuticas, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes,
Mérida, Venezuela
[email protected]
El género Cestrum agrupa cerca de 175 especies distribuidas en las regiones cálidas y tropicales
de América. Estudios muestran potenciales efectos farmacológicos de las especies del género
Cestrum como la anticonvulsivante, antitumoral, antiinflamatoria, analgésica y actividad contra
leishmania. La especie Cestrum buxifolium es conocida popularmente como uvito en los Andes
Venezolanos. Hemos encontrado que esta planta presenta actividad antiinflamatoria y analgésica
en modelos animales, así como también efectos tóxicos agudos en ratones. Con el fin de seguir
caracterizando el perfil toxicológico de esta especie, se evaluó su citotoxicidad in vitro sobre
células del epitelio renal de mono LLCMK2 y sobre células de cáncer de mama MCF-7, usando el
método de Mosman. El C. buxifolium mostró una potente actividad citotóxica en ambas líneas
celulares, especialmente en las LLCMK 2. Adicionalmente, fue evaluado el efecto del extracto
sobre la proliferación de células de la línea LLCMK 2 y MCF-7 a través del método de exclusión del
azul de tripano. Para ello las células fueron incubadas (95% de oxígeno y 5% de CO 2 a 37°C) con la
IC50 durante 24, 48 y 72 horas y contabilizadas en una cámara de neubauer utilizando un microscopio de luz. El extracto acuoso de C. buxifolium disminuyó la proliferación celular por un claro
efecto citotóxico. Estos resultados sugieren la presencia de compuestos hidrosolubles
nefrotóxicos pero con un potencial efecto antineoplásico. Lo que hace necesario realizar otros
estudios farmacológicos y fitoquímicos para dilucidar los compuestos responsables de estos
efectos así como los mecanismos moleculares por los cuales se producen. ¬
214
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3
Detección cualitativa de la inhibición de la enzima monoamino
oxidasa b (mao-b) por cromatografía de capa fina
Selene Harrisson, Elsy Bastidas, Deanna Marcano, María Rodríguez*
Laboratorio de Productos Naturales, Escuela de Química, Facultad de Ciencias,
Universidad Central de Venezuela. 47102
Se reporta un ensayo cualitativo simple sobre placas de capa fina para la detección de la
inhibición de la actividad de la enzima Monoamino Oxidasa B (MAO-B). La actividad de MAO fue
detectada por la conversión de bencilamina (coloración rojiza) a benzaldehído (coloración azúl)
utilizando como reactivo de coloración azul de Nilo. En presencia de inhibidores no ocurre la
oxidación enzimática observándose manchas rojizas sobre un fondo azul sobre las placas de capa
fina. Las condiciones óptimas para trabajar con la enzima son: dilución a ½ de su concentración
original de proteínas totales (8.0102 ± 0.4705 nmol/h/mg de proteínas totales) con 0,8mg de
albúmina bovina; tiempo de incubación entre los 25 y 30 minutos, temperatura 37ºC, pH 7.6, bajo
atmósfera de humedad. Los alcaloides hidrastina, cloruro de berberina, y L-deprenilo, conocido
inhibidor de MAO-B, fueron utilizados para evaluar el nivel de sensibilidad del ensayo: 1) El valor
mínimo de detección para hidrastina y cloruro de berberina se encuentra entre 0,2 mg y 0,1mg y
2) Para L-deprenilo el valor mínimo de detección está comprendido entre 0,1mg y 0,01mg. Una
serie de alcaloides y extractos de plantas fueron evaluados con este ensayo.
Palabras claves: MAO-B, hidrastina, deprenilo, cloruro de berberina ¬
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3
Manejo de la medicina tradicional mexicana en la edad madura
de la mujer (menopausia)
Lourdes Hernández De Jesus1, Alfonso Ruiz Belmán2, Marisela Quiroz Bravo3
1
3
Depto. de Farmacia
Depto. de Ingeniería de Alimentos. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional.
Dirección Av. Wilfrido Massieu S/N, Unidad Profesional Adolfo López Mateos C.P. 07738 México D.F.
2
Escuela Superior de Medicina del I.P.N. Prolongación de Carpio y Av. de los Maestros S/N Col.
Casco de Santo Tomás C.P.11340 México D.F.
[email protected]
En la mujer existen diferentes etapas biológicas, una de ellas es cuando se llega al final de la
fase reproductiva, en ella los ovarios dejan de producir óvulos y algunas hormonas sexuales, lo
que significa el cese de la menstruación. Durante este proceso se pueden presentar sangrados
intensos y otras reacciones fisiológicas al ocurrir este cambio. Esta etapa de la mujer cuando deja
de ser fértil, en la Medicina Occidental, se le conoce como menopausia que es el término médico
que designa la fecha de la última menstruación en la vida de la mujer y ha creado este proceso
biológico como una enfermedad, tratándolo terapéuticamente con remplazos hormonales de
tipo sintético, (causando en la mayoría de las veces alteraciones fisiológicas en útero y glándulas
mamarias principalmente) y tratamientos quirúrgicos. En el caso de la Medicina Tradicional
Mexicana, el concepto de menopausia no existe en su contexto biológico, social y cultural, sino
de que se trata de un ciclo de vida. En este sistema tradicional, atiende este padecer de una
forma atenuada e integral a través de la herbolaria y otros métodos menos invasivos como el
empleo del temazcal, y de procesos simbólicos (rituales) al pasar a una etapa de mayor evolución
en la vida de la mujer.
El objetivo del presente trabajo es dar a conocer como la Medicina Tradicional Mexicana
atiende el cambio fisiológico cuando se llega al final de la fase reproductiva de la mujer (mujer
madura). Dentro de los aspectos importantes de la medicina tradicional, es el empleo de plantas
medicinales, éstas disminuyen sus efectos tóxicos notablemente por su mayor inocuidad a la
dosis apropiada (tomando en cuenta la experiencia de los médicos tradicionales en su uso). En el
presente trabajo se dan a conocer algunas especies vegetales que son empleadas durante este
proceso biológico, en sus distintos contextos. La mujer indígena este cambio lo vive de una
forma desapercibida o atenuada en cuanto a sus síntomas, ya que recurre a las terapeutas
tradicionales, empleando recursos psicoterapéuticos como las oraciones, terapias rituales que
tienen eficacia simbólica dentro de su cosmovisión. En cuanto a sus cambios fisiológicos se
emplean plantas medicinales en forma de te, cataplasmas y recursos térmicos como el temazcal
involucrando vínculos psicosomáticos, psicoreligiosos, además de que su alimentación es mas
sana y el medio en que se desarrolla su vida es mas tranquilo. Dentro de la vida actual y acelerada
de la mujer en su forma de vivir en un contexto social citadino, se debe de entender que la
menopausia es un proceso que le ocurre a todas las mujeres al superar cierta edad; en ningún
caso es una enfermedad. Sin embargo, algunas mujeres pasan unos años difíciles a causa de los
cambios hormonales, aunado a sus malos hábitos de alimentación, falta de ejercicio y una vida de
stress. ¬
216
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3
Distribución de triterpenos en quince especies de burseras de
la sección bullockia
Juan D. Hernández-Hernández, M. M. Pérez-Vallejo, R. García-Íñiguez,
J. Camacho-Ruiz, J. C. Guzmán-Martínez, Luisa Urania Román-Marín
Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas de la UMSNH, Edificio B-1,
Ciudad Universitaria, 58030, Morelia, Mich. México
[email protected]
Introducción
La sección Bullockia1,es a la que pertenecen las Burseras estudiadas, cuyo hábitat es el bosque
tropical caducifolio, donde guardan un papel importante en los ecosistemas, dado su biodiversidad y endemismo, son arbustos ó árboles pequeños caducifolios, miden de 2-7 m de altura, de
corteza no defoliante, son muy apreciados en medicina tradicional, la resina, su aroma y su uso
artesanal.
Discusión y Resultados
De los extractos apolares de los tallos de las Bursera bicolor, B. biflora2, B. bipinnata, B. bonetii,
B. copallifera, B. coyucensis, B. cuneata, B. excelsa, B. glabrifolia, B. hintonii, B. infernidialis3, B.
mirandae, B. penicillata, B. véjar-vazquezii, B. vellutina y algunos hibridismos, se aislaron mayoritariamente los triterpenos isoméricos de F.M. C 30H50O, 3-epi-lupeol (I), α-amirina (II) y 3-epi-αamirina (III), mientras que el acetato de 3-epi-lupeílo (Ia) y la 3-lupenona (Ib), se encontraron
menormente distribuídos, su análisis espectroscópico de RMN de 1H y 13C en 1 y 2D, permitió su
identificación la cual fue corroborada con los datos reportados en la literatura 4-6.
I: R = H ; R’ = OH
II: R = H ; R’ = Oac
III: R = R’ = O
Bibliografía
1. Toledo-Manzur, C. A. Biotica, 1984, 9, 441-449
2. Rzedowki, J.; Calderón de Rzedowki G., Acta Botánica Mexicana, 2006, 74, 169-174.
3. Hernández-Hernández, J. D.; García-Heredia, L.; Hernández-Barragán, A.; Alvarez-García, R. y Román-Marín, L.U.,
Rev. Soc. Quím. Méx., 2002, 46, 295-300.
4. Knight, S.A., Org. Magn. Res., 1974, 6, 603-611 Carpenter, R. C.;Sotheeswaran, S.;Sultanbawa, M. U. S.; Ternai B.,
Org. Magn. Res., 1980, 14, 462- 46.
6. Romeo, G.; Giannetto, P.; Aversa, M.C., Org. Magn. Res., 1977, 9, 29-34. ¬
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3
Componentes volátiles de la Bastardia viscosa que crece en
Mérida-Venezuela
Hernandez J.1, Rojas L.2, Carmona J.3, Usubillaga A.2
1
Postgrado Interdisciplinario de Química Aplicada, Facultad de Ciencias
2
3
Jardín Botánico, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de los Andes
Mérida - Venezuela
[email protected]
Bastardia es un género de plantas fanerógamas perteneciente a la familia Malvaceae. De esta
última se han aislado flavonoides, glycinebetaine, alcaloides y aceites esenciales. En el presente
trabajo se estudian los componentes volátiles de la especie Bastardia viscosa que crece en
Mérida-Venezuela. El mismo consistió en aislar los aceites esenciales por arrastre con vapor de
agua, de las hojas frescas, utilizando una trampa de Clevenger, estos se identificaron por GC-MS,
empleando un equipo Hewlett Packard 5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un inyector
automático, utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m, 0,25 mm, 0,25μm). Se empleó una
temperatura inicial de 60ºC (1 min) y luego se calentó a razón de 4 °C/min hasta 260ºC (20 min). Se
inyectó una muestra de 1,0μL de una solución al 2% del aceite esencial en n-heptane con reparto
de 100:1. Se utilizó una temperatura de inyección de 200ºC. La identificación de los componentes
de los aceites se realizó mediante comparación computarizada de los espectros obtenidos con
los espectros de una Librería Wiley (6ta Edición). Se determinaron los índices de Kováts analizando conjuntamente las muestras con una mezcla de n-alcanos. Se obtuvo un rendimiento de
0,03% y se identificaron 16 componentes, el aceite está formado básicamente por sesquiterpenos, los mayoritarios resultaron ser: cariofileno (3,1%), alfa-selinene (12,9%), delta-amorfene (7,0%)
1,10-di-epi-cubenol (11,4%). ¬
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3
Estudio del comportamiento de las 23-acetilsapogeninas en
medio básico
Ma. Guadalupe Hernández Linares1, Gabriel Guerrero Luna1,
Jesús Sandoval Ramírez2, Socorro Meza Reyes2, Sara Montiel Smith2
1
Universidad del Istmo, Ingeniería Química. Ciudad Universitaria s/n, Barrio Sta. Cruz Tagolaba,
Tehuantepec, Oax. México. C.P.70760
[email protected]
2
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Facultad de Ciencias Químicas. C.U.Av. San Claudio esq. Blvd. 14 sur.
Puebla, Pue., México. C. P. 72570
En el desarrollo de las investigaciones a nivel mundial sobre las transformaciones de las
sapogeninas esteroidales y su cadena lateral, se han reportado trabajos que muestran la gran
diversidad de productos que se pueden generar al manipular los diferentes factores que intervienen en una reacción[1]. La sola variación de uno de estos parámetros, modifica el resultado,
generando gran variedad de productos esteroidales derivados de sapogeninas que ya han sido
reportados (figura 1). El presente trabajo se concentra en la inusual deacilación de la 23(R)acetildiosgenina (2) y la 23(R)-acetilhecogenina (3) en medio fuertemente básico.
Figura 1
Se obtuvieron las 23(R)-acetilsapogeninas (2 y 3) a partir del derivado epoxicolesténico 2 [ref.
1g]. Una vez aisladas 2 y 3, se trataron con una solución fuertemente básica (KOH/etanol al 30%)
por 12 horas, conduciendo a la sapogenina como producto mayoritario con un 63 a 65% de rendimiento (esquema 1). El mecanismo de reacción propuesto transcurre a través de una reacción de
hidratación en medio básico de la cetona del C-23. Los datos espectroscópicos confirman a la
sapogenina como producto de deacilación.
Esquema 1
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Referencias
[1]a) Marker, R. E.; Tsukamoto, T.; Turner, D. L. J. Am. Chem. Soc. 1940, 62, 2525.
b) Gould, D. H.; Staudle, H.; Hershberg, E. B. J. Am. Chem. Soc. 1952, 74, 3685.
c) Dauben, W. G.; Fonken, G. J. J. Am. Chem. Soc. 1954, 76, 4618.
d) Sandoval-R., J.; Castro-M., A.; Meza-R., S.; Reyes-V., F.; Santillán, R.; Farfán, N. Tetrahedron Lett. 1999, 40, 5143. e)
Iglesias-A., M. A.; Sandoval, R. J.; Mata-E., M. Y.; Viñas-B., O.; Bernès, S. Tetrahedron Lett. 2004, 45, 4921.
f) Cyranski, M. K.; Frelek, J.; Jastrzebska, I.; Morzycki, J. W. Steroids 2004, 69, 395.
g) Meza-R., S.; Sandoval-R., J.; Montiel-S., S.; Hernández-L., G.; Viñas-B., O.; Martínez-P., R.; Fernández-H., M. A.;
Vega-B., J. L.; Merino-M., P.; Santillán, R.; Farfán, N.; Rincón, S.; Del Río R. E. Arkivoc 2005, vi, 307.
h) Fernández-H., M. A.; Sandoval-R., J.; Meza-R., S.; Montiel-S., S. J. Mex. Chem. Soc. 2009, 53, 126.
[2]Sandoval, R. J.; Meza, R. S.; del Río, Rosa E.; Hernández, L. G.; Suárez, R. A.; Rincón S.; Farfán, N.; Santillán, R. L.
Steroids 2003, 68, 199. ¬
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3
Sintesis del nuevo complejo quiral n-(s)-(-)-(1-feniletil) -2piridinmetanimina-PdCl2
Ma.Guadalupe Hernández Téllez1, René Gutiérrez Pérez1, Ulises Peña Rosas1
Ruth Melendrez Luevano
1
Laboratorio de Síntesis de Complejos, Facultad de Ciencias Químicas,
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Puebla, Pue., México
Este trabajo de investigación trata sobre la síntesis de un nuevo complejo metálico quiral,
desde la síntesis de la imina a partir del 2-piridilcarboxaldehido y la(S)-(-)-1-feniletilamina. La
estereoquímica de la estructura molecular de los fármacos es de suma importancia, ya que desde
hace algunos años se sabe que la mayoría de los fármacos existen como dos o más
estereoisómeros, los cuales desde el punto de vista de actividad biológica pueden ser considerados como sustancias diferentes. Existen varios ejemplos sobre la estereoespecificidad exhibida
por sustratos enantioméricos, en donde uno de los estereoisómeros es biológicamente activo
(eutómero), pero su enantiómero es inactivo (distómero). Actualmente, numerosas investigaciones sobre el origen y tratamiento de las enfermedades cancerígenas se realizan en muchos
grupos a escala mundial, en donde el diseño y síntesis de nuevos fármacos se realiza constantemente con el fin de eliminar o controlar estas enfermedades. En la actualidad se conoce la
etiología de sólo algunos tipos de cáncer y, en casos como el de la leucemia, puede llegar a
curarse totalmente. Los tratamientos dependen del avance de la enfermedad y generalmente
consisten en cirugías, radioterapias o quimioterapias.
En este contexto, la participación de los químicos sintéticos adquiere importancia debido al
requerimiento de nuevos fármacos que no tengan efectos secundarios adversos comúnmente
observados en asociación con la quimioterapia, la cual constituye uno de los métodos más
empleados para eliminar células cancerosas. El empleo de complejos derivados de platino como
fármacos, adquirió gran importancia desde que Rosenberg reportó la síntesis y actividad
biológica del compuesto cis-diclorodiaminoplatino.
Estos compuestos han sido casi universalmente empleados en varios tipos de cáncer pero,
desafortunadamente, inducen efectos colaterales dañinos. Por otro lado, muchos pacientes no
toleran el tratamiento con fármacos inorgánicos al nivel de las dosis requeridas para ser efectivos. De esta forma, desde la detección de la actividad antitumoral del Cisplatino, un amplio
número de compuestos análogos con la fórmula general ML 2X2 han sido sintetizados, (en donde
M corresponde a Pt ó Pd, L corresponde a un ligante orgánico y X corresponde a un halógeno) y
se ha observado que esta actividad varía con el metal y los ligantes empleados. Debido a la gran
importancia que estos complejos representan en el área de la medicina, uno de nuestros principales objetivos se ha enfocado a la síntesis de complejos de paladio empleando ligantes quirales
del tipo imina. ¬
221
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3
Síntesis verde de nuevas bisiminas quirales derivadas del
2,5-tiofenodicarboxaldehido
Ma.Guadalupe Hernández Téllez1, René Gutiérrez Pérez1, Ulises Peña Rosas1,
Jaime Vázquez Bravo2
1
Laboratorio de Síntesis de Complejos, Facultad de Ciencias Químicas,
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Puebla, Pue., México
2
Universidad de la Cañada, Teotitlán de Flores Magón, Oax. México
Esta investigación trata de la síntesis de nuevas bisiminas quirales a partir del 2,5Tiofenodicarboxaldehido con las aminas primarias ópticamente puras a) (S)-(-)-1-feniletilamina, b)
(S)-(-)-(4-metilfenil)etilamina, c) (S)-(-)-1-(1-naftil)etilamina. Utilizando el método en ausencia de
disolvente, que es un método de la Química Verde, lo cual permite desarrollar procesos que
reducen o eliminan el uso y generación de sustancias peligrosas para la salud humana y el medio
ambiente, además presenta interesantes ventajas como alta eficiencia, fácil separación y
purificación, así como rendimientos altos.
Las bisiminas muestran un comportamiento versátil de coordinación en la formación de complejos metálicos y, en este contexto, el potencial de la complejación como una aportación a la
medicina es un área de investigación que ha crecido enormemente en los últimos años.
Estructura cristalina de [b]
La estructura de los compuestos se estableció por estudios espectroscópicos y además la
estructura del compuesto [b] fue corroborada por difracción de R-X. ¬
222
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3
Actividad Antibacteriana de Decatropis bicolor (Zucc.) Radlk.
(Rutaceae) de Tres Zonas Ecológicas del Estado de Hidalgo,
México
Tovar Hernández J.C.1, Villavicencio Nieto M.A.2, Pérez-Escandón B.E.3
Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. Centro de Investigaciones Biológicas
Laboratorio de Etnobotánica. Carr. Pachuca-Tulancingo km 4.5,
Mineral de la Reforma, Hidalgo. CP 42184
1
[email protected], [email protected], [email protected]
Decatropis bicolor (Arantó) es un arbusto que crece en distintas zonas ecológicas del estado de
Hidalgo como la zona semiárida del Valle del Mezquital en Plomosas, en la zona templadahúmeda de Tenango, en Dequeñá y en la zona tropical-húmeda de Huazalingo, en Ixtlahuac,
donde su uso principal es el medicinal. El objetivo de este trabajo fue comparar a Decatropis
bicolor de estas tres zonas ecológicas de Hidalgo, por medio del análisis químico de extractos
orgánicos y la evaluación de la actividad antibacteriana de estos componentes para determinar si
existen diferencias entre las tres. La actividad antibacteriana de los extractos se evaluó mediante
el método de estría en concentraciones de 1 y 2%, y el método de dilución en caldo en concentraciones de 0.031, 0.0625, 0.125, 0.25, 0.5 y 1% para observar la Concentración Mínima Inhibitoria
(CMI) y la Concentración Mínima Bactericida (CMB), en Salmonella thyphimurium, Escherichia coli,
Pseudomona aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Enterococcus faecalis y Staphylococcus
aureus. Se utilizaron dos testigos uno positivo con los extractos solos y uno negativo con
antibiótico. Bajo estas condiciones se hicieron curvas de crecimiento para observar el nivel de
afectación en el crecimiento de las cepas. Los resultados obtenidos en los bioensayos de los
extractos etanólicos de las tres procedencias fueron que D. bicolor de Plomosas tuvo mayor
actividad en comparación con los de Dequeñá y de Ixtlahuac, ya que presentaron CMI y CMB
desde concentraciones de 0.25%. Al probar los extractos de hexano, cloroformo, acetato de etilo
y etanol de D. bicolor de Plomosas se determinó que los extractos de cloroformo y acetato de
etilo fueron los que presentaron mayor actividad antibacteriana con una CMI y CMB en las seis
cepas, excepto CMB en Salmonella thyphimurium en el extracto de acetato de etilo. En las curvas
de crecimiento se observó la disminución del crecimiento desde las primeras dos horas en E. coli,
a las tres horas en S. pneumoniae, y E. faecalis, mientras que para S. aureus y P. aeruginosa fue a
las 5 horas, la inhibición en S. thyphimurium se presentó a partir de las 7 horas. Se comprobó que
D. bicolor procedente de tres zonas ecológicas de Hidalgo, presentan actividad antibacteriana
diferencial. Estos resultados contribuyen a comprobar las propiedades medicinales que tradicionalmente se atribuyen a la planta. ¬
223
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3
Nutritional analysis of indigenous wild edible herbs used in
eastern Chhattisgarh, India
Kanchanlata Vishwakarma1*, Veenapani Dubey
1
Main author
Corresponding author
ms.kanchan14@rediffmail.com
*
The present communication deals with the native uses of ethnobotanical species, identification
and nutritional analyses of wild edible plant species consumed by the local people inhabiting in
the tribal areas of Bilaspur district situated in the eastern part of Chhattisgarh state of India.
Ten wild leafy vegetables were characterized and chemically analyzed for their nutritional
value. Some of them were not only used for food, but for medicine in minor ailments by the
natives. The plant samples collected from different tribal areas of Bilaspur district. The proximate
nutritional composition, moisture, carbohydrate, crude protein, crude fat, crude fiber, energy
and iron were determined. The recommended methods of “Association of official Analytical
Chemist” (AOAC 1990) was used.
The result which referred to fresh weight emphasized the high moisture content ranged from
93.45±0.182% to 66.5±0.412%. The leaves also exhibited high crude fiber 4.16±0.939% to
21.78±0.888% highest in Centela asiatica (21.78±0.888%). Crude protein range varied from
4.37±0.359% to 14.07±0.924% and highest carbohydrate is reported in Basella rubra
(69.59±0.403%). Iron content ranged from 838ppm to 147ppm, highest iron reported in Centela
asiatica (838ppm).
All the values are statistically analyzed and compared with previously reported values and the
value of standard recommended dietary allowance (WHO/FAO/UNU1985) for children, adults,
pregnant and lactating mothers. ¬
224
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3
Efecto hipolipemiante producido por la suplementación
dietaria con proteína de soya libre de isoflavona y l-arginina
Emilia Magdaleno-Morales1, María Dolores Hernández-Navarro1*,
Alicia Ortiz-Moreno2, Rosalva Mora-Escobedo2, Germán Chamorro-Cevallos3
1
Facultad de Química. Universidad Autónoma del Estado de México.
Paseo Colón esq. Paseo Tollocan. Col. Residencial Colón. C.P. 50120. Toluca, Edo. Mex., México.
2
Programa de Ciencias Quimicobiológicas.
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. Instituto Politécnico Nacional.
Plan de Ayala esq. Carpio s/n. Col. Sto. Tomás. C.P. 11320. México, D.F., México.
3
Departamento de Farmacia. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. Instituto Politécnico Nacional.
Wilfrido Massieu y Cerrada Manuel Stampa s/n Col.
Nueva Industrial Vallejo. Del. Gustavo A. Madero. C.P. 07700. México, D.F., México.
*
[email protected]
La proteína de soya y recientemente la L-arginina, se han relacionado con la disminución de
colesterol, presión arterial y atenuación de la placa aterómica. El propósito de este estudio, fue
determinar el efecto hipolipemiante en ratas normocolesterolémicas e hipercolesterolémicas
suplementadas con proteína de soya germinada libre de isoflavona y L-arginina.
Se emplearon semillas de soya variedad BM2, las cuales fueron desinfectadas y germinadas a
27° C por 72 horas. Posteriormente, fueron secadas por lecho fluidizado y pulverizadas para la
obtención de una harina a la cual se le extrajo las isoflavonas por el método de Camacho Peña,
2003. Se trató un grupo normocolesterolémico, un control dislipidémico y tres grupos hipercolesterolémicos suplementados con 430 mg/kg de proteína de soya germinada sin isoflavonas, 170
mg/kg L-arginina y la interacción, todos los animales lipidémicos fueron inducidos con una dieta
rica en colesterol durante 30 días. Las ratas hipercolesterolémicas suplementadas con proteína
de soya germinada libre de isoflavona, presentaron un ligero decremento no significativo de
colesterol total y c-LDL (11.5% y 13.0%, respectivamente), mientras que la administración de Larginina, mostró una disminución de colesterol total del 25% (P<0.01) con respecto al control y los
niveles de c-LDL, se vieron reducidos hasta en un 27.8% en comparación al grupo control (P<0.01).
La suplementación simultánea de soya y L-arginina, denotó un decremento significativamente
estadístico del colesterol total P<0.01 de 59.1%, c-LDL 68.3% y el c-HDL presentó una
concentración similar al grupo normocolesterolémico. El efecto hipolipemiante pudo ser potenciado por la interacción de la proteína de soya germinada sin isoflavonas y la L-arginina. ¬
225
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3
Protección del fruto de litchi contra el daño teratogénico
inducido por ácido acetilsalicílico
Lorena Bustos Estrada1, María Dolores Hernández-Navarro1*,
Leobardo Gómez-Oliván1, Alicia Ortiz-Moreno2
1
Departamento de Farmacia. Laboratorio de Toxicología. Facultad de Química. Universidad Autónoma del Estado de
México. Paseo Colón y Paseo Tollocan. Col. Residencial Colón. C.P. 50120 Toluca, Edo. Méx.
2
Programa de Ciencias Quimicobiológicas. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. Instituto Politécnico Nacional.
Prolongación Carpio y Plan de Ayala. Col. Sto. Tomás. C.P. 11340. México, D.F.
*
[email protected]
El fruto Litchi chinensis ha sido empleado en la medicina tradicional china por sus propiedades
nutritivas, antiulcerante, antinociceptivo, antitusivo e hipoglicemiante. En años recientes, se
demostró que posee un alto contenido de compuestos polifenólicos, por lo que se ha propuesto
como agente terapéutico hepatoprotector, antioxidante y anticancerígeno. El objetivo del
presente trabajo, fue evaluar en un modelo murino el efecto protector de la pulpa liofilizada de
Litchi chinensis Sonn, contra la acción teratogénica inducida por ácido acetilsalicílico (ASA);
fármaco analgésico mundialmente más consumido y epidemiológicamente relacionado con la
producción de efectos adversos durante la gestación.
Fueron administradas hembras gestantes por vía oral con una dosis de ASA 1250 mg /kg en el 7º
día de la gestación (DG). La pulpa de litchi se administró a dosis de 800, 1600 y 3200 mg/kg del 7º
al 15º DG. El grupo control fue tratado con el vehículo (agua destilada). El 18º DG, se practicó una
histerectomía para la evaluación de anormalidades externas, viscerales y esqueléticas. El tratamiento con ASA provoco la incidencia de paladar hendido, ectopia, hidronefrosis y embrioletalidad. La pulpa de litchi mostró una relación dosis-respuesta del efecto protector contra la teratogenicidad del ASA, siendo la dosis de 3200 mg/kg significativamente preventiva frente a la embriotoxicidad y embrioletalidad del fármaco (P<0.05). No obstante, la dosis de litchi 800 mg/kg
potenció la embrioletalidad del ASA (P<0.05). El efecto protector de litchi contra los metabolitos
tóxicos del ASA, quizá se atribuyan al poder antioxidante de los flavonoides que la pulpa contiene. ¬
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3
Extracción y caracterización de aceies fijos de semillas de
Opuntia ficus del cantón Guano-Riobamba
Angélica Arrieta R., Cumandá Játiva
Carrera de Bioquímica y Farmacia-Fac. de Ciencias de la Escuela Superior
Politécnica de Chimborazo-Riobamba-Ecuador
[email protected]
Las semillas de tuna Opuntia ficus actualmente no es utilizada, para aprovechar este residual de
los frutos se plantea estudiar la influencia del tipo de secado, extracción y tiempo en el rendimiento del aceite y sus propiedades físicas y químicas. En el secado por aire caliente a 60ºC y
extracción por Soxhlet durante 12 h se tiene rendimiento de 12.64%, aceite amarillo verdoso con
propiedades físicas y químicas similares a las reportadas para el aceite de esta especie en Méjico.
Actualmente en Ecuador se consume los frutos de Opuntia ficus cultivada en el cantón Guano
que posee algunas variedades de tuna con 200hectarias de plantación, y los productos son jugo,
vino, mermelada contiene al 30% de semillas que no son aprovechadas constituyéndose en
residuales contaminantes del ambiente.
La proyección de la asociación de tuneros elaborará vino y mermelada dejando las semillas
expuestas al aire para evitar contaminación se prevée la utilización de este residual extrayendo el
aceite fijo y caracterizando el mismo.
Semillas de tuna producidas de marzo a abril del 2010,vapor de agua, hexano, estufas con
circulación de aire, soxhlet, cromatógrafo de gases, rotavapor, vidriería diversa, reactivos diversos.
Secado de semillas al ambiente (18ºC) y a 60ªC por 8, 12 y 24 horas en estufa con circulación de
aire. Extraccción con vapor de agua y por extracción continua en soxhled con hexano,
eliminación del solvente en rotavapor, determinar el rendimiento por peso, propiedades organolépticas, densidad por picnometría, índice de refracción, la acidez en un potenciómetro, índice de
acidez por titulación, Indice de saponificación por titulación, índice de peróxidos por Wiggs,
composición química por cromatografía de gases.
Conclusiones
1. Las semillas de tuna contienen aceites fijos extraidos en el laboratorio con hexano en
soxhlet es similar en propiedades físicas y químicas a los reportados para Opuntia ficus.
2. El secado de las semillas a 60ºC por 12 horas da rendimientos de 12.64% es decir que afecta
las condiciones e secado y el tiempo .
3. Las propiedades físicas del aceite indican ser un aceite liviano, untuoso que podrá ser usado
en cosmética.
4. La calidad del aceite dada por los diferentes índices permiten aplicar a la piel en protectores
solares.
5. Los residuales de la extracción del aceite son fácilmente degradados sea en composteras o
como combustible.
Bibliografìa
1. http://redalyc.uaemex.mx/redalyc pdf 857.
2. Aceite de tuna http://dato anuncios.org/?a=23375 ¬
227
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3
Antibacterial and antioxidant activities of essential oil of
Artemisia echegarayi Hieron. (Asteraceae) against Listeria
monocytogenes
A. Laciar1*, M.L. Vaca Ruiz1, J.R. Saad2
1
Área Microbiología
Área de Química Orgánica-INTEQUI-CONICET
Universidad Nacional de San Luis. Chacabuco y Pedernera. San Luis, 5700, Argentina
2
Artemisia echegarayi Hieron. (Asteraceae) is commonly known in Argentina as “ajenjo”. Many
studies report a high efficacy of EOs against food-borne pathogens bacteria. The antimicrobial
activity and the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) of A. echegarayi EO were evaluated
against Listeria monocytogenes, bacterias of significant importance in food hygiene by using the
disc diffusion assay and the micro-well dilution method, respectively. Volatile components of the
extract were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry and the major components
were determined. Furthermore, the EO was tested for its antioxidant activity. The EO of A.
echegarrayi on GC-MS analysis resulted in the identification of 15 constituents representing
92.48%. These components have the following chemical groups in their structure: hydrocarbons,
alcohols, ketones and esthers. The major components were 3-thujanone (49.25%) and thujone
(10.72%). A. echegarayi EO showed antibacterial activity against the tested bacterias. L. monocytogenes was very sensitive to A. echegarayi EO with MIC of ≤ 2.4. The oil showed a free radical
scavenger activity equivalent to 50% of the reference compound. These preliminary studies
showed promising results because this EO may provide an alternative to promote its use as
natural food additives. ¬
228
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3
Actividad antibacteriana de los extractos de la Munnozia
senecionidis benth e identificación de los compuestos
presentes en dichos extractos
Joel Lara1, Luis B. Rojas2*, Chataing Bernardo3, Juan Carmona4
1
Postgrado en Química de Medicamentos, Facultad de Farmacia y Bioanálisis
2
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
3
Laboratorio de Análisis Biológico de Productos Naturales Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
4
Herbario de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis
*[email protected]
En el presente estudio se describe, el análisis y la elucidación de los compuestos extraídos de la
especie Munnozia senecionidis Benth también se muestra los resultados sobre la actividad antibacteriana de los extractos obtenidos de dicha especie. El género Munnozia pertenece a la familia
Asteraceae1 y se encuentra distribuido principalmente en países de América del sur como
Venezuela, Colombia, Ecuador, Perú, Bolivia y el norte de Argentina y en menor cantidad en
América central2.
La bibliografía muestra que en Venezuela se encuentran las siguientes especies del genero
Munnozia: M. hastifolia (Poeppig et Ende) H. Rob. Et Brettel, M. karstenii H. Rob. y M. senecionidis
Benth3. La especie M. senecionidis fue recolectada en el sector la cañada de la ciudad de Mérida
estado Mérida, Venezuela. Los extractos de Hexano, Etanol y Agua obtenidos de las hojas de la
especie M. senecionidis fueron evaluados para determinar su actividad antibacteriana y antiparasitaria y luego tratados por cromatografía de capa fina y de columna para lograr la separación y
aislamiento de los compuestos mayoritarios presentes en dichos extractos. La elucidación de los
compuestos extraídos se llevó a cabo empleando técnicas espectroscópicas de RMN- 1H, RMN-13C,
COSY, HMQC y HMBC. La mayoría de los compuestos aislados en esta planta son de tipo triterpeno y cabe destacar que uno de ellos es la primera vez que se aísla de esta familia de plantas. El
extracto hexánico no mostró actividad antibacteriana por otro lado los extractos de etanol y
agua mostraron actividad interesante sobre bacterias: Staphylococuus aureus y contra parásitos
como Tyipanosoma cruzi y Leishmania mexicana.
Bibliografia
1. Bremen, K., Asteraceae: Cladistics & Classification. Timber Press.: Pórtland, Oregon (USA), 1994.
2. Nordenstam, B., Senecioneae and Liabeae - Systematic review. In the Biology and Chemistry of the Compositae,
Heywood, V. H.; Harborne, J. B.; Turner, B. L., Eds. Academic Press Inc.: London, 1977; Vol. 2.
3. Badillo, V. M., Lista Actualizada de las Especies de la familia Compuestas(Asteraceae) de Venezuela. Ernstia 2001, 11,
(3 y 4).
Agradecimiento
CDCHT, Universidad de Los Andes, Mérida Venezuela ¬
229
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3
Actividad antibacteriana y composición química de aceites
esenciales de catorce especies de lamiaceae y asteraceae de
hidalgo, méxico
Villavicencio Nieto M.A., Pérez Escandón B.E., López-Gutiérrez B.N.,
Garrido González M., Tovar Hernández J.C., Gordillo Martínez A.J.
Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, México.
Carretera Pachuca-Tulancingo, Km 4.5, Pachuca, Hidalgo, C.P. 42184.
Centro de Investigaciones Biológicas. Laboratorio de Etnobotánica
Los aceites esenciales (AEs) son sustancias volátiles, responsables del aroma de muchas
plantas y forman parte de sus defensas químicas. Lamiaceae y Asteraceae son ricas en estos
aceites. Varias especies de estas familias tienen uso medicinal en Hidalgo, México y la mayoría no
han sido estudiadas. Por lo antes mencionado, se seleccionaron catorce de estas especies con el
objetivo de evaluar la actividad antibacteriana se sus AEs y analizar su composición química. Los
AEs se obtuvieron por destilación con arrastre de vapor de tallos, hojas y flores de cada especie.
Para evaluar la actividad antibacteriana, los AEs se probaron en concentraciones de 12.5 a
2000μg/ml, mediante el método de dilución en caldo, en tres cepas Gram negativas, Escherichia
coli, Salmonella thyphimurium y Haemophylus influenzae y dos Gram positivas, Staphylococcus
pneumonidae y Staphylococcus aureus, determinando la Concentración Minina Inhibitoria (CMI) y
la Concentración Mínima Bactericida (CMB). La composición química de los AEs se analizó
mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. Se comprobó que los AEs
de diez de las especies de plantas presentaron actividad antibacteriana en por lo menos una
cepa; Poliomintha longiflora fue la especie más activa, le siguieron en actividad Hedeoma drummondii y Tagetes lucida; después Tagetes micrantha, Tagetes lunulata, Tagetes erecta, Hedeoma
piperitum y Salvia microphylla, en seguida, Hesperozygis marifolia y Salvia elegans; las especies
inactivas fueron Satureja mexicana, Hyptis verticillata, Mentha rotundifolia y Tagetes filifolia. Las
cepas Gram negativas fueron más susceptibles que las Gram positivas. Los AEs mayoritarios de P.
longiflora son carvacrol, timol y trans-cariofileno; los de H. drummondii son mentona, pulegona y
n-metilpiridona-6-ácido carboxílico; de T. lucida, estragol; de T. micrantha, estragol y asarona. Se
presenta la composición química de los demás AEs.
Se observó una relación estructura-actividad, en donde la actividad va de mayor a menor como
sigue: monoterpenos fenólicos ->monociclicos cetónicos ->biciclicos cetónicos ->aciclicos hidroxilados; aunque se infieren posibles efectos antagónicos o sinérgicos de acuerdo con la
composición química de los AEs. Los resultados contribuyen a confirmar algunas propiedades
medicinales que tradicionalmente se atribuyen a estas plantas. ¬
230
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3
Etnobotanica y elaboración de un fito-preparado semisolido
para aliviar sintomas de la tos a partir de (Lepidium chichicara
desv., Mentha piperita L., Solanum americanum mill.,
Clinopodium sp. L) en base a los conocimientos ancestrales de
los Hampiyachakkuna de la etnia Saraguro - Loja - Ecuador
Manuel Agustín Tene Saca1, Paola Inés Silva1, Chabaco Armijos1, Omar Malagón1,
Delfina Chalan2, Rosa Medina2, Maria Aurelia Quizhpe2, Maria Alegría Saca2,
Paola Vita Finzi3, Giovanni Vidari3
1
Instituto de Química Aplicada - Planta de Productos Naturales (UTPL)
2
Yurak Hampiyachak de la comunidad indígena Saraguro
3
Universitá di Pavia
El estudio reporta los resultados de una adaptación tecnológica para la elaboración de un
fitopreparado semisólido que es usado de forma tradicional para aliviar los síntomas de la Tos
producidos por resfrío en la comunidad indígena Saraguro al Sur del Ecuador.
Las especies se colectaron en San Lucas, cantón y provincia de Loja. La información (especies,
forma de preparación, etc.) se obtuvo a partir de 10 informantes Yurak Hampiyachak (hierbateros) (Fig 1 y 2), asignados por el Departamento de Salud Intercultural de Saraguro, todos con una
edad superior a los 36 años y con experiencia en el uso de especies medicinales de más de 19
años, 6 fueron mujeres y 4 varones.
Fig. 1. Rosa Francisca Medina Comunidad Cañi
Fig 2. Aurelia Quizhpe Comunidad Pichic
Manuel Agustin Tene©
En este tipo de afecciones respiratorias los Hampiyachak utilizan 7 especies: Solanum americanum Mill, Mentha piperita L., Lepidium chichicara Desv., Clinopodium sp L., Borago officinalis L.,
Eucalyptus citriodora y Ruta graveolens L.).
El Solanum y la Mentha son usadas por el 100% de los Hampiyachak; el 90% usa Clinopodium y
Lepidium, el resto son utilizadas menor porcentaje. Todos en estado fresco. Por marchas
fitoquímicas 1 se determinó: alcaloides, coumarinas, catequinas, esteroides, flavonoides, saponinas, taninos. Del análisis cromatográfico del aceite esencial de Mentha piperita L., se determinaron como compuestos más representativos: Acetato de linalilo (57,12%) y Linalool (12, 81%),
231
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mientras que en el aceite esencial de Clinopodium sp L., fueron: Mentona (51,87%), Pulegona
(36,09%)[2]. El fitopreparado elaborado contiene extractos fluidos de Clinopodium sp L., Lepidium
chichicara Desv., Mentha piperita L. y Solanum americanum Mill, excipientes y el agua floral del
aceite esencial del Clinopodium y Mentha.
Durante la estabilidad se consideró los factores tiempo y temperatura, evaluandose el pH,
densidad, extensibilidad, color, olor y microbiológico en los días 1, 7, 15, 21, 30 y 41. En dicho
periodo no se presentaron cambios en los lotes expuestos a temperatura controlada, mientras
que al ambiente existe una ligera variación en el pH y la extensibilidad; cambios que no fueron
apreciables en el producto.
Bibliografia
1. Miranda, 2002. Prácticas de farmacognosia y productos naturales, La Habana-Cuba. 126p.
2. Adams R, 1995. Identification of essential oil components by gas chromatography/mass spectroscopy. Allured
Publishing Carol Stream, Illinois. USA. ¬
232
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3
Valorizacion quimica de la materia prima y residuos (torta) del
proceso de extracción de aceite esencial de frutos de Palo
Santo (Bursera graveolens) empleado en la industria
cosmética - Loja - Ecuador
Manuel Andrade1, Chabaco Armijos1, Cristian Merchán1, Omar Malagón1,
Francesco Bracco2, Paola Vita Finzi3, Giovanni Vidari3
2
1
Instituto de Química Aplicada - Planta de Productos Naturales (UTPL), Loja - Ecuador
Dipartimento di Ecologia del Territorio Univ. Pavia 3Dipartimento de Chimica Organica Univ. de Pavia
Con la finalidad de contribuir al mejoramiento del nivel Socio Económico de comunidades
campesinas de Malvas, Chaquiro y Tutumos, asentados en el Cantón Zapotillo de la provincia de
Loja, desde el 2007 la UTPL, la ONG Naturaleza y Cultura Internacional y la empresa NATURA de
Brasil, mantienen un proyecto para el aprovechamiento sustentable de los frutos de Bursera
graveolens, exportandose 130 Kg de aceite esencial hasta la fecha que sirve como materia prima
para la industria comética y perfumera.
Para determinar la Hm se uso la técnica AOAC 950.46[1], cenizas AOAC 940.26, para grasas una
técnica volumétrica (Método Soxhlet)[2], para fibras una técnica volumétrica (Método de
Balón)[2], fósforo la AOAC 970.93, pH AOAC 981.12, para sólidos solubles se utilizó el índice de
refractómetro y Brix (INEN 380), para nitrógeno no proteico y acidez (Técnica Volumétrica)[2],
Color (cartas colorimétricas RHS)
Para el análiis se tomo 1Kg de frutos que representa el 0.6% del lote total de frutos a procesar.
De los 2335 frutos (1Kg.) se realizo un cuarteo hasta obtener una muestra de 175 frutos que
fueron analizados. Los resultados obtenidos para los frutos son: Hm 72.4%, Fibra 34.31%, Grasa
42.24%, Fósforo 77.52mg/100g, Nitrógeno no proteico 0.11%, Brix 3, AGL 17.84%, pH 4. El fruto es
una drupa de 1cm de largo con una semilla aovada, el peso promedio de cada fruto es de 0.57gr,
de los cuales la semilla presenta 19.2% y la pulpa más la corteza 80.8%. El color característico de
los frutos de la mayoría de los frutos analizados (64.7%) se ubican en la escala YELLOW - GREEN
GROUP 152 B. El resto (35.3%) es una mezcla de la escala antes indicada y el grupo GREYED - RED
GROUP 178 B.
Fig. 1. frutos de Bursera graveolens
Fig 2. frutos de Bursera graveolens
Finalmente se analizó el residuo (torta), los resultados fueron: Fibra 62.18%, Hm 3.64%, Grasas
3.01%, Cenizas 4.14%, pH 4.41, AGL 3.12mg de NaOH/gr aceite, no se registran sólidos solubles
233
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(Brix). En lo que se refiere al Nitrógeno no proteico el contenido en el fruto fresco es 0.11% se ve
reducido en la torta a 0.063% que podría justificarse por el exagerado proceso térmico (2.53horas).
Bibliografia
1. AOAC (1996). Official Methods of Analysis (15th ed.)
2. Pizarro, 1988, MANUAL DE ANALISIS AGROQUIMICO, UTPL, 65p ¬
234
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3
Plantas tintoreas y proceso de teñido artesanal en la
Comunidad Saraguro - Sur del Ecuador
Angel Leonidas Chalán1, Chabaco Armijos1, Omar Malagón1, Natividad Guamán2,
Rosa Guamán2, Maria Chalán2, Paola Vita Finzi3, Giovanni Vidari3
2
1
Planta de Productos Naturales (UTPL)
Tintoreras artesanales de la comunidad indígena Saraguro
3
Universitá de Pavia
El estudio reporta las especies tintóreas usadas por teñidoras artesanales de la etnia Saraguro,
así como el proceso tradicional de teñido en negro, color característico de las prendas de vestir
de los Saraguros. Se trabajó con tres teñidoras, cuya edad oscila entre los 60 y 80 años y con
experiencia en el uso de especies tintóreas superior a los 20 años. La información se obtuvo
mediante una entrevista a los colaboradores (Fig 1, 2 y 3)
Fig. 1. Hilado de lana de oveja
Comunidad Saraguro
Angel Leonidas Chalá©
Fig 2. Inmersión de la lana en la
solución tinórea
Foto Autorizada por Rosa Guamán
Fig 3. Tejido hilo de lana teñido
Comunidad saraguro
La investigación se realizó en el cantón Saraguro. Se reportaron 29 especies usadas
empíricamente en el teñido de lana. Del total tres son utilizadas ancestralmente por los
MACERACIÓN
PLANTA
PROCESO
EXTRACTO
COLOR
OBTENIDO
3 Meses
Garuk
Brown Group
200A
3 Meses
Llama
Black 202 A
Uso inmediato
Campiche
Greyed orange
175 A
LANA TEÑIDA
Tabla 1. Clasificación del color de la lana teñida artesanalmente
235
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Saraguros en el teñido de su vestimenta negra típica: Campiche (Caesalpinia spinosa), Garuk
(Lomatia hirsuta) y Llama (Eccremis coarctata).
Los análisis realizados a las soluciones tintóreas fueron: pH, sólidos solubles, sólidos totales y
clasificación del color (Tabla 1). Para determinar la resistencia o durabilidad en el tiempo de los
materiales teñidos, las lanas luego de la tinción artesanal fueron analizadas mediante el análisis
de: solidez del color a la intemperie y solidez del color al frote. 1, 2 Sobre el proceso artesanal de
teñido, se determinó tres diferentes métodos para el teñido negro: Proceso tradicional empleando especies vegetales, Proceso de teñido utilizando anilina, y Proceso de teñido con tinta
índigo.
Bibliografia
1. Alan Johnson, 1995, The Theory of Coloration of Textiles, Second Edition, Edited By Alan Johnson, 457 p., 1995
2. Lock, 1997, Colorantes Naturales, PUCP-Fondo Editorial, 274 p. ¬
236
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3
Ecología e Identificación de Metabolitos Secundarios de
Hongos Basidiomicetes en un Bosque Montano Alto de la
Comunidad Indígena Saraguro, Sur del Ecuador
José Miguel Andrade1a, Omar Malagón1b, Giovanni Vidari2
1
Instituto de Química Aplicada (IQA)-Universidad Técnica Particular de Loja (UTPL) Ecuador
2
Università degli studi di Pavia
a
El estudio presenta datos cuantitativos sobre la riqueza y abundancia de macrohongos en el
sur del Ecuador, además se reporta el estudio químico de Clitocybe sp., hongo comestible usado
por los indígenas Saraguros. En el Ecuador son casi nulos los estudios sobre hongos superiores y
sus usos, se estima que existen aproximadamente 100.000 especies (1). Para la región sur,
concretamente la provincia de Loja, no existen trabajos en relación a ecología y química de
hongos útiles, la bibliografía reporta únicamente ocho especies registradas (2).
La investigación se realizó en dos comunidades vegetales: bosque primario (BP) y pastizal
nuevo (PN). Se identificaron 14 especies, el 50% son especies útiles, tres medicinales y cuatro
especies comestibles. El estudio de diversidad demostró que la mayor riqueza y abundancia se
presentó en la comunidad PN, seguido del BP. Los índices de diversidad difieren entre los sitios
estudiados. Según el índice de Simpson y el de Shannon-Wiener la comunidad PN presentó
valores mayores 1,144 y 2,011 respectivamente. Distinto patrón presentó BP con una diversidad
menor 0,930 para Simpson y 0,269 para Shannon-Wiener.
Para el estudio químico se utilizó 200 g del hongo molido y seco, la cual fue sometida a
maceración con CH2Cl2 por un período de 24 horas. El extracto obtenido fue filtrado y concentrado al vacío, se separaron los ácidos grasos libres por medio de una columna en alúmina,
obteniendo una fracción de ácidos grasos libres (B) y una fracción llamada (A). 50 mg. de la
fracción B, se metilaron con diazometano y en base al análisis de sus espectros de masa (GC-MS)
se identificaron los ácidos hexadecanoico, 9,12-octadecadienoico, 9-octadecenoico y el ácido
octadecanoico. La fracción A se sometió a partición con Hex:AcOEt 2:1 y se obtuvieron A 1, A2 y A3.
El análisis de espectro de 1H RMN (200MHz) de A2 y A3 permitió identificar los esteroles: ergosterol y el peróxido de ergosterol. La fracción A1 se purificó por una cromatografía de columna con
Hex:TBME 6:4, y se obtuvieron tres compuestos, sus espectros de 1H RMN (200MHz) permitieron
determinar los siguientes lípidos: triacilglicerol, 1,3-diacilglicerol y 1,2-diacilglicerol. Los mismos
fueron saponificados con NaOH y metilados con diazometano. Luego en base a sus espectros de
masa se identificaron los siguientes ácidos: hexadecanoico o ácido palmítico; 9, 12octadecadienoico o ácido linoleico; 9-octadecenoico o ácido oleico, octadecanoico o ácido
esteárico y el acido 1, 2- bencenodicarboxílico. Finalmente, concluimos que la composición de
ácidos grasos valida el consumo de este hongo en la dieta alimentaria de los indígenas Saraguros.
Bibliografia
1. Læssøe T. & Petersen J. H. 2008. Svampe. Equatorial fungi-mycological biodiversity in Ecuador. 68 pags.
2. Briones R. 2008. Géneros, Especies y Localidades de Ascomicetes y Basidiomicetes representados en la colección
de Hongos del Fungario QCA (M). Pontificia Universidad Católica del Ecuador, Escuela de Ciencias Biológicas. ¬
237
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3
Efecto del extracto acuoso de la raíz de ruellia tuberosa sobre
las enzimas antioxidantes en ratas diabéticas
(Effect of aquose extracts of Ruellia tuberosa roots on antioxidant enzymes activity in diabetic rats)
Maldonado A.M., Ciangherotti C., Silva J.A., Camacho E., Matos M.G., *Israel. A.
Universidad Central de Venezuela, Facultad de Farmacia, Laboratorio de Neuropéptidos.
Caracas. Venezuela
[email protected], *Tutor
La Ruellia tuberosa es una especie perteneciente a la familia Acanthaceae cuyo extracto acuoso
de la raíz es utilizado popularmente por la población venezolana por su actividad antidiabética.
En el presente estudio se evaluará la acción de dicho extracto sobre los niveles de glucosa
sanguínea, las enzimas antioxidantes [catalasa (CAT) y superoxido dismutasa (SOD)] y el posible
efecto protector sobre daño glomerular renal (proteinuria) en la diabetes mellitus inducida in
vivo. Se emplearon ratas Sprague-Dawley de 230-250 g, a las cuales se les indujo diabetes experimental mediante la administración de estreptozotocina (70 mg/Kg, i.p.). Se monitorearon los
niveles de glucosa durante 5 días, hasta alcanzar ≥ 250 mg/dL. La mitad de los animales controles
y la mitad de los diabéticos fueron tratados durante 30 días con el extracto acuoso de raíz de
Ruellia tuberosa (10 mg/Kg, i..p.). Se recolectaron muestras de orina de 24 horas y se monitorearon los niveles de glucosa sanguínea, cada semana. Se sacrificaron los animales por decapitación
y se extrajeron los riñones para la determinación de la actividad de las enzimas antioxidantes
mediante espectrofotometría. Nuestros resultados demuestran que la diabetes inducida por
estreptozotocina produce proteinuria, la cual disminuye significativamente a partir de la tercera
semana de tratamiento con la Ruellia tuberosa. La diabetes experimental produjo una reducción
significativa de la actividad CAT y SOD comparada con los animales control y este efecto no fue
alterado por el tratamiento con el extracto acuoso de de raíz de Rubelia tuberosa.
Aunque se desconoce el mecanismo mediante el cual el extracto acuoso presenta actividad
antidiabética y nefroprotectora, los hallazgos anteriormente citados son considerados una
introducción importante para futuras investigaciones en los que se considere este recurso
etnobotánico como posible tratamiento para la diabetes mellitus.
Palabras claves: Daño renal, Diábetes Mellitus, Ruellia tuberosa, microalbuminuria, estrés oxidativo. ¬
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3
Anti-inflammatory activity of Abarema cochliacarpos in an
experimental models of ulcerative colitis
Da Silva M.S.1, Sanchez-Fidalgo S.2, Talero E.2, Cárdeno A.2, Da Silva M.A.3,
Almeida A.C.A.1, Socca E.A.R.1, Villegas W.4, Souza-Brito A.R.M.1,
Catalina Alarcón de La Lastra2
1
Campinas State University-UNICAMP
2
University of Seville
3
Alfenas Federal University
4
São Paulo State University
Aim
The aim of this study was to asses the effects of the butanolic fraction of methanolic extract
(AC of the bark of abarema cochliacarpos (gomes) barneby & grimes (mimosaceae), a brazilian
native plant known popularly as “barbatimão”, in an acute and chronic ulcerative colitis models
induced by intra-colonic administration of trinitrobenzensulfonic acid (TNBS) in wistar rats.
Methods and Results
In the acute model, AC (100 and 150 mg/kg/day) was administered by gavage 48, 24 and 1 h
prior to the induction of colitis by 10 mg TNBS and 24 h later. The animals were sacrificed 48h
after. In the chronic model, 150 mg/kg of AC was administered daily, starting 24 h after 30mg
TNBS instillation, during 14 days. Experiments followed a protocol observed by the Animal Ethics
Committee of the University of Seville. The lesions were blindly scored according to macroscopic
and histological scales. The inflammatory response was also assessed by histological analysis and
myeloperoxidase activity (MPO). Mucosal anti-inflammatory cytokine (IL-10) and inducible
enzymes expression, iNOS and COX-2, as well as JNK activation, by western-blotting, were also
determined. Phytochemical studies by mass spectrometry showed that catechins were a major
component into condensate class of tannins. The NMR characterization shows the major constituent was (+)-catechins. In the acute model, AC100 and AC150 showed a significant decrease in
colon damage score as compared to the TNBS group (279.5 ± 50.6 mm 2 and 258.5 ± 49.9 mm2
respectively, p<0.05). Histological analysis showed that both doses of the extract improved the
microscopic structure. In addition, the MPO activity was decreased in a dose-dependent way (2.9
± 0.2 U/mg tissue, p<0.01, and 2.3 ± 0.1U/mg tissue, p<0.001, vs TNBS group, respectively). The
COX-2 and i-NOS expression were significantly diminished, as well as the involvement of JNK
signaling, although it was signi?cant at 150mg/kg only (p<0.05 vs TNBS group). Moreover, IL-10
levels determination, by ELISA kit, obtained no significant results. In the chronic model, daily
administration of 150 mg/kg of AC showed a significant reduction of lesion as compared to TNBS
group (p<0.001). The histological analysis showed preserved some areas of the colonic mucosa
structure. Moreover, MPO activity was significantly reduced (p<0.05) and, IL-10 cytokine production was significantly increased (p<0.01) as compared the TNBS. Finally, COX-2 and iNOS expression also were attenuated, and JNK activation was diminished.
Conclusion
These data suggest that Abarema cochliacarpos possess active substances, which exert marked
protective effects in both acute and chronic experimental colitis, and justifying, at least in part,
the popular use of this plant to treat gastrointestinal diseases.
239
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Financial support
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Universidade
Estadual de Alagoas (UNEAL) and Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia de Sergipe
(IFS). ¬
240
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3
Abarema cochliacarpos: Gastroprotective and Ulcer Healing
Activities
Da Silva M.S.1,4,5, de Faria F.M.1, Almeida A.C.A.1, da Silva M.A.2, Luiz-Ferreira A.1,
Takayama C.1, Dunder R.J.1, Pellizzon C.H.6, Vilegas W.3, Souza-Brito A.R.M.
1Universidade Estadual de Campinas, UNICAMP
2Universidade Federal de Alfenas, UNIFAL
3Universidade Estadual de São Paulo, UNESP - Araraquara
4Universidade Estadual de Alagoas, UNEAL
5Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia de Sergipe, IFS
6Universidade Estadual de São Paulo, UNESP - Botucatu
Aim
Abarema cochliacarpos is a Brazilian native plant occurring mainly in the Atlantic Forest and in
the Caatinga biomes, which is popularly known as “barbatimão”. It belongs the Mimosaceae
family. The aim of this study was to assess the effects of the butanolic fraction of methanolic
extract of the Abarema cochliacarpos’ bark (AC) in the ulcer healing, as well as evaluate both
acute and chronic toxicity.
Methods and Results
Acute toxicity studies were performed on male and female Swiss mice (n=10). A single dose of
AC (5g/kg) was administered orally to groups of animals after a 12-h fast. Animals receiving 8%
Tween 80 served as control. Healing action was evaluated in acetic acid-induced gastric ulcers
model. After the exposing the stomach, 0.05 ml (v/v) of a 30% acetic acid solution was injected
into the subserosal layer in the glandular part of the anterior wall (Japanese Journal of
Pharmacology 19, 418-426, 1969). Male Wistar rats (150-250g) were divided into groups. AC (150
mg/kg), vehicle (10 ml/kg) and lansoprazole (30 mg/kg) received treatments by gavage once a
day for 14 consecutive days.
During this period, body weight was recorded for evaluate possible chronic toxicity induced in
AC. Experiments followed a protocol observed by the Animal Ethics Committee of the Campinas
State University-CEEA/IB/UNICAMP. Stomachs were photographed and the extent of the lesions
was measured (mm2) by AVSoft BioView program. The statistical significance was calculated
using ANOVA followed by Tukey’s test. Samples tissue were collected for histological and imunohistochemical analysis. Phytochemical studies were also carried out. A single oral dose of AC
(5g/kg) did not produce any visible signs or symptoms of toxicity in the treated animals. After 14
days of administration, no animal had died, and no significant macroscopic changes in daily body
or organ weights were observed. AC (150 mg/kg) showed healing activity which was demonstrated by reduction of lesion area (49.81 ± 3.93 mm 2 vs. 103.80 ± 5.73mm2 in the negative control,
p<0.001), in agreement with both HE and PAS histological analysis. No significant changes in daily
body or organ weight were observed.
Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) results indicated induction of cell proliferation. The
immunohistochemical analysis of heat shock proteins (HSP-70), cyclooxygenase (COX-2) and vase
marked (VEGF) in the gastric tissue suggested that ulcer healing activity was induced by the
increased of the expression of these factors. Phytochemical studies by mass spectrometry and
NMR characterization showed that catechins were a major component into condensate class of
tannins, and the main constituent was (+)-catechins.
241
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Conclusion
All these results suggest that Abarema cochliacarpos (Gomes) Barneby & Grimes presents
wound healing properties. The safety and efficacy in the healing of gastric ulcers is based on its
ability to activate the expression of COX-2 and VEGF and stimulate proliferative factors that reestablish the gastric mucosa integrity.
Financial support
(IFS). ¬
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3
Aristolactamas presentes nas raízes de Ottonia anisum
Sprengel
André M. Marques1*, Leosvaldo S.M. Velozo1, Davyson de L. Moreira2,
Elsie F. Guimarães3, Maria Auxiliadora C. Kaplan1
1
Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais (NPPN), Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ),
Rio de Janeiro, RJ, Brasil
2
Instituto de Tecnologia de Fármacos (Far-Manguinhos), FIOCRUZ, Rio de Janeiro, RJ, Brasil
3
Instituto de Pesquisa Jardim Botânico do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, RJ, Brasil
*[email protected]
A família Piperaceae pertence à superordem Nymphaeiflorae, ordem Piperales sendo formada
por 5 gêneros e cerca de 2000 espécies que possuem distribuição pantropical, com boa representatividade na América Central e do Sul. No Brasil ocorrem cerca de 260 espécies de Piperaceae,
das quais poucas foram investigadas do ponto de vista químico e/ou farmacológico. Os resultados da investigação química de Piperaceae baseiam-se, principalmente, no isolamento de
substâncias de espécies do gênero Piper (amidas, lignanas, neolignanas, arilpropanóides,
flavonóides, cromenos). De espécies do gênero Ottonia já foram descritas algumas amidas e
derivados arilpropanoídicos. Recentemente tem sido dedicada maior atenção ao estudo de
espécies nativas de Piperaceae da Mata Atlântica do Estado do Rio de Janeiro. Nesse contexto,
Ottonia anisum coletada no município de Xerém, RJ, em dezembro de 2006, teve seu extrato das
raízes estudado do ponto de vista químico. O material vegetal seco em estufa, triturado e levado
à extração com metanol foi fracionado por partição líquido-líquido, sendo as frações menos
polares reunidas e cromatografadas sobre Sephadex LH-20. Esse processo rendeu frações
concentradas em substâncias muito fluorescentes que foram separadas por cromatografia em
camada preparativa de gel de sílica usando como eluente o sistema binário hexano: acetato de
etila (1:1). Foram obtidas 6 frações distintas que foram analisadas por técnicas de RMN de 1H e 13C
(1D e 2D). Comparação dos sinais de RMN de 1H e 13C das 6 frações com registros da literatura
evidenciaram padrão de equivalência com estrutura de aristolactamas substituídas por hidroxilas
e/ou por metoxilas nas posições 2, 3, 4, e 6 e não substituídas nas posições 5, 7, 8 e 9. Para a
determinação exata da localização das hidroxilas e metoxilas foram necessárias análises de RMN,
tais como, COSY, NOESY, e HMBC. Essas análises possibilitaram estabelecer inequivocamente o
padrão de substituição das 6 diferentes aristolactamas (Fig. 1).
(1) R1=OH; R2=OCH3; R3= OCH3; R4=H;
(2) R1=OCH3; R2=OCH3; R3=OCH3; R4=H;
(3) R1=OCH3; R2=OCH3; R3=OCH3; R4=OH;
(4) R1=H; R2=OCH3; R3=OH; R4=H;
(5) R1=H; R2=OCH3; R3=OCH3; R4=H;
(6) R1=H; R2=OCH3; R3=OCH3; R4= OCH3;
Fig. 1 - Aristolactamas isoladas de Ottonia anisum e identificadas por RMN 1D e 2D.
Agradecemos ao CNPq.
Keywords: Piperaceae; Ottonia anisum; aristolactams. ¬
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3
Biological Activity and Chemistry of Piper claussenianum’s
Essential Oil
André M. Marques1, Cristina H.P. Lima1, Eber M. Batista3,
José Alexandre da R. Curvelo3, Anna Léa Silva Barreto3, Leosvaldo S.M. Velozo1,
Davyson L. Moreira2, Rosângela M. de A. Soares3, Maria Auxiliadora C. Kaplan1
1
Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais (NPPN), Centro de Ciências da Saúde, Bloco H, UFRJ
Tel. 55-21-2562-6791/6513,Tel/Fax: 55-21-2562-6512
CEP: 21941-590 - Rio de Janeiro - RJ, Brasil.
2
Instituto de Tecnologia de Fármacos - Far-Manguinhos/FIOCRUZ, Rio de Janeiro.
3
Departamento de Microbiologia Geral, Instituto de Microbiologia Paulo Góes, UFRJ, Rio de Janeiro
Brazil, a country of megadiversity encompasses the richest flora in the world. A great number
of the Brazilian plant species are used in folk medicine to treat many types of conditions. The
family Piperaceae is formed by five genera: Piper, Peperomia, Ottonia, Sarcorhachis and
Pothomorphe; including 2500 species widely distributed in the tropical and subtropical regions
[1]. Species of Piper, the largest genus of the family, are the most studied on chemical and pharmacological point of view. The essential oils from Piper species are chemically diversified and
show several biological activities [2]. Fresh leaves and inflorescences of Piper claussenianum were
separatedly extracted by hydrodistillation during 2h in a Clevenger-type apparatus. The essential
oils were recovered in about 1% yield. Analysis of the plant volatile fractions were carried out on a
GC-MS QP5000 Shimadzu with a ZB-5MS fused silica capillary column (30m x 0.25mm, 0.25μm
film thickness). The operating temperatures were: injector 260°C; detector 290¯C and column
oven 60°C up to 290°C (3°C/min). Identification of the detected analytes was accomplished by
matching their mass spectra with the available databases. The presence of trans-nerolidol was
remarkably in both organs being above 80.0% in the leaves and 22.0% in the flowers in which the
main constituent was the linalool (50.0%). Arginase is metalloenzyme dependent manganese able
to hydrolyze L-arginine to L-ornithine and urea and its activity has been related to the synthesis
of nitric oxide (NO) and consequently related to cytotoxic process and immunological mechanisms. The genus Leishmania has a detectable arginase activity which is considered to have a role in
the production of ornithine, and therefore essential for the growth of the parasite, since previous studies revealed that arginase null protozoans are unable to generate polyamines. The
inhibition of this enzymatic activity could be able to modulate cellular infection in Leishmania
major and Leishmania infantum infected macrophages. The effect of essential oil of P. claussenium on arginase activity levels showed an inhibition of 62,17% of enzime activity .The results
corroborate the nerolidol’s activity on Leishmania’s strains and stimulate the scientific interest
about the potential value of this plant species on neglected diseases and therefore, arginasespecific inhibitors could be potential new substances of pharmacological interest for the treatment of leishmaniasis.
Acknowledgements
1. Yuncker, T. G. 1972, Hoehnea, 2,19-366.
2. Parmar, S. V.,l., 1997, Phytochemistry, 46, 597.
3. CAPES and CNPq. ¬
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3
Investigación de la actividad antiestafilocócica y citotóxica de
extracto acuoso de Acacia aroma
Mattana C.1, Satorres S.1, Sosa A.2, Sabini C.3, Sabini L.3, Alcaráz L.1
1
Área Microbiología
Área Farmacognosia. Fac. de Qca, Bioqca y Farmacia. UNSL. San Luis. Argentina
3
Departamento de Microbiología e Inmunología, Fac. de Cs. Ex. Fco-Qcas y Nat. UNRC.
Córdoba - Argentina
[email protected]
2
Ante la comprobada resistencia de Staphylococcus aureus a múltiples antibióticos, se han
realizado numerosas investigaciones orientadas hacia la búsqueda de nuevos compuestos con
actividades biológicas, siendo las plantas una fuente importante de productos naturales con
actividad antibacteriana. En la medicina folclórica de Argentina, la especie Acacia aroma,
comúnmente llamada “tusca”, es usada como cicatrizante y antiséptico para el tratamiento de
heridas.
El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antiestafilocócica de extracto acuoso de A.
aroma y su potencial citotoxicidad frente a células Vero.
Ensayo microbiológico
Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) del extracto (obtenido a 70ºC) frente a
cepas de S. aureus ATCC 29213, S. aureus ATCC 43300, S. aureus ATCC 35556 y 6 aislamientos
locales de S. aureus obtenidos de infecciones de piel. Se empleó el ensayo de microdilución en
caldo utilizando microplacas de 96 pocillos. Se adicionó en cada pocillo 95μl de caldo Moeller
Hinton suplementado con 0,01% de cloruro de 2,3,5,-trifeniltetrazolium como indicador visual de
crecimiento bacteriano, 5μl de una suspensión de 10 7UFC/ml de las cepas y 100μl de diluciones
seriadas en base dos (2000 - 62,5μg/ml) del extracto. Se incluyeron controles de medio, extracto
y cepas. La experiencia se realizó por triplicado. Las placas se incubaron a 37ºC 24 h, se añadió
100μl de isopropanol para disolver los cristales de formazán y se leyó la absorbancia a 655 nm en
lector de Elisa.
Ensayo de citotoxicidad
La citotoxicidad del extracto acuoso fue determinada por el método del rojo neutro utilizando
monocapas de células Vero ATCC CCL-81 pasaje 95 sembradas en microplacas de 96 pocillos. Se
probaron 11 concentraciones del extracto: 5000, 4000, 3000, 2000, 1000, 800, 600, 500, 300, 100
y 50μg/ml. Se incluyeron 8 pocillos con medio de mantenimiento como control celular. Se adicionaron 200μl de cada dilución de extracto por pocillo y se incubó 48 h a 37ºC. La experiencia se
realizó por cuadruplicado. Posteriormente se descartó el medio con extracto, se agregó una
solución de rojo neutro (30μg/ml) y se incubó durante 3 h a 37ºC. Se descartó el medio con rojo
neutro, se adicionó una solución de extracción: agua:alcohol:ácido acético (49:50:1) y se agitó la
placa suavemente por 15 min. La absorbancia se leyó a 540 nm en lector de Elisa.
Con los valores de densidades ópticas de ambos ensayos se calcularon los porcentajes de
inhibición bacteriana, Concentración Efectiva 50 (CE 50), Concentración Citotóxica 50 (CC 50) e
Índice de Selectividad (IS).
Los resultados obtenidos indicaron una CIM en el rango de 250 a 500μg/ml, una CE 50 de 190 ±
10μg/ml, una CC50 de 1,8 mg/ml y un IS=9,50 ± 0,5.
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El índice de selectividad obtenido nos garantiza su selectividad de acción por lo que sería
factible la aplicabilidad de este extracto como posible fitoterapéutico antiestafilocócico sobre
tejidos vivos. ¬
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3
Composicion quimica y actividad antibacteriana del aceite
esencial de Origanum majorana l. de los andes venezolanos
Sulymar Ramos1, Luis B. Rojas1, Maria Eugenia Lucena2, Gina Meccia1,
Alfredo Usubillaga1
1
Departamento de Bioanálisis Clínico.
Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes, Mérida-Venezuela
*
[email protected]
2
Origanum majorana es una Labiada muy utilizada en gastronomía y medicina natural. Es una
planta herbácea de hojas pequeñas y flores blancas o rosadas; originaria del Oriente Medio, se
extendió luego por toda Europa. Tradicionalmente es usada en trastornos digestivos, como
aperitivo, tónico estomacal, carminativo y afrodisíaco; es hipotensor, diaforético, expectorante y
sedante suave del sistema nervioso; además, tiene una importante aplicación industrial, sobre
todo como condimento para la carne, salchichones y embutidos. En el presente estudio, la planta
de Mejorana fue colectada en San Isidro de Apartaderos (estado Mérida), a 3.342 m.s.n.m. Para la
obtención del aceite esencial se empleó el método de hidrodestilación utilizando la trampa de
Clevenger, obteniéndose un rendimiento de 0,6%. El análisis del aceite esencial de O. majorana se
realizó por medio de un equipo de cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas.
Los compuestos mayoritarios resultaron ser α-terpineno (3,57%), γ-terpineno (7,19%), cis-sabineno
hidrato (4,41%), trans-sabineno hidrato (30,18%), 4-terpineol (28,79%), α-terpineol (6,88%) y linalil
acetato (3,85%). Por otra parte, se realizó un fraccionamiento del aceite de Origanum majorana
sobre columna seca, lográndose separar los dos componentes mayoritarios: en la fracción 1 se
obtuvo el trans-sabineno hidrato (67,58%) y en la fracción 3 al 4-terpineol (72,85%). El estudio de la
actividad antibacteriana del aceite esencial se realizó mediante el método de difusión en agar con
discos, sobre cepas de Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli y Klebsiella
pneumoniae, encontrándose actividad inhibitoria sobre todas ellas. También se determinó la
actividad antibacteriana de las fracciones 1 y 3 obtenidas del fraccionamiento en columna seca
del aceite esencial, observándose que la fracción 1 posee mayor actividad que la fracción 3, por lo
que se puede concluir que el trans-sabineno hidrato es el componente determinante para la
inhibición del crecimiento bacteriano en el aceite esencial de Origanum majorana.
Palabras clave: Aceite esencial, Lamiaceae, Origanum majorana, actividad antibacteriana, fraccionamiento. ¬
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3
Estudio comparativo de los componentes volátiles de dos
especies de Annonaceae que crecen en el Estado MéridaVenezuela.
Meléndez M., Rojas L., Carmona J., Usubillaga A.
Instituto de investigaciones. Laboratorio de Productos Naturales, Facultad de Farmacia y Bioanálisis
Universidad de los Andes. Mérida Venezuela
[email protected]
La Anonna muricata L. y la Anonna cherimolia Mill., corresponden al orden Magnoliales, familia
Annonaceae. Son árboles de unos 5 a 8 metros de altura aproximadamente; Aunque ambas
crecen en América Tropical, la Anonna cherimolia Mill es propia del clima subtropical siendo
cultivable en clima tropical a alturas mayores de 900 metros s.n.m.; La primera posee una fruta
muy delicada de color verde oscuro cubierta de espinas suaves de cáscara muy delgada; el fruto
de la Anonna cherimolia Mill tiene forma cordiforme, cubierto de escamas, y es de color verde
pálido. Ambas son utilizadas por sus propiedades anticancerígenos, antimicrobianas y
antifúngicas gracias a la diversa cantidad de acetogeninas que poseen. En este trabajo se realiza
un estudio comparativo de los aceites volátiles de estas dos especies de Annonáceas para lo cual
se empleó 420g de partes aéreas de la Anonna muricata L., y 330g de la Anonna cherimolia Mill,
que fueron sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger por 3 horas obteniendo 0.3 ml de un aceite de color amarillo y 0.4 ml de un aceite blanquecino respectivamente.
El análisis de los aceites de las dos especies de annona, se realizó por cromatografía de gases
empleando un equipo de Marca Pekín Elmer modelo Autosystem equipado con una columna AT-5
de 60m de largo y 0,25 mm de diámetro, también se uso un sistema GC/MS Hewlett Packard MSD
5973 con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30 m x 0,25 mm (HP-5). La identificación de
los componentes se realizó con ayuda de una librería Wiley Ms Data (sexta edición, 275 K
Spectra). Se obtuvo como componentes mayoritarios: para la Anonna muricata L. el betaCariofileno 21,27%, alfa-Bergamontene 7,89%, Germacrene D 8,83%, Valencene 14,20% y para la
Anonna cherimolia Mill. el Germacrene D 46,56%, bicyclogermacrene 11,66%, beta-Cariofileno
6,08%, Germacrene B 5,51%. ¬
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3
Obtencion por un metodo de quimica suave del ferroelectrico
BiFeO3
Ruth Meléndrez L., Blanca Martha Cabrera V., Ma. Gpe. Hernandez Tellez,
Juan Carlos Ramirez G., Erika Ramirez M., Albino Moreno R., I. Roberto Portillo y R.
Facultad de Ciencias Químicas, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Edificio 179,
Av. San Claudio y 14 Sur, Col. San Manuel Puebla, Puebla, CP. 72570 México
[email protected]
El ultrasonido es utilizado en la naturaleza, que dotó a ciertos animales con la capacidad de
emitir ondas ultrasónicas, como los murciélagos y delfines. Debido a que, el ultrasonido está
fuera de la banda de frecuencia audible para el hombre, puede ser empleado con intensidad
bastante alta. Las aplicaciones del ultrasonido de baja intensidad tiene, como propósito, transmitir la energía a través de un medio y con esto obtener informaciones del mismo. El ultrasonido de
baja intensidad en medicina se utiliza para diagnóstico, y se basa en la reflexión de ondas
ultrasónicas. En medicina el diagnóstico con ultrasonido es más seguro que la radiación ionizante, como los Rayos X, por eso es preferible en exámenes prenatales, dar seguimiento de
arritmias cardiacas, la detección de tejidos defectuosos, cáncer de colon y un sinfín de patologías
que no pueden ser detectadas por otras técnicas Las ondas ultrasónicas son generadas por
transductores ultrasónicos que convierten la energía eléctrica en un tipo energía mecánica y
viceversa. Estos transductores son hechos de materiales piezoeléctricos que presentan un
fenómeno llamado efecto piezoeléctrico. El BiFeO3 es un ferroeléctrico que posee propiedades
piezoeléctricas. Por lo general estos materiales son preparados por el método cerámico, donde
utilizan calentamientos prolongados a muy altas temperaturas de mezclas de reactivos de cada
uno de los cationes, por este método se tienen altos costos energéticos perdida de la estequiometria etc. En el presente trabajo se obtuvo el BiFeO 3 por un método de Química Suave, a partir
de nitrato de bismuto pentahidratado, Bi(NO 3 ) 3 ·5H 2 O y citrato de fierro III amónico,
[C6H8O7]Fe·NH3 y agua desionizada, con agitación constante y burbujeo de aire durante 220 H. a
temperatura ambiente. Los materiales se sometieron a calcinación a 570ºC durante 5 H. con un
incremento de la temperatura de 2ºC por min. con flujo de aire a una velocidad controlada. Las
muestras de BiFeO3 se caracterizaron estructuralmente mediante difracción de Rayos X para
identificar la fase cristalina. El material obtenido corresponde al BiFeO 3 en fase romboédrica
reportada en las fichas PDF.
Bibliografia
1. Crystal Structures: A Working Approach, by Helen D. Megaw W B Saunders Company, Philadelphia, London,
Toronto. ISBN 0-7216-6260-9.
2. Ferroelectricity in Crystals, by Helen D. Megaw Methuen & CO LTD, 1957, 36 Essex Street, London Wc2
3. Structure - Property Relations. Robert E. Newnham ISBN 3-540-07124-5 Springer Verlag Springer - Verlag Berlin
Heidelberg New York 1975. PZT. Journal of Materials Science Letters 22, 449-453(2003). ¬
249
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3
Fotodegradacion catalitica de fenol
Ruth Meléndrez L.1, José Albino Moreno R.1, Fernando Hernández A.2,
Marco Antonio González C.1, Blanca Martha Cabrera V.1, Ma. Luisa Xochipa J.1,
Marcial Zamora T.1
1
Instituto de Ciencias - Benemérita Universidad Autónoma de Puebla,
Edificio 179, Av. San Claudio y 14 Sur, Col. San Manuel Puebla, Puebla, CP. 72570 México
[email protected]
2
Las aguas contaminadas, pueden ser procesadas con cierto grado de eficiencia por diversos
procesos biológicos y tratamientos químicos convencionales, oxidación térmica, cloración,
ozonización, permanganato de potasio, entre otros; sin embargo, en algunos casos estos procedimientos resultan ser poco eficientes en procesos de tratamientos de aguas industriales, como
lo marcan las normas internacionales.
Los compuestos fenólicos son contaminantes habituales en efluentes industriales, estos
compuestos no se degradan eficientemente a través de métodos convencionales de tratamiento,
presentan altos grados de toxicidad y afectan las propiedades organolépticas del agua. La
energía solar puede usarse directamente para degradar compuestos orgánicos contaminantes
aunque sólo un número limitado de compuestos orgánicos puede absorber luz y directamente
experimentar una transformación química. Contaminantes orgánicos pueden destruirse con
nuevos tratamientos denominados procesos avanzados de oxidación, como el estudio del
siguiente trabajo, donde se realiza la fotodegradación catalítica de fenol en catalizadores mixtos
de oxido de tungsteno y oxido de titanio, utilizando como fuente de radicales libres ( .OH) la
radiación ultravioleta, el peróxido de hidrogeno y el ozono. Los catalizadores se prepararon por
el método de sol-gel a partir del isopropoxido de titanio y el acido tungstenofosfórico al 1% y 3%
en peso de tungsteno en medio básico. Se calcinaron a 400°C durante 5 horas con un incremento
de la temperatura de 2°C por minuto, con un flujo de aire a una velocidad controlada. Los catalizadores se caracterizaron estructuralmente mediante difracción de Rayos X para identificar las
fases presentes, las cuales son la anatasa y rutilo en las mismas proporciones. Por estudios de
TEM se determino el diámetro promedio de partícula el cual fue de 9 a 30 nm. Las pruebas de
fotodegradación, se realizaron en un fotoreactor de flujo continuo. Utilizando soluciones fenolicas de variadas concentraciones, una optima eficiencia de los procesos avanzados de oxidación
de una forma muy importante se ve reflejada cuando se incrementa la concentración de tungsteno
Bibliografia
1. Dong Hyun Koo, Min Kim, and Sukbok Chang, Organic Letters, Vol 7, Número 22, 5015-5018 (2005).
2. Víctor D. Monopoli, Luis R. Pizzio, Mirta N. Blanco, Materials Chemistry and Physics, Elsevier B.V, 331-336 (2008).
3. V. A. Sinani, D. S. Koktysh, B. G. Yun, R. L. Matts, T. C. Pappas, M. Motamedi, S. N. Thomas, N. A. Kotov, Nano Lett.,
3, 1177 (2003) ¬
250
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3
Efecto del consumo de la fruta noni Morinda citrifolia en el
control de glucosa y colesterol en sangre
Virginia Melo Ruíz, Jorge Rivero Martinez, Ma. Carmen Herrera Fuentes,
Ileana Muñiz González, Claudia Pérez Hernández
Universidad Autónoma Metropolitana, Calz. del Hueso 1100, México, D.F. 04960 México
El Noni Morinda citrifolia fruta de originaria de Asia, se trajo a America el siglo pasado, crece en
forma salvaje en regiones tropicales de México, durante todo el año, su pulpa madura blanca es
de olor y sabor desagradable, sin embargo una gran parte de la población la consume por los
posibles beneficios que su ingesta aporta en la reducción de glucosa y colesterol en sangre. Para
confirmar lo anterior se realizó un estudio longitudinal en 51 personas voluntarias de ambos
sexos y edades de 22 a 50 años a los que se tomaron muestras de sangre para medir glucosa y
colesterol en Mayo de 2009 y se aplicó un tratamiento con jugo de Noni que consistió en tomar
100 ml de jugo de Noni por la mañana y 100 ml jugo de Noni por la noche durante tres meses, se
interrumpió éste por 15 días y se repitió por dos veces más. En este tiempo los participantes
conservaron sus hábitos alimenticios normales. Al fin de diez mese y quince días se volvió a
tomar análisis de sangre, se compararon los resultados y se observó que ninguna de las personas
de la muestra presentaba diferencias significativas en niveles de glucosa o colesterol en sangre.
Al mismo tiempo se analizaron macronutrientes en base seca de la pulpa madura de la fruta Noni
y se obtuvieron los siguientes resultados: humedad 81.31%; proteínas 8.16%; lípidos 3.74%; materia
inorgánica 5.14%; fibra 12.43% y carbohidratos solubles 70.53%. Según los daros obtenidos se
concluye que si bien el Noni no modificó los niveles de glucosa o colesterol en sangre, de acuerdo
a su contenido de macronutrientes puede ser una fuente más de alimento, aunque de acuerdo a
la muestra involucrada en el estudio 81% de ellos no lo consumiría como alimento, 15% lo tomaría
en casos extremos de hambre y 4% podría tomarlo esporádicamente o combinado con otro
alimento. El rechazo se debió al sabor y olor desagradable de la fruta. ¬
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3
Hueva de chiquiliques Emerita analoga crusteceo mexicano
fuente de macronutrientes para la poblacion costera
Virginia Melo Ruíz, Nidia Vargas, Jorge Rivero Martinez,
Ma. Carmen Herrera Fuentes, Juliano Palácios Abrantes
Universidad Autónoma Metropolitana, Calz. Del Hueso 1100, Mexico D.F. 04960
Los Chiquiliques Emerita analoga crustáceo ampliamente distribuidos a lo largo de todo el año
en los litorales de México, con mayor abundancia durante la época de lluvias. A partir de la última
década se incrementa su consumo entre la población local, motivo por el cual se llevó a cabo un
estudio mas detallado de este invertebrado, su distribución, biodisponibilidad y propiedades
nutritivas así como los beneficios que aporta en la salud humana. La hueva de los chiquiliques en
base seca se analizó de acuerdo a las técnicas del AOAC 1995 para investigar su contenido de
macronutrientes y proporcionar a los habitantes la información obtenida. Los resultados encontrados fueron: proteínas 52.56%; lípidos 34.46%; materia inorgánica 5.68%; fibra 0.25%; carbohidratos solubles 7.05%. La hueva de Chiquiliques es rica en proteínas biomoléculas indispensables en
el metabolismo humano también cuentan con una cantidad considerable de lípidos importantes
por su participación en la estructura de las membranas celulares, sin embargo la cantidad presente de fibra es minima y los carbohidratos solubles fuente de energía están en poca proporción, en
cuanto a los minerales, estos no se analizaron en forma individual. En conclusión la hueva de los
Chiquiliques es un alimento autóctono que representa una buena fuente de nutrientes que
puede mejorar las condiciones de nutrición entre la población costera. ¬
252
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3
Composición química del aceite esencial de Phthirusa adunca
(Meyer) de los andes venezolanos
Flor D. Mora1, Luis B. Rojas2, Juan Carmona A.1, Bladimiro Silva1
1
2
Universidad de Los Andes, Mérida, 5101,Venezuela
La familia Lorantaceae está compuesta por una serie de plantas semi-parasíticas de una gran
cantidad de angiospermas y gimnospermas. Muchas hepífitas de esta familia se conocen por sus
usos etnomedicinales como antibióticas, antivirales y antinflamatorias. Del género Phthirusa muy
pocas referencias aparecen en la literatura. Algunas lectinas con actividad antimicrobiana se han
aislado de Phthirusa pyrifolia. En este trabajo se presenta la caracterización química del aceite
esencial de Phthirusa adunca Meyer colectada en Venezuela. El aceite esencial de las hojas frescas
de P. adunca fue obtenido por hidrodestilación empleando una trampa de Clevenger. La planta
fue colectada en mayo 2008 en Mérida, estado Mérida, Venezuela, produciendo un 0.8% del
aceite. La separación de los componentes se realizó por GC/MS utilizando un cromatógrafo de
gases 6890 acoplado a un detector de masas Hewlett Packard 5973 sobre una columna de fenilmetil-polisiloxano de 30 m x 0,25 mm (HP-5). La identificación de los componentes se realizó con
ayuda de una librería Wiley MS Data (sexta edición, 275K espectra). Estos equipos trabajaron a
temperatura inicial de 60 °C durante 1 min, luego se le aplica un incremento de 4 °C/min hasta 260
°C por 1 min; manteniéndose durante 10 min la temperatura final. Veinticuatro compuestos (los
cuales representan 94.4% de la muestra) fueron identificados. El 76% de la muestra está representado por tres compuestos: β-felandreno (38.1%), D-germacreno (26.8%) y β-pineno (11.5%). ¬
253
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3
Plantas mágicas de las selvas del Pacifico colombiano - Sur
America
Nayive Pino Benítez, Giovanni Ramirez
Universidad Tecnológica del Chocó, bloque 6, Laboratorio 316, Grupo Productos Naturales,
Conocer sobre plantas medicinales eficaces y la existencia de un poder que entraña fuerzas
que están por encima de la comprensión humana, es conocer sobre plantas con usos mágicoreligiosos, se cree que estas plantas requieren para su efectividad el empleo de técnicas que
ejercen fuerzas ocultas o ritos de invocación de espíritus, las cuales favorecen el acto de curar o
dañar. Su marco metodológico se fundamenta en el trabajo directo en campo interlocutando
experiencias con curanderos que por más de 15 años vienen ejerciendo este oficio, registros en la
base de datos Spica del herbario CHOCÓ donde se depositan las colecciones en las que se encuentran representadas múltiples expresiones no solo de la diversidad genética vegetal sino
también de la memoria ancestral y colectiva de la flora del Departamento del Chocó ubicado en la
esquina nor-occidental de Sur América; otro aspecto metodológico fue realizar revisiones
bibliográficas de forma exhaustiva de la flora regional. En los resultados de esta investigación se
registran 129 especies utilizadas con fines mágico-religiosos, de las cuales 128 fueron determinadas a familia y género, y 115 hasta especie; dichas plantas son agrupadas en 91 géneros y 53
familias, de las cuales 50 familias pertenecen a Magnoliophyta y 3 a Pteridophyta, siendo las más
representativas en número de especies las Piperaceae 19 spp (15%), seguida de Lamiaceae 8% (10
spp), Asteraceae, Gesneriaceae y Leguminosae con 7spp c/u (5%), Acanthaceae 6 spp (5%) y
Liliaceae y Solanaceae con 4 spp c/u (3%); igualmente se encontró que solo 9 spp comparten
funciones en más de una subcategoría (Capsicum annuum L., Petiveria alliacea L., Selaginella sp.,
Peperomia emarginella (Sw. Ex Wikstr.) C.DC., Senna alata Burm. f., Hedychium coronarium
Koenlg., Cordyline fruticosa (L.) A. Chev., Ruta graveolens L. y Piper auritum HBK). Basándose en la
finalidad del uso mágico-religioso, dado por las comunidades las clasificamos en 3 subcategorías
así: plantas usadas con fines benéficos (94 spp), plantas usadas con fines maléficos (31 spp) y
plantas usadas con fines rituales (13 spp). ¬
254
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3
Recursos forestales no maderables en un ambiente
sociocultural de la región del Pacífico colombiano
Nayive Pino Benítez, Oscar Ramiro Prado González, Daniel Robledo
Universidad Tecnológica del Chocó, bloque 6, Laboratorio 316, Grupo Productos Naturales
Para América Latina se reconocen dos grandes categorías de productos forestales no maderables -PFNM:
I) los productos donde se incluyen alimentos de origen vegetal, animal, medicinales y otros
bioactivos (insecticidas, toxinas y estimulantes), extractivos (gomas, resinas, látex, aceites fijos y
esenciales, colorantes, taninos, gomas, lacas, anilinas y ceras), otros animales y derivados (animales vivos, plumas, pieles, cuernos, dientes, cueros, seda, estiércol, miel, ceras, grasas), otras
plantas y derivados vegetales (ornamentales, artesanías, empaques, tallos, hojarasca, tierra
vegetal y paja).
II) Servicios: ambientales (biodiversidad, protección del suelo, calidad y cantidad de agua,
efectos climáticos); sociales y culturales (recreación, importancia histórica incluye valores espirituales, rituales, culturales y patrimoniales). El objeto planteado en este estudio es caracterizar el
uso, conocimiento y manejo de los principales productos forestales no maderables tanto de flora
como de fauna reconocidos en dos comunidades Termales y Partadó en la costa pacífica del
departamento del Chocó, nor-occidente Colombiano, partiendo no solo de su contexto
biogeográfico y ecológico, sino de su acervo cultural. En la metodología se tuvo en cuenta
socialización del trabajo y talleres, señalando objetivos e importancia; de igual forma, que la
propuesta estuviera enmarcada dentro de la misión y visión institucional y departamental,
promoviendo el trabajo comunitario y el emprendimiento de acciones de manejo y conservación
de la biodiversidad. Se presentó y discutió la metodología a seguir, con el fin de llegar a una
concertación con los miembros del Consejo Comunitario (autoridades locales). Se informó que el
registro del conocimiento e información etnobotánica y etnozoológica sería “in situ” directamente con la comunidad local. Los resultados arrojaron 267 citaciones de plantas cuyas especies
seleccionadas por índice de mención fueron 10. Así mismo en fauna hubo 45 citaciones de animales con 10 especies seleccionadas por índice de mención. Se hizo el cálculo de valor de importancia cultural para las especies y su intensidad de manejo. En su análisis se observa que las acciones
de manejo y el uso que los pobladores dan a los PFNM, permiten dividir a los recursos seleccionados en tres grandes grupos: las especies que extraen de ambientes silvestres, las especies que se
encuentran tanto en ambientes silvestres como intervenidos y las especies de ambientes intervenidos. Se puede concluir que el manejo es más intensivo en ambientes intervenidos para las
especies de uso medicinal y alimenticio que tienen mayor importancia cultural en zonas de
cultivo y huertas caseras, y menos intensivo para las especies para construcción y artesanías que
se extraen del bosque con importancia principalmente de abastecimiento personal y comercial. ¬
255
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3
Actividad biologica de los extractos vegetales de
Exellodendron coriaceae familia chrysobalanaceae
E. Negrón, M. Rodríguez-Ortega, G. Cabrera, M. Bruzual, Z. Carvajal
Bioterio, Fundación Instituto de estudios Avanzados (IDEA).
Laboratorio de Virología, Instituto de Biomedicina, UCV, MPPS.
Laboratorio de Productos Naturales, Facultad de Ciencias, UCV.
Laboratorio de Productos Naturales, Facultad de Ciencias, UCV.
Laboratorio de Virología, Instituto de Biomedicina, UCV, MPPS
[email protected]
Exellodendrom coriaceum es uno de los siete géneros de la familia Chrysobalanaceae presentes
en Venezuela. En este trabajo se estudio la actividad biológica, citotoxicidad y efecto antiviral
contra el virus de la fiebre amarrilla cepa vacunal 17D, de los extractos clorofórmico (1),
clorofórmico/metanólico (2), metanólico (3), metanólico/agua (4), las fracciones del extracto
metanólico y la quercetina-3-O-arabinósido obtenidos de Exellodendron coriaceum. Se realizó el
estudio comparativo de dos métodos colorimetricos, el 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il) 2,5 Bromuro
difeniltetrazolio (MTT) y el 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenilil)-2H-tetrazolio 5- carboxanilide
(XTT), para evaluar la citotoxicidad de los extractos sobre células Vero, sin que se observaran
diferencias en la viabilidad celular en el rango de concentraciones (50μg/mL - 0,098μg/mL)
utilizadas. La citotoxicidad de las fracciones del extracto metanólico y la quercetina-3-Oarabinósido se estudio usando el método colorimétrico MTT, los extractos y fracciones que
resultaron inocuos se les determinó la actividad antiviral contra la cepa vacunal del virus de la
fiebre amarilla 17D, utilizando el ensayo de reducción de placas. Los extractos 1,3 y 4, las fracciones 1 y 2 del extracto metanòlico y la quercetina- 3-O-arabinòsido mostraron inocuidad a concentraciones menores o iguales a 50μg/mL El extracto metanólico y la quercetina -3-O-arabinòsido
inhibieron la formación de placas virales en concentraciones entre 12,5μg/mL a 50μg/ml y
6,25μg/mL a 25μg/mL. Ninguna de las fracciones evaluadas mostró el efecto de inhibición de
replicación viral.
Palabras claves: extractos vegetales, citotoxicidad, MTT, XTT, virus de la fiebre amarilla ¬
256
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3
Lo bueno lo malo y lo feo de las plantas medicinales
Dra. Nubilde Martínez1,2
1
Universidad de Carabobo. Sede Aragua. Facultad de Ciencias de la Salud.
Escuela de Medicina “Dr. Witremundo Torrealba” Dpto. de Farmacología y Fisiopatología.
Instituto de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Carabobo Sede Aragua (BIOMED-UC). Sección
Fitofarmacología.
2
FRECOCICUAS
Las plantas medicinales se han convertido en un recurso terapéutico para tratar algunas
patologías, pero es necesario adquirir los conocimientos sobre sus principios activos y reacciones
adversas. El objetivo de esta investigación permitió conocer las experiencias de vida de la
población de Santa Rita, estado Aragua, Venezuela, en relación con el uso de las plantas medicinales. Esta investigación es de modalidad cualitativa, se aplicó el estudio de casos, de tipo descriptivo y analítico. La información fue recogida a través de un trabajo de campo, el muestreo
utilizado fue el no probabilístico y la muestra estuvo constituida por veinticinco (25) personas
que asistieron a las consultas médicas en dos Núcleos de Atención Primaria y que estuvieron de
acuerdo en participar. Las plantas que los entrevistados utilizaron para curar alguna patología y
que presentaran alguna reacción adversa se citan respetando el orden en que fueron reportadas:
Ajo, Manzanilla, Cebolla, Poleo, Ñongué, Pasote, Piñón, Jabillo, Tártago, Peonía, Berbería,
Retama o Cascabel, Parchita, Limón, Cayena, Cambur, Malojillo e Higo. Muchas de las personas
que recurren al uso de la fitoterapia tienen la creencia que por ser naturales no producen ningún
efecto tóxico, pero en la realidad no es así porque la mayoría de las plantas contienen principios
activos cuyos efectos son similares a los de algunos fármacos y que en algún momento se hacen
tóxicos si son preparados de manera inadecuada, por lo tanto es necesario tener cuidado al
consumirlas. Existen especies vegetales que producen reacciones adversas y toxicidad al contacto con la piel como: Las urticantes (ortiga, pica-pica), otras son irritantes por incisiones
mecánicas (cactus, tuna), otro grupo de ellas son irritantes químicos (plantas con látex irritantes), otras pueden producir fototoxicidad (efecto fotodinámico producido por el limón), y
aquellas irritaciones de origen alérgico producidas por la pimienta, cebolla, ají, entre otros. Hay
otro grupo de plantas que pueden producir toxicidad por ingestión: Cuando se ingieren plantas
tóxicas por confundirlas con plantas comestibles. Cuando se ingieren verduras inmaduras
(papas). Confusión de una especie de planta por otra (ingerir hojas de Berbería por hojas de
eucalipto). Cuando se contaminan algunas plantas con plaguicidas. Cuando se utilizan las plantas
en dosis inadecuadas. O cuando los principios activos de las plantas son extraídos incorrectamente. En conclusión las plantas medicinales representan una opción valedera como alternativa
terapéutica ante la medicina convencional, pero deben manejarse con mucho conocimiento de
sus principios activos, modos de preparación adecuados, dosificación correcta y tener en cuenta
que las plantas no son tan inofensivas como parecen porque tienen su lado bueno, su lado malo y
su lado feo. ¬
257
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3
Evaluación de las actividades anti-fúngica y anti-helmíntica de
los extractos de las hojas y ramas de Minquartia guianensis
L.G. Azevedo1, L.M.C. Cursino2,3, M.F. Landell1, C.V. Nunez2, H.B. Ferreira1,
M.H. Vainstein1
2
1
Centro de Biotecnologia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS, Brasil
Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Coordenação de Pesquisas em Produtos Naturais,
Av. André Araújo, 2936, 69060001, Manaus, AM, Brasil
[email protected]
3
Mestranda em Biotecnologia e Recursos Naturais, UEA, Manaus, AM, Brasil
La especie Minquartia guianensis (Olacaceae) es encontrada en la región Amazónica y también
en Nicarágua, Panamá y Costa Rica 1. Poblaciones indígenas de Ecuador usan la infusión de las
cáscaras en el tratamiento de infecciones intestinales causadas por parasitas, contra dolores
musculares e irritaciones cutáneas2. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar la actividad anti
fúngica, frente a Cryptococcus neoformans y Cryptococcus gattii, y la actividad anti-helmíntica,
frente a Mesocestoides corti, de los extractos diclorometánicos (DCM), metanólicos (MeOH) y
acuosos (H2O) de las hojas y ramas. El complejo de especies de Cryptococcus neoformans incluye
levaduras basidiomicéticas que causan enfermedades en el sistema nervioso central, pulmón y
piel, en humanos y animales3. Mesocestoides corti es un platelminto parasito de la clase Cestoda,
utilizado como modelo para la investigación de la toxicidad de drogas potencialmente antihelmínticas para larvas de cestódeos4. La colecta del material vegetal fue realizada en la Reserva
Adolpho Ducke, Manaos, AM. Las hojas y ramas fueron secas, molidas y extraídas utilizando
DCM, MeOH y H2O, cada extracción realizada 3 veces, en ultra-sonido por 20 min. Para la actividad anti fúngica frente a las especies de Cryptococcus, los extractos fueron testados en 10 concentraciones variando de 1000μg/mL hasta 1,95μg/mL. Para la actividad anti-helmíntica, las
concentraciones testadas de los extractos, diluidos en sus respectivos solventes, fueron de
1000μg/mL, 500μg/mL, 100μg/mL y 50μg/mL. Los resultados obtenidos muestran que el extracto
MeOH de las hojas fue bien activo contra todas las cepas de Cryptococcus evaluadas, presentando concentraciones inhibitorias mínimas de 7,81 a 1,95μg/mL, dependiendo de la cepa. Los
demás extractos vegetales fueron inactivos para esas cepas de Cryptococcus, así como frente al
Mesocestoides corti. El fraccionamiento fitoquímico del extracto metanólico de las hojas está en
andamiento.
Keywords: Minquartia guianensis, actividad anti-fúngica, Cryptococcus, Actividad anti-helmíntica, Mesocestoides
corti.
Agradecimentos
CT-Agro/CNPq/MCT, PPBio/INPA/CNPq/MCT, CENBAM/CNPq/MCT.
Referências
1. MOBOT: http://www.tropicos.org/NameDistributions.aspx?nameid=22900119;
2. Marles, R. J. et al.; J. Nat. Prod.; 1989; 52: 261-266;
3. Kidd et al.; Proceedings of the Nat. Academy of Sci. of the U. S. A.; 2004; 101: 17258-17263;
4. Markoski et al.; Parasitol Int.; 2006; 55(1): 51-61. ¬
258
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3
Actividad antibacteriana de los extractos de Minquartia
guianensis
L.M.C. Cursino1, Silva I.2, Nogueira P.P.O.2, C.V. Nunez1
1a
Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Coordenação de Pesquisas em Produtos Naturais,
Av. André Araújo, 2936, 69060001, Manaus, Brasil.
b
Universidade Federal do Amazonas, Manaus, Brasil
[email protected]
2
Instituto Leônidas e Maria Deane - ILMD, Fundação Oswaldo Cruz - FIOCRUZ
La especie Minquartia guianensis (Olacaceae) es encontrada en la región Amazónica y también
en Nicarágua, Panamá y Costa Rica 1. Poblaciones indígenas de Ecuador usan la infusión de las
cáscaras en el tratamiento de infecciones intestinales causadas por parasitas, contra dolores
musculares e irritaciones cutáneas 2. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar la actividad
antibacteriana de los extractos de M. guianensis sobre las bacterias Gram-negativas (Shigella,
Salmonella, Pseudomonas, Escherichia coli) y Gram-positivas (Staphylococcus aureus sensible,
Staphylococcus aureus resistente a meticilina, Streptococcus, Bacillus cereus, Bacillus liquefaciens).
Estas bacterias están relacionadas con la diarrea, que provoca muchas muertes en niños en las
regiones tropicales. La colecta del material vegetal fue realizada en la Reserva Adolpho Ducke,
Manaus, AM, siendo la primera en abril/2005 (Col. 2005) y la segunda en julio/2008 (Col. 2008).
Las hojas y las ramas fueron secas, molidas y extraídas utilizando DCM, MeOH y H2O, cada
extracción realizada 3 veces, en ultra-sonido por 20 min. Los extractos testados fueron los
diclorometánicos (DCM), metanólicos (MeOH) y acuosos (H 2O) de las hojas y de las ramas de M.
guianensis (Col. 2005) y los extratos MeOH de las hojas y de las ramas de M. guianensis (Col.
2008). El test de la actividad antibacteriana fue realizado por el método de la difusión en pozo
con la concentración de 100 mg/mL. El medio de cultura utilizado fue Agar Müeller Hinton.
Después de la incubación de las placas, el halo de inhibición fue medido.
Los resultados obtenidos muestran que de la colecta de 2005, los extractos activos fueron los
DCM de las hojas (3 mm frente a Shigella - control con antibiótico 1 cm; 1 cm frente a
Staphylococcus aureus sensible - controle con antibiótico 1 cm; 3 mm frente a Escherichia coli
enteropatogênica, controle con antibiótico 7 mm; 7 mm frente Salmonella - controle con
antibiótico 1,3 cm) y de las ramas (3 mm frente a Staphylococcus aureus sensible - controle con
antibiótico de 1 cm)
Ya para los extractos de la colecta de 2008, los extractos MeOH de las hojas (7 mm frente a
Staphylococcus aureus sensible - antibiótico 1,5 cm) y ramas (9 mm frente a S. aureus sensible,
controle con antibiótico de 1,5 cm), fueron los activos.
Los fraccionamientos fitoquímicos de los extractos que presentaron los mayores halos de
inhibición están en andamiento para descubrir cuáles son las características químicas que los
hacen activos.
Keywords: Minquartia guianensis, Actividad antibacteriana, bacterias relacionadas con diarrea.
Agradecimientos
CT-Agro/CNPq/MCT, PPBio/INPA/CNPq/MCT, CENBAM/CNPq/MCT.
Referências
1. MOBOT: http://www.tropicos.org/NameDistributions.aspx?nameid=22900119;
2. Marles, R. J. et al.; J. Nat. Prod.; 1989; 52: 261-266.
3. Rasmussen, H. B. et al.; Nat. Prod; 2000; 63: 1295. ¬
259
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3
Ethnopharmacological versus random plant selection for
antimycobacterial activity in quilombolas communities from
oriximiná, brazil
Danilo R. Oliveira1,5*, Gilda G. Leitão1, Tatiane Coelho2, Pedro Eduardo A. Silva3,
Maria Cristina S. Loureiro3, ARQMO4, Suzana G. Leitão5
1
Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS, Bloco H,
Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro, Brasil
2
Universidade Federal do Rio Grande - FURG, Brasil
3
Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Serviço de Bacteriologia,Setor de Testagem de Drogas,
Fiocruz, 21045-900, Rio de Janeiro, Brasil
4
Associação de Comunidades Remanescentes de Quilombos do Município de Oriximiná, Rua 24 de dezembro,
no3068, Oriximiná-PA, Brasil
5
Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS, Bloco A 2o andar,
Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro, Brasil.
Tuberculosis (TB) is the main cause of death for infectious illness in the world. It is estimated
that approximately 1/3 of the world population may be infected with the TB bacillus. Amazonian
biodiversity and the traditional knowledge of the forest peoples are potential sources for discovering of new therapeutical agents against the TB. The city of Oriximiná, Pará State, has 33
quilombola communities in remote areas, endowed with wide experience in the use of medicinal
plants. In December 2007, the Federal University of Rio de Janeiro obtained the first approval in
Brazil to access the traditional knowledge for bioprospecting purposes in these communities.
Thus, it was carried out an ethnobotanical survey in the communities, using semi-structured
interviews, participant observation and guided turné. Thirty four enterviewed people related 254
etnospecies, totalizing 2508 use indications. Also it was applied the free-list method directed for
the species used against TB and lung problems. The data were analyzed by quantitative techniques: saliency index (S), relative importance of species (RI) and major use agreement (MUA).
Fourty three etnospecies were surveyed with possible activity to tuberculosis, belonging to 30
botanical families. The Leguminosae was the most well represented family with 16,3% of the
etnospecies. As a result of those informations, 10 samples were tested by ethno-direct method
(ETNO) and 18 by random method (RANDOM) for the antimycobacterial activity against
Mycobacterium tuberculosis H37Rv strain. The extracts were subjected to an initial screening with
fixed concentration of 200μg/ml by microdilution method using resazurin as an indicator of cell
viability. From this, it was determined the minimum inhibitory concentration (MIC). The best
results for antimicobacterial activity were obtained with the ethno approach - 50% ETNO x 16,7%
RANDON. ETNO’s good results can be even more significant considering that the therapeutic
success obtained in maroon practice is complex. They consider that some plants have relative
importance in the cure or in the recovery healthy processes acting as fortifying, depurative,
vomitory, purgative and bitter remedy, especially to infectious diseases, to restoration the
healthy as a whole. Moreover, making a broad literature review about 43 cited ethnospecies,
found that 67.5% of them have published information on diseases of the lung and 60.5% indications such as tonic and stimulant, corroborating with the ETNO information.
Keywords: bioprospecting,quilombola communities,antimicobacterial activity,ethnopharmacology approach, random
approach
Support
CNPq e FAPERJ. ¬
260
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3
Authorization of the traditional knowledge associated access
for bioprospecting purposes: the case of ufrj and the
association of the Oriximiná Quilombola communities
Oliveira D.R.1,3*, Leitão S.G.1, O´Dwyer E.C.2, Leitão G.G.3, ARQMO4
1
Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS, Bloco A 2o andar, sala 10,
Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro, RJ.
2
Departamento de Antropologia e Programa de Pós-graduação em Antropologia, Universidade Federal Fluminense,
Campus Gragoatá, Bloco O, sala 325, 24210-350, Niterói, RJ.
3
Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro, RJ,
4
Associação de Comunidades Remanescentes de Quilombos do Municipio de Oriximiná (ARQMO),
Rua 24 de dezembro, n. 3068, 68.270-000, Oriximiná, PA
The traditional knowledge associated (CTA) and the genetic heritage access have being well
discussed in Brazil since Convention on Biological Diversity, in 1992, due to the necessity of
equitable and fair sharing of the benefits, and the prior purveyor authorization. This way this
purveyor has his rights recognized. However only 10 years later, the first legislation about the
subject was published (MP 2186-16, 2001), and 15 years later, the first authorization to CTA access
for bioprospecting in Brazil, involving anthropologic appraisal and benefit sharing contract
between university (UFRJ) and community, just for this work “Bioprospecção de espécies
Farmacologicamente Ativas Utilizadas Medicinalmente por Comunidades Quilombolas de
Oriximiná (PA), Brasil” carried out by our group. The “remanescent of quilombos” or “quilombolas communities” are ethnic groups, with historical background, with their specific territorial
relations, with the presumption of black ancestry, related to resistance to oppression suffered
historical. In Oriximiná these communities began in the 18 th century when Portugal to prevent the
invasion of Dutch, British and French in the Amazon, encouraged the colonization of the lower
Amazon region of Pará, using as a labor force tens of thousands of African slaves on the plantations of cocoa, coffee and cotton. However the slaves fled to remote areas, especially for lakes
and waterfalls difficult to locate and access. Many of these communities are still today in full
contact with the biodiversity in places far from the urban area of Oriximiná. These communities
survive largely on fishing, hunting and subsistence agriculture and the only source of income is
the extraction of the chestnut of Pará that provide only few months in the year. Thus, the aim of
this work is to discuss, through a case study, involving the Federal University of Rio de Janeiro
and the Association of Remaining Communities of Quilombo of the City of Oriximiná, the difficulties to get the authorization of access with the directing council of the genetic heritage, the
anthropologic appraisal and the benefit sharing contract. Although it’s well-known the unpreparedness of the government to deal with the subject, many times harming and making impracticable the national research, on the other hand has the rights of the communities that must be
respected, searching that the access brings benefits to the purveyor of the CTA. Thus, the guarantee of these benefits must come through the fulfilment of the current law, that still needs to
be perfected. Nowadays, the return of benneficits to tradicional knowleadges may be the only
way to rpeserve the Amazon Rain Forest.
Keywords: Bioprospecting; anthropologic appraisal; Genetic heritage; Traditional knowledge associated; informed
consent; benefit sharing contract.
Support: CNPq e FAPERJ. ¬
261
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3
Medicinal plants used in vaginal baths by the Quilombolas
from Oriximiná, Brazil
Danilo R. Oliveira1,4*, Gilda G. Leitão1, Celuta S. Alviano2, Daniela S. Alviano2,
ARQMO3, Suzana G. Leitão4
1
Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro, Brazil
2
IMPPG, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS,- Bloco I, Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro, Brazil
3
Associação de Comunidades Remanescentes de Quilombos do Município de Oriximiná, Rua 24 de dezembro,
no3068, Oriximiná-PA, Brazil
4
Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS, Bloco A 2o andar,
Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro, Brazil
“Quilombolas” (maroons) from Oriximiná are descendants of African slaves which were
brought to the farms of the Lower Amazon region of Pará State, Brazil, in the 18 th century, who
fled to remote areas of the Amazon River, establishing their communities in lakes and waterfalls
of difficult access. In December 2007, the Federal University of Rio de Janeiro obtained the first
approval in Brazil to access the traditional knowledge of 33 quilombolas communitie for the
purpose of bioprospecting. The Quilombolas were represented by their association called
Associaçao de Remanescentes de Quilombo de Oriximiná - ARQMO. In the ethnobotanical
survey, semistructured interviews and participative observation were carried out, as well as
quantitative ethnobotanical methods of analysis such as relative importance of species (RI) and
major use agreement (MUA). Thirty four enterviewed people reported a total of 253 etnospecies,
for which 2508 indications of plant uses were desccribed. An important cultural practice among
the quilombolas of these communities is a vaginal bath called “banho de asseio”. Seventy four
use indications of plant preparations for vaginal bath were reported, among them: for vaginal
cleaning and cleaning the uterus after delivery; to disguise bad smells, to prevent or treat sexually transmitted diseases, to treat inflammations of the female reproductive system and to
tighten the vagina, “narrowing” the woman after delivery, to improve sexual pleasure and keep
the sexual partner satisfied. Out of the 31 etnospecies used for this purpose, analyses of the MUA
and RI pointed out Trichilia quadrijuga, Campsiandra laurifolia, Anacardium giganteum and
Anacardium occidentale as the most important ones.
Some families detach by the large number of cited species, such as Anacardiaceae (4),
Malpighiaceae (3), Leguminosae-Caesalpinioideae, Myrtaceae and Meliaceae (2). Out of these, 13
ethnospecie’s extracts were evaluated for antimicrobial activity by the agar diffusion method
against fungi (Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Trichophyton rubrum, Fonsecaea
pedrosoi) and bacteria (Staphylococcus aureus MRSA, Escherichia coli) species. Only 3 species have
shown some activity (23% of the total) - Trichilia quadrijuga, Machaerium sp and Lippia origanoides.
At least 55% of the species can be chemically characterized by the abundant presence of tannins
and other phenolic substances that may be responsible for the contraction and vaginal antiinflammatory effects reported for these plants. The use of plants to enhance sexual pleasure is
already known among the Maroons of Suriname as “dry sex”. However, Dutch doctors believe
that this practice can facilitate the transmission of sexual diseases and that the practice gives
pleasure exclusively for the men, unlike of reporting the maroons of Oriximiná. Due to the
extensive use of these vaginal baths among the Quilombolas to improve sexual function, prevent
sexually transmitted diseases and as a topic anti-inflammatory, more studies become necessary
to evaluate the safety of this practice, so important in these communities.
Support: CNPq and FAPERJ. ¬
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3
Bioactividades de Chuquiraga straminea sandwith. subfamilia
barnadesioideae (asteraceae)
Mendiondo María Elena3, Juárez Berta Estela1,3, Zampini Iris Catiana1,2,3,
Isla María Inés1,2,3, Ordoñez Roxana1,2,3
1
Fac. Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo. Fundación Miguel Lillo.
2
INQUINOA
3
CONICET. Miguel Lillo 205/251. (4000).San Miguel de Tucumán. Tucumán. Argentina.
El género Chuquiraga de aproximadamente 20 especies se distribuye desde Colombia hasta
Chile y Argentina principalmente a lo largo de los Andes y en la Patagonia. En Argentina habitan
15 especies (C. Ezcurra, 1996), varias de ellas usadas en medicina popular. Son plantas xerófilas
de follaje coriáceo y persistente, y se encuentran en ambientes áridos.
Chuquiraga straminea es un arbusto de 5-10 m de altura, espinoso, con hojas alternas o en
fascículos. Capítulos terminales sésiles. Involucro acampanado, anaranjado.
El objetivo de este trabajo fue determinar en extracto etanólico de partes aéreas de
Chuquiraga straminea a) el contenido de compuestos fenólicos totales y flavonoides b) la capacidad depuradora de radicales libres y c) la capacidad antibacteriana frente a Staphylococcus aureus
resistente a meticilina. Se evaluó la capacidad de depurar radicales libres centrados en átomos de
nitrógeno, DPPH y ABTS. La capacidad antibacteriana se determinó cualitativamente mediante
ensayos bioautográficos. Por ensayos de macrodilución en agar se determinó la CIM
(concentración inhibitoria mínima). El extracto presentó un elevado contenido de flavonoides
con respecto al contenido fenólico total. La actividad depuradora de radicales libres fue más
eficiente frente al radical ABTS con un valor de CD 50 de 20μg/ml, mientras que frente al radical
DPPH la CD50 fue de 63μg/ml. Se observó una correlación positiva entre el contenido de compuestos fenólicos y el porcentaje de actividad depuradora de ambos radicales libres. El extracto
alcohólico de Ch. straminea presentó actividad antibiótica frente a S. aureus resistente a meticilina
con un valor de CIM de 200μg/ml. Estos resultados demuestran que el extracto alcohólico de
partes aéreas de Ch. straminea constituiría una fuente de compuestos antioxidantes y antibacterianos que podrían ser usados con fines medicinales. ¬
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3
Efecto hipolipemiante del aceite de semilla de noni
D.C. Pazos-Guarneros2, M.C. Cruz-López1, L. Garduño-Siciliano2, F.E. Jiménez-Montejo1
1
Centro de Investigación en Biotecnología Aplicada, Instituto Politécnico Nacional,
Carretera estatal Sta. Inés Tecuexcomac-Tepetitla Km 1.5, Tepetitla, Tlaxcala, 90700, México
2
Departamento de toxicología preclínica, Escuela Nacional de Ciencias Bioógicas, IPN,
Carpio y Plan de Ayala , México, D.F. 11340
Morinda citrifolia comúnmente conocida como noni, es una planta originaria de las polinesias,
la cual ha popularizado su uso y comercialización en todo el mundo incluyendo nuestro país
debido a su utilización en la medicina tradicional para el tratamiento de diversas enfermedades
como cáncer, diabetes mellitus y las hiperlipemias sólo por mencionar algunas; debido a esto se
han estudiado diversas partes de la planta del noni de las cuales se han aislado una gran cantidad
de moléculas como glucósidos, terpenos, fenólicos y ácidos grasos, sin embargo aun no se ha
comprobado la efectividad de esta planta en la disminución de los niveles de lípidos.
En el presente trabajo se evaluó en ratones ICR macho normolipídicos e hiperlipémicos, el
aceite obtenido de la semilla de noni (ASN) administrando vía oral a dosis de 150, 300 y
600mg/kg/día en modelo de 28 días y de hiperlipemia severa, posteriormente se evaluaron los
niveles de colesterol, triglicéridos y col-HDL presentes en sangre, también se calculó el porcentaje de índice aterogénico de Castelli (IA) en cada individuo para estimar el riesgo a desarrollar
enfermedades cardiovasculares.
El estudio reveló que en ratones normolipídicos los niveles de colesterol y col-HDL se reducen
de forma significativa observando un efecto menor en la dosis de 300 mg/kg/día; sin embargo al
evaluar los niveles de triglicéridos estos disminuyen cada vez más al incrementar la dosis administrada. Si el ASN se administra cuando hay una patología presente como la hiperlipemia, se
observa una marcada disminución de los niveles séricos de colesterol y col-HDL a dosis de 150
mg/kg/día, en el caso de los triglicéridos parece existir una relación dosis-efecto en donde a
mayor dosis administrada de ASN mayor efecto producido sobre los niveles de triglicéridos.
Con base en los datos obtenidos, el presente estudio concluyó que el ASN muestra efectos en
los niveles de lípidos séricos, y que este efecto está en función de la dosis administrada así como
de la existencia o ausencia de patologías tales como la hiperlipemia, por lo que el consumo del
mismo puede tener un efecto benéfico en el tratamiento de estas enfermedades reduciendo los
valores de colesterol, triglicéridos y col HDL. Se observó también una disminución del índice
aterogénico para el caso de animales hiperlipidémicos, aunque la dependencia de la dosis es
sumamente importante. ¬
264
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3
Contribución al estudio de los alcaloides esteroidales del
Solanum sycophanta dunal et DC
Peña Alexis1, Libia Alarcón2, Alfredo Usubillaga3
1
Universidad Nacional Experimental de los Llanos Occidentales Ezequiel Zamora (UNELLEZ)
Programa de Ciencias del Agro y del Mar. San Carlos Edo. Cojedes-Venezuela
2
Universidad de Los Andes (ULA). Núcleo Rafael Rangel (NURR). Departamento de Biología y Química.
Trujillo-Venezuela
3
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis. ULA, Mérida-Venezuela
[email protected]
Los alcaloides esteroidales son una importante clase de metabolitos secundarios que se
encuentran en las plantas. Estos pueden encontrarse en forma de agliconas o en forma de
glicósidos. Los alcaloides esteroidales son de gran importancia en la actualidad, ya que estos
pregnanos son intermediarios importantes, en la producción industrial de hormonas esteroidales. El Solanum sycophanta Dunal et DC, es un árbol que crece en zonas húmedas alrededor de los
2000 m.s.n.m en el estado Mérida Venezuela. En el presente estudio se aislaron a partir de los
frutos verdes, los alcaloides esteroidales presentes en el Solanum sycophanta. Utilizando diferentes técnicas cromatográficas se lograron separar e identificar tres alcaloides esteroidales y sus
estructuras fueron establecidas como: (25R, 22R)-N-espirosola-3,5-dieno[I], (25R, 22R)-Nespirosol-5-eno-3β-ol[II], (25R, 22R)-N-espirosol-5-eno-3β,21-diol[III]. Todas las estructuras fueron
establecidas con base a un estudio detallado y sistemático de los espectros de RMN unidimencionales y bidimencionales. El compuesto[III] se reporta por primera vez como producto natural. ¬
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3
Chemical profile of the methanolic extract of the scape from
the Paepalanthus geniculatus kunth. (eriocaulaceae) by
electrospray tandem mass spectrometry
Fabiano Pereira do Amaral1, Assunta Napolitano2, Milena Masullo2,
Lourdes Campaner dos Santos1, Sonia Piacente2, Wagner Vilegas1
1
São Paulo State University - UNESP, Institute of Chemistry, Organic Chemistry Department,
CP 355, CEP 14800-900, Araraquara, SP - Brazil
2
Università degli Studi di Salerno, Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, via Ponte Don Melillo,
84084 Fisciano (SA) - Italy
Electrospray ion-trap tandem mass spectrometry (ESI-IT-MS n) is a very sensitive and precise
method for identifying the flavonoids. The present study aimed to investigate the chemical
profile of the methanol extract from the scapes of P. geniculatus using ESI-IT-MS.
Plants of the Eriocaulaceae family are widespread in the region of the Serra do Cipó, State
Minas Gerais, Brazil. Several plants from this family are known as ‘everlasting plants’ because
they appear to be alive even for years after being haversted. Paepalanthus is the largest genus of
this family with approximately 500 species. Among there more than 400 species are endemic in
Brazil.
Direct flow injection ESI-IT-MS of the methanolic extrac of the scapes from the P. geniculatus
led to the detection of a series of flavonoid quercetin derivatives with a no sugar unit (O- and Cglycosides) and acyl derivatives.
Flavonoids and their glycosides are responsible for a large number of pharmacological properties. They are also known for their radical scavenging and antioxidant apabilities and these
properties are closely related to the anti-ulcer activity due to protective effect, including gastric
and esophageal injuries or liver protection.
The uses of ESI-IT-MS pointed toward the possibility of identifying key-compounds directly
from crude extract, without the need of extensive clean-up. Moreover, by performing a limited
number of experiments, a significant gain in terms of time and reliability was achieved.
Flavonoids O- and C-glycosides have been previously described in Eriocaulaceae family, but the
flavonoids here identified by ESI-IT-MSn never been described in P. geniculatus.
Support
CNPq, FAPESP, PROPG-UNESP. ¬
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3
Efecto antiinflamatorio de una fracción de flavonoides de
Dodonaea viscosa en el modelo de edema auricular en ratón
inducido por tpa
Salinas Sánchez David O.1,2,3,4, Pérez Gutiérrez Salud2, Herrera Ruiz Maribel1,
Jiménez Ferrer J. Enrique1, Zamilpa Alvarez Alejandro1
1
Centro de Investigación Biomédica de Sur, Instituto Mexicano del Seguro Social, Argentina No. 1 Col Centro
Xochitepec, Morelos C.P. 62790
2
Departamento de Sistemas Biológicos. Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Xochimilco
3
Centro de de Investigación en Biodiversidad y Conservación de la Universidad Autónoma del Estado de Morelos,
Av. Universidad 1001 col. Chamilpa C.P. 62209
4
Alumno Doctorado en Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma Metropolitana
[email protected]
La inflamación es una reacción compleja del tejido conjuntivo vascularizado. Es útil para localizar, diluir y destruir al agente patógeno, al mismo tiempo que inicia una cadena de acontecimientos para curar y reconstruir el tejido lesionado. En algunas enfermedades crónicas como la artritis
reumatoide, la reparación mediante fibrosis puede dar lugar a la aparición de cicatrices con
desfiguración y pérdida de la función. El objetivo es medir el efecto antiinflamatorio de Dodonaea
viscosa y sus fracciones, en un modelo de inducción de edema en el pabellón auricular de ratón
ICR por 13-acetato de 12-O-tetradecanoilforbol (TPA). Se realizó un fraccionamiento bio-dirigido
del extracto metanólico de Dodonaea viscosa (DvMeOH). Utilizando el modelo de edema auricular de ratón inducido por TPA (Paya et al., 1993). El material vegetal, fue colectado en la Reserva
de la Biosfera Sierra de Huautla (REBIOSH), Morelos, México con clave HUMO-26620. La planta
seca y molida, fue extraída con metanol. La maceración de este extracto en acetona permitió
obtener la fracción DvF1, que fue purificada por cromatografía en columna generando 5 subfracciones. La administración tópica de 3.2 mg/oreja de (DvMeOH) y 1 mg/oreja de DvF1 y su subfracción DvF5-6 sobre el pabellón auricular de ratón, provocó una disminución significativa
(p<0.05) del edema inducido con TPA en comparación con un grupo de animales que recibió el
vehículo (acetona 100%). El porcentaje de inhibición de los tratamientos fue de 78% para
DvMeOH, de 93% para DvF1, y 94.6% para DvF5-6. Estos valores de actividad biológica fueron
estadísticamente semejantes al producido por indometacina (0.8mg/oreja, 86%). Un análisis
químico preliminar de los tratamientos activos indica la presencia de un alto contenido de compuestos de tipo flavonoide.
Bibliografia
1. Payá M, Ferrándiz M, Sanz MJ, Bustos G, Blasco R, Ríos JL, Alcaraz MJ, (1993). Study of the antioedema activity of
some seaweed and sponge extracts from the Mediterranean coast in mice. Phytotherapy Research 7:159:162. ¬
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3
Actividad anti-inflamatoria de Salmea Scandens (Astereaceae)
Salud Pérez Gutiérrez1, Héctor Salgado Z.2, I. Jassibe Ramos G.1, Fabiola García P.1,
Diana Bojorjez2
1
Departamento de Sistemas Biológicos Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco A.P. 23-181. México D.F.
[email protected]
2
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN. Prolongación Carpio y Plan de Ayala, Col. Santo Tomás México D.F.
Salmea Scandens (Astereaceae) comúnmente conocido como Bejuco de miel o Arbol de Chile,
es un arbusto que crece hasta 5 m de altura. Esta planta se usa en medicina tradicional como
anestésico y en el tratamiento de problemas inflamatorios. De la raíz se ha aislado ácido linoleico
y estearico así como custunolido y N-isobutil-2E,4E,8Z,10E-dodeca-2,4,8,10-tetraenamida. Este
trabajo reporta estudios de la actividad anti-inflamatoria de los extractos etanolico, de acetato
de etilo y cloroformo de esta planta en el modelo de edema auricular en ratones, inducido con 12O-tetradecanoilforbol (TPA) por aplicación tópica de 2.5 μg/oreja, se uso indometacina como
fármaco de referencia (2 mg/oreja) y del extracto se uso una dosis de 2 mg/oreja. Los extractos se
obtuvieron por maceración de la corteza durante 24 h y posterior calentamiento a temperatura
de ebullición por 2 h. Enseguida se eliminó el disolvente a presión reducida.
Los resultados obtenidos en el modelo de edema inducido por TPA muestran que los extractos
clorofórmico y de acetato de etilo disminuyen ligeramente el edema auricular, en cambio el
extracto etanólico inhibe significativamente la inflamación (58.5 ± 12.5%) efecto similar al obtenido con la indometacina (67.9 ± 8.0%). Estos resultados indican que S. Scandens tiene actividad
antiinflamatoria cuando se aplica por vía tópica, pero es conveniente en estudios posteriores
determinar su actividad en otros modelos farmacológicos, así como continuar con el estudio
fitoquímico para aislar el compuesto responsable de la actividad anti-inflamatoria. ¬
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3
Actividad insecticida del extracto hexánico de Ricinus
communis y sus componentes mayoritarios contra Spodoptera
frugiperda
Ramos López Miguel Angel1, Pérez Gutiérrez María Salud1,
Zavala Sánchez Miguel Angel1, Rodríguez Hernández Cesáreo2
1
Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco. Apartado Postal 23-181, México, D.F
[email protected]
2
Colegio de Postgraduados Campus Montecillos Km 35.5 Carretera México-Texcoco, Texcoco, Edo. Mex, CP 56230
Se evaluó la actividad insecticida del extracto hexánico de hoja de Ricinus communis
(Euphorbiaceae), y los componentes mayoritarios del mismo extracto contra Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae).
Para preparar el extracto se colocaron 2 kg de hoja seca y molida con 6 L de hexano, la mezcla
se calentó temperatura de ebullición durante 4 h, posteriormente se filtró y el disolvente se
eliminó a presión reducida en un evaporador rotatorio. El extracto hexánico se esterificó, con
trifluoruro de boro al 15% en metanol. El producto esterificado se analizó por cromatografía de
gases acoplado a un espectrómetro de masas. La identificación de los componentes se llevó a
cabo por comparación de los espectros de masas con la librería NIST 02.
Se usaron larvas de primer ínstar de S. frugiperda, provenientes del Laboratorio de
Entomología del CIMMYT, evaluándose las concentraciones siguientes: 1 600, 960, 400, 160 y 0
ppm del extracto, y los ácidos palmítico y linoléico mezclados con los ingredientes de la dieta,
vertiendo 10 mL de la mezcla en 24 vasos de acrílico de una onza, dejándolos solidificar 24 h,
luego se colocó una larva de primer ínstar de S. frugiperda y se pusieron a 27ºC ± 2ºC y 70% ± 5% de
humedad relativa con fotoperiodo de 14-10 h aleatoriamente. La variable evaluada fue la viabilidad larval, realizándose análisis de varianza y prueba de Tukey con el paquete estadístico SYSTAT.
Los componentes mayoritarios del extracto hexánico fueron los ácidos linolérico, linoléico y
palmítico con 47.8, 15.3 y 13.0% respectivamente, de los cuales el primero no se probó porque no
fue posible encontrarlo comercialmente y los ácidos linoléico y palmítico obtenidos en sigmaaldrich se probaron puros.
Los porcentajes de viabilidad larval para cada tratamiento fueron: el extracto hexánico de hoja
mostró 50 y 75%; con el ácido palmítico se obtuvo 29.2 y 45.8% y el ácido linoléico mostró 25 y
54.2%, todos a 1 600 y 960 ppm. Los resultados obtenidos indican que el este extracto tiene una
actividad insecticida significativa, por lo que la siguiente etapa sería el estudio de la actividad
biológica en campo. ¬
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3
Estudio de la actividad antiinflamatoria de Hyptis albida
Pérez Gutierrez Ma. Salud1, Hernández Basave Linnet1, Morales Gómez Edith1,
Cárdenas Norma2, Zavala S. Miguel A.1
1
Departamento de Sistemas Biológicos, Universidad Autónoma Metropolitana- Xochimilco.
Calzada de Hueso 1100, Col. Villa Quietud, Delegación Coyoacán, C.P. 04960, México D.F.
[email protected]
2
Facultad de Ciencias Químicas. Universidad Autónoma de San Luis Potosí, Av. Dr.Manuel Nava #6 CP. 78290,
San Luis Potosí, SLP, México
Hyptis albida (Lamiaceae) conocida comúnmente como salvia real o salvia blanca, es un arbusto que crece hasta 4 metros de altura, es originaria de América tropical 1. Tiene propiedades
carminativos, antiinflamatoria y antiespasmódicos, además se utiliza para combatir los síntomas
de la gripe, pero también puede ser abortiva. Del extracto acetónico se aislaron 3 triterpen
lactonas2, sin embargo no hay estudios sobre las actividades farmacológicas de esta planta, por
lo que el objetivo de este trabajo es estudiar la actividad antiinflamatoria de los extractos cloroformico y metanolico de H. albida en el modelo de edema auricular en ratón inducido con acetato
de 12-O-tetradecanoilforbol (TPA).
Los extractos se obtuvieron por calentamiento a temperatura de ebullición por 4 horas y
después se elimino completamente el disolvente.
El edema auricular se produjo por la aplicación tópica de 2.5μg/oreja de TPA, el extaracto
(2.0mg/oreja) también se aplicó por vía tópica; el fármaco de referencia que fue indometacina
(2.0mg/oreja). Los resultados obtenidos en la evaluación de los dos extractos de H. albida muestran que el extracto metanolico disminuye el edema auricular en 30.7 ± 6.8%, en cambio el
extracto clorofórmico reduce la inflamación significativamente (51.8 ± 9.6%), valor que es ligeramente mayor que la inhibición obtenida con indometacina (35.8 ± 6.0%). Estos resultados permiten continuar con la investigación de esta planta para aislar e identificar el compuesto responsable de la actividad antiinflamatoria.
Bibliografía
1. Rzedowski J. 1994. Vegetación de México. 1ª Edición, Limusa, pp.203,282.
2. Pereda M. R, 1990.Journal of natural products. 53(1), 182-185. ¬
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3
Efecto antiinflamatorio de Senecio salignus en el edema
auricular en raton
Salud Pérez Gutiérrez1, Miguel A. Zavala Sánchez1, Candy M. Romero Origel1,
J. Roberto Serrano Vega1
1
Departamento de Sistemas Biológicos. Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco.
Calzada del Hueso 1100, Col Villa Quietud México D.F. México, CP 04960
[email protected]
Senecio salignus DC (Astereaceae), comúnmente conocida como “Asomiate amarillo” o
“Jarilla” es un arbusto que crece de 1 a 2 m de altura, sus flores son amarillas y en medicina
tradicional se usa como remedio contra las fiebres y el reumatismo. También se usa como insecticida para proteger granos almacenados principalmente maíz y frijol, además se usa como planta
de ornato. Con estos antecedentes nuestro trabajo tiene como objetivo estudiar la actividad
antiinflamatoria de S. salignus, por lo que se colectó la planta en el Estado de México, se dejó
secar a la sombra y se molió.
Los extractos clorofórmico y metanólico de las partes aéreas de la planta se prepararon por
calentamiento a temperatura de ebullición durante 4 h. La actividad farmacológica de la planta
de evaluó en el modelo de edema auricular en ratón inducido con 2.5μg/oreja de 12-Otetradecanoilforbol (TPA). También por vía tópica se aplicó indometacina a uno de los grupos,
fármaco de referencia (2.0 mg/oreja.). Después de 6 h los animales se sacrificaron y se les cortó
un círculo de 6 mm de diámetro de cada oreja y con la diferencia de ambos pesos se determinó el
porcentaje de inhibición.
Los resultados indican que tanto el extracto metanólico como el clorofórmico disminuyen
significativamente la inflamación auricular (59.5 ± 1.9 y 76.9 ± 6.0 respectivamente), sin embargo,
el último extracto presentó mayor actividad, la cual es similar a la observada con indometacina
(67.8 ± 8.1). Estos resultados permiten continuar con el estudio químico y farmacológico de esta
planta, sobre todo si consideramos que no se encontraron estudios científicos de su actividad
antiinflamatoria. ¬
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3
Aceite esencial de la raíz de Chrysactinia mexicana activo
contra Streptococcus pneumoniae
Bárbara Missiam Guevara Campos1, Verónica Mayela Rivas Galindo2,
Ricardo Salazar Aranda2, Noemí Waksman de Torres2, Luis Alejandro Pérez-López2
1
Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León
2
Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Nuevo León
[email protected]
Los aceites esenciales pueden ser usados en terapias naturales y en medicina alternativa como
remedio para muchas enfermedades infecciosas, las propiedades antimicrobianas de los aceites
esencias ha sido bien establecida desde hace mucho tiempo y han sido usados tradicionalmente
para infecciones del tracto respiratorio. En el campo medicinal, la terapia de inhalación de aceites
esenciales ha sido usada para tratar bronquitis crónica y sinusitis aguda (Inouye et al, 2001).
Varios estudian han confirmado que los aceites esenciales tienen propiedades antimicrobianas
contra bacteria, levaduras y hongos (Lo Cantore et al, 2009; Rosato et al, 2008; Damian-Badillo et
al.) Chrysactinia mexicana, conocida comúnmente como calanca, damianita, hierba de San Nicolás
o falsa damiana, y que se encuentra distribuida el norte de México y en Texas USA. Las hojas y
tallo de Chrysactinia mexicana son utilizadas como diurético, así como para contrarrestar males
estomacales o dolores posparto, usándose la raíz como remedio casero. Igualmente, se conoce el
uso de la planta en el norte del país, donde se utiliza para mitigar enfermedades respiratorias e
infecciones de la piel. Molina y cols. 2007, reportan actividad de un extracto etéreo de la raíz de
Chrysactinia mexicana contra dos cepas de Streptococcus pneumoniae resistentes a penicilina. En
el presente trabajo se probó la actividad el aceite esencial y un compuesto aislado de Chrysactinia
mexicana contra Streptococcus pneumoniae resistentes y células Hela.
Se obtuvo el aceite esencial de la corteza de la raíz de Chrysactinia mexicana mediante
hidrodestilación. Se procedió a la separación de los componentes del aceite por medio de
cromatografía en columna de Fase inversa C-18 y cromatografía en columna de gel de sílice. Se
obtuvo el compuesto 5-(But-3-en-1-inil)-2,2'-bitiofeno. Se probó la actividad antimicrobiana del
aceite completo y del compuesto aislado contra dos cepas de Streptococcous pneumoniae resistentes a antibióticos β-lactámicos, mediante microdilución. También se probó la citotoxicidad en
células Hela. Los resultados mostraron actividad del aceite y del compuesto aislado contra las dos
cepas de Streptococcus pneumoniae
Referencias
1. Inouye, S.; Takizawa, T.; Yamaguchi, H. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 2001, 47, 565-673.
2. Lo Cantore, P.; Shanmugaiah, V.; Sante N. J. Agric. Food Chem. 2009, 57, 9454-9461.
3. Rosato, A.; Vitali, C.; Gallo, D.; Balenzano, L.; Mallamaci, R. T Phytomedicine 2008, 15, 635-638.
4. Damian-Badillo, L.M.; Salgado-Garciglia, R.; Martínez-Muñoz, R.E.; Martínez-Pacheco, M.M. The Open Natural
Products Journal 2008, 1, 27-33.
5. Molina-Salinas, G.M.; Pérez-López, A.; Beceril-Montes, P.; Salazar-Aranda, R.; Said-Fernández,S.; Waksman de
Torres, N. Journal of Ethnopharmacology 2007, 109, 435-441. ¬
272
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3
Actividad diurética de una decocción de Costus pictus D. Don
Diuretic Activity of Costus pictus D. Don. decoction
Pérez Machín M.1, Sueiro Oyarzun M.L.2, Boffill Cárdenas3, Morón Rodríguez F.4,
Monteagudo Jiménez E.3, Lorenzo Monteagudo G.4
1
Vicerrectorado de Investigaciones. Universidad de Ciencias Médicas “Dr. Serafín Ruiz de Zarate Ruiz”.
Santa Clara. Villa Clara. Cuba
[email protected]
2
Departamento de Farmacia. Universidad Central “Marta Abreu” de Las Villas. Santa Clara. Villa Clara. Cuba
3
Unidad de Toxicología Experimental (UTEX). Universidad de Ciencias Médicas “Dr. Serafín Ruiz de Zarate Ruiz”.
Santa Clara. Villa Clara. Cuba
4
Laboratorio Central de Farmacología. Facultad de Ciencias Médicas “Dr. Salvador Allende”.
Ciudad de La Habana, Cuba
3
Master en Toxicología Experimental. Investigador Auxiliar. Unidad de Toxicología Experimental (UTEX).
Universidad de Ciencias Médicas “Dr. Serafín Ruiz de Zarate Ruiz”. Santa Clara. Villa Clara. Cuba
4
Centro de Inmunología Molecular. Delegación Villa Clara
Introducción
Costus pictus D. Don. (caña mexicana) es una especie cultivada como ornamental en Cuba y la
decocción de sus hojas se emplea tradicionalmente para afecciones urinarias como infecciones,
litiasis y cólicos renales.
Objetivo
Evaluar la actividad diurética de la decocción de hojas C. pictus.
Métodos
Se elaboró una decocción con hojas secas al 30% y se administró a ratas machos Wistar a dosis
de 200, 400 y 800 mg de sólidos totales/kg. El volumen fue completado con solución salina
fisiológica para lograr una sobrecarga hidrosalina con un volumen total de administración constante de 40 mL/kg, tanto para los grupos tratados como para el control positivo (furosemida, 20
mg/kg) y control negativo (Cloruro de Sodio, 0,9%). Se midieron los volúmenes de orina excretados a ½, 1, 2, 3, 4, 5 y 6 horas y se determinaron las concentraciones de electrolitos (Na + y K+) en
la orina total colectada.
Resultados
Se observó acción diurética dependiente de la dosis en la decocción del C. pictus con mejores
resultados a dosis de 800 mg/kg. Los niveles de sodio y potasio eliminados en orina fueron
significativamente mayores a los del grupo control negativo, lo que nos hace pensar en un
comportamiento similar a la furosemida, a pesar de que nunca se llega a superar su efecto. La
actividad diurética fue mayor en el último nivel de dosis (800 mg/kg).
Conclusiones
Los resultados obtenidos permiten concluir que la decocción al 30% de hojas secas de C. pictus
presentó efecto diurético dosis dependiente.
Palabras clave: Costus pictus, plantas medicinales, diurético, ratas ¬
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3
Efecto de la agelasina b sobre la homeóstasis intracelular de
Ca2+ y la apoptosis en células de cáncer de mama (MCF7)
Adriana Pimentel1,2, Laura Colman1,2, Pimali Felibertt1,2, Jais Nieves1, Felipe Sojo2,
Héctor Rojas3, Alirica I. Suarez4, Reinaldo Compagnone5, Francisco Arvelo2,
Ivan Galindo6, Juan De Sanctis7, Gustavo Benaim1,2
1
2
Centro de Biociencias y Medicina Molecular, Instituto de Estudios Avanzados (IDEA)
Laboratorio de Biofísica, Centro de Biología Celular, Instituto de Biología Experimental, Facultad de Ciencias,
Universidad Central de Venezuela, UCV.
3
Laboratorio de Permeabilidad Iónica, Centro de Bioquímica y Biofísica,
Instituto Venezolano de Investigaciones Científica.
4
Laboratorio de Productos Naturales, Facultad de Farmacia, UCV.
5
Laboratorio de Síntesis Orgánica, Facultad de Ciencias, UCV.
6
Centro de Biotecnología, IDEA.
7
Instituto de inmunología, UCV.
Caracas, Venezuela
[email protected]
La agelasina B, un compuesto purificado a partir de una esponja marina (Agelas clathrodes),
tiene propiedades citotóxicas en células MCF-7, con un IC 50 de 4,85μM. Esta IC50 es significativamente diferente respecto a la observada en fibroblastos (IC50 = 51,15μM), por lo que califica como
un posible agente terapéutico en cáncer de mama. En este trabajo, observamos que la agelasina
B, en células MCF-7 cargadas con fura 2-AM, provocó el aumento de la concentración intracelular
de calcio ([Ca+2]i) gracias a su liberación desde el retículo endoplasmático (RE), lo que fue demostrado utilizando técnicas de microscopía confocal. Adicionalmente, la agelasina B inhibió la
actividad de la Ca2+-ATPasa del RE (SERCA), de forma dosis dependiente. Además, demostramos
que luego del tratamiento por 48 h con este compuesto, se indujo la fragmentación del ADN por
ensayos de TUNEL. De la misma manera, la agelasina B logro disminuir la expresión de la proteína
Bcl-2 pro apoptótica y fue capaz de activar la enzima caspasa 8 sin modificar la actividad de la
caspasa 7. Todos estos hallazgos demuestran que la citotoxicidad de la agelasina B en células
MCF-7 es mediada por la activación de la apoptosis celular y la movilización de [Ca +2]i al inhibir la
SERCA.
Palabras clave: Agelasina B, citotoxicidad, Ca2+, SERCA, apoptosis.
Financiamiento
Proyectos C.D.C.H.-U.C.V. PG-03-00-7380-08 y Proyecto de Grupo FONACIT G-2001000637 a G.B. ¬
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3
Therapeutic potential of secondary metabolites produced by
plants of the Atlantic coast restinga
Cristiane Pimentel Victório¹, Rosani do Carmo de Oliveira Arruda²
1
Centro Universitário Estadual da Zona Oeste, Rio de Janeiro (UEZO), Brasil
2
Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro (UNIRIO)
[email protected]
Although the Atlantic coast restinga is among the world’s biodiversity hotspots, it is understudied. High salinity and high temperatures yield plant growth that presents a diverse production
of secondary metabolites. Therefore, the potential development of Brazilian bioindustry to
exploit the aromatic and medicinal use of these plants should be evaluated. To address this, we
investigated the leaf anatomy of the following species collected in restinga areas of Rio de
Janeiro City: Protium icicariba (Burseraceae), Eugenia umbeliflora (Myrtaceae), Manilkara subsericea (Sapotaceae), Andira legalis (Fabaceae) and Myrsine parvifolia (Myrsinaceae). The studied
species were selected based on their importance to the restinga environment and source of
medicinal compounds. As such, secretory structures, which are the main sites of metabolite
production, were described, using imaging techniques to analyze plant histochemical content. To
observe secretory cells, fixed plant samples were dehydrated in graded ethanol-butanol series,
embedded in paraffin, and sectioned. Scanning electron microscopy analysis was then used to
gather further data about tissues. To perform histochemical tests, fresh leaves were used to
observe the plant tissues responsible for the production and accumulation of secondary metabolites. The following reagents were employed: Sudans, Oil red O, Nile blue, 2,4 dinitrophenylhydrazine, sulphuric acid, sodium hydroxide and vanillin (0.5%)-HCl, and ferric chloride. Results showed
both morphological and chemical diversity associated with the production of secondary metabolites. Particularly, secretory structures included glandular trichomes, cavities, ducts and idioblasts
with phenolic or lipophilic compounds. Taken together, these data provide a sound scientific
foundation for the establishment of a new bioindustry in Brazil dedicated to developing medicinal and aromatic products based on plant materials found the native restinga ecosystem. ¬
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Estudio de los componentes volátiles de la Terminalia catappal
Linn.
Pineda L.1, Rojas L.1, Carmona J.2, Usubillaga A.1
1
2
Jardín Botánico, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de los Andes, Mérida- Venezuela
[email protected]
El almendro (Terminalia catappal) es un árbol tropical de gran porte, dentro la familia de las
Combretáceas. El origen del árbol está en discusión, puede proceder de la India, o de la península
Malaya, ó de Nueva Guinea. Las hojas contienen varios flavonoides (como el kamferol o quercetin), varios taninos (tal como punicalina, punicalagina o tercatina), saponinas y fitosteroles.
Debido a su riqueza en principios activos, las hojas (e incluso la corteza) se usan en varias medicinas tradicionales con distintos propósitos. Por ejemplo, en Taiwán las hojas desprendidas del
árbol se usa como hierba para tratar las enfermedades del hígado. En un trabajo previo del aceite
esencial, obtenido de los frutos frescos, se reportaron 7 compuestos: α-farnesene (21.3%), octadecane (11.7%), hexadecanoic acid (9.5%) and neoisothujol (5.8%). En el presente trabajo se
estudia por primera vez, en Mérida - Venezuela, los componentes volátiles de esta especie. 700g
de hojas fueron sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger, obteniéndose
0,01% de rendimiento. El aceite fue analizado por GC-MS en un equipo HP 6980 acoplado a un HP
5973 espectrómetro de masas, los Índices de Kovats se determinaron en un cromatografía de
Gases (CG) marca Perkin Elmer, modelo Autosystem. Se lograron separar 5 componentes, los
cuales representan el 99,02%. Los Componentes mayoritarios resultaron ser phytol (40,7%) y
ácido hexanoico (36,7%), este último fue reportado para los frutos de esta especie.
Bibliografia
1. Moronkola, D. O., Ekundayo, O. (2006). Chemical constituents in the fruit essential oil of Terminalia catappa Linn
(almond fruits). Journal of Tropical Forest Resources. ¬
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3
Composizione e attività biologica dell’olio essenziale di Salvia
verbenaca
M. Canzoneri1*, M. Bruno2, S. Rosselli2, A. Russo3, V. Cardile4, C. Formisano5,
D. Rigano5, F. Senatore5
1
Ente Sviluppo Agricolo – Dipartimento Regionale Azienda Foreste Demaniali,
Regione Siciliana, Via Libertà 97, Palermo, Italia
2
Dipartimento di Chimica Organica, Università degli Studi di Palermo,
Parco d’Orleans II, I-90128 Palermo, Italia
3
Dipartimento di Chimica Biologica, Chimica Medica e Biologia Molecolare, Università di Catania,
V.le A. Doria 6, 95125 Catania, Italia
4
Dipartimento di Scienze Fisiologiche, Università degli Studi di Catania, V.le A. Doria 6, 95125 Catania, Italia
5
Dipartimento di Chimica delle Sostanze Naturali, Università degli Studi di Napoli Federico II,
via D. Montesano 49, Napoli, Italia.
Il nostro gruppo di ricerca già da alcuni anni si occupa della caratterizzazione di oli essenziali
estratti da piante aromatiche; in questa comunicazione vengono presentati i risultati dello studio
dei composti volatili di due campioni di Salvia verbenaca L. raccolti in Sicilia. La S. verbenaca o
“Salvia minore”, conosciuta nella tradizione popolare siciliana come “spaccapetri”, è una pianta
erbacea perenne, a portamento eretto, alta da 20 a 50 cm con infiorescenza generalmente
semplice, allungata, con brattee verdi e corolla violacea. In Sicilia la Salvia minore è ubiquitaria e
si utilizza per risolvere i casi di calcolosi renale, masticando le foglie fresche oppure in decotto.
Le parti aeree della pianta spontanea sono state raccolte a Piano Battaglia (Sicilia) nel mese di
Luglio 2009. In contemporanea, i semi raccolti allo stato spontaneo nella stagione autunnale
sono stati posti su terriccio organico, in cassetta split-plot, in numero di tre per ciascuna cella; le
piantine emerse, nella stagione primaverile sono state poste in vaso e, successivamente, in piena
terra. Dalle parti aeree di piante di S. verbenaca allo stato spontaneo e da quelle in coltura presso
l’Orto Botanico sono stati ottenuti per idrodistallazione oli essenziali analizzati per GC e GC/MS.
L’analisi GC e GC/MS ha permesso di identificare 77 e 71 componenti rispettivamente per l’olio
ottenuto dalle parti aeree di S. verbenaca spontanea (Ss) e di S. verbenaca coltivata (Sc). Le
frazioni più abbondanti sono costituite da acidi grassi e composti carbonilici per entrambi gli oli.
L’attività biologica degli oli essenziali è stata testata in cellule umane di melanoma umano
(M14). Le cellule sono state trattate con gli oli essenziali alla concentrazione di 12.5-100 μg/ml per
72 h e sono stati presi in esame alcuni parametri, quali la vitalità cellulare (MTT assay) [1],
l’integrità della membrana cellulare (LDH release) [1] e la frammentazione del DNA genomico
(COMET assay) [1]. I risultati ottenuti hanno evidenziato che gli oli essenziali presi in esame sono
in grado di inibire la vitalità delle cellule M14 (12.5-25 μg/ml), evocando una risposta proapoptotica.
Bibliografia
1. V. Cardile, A. Russo, C. Formisano, D. Rigano, F. Senatore, N.A. Arnold, F. Piozzi Journal of Ethnopharmacology,
2009, 126, 265-272.
¬
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Actividad antimicrobiana de extractos y fracciones obtenidos
de la especie vegetal Anacardium excelsum frente a
microorganismos patogenos
C. Celis, A. García, G. Sequeda, G. Mendez, R. Torrenegra
Laboratorio de Fitoquimica,Departamentode Quimica, Facultad de Ciencias Básicas,
Pontificia Universidad Javeriana, Cra 7 N 43-82 Bogotá, Colombia
[email protected]
Resumen
En esta investigación se evaluo la activida antimicrobiana de metabolitos secundarios presentes en hojas, fruto, testa, tegumento, semilla, flor y corteza presentes en la especie vegetal
Anacardium excelsum, frente a microorganismos Gram positivos como Staphylococcus aureus y
Bacillus subtilis y a su vez microorganismos Gram negativos como E.coli y Salmonella. Los metabolitos se obtuvieron por medio de extracción soxhlet, y para su fragcionamiento se realizaron
extracciones discontinuas liquido-liquido utilizando como solventes, éter de petróleo, diclorometano y etanol/butanol consecutivamente. La actividad antimicrobiana se llevo a cabo usando la
técnica de pozos.
Como resultado general se determino que la especie vegetal Anacardium excelsum tiene
actividad antimicrobiana frente a los microorganismos gram positivos. Con respecto a las fracciones en estudio, estas solo se probaron contra Bacillus subtilis en donde el tegumento, la semilla y
la testa presentaron la mayor actividad. A estas se les llevo a cabo una bioautografia en donde la
banda mas polar mostro actividad. Finalmente se hizo una cromatografía en columna para la
fracción de tegumento, de la cual se obtuvieron 16 muestras que fueron analizadas por cromatografia de gases acoplado a un detector de masas, donde se determinaron algunos compuestos
fenolicos como Fenol 2-(1,1- dimetiletil)-4- (1,1,3,3 tetrametilbutil) y fenol 2,2- metil 6(1,1 dimetiletil)
– 4 metil- cresol 2,2 – metil (6- ter-butil), los cuales son los posibles compuestos que generan
dicha actividad. ¬
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3
Importancia de la conservación del ecosistemas vegetal del
bosque pino-encino que contribuyen con sus minerales para
darle las caracteristicas del agua de los manantiales del Parque
Nacional del Río cupatizio de Uruapan, Michoacan. México
M.T. Álvarez Ramírez1, K. Hernández Mondragón1, P. Delgado Valerio2
1
Lab. Parasitología y Nutrición de Facultad de Biología. Morelia, Mich.
2
Lab. Genética de pinos. Facultad de Agrobiología. Uruapan, Mich.
El agua que nace en varios manantiales en forma de fuentes y cascadas en el parque nacional
de Uruapan, se ha considerado desde tiempos prehispánicos con propiedades sanadoras por sus
minerales presentes y sabor agradable que durante varios siglos se ha utilizado para consumo
humano, actividades agrícolas y otros. El parque Nacional llamado Barranca del Rió Cupatitzio
está enclavado en la región hidrológica del Rio Balsas y la subcuenca del Cupatitzio, esta última
está rodeada principalmente por bosques pino-encino que contiene 469 especies de plantas
nativas, que le aportan grandes volúmenes de agua, abundante humedad llega a esta zona que
es captada por la masa forestal que la condensa y forma precipitaciones directas, se infiltra hasta
los mantos acuíferos, en varios kilómetros del bosque y decenas montañas y surge en los manantiales del parque dando origen al río Cupatitzio, únicas corrientes perenes de manantiales en el
interior de este. Su volumen inicial en el siglo XV era de 12 varas/seg., Actualmente su volumen es
de 2v/seg. Su disminución se debe a que en los últimos 40 años grandes extensiones de bosque
se destruyen para el monocultivo de Persea americana Mill, lo que ha disminuyó los minerales en
el agua y algunos aumentó ó los sustituyó. El objetivo de este trabajo fue determinar que minerales contenidos en el agua original de manantiales prístinos y en 25 especies plantas contribuyentes más abundantes de estos bosques. Por medio de microanálisis de rayos X (SEM/EDS), se
determinó los elementos químicos de 40 muestras de agua de manantiales prístinos (M1) y 40
muestras de agua de manantiales que se ven afectados por bosques con monocultivos (M2), y en
100 plantas de 25 especies más abundantes del bosque (M3). El resultados se registran en% de
cps /eV del elementos químico en cada muestra. Para el agua prístina se reporta la presencia de
predominante de Oxigeno constante en un 54%, Silicio orgánico en un promedio mínimo y
máximo de 12 al 18% , seguido por Magnesio 4 al 6% , Calcio 2 al 4%, Potasio 1 al 3%, y en mínimas la
presencia de 0.01 al 0.3% de Cloro, Manganeso, Fosforo y hierro. Las principal especies de plantas
que contribuyen con estos minerales y otros 10 microelementos son los líquenes, musgos,
helechos, pinos y estratos arbustivos y son la siguientes: Parmelia michoacana, Candelaria concolor, Canoparmelia uruapan, Brionia unicolor, Bryum bicolor, Cheilanthes farinosa, Polipodium
madranse, Pleopeltis anguata, Andiatum capillus, Pinus lawsoni, P. douglasiana, P. michoacana,
Quercus obtusa, Q. castanea, Q. magnollifolia, Alnus jorullensis, Cletra mexicana, Prunus serótina,
Populos alba, Bocconia arbórea, Plantago australis, Salvia mexicana, Lopezia racemosa, Piquería
trinerva, Senecio angulifoliun etc. Mientras que para El agua M2 se registra la presencia de O 25%
Si 1- 5% K 6-10%, Mg 2%, Ca 9-12% Cl 14-18%, Fe 5-10% S 12-16%, P 5- 10%, Al 5%, F 7-16% etc. en estos
bosque de Persea americana (aguacate) solamente predomina esta planta, porque no permite
crecer a otra planta. Consideramos que el conservar el ecosistema vegetal de un bosque es
determinante para mantener la calidad y propiedades del agua, principalmente si esta se utiliza
para consumo humano y otros. Desafortunadamente, para mantener sano los bosques de P.
279
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americana, se utilizan varios productos exógenos para nutrirarla y dejarla libre de plagas, produciendo residuos agrícolas que se lixivian a los manantiales, como el Flúor elemento químico por
su naturaleza electronegativa al ser ingerido por los humanos puede causar problemas de fluorosis y otros, este problema de salud se refleja en los niños de edad escolar de esta región que
presenta una fluorosis el 87% y otros problemas de salud como la presencia de cáncer en adultos.
Proyecto CONACYT. No. 115897) ¬
280
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Estudio etnobotanico y sus aplicaciones en afecciones en la
comunidad de Acambay, del estado de México.
J. Correa Gómez, D. Tafolla Venegas, M.T. Álvarez Ramírez
Acambay México es una comunidad perteneciente a la antigua cultura mesoamericana, donde
aún se conservan conocimientos de su herbolaria tradicional. Así también, ésta comunidad tiene
una importante vinculación con el bosque, que ha utilizado sus recursos naturales para el mantenimiento y crecimiento de la comunidad, Las plantas medicinales son uno de los recursos, que ha
sido de gran importancia, ya que se han utilizado a través del tiempo, para curar y prevenir
diferentes tipos de afecciones en esta comunidad y que están al alcance de personas de cualquier estatus social. El objetivo principal fue realizar un registro taxonómico y etnobotánico de la
región, así como los usos principales que las personas les dan para tratar varias enfermedades.
Como resultados se obtuvo un listado de 62 especies de plantas medicinales que corresponden a
41 familias diferentes. Las especies de plantas de nueve familias se utilizan como antiparasitarias,
especies de 12 familias son utilizadas como antibacterianas, especies de 17 familias se utilizan
como expectorantes y broncodilatadores, especies de 28 familias son utilizadas contra desordenes gastrointestinales, especies de 27 familias se utilizan para contrarrestar enfermedades
crónico-degenerativas y especies de 12 familias son utilizadas para tratar problemas
dermatológicos. Dentro de los metabolitos secundarios a los cuales se les atribuyen estas propiedades medicinales a las plantas se tiene que presentan catecol, pirogalol y ácidos cinámicos y
cafeínico, donde los lugares y el número de grupos hidroxilo (OH) en el anillo parece que está
relacionado directamente con la toxicidad frente a los microorganismos, de modo que un aumento en la hidroxilación está ligado a una mayor toxicidad. El mecanismo está relacionado con
la inhibición enzimática por los compuestos oxidados, mediante reacciones de grupos sulídrico
o por interacciones no específicas con proteínas. Cabe resaltar que las plantas medicinales que
son mayormente usadas, son aquellas con propiedades contra problemas gastrointestinales y
con propiedades para contrarrestar enfermedades crónico-degenerativas, expectorantes y
broncodilatadoras, lo cual nos habla que presentan una gran efectividad en los usuarios. Por lo
tanto es de suma importancia el conocimiento tradicional de las plantas con usos medicinales
utilizadas en las poblaciones indígenas, ya que pueden ser utilizadas como una alternativa muy
importante en el tratamiento de diversas enfermedades que en la actualidad causan pérdidas
económicas debido a los altos costos de los fármacos utilizados. ¬
281
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3
Conbinación de las infusiones de hojas de Mentha piperita var.
citrata, Lima linetta l. y frutos de Phalaris canariensis l. en
procesos agudos de hipertensión arterial, en personas con
hipercolesteremia, en la región del bajo balsas del estado de
Michoacan. México
M.T. Álvarez Ramírez1, M.T. Flores Álvarez2
1
2
Facultad de Medicina. “Dr. Ignacio Chávez”. Morelia, Mich.
En la región del bajo Balsas se encuentra a 200 msnm, enclavada en la selva baja caducifolia de
la sierra madre del sur en México, debido a sus hábitos alimenticios de sus habitantes, y aunado a
su carga genética predisponente, es común la presencia de dislipidemias tipo IV y V en hombre y
mujeres, donde se presentan cuadros de hipertensión aguda, en ocasiones por las distancia a los
centros de salud, se deben de actuar con los recursos naturales que tienen a su alcance, esta
combinación de plantas se ha utilizado en estos procesos, Sin embargo en cuanto pasa la crisis no
se vuelven atender su problema, el tratamiento alopático es caro e inaccesible a estas personas
de escasos recursos, que además debe de ser sostenido porque induce agravarse y produce alto
índice de mortalidad. Por otro lado, las plantas utilizadas en esta infusión son accesibles y bajo
costo y la dosis de sus principios activos que son bioflavonoides, sequiterpenos y ácidos
salicílicos, oxálicos etc, no pone en riesgo a la persona. El objetivo de este trabajo fue determinar
el efecto de la combinación de estas plantas, en los procesos agudos y pos-agudos en la presión
sanguínea, colesterol y triglicéridos. Se formaron 3 grupos de voluntarios de 20 personas c/u.
Grupo 1 hipertensas con tratamiento, Grupo 2 normotensas con tratamiento y grupo 3
Hipertensas sin tratamiento. El tratamiento consistió en tomar la combinación de infusiones cada
tercer días un I/4 de la dosis original. Se les determinó presión sanguínea cada 3, 8 y 15 días
durante seis meses con un baumanómetro y vigilancia médica, y la lectura de su colesterol y
triglicéridos en suero cada mes por espectrofotocolorimetría. Las diferenciad estadísticas de la
variables medibles en los grupos se compararon por ANDEVA y la prueba de Tukey. Los resultados mostraron la regulación de la presión sanguínea que se mantuvo a 120 / 90 mm/ Hg en el
grupo 1 y 2 y mostraron una diferencia de P<0.02 con respecto al grupo 3, donde su presión se
mantuvo en niveles altos de 168/140 mm/Hg. El colesterol total LDH y triglicéridos disminuyeron
en los grupos 1 y 2, y sus HDL aumento. Mientras que para el grupo 3 mantuvo los mismos niveles
iniciales de colesterol y triglicéridos y repitió 4 cuadros agudos de hipertensión en el periodo de
seis meses, mostrando este grupo una diferencia estadística considerable P<0.01 en ANDEVA.
Con estos resultados se muestra el efecto de la combinación de principios activos de estas
plantas con la acción antiinflamatoria, dispidizante, vasodilatador normoregulador de presión,
además de la ventaja de estos metabólitos secundarios como los bioflavonoides no son acumulativos, y son eliminados vía renal diariamente, por tal motivo, es recomendable mantener constante el tratamiento para mantener el efecto hasta regular la presión y hipercolesteremia, así
como, la fluidez de la circulación, e ir disminuyendo su dosis al retirar su empleo. El grupo 1 no
volvió a tener ningún cuadro de hipertensión y se liberó del medicamento comercial. ¬
282
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Efecto sobre la cutícula del nematodo Eustrongylides ignotus
L3 inducido por la acción de once especies de plantas con
propiedades antiparasitarias de la comunidad de Acambay,
Mexico
D. Tafolla Venegas, J. Correa Gómez, M.T. Álvarez Ramírez
Tradicionalmente las plantas medicinales sirvieron como remedios para aliviar síntomas o
tratar enfermedades, con resultados dispares. Debido a su efectividad farmacológica, actuaban
directamente sobre el organismo, produciendo cambios significativos en su funcionamiento. En
este sentido, estas plantas eran estrictamente fármacos (drogas) con capacidad de operar,
alternativamente, como remedios o venenos, dependiendo de la dosis, la oportunidad, la vía de
administración, la idoneidad de quien las indicaba, la constitución del sujeto tratado, entre otros
factores. El objetivo principal de este trabajo fue determinar los efectos causados en la cutícula
de la larva L3 del nematodo E. ignotus debido a la acción de los metabolitos secundarios de once
especies de plantas utilizadas como antiparasitarias en la comunidad de Acambay, México. Los
metabolitos secundarios de las once plantas, (Artemisia absinthium, Tanacetum balsamita,
Mentha sativa, Ruta graveolens, Rosmarinus officinalis, Ceterach officinarum, Allium sativa, Lepidium
intermedium, Aloe vera, Chenopodium Ambrosioides, Allium cepa) presentaron algún efecto en la
cutícula del 100% de las larvas, sin embargo la morbilidad y mortalidad tuvo diferente dinámica
con las diferentes infusiones de plantas antiparasitarias. A partir del tercer día se observó la
distención muscular de las larvas sometidas a metabolitos del Romero, hasta el día quinto hubo
distención muscular en larvas sometidas a infusiones de Doradilla, Santa María, Hierbabuena,
Ruda, Epazote, Sábila y Estafiáte, este grupo constituyo el 66% de las plantas en estudio. Por otro
lado el Manrrubio no presento distención sino contracción muscular y endurecimiento general de
los nematodos. Para el octavo día la infusión de cebolla afectaron a las larvas presentando
distención muscular y flacidez general en los cuerpos de los helmintos. Como control positivo se
utilizo una infusión de Albendazol, la cual a las 24 horas de habérsele aplicado a las larvas, indujo
que sus cuerpos del nematodo se endurecieran con bastante rigidez, a diferencia del Romero,
que suavizó la cutícula del nematodo a las 48 horas. La Cebolla, La Doradilla, La Santa María, El
Epazote, La Sábila, La lentejilla y El Estafiáte, tuvieron acción sobre la pared de las larvas suavizando y atrofiando la cutícula alrededor de 72 horas; por último a las 168 horas tuvo efecto sobre
la pared de las larvas el Manrrubio, la Ruda y la Hierbabuena. El conocimiento adquirido de
muestra las plantas que pueden ser utilizadas contra helmintos con mejores resultados. Donde se
presenta al Romero como la planta que mayor daño causó a las larvas de los helmintos y que
puede ser utilizada como una alternativa al Mebendazol, sin los efectos colaterales y el riesgo de
la oclusión intestinal en la parasitosis masivas que es frecuente aun en las comunidades rurales. ¬
283
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Composición química y efecto larvicida sobre larvas de Aedes
aegypti del aceite esencial de Annona cherimolla de los Andes
venezolanos
Rosslyn N. Ramírez1, Flor D. Mora1, Jorge L. Avila2, Luis B. Rojas3, Alfredo Usubillaga3,
Samuel Segnini4, Juan Carmona A.1
1
2
Grupo de Química Ecológica, Facultad de Ciencias
3
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia 4Laboratorio de Ecología de Insectos, Facultad de Ciencias.
Universidad de Los Andes, Mérida, 5101, Venezuela
La familia Anonáceae, más conocida como la familia de la Guanábana, es una familia de árboles
aromáticos de regiones tropicales, se caracteriza por la presencia de numerosas sustancias de
diversa naturaleza química[1-2]. En hojas raices, frutas y semillas se han reportado alcaloides,
terpenoides, flavonoides, acetogeninas y aceites saponificables como metabolitos bioactivos[3].
El aceite especial de varias especies de Annona se caracteriza por contener biciclogermacreno,
trans-cariofileno y δ-amorfeno.[4]. El presente trabajo describe la composición química y actividad larvicida en Aedes agypti del aceite esencial de Annona cherimolla, recolectada en Venezuela.
El aceite esencial de las hojas frescas de Annona cherimolla, fue obtenido por hidrodestilación
utilizando un aparato tipo Clevenger 5 . La planta se recolectó, en la Ciudad de Mérida, estado
Mérida, Venezuela obteniendo un 0,17% de aceite esencial. Se identificaron catorce componentes
químicos (97.2%) por análisis CG-MS. Los constituyentes mayoritarios fueron D Germacreno
(57.7%), β-cariofileno (8.9%), Biciclogermacreno (8.8%), B Germacreno (5.0%), mezcla de a-cadinol
y T-muurolol (2.9%). El aceite esencial es activo contra larvas del tercer estadío de Aedes aegypti
[6], CL50 30.7ppm.
Referencias Bibliohemerográficas
1. Walter, J. W. (1971). Contributions for the GRAY HERBARIUM. Pollen, Morphology, phytogeography and Phylogeny
of the Annonaceae., Edit Reed C, Rollins and K. Roby. 2002.
2. Leboeuf, et al., (1980). Phytochemistry.
3. Ocampo, S. et al., (2007). Vector 2:103-112
4. Castrejón et al., (2003). Revista de la Sociedad Quimica de Mexico. 47.2 139-142
5. Rojas L. et al., (1999). Phytochemistry 52:1483-84
6. WHO 1981a. Instructions for Determining the Susceptibility or Resistance of MosquitoLarvae to Insecticides.
WHO/VBC/81.807, World Health Organization, Geneva. ¬
284
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Derivados Fenólicos Potencialmente Activos del Hypericum
laricifolium Juss.
Ramírez-González I.1, Amaro-Luis J. M.2, Bahsas A.2
1
Instituo de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis.
2
Escuela de Química. Facultad de Ciencias.
Universidad de Los Andes. Mérida-Venezuela
[email protected]
El Hypericum laricifolium Juss., es una especie ampliamente distribuida en los páramos de
Mérida-Venezuela. Para esta investigación, la especie fue recolectada en el páramo Piedras
Blancas. Las partes aéreas fueron secadas a temperatura ambiente y a la sombra, y posteriormente molidas. Se prepararon dos extractos. Se realizó una primera extracción con diclorometano seguida de otra con metanol. Las soluciones producto de esas extracciones, se concentraron a presión reducida. El extracto de diclorometano fue sometido a una cromatografía de
columna con sílica gel. Del extracto de diclorometano se aislaron: la 1-hidroxi-7-metoxixantona
[1], la 6-deoxiisojacareubina [2], la 1,7-dihidroxixantona [3] y la 2-hidroxixantona [4]; junto a los
ácidos vanílico y betulínico. En el extracto metanólico precipitó una mezcla de quercetina e
isorhamnetina. El resto del extracto se pasó por una columna de sephadex. Del mismo se aislaron: la 1,5,6-trihidro-7-metoxixantona [5] y la 1,3-dihidroxi-6-metoxixantona [6], así como la
isoquercitrina.
Las xantonas: 1-hidroxi-7-metoxixantona [1], 1,7-dihidroxixantona [3] y 2-hidroxixantona [4];
están ampliamente distribuidas en el género hypericum. Para éste, es el tercer reporte de la 6deoxiisojacareubina [2], y el segundo de la 1,5,6-trihidro-7-metoxixantona [5]. La 1,3-dihidroxi-6metoxixantona [6], hasta ahora, solamente se había sintetizado, siendo esta, la primera vez que
se aísla de una fuente natural. También este es el primer reporte de la isorhamnetina para el
género hypericum, a pesar de que la quercetina está ampliamente distribuida en el mismo. Se
obtuvo un 9,2% de isorhamnetina del material seco, por lo cual el H. laricifolium constituye una
fuente importante de este compuesto natural. ¬
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Potential insect deterrent of species of Eupatorium genus
Cesar B. Ramirez Lopez1, E. García Sanchez2, R.E.N. del Rio2, A. Flores Garcia2,
D. Raya Gonzalez1, J.A. Aviña Verduzco, M.M. Martínez Pacheco2
1
2
Facultad de Ingenieria y Tecnologia de la Madera
Instituto de Investigaciones Quimico Biologicas, Universidad Michoacana de San Nicolas de Hidalgo, Edificio B-1,
Ciudad Universitaria, Francisco J. Mujica s/n. Col. Felicitas del Rio, Morelia, Mich, Mexico. C.P. 58060
[email protected]
In the local area as in the rest of the country the wooden products of uses industrial, domestic
and cultural, like cellulose pulp, paperboard and other cellulose products are damaged by borer
and xylophages insects that cause a great loss both cultural as economic. However, these insects
are important in trophic chains, recycling and formation of soils. This is a good environmental
reason to search about of the better control method for these insects with compounds new and
environmental friendly with both activities repellent as deterrent (dissuasive activity). Plants
secondary metabolites are biodegradable and it is possible to determine its spectrum insecticide
as; attractants, stimulants, toxins, dissuasive compounds and oviposition inhibitors of the pest
insect. It is highlights the Eupatorium genus could be considered as source of insect dissuasive
compounds. In Mexico, species of this plant genus are widely represented and it was described
20 endemic species in the Central West area. Some Eupatorium sp are used in traditional medicine and most of them grow in abundance, it is deduce that they have not natural enemies
perhaps because of their chemical defense. This work raises the potential insect deterrent
(repellent and antifeedant) in species of the Eupatorium genus in pest control especially in the
control of dry wood borers.
Keywords: Eupatorium, plant extracts, repellent.
Aknowlegements
We thank to UMSNH for to financial support to this work. CBRL and EGS are holders of CONACyT fellowships. ¬
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Effect of Compounds Isolated from Red Brazilian Propolis on
the Pdr5p from Yeast Plasma Membrane
Cinzia Lotti1, Gabriellen Menezes Migliani de Castro2, Leandro Figueira Reis de Sá2,
Ana Claudia Tessis3, Anna Lisa Piccinelli1, Luca Rastrelli1, Antonio Ferreira-Pereira2
1
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Facoltà di Farmacia, Università degli Studi di Salerno
2
Laboratório de Bioquímica Microbiana, Dept. de Microbiologia Geral/CCS,
Universidade Federal do Rio de Janeiro, I. do Fundão, 21941902, Rio de Janeiro, Brazil.
3
Instituto Federal do Rio de Janeiro, Maracanã, Rio de Janeiro, Brazil
Multidrug resistance is one of the most preoccupying mechanism of resistance in cancer cells
and in pathogenic microorganisms leading to an inefficiency of chemotherapy treatments by
overexpressing efflux pumps belonging to super family of the ABC (ATP-binding cassette)
Transporters [1]. The mammalian multidrug resistance (MDR) is analogous to pleiotropic drug
resistance (PDR) in yeast which involves an overexpression of related proteins as Pdr5p transporter, a member of the ABC Transporters super family. These similarities, between P-glycoprotein
and others fungi transporters, making the Pdr5p an interesting model to study the MDR phenotype [2]. Some research groups are looking for new inhibitors for efflux pumps belonging to the
ABC family, and natural products have significantly contributed for discovering new compounds
with biological activity. Propolis is a complex resinous material collected by honeybees from
exudates and buds of certain plant sources and this material is thought to serve as a defence
substance for bee’s hives [3]. Propolis is widely used in traditional medicine and is reported to
have a broad spectrum of pharmacological properties. Literature reported some biological
functionalities of propolis, such as antibacterial, antiviral, fungicidal, anti-inflammatory and anticarcinogenic activities [4-5]. Propolis chemical composition is qualitatively and quantitatively
variable, depending on the season, the species of bee, vegetation and the area of collection [6].
The major components isolated from methanolic extract of red Brazilian propolis (Alagoas, NordEst of Brazil) are isoflavonoids (including pterocarpans, isoflavans, isoflavones), flavanones and
polyprenylated benzophenones [7,8]. In this work we demonstrated the effects of five different
isolated compounds on ATPase activity of Pdr5p. From all five substances tested, only the RBP-1
was able to abolish completely the enzymatic activity while other ones worked as positive
modulators. In similar way, RBP-1 abrogated the efflux of Rhodamine 6G from yeast cells that
overexpress the Pdr5p transporter. Taken together, these results demonstrate that Brazilian
propolis could be a source of promising compounds that could reverse the MDR phenomenon,
particularly in fungus, where it could be an adjuvant in the treatment with azoles.
References
[1] Hall, M. D., et al., 2009, Trends Pharmacol. Sci., 30, 546-556.
[2] Cannon, R. D., et al., 2009, Clin. Microbiol. Rev., 22, 291-321.
[3] Pietta P. G., 2002, Fitoterapia, 73, 17-20.
[4] Burdok G. A., 1998, Food Chem. Toxicol., 36, 347-363.
[5] Marcucci, M. C., 1995, Apidol., 26, 83-99.
[6] Lotti, C., et al., 2010, J. Agric. Food Chem., 58, 2209-2213.
[7] Alencar, S. M., et al., 2007, J. Ethnopharmacol., 113, 278-283.
[8] Awale, S., et al., 2008, Bioorg. Med. Chem., 16, 181-189. ¬
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3
Evaluation of estrogenicity of flavonoids by recombinant yeast
assay (rya)
Resende F.A.1, Vilegas W.2, Varanda E.A.1
1
Department of Biological Sciences, Faculty of Pharmaceutical Sciences of Araraquara, Universidade Estadual Paulista
Julio de Mesquita Filho - UNESP, Araraquara, São Paulo, Brazil
2
Institute of Chemistry of Araraquara, Department of Organic Chemistry, Universidade Estadual Paulista Julio de
Mesquita Filho- UNESP, Araraquara, São Paulo, Brazil
fl[email protected]
A number of plants used traditionally exhibit pharmacological properties with great potential
in therapeutic applications. In most developing countries, 70-80% of the population still resorts to
traditional medicine for their primary health care. Plant-derived estrogenic chemicals that influence endocrine activity and play a role in the prevention of certain hormone-dependent
cancers (such as breast and prostate cancers) are referred to as phytoestrogens. These compounds present in environment mimic the action of natural estrogens. Although their chemical
structure is different from that of natural estrogens, the phytoestrogens can bind to the estrogen receptors and activate the transcription of target genes. Many flavonoids, a major group of
phenolic plant-derived secondary metabolites, are known to possess estrogen-like bioactivities.
Thus, in this study, the estrogenicity of 10 flavonoids with small structural differences (quercetin,
fisetin, kaempferol, luteolin, chrysin, galangin, flavone, 3-hidroxyflavone, 5-hidroxyflavone and 7hidroxyflavone) was investigated by recombinant yeast assay (RYA).
RYA consists of an engineered yeast strain in which the transcription of a reporter gene depends upon the presence in the medium of compounds capable to bind to the human estrogen
receptor. This setup imitated the mechanism by which many hormone-responsive genes are
regulated in vertebrates; the fundamental similarity of all eukaryotes ensures that it also works in
yeast in a similar way. The results are expressed in estradiol equivalents that are defined as the
concentration of estratiol that is required to elicit the same response as that of the sample.
Kaempferol was the only compound that showed an estrogen-receptor-dependent stimulation
with 5.36 ng/L estradiol equivalents. The others samples showed no detectable levels of estrogenicity (<0.1 ng/L of estradiol equivalents). The results of this study collaborate to elucidate the
relationships of flavonoid derivatives and estrogenicity being that a greater understanding of its
structure may prove valuable in the search for preventive natural phytoestrogens against breast
cancer, as well as the development of novel drugs derived from natural products.
Financial support
CAPES and FAPESP ¬
288
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Estrogenic and mutagenic activity of quercetrin isolated from
Serjania glutinosa
Vanessa Uzan1, Flávia A. Resende1, Mariana Frigieri2, Cláudia Joseph Nehme3,
Wagner Vilegas3, Eliana A. Varanda1*
1
Biological Sciences Department, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Unesp - Univ Estadual Paulista,
Rodovia Araraquara - Jaú, km 1, 14801-902 - Araraquara (SP), Brazil
2
Technology Faculty of Jaboticabal, FATEC - Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane,
s/n - CEP 14884-900 - Jaboticabal (SP), Brazil
3
Organic Chemistry Department, Institute of Chemistry, Unesp - Univ Estadual Paulista, P.O. Box 355,
14800-900 - Araraquara (SP), Brazil
*corresponding author:
[email protected]
In Brazil, in some situations, the medicinal plants are the only therapeutic resource of some
communities and ethnic groups, however, in spite of their indiscriminate use, until today studies
of their chemical constitutions and biologically activity are scarce. In spite of the many beneficial
actions of plants, it is important emphasize that some of their constituents can have undesirable
effects to the organism. In light of these plant species in medicinal treatment we assessed a
specie of the genus Serjania, family Sapindaceae. Serjania glutinosa Radlk, popularly known as
“timbó-branco”, is used as ictiotoxic in the North and Center West. Previous assays revealed that
MeOH 70% extracts of this specie presented positive mutagenic activity. In this study, we verified
the mutagenic and estrogenic potential of the majority substance isolated of the MeOH extract
(quercetrin). The mutagenicity assays were realized in Salmonella typhimurium using the strains
TA100, TA98, TA102 and TA97a. To test the estrogenic activity the same substance was submitted
to recombinant yeast assay (RYA) that uses genetically engineered yeast cells to reproduce the
natural pathway of genetic control by estrogens in vertebrate cells. A synthetic estrogen, 17-αethinylestradiol (EE2), was used as the reference estrogenic compound. It was possible to
observe that the substance was not mutagenic. The RM (mutagenic index) values were lower
than 2 and has not dose-response effect, in the absence and in the presence of metabolic activation. In this form, we conclude that the quercetrin is not responsible for the mutagenic effect of
Serjania glutinosa. Additionally, in the RYA test we verify a viability of 93% and absence of estrogenic effect.
Keywords: Ames test, Recombinant yeast assay, quercetrin ¬
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3
Evaluación antibacteriana de extractos de plantas que se
utilizan para tratar heridas en comunidades de la Sierra y
Huasteca de Hidalgo, México
Reyes Silva Jesús Alan, Pérez Escandón Blanca Estela,
Villavicencio Nieto Miguel Ángel
Laboratorio de Etnobotánica, Centro de Investigaciones Biológicas, Universidad Autónoma el Estado de Hidalgo,
México. Carretera Pachuca-Tulancingo, Km 4.5, Cd Universitaria, Pachuca, Hgo, C. P. 42184
[email protected]
En este trabajo se seleccionaron cinco municipios de la Sierra y Husteca de Hidalgo (San Felipe
Orizatlan, Huejutla, Huautla, Tlanchinol y Molango.) con alto índice de población indígena
náhuatl, con el objetivo de corroborar el uso de las plantas para tratamiento de heridas y evaluar
la actividad antibacteriana de los extractos vegetales en cepas de Serratia marcescens,
Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus ATCC. Por medio de entrevistas se estimó la
frecuencia de uso de las especies vegetales empleadas para el tratamiento de esos problemas;
los extractos se ensayaron en los cultivos bacterianos, con el método de difusión en disco sobre
placas con medio de cultivo. Se encontró que en los municipios de la Sierra y Husteca de Hidalgo
se emplean veinte especies de plantas para tratar heridas; las especies son Stemmadenia donellsmithii, Syngonium podophyllum, Xanthosoma robustum, Pseudogynoxys chenopodioides,
Pseudobombax ellipticum var. ellipticum, Pseudobombax ellipticum var. tenuiflorum, Rhipsalis
baccifera, Lobelia laxiflora, Kalachoe pinnata, Bejaria aestuans, Croton draco, Liquidambar styraciflua, Prunella vulgaris, Malvaviscus arboreus, Argemone mexicana, Bocconia frutescens, Pinus
greggi, Hamelia patens, Capsicum annum y Lantana camara. Los extractos de K. pinnata y P. ellipticum var. tenuiflorum fueron los más activos en S. aureus, con 1600 μg/ml produjeron zonas de
inhibición de 28 mm; le siguió en actividad P. chenopodiodes y L. camara con 23 mm, en la cepa de
S. marcescens, los extractos de la especies que produjeron la mayor zona de inhibición fue el de
A. mexicana, P. ellipticum var. tenuiflorum y L. laxiflora con 29 mm. En P. auriginosa ninguno de los
extractos produjo zonas de inhibición.. Los resultados contribuyen a corroborar las propiedades
medicinales que los pobladores del área atribuyen a estas plantas y ayudan a validar su uso
tradicional. ¬
290
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3
Evaluación de la capacidad antioxidante y antimicrobiana de
los compuestos fenólicos presentes en Caesalpiniaceae coriaria
(Dividivi)
Alicia Mariela Rincón1, Ana Quintero2, Fanny C. de Padilla1, Trina Colman3,
Lizet Bou Rached1
1
Unidad de investigación Análisis de Alimentos, Facultad de Farmacia, Universidad Central de Venezuela
2
Instituto Pedagógico de Caracas
3
Laboratorio de Química Orgánica. Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela. Apdo 40109.
Caracas, Venezuela
[email protected]
Caesalpinia coriaria (Caesalpiniaceae), conocido como “dividive”, es un árbol que se encuentra
en lugares áridos de América tropical. En Venezuela, se puede ubicar en los valles de la Cordillera
de la Costa y en los Llanos. La medicina popular le atribuye al fruto de la planta propiedades
antibacterianas, ya que ha sido utilizado para el tratamiento de dolencias de garganta e infecciones de las encías. En este trabajo, los frutos deshidratados de Caesalpinia coriaria se evaluaron en
el contenido de polifenoles totales, expresados como equivalentes de ácido gálico, por el método de Folin-Ciocalteau, así como el contenido de flavonoides, expresados como equivalentes
de rutina, previa extracción con solventes orgánicos. Se estudió la actividad antioxidante de los
compuestos fenólicos por el método del radical libre DPPH *, la capacidad antirradical como mM
Trolox/g y el ensayo del poder reductor, expresado como equivalente de ácido ascórbico.
También se determinó la actividad antimicrobiana in vitro, utilizando el método de difusión en
placa. Los frutos de Caesalpinia coriaria tuvieron un contenido de polifenoles de 5.93 g- equivalentes de ácido gálico/100 g de muestra seca y un contenido de flavonoides de 0.3697 g equivalentes de catequina/100 g de muestra seca. Al evaluar el porcentaje de inhibición del
radical DPPH*, a diferentes concentraciones de extractos de los frutos en estudio, se encontró
que el mismo estuvo entre 64.19 y 87,24%. Las muestras en estudio presentaron una marcada
capacidad antioxidante (0.242 mMTrolox/g y 6.5144 g-equivalentes de ácido ascórbico/100 g de
muestra seca). El análisis de la actividad antimicrobiana in vitro mostró que el extracto de los
frutos presentó actividad sobre los microorganismos Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis. Los
resultados muestran que los frutos de Caesalpinia coriaria podrían constituirse en una fuente
vegetal promisoria para uso medicinal, especialmente para el tratamiento de las patologías
asociadas al estrés oxidativo, así como en el tratamiento de algunas infecciones bacterianas.
Palabras claves: Caesalpinia coriaria, polifenoles, flavonoides, capacidad antioxidante, actividad antimicrobiana. ¬
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3
Contenido de polifenoles y actividad antioxidante del
Cymbopogon citratus (DC) STAPF
Fanny C. Padilla, Alicia M. Rincón, Lizet Bou-Rached
Universidad Central de Venezuela, Facultad de Farmacia, Unidad de Análisis de Alimentos.
Apdo. 40109 Caracas, 1040-A, Venezuela
[email protected]
Muchas plantas medicinales contienen cantidades considerables de antioxidantes como los
polifenoles, que juegan un papel importante en la absorción y neutralización de radicales libres,
extinción de oxígeno singlet y triplet, o descomposición de peróxidos. Las hierbas se han usado
como remedios para tratar infecciones, dolencias y enfermedades. Estas hierbas son generalmente consumidas en la forma de te (infusión) de las partes secas de la planta. Recientemente,
los te de hierbas han ganado popularidad en los países occidentales debido a su fragancia,
propiedades antioxidantes y aplicaciones terapéuticas. El malojillo Cymbopogon citratus (DC)
Stapha (Gramíneas) también conocida en Venezuela como citronera, caña de malojillo, limonera
es una planta originaria de la India. La infusión se ha usado como digestivo, febrífugo y para el
paludismo, como sedante, en dolores estomacales, carminativo, expectorante, hipertensión y
otras afecciones. En este trabajo en el extracto metanólico de las hojas liofilizadas de
Cymbopogon citratus (DC) Stapf se determinó el contenido de polifenoles totales expresados
como equivalentes de ácido gálico, por modificación del método de Folin Ciocalteu, además del
contenido de flavonoides y taninos expresados ambos como equivalentes de catequina.
Asimismo, se preparó una infusión de las hojas en agua a 85ºC y se realizaron estas mismas
determinaciones. La actividad antioxidante de ambos extractos se evaluó por el método del
radical libre DPPH*, la capacidad antirradical expresada como mMTrolox/Kg y el poder reductor
expresado en equivalentes de ácido ascórbico. Los resultados confirman la presencia de compuestos fenólicos presentando la hierba seca mayor cantidad que la infusión, 12,80 y 11,49 EAG g/Kg
respectivamente. Esta misma relación se presenta en el caso del contenido de flavonoides (4,43 y
1,58 ECATg/Kg) y taninos (4,76 y 1,73 ECAT g/Kg). En el caso de la actividad antirradical y poder
reductor la infusión y el extracto metanólico no presentaron diferencias significativas (p<0,05).
Estos resultados podrían ser la consecuencia de las diferencias en la obtención de los extractos.
De acuerdo trabajos realizados los taninos parecen ser la fracción mas activa como antioxidante y
se consideran como los responsables de los efectos gastrointestinales. Asimismo los taninos y los
flavonoides contienen los compuestos fenólicos responsables por la actividad antirradical contra
los ROS, que promueven las enfermedades inflamatorias y degenerativas. Estos resultados
muestran que tanto las hojas secas como la infusión de Cymbopogon citratus (DC) pueden proporcionar beneficios para la salud por su actividad antioxidante.
Palabras clave: Cymbopogon citratos, malojillo, compuestos fenólicos, actividad antioxidante. ¬
292
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3
Estudio amilográfico y propiedades antioxidantes de mezclas
de harina de avena con polvo de frijol de chiga (Campsiandra
comosa benth)
Lizet Bou Rached, Alicia Mariela Rincón, Fanny. C. Padilla
Unidad de Investigación Análisis de Alimentos, Facultad de Farmacia, UCV.
Apdo. Postal 40109. Caracas, 1040-A. Venezuela
[email protected]
El consumo de avena se ha incrementado en los últimos años debido a sus efectos beneficiosos para la salud, especialmente por la disminución de los niveles de colesterol y glucosa en
sangre, siendo el elevado contenido de fibra soluble responsable de tales efectos. Por otra parte,
una dieta rica en antioxidantes no nutritivos (polifenoles) es altamente recomendada, ya que
protege contra enfermedades cardiovasculares, cáncer y otras enfermedades degenerativas. Los
frijoles de chiga se han estudiado por sus propiedades antioxidantes, no obstante tal actividad no
ha sido evaluada cuando se incorpora a un sistema alimenticio. El objetivo del presente trabajo
fue estudiar el contenido de polifenoles, la actividad antioxidante y las propiedades amilográficas
de una muestra de harina de avena a la que se le incorporó polvo de frijol de chiga a las concentraciones de 10 y 20%. Para la determinación de polifenoles extraíbles se aplicó el método espectrofotométrico de Folin-Ciocalteau, usando una curva patrón de ácido gálico, expresando los
resultados como g-equivalentes de ácido gálico, g (EAG)/100 g de muestra seca. La actividad
antioxidante se determinó mediante el método del radical DPPH (1,1-difenil-2-picryl-hidracil). El
estudio amilográfico se realizó utilizando el micro-viscoamilógrafo de Brabender, calentándose
las suspensiones desde 30º hasta 95º C, enfriándose hasta 50ºC. El estudio reveló que hubo un
incremento significativo del contenido de polifenoles al añadir polvo de frijol de chiga en las
muestras de harina de avena. (1,23 EAG/Kg, 9,14 EAG/Kg y 15,63 EAG/Kg para harina de avena,
harina de avena más 10% de chiga, y harina de avena más 20% de chiga, respectivamente). La
actividad antioxidante varió significativamente (0,008, 0,036 y 0,036 mMTr/g para harina de
avena, harina avena más 10% de chiga y harina de avena más 20% de chiga respectivamente). El
estudio mostró que se obtuvo un producto con alto contenido de fibra antioxidante. Del análisis
amilográfico se puede inferir que todas las mezclas evaluadas fueron de fácil cocción, presentando una gran estabilidad durante el período de calentamiento.
Palabras claves: harina de avena, chiga (Campsiandra comosa Benth), antioxidante, estudio amilográfico. ¬
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Composición quimica y actividad antibacteriana del aceite
esencial de Lantana camara var. moritziana
Nurby Nahiely Rios Tesch1, Flor Mora1, Luis Rojas2, Tulia Diaz3, Judith Velasco3,
Carlos Yánez4, Nahile Rios4, Juan Carmona5
1
Laboratorio de Investigación de Medicamentos Orgánicos
Instituto de investigaciones-Sección Productos Naturales
3
Laboratorio de Síndromes Gastrointestinales y Urinarios
4
Laboratorio de Toxicología
5
Herbario. Facultad de Farmacia y Bioanálisis.
Universidad de los Andes, Mérida
2
La composición química y actividad antibacteriana del aceite esencial obtenido de las hojas de
Lantana Camara var. moritziana recolectadas en Rubio, Estado Táchira, Venezuela, fueron evaluadas utilizando hojas frescas sometidas a hidrodestilación en una trampa de clevenger. El análisis
cualitativo-cuantitativo se realizó mediante la cromatografía de gases acoplada a espectrometría
de masas (GC/MS), en un equipo HP GC-MS system, modelo 5973, encontrando como compuesto
mayoritario al D-germacrene (31,01%), seguido de β-cariofileno (14,8%), α-felandreno (6,68%),
limoneno (5,69%) y 1,8-cineole (5,16%). La actividad antibacteriana del aceite esencial realizada
por el método de difusión en agar, se determino empleando bacterias gram positivas
Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212 y gram negativas Escherichia
coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 23357, Salmonella Typhi CDC 57, Pseudomona aeruginosa ATCC 27853, obteniendo como resultado que solo las bacterias gram positivas mostraron
sensibilidad a MIC 350μg/ml para Enterococcus faecalis y MIC de 400μg/ml para Staphylococcus
aureus.
Referencias
1. Hernández, T. et. al,. (2005). J. Ethnopharmacol, 96: 551-554.
2. Jualiani, J., et. al. (2002). Planta Med, 68:762-764.
3. Julião, S., et. al,. (2009). Nat. Prod. Commun, 4: 1733-1736.
4. Marongiu, B., et. al,. (2007). Nat Prod Res, 21:33-36.
5. Sena, J., et. al,. (2010). Nat. Prod. Commun, 5: 635-640.
6. Walden, A., et. al,. (2009). Nat. Prod. Commun, 4: 105-108. ¬
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3
The placebo effect in herbal medicine: can the psychosocial
factors and placebo effects have a clinical significance?
José F. Rivas-Vilchis1, Jorge A. Cervantes-Reyes1, Rubén Román-Ramos2
1
Especialización en Acupuntura y Fitoterapia, División de Ciencias Biológicas y de la Salud,
Universidad Autónoma Metropolitana - Iztapalapa
San Rafael Atlixco 186, Iztapalapa DF, México 04390
[email protected]
2
División de Ciencias Biológicas y de la Salud, Universidad Autónoma Metropolitana - Iztapalapa
We examine the psychosocial factors that might predict clinical outcomes with the therapeutic
approach based on herbal medicine (HM). Given existing evidence concerning the clinical effectiveness and safety of herbal medicines in several pathological conditions, it is important to
consider how clinicians might further improve their effectiveness. The relevant theoretical
frameworks focus primarily on the patient, suggesting that their background characteristics and
their beliefs about disease and herbal medicine should be considered as potential predictors of
outcome. The empirical literature in this area is sparse. However, the findings to date do suggest
that a number of psychosocial factors, in particular patients’ beliefs about herbal medicine, are
significant predictors of treatment outcomes from herbal medicine for disease. The aim of this
review is exam the psychosocial and cultural factors that might predict outcomes from herbal
medicine therapeutics while recognizing that it is probably an effective and cost effective clinical
intervention. The self-regulation model within health psychology helps us understand how
people manage their health and integrate interventions like herbal medicine into the management of their illness. We discuse five patients’ beliefs and expectancies: a) herbal medicine as
‘free side effects’ remedies and/or greater toxicity of chemical drugs; b) herbal medicine as a
more ‘holistic’ approach to health, c) herbal medicine with a more poweful placebo effect than
chemical drugs, patients with higher confidence in a practitioner using herbal medicine, and e)
herbal medicine as closer related therapy with cultural background. If we can identify psychosocial factors that predict outcomes in herbal medicine therapeutics then we can use this knowledge clinically to improve the effectiveness of herbal medicine therapeutics in clinical settings.
The findings do suggest that a number of psychosocial and cultural factors, in particular patients’
beliefs about herbal medicine, predict treatment outcomes in herbal medicine therapy to a
significant extent. ¬
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3
Usos etnomédicos y evaluación de la actividad antioxidante de
algunas especies mexicanas del género Bursera
Corona Sánchez Lucía1, Peña Morán Omar1, Rodríguez López Teresita2,
Flores Palacios Alejandro2, Álvarez Berber Laura3, Mamadou Moustapha Bah4,
Rodríguez López Verónica1
1
Facultad de Farmacia
Centro de Investigación en Biodiversidad y Conservación
3
Centro de Investigaciones Químicas, Universidad Autónoma del Estado de Morelos 62209; Dirección Av. Universidad
# 1001, Col. Chamilpa, Cuernavaca, Morelos, México
[email protected]
4
Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Autónoma del Estado de Querétaro; México
2
El género Bursera comprende alrededor de 100 especies de árboles distribuidos desde el sur
EE.UU. hasta Perú [1,2]. Alcanza su máxima diversidad y abundancia en los bosques secos tropicales de México, donde, con cerca de 84 especies - 80 de ellas endémicas, es el género con más
especies y a menudo uno de los grupos más abundantes [3, 4, 5]. La corteza, fruto, y hojas de
diferentes especies de Bursera tienen usos medicinales, comestibles, agrícolas, artesanales y
ceremonial a nivel local en varias regiones de América [7,8]. Desde el punto de vista medicinal
son utilizadas fundamentalmente contra la fiebre, el dolor y para curar heridas [9]. Algunas
especies como, B. fagaroides y B. simaruba se les ha demostrado actividad antiinflamatoria. Un
exceso de radicales libres se ha relacionado con una mayor incidencia de diversas enfermedades
degenerativas [10] como cáncer, enfermedades cardiacas, inflamación, artritis, disfunción cerebral, aceleración del envejecimiento [11], etc. La excesiva oxidación de biomoléculas da lugar a
diversos daños en el organismo [10]. El objetivo del presente trabajo es evaluar la capacidad
antioxidante de cinco cortezas y dos resinas correspondientes a cinco especies mexicanas del
género Bursera seleccionadas por su uso etnomédico.
Se recolectaron las cortezas de las cinco especies de Bursera y las resinas de B. copallifera y B.
bipinnata. Se obtuvieron los extractos, hexánico, metanólico e hidrolacohólico de las cortezas y,
las resinas se disolvieron en DMSO. Los métodos utilizados para cuantificar la actividad antioxidante fueron: Capacidad antioxidante equivalente en Trolox (CAET) con ABTS y con DPPH [13] y,
Capacidad antioxidante reductora del ion fierro (CARF) [14]. Para determinar el contenido total
de compuestos fenólicos totales se utilizó el método Folin-Ciocalteu [15].
Se evaluó la actividad antioxidante de 22 extractos, de los cuales 20 correspondieron a extractos de corteza y dos a soluciones de resina. Con excepción del extractos hexánico de la especie B.
copalifera, todos los extractos mostraron capacidad antioxidante; siendo los más activos los
extractos de las especies B. simaruba (extracto hexánico), B. glabrifolia (extracto
diclorometánico) y B. bipinnata (extractos hexánico e hidroalcohólico) y B. copallifera (extracto
hidroalcohólico). Cabe mencionar que se encuentran en proceso los análisis fitoquímicos y la
evaluación de otras actividades biológicas con estos extractos. ¬
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Comparación de actividad antioxidante de aceites esenciales
del género Schinus
Rodriguez S.A., Murray A.P.
INQUISUR-CONICET, Departamento de Química, Universidad Nacional del Sur, (8000) Bahía Blanca, Argentina
[email protected]
Continuando con la búsqueda de compuestos antioxidantes de origen natural, así como el
estudio de la actividad biológica y la composición química de especies del género Schinus
(Anacardiaceae)1,2, nos propusimos estudiar la actividad antioxidante de cuatro especies de este
género utilizando el método Crocin Bleaching Inhibition que permite el análisis de los compuestos lipofílicos antioxidantes.3 Se obtuvieron y analizaron los aceites esenciales de Schinus areira
L., Schinus longifolia (Lindl.)Speg, Schinus fasciculata (Griseb.) y Schinus praecox (Griseb.).
La fracción volátil de cada especie se obtuvo por hidrodestilación a partir de material vegetal
fresco, inmediatamente después de la recolección. Se estudió la composición de los aceites
teniendo en cuenta el estado fenológico y sanitario de los ejemplares y, en algunos casos, analizando por separado hojas y frutos. La caracterización química fue realizada por Cromatografía
Gaseosa, Espectrometría de Masa y comparación con muestras auténticas.
La actividad antioxidante de los aceites, evaluada como la oxidación del carotenoide crocin por
radicales peroxilos generados a partir del AAPH, fue cuantificada por espectroscopia UV-Vis. Los
resultados obtenidos muestran una mayor capacidad antioxidante, comparable con el control
positivo (Trolox), en el aceite de S. longifolia, en comparación con los aceites de S. areira, S.
praecox y S. fasciculata, en orden decreciente de actividad, como se puede observar en el Gráfico
1. Se compararán y discutirán los resultados obtenidos con los resultados reportados en el
pasado con el método de DPPH, en función de la composición química de los aceites. En esta
oportunidad se amplía el espectro de potenciales aplicaciones para estos aceites en base a la
actividad antioxidante observada en los aceites del género Schinus.
Gráfico 1: E.V. = Estado vegetativo, Fl = en flor, Fr = frutos, I = planta Infectada
Agradecimientos: UNS, ANPCYT y CONICET ¬
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3
Actividad antioxidante de Limonium brasiliense (boiss) kuntze
Rodriguez S.A., Murray A.P.
INQUISUR - CONICET, Departamento de Química, Universidad Nacional del Sur,
Bahía Blanca, (8000), Argentina
[email protected]
Limonium brasiliense (Boiss) Kuntze (Plumbaginaceae), es una planta perenne, conocida
vulgarmente como “Guaycurú”, que se distribuye por Argentina, Uruguay y el sur de Brasil. La
infusión de sus raíces es utilizada por sus propiedades medicinales, en tratamiento de hemorragias, enfermedades cardiovasculares, desordenes menstruales, reumatismo, como antidiarreico,
astringente y anticolesterolémico. En función de estas propiedades nos propusimos continuar
con el estudio de la composición del extracto metanólico de la raíz de L. brasiliense (Boiss) Kuntze
y evaluar comparativamente entre dos ensayos cuantitativos de actividad antioxidante como
DPPH y el método Crocin Bleaching Inhibition.4,5
En esta oportunidad se realizó una partición acuosa - hexánica al extracto metanólico, obteniendo subextractos. A cada uno de ellos se los ensayó con DPPH resultando positivo el subextracto polar, que luego fue fraccionado por cromatografía en columna en fase reversa, TLC
preparativa y HPLC (C18). Esto permitió el aislamiento de compuestos activos que fueron elucidados estructuralmente por Resonancia Magnética Nuclear de 1H y 13C (mono y bidimensional),
comparación con muestras auténticas y confirmados por literatura 6.
Los compuestos identificados fueron el acido gálico, anteriormente reportado, y tres flavonoides antioxidantes como 3-O-acetiltaxifolina, taxifolina y apigenina.
La capacidad antioxidante, tanto del extracto metanólico, subextracto acuoso y la fracción
activa, fue cuantificada por espectroscopía UV-Vis con DPPH (0.004% MeOH) y se la comparó con
el método Crocin.
Los resultados obtenidos mostraron una marcada actividad antioxidante en ambos métodos
como se pude observar en los gráficos, consistente con los compuestos antioxidantes aislados
hasta el momento.
Se discutirán los resultados obtenidos para los distintos bioensayos realizados en función de la
composición química.
Agradecimientos: UNS, ANPCYT y CONICET. ¬
298
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3
Analisis de los componentes volátiles del aceite esencial de
Lantana trifolia que crece en mérida venezuela
Loryis Silva*, Janne Rojas, Luis B. Rojas
Facultad de farmacia y Bioanálisis, Instituto de investigaciones de la facultad de farmacia y Bioanálisis
*
[email protected]
La especie Lantana trifolia pertenece a la familia verbenaceae, es un arbusto oriundo de zonas
tropicales de todo el mundo. Las especies de este género crecen generalmente como plantas
ornamentales en sembradíos públicos o jardines. En la medicina tradicional es utilizada para el
tratamiento de diarreas, heridas y ulceraciones dérmicas, bucales o cornéales, conjuntivitis,
faringitis y eritemas. Estas especies se caracterizan por presentar aceites esenciales. En el presente trabajo se determinó la composición química del aceite esencial de Lantana trifolia a través de
la técnica de cromatografía de gases acoplado a la espectrometría de masas (CG-EM). El estudio
se realizó en un equipo marca Hewlett Packard 6890 equipado con una columna de Fenil-metil
Polixilosan usando como base de datos Willey MS data library 6° edición y los componentes
volátiles de esta especie fueron: β-Cariofileno, D-Germacreno, δ-Elemeno, β-Elemeno, α-Copaeno,
( z )-β-Ocimeno, Sabineno, Limoneno, 1-Octen-3-Ol, 1,8-Cineol, α-Pineno, Linalol entre otros.
Palabras clave: Lantana trifolia, aceites esenciales, β-cariofileno, D-germacreno ¬
299
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3
Estudio fitoquímico de la Carramboa tachirensis (Aristeg.)
Cuatrec. (Asteraceae) especie endémica de los Andes
Venezolanos
Obregon Y., Rojas L., Usubillaga A.
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Mérida-Venezuela
[email protected]
El género Carramboa (familia Asteraceae), perteneciente antiguamente a las Espeletias, fue
creado por Cuatrecasas y comprende 7 especies, dentro de las cuales se encuentra la Carramboa
tachirensis (Aristeg.) (Cuatrec.), especie endémica de los páramos andinos y perteneciente a la
sub-tribu Espeletiinae. Los usos tradicionales de esta especie son los mismos atribuidos al género
Espeletia. A nivel popular la decocción de las hojas y cataplasmas son utilizadas contra el asma y
las afecciones pulmonares, debido a sus propiedades sudoríficas, antibronquiales y antigripales.
En el presente trabajo se realiza el estudio fitoquímico de la C. tachirensis. En el presente trabajo
se preparó un extracto de hexano:eter a partir de hojas secas de la planta, posteriormente se
siguió una marcha acido-base, obteniéndose dos fracciones: una ácida, la cual fue metilada, y otra
neutra. Ambas fueron analizadas por GC-MS empleando un aparato Hewlett Packard 5973 GC/MS
a 70 eV, equipado con un inyector automático y utilizando una columna capilar HP-5MS (30 m,
0,25 mm, 0,25μm). El programa empleado fue: temperatura inicial de 250ºC (1 min) hasta 300ºC (2
min) a razón de 5°C/min, con un reparto de 100:1. Se utilizó una temperatura de inyección de
200ºC. La identificación se realizó mediante comparación con patrones auténticos y con el empleo de las bases de datos Wiley (6ta Edición), Nist 05 y Adams 2007. Los compuestos detectados
fueron: ácido kaurénico (44%), ácido grandiflorénico (6%) y ácido 15-alfa-hidroxikaurenico (39%) de
la fracción ácida y kaurenol (5%), ruilopeziol (19%), 16-alfa-kaurano (56%) y ceras de la fracción
neutra. Estos compuestos identificados son derivados del ent-kaureno y son encontrados frecuentemente en especies pertenecientes a la sub-tribu Espeletiinae. Este es, para nuestro conocimiento, el primer reporte fitoquímico que se hace de esta especie. ¬
300
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3
Componentes volátiles de la Ocotea macropoda (Kunth) Mez.
(Lauraceae)
Perez L.1, Rojas L.1, Carmona J.2, Ferrer H.3, Usubillaga A.1
1
2
Instituto de Investigaciones, Laboratorio de Productos Naturales
Jardín de Plantas Medicinales, Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de los Andes. Mérida-Venezuela
3
Fundación Instituto Botánico Tobias Lasser, Universidad Central de Venezuela.
[email protected]
La Ocotea macropoda (Lauraceae), es un árbol de 6-9 metros de alto. De esta especie se han
aislado alcaloides del tipo aporfina (dehidrodicentrina, ocopodina). En el presente trabajo se
realiza el estudio de los aceites volátiles de esta especie. Un kilo de hojas frescas fueron sometidas a hidrodestilación empleando la trampa de Clevenger por 3 horas obteniéndose 0,5 ml de un
aceite de color amarillo. El análisis de este se realizó por cromatografía de gases empleando un
equipo de Marca Pekín Elmer modelo Autosystem equipado con una columna AT-5 de 60m de
largo y 0,25 mm de diámetro, también se utilizó un sistema GC/MS Hewlett Packard MSD 5973
con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30 m x 0,25 mm (HP-5). Se empleó una temperatura inicial de 60ºC (1 min) y luego se calentó a razón de 4 °C/min hasta 260ºC (20 min). Se inyectó
una muestra de 1,0μL de una solución al 2% del aceite esencial en n-heptane con reparto de 100:1.
Se utilizó una temperatura de inyección de 200ºC. La identificación de los componentes se realizó
con ayuda de una librería Wiley Ms Data (sexta edición, 275 K Spectra) y NIST 05. El rendimiento
obtenido resultó ser de 0,05% p/v y se lograron separar por la cromatografía de gases 45 componentes, siendo los mayoritarios: β-cariofileno (10,52%), δ-germacreno (26,04%), δ-cadineno (8,22%)
y α-copaeno (13,80%).
Bibliografía
1. Cava, M.P.; Venkateswarlu, A. (1971). Dehydroocopodine, dicentrinone, and other alkaloides from Ocotea
macropoda and Hernandia jamaicensis. 27, 2639-26-43. ¬
301
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3
Análisis y determinación de la actividad antibacteriana del
aceite esencial de la Pimenta racemosa. P. Miller (J.W.Moore)
var. Racemosa
Pedro Huelvas1, Francy Mora1, Luís B. Rojas2*, Marieugenia Lucena3
2
1
Facultad de Farmacia y Bioanálisis
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela
3
Departamento de Bioanálisis Clínico.
*
[email protected]
En el presente estudio se describe la extracción, análisis y determinación de la actividad antibacteriana del aceite esencial P. racemosa var. racemosa. Estudios fitoquímicos y farmacológicos
han revelado que esta especie presenta efectos antirreumáticos, antifúngicos y antibacterianos 1.
Esta especie fue recolectada en el jardín botánico de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis de la
Universidad de Los Andes. La extracción del aceite se realizó utilizando la técnica de
hidrodestilación, empleando la trampa de Clevenger. Los componentes del aceite fueron separados en un cromatógrafo de gases marca Heweltt Packard 6890 y fueron identificados por un
detector de masa Heweltt Packard MSD 59372 empleando la base de datos Willey Ms data Library
6th y el cálculo de los índices de Kováts. El concentrado aceitoso fue fraccionado sobre una
columna seca (silica-gel) por gravedad, obteniéndose 4 Fracciones, estas fueron analizadas por
CG-EM. La fracción 2 resultó ser abundante en compuestos polares mientras que la fracción 3
sólo presentó compuestos apolares. Los constituyentes químicos mayoritarios del aceite esencial
fueron: Eugenol (48,67%), Limoneno (13,65%) y 1,8 Cineol (12,68%). La determinación de la actividad antibacteriana del aceite esencial y sus fracciones, se realizó por el método de difusión en
agar de disco (Kirby-Bauer) contra 5 especies bacterianas ATCC de referencia internacional (2
Gram positivas y 3 Gram negativas) 3,4; las cepas que resultaron ser sensibles al aceite fueron las
Gram positivas (S. aureus y E. faecalis) y de las Gram negativas ensayadas la única especie que
exhibió susceptibilidad fue la K. pneumoniae. Las fracciones 2 y 3 resultaron tener escasa actividad antibacteriana contra las cepas estudiadas. Los componentes presentes en el aceite esencial,
de forma combinada, ejercen un efecto sinérgico potenciando así la actividad inhibitoria sobre
los microorganismos ensayados.
Agradecimiento: DAES y CDCHT, Universidad de Los Andes, Mérida Venezuela
Bibliografia
1. Guylene, A.; Abaul, J.; Bourgeois, P. 1998. J. Essent. Oil Res. 10, 161-164.
2. Adams R, 1995. Identification of Essential Oil Components by Gas Chromatography/mass spectroscopy. Allured
Publishing.
3. Velasco, J.; Rojas, J.; Salazar, P.; Rodriguez, M.; Diaz, T.; Morales, A.; Rondon, M. 2007. Natural Product
Communications, 2, (1), 85-88
4. CLSI. (2009) Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility
Testing; 19th Informational Supplement. CLSI document M100- S19, Wayne, PA. ¬
302
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3
Componentes volátiles de la especie Mangifera SP
(Anacardiaceae) que crece en Mérida Venezuela
Reyes L., Rojas L., Usubillaga A.
Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de los Andes, Mérida - Venezuela
[email protected]
La Mangifera sp, pertenece a la familia Anacardiaceae. Se trata de un árbol leñoso, que alcanza
un altura de 30 m. El mango es una fruta de la Zona Intertropical de pulpa carnosa y semi-ácida.
De origen asiático, principalmente de la India, comprende numerosas variedades, muchas de ellas
obtenidas por injerto. Por sus riqueza en ácidos (málico, palmítico, p-cumárico y mirístico),
vitamina C y, especialmente, por su alto contenido en vitamina A, el mango constituye una buena
fruta antioxidante, capaz de neutralizar los radicales libres y dotar al organismo de un poder
defensivo en contra de la degradación de las células. La composición de los componentes
volátiles de los frutos ha sido sujeto de numerosos estudios. En el presente trabajo se estudian
los componentes volátiles de la especie Mangifera sp., que crece en Barinas-Venezuela. Estos
fueron aislados por arrastre con vapor de agua, a partir de las hojas frescas, utilizando una
trampa de Clevenger, estos se identificaron por GC-MS, empleando un equipo Hewlett Packard
5973 GC/MS a 70 eV, equipado con un inyector automático, utilizando una columna capilar HP5MS (30 m, 0,25 mm, 0,25μm). Programa: temperatura inicial de 60ºC (1 min) y luego se calentó a
razón de 4 °C/min hasta 260ºC (20 min). Se inyectó una muestra de 1,0μL de una solución al 2% del
aceite esencial en n-heptane con reparto de 100:1. Se utilizó una temperatura de inyección de
200ºC. La identificación de los componentes de los aceites se realizó mediante comparación
computarizada de los espectros obtenidos con los espectros de una Librería Wiley (6ta Edición).
Se determinaron los índices de Kováts analizando conjuntamente las muestras con una mezcla de
n-alcanos. Se obtuvo un rendimiento de 0,02% y se identificaron 19 componentes, el aceite está
formado básicamente por sesquiterpenos, los mayoritarios resultaron ser: alfa-gurjunene
(34,09%), beta-farneseno (25,15%), alfa-humuleno (15,98%) y viridiflorol (10,30%).
Bibliografia
1. Ansari, S H, Ali, Mohammed, Velasco-Negueruela, Arturo, Perez-Alonso, Maria Jose Characterization of Volatile
Constituents of Mango ‘Qalmi’ (Mangifera indica L.) Fruit. Journal of Essential Oil Research: JEOR, Sep/Oct 2004. ¬
303
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3
Composicion quimica del aceite esencial de las hojas y raices
de Ottoa oenanthoides kunth (apiaceae) colectada en
Venezuela
Janne Rojas*, Alexis Buitrago, Luis B. Rojas, Antonio Morales, Shirley Baldovino
Grupo de Investigación en Biomoléculas Orgánicas
Instituto de Investigaciones de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis
Universidad de Los Andes, Venezuela.
[email protected]
Ottoa oenanthoides Kunth pertenece a la familia Apiaceae la cual comprende alrededor de 450
géneros y 3700 especies distribuidas principalmente en Europa y Asia Central. En el Neotrópico,
el género Ottoa se encuentra distribuido desde México hasta Ecuador, reportándose para
Venezuela únicamente la especie O. oenanthoides Kunth, localizada principalmente en Táchira,
Trujillo y Mérida, donde crece en alturas comprendidas entre 2500 y 4400 msnm. En relación a
estudios fitoquímicos no se han encontrado reportes para ninguna de las especies del genero
Ottoa hasta la presente fecha, lo que hace muy interesante su estudio ya que representa un
nuevo aporte a la investigación de los productos naturales. En la presente investigación se
analizaron por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas (CG/EM) los aceites
esenciales de las hojas (0.10%) y raíces (0.66%) de Ottoa oenanthoides Kunth (Apiaceae) colectada
en la carretera via Piñango, Mérida, Venezuela en Junio 2009, los cuales fueron obtenidos por
hidrodestilación. En el análisis por GC/EM se observaron cuatro derivados del naftaleno los cuales
fueron identificados por comparación de los espectros de masas con la base de datos de las
librerías Wiley GC-MS y Nist 05 y por comparación de sus índices de retención con los reportados
en las referencias. El compuesto mayoritario identificado fue 2-metoxi-8-metil-1,4-naftalindiona
(59.9%, hojas y 62.8%, raíces), seguido por 7-metoxi-1-naftol (18.3% hojas y 17.3% raíces), 2naftalenol (18.6% hojas y 15.0% raíces) y 3-metoxi-2-naftalenol (3.1% hojas y 2.1% raíces). De acuerdo
a las referencias consultadas este es el primer reporte sobre la composición química del aceite
esencial de Ottoa oenanthoides Kunth colectada en Mérida - Venezuela.
Palabras Clave: Ottoa oenanthoides, Apiaceae, aceite esencial, 2-metoxi-8-metil-1,4-naftalindiona. ¬
304
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3
Síntesis y evaluación enzimática de nuevos compuestos
inhibidores de la farnesiltransferasa
Anabel Romero López1, Sara Montiel Smith1, Socorro Meza Reyes1,
Jesús Sandoval Ramirez1, Joelle Dubois2
1
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Facultad de Ciencias Químicas
Ciudad Universitaria. Av. San Claudio esq. Blvd. 14 sur. Puebla, Pue.
C. P. 72570. Tel/Fax: (01-222) 229-5500 ext. 7382.
2
Institut de Chimie des Substances Naturelles, CNRS, Av. De la Terrasse SN, 91190 Gif-sur-Yvette, Francia
[email protected]
La farnesiltransferasa (Ftasa) es una una metaloproteína dimérica, que es necesaria para que
algunas proteínas cumplan sus funciones. Por otra parte, se descubrió que la proteína Ras, 1 está
implicada en la transformación maligna de diferentes tipos de cánceres humanos, así como que,
la enzima Ftasa juega un papel determinante en la formación de los oncógenos ras. De ahí el
enorme interés que surgió en identificar o sintetizar inhibidores de esta enzima, 2,3 que pudiesen
emplearse como fármacos contra el cáncer y algunas otras enfermedades parasitarias y virales.
La Ftasa cataliza la introducción de un grupo farnesilo sobre la cisteína de la proteína Ras.
En este trabajo se propuso sintetizar algunas estructuras mimetizadoras del estado de
transición del proceso de farnesilación, tomando como parte central al núcleo del uracilo. Sobre
este núcleo se unieron en diferentes posiciones, un grupo isoprenilico para imitar al farnesilo,
una función diácida para imitar el grupo pirofosfato y/o una cadena peptídica para imitar a la
proteína Ras. Los productos fueron sintetizados con buenos rendimientos, optimizando las
metodologías descritas en la literatura. Una vez purificados y caracterizados los compuestos, por
los métodos espectroscópicos y físicos más usuales, se les determinó su actividad como inhibidores de la Ftasa, para ello se utilizaron diferentes tipos de enzima (de levadura, humana, T. brucei,
etc.). El método empleado para determinar la inhibición de la Ftasa fue mediante la espectroscopia de fluorescencia, a partir de estos datos se determinaron los valores de IC 50. De las estructuras sintetizadas las que muestran resultados importantes como inhibidores son 1 y 2.
Referencias
1. Shields, J. M.; Pruitt, K.; McFall, A.; Shaub, A.; Der, C. J. Cell Biol. 2000, 10, 147 y referencias ahí citadas.
2. Marcia de Figueiredo, R.; Coudray, L.; Dubois, J. Org. Biomol. Chem, 2007, 5, 3299.
3. Kerhervé, J.; Botuha, C.; Dubois, J. Org. Biomol. Chem. 2009, 7, 2214. ¬
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3
Actividad antiviral de Ageratina havanensis y compuestos
químicos mayoritarios de la fracción más activa
del Barrio G.1, Spengler I.2, García Pérez T.2, Álvarez A.L.1, Roque A.1, Calderón J.S.3,
Parra F.4
1
Plaza de la Revolución. Ciudad de La Habana, Cuba.
2
Centro de Estudios de Productos Naturales, Facultad de Química, Universidad de La Habana, Cuba
3
Instituto de Química. Universidad Nacional Autónoma de México. Circuito Exterior s/n.
Ciudad Universitaria. México. 04510. DF México.
4
Instituto Universitario de Biotecnología de Asturias. Universidad de Oviedo
[email protected]
Los productos naturales, y en especial los provenientes de plantas, juegan un papel muy
importante en el descubrimiento de drogas, y constituyen moléculas ideales para las interacciones con blancos biológicos, constituyendo bibliotecas combinatorias con propiedades
farmacológicas específicas. La búsqueda de antivirales resulta aún de mayor interés dada la
carencia actual de fármacos con estas propiedades. Es por ello que en el presente trabajo nos
propusimos realizar un estudio de actividad antiviral de extractos obtenidos de la planta
Ageratina havanensis y aislar, purificar y caracterizar los metabolitos presentes en el extracto más
activo. La acción antiviral de los extractos se determinó a través de la inhibición del efecto
citopático de los virus Herpes simplex y el Vesivirus del conejo (Rav) en células Vero. La mayor
actividad antiviral se encontró en el crudo de acetato de etilo de hojas frente al Rav (IS=5) y a los
herpesvirus estudiados (IS>2). El crudo de acetato de etilo se fraccionó a través de técnicas
cromatográficas y la elucidación estructural de los compuestos aislados y purificados se realizó a
través de técnicas espectroscópicas modernas (RMN mono y bidimensional y de masas), lo cual
permitió aislar cinco flavonoides (5,4'-dihidroxi-7-metoxiflavanona (sakuranetina), 3,5,4'trihidroxi-7-metoxiflavanona (7-metoxiaromadendrina), 4'-O-b-D-glucosil-5,3'-dihidroxi-7metoxiflavanona
(4'-O-b-D-glucosil-7-metoxi-eriodictiol),
4'-O-b-D-glucosil-5-hidroxi-7metoxiflavanona (4'-O-b-D-glucosilsakuranetina) y 5-O-a-D-glucosil-4'-hidroxi-7-metoxiflavanona
(5-O-a-D-glucosilsakuranetina)) y una lactona sesquiterpénica novedosa (2-hidroxi-1,4-dien-8-(cis3'-hidroximetil-2'-metilbutenoxi)-germacran-11(13)-en-6,12-ólido (Ageratinina). ¬
306
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3
Phyllanthus orbicularis kunth: una alternativa para la
obtención de compuestos antivirales
Roque A.1, del Barrio G.1, Álvarez A.L.1, Acosta M.1, Parra F.2
1
Plaza de la Revolución. Ciudad de la Habana, Cuba.
2
Instituto Universitario de Biotecnología de Asturias. Universidad de Oviedo.
[email protected]
Introducción
Phyllanthus orbicularis Kunth (Phyllanthaceae) es una planta endémica cubana, empleada
tradicionalmente para el tratamiento de diversas enfermedades, entre las que se incluyen la
diabetes, ictericia y afecciones renales, entre otras.
Objetivo
Evaluar la citotoxicidad y la actividad antiviral del extracto acuoso de P. orbicularis frente a un
panel de virus que incluye miembros de la familia Herpesviridae, Poliovirus 1 (PV1), Mengovirus,
Adenovirus 7, Virus de la Hepatitis B (VHB) y Vesivirus del conejo.
Metodología
El ensayo de citotoxicidad se realizó empleando la técnica del MTT en diferentes cultivos
celulares (Vero, MDBK, HeLa, HEL, Hep-2 y PLC/PRF/5). La determinación de la actividad antiviral
se realizó a través de la inhibición del efecto citopático (ECP) para cada virus ensayado en la línea
correspondiente, con excepción del virus de la hepatitis B (VHB), para el que se empleó como
criterio de actividad la inhibición de la producción del AgsHB en las células PLC/PRF/5. Se realizaron ensayos de acción virucida y de tiempo de adición con herpesvirus y poliovirus.
Resultados
Los valores de CC50 variaron entre 144.7 ± 3.6μg/mL y 1500.49 ± 37.8μg/mL, en dependencia de
la línea celular. El extracto fue activo frente a todos los herpesvirus ensayados, con índices
selectivos (IS) entre 8.7 y 37.6. De igual forma fue efectivo frente Poliovirus tipo 1 (IS = 9.1), y HBV
(IS = 12.9). No se obtuvo actividad frente a Mengovirus, Adenovirus 7 ni Vesivirus del conejo. Los
resultados alcanzados en los ensayos virucida y de tiempo de adición revelan que la droga
pudiera actuar en etapas tempranas del ciclo replicativo de herpesvirus y poliovirus, aunque en
PV1 esta acción es solo de un log de reducción y se manifiesta con una concentración de
1000μg/mL. Estos resultados sugieren que la actividad antiviral de P. orbicularis puede estar dada
por la acción de más de un compuesto químico en interacción con el ciclo replicativo viral. ¬
307
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Cihuapatli (Montanoa tomentosa) ejerce efectos antidepresivo
y ansiolítico en ratas ovariectomizadas de la cepa wistar
Margarita Saavedra1,2, Aideé Arcos-Martínez1,3, Martha López-Canúl1,3,
Juan Francisco Rodríguez-Landa1,2, Miguel Carro-Juárez3
1
Facultad de QFB
2Instituto de Neuroetología
3Maestría en Neuroetología, Universidad Veracruzana
4Facultad de MVZ, Universidad Autónoma de Tlaxcala
Introducción
En la medicina tradicional de México, la planta conocida como cihuapatli o zoapatle (Montanoa
tomentosa) es empleada como inductor del sangrado menstrual, anticonceptivo, abortivo y
afrodisiaco, además tiene un perfil farmacológico similar a oxitocina. Esta hormona participa en
procesos reproductivos y es propuesta como moduladora del estado emocional, toda vez que
incrementa el umbral al estrés, al miedo y reduce las conductas indicativas de ansiedad y
depresión. Sin embargo, se desconoce si zoapatle posee actividad antidepresiva y ansiolítica.
Objetivo
Determinar la eficacia de M. tomentosa como antidepresivo y ansiolítico en modelos animales
de depresión y ansiedad.
Se emplearon ratas ovariectomizadas de 3 meses de edad y 200-250 g de peso al inicio de los
experimentos. Primero se determinó la dosis efectiva del extracto acuoso de cihuapatli (0, 25, 50
y 100 mg/kg/ml, v.o.) y la latencia a la aparición de sus efectos antidepresivos (0, 15, 30 y 45 min)
en ratas forzadas a nadar. En una segunda serie experimental empleando este mismo modelo se
evaluó la interacción farmacológica de cihuapatli (50 mg/ml/kg) con dosis sub-umbrales de
oxitocina (0.1 UI/kg, i.p.) y del antidepresivo fluoxetina (5.0 mg/kg, i.p.). Finalmente, se determinó
la dosis de M. tomentosa (0, 25, 50 y 100 mg/kg/ml, v.o.) que reduce los indicativos de ansiedad en
los modelos de laberinto de brazos elevados, luz-oscuridad e interacción social. Se utilizó la
prueba de campo abierto para descartar efectos motores en todos los experimentos realizados.
Para el análisis estadístico de datos se empleó ANOVA de 1 vía para grupos independientes y
Student-Newman Keuls como post hoc cuando se obtuvieron valores de p ≤ 0.05.
Resultados
La reducción significativa de inmovilidad en la prueba de nado forzado se observó 30 min
después de la administración de 50 mg/kg/ml de cihuapatli (F 3,32 =16.60, p<0.001; F3,28= 11.2,
p<0.001; respectivamente). Por el contrario, oxitocina y fluoxetina no la modificaron, pero
ejercieron un efecto sinérgico con Montanoa cuando fueron administradas de manera simultánea
(F5,34=6.286, p<0.001). Por otra parte, se detectaron diferencias estadísticas entre los tratamientos (χ2(4)=11.4, p<0.02), el extracto acuoso de cihuapatli (50 mg/kg/ml) y diacepam tuvieron una
mayor permanencia en el compartimento iluminado, mientras que en la prueba de interacción
social sólo se observó un efecto ansiolítico moderado al reducir el número de individuos que
presentaron la conducta pasiva de congelamiento. Por lo que respecta al modelo de laberinto de
brazos elevados los tratamientos ensayados no produjeron cambios en las variables evaluadas.
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Todos los tratamientos ensayados carecieron de efectos en la prueba de campo abierto.
Conclusiones
El extracto acuoso de Montanoa tomentosa a una dosis de 50 mg/kg/ml ejerce efectos antidepresivos en la prueba de nado forzado y reduce los indicativos de ansiedad en los modelos de luzoscuridad e interacción social. ¬
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Actividad anti-Candida spp de Turnera diffusa
Jonathan Pérez Meseguer, Graciela Granados Guzmán,
Noemí Waksman de Torres, Ricardo Salazar Aranda
Departamento de Química Analítica, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Nuevo León.
Madero y Aguirre Pequeño, Col. Mitras Centro. Monterrey, N. L., México. CP. 64460
[email protected]
Antecedentes
Damiana (Turnera diffusa) un arbusto que crece al sur de los Estados Unidos, México y países
centroamericanos, es usada para tratar el resfriado, dispepsia, desbalance hormonal, depresión,
desórdenes nerviosos y aperitivo. La planta tiene una alto contenido en flavonoides y un buen
poder antioxidante. En base a la relación de la actividad antioxidante y antimicrobiana de los
flavonoides, decidimos evaluar la actividad antimicrobiana del extracto y fracciones así como uno
de los flavonoides aislados de la misma.
Métodos
T. diffusa se colectó en Cadereyta, N. L., México en Junio del 2008. La separación y aislamiento
se realizó siguiendo la metodología descrita previamente (Pérez y cols., 2010). La actividad
antimicrobiana se realizó siguiendo la metodología del NCCLS en los protocolos M100-S12 y M27A2. Los aislados clínicos utilizados fueron: P. aeruginosa, K. pneumoniae, Acinetobacter baumannii,
Enterococcus faecalis, S. aureus (ATCC 12598 y resistente a oxacillina); Candida albicans (HU 53,
498, 501), C. krusei (HU168), C. tropicalis (HU166), C. parapsilosis (HU96), C. glabrata (HU 84, 503,
609, 653, 806, 1058). Se determinaron las Concentraciones Mínimas Inhibitorias (MICs) de cada
extracto, compuesto y/o fracciones obtenidos.
Resultados y discusión
En contraste con lo esperado, el extracto metanólico de la parte aérea de T. diffusa mostró
solo actividad sobre Candida spp (MICs 250 a 31.2μg/mL), los aislados más sensibles fueron los de
C. glabrata (MICs 16 a 8μg/mL), sin embargo no mostró actividad significativa contra ninguna de
las bacterias utilizadas (MICs>1000μg/mL). El extracto contenía clorofilas, las que se eliminaron
por extracción en fase sólida de fase inversa usando metanol al 50%, 70% y 100%. La fracción activa
resultó ser la obtenida con metanol al 50% (MICs 125 a 31.2μg/mL), siendo los aislados de C.
glabrata los más sensibles (MICs 4 a 2μg/mL). Esta fracción fue sometida a cromatografía de sílica
gel a vacio y eluida con CH2Cl2, AcOEt, ACOEt:MeOH (1:1) y MeOH. La fracción de acetato de etilo
conservó la actividad. A partir de esta fracción activa se obtuvo un C-glucósido de luteolina, el
cual solamente mostró actividad sobre los aislados de C. glabrata (MICs 32 a 8μg/mL). Estos
hallazgos sugieren fuertemente la actividad anti-C. glabrata de T. diffusa. Sin embargo el extracto
metanólico resultó ser más activo que el compuesto lo cual habla de la presencia de otros compuestos con actividad o bien de sinergismo. Por otro lado se evaluó la actividad de algunos
flavonoides comerciales. Miricetina mostró una fuerte actividad contra todas las especies de
Candida (MICs 62.5 a<2μg/mL), tal como ha sido reportado previamente, mientras que luteolina
tuvo actividad moderada sobre un aislado de C. albicans (501) y de C. parapsilosis (MICs 125μg/mL)
pero fue muy activo contra los seis aislados de C. glabrata (MICs 16 a 4μg/mL). Sin embargo,
ninguno de los flavonoides evaluados mostró actividad contra las bacterias. ¬
310
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3
Evaluación de la Actividad Inhibitoria de la Acetilcolinesterasa
y la citotoxiciada de Extractos de Plantas del Noreste de
México
Francisco R. Martínez Estrada, Yael C. de la Torre Rodríguez,
Noemí Waksman de Torres, Ricardo Salazar Aranda
Departamento de Química Analítica, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Nuevo León.
Madero y Aguirre Pequeño, Col. Mitras Centro. Monterrey, N. L., México. CP. 64460
[email protected]
Antecedentes
El Alzheimer es una afección cerebral progresiva y degenerativa que afecta la memoria, el
pensamiento y la conducta. En 1976, Davis y Maloney descubrieron la falta de acetilcolina (ACh)
en pacientes con Alzheimer, originando la hipótesis hipocolinérgica para el tratamiento de esta
enfermedad. El enfoque actual para el tratamiento del Alzheimer es el uso de agentes que
incrementen la disponibilidad intrínseca de ACh por inhibición de la actividad de acetilcolinesterasa (Achasa). Los inhibidores de AChasa pueden encontrarse en la naturaleza tanto en animales
(ponzoñosos) como en plantas utilizadas como insecticidas o pesticidas, ambos actúan sobre el
SNC de insectos produciendo su muerte. Sin embargo, la mayoría de los inhibidores de la AChasa
actúan de la misma forma en plantas u animales, por lo que es conveniente definir la toxicidad. El
propósito de este trabajo fue evaluar la actividad inhibitoria de acetilcolinesterasa y la toxicidad
celular de un grupo de plantas que crecen de forma silvestre en el Noreste de México.
Métodos
Las plantas utilizadas como insecticidas: Ambrosia artemisialfolia, Melia azedarach, Zanthoxylum
fagara, Cymbopogon citratus, Ricinus communis, Lantana camara, Parthenium hysterophorus,
Bidens pilosa, Xanthosoma robustum, Ruta chalepensis, Thymus vulgaris y Selaginella lepidophylla
fueron colectadas en el estado de Nuevo León en el 2007. La parte aérea molida y seca (100 g) se
extrajo con éter etílico. El residuo fue extraído con metanol. Todos los extractos metanólicos se
sometieron al ensayo de inhibición de la acetilcolinesterasa de acuerdo al procedimiento de
Ellman, como control positivo de inhibición se utilizó Galantamina. La citotoxicidad se evaluó por
el ensayo de reducción del MTT con células HeLa de acuerdo al método de Mosman, doxorubicina se utilizó como control positivo.
Resultados
Galantamina produjo una CI50 de 0.276μg/mL. Los extractos con mejor actividad inhibitoria
fueron aquellos con CI50 menores a 300μg/mL: L. camara (204μg/mL), Z. fagara (110μg/mL), P.
hysterophorus (284μg/mL) y B. pilosa (282μg/mL). El resto de los extractos presentaron
CI50>300μg/mL, la cual fue la máxima concentración evaluada en este trabajo. Previamente se ha
reportado la obtención de compuestos y aceites de T. vulgaris con actividad inhibitoria de
Achasa. Así mismo se ha reportado que una especie relacionada con Z. fagara, Z. coco produce el
80% de inhibición con 1 mg/mL de extracto, por lo que la actividad de Z. fagara evaluada en este
trabajo es mucho mayor. Ambos reportes confirman nuestros resultados. Para el resto de los
extractos que presentaron una fuerte actividad inhibitoria como son L. camara, P. hysterophorus y
B. pilosa, no se encontraron publicaciones que los describan con ésta actividad biológica por lo
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que en este trabajo es la primera vez que se reporta la actividad inhibitoria de Achasa de estas
plantas. En los ensayos de citotoxicidad los extractos de L. camara, Z. fagara, P. hysterophorus y B.
pilosa presentaron CI50 de 243, 119, 12 y 124μg/mL, respectivamente. ¬
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3
Free-radical scavenging activity, determination of phenolic
compounds and HPLC-UV/DAD/ESI-MS profile of
Campomanesia adamantium leaves
Aislan C.R.F. Pascoal1, Maria Elida Alves Stefanello2, Marcos José Salvador1
1
2
DQ/UFPR
Numerous diseases are induced by free radicals via lipid peroxidation, protein peroxidation and
DNA damage. It has been known that a variety of plant extracts have antioxidant activities to
scavenge free radicals. The Campomanesia adamantium (Myrtaceae) species is a small tree with
edible fruit, commonly known as guabiroba that is used in popular medicine as depurative, antidiarrhoeic, cleanser, anti-rheumatic and to decrease the blood cholesterol. The anti-radical
activities of various antioxidants were determined using the free radical, 2,2-Diphenyl-1picrylhydrazyl (DPPH) and the total phenol content in the samples was estimated by Folin’s
method. In an initial evaluation the ethanolic extract e as phases of ethyl acetate and butanol
have shown levels of phenolic compounds between 15- 74 mgGAE/g and IC50 in the range of 7.77
and 13.35μg/mL in the DPPH. Initial HPLC-UV/DAD and ESI-MS analysis revealed that the antioxidant extracts investigated appears to contain flavonoids as major constituents. Findings from
this study demonstrated that the leaves ethanolic extract of this plant possess antioxidant/freeradical scavenging activity, which seems to be correlated to its total phenolic content.
Investigation is under way to isolate and characterizated the compounds in the extract that are
responsible for this antioxidant activity.
Financial support: CNPq, FAPESP and FAEPEX-UNICAMP ¬
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3
Evaluation of estrogenic and antimutagenic activity of
nemorosone
Camargo M.S.1, Oliveira A.P.S.1, Resende F.A.1, Villegas W.2, Cuesta-Rubio O.3,
Varanda E.A.1
1
Department of Biological Sciences, Faculty of Pharmaceutical Sciences of Araraquara, UNESP, Brazil
2
Institute of Chemistry, Estadual Paulist University, UNESP, Araraquara- SP, Brazil.
3
Instituto de Farmacia y Alimentos, Universidad de La Habana, Cuba
Nemorosone is the major constituent of Clusia rosea floral resins and brown Cuban propolis.
This compound showed cytotoxic activity in vitro against a panel of tumor cell lines including
wildtype and chemotherapy-refractory and absence of citotoxicity to non-tumoral cells. There
has been a growing concern about environmental chemicals with the ability to mimic the action
of natural hormones interfering with the endocrine system. The possible health risks associated
with the consumption of plant estrogens underline the need to characterize the estrogenic
potency of vegetables and seeds which are commonly present in the diet or used as medicinal
plants. In adition it is known that prevention against cancer development by chemical substances
that act as antimutagenic agents and present the capacity to interact with mutagenic compounds or their metabolites and reduce their effects, is one possible alternative for preventing
cancer. Considering the limited number of pharmacological studies regarding the nemorosone,
the aim of this study was evaluate the estrogenic and antimutagenic effects of this compound.
The antimutagenic effect was evaluated using mutagens with direct action (mitomycin C (MMC)
and 4-nitro-o-phenylenediamine [NPD]). This study was based on the Salmonella typhimurium
reversion assay using TA98 and TA102 strains. According to the methodology developed by
Maron and Ames, five different doses of the nemorosone were mixed with bacterial culture and
the mutagenic agent (MMC or NPD) and poured onto a plate with minimum glucose agar. The
plates were incubated and the number of revertant colonies per plate was counted. The percentage of mutagenicity inhibition was calculated and a non-antimutagenic effect was considered
when a value lower than 25% was obtained, a moderate effect when a value between 25% and 40%
was obtained and strong antimutagenicity at values greater than 40%. The nemorosone showed
value inhibition of 53% to TA102 strain in presence of MMC on the highest concentration tested
(0.03mg/plate). The recombinant yeast assay (RYA) was used to evaluate the estrogenic effect of
nemorosone. This method based on ligand detection for different vertebrate receptors in yeast,
using fluorogenic substrates for the widely used reporter β-galactosidase gene. For fluorogenic
determination, the culture was adjusted to an optical density of 0.1 and split in a 96-well plate
mixed with different doses of the nemorosone. Fluorescence was recorded for 20 min; βgalactosidase activity values were calculated as rates of the increment of arbitrary fluorescence
units with time, using standard linear regression methods. Estrogenic effect was not observed on
the different doses (0.002 - 40μg/well) tested by RYA. These findings highlight that further
studies about action mechanisms of nemorosone must be conducted to evaluate the possible
use of this compound on anticancer therapy.
Financial support: FAPESP ¬
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3
Estrogenic properties of Leiothrix flavescens (Eriocaulaceae)
assessed by Recombinant Yeast Assay (RYA test)
Ana Paula Siqueira de Oliveira1, Mariana Santoro de Camargo1,
Flávia Aparecida Resende1, Lourdes Campaner dos Santos2, Wagner Vilegas2,
Eliana Aparecida Varanda1*
1
Department of Biological Sciences, Faculty of Pharmaceutical Sciences of Araraquara,
Estadual Paulist University, UNESP. Araraquara, SP, Brazil
2
Institute of Chemistry. Organic Chemistry Department, Estadual Paulist University, UNESP. Araraquara, SP, Brazil.
*
[email protected]
The genus Leiothrixt belongs to the Eriocaulaceae family and has been reported that its capitulae and scapes contain flavones (luteolin and derivatives). The possible benefit of some bioactive
flavones prompted us to screen it for estrogenic activity. Leiothrix flavescens, who has the common names of “bolinha”, “botão-íris” and “sempre-viva-do-campo”, presents the widest geographical distribution of the genus, occurring in sandy soils of montane grasslands of Peru,
Venezuela, Guyana and Brazil. The aim of this study was to characterize the methanol and dichloromethane extracts, and three enriched fractions of methanol extract (FX: fraction of xanthones;
FFG: fraction of flavonoid glycosides; FFA: fraction of flavonoids aglycones) and the isolated
compounds (L.f.1: luteolin; L.f.2: 6-metoxiluteolin; L.f.3: 1,3-o-diferuloilglicerol) derived from L.
flavescens towards potential estrogenic activity, by using Recombinant Yeast Assay (RYA). In this
test was used an engineered yeast strain in which the transcription of a reporter gene depends
upon the presence in the medium of compounds capable to bind to the human estrogen receptor (ER). This is a simplified version of the mechanism by which natural estrogens operate in
vertebrates; the fundamental similarity of all eukaryotes ensures that it also works in yeast in a
similar way. According the results, the estrogenicity evaluation of L. flavescens shows that the
enriched fractions, FFG and FFA, and the isolated compounds, L.f.1 and L.f.2, were considered
positive. Considering 100% as the potential of 17- -estradiol, used as a positive control, the FFG,
FFA, L.f.1 and L.f.2 presented, respectively, the estrogenic potential of 11%, 39%, 39% and 13%.
These results of the estrogenic activity show that the flavones of L. flavescens may thus be useful
as a selective estrogen receptor modulator (SERM), providing a new opportunity to build on
natural product diversity to develop hormonal agents.
Financial support: FAPESP, Capes. ¬
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3
Identification of antioxidant and antimicrobial compounds of
Lippia species by bioautography
Rodrigo Luiz Fabri, Mauro Silva Nogueira, Jussara dos Reis Moreira,
Maria Lúcia Morcef Bouzada, Elita Scio*
Federal University of Juiz de Fora, Department of Biochemistry - ICB.
Juiz de Fora - MG - Brazil, 36036 900
[email protected]
The methanolic extracts of the leaves of five Lippia species (L. pseudo-thea, L. hermannioides, L.
alba, L. rubella and L. sidoides), Verbenaceae, were tested for their antimicrobial and antioxidant
activity. The extracts showed MIC varying from 78 to 5000μg/ml for antibacterial activity against
at least two species of bacteria, although none was active against the gram-negative Escherichia
coli. Antifungal activity was found only for L. pseudo-thea (MIC of 625μg/ml for C. albicans) and L.
sidoides (MIC of 625μg/ml for both C. albicans and C. neoformans). Beside results being recorded
in terms of MIC ( g/ml), total activity and percent activity (%) and also microbial susceptible index
(MSI) were calculated. Total activity values revealed that L. hermanioides, L. sidoides and L.
pseudo-thea extracts had the highest antimicrobial activity against B. cereus (total activity = 1282,
1026 and 962 ml/g, respectively).This result reinforces the importance of Lippia extracts against
B. cereus. MSI values were useful in evaluating the susceptibility of the different strains of microbes towards the plant extracts investigated. B. cereus and P. aeruginosa were the test organisms
found to be the most susceptible to the samples investigated (100% susceptibility). On the other
hand, E. coli was resistant to all strains tested. Among the samples evaluated, the extract of L.
sidoides was the most efficient (78% activity) against the different microorganisms used. The
bioautography showed that flavonoids and coumarins are responsible for the antioxidant activity
of the extracts and that the antimicrobial properties are due to flavonoids and terpenoids. To our
knowledge, it is the first report on biological and chemical constituents of L. pseudo-thea, L.
hermannioides and L. rubella.
Financial support: FAPEMIG and UFJF. ¬
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3
Antinociceptive activity of methanol extracts of Syzygium
malaccense
Paula Maria Quaglio Bellozi, Isabel de Assis Vieira Lima, Josiane Mello da Silva,
Juliana de Carvalho Costa, Renata de Freitas Mendes,
Danielle Maria de Oliveira Aragão, Elita Scio*
Federal University of Juiz de Fora, Department of Biochemistry - ICB.
Juiz de Fora - MG - Brazil, 36036 900
*[email protected]
The species Syzygium malaccense belongs to the family Myrtaceae and, in Brazil, is popularly
known as jambo. The leaves are popular used as diuretic, to treat skin infections, gastrointestinal
and respiratory diseases, and inflammatory processes. To increase our knowledge about this
species, this study aimed to evaluate the antinociceptive activity of methanol extract of its
leaves. The test was conducted with male Swiss mice weighing between 25 and 35 g divided into
3 groups (n = 6): group I, treated with vehicle (saline + DMSO 2%), group II, treated with indomethacin (10 mg/kg) and group III, treated with extract (300 mg/kg). The antinociceptive activity
was evaluated by the writhing induced by acetic acid. Treatments were made orally and after one
hour a solution of acetic acid 0.6% (v/v) in saline was administered intraperitoneally. The total
number of writhing was observed for 30 minutes to quantify the intensity of nociception. The
results were expressed as the mean of the number of contortions, and analyzed by one-way
ANOVA and Tukey test (P<0.05).
Mean of contortions were 115 ± 14 in group I, 45 ± 20 in group II and 60 ± 21 in group III. The
number of contortions in groups II and III were not significantly different and they were significantly different from the vehicle (group I), indicating a considerable antinociceptive activity of
the extract. Therefore more detailed studies are required on the species to identify the bioactive
substances.
Financial support: FAPEMIG and UFJF.
¬
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3
La biotecnologia como herramienta para la conservación de
especies endémicas en la provincia de Buenos Aires, Argentina
W. Abedini, M. Adema, M.A. Basiglio Cordal, V. Briones, S. Sharry, B. Villarreal
Centro Experimental de Propagación Vegetativa (CeProVe).Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales.
UNLP. CICPBA. Diagonal 113 Nº 469. (1900) La Plata. Buenos Aires. Argentina
[email protected]
Phytolacca tetrámera Hauman (“Ombusillo”), es una especie dioica de hasta 1,5 mts, de flores
unisexuales, hojas oblanceoladas, de 20 a 35 cm. de longitud y con bayas deprimidas. Es un
arbusto geófito que habita suelos formados por el depósito de valvas de moluscos, rodados
calcáreos y matriz arenosa, relativamente húmedos y cercanos a cuerpos de agua. Pertenece a la
Familia Phytolaccaceae y enfrenta un riesgo extremadamente alto de extinción en el estado
silvestre en un futuro inmediato por tal motivo esta incluida en la categoría CR (en peligro crítico)
de especies amenazadas de la Provincia de Buenos Aires. Todas las especies de esta familia son
ampliamente usadas en medicina folklórica para enfermedades como edema, reumatismo y
dermatitis. Phytolacca tetrámera Hauman es endémica del NE de Bs. As, desde La Plata hasta la
Ensenada de Samborombón y se distribuye entre los partidos de Magdalena, Punta Indio y
alrededores, formando parte fundamental como endemismo de la flora característica del Parque
Costero Del Sur declarada por la UNESCO Reserva Mundial de la Biosfera, desde el año 1984. Esta
especie es fuente de principios activos fungicidas y, probablemente también de compuestos
antivirales, antitumorales y bactericidas. Ha sido reportada en el extracto metanólico de sus
bayas la presencia de 3 saponinas monodesmosídicas (fitolacósidos B, E Y F), mostrando las 2
primeras actividad antifúngica frente a hongos oportunistas patógenos para el hombre. En 2004,
Escalante, A, comprobó que el Fitolacósido B fue la saponina antifúngica más activa, originando
alteraciones drásticas, tanto en la pared celular fúngica como en la membrana, produciendo
inicialmente la inhibición del crecimiento del hongo y su posterior letalidad. Debido a que es una
especie endémica con importantes propiedades medicinales y a que actualmente enfrenta la
degradación de su hábitat, es que comenzamos a trabajar en las estrategias de conservación in
situ y ex situ, su caracterización y posterior domesticación. Se inició el diseño de un banco clonal
de plantas madres, tanto para su conservación ex situ, como para obtener material clasificado y
caracterizado para establecer in vitro, contando como antecedente con el Banco de Germoplasma
de Especies Forestales Nativas de la Provincia de Buenos Aires que funciona desde el año 2004 en el
Centro Experimental de Propagación Vegetativa. Este banco se rige por directivas emanadas de
organismos internacionales tales como la Organización para la Agricultura y la Alimentación
(FAO) y el Instituto Internacional de Recursos Genéticos Vegetales (IPGRI). ¬
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3
Composición química del aceite esencial de Verbesina
negrensis Steyerm. de los andes venezolanos
Bladimiro Silva1, Flor D. Mora1, Luis B. Rojas2, Rosslyn Ramírez1, Yesenia Rojas1,
Viviana González1, Juan Carmona A.1
1
2
La familia Asteraceae es rica en aceites esenciales, el género Verbesina (tribu Heliantheae)
comprende alrededor de ciento cincuenta especies, la mayoría de las cuales están distribuidas en
américa tropical. El estudio fitoquímico del género, reporta la presencia de una gran variedad de
compuestos: derivados acetilénicos, terpenos, cinamatos sesquiterpénicos, derivados de elemanolidos . Dos agentes hipotensores: Caracasanamida y Caracasandiamida ha sido aislados de V.
caracasana. El estudio del aceite esencial de V. turbacensis es el único reportado de este género y
su componente mayoritario es el D-germacreno (56.2%). El presente trabajo reporta la
composición química del aceite esencial de Verbesina negrensis colectado en Venezuela. El aceite
esencial de las hojas frescas de V. negrensis fue obtenido por hidrodestilación usando un aparato
tipo Clevenger. La planta fue colectada en marzo 2009 en Pueblo Hondo, estado Táchira,
Venezuela, produciendo un 0.4% del aceite. Los constituyentes químicos fueron identificados por
análisis GC-MS. Veintisiete compuestos (los cuales representan 97.3% de la muestra) fueron
identificados. Los constituyentes mayoritarios fueron α-pineno (43.05%), α-humuleno (13.8%), βcadineno (8.1%), limoneno (4.6%), y biciclogermacreno (4.2%). ¬
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Deshabituación tabáquica
MSc. Hilda Esther Silva Darcourt
Facultad de Ciencias Médicas: Dr. Salvador Allende. Ciudad Habana. Cuba
[email protected]
Introduccion
El consumo del tabaco en la juventud aunque tratado en disímiles ocasiones constituye un
tema de vital importancia puesto que el problema sigue latente y lo importante no es cuantas
veces haya sido tratado, sino desde la óptica que se trate. Como docente de una institución no
podemos estar ajenos a esta problemática sin tratar de aportar a soluciones para disminuir este
nocivo hábito.
En las últimas décadas, numerosas investigaciones han demostrado científicamente la
asociación entre tabaquismo y salud en sentido negativo. La Deshabituación Tabáquica no es una
tarea fácil de lograr, pues debemos reconocer que se trata de un hábito que demanda un
esfuerzo personal importante para ser superado que requiere del esfuerzo simultáneo del
fumador. Las investigaciones realizadas acerca del cese del hábito de fumar han mostrado la
importancia de que los médicos y otros profesionales de la salud ayuden a los pacientes a dejar
de fumar.
Cuando los esfuerzos personales no son suficientes existen técnicas intervencionistas para
propiciar la deshabituación, las cuales se han aplicado en diferentes centros de salud, con resultados satisfactorios. La terapia acupuntural es un método relativamente rápido, sencillo y requiere
de esfuerzo mínimo, incluyendo de alguna manera en las funciones de los distintos sistemas
orgánicos alterados por determinadas afecciones1.
En nuestra investigación aplicaremos simultáneamente la dinámica grupal y la Auriculoterapia.
La Auriculoterapia
Microsistema más utilizado en la terapia acupuntural, referido a la zona de la oreja. Aquí existe
un conjunto de puntos que representan a todo el organismo, es una nueva “arma para actuar
sobre numerosas afecciones como: el estrés, trastornos de alimentación, obesidad, adicciones,
alcoholismo, tabaquismo etc,1
Ventajas2:
- Fácil de aprender por los Hologramas (esquema de la representación del cuerpo en la zona
del microsistema).
- No requieren exposición de grandes zonas.
- Positivos resultados inmediatos.
- Posibilidad de auto estimulación.
- El paciente no necesita acudir a diario al tratamiento (pues la semilla se deja de 10 a 15 días y
posteriormente se cambia para pabellón de la otra oreja, repitiendo el cambio cuantas veces sea
necesario).
- Pocos efectos secundarios, salvo lo que puedan producirse localmente por las semillas o el
esparadrapo:
a) Con respecto a las semillas se pueden utilizar semillas redondeadas y lisas ejemplos mostaza en lugar de caldo santo.
b) Esparadrapo hipoalérgico
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- Es económico.
Problema a investigar
Cómo contribuye la combinación de la dinámica grupal y la auriculoterapia a la erradicación del
hábito de fumar en las personas adictas al tabaco que estudian y laboran en las instituciones
estudiantiles y de rehabilitación analizadas?
Hipótesis
La combinación de la dinámica grupal y auriculoterapia contribuyen a erradicar el hábito de
fumar en los estudiantes y trabajadores adictos de las instituciones analizadas.
•Impacto científico:
A partir de los resultados obtenidos se podrá aplicar a cada una de las instituciones del sistema
nacional de salud este tipo de terapias a las personas (estudiantes y trabajadores) adictas al mal
hábito de fumar. Además se publicarán los resultados de esta investigación garantizando la
socialización de los beneficios que aporta.
•Impacto Económico.
A medidas que se eliminan los adictos al cigarros el estado puede revertir los recurso invertidos
en cuidar la salud de otras personas aquejada por otras patologías. Y disminuirá el gasto en la
atención a estos pacientes.
•Impacto Social
Representa un ahorro para la economía familiar del consumidor de $2520.00 debido a que cada
fumador, consume una caja de cigarro diaria como promedio, que representa a la semana $49.00.
Los fumadores constituyen un grupo de riesgo que además, de los riegos a lo que se exponen,
ponen en peligro los no fumadores que según estadísticas causan 3000 muertes por cáncer del
pulmón año y enfermedades cardiovasculares. Los niños que se exponen al humo del tabaco son
más propensos a contraer enfermedades (asma, infección de oído), que los niños que se desarrollan un ambiente saludable.
Objetivo General
Demostrar la influencia de la combinación de la dinámica grupal y la auriculoterapia como
Técnicas Terapéuticas en la Deshabituación Tabáquica.
Objetivos Específicos
•Identificar las características de los estudiantes y trabajadores adictos al tabaco de las instituciones analizadas para tener en cuenta los criterios de inclusión en función de las terapias que
serán aplicadas
•Aplicar las técnicas de dinámica grupal y la auriculoterapia, por separado y de manera combinada en el grupo de fumadores seleccionado para su comparación.
•Evaluar los efectos de las técnicas aplicadas en la erradicación del hábito de fumar.
Metodología a utilizar para enfrentar el problema
Clasificación de la investigación:
Xx x
Investigación Desarrollo
Innovación
Esta es una investigación experimental con el fin de modificar modos y estilos de vida en
personas adictas al consumo del tabaco. Se analizarán los resultados en dos grupos controles, el
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primero de estos estará constituidos por pacientes con características específicas tratados con la
técnica de la auriculoterapia. El segundo grupo control estará formado por pacientes con las
mismas características del grupo anterior pero se le aplicarán las técnicas de dinámica grupal. Se
seleccionará el grupo muestral con similitud a las características de los grupos controles y se le
aplicará la técnica de la dinámica grupal conjuntamente con la auriculoterapia. Se compararán los
resultados entre todos los grupos para determinar la efectividad de nuestra propuesta.
Las técnicas de dinámica grupal que se utilizarán
•Población
Estudiantes de la Facultad de Ciencias Médicas “Dr. Salvador Allende” , la Facultad de
Tecnología de la Salud y trabajadores del Centro Médico Psicopedagógico Impedido # 7 del
Municipio Cerro, adictos al tabaco.
•Muestra
Los estudiantes albergados de la Facultad de Ciencias Médicas” Dr. Salvador Allende”, estudiantes de primer año de la Facultad de Tecnología de la Salud, y trabajadores de servicios del
Centro Médico Psicopedagógico Impedido # 7 del Municipio Cerro, adictos al tabaco.
Los criterios de inclusión son:
Los adictos al tabaco tengan menos de 10 años de adicción y se encuentren en un rango de
edad entre 18 y 35 años. Se debe tener en cuenta la voluntad de los adictos a ser tratados con
estas terapias.
Criterios de exclusión:
Los adictos que presenten enfermedades mentales que les imposibilite reaccionar normalmente ante las técnicas de la dinámica grupal
La muestra seleccionada fueron los estudiantes y trabajadores adictos al tabaco y se escogió al
azar, teniendo en cuenta las mismas características del grupo control. Para evitar errores se
homogeneizará la muestra teniendo en cuenta el tiempo de adicción y la edad.
Métodos teóricos: Análisis y síntesis. Se realizará un análisis exhaustivo donde nos documentaremos de la bibliografía seleccionada y sintetizaremos lo más significativo para la investigación.
Métodos Empíricos: Observación, Experimento y Encuesta
A partir de la guía de observación se percibirá la conducta del paciente a lo largo del tratamiento para poder monitorear los resultados parciales de la investigación.
La encuesta se aplicará para darle cumplimiento al objetivo específico # 1 y poder seleccionar
correctamente la muestra. El experimento consistirá en aplicar las técnicas descritas sobre el
grupo muestral con el fin de obtener los resultados esperados y comprobar la efectividad de
dichas técnicas así como la ventaja de su combinación con respecto a la utilización de técnicas
aisladas. Estos resultados se compararán con los obtenidos de los grupos controles analizando la
existencia de diferencias significativas entre ellos.
Técnicas y procedimientos
•Auriculoterapia
Activar los puntos situados en el pabellón auricular y posteriormente se procede a activar los
de la otra oreja, al cabo de los 10 ó 15 días. (se realizó dinámicas grupales).
Las Técnicas de Dinámica Grupal que se aplicarán serán: Charlas Educativas, Discusión Grupal,
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técnicas dramáticas.
•Guía para la dinámica grupal:
- ¿Por qué se fuma?
- ¿Qué impide dejar de fumar?
- ¿La acupuntura puede ayudar ha dejar de fumar?
- ¿Cómo?
•Contenido de la dinámica grupal inicial
- Ventajas para la salud de individuo.
No es ningún secreto que el tabaquismo representa numerosos riesgos para la salud. La
siguiente es una breve lista de algunos efectos dañinos asociados con el tabaquismo.
1. Tan solo un cigarrillo puede aumentar la frecuencia cardiaca veinte y veinticinco latidos por
minuto y puede aumentar significativamente la tensión arterial.
2. Los cigarrillos contienen cuatro mil venenos tóxicos conocidos.
3. Fumar una cajetilla de cigarro al día ocasiona depleción de una cantidad de vitamina C mayor
que la cantidad que la mayoría de la gente ingiere en un día.
4. Los cigarros aumentan los niveles de monóxidos de carbono en la sangre, el cual compite
con el oxigeno a un nivel tal, que le lleva al sistema circulatorio seis horas volver a la normalidad
después de haber fumado tan solo un cigarrillo.
5. El tabaquismo es tan importante que se requiere tres meses para revertir el daño que
ocasiona al sistema inmune.
El alquitrán que se forma en la combustión de los componentes orgánicos es la principal
sustancia química cancerígena que contiene el humo del tabaco. La nicotina, un alcaloide que se
encuentra en el tabaco, es altamente adicto y es altamente toxico si se ingiere directamente. Aún
cuando en la fuma solamente se absorbe una pequeña cantidad de nicotina, esto de cualquier
manera puede ocasionar liberación de adrenalina que aumenta de manera importante. La nicotina actúa como promotor, facilitando la diseminación a todo el cuerpo de los cánceres de todos
tipos.
¿Qué se gana con dejar de fumar?
•El riesgo de contraer cáncer de pulmón disminuye paulatinamente.
•Los esputos y la tos disminuyen progresivamente. Los bronquios y pulmones se limpiarán, lo
que representa una mejor actividad respiratoria.
•El cuerpo se hará más resistente y tendrá menos resfriados (catarros) y congestión nasal.
•Al recibir más oxigeno los órganos aumentan su energía y se agota menos el individuo.
•Mejora su funcionamiento sexual.
•Aumenta su productividad y nivel de actividad.
•El dinero para cigarros podrá invertirlo en cosas útiles para usted y su familia.
•Dejará de ser un elemento contaminante del ambiente y evitará a los seres queridos y amigos
el riesgo de contraer enfermedades que causa el humo del cigarro.
•Se dejará de ser un modelo negativo del cual niños y adolescentes aprenden el hábito de
fumar.
•Se fortalece su voluntad, mejora su apariencia física, se evita el mal aliento, favorece el
cuidado de los dientes, evita las manchas amarrillas de los dedos y dientes y evita el desarrollo de
arrugas prematuras.
•Si es mujer y abandona el hábito durante los primeros meses del embarazo, el niño tendrá las
mismas posibilidades de nacer con el peso normal que los hijos de madres no fumadoras (.6)
323
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Fumar no solo es un hábito, también es una drogadicción, ya que el hecho de fumar cumple
con todos los criterios que definen el uso de una sustancia como tal:
· Existencia de tolerancia.
· Dependencia.
· Síndrome de abstinencia en ausencia de la misma.
· Comportamiento compulsivo.
El máximo responsable de la dependencia es la nicotina, sustancia con gran poder de adicción
similar al de otras drogas como la heroína o cocaína. El fumar sigue siendo un acto social, se hace
en grupos, en ciertas reuniones de ocio, tras cenas con los amigos y sobre todo sigue siendo un
hábito que distingue a ciertos grupos de adolescentes dándoles un valor social de rebeldía y de
madurez malentendidos.
Se emplearán métodos estadísticos como el análisis porcentual y para la correlación de datos
las técnicas adecuadas utilizando el paquete estadístico SPSS versión 11.0.
Variables Fundamentales
Deshabituación tabáquica (dependiente): Pérdida de la adicción al consumo del tabaco.
Efectividad de las terapias (independientes): La proporción en la que los adictos pierdan el
hábito de fumar por medio de las terapias aplicadas sobre ellos.
Variable
Tipo
Operacionalización
Escala
Descripción
Deshabituación
tabáquica
Cualitativa ordinal
dicotómica
Si
No
Según la pérdida o no del
hábito de fumar para cada
elemento de la muestra
Efectividad de las
terapias
Cuantitativa discreta
85- 100% Efectiva
60- 84, 9% Poco
Efectiva
Menos 59, 9% no
efectiva
Según el porciento que
pierda el hábito de fumar
con respecto al total de la
muestra
Encuesta
•Principales indicadores de medición de las respuestas para la caracterización de la población:
sexo, edad, enfermedades (relacionadas con el hábito de fumar), tiempo que lleva fumando.
Indicadores
Tipo
Operacionalización
Escala
Descripción
Sexo
Cualitativa nominal
Masculino
Femenino
Según sexo biológico
de pertenencia
Enfermedad
Cualitativa nominal
Según el tipo o tipos
de enfermedad(es)
que tenga el sujeto
Edad
Cuantitativas discreta
Tiempo de adicción
Cuantitativas
continúas
Respiratorias
Cardiovasculares
Renales
Varias
Menos de 14
14 - 25
26 - 35
más de 36
Menos de 10 años
11 o más años
Según el tiempo que
lleva fumando
Cantidad de cigarrillos
Cuantitativas
continúas
Menos de 20 por día
21 o más por día
Según el hábito de
fumar
Según etapa del
desarrollo
324
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Resultados y cronograma de actividades principales
Actividades
principales
Fechas de inicio
Fecha de Terminación
Aplicar la encuesta
Noviembre 2008
Enero 2009
Seleccionar
Los grupos controles
Febrero 2009
Marzo 2009
Selección del grupo
muestral
Abril 2009
Abril 2009
Aplicar las terapias
Febrero 2009
Mayo 2009
Procesamiento de los
resultados
Mayo 2009
Julio 2009
Confección del Informe final
Julio 2009
Julio 2009
Recursos humanos principales
Nombres y
apellidos
Marcar si es Jefe de
Resultado
MSc. Hilda Esther
Silva Darcourt
Grado
Científico
Categoría Científica,
Docente o
Tecnológica
Institución
X
Instructor
FAC.Ciencias
Médicas
Dr..Lázaro Quevedo
Armas
X
Especialista en
Ortopedia
Hospital “Salvador
Allende”
Lic.Eduardo Ramón
Leyva
X
Profesor Asistente
FAC. Ciencias
Médicas
Experiencia relacionada con el objetivo del proyecto del jefe del proyecto y su equipo
Como antecedentes el jefe del proyecto y su equipo han realizado estudios relacionados con
las terapias durante su estancia como maestrantes en Medicina Bioenergética y natural.
El Dr. Lázaro Quevedo Armas tiene experiencia en la aplicación de la auriculoterapia en el
departamento de salud mental de la institución donde trabaja habiendo obtenido muy buenos
resultados. La jefa del proyecto y otros miembros del equipo tienen experiencia en la aplicación
de dinámicas grupales para regular conductas y estilos de vida no saludables en la Facultad de
Ciencias Médicas
Recursos materiales e infraestructura disponible por las instituciones para ejecutar el
proyecto
Algodón, Solución Desinfectante, Semillas de Cardo Santo, Esparadrapo, Pinzas.
Computadora
Impresoras.
Conclusiones
Este Proyecto que se encuentra en su fase inicial, está encaminado a modificar conductas y
estilos de vida no saludables, así como reactivar el interés de los estudiantes con respecto a este
tema tan problemático en la actualidad con la finalidad de disminuir el consumo de sustancias
tóxicas.
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Recomendaciones
Dar continuidad a esta investigación ampliando con el estudio de la evolución a largo
plazo de estudiantes fumadores.
Referencias Bibliográficas
1. Alvarez Sintes R, Compilador. Temas de Medicina General Integral. 2001: Editorial Ciencias Médicas; La Habana
2. Dovale Rojas C. Rosell Puig W. Elementos Básicos de Medicina Bioenergética.2001. Editora de Ciencias Medicas.
Ciudad Habana
3. González Menéndez R. Contra las adicciones. Clínica y terapéutica.2002 Editorial Científico Técnica, La Habana:
4. González Menéndez R. Usted puede prevenir, detectar y vencer las adicciones .2005.Editorial Científica Técnica.
Ciudad Habana
5. Grupo Operativo Nacional, Ministerio de Educación. Trabajo preventivo con el uso indebido de drogas. 2003. Ciudad
de la Habana
6. Morales Calatayud F. Psicología de la Salud. Conceptos básicos y proyecciones de trabajos:1999.Editorial Científico
Técnica; La Habana
7. Núñez de Villavicencio F. Psicología y Salud. 2001 Editorial Ciencias Médicas;
Ciudad de la Haban
8. Ramírez González, X. Habito de fumar en adolescentes. ADOLECA 2005,CD
ROM, 2005
9. Rial Blanco N. El centro para la prevención y el control del tabaquismo del
INACV. Rev. Cubana de Angiol y Cir Vasc. 2000; 1(1): 32-3.
10. Plan Nacional sobre drogas - Noticias de prensa. Diciembre 2005.
11. Periódico Guerrillero: Organización del Comité Provincial del PCC en Pinar
del Río. Cuba.
12. Gutiérrez Ferrer F. Contra el Tabaquismo. El habanero 2005.
13. Chedier S. El tabaquismo, Un hábito Nocivo. Portal Fitness 2005 http://www
Portal Ftness. Com/Articulos/ Actividad/ Silvia Diek/ Tabaquismo o.htm.
14. Consejo Nacional de Patrimonio Cultural de Cuba. Historia del tabaco 2003
disponible en PTH:// www. cnpc. cult. cu/ cnpc/historia.html.
ANEXOS
Consentimiento informado
Yo: ________________________________________________________________
Como paciente en uso de mis facultades libre y voluntariamente declaro que he sido informado(a), por la especialista
acerca del tratamiento terapéutico.
He recibido información clara y suficiente sobre la naturaleza, beneficios, riesgos y alternativas de este procedimiento
y la libertad que tengo de retirarme, de la investigación. Otorgo el consentimiento previamente informado para
que se me realice el tratamiento.
________________________
Firma del paciente
___________________________
Firma del especialista ¬
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3
Screening of medicinal plants of Maytenus genus for antimicrobial activity
Silva F.C., Duarte L.P., Takahashi J.A., Vieira-Filho S.A., Silva G.D.F., Sallum W.S.T.,
Moura F.
Departamento de Química, ICEx, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antônio Carlos, 6627,
CEP 31270-901, Belo Horizonte, MG, Brazil
Many species of the Celastraceae family have been studied through phytochemical methods
because these plants present many specific pharmacological activities and have been largely
employed in South America etnomedicine. In special, plants of Maytenus genus have been used
to prepare infusions or decoctions to treat inflammations and analgesic remedies for oral and/or
topical administration1 and, in northern Brazil, it is also used to treat infections. 2 The bioactivity in
Maytenus species has been attributed to various groups of secondary metabolites such as triterpenes3 some of which are considered taxonomic markers of Maytenus genus.4 Triterpenes
isolated from Maytenus species, such as maytenfolic acid, isolated from Maytenus heterophylla,
which showed antimicrobial activity by inhibiting the growth of Candida albicans. 5 In this work,
hexane extract and the triterpenes (3-oxofriedelane, 3β-hydroxyfriedelane, 3,11-dioxofriedelane,
3,16-dioxofriedelane and 3-oxo-12α-hydroxyfriedelane), isolated from Maytenus gonoclada
Martius, were screened against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Citrobacter freundii,
Bacillus cereus and Candida albicans by disk diffusion and macro-dilution tests. The activity against
Cladosporium cladosporioides was tested by bioautography. The hexane extract showed activity
against S. aureus and Candida albicans and triterpene, 3-oxo-12α-hydroxyfriedelane was active
against C. albicans. The high lipophilicity of triterpenes and the chracateristics of the bioassay
explain why only 3-oxo-12α-hydroxyfriedelane showed activity. It is well known that agar diffusion method has its accuracy impaired when samples are lipophilic. However, the presence of a
certain degree of lipophilicity is important for antimicrobial activity, because it is speculated that
the mechanism of action of terpenes is due to disruption of cell membrane of the microorganism.6 (FAPEMIG and CNPq)
References
1. Sosa, S.; Morelli, C. F.; Tubaro, A.; Cairoli, P.; Speranza, G.; Manitto, P.; Phytomedicine, 2007, 14, 109.
2. Estevam, C. S.; Cavalcanti, A. M.; Cambuí, E. V. F.; Araujo Neto, V.; Leopoldo, P. T. G.; Fernandes, R. P. M.; Araujo, B.
S.; Porfírio, Z.; Sant’Ana, A. E. G. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2009, 19, 299.
3. Lindsey, K. L.; Budesinsky, M.; Kohout, L.; Staden, J. V.; S. Afr. J. Bot. 2006, 72, 473.
4. Da Silva, M. S.; De Sousa, D. P.; Medeiros, V.M.; Folly, M. A. B.; Tavares, J. F.; Barbosa- Filho, J. M.; Biochem. Syst.
Ecol. 2008, 36, 500.
5. Orabi, K. Y.; Al-Qasoumi, S. I.; El-Olemy, M.; Mossa, J. S.; Muhammad, I.; Phytochemistry 2001, 58, 475.
6. Saleem, M.; Nazir, M.; Ali, M. S.; Hussain, H.; Lee, Y. S.; Riaz, N.; Jabbar, A.; Nat. Prod. Rep. 2010, 27, 238. ¬
327
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3
Phytochemical and antimicrobial study of M. champaca
J.A. Takahashi1*, M.B. Floreano1, M.S. Oliveira2, T.S. Oliveira1, James Wardell3,
Solange M.S.V. Wardell3
1
2
Departamento de Química, Universidade Federal de Minas Gerais, MG, Brazil
Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Minas Gerais, MG, Brazil
3
CHEMSOL, 1 Harcourt Road, Aberdeen AB15 5NY, Scotland.
*
[email protected]
Michelia champaca L. (Magnoliaceae), traditionally known as yellow-magnolia and Petrópolismagnólia, in Brazil, champá, champaka, tspampaca, in India, champac and michelie, in France, is
an exotic tree widely used in streets ornamentation. In traditional medicine, its use is reported to
the treatment of fever, colic, leprosy and for post partum protection. 1 Antimicrobial activity of
flowers2, leaves, seeds, stem and root barks, stem and root heart-woods of M. champaca3 were
reported. Previous phytochemical study of M. champaca root barks led to the isolation sesquiterpene lactones, including michampanolide, 8-acetoxyparthenolide and magnograndiolide. The
sesquiterpene lactones costunolide, parthenolide, dihydroparthenolide, and micheliolide were
also isolated from root barks of M. champaca. In this work, empty capsules of M. champaca fruits
were collected, dried, grounded and extracted with hexane on a Soxhlet apparatus. After hexane
extraction, plant material was extracted at room temperature with ethanol. Hexane extract was
analyzed by gas chromatography (GC) and showed to be constituted mainly by fatty acids that
were analyzed as their methyl esters. Gas chromatography showed palmitic (C16:0, 28.03%),
stearic (C18:0, 28.79%) and linoleic (C18:2n6c, 13.96%) acids as the three major components of
hexane extract (70.78%). From ethanol extract, three compounds were isolated after column
chromatography. From fractions eluted from ethyl acetate/methanol (1:1) and more polar fractions, a white solid spontaneously precipitated in large amounts. It was promptly identified by 1H
and 13C NMR as being pinitol (3-O-methyl-chiroinositol). A group of fractions was pooled and
further chromatographed on silica gel and then on neutral alumina, leading to the isolation of 3hydroxy-3',4'-methylenedioxy-3,3',4'-trihydroxyflavone,an uncommon natural product. A third
secondary metabolite was isolated from the original column of the ethanol extract after further
chromatography on silica and then in neutral alumina to furnish transparent crystals. 1H and 13C
NMR spectrum and X-ray analysis showed this compound to be a liriodenine-like alkaloid that is
herein described by the first time. The compounds were tested in vitro against Staphylococcus
aureus (ATCC 29213), Bacillus cereus (ATCC 11778), Listeria monocytogenes (ATCC 15313), and
showed activity against at least one of the tested bacteria. (FAPEMIG, CNPq)
References
1. Perry, LM. Medicinal plants of East and Southeast Asia: attributed properties and uses, The MIT Press, Cambridge,
Massachusetts, and London (1980), 54.
2. Elizabeth, K. M.; Lakshmi, Y. A. S. Jaya. Antimicrobial activity of Michelia champaca. Asian Journal of Chemistry
(2005), 18, 196.
3. Khan MR; Kihara M; Omoloso AD. Antimicrobial activity of Michelia champaca. Fitoterapia (2002), 73, 744. ¬
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3
Phenolic profile of Petroselinum crispum flat and curly leaf of
apiaceae family
Douglas S. Chaves1, Ana Paula de Almeida2, Russolina B. Zingali3, Sônia S. Costa1
1
LPN-Bio, NPPN, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Brazil.
CEQOFFUP - CEQUIMED-UP, Universidade do Porto, Portugal.
3
LabHemoVen, IBqM, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Brazil.
1
2
Introduction
Parsley is an aromatic herb from Apiaceae family that has been employed in food, pharmaceutical, perfume and cosmetic industries (1). The chemical composition of parsley has revealed the
presence of flavonoids, coumarin and essential oil. In folk medicine parsley is also used to treat
cardiovascular disorders, infection processes, among others (2).
Materials and Methods
Parsley flat (Pcl) and Parsley curlyf (Pcc) were collected out of blooming season and submitted
to a decoction. The High Performance Liquid Chromatography-Diode Array (HPLC-DAD) was
performed on a C18 reversed phase column (UV detection at 200-500 nm), using a gradient of
phosphoric acid 0.01% (A) and methanol (B), with a flow rate 1 ml min -1 (injection of 20μl at 10.0
mg/ml). The compounds were quantified from a standard curve of rutin (flavonoid).
Discussion
The chemical profile of phenolic compounds showed to be very similar in both varieties. The
main difference between Pcl and Pcc is the concentration of their compounds as can be observed
in the chromatograms (Figure 1). Apiin is the major component in Pcl, followed by comosiin,
oxypeucedanin hydrated, diosmetin 7-O-apiofuranosyl-(1->2)-O-glucopyranoside, diosmetin 7-Oapiofuranosyl-(1->2)-O-glucopyranoside isomer and apigenin (Figure 2). Apiin is also the major
component in Pcc, followed by oxypeucedanin hydrated, diosmetin 7-O-apiofuranosyl-(1->2)-Oglucopyranoside, diosmetin 7-O-apiofuranosyl-(1->2)-O-glucopyranoside isomer, apigenin and
comosiin (Figure 2).
Figura !.
Figura 2
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Conclusion
Our findings revealed a very similar phenolic profile for Pcl e Pcc, varying only in the quantification of these compounds. Apiin is the major flavone in both parsley varieties and this spice is
consumed worldwide and can be considered a functional food.
Acknowledgments and Financial Support: CAPES
(1) Lopes et al. Journal of Agricultural and Food Chemistry 47: p. 3292-96, 1999.
(2) Yanardag et al. Biological and Pharmeutical Bulletin 26: p. 1206-10, 2003. ¬
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3
Assessment of genotoxicity of ethanolic extract of Casearia
sylvestris (Salicacea) in HepG2 and MRC5 cell lines assessed by
the comet assay
Oliveira A. M.1, Varanda E.A.2, Santos A.G.3, Cavalheiro A.J.4, Bolzani V.S.4,
Soares C.P.1
1
Clinical Analysis, College of Pharmaceutical Sciences, São Paulo State University, Brazil
Biological Sciences, College of Pharmaceutical Sciences, São Paulo State University, Brazil
3
Princípios Ativos Naturais e Toxicologia, College of Pharmaceutical Sciences, São Paulo State University, Brazil
4
Núcleo de Bioensaios, Biossíntese e Ecofisiologia de Produtos Naturais, Chemistry Institute, São Paulo State
University, Brazil
2
Casearia sylvestris and its derivatives are commonly used to treat ulcer and inflammatory
disease. Besides, a previous study showed that the ethanolic extract of C. sylvestris was genotoxic at high concentrations in mice blood cells. The aim of the present study was to assess the
genotoxicity of ethanolic extract of C. sylvestris in HepG2 (human hepatocarcinoma), MRC5 (lung
fibroblast) cell lines using comet assay. The cells (10 5 cells/mL) were treated during 24h with five
concentrations of ethanolic extract in HepG2 (0.56, 1.15, 2.30, 4.60 and 9.20μg/mL) and MRC5
(0.14, 0.28, 0.55, 1.10 and 2.20μg/mL). These concentrations were lower than IC 50 previously
obtained by MTT assay. As positive control we treated the cells with 1mM of hydrogen peroxide,
to the vehicle control we tested DMEM plus 0.5% of DMSO, as negative control the cells were
treated only with DMEM. After the treatments we performed comet assay by suspending HepG2
and MRC5 cells in 100μL of low-melting-point agarose, the cells were spread on a microscope
slide precoated with normal-melting-point agarose, after, the slides were immersed in lysing
solution. After lysis, the electrophoresis was run for 20 min and finally the slides were immersed
in neutralizing buffer, dried at room temperature and fixed in ethanol. Slides were prepared in
duplicate and 50 cells were screened per sample in a fluorescent 40X objective. The tail moment
was assessed by an image analysis system. We compared groups treated with ethanolic extract
with negative control using Kruskal-Wallis test. Ethanolic extract of C. sylvestris was genotoxic to
HepG2 cell line at 4.60 and 9.20μg/mL (both p<0.01), and in MRC5 cell lines the same extract was
genotoxic at 0.55μg/mL (p<0.05), and 1.10 and 2.20μg/mL (both p<0.01). In conclusion, ethanolic
extract of C. sylvestris was genotoxic in the higher concentrations tested.
Financial support
FAPESP (2008/58908-0), Biota-FAPESP (2003/02176-7) and Fundunesp (00797 - DFP) ¬
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3
Un glicósido de flavonoide aislado de las hojas de Guazuma
ulmifolia Lam. (Sterculiaceae)
Sosa-Moreno Adakarleny, Rosquete-Porcar Carmelo
Laboratorio de Productos Naturales. Facultad de Ciencias.
Universidad de Los Andes. Mérida 5101. Venezuela.
[email protected]
El género Guazuma (Sterculiaceae) es un género neotropical de amplia distribución en América.
Guazuma ulmifolia Lam, conocida comúnmente como “guácimo”, se encuentra distribuida en
varios países de Latinoamérica, principalmente Ecuador, México y Panamá 1. En la medicina
tradicional, su corteza es utilizada para el tratamiento de diversas afecciones como la diarrea,
hemorragias, fiebres, asma, hipertensión, entre otras. Las hojas de esta planta también son
usadas como infusión para el tratamiento de la diabetes, comprobándose experimentalmente la
disminución de la hiperglicemia provocada en ratones2. Otras investigaciones han confirmado las
propiedades antibacteriales, antioxidante, antivirales, antisecretora y antihipertensivas que
presenta esta especie, principalmente atribuidas a la presencia de proantocianidinas dentro de su
composición química3. Estudios fitoquímicos preliminares de Guazuma ulmifolia Lam., han reportado la presencia de taninos y otros compuestos fenólicos; además se aislaron compuestos
conocidos como la cafeína y varios flavonoides como el kanferol, la quercetina y la kanferitrina 4.
En este trabajo reportamos el aislasmiento de un flavonoide (I) de la extracción con una mezcla
de metanol-agua (1:1) de hojas de G. ulmifolia Lam., recolectadas en la población de Lagunillas,
Estado Mérida, Venezuela.
Referencias
1. Berenguer, B. et al. (2007), J. Ethnopharmacol., 114: 153.
2. Alonso, A., Olivo, L. (2008), J. Ethnopharmacol., 118: 252.
3. Alarcon, F. et al. (1998), J. Ethnopharmacol., 61: 101.
4. Lyu, S. et al. (2005), Arch. Pharm. Res., 28: 1293. ¬
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3
Screening of Brazilian medicinal plants for anti-infective
activity and as acetylcholinesterase inhibitors
Jacqueline A. Takahashi, William S. T. Sallum, Fabiana de Moura,
Karine F. Campos, Rafael F. Mota
Chemistry Department, Universidade Federal de Minas Gerais, UFMG, Brazil
[email protected]
One of the most important uses of medicinal plants by people living in tropical countries is as
an antimicrobial agent. In such developing countries, infectious diseases account for approximately one-half of all deaths. However, even in developed countries, mortality rates caused by
infectious diseases have been increasing, probably due to development of novel respiratory tract
infections, bacterial resistance, and AIDS. In Brazil, most of the population uses medicinal plants
as the major therapeutic resource to prevent or treat numerous diseases. Since Brazil holds an
enormous biodiversity, continuous efforts to scientifically prospect the real potential of plant
remedies is a real demand. We have been carrying on a large screening of plants popularly used
in Brazil as medicines for their activity as antimicrobial agents to treat fungal and bacterial
infections and for their ability of inhibiting acetylcholinesterase, an enzyme targeted by antiAlzheimer drugs. Methods using thin layer chromatography (TLC) bioautography and multi wells
plates are useful as they show good compatibility with a large number of samples that may need
to be tested on a screening program. For the present work, 36 medicinal plants, widely used in
Brazil but typical of Minas Gerais state were collected in several localities of Minas Gerais, Brazil,
some of them were divided in parts (stem, leaves, roots, etc) and extracted at room temperature
with ethanol. The solvent was removed using a rotary evaporator, furnishing the crude extracts
that were stored at 6°C. In overall, 64 extracts were obtained. All extracts were tested using
micro-dilution in 96 well plates against Gram-positive and Gram-negative bacteria and Candida
albicans. Two TLC bioautographic bioassays were also used, the first one to screen the activity of
the extracts against filamentous fungi and, the second one to evaluate the extracts capacity of
inhibiting acetylcholinesterase (AChE) in vitro. Most of the extracts showed selective activity
against Gram-positive bacteria and only a few extracts were active against C. albicans. Five
extracts were active against the tested filamentous fungi, but from the 64 extracts assayed for
AChE inhibition activities, almost 50% of them showed a positive response, varying from moderate to strong inhibition. Ageratum conyzoides BHCB 140211 (Asteraceae) and Jacaranda caroba
BHCB 140208 (Bignoniaceae) extracts were the most active AChE inhibitors. In conclusion, out of
the 64 extracts prepared from the 36 plant species assayed, 40 were active and a few of them
showed encouraging biological activity profiles. Considering these findings, further study of
these selected plant extracts is promising for the search of new agents to fight infections and
Alzheimer’s disease. This work is being supported by FAPEMIG, IFS and CNPq. ¬
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3
Studi preliminari per il ripristino del Giardino dei Semplici
annesso all’Antica Spezieria dell’Ospedale Maggiore di Milano
Sara Vitalini1,4, Paolo M. Galimberti2, Marcello Iriti1, Franca Tomè3,
Gelsomina Fico3,4
1
Dipartimento di Produzione Vegetale, Università degli Studi di Milano, via Celoria 2, 20133 Milano, Italy
2
Servizio Beni Culturali, Fondazione IRCCS Ca’ Granda Ospedale Maggiore Policlinico,
Via Francesco Sforza 28 - 2011 Milano
3
Dipartimento di Biologia, Università degli Studi di Milano, via Celoria 26 - 20133 Milano, Italy
4
Orto Botanico G. E. Ghirardi, Dipartimento di Biologia, Università degli Studi di Milano,
via Religione 25 - 25088 Toscolano Maderno (Brescia), Italy
I documenti dell’Archivio Storico dell’Ospedale Maggiore di Milano, fondato nel 1456, conservano testimonianza dell’esistenza di una farmacia interna, attiva fin dal 1470. La preparazione dei
farmaci, si fondava principalmente sull’utilizzo di piante che, almeno in parte, venivano coltivate
direttamente nell’orto ospedaliero o Giardino dei Semplici, la cui esistenza è documentata dal
1644.
Il presente lavoro ha previsto l’uso di fonti storiche (fonti documentarie manoscritte e a
stampa, ma soprattutto materiali archeologici, ossia le suppellettili dell’antica Spezieria), con
l’obiettivo di individuare le specie officinali collezionate nel corso dei secoli. La stesura di un
primo elenco è stata possibile grazie alla ricca collezione di vasi in maiolica del XVII-XVIII secolo,
costituita da 150 esemplari con iscrizioni, in latino o in volgare, relative ai nomi delle piante e ai
preparati che contenevano (es. aqua, oleum, extractus, etc.).
Inizialmente, mediante le abbreviazioni riportate sui vasi stessi, è stato steso un elenco per
genere. La consultazione di antichi documenti quali farmacopee, elenchi inventariali ed indici a
stampa (liste di medicamenti semplici e complessi in uso presso l’ospedale in quegli anni), patrimonio dell’Archivio Storico dell’ospedale, ha rappresentato lo strumento per la successiva
elaborazione di una lista per specie.
L’indagine condotta ha consentito di stabilire che, dei medicamenti contenuti anticamente nei
vasi, 107 sono risultati essere di origine vegetale, in 5 casi si trattava di preparati di origine mista
(vegetale-animale), 14 erano di origine animale, 6 di origine minerale e 18 di origine sconosciuta.
Delle 35 famiglie a cui appartengono le circa 60 specie individuate, Rosaceae, Lamiaceae ed
Asteraceae sono risultate le più rappresentate.
Una fase successiva del lavoro prevede la comparazione tra usi tradizionali e dati di recenti
studi sperimentali. Quale esempio di tale ricerca, attualmente in corso, si presentano i risultati
ottenuti per la specie Tanacetum parthenium (L.) Sch.-Bip. ¬
334
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3
Validação de metodologia analítica, por clae, para
quantificação de boldina em um fitoterápico composto
contendo Peumus boldus molina e Solanum paniculatum l.
Luciene de Oliveira Morais1, César Gomes de Queiróz2, Elizabeth Valverde Macedo2
1
Farmacêutica, Mestranda da Pós-Graduação do Instituto Nacional de Controle da Qualidade em Saúde da Fundação
Oswaldo Cruz - FIOCRUZ
2
Docente da Faculdade de Farmácia da Universidade Federal Fluminense/UFF - Pesquisadora do Laboratório de
Tecnologia de Produtos Naturais - LTPN/UFF
[email protected] - Tel./Fax +55-21-26299597
Em 2006 o governo brasileiro, através do Ministério da Saúde, tornou oficial a Política Nacional
de Plantas Medicinais e Fitoterápicos, levando em conta a necessidade do reconhecimento da
medicina tradicional como parte integrante dos sistemas de saúde. Embora o medicamento
tenha se tornado imprescindível para a sociedade e o Estado, sua produção tem sido capturada
por poucas empresas líderes de grande porte. Muitas atuam de forma globalizada em segmentos
específicos (classes terapêuticas), mediante estratégias de diferenciação de seus produtos, e
quanto mais diferenciado são, mais específicos necessitam ser os métodos analíticos empregados ao controle da qualidade destes medicamentos. A validação de uma metodologia analítica
deve garantir, por meio de estudos experimentais, que o método atenda às exigências das
aplicações analíticas, assegurando a confiabilidade dos resultados. O objetivo do presente
trabalho foi validar a metodologia analítica empregada para a quantificação do marcador boldina
presente em comprimido fitoterápico composto que contém 10mg de extrato seco de boldo
(Peumus boldus, Molina) e 120mg de extrato seco de jurubeba (Solanum paniculatum, L.), correspondente a 0,01mg de boldina e 4mg de solanina, respectivamente. O produto é indicado para o
tratamento de distúrbios digestivos. Para a validação da metodologia analítica empregada ao
comprimido, inicialmente procedeu-se a extração ácido-base e posteriormente a separação e
quantificação por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). O cromatógrafo líquido
utilizado foi da marca Shimadzu (Kyoto, Japão), equipado com um controlador de bombas Série
LC-20AT e injetor manual RHEODYNE 7725. A quantificação do marcador foi realizada por
padronização externa, utilizando boldina (Chromadex) como substância química de referência.
No estudo foi utilizada coluna Hypersil BDS RP-C18 (250mm X 4,6mm, 5μm), detector ultravioleta
(SPD-20A), a leitura foi realizada no comprimento de onda de 304nm, a fase móvel foi constituída
de acetonitrila e ácido fosfório 0,1% (77:23) e o fluxo foi de 2,1mL/min, sob condição isocrática. Os
parâmetros determinados no estudo de validação foram: especificidade/seletividade, linearidade,
intervalo, precisão, exatidão e robustez. Todos os resultados se mostraram satisfatórios, e o
método demonstrou-se adequado para a quantificação de boldina presente no comprimido
fitoterápico composto, conforme guia para validação de métodos analíticos e bioanalíticos
estabelecido pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária - ANVISA através da Resolução
899/2003. Concluí-se, portanto, que a metodologia utilizada pode ser considerada validada,
sendo autorizado o seu uso na rotina do controle de qualidade do medicamento objeto do
estudo.
Unitermos: Peumus boldus, CLAE, validação. ¬
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3
Composición química del aceite esencial de las hojas de
Isocarpha oppositifolia (L.) Cass que crece en Mérida-Venezuela
Vargas Y.2, Rojas L.1, Usubillaga A.1, Carmona J.2
1
2
Instituto de Investigaciones. Facultad de Farmacia y Bioanálisis.
Jardín de Plantas. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Urb. Campo de Oro.
Universidad de Los Andes. Mérida-Venezuela
[email protected]
El género Isocarpha pertenece a la familia Compositae (Asteraceae), se encuentra distribuido
en la región tropical de América y está representado por cerca de 10 especies. La Isocarpha
oppositifolia (L.) Cass es un arbusto aromático ubicado antiguamente en la tribu Heliantheae,
actualmente se localiza en la tribu Eupatorieae. En estudios previos se han aislados derivados del
benzofurano, germacranolidos y heliangolides. En el presente trabajo se reporta, por primera vez
para nuestro país, el análisis de los componentes volátiles del Isocarpha oppositifolia que crece en
Mérida, Edo Mérida-Venezuela. Hojas frescas de la planta fueron sometidas a hidrodestilación
empleando la trampa de Clevenger por dos horas obteniendo, de 1Kg de hojas, 0,1 mL de aceite.
La identificación de los componentes se realizó mediante un sistema GC/MS Hewlett Packard
MSD 5973, equipado con una columna de fenil-metil-polisiloxano de 30m por 0,25mm (HP-5). Se
empleó un programa de temperatura partiendo de 60ºC (1 min) luego se incrementó hasta 260ºC
(20 min) a razón de 4ºC/min. La identificación de se realizó con ayuda de una librería Wiley MS
Data (6ª Edición, 275K Spectra), Nist 05 y el cálculo de los índices de kovats. Un total de 9 constituyentes fueron identificados, en su mayoría sesquiterpenos, siendo los mayoritarios: betacariofileno (26,53%), germacreno D (44,93%). ¬
336
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3
Comparative study of two Aspidosperma species used by
“quilombola” communities of Oriximiná (Brazil):
chromatographic profiles and acetylcholinesterase inhibitory
activity
Mariana Neves Vieira1*, Danilo R. Oliveira1,2, Paula C.C. Porto1, Newton G. Castro3,
ARQMO4, Washington Marcondes-Ferreira5, Suzana G. Leitão1
1
Faculdade de Farmácia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CCS, Bloco A 2o andar, Ilha do Fundão,
21941-590, Rio de Janeiro, Brazil
2
Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais, UFRJ, CCS, Bloco H, Brazil
3
Departamento de Farmacologia Básica e Clínica, ICB, UFRJ, CCS, Bloco J,Brasil
4
Associação de Comunidades Remanescentes de Quilombos do Município de Oriximiná, Oriximiná, Brazil
5
Instituto de Biologia, Instituto de Biologia Universidade Estadual de Campinas, SP, Brasil
Species of Aspidosperma genus (Apocynaceae) are, generally, trees found in Central and South
America, commonly known in the North of Brazil as “Carapanaúba”, which means mosquito’s
nest. Teas made from the bark of these trees are popularly used in the “quilombola’s” communities to treat malaria, liver diseases, amoeba, fever and as a tonic for the nerves. 1 Based on this
last indication and on the fact that this genus is characterized by the occurrence of indole alkaloids,2 the aim of this work was to investigate the acetylcholinesterase enzyme (AChE) inhibitory
activity of this plant, in order to find a potential source to the symptomatic treatment of
Alzheimer’s disease. Two samples of Carapanaúba: Aspidosperma excelsum (terra-firme - CTF)
and A. rigidum (baixio - CBA), were collected as the same ethnospecies in Oriximina, State of
Pará, Brazil, in August (2008). The dried and ground barks were submitted to maceration with
ethanol and the solvent was later evaporated under reduced pressure. Aqueous extracts were
also obtained (teas - traditional method) and then liofilized. HPLC chromatographic profiles were
developed in a Merk-HITACHI apparatus with an UV/DAD detector; using a reversed phase ODS
analytical column (25 cm x 4.6 mm, 5 micra) at room temperature. Mixtures of acetonitrile and
water, or methanol and water were tested for different gradients, as well as the influence of
different acids (acetic, phosphoric or TFA) in the separation efficiency. The best results were
obtained with the mobile phase solvent system: H2O/TFA (pH 3) and CH3CN in a linear gradient
starting from 80:20 (respectively) and going to 10:90 in 18 minutes, with 2 more minutes of 100%
CH3CN to wash the column; flow rate: 2,0 ml/min and detection at 250 nm. The evaluation of the
AChE inhibitory activity was performed by the quantitative Ellman’s method, modified by our
group. Tests were made in 96-well plates to which were added the enzyme, the colorimetric
reagent (5,5´-dithio-bis(2-nitrobenzoic acid)), the samples (2 mg/mL) and the substrate (acetylthiocholine iodide). The absorbance was measured at 412 nm in the kinetic mode during 5 minutes. Physostigmine (0,1 mg/mL) was used as the positive control. The chromatograms obtained
showed differences in the chemical profiles of the species. The CTF extracts showed to be more
complex than those from CBA. However, it was possible to make correspondences between the
UV spectra of the major peaks, which were characteristic of indole alkaloids,3 suggesting the
presence of some substances in common to CTF and CBA. Also, in the biological assay, different
results were found. The most active extracts were those from CTF, with 80% inhibition of AChE
for the ethanolic extract and 53% for the tea. To CBA, inhibition values of 33% for the ethanolic
extract and 18% for the tea were found. Further investigation should be made in order to elucidate the structure of the active compounds.
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Acknowledgements: CNPq
References
1. OLIVEIRA, D. R. NPPN- UFRJ, PhD Thesis, 2009;
2. PEREIRA, M.M. et al. Quím. Nova. v. 30, p. 970-983, 2007;
3. GABETTA, P.; MUSTICH, G. Spectral Data of Indole Alkaloids. Italy: Inverni Della Beffa, 1975. ¬
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3
How a Huottuja (Piaroa) community perceive genuine and
false honey from the Venezuelan Amazone, by free choice
profile sensory method
Patricia Vit*,1, Rosires Deliza2, Alfonso Pérez3
1
Departamento Ciencia de los Alimentos, Facultad de Farmacia y Bioanálisis,
Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela;
2
Embrapa Labex Europe
3
Institut National de la Recherche Agronomique - Centre des Sciences du Goût et de l’Alimentation, Dijon, France
3
Asociación Cooperativa de Meliponicultores Warime
Pot honey is the most abundant honey in the forest, produced by many species of stingless
bees (Meliponini). Local names of these native bees are present in poems and songs, but the
honey they produce is only included in Colombian standards. Meliponiculture is practiced by a
Huottuja (Piaroa) community in Paria Grande, Atures County, Amazonas State, Venezuela.
However, the marketing chain for the honey they produce is poor, and false honeys with labelled
bottles are broadly exhibited in the market. Our interest focus on the ability of an untrained
panel of Huottuja to differentiate genuine and false pot honey, and Apis mellifera comb honey. A
light amber Melipona fuscopilosa (isabitto) and a dark amber Tetragona clavipes (ajavitte) genuine
honeys, false light and dark (angelita) and amber A. mellifera honey were monadically presented
in plastic containers. Water and local cassava crakers were used to reset the palate between
samples. The free-choice profile (FCP) sensory method consents consumers to use their own
words to describe and to quantify sensory attributes of the product. Appearance (visual consistency and color), odor, flavor (taste and aroma) and other sensations were elicited in a qualitative session, and were quantified later with individual score sheets in duplicates using a 10-cm
unstructured line scale. Data were processed with generalized Procrustes analysis (GPA). The
first and second dimensions accounted for 69.14% of the variance, the first dimension (39.50%)
was explained by the low viscosity, fermented odor and sour flavor, whereas the second dimension (24.69%) was related to fruity and mellow honey attributes in the odor and the flavor. Their
bidimensional plot separated genuine from false pot honeys. The A. mellifera honey was perceived as more similar to the false honeys, possibly due to the higher viscosity caused by the lower
natural moisture content of comb honey compared to pot honey. The Huottuja assessors successfully accomplished the differentiation of five types of pot honey. The free choice profiling was
helpful to picture consumer perception of Meliponini pot honey. Additionally, the GPA generated
a handy bidimensional plot, positioning honey according to the entomological genus of origin
and separated authentic from false honey.
Keywords: Apis, free choice profile, honey, Meliponini, sensory analysis ¬
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3
Fitochimica di Clinopodium nubigenum (kunth) kuntze: un
aggiornamento
Gianluca Gilardoni3, Cristina Massolino2, Omar Malagon4,
Segundo Vladimir Morocho Zaragocín4, Riccardo Negri1, Giovanni Vidari1,
Paola Vita Finzi1*
1
Università degli studi di Pavia, Dipartimento di Chimica Organica, via Taramelli 10, 27100 Pavia, ITALIA
2
Università degli studi di Torino, Dipartimento di Chimica Analitica, Via Giuria 5, 10125 Torino, ITALIA
3
OSMOTECH s.r.l., Dipartimento di Chimica Farmaceutica, via Taramelli 12, 27100 Pavia, ITALIA.
4
Universidad Técnica Particular de Loja, Loja, ECUADOR
*
vitafi[email protected]
Clinopodium nubigenum (Kunth) Kuntze è una pianta aromatica appartenente alla famiglia
delle Lamiaceae, conosciuta anche come Thymus nubigenus, Micromeria nubigena e
Satureja nubigena e diffusa in America latina tra i 3000 e 4000 metri di altitudine. Presso le
popolazioni indigene è conosciuta con il nome di “tipo de cerro” ed è utilizzata in
infusione dalla medicina tradizionale nel trattamento del mal di stomaco, del raffreddore
e dei dolori mestruali. L’analisi chimica dell’olio essenziale è stata presentata per la prima
volta dagli autori nella precedente edizione di questo congresso; oltre alla composizione
percentuale dell’olio essenziale, ottenuta a partire dalla letteratura di Adams del 2001 (1),
fu evidenziata una significativa attività antifungina verso Candida albicans e Cryptococcus
neoformans.
Nella presente comunicazione si fornisce un aggiornamento sulla composizione chimica
dell’olio essenziale, riveduta secondo la più recente letteratura di riferimento (2), che ha
permesso di portare il numero di composti identificati da 43 a 71, nonché la descrizione di
due metaboliti secondari non volatili di origine terpenica.
Tali metaboliti, isolati per cromatografia liquida su fase inversa C-18 e successivamente su
gel di silice, sono stati caratterizzati tramite spettroscopia NMR, mediante esperimenti 1HNMR, 13C-NMR e DEPT. I composti identificati sono risultati identici allo schizonepetoside
C (fig.1) ed allo schizonepetoside A (fig. 2), isolati prima d’ora solo dalla Schizonepeta
tenuifolia Briq. (3, 4).
Bibliografia
1. Adams R., Identification of Essential Oil Components by Gas Chromatography/Quadrupole Mass Spectroscopy;
ALLURED 2001.
2. Adams R., Identification of Essential Oil Components by Gas Chromatography/Mass Spectrometry - Fourth edition;
ALLURED 2007.
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3. M. Kubo et al. Chem. Pharm. Bull. 1986, 34, 3097-3101.
4. I. K. Lee et al. Nat. Prod. Sci. 2008, 14, 100-106. ¬
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3
Composición quimica y actividad antibacteriana del aceite
esencial de Ambrosia cumanensis
Carlos Alberto Yánez Colmenares4, Nurby Rios1, Flor Mora1, Luis Rojas2, Tulia Diaz3,
Judith Velasco3, Nahile Rios4, Pablo Melendez1
1
Laboratorio de Investigación de Medicamentos Orgánicos
Instituto de investigaciones-Sección Productos Naturales
3
Laboratorio de Síndromes Gastrointestinales y Urinarios
4
Laboratorio de Toxicología.
Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Universidad de los Andes, Mérida
2
En Venezuela actualmente se están explorando nuevas fuentes de agentes antibacterianos de
origen natural, debido al aumento de la resistencia bacteriana, entre ellos los aceites esenciales
derivados de plantas. Por tal razón en el presente estudio se determino la composición química y
actividad antibacteriana del aceite esencial obtenido de las hojas de Ambrosia Cumanensis recolectada en Guasdualito, Estado Apure, Venezuela. Los compuestos volátiles se aislaron por
hidrodestilación en una trampa de clevenger y posteriormente se realizó el análisis cualitativocuantitativo a través de cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC/MS), en
un equipo HP GC-MS system, modelo 5973, encontrando como compuesto mayoritario al gammacurcumeno (23,99%), seguido de curcumeno-ar (14,08%), acetato de bornilo (10,35%), camfor
(5,03%) y epóxido de oximene (4,79%). La actividad antibacteriana del aceite esencial realizada
por el método de difusión en agar frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterococcus
faecalis ATCC 29212, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 23357, Salmonella
Typhi CDC 57, Pseudomona aeruginosa ATCC 27853, mostró actividad tanto en bacterias gram
positivas como gram negativas, con valores de Concentración Inhibitoria Mínima (MIC) de
400μg/ml 500μg/ml, 500μg/ml y 350μg/ml respectivamente para Staphylococcus aureus,
Enterococcus faecalis, Escherichia coli y Salmonella Typhi.
Referencias:
7.
Borges, J., et. al,. (1983). Phytochemistry, 22: 782-783.
8. Borges, J., et. al,. (1978). Tetrahedron Letters, 19: 1513-1514.
9. Goldsby, G., et. al,. (1987). Phytochemistry, 26: 1059-1063.
10. Lentz, D. et. al,. (1998). Journal of Ethnopharmacology, 63: 253-263.
11. Payne, W., et. al. (1972). Brittonia, 24:189-198.
12. Zapata, B., et. al,. (2010). Revista Iberoamericana de Micologia, 27:101-103. ¬
342
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3
Composición química del aceite esencial de Hyptis capitata Jac.
de los llanos venezolanos
Zambrano Leida1, Flor D. Mora1, Luis B. Rojas2, Pablo Melendez1
1
2
La familia Lamiaceae incluye unos 150 géneros y unas 3000 especies de plantas herbáceas, el
género Hyptis (tribu Ocimeae) comprende alrededor de seiscientas noventa y cuatro especies, la
mayoría de las cuales están distribuidas en américa tropical. La composición química del género
está representada por terpenoides, podofilotoxina, estigmasterol, pirona, beta peltatina, lactonas insaturas, quinonas, lignanos, ácidos oleanólico, ursólico, rosmarínico, entre otros. El presente trabajo reporta la composición química del aceite esencial de Hyptis capitata colectado en
Venezuela. El aceite esencial de las hojas frescas de H. capitata fue obtenido por hidrodestilación
usando un aparato tipo Clevenger. La planta fue colectada en diciembre 2009 en la reserva
forestal Caparo, estado Barinas, Venezuela, produciendo un 0.002% del aceite. Los constituyentes
químicos fueron identificados por análisis GC-MS. Treinta y un compuestos (los cuales representan 97.3% de la muestra) fueron identificados. Los tres constituyentes mayoritarios encontrados
son Precoceno I (10.6, α-selineno, (9.7%) y β-cadineno (10.3%). ¬
343
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3
Efecto Antiagregante Plaquetario y Antiedemagénico de un
Extracto de Lippia polystachia
Vassilios Nastos1, Milagros García Mesa2, María Antonia Alfonso Valiente2,
Silvana Morelli3, Anna Lisa Piccinelli3, Francesco De Simone3, Luca Rastrelli3
1
Instituto de Angiología y Cirugía Vascular, Ciudad de la Habana, Cuba
3
Departamento de Ciencias Farmacéuticas, Universidad de Salerno, Italia.
2
RESÚMEN
Antecedentes
Los antiagregantes plaquetarios son los fármacos de elección para la prevención de las complicaciones patológicas de la aterosclerosis (aterotrombosis). Los antiedemagénicos (flebotónicos),
son empleados en el tratamiento de la insuficiencia venosa crónica. Algunos compuestos
fenólicos presentes en las plantas son antiagregantes plaquetarios o antiedemagénica , lo que
sugiere que los extractos vegetales ricos en estos metabolitos también poseen estas acciones
farmacológicas. El objetivo de este trabajo fue evaluar los potenciales efectos antiagregante
plaquetario y antiedemagénico de un extracto de Lippia polystachia rico en compuestos
fenólicos.
Métodos
La agregación plaquetaria fue evaluada en plasmas ricos en plaquetas (PRP) preparados a
partir de muestras de sangre de sujetos voluntarios sanos. El adenosin difosfato (ADP) y el
colágeno fueron utilizados como estímulos. El efecto antiagregante del extracto se evaluó
mediante su adición al PRP para obtener concentraciones de 50; 100 y 200 μg/mL de polifenoles
totales en el medio de incubación. La agregación plaquetaria fue inducida mediante la adición de
ADP o colágeno al PRP después de dos minutos de incubación con el extracto. La hiperpermeabilidad vascular fue inducida en ratas Wistar mediante la aplicación de inyecciones intradérmicas de
histamina y dextran 400 después de 15 días de tratamiento con extracto 80 mg/kg/día o agua
(grupo control). Las áreas de edema fue visualizado por la inyección intravenosa de Azul de
Evans.
Resultados
El extracto inhibió la agregación plaquetaria inducida por ADP de una manera dependiente de
la concentración, mientras mostró un débil efecto inhibitorio sobre la inducida por colágeno, lo
que sugiere la existencia de selectividad hacia el mecanismo de activación plaquetaria correspondiente al ADP. Las áreas de edema inducidas por histamina y por dextran fueron significativamente inferiores en las ratas tratadas con el extracto con respecto al grupo control, lo que lleva a
pensar en una acción antiedemagénica inespecífica.
Conclusiones
El extracto de Lippia polystachia posee acciones antiagregante plaquetaria y antiedemagénica,
lo que sugiere la conveniencia de continuar los estudios para caracterizar estas acciones
farmacológicas. ¬
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3
Evidenze della medicina termale e della fitoterapia nella cura
della gonartrosi
Nastos Vassilios1, Russo Luigi2
1
2
Il termine artrosi, formato dalle parole di origine greca “artro” che significa articolazione e
“osi” che significa degenerazione, indica una malattia degenerativa delle articolazioni. L'artrosi è
fra le malattie croniche più comuni nella popolazione e la causa di disabilità più frequente
nell'anziano. Come per molte altre malattie, nella maggior parte dei casi si assiste ad una combinazione fra la predisposizione genetica dell'individuo e l'influenza dei fattori ambientali, soprattutto quelli che agiscono sul carico, quali le sollecitazioni meccaniche, l'obesità, le malformazioni,
i traumi ed i microtraumi. Le manifestazioni principali che si ritrovano in un paziente affetto da
artrosi si possono suddividere in sintomi (soggettivi) e segni (oggettivi). Il sintomo principale
dell'artrosi è il dolore. Esso è definito di tipo “meccanico”, in quanto viene risvegliato dal movimento ed è alleviato dal riposo. Nel presente studio sono stati selezionati 15 pazienti affetti da
gonartrosi bilaterale afferenti al Centro Termale di Edipsos, nella regione greca di Eubea. Il
protocollo dello studio e stato preventivamente approvato dal Comitato Etico del Distretto
Regionale di Eubea del Ministero Ellenico di Sanita Pubblica. Ciascun paziente ha volontariamente
accettato di partecipare allo studio sottoscrivendone il relativo Consenso Infomato, nel quale
venivano esplicitate completamente ed elencate a voce da un medico le finalità dello studio ed i
suoi potenziali rischi.I pazienti erano suddivisi per sesso (5 M, 10 F) con età media di 56,7
anni.(Età Min. 50/Massima 70). La valutazione clinica dei pazienti prima di essere trattati con
fango balneoterapia era basata sulla valutazione dei seguenti parametri.Valutazione del dolore
riferito a riposo e durante la deambulazione secondo una scala visuale Analogica (VAS). I pazienti
sono stati trattati quotidianamente per un ciclo di 12 giorni mediante fango-balneoterapia sulfurea salsobromoiodica e trattamento riabilitativo talassoterapico. I 15 pazienti in studio affetti da
gonartrosi in fase attiva venivano poi avviati alla Balneoterapia. I risultati ottenuti dal presente
studio sperimentale in aperto, cioè senza utilizzo del gruppo di controllo, per evidenti ragioni
etiche, sono riassumibili in 2 aree di dati: Valutazione Clinica, Indici del Dolore e di disabilità. Il
report della valutazione clinica della terapia effettuata si e articolata sulla descrizione soggettiva
di benessere del paziente con gonartrosi prima e dopo il ciclo di fango balneoterapia. Alla percezione del proprio stato di benessere da parte del paziente si e aggiunta la percezione soggettiva
dello stato globale del paziente da parte del medico. Nessuno dei quindici pazienti studiati ha
mostrato un peggioramento clinico. Dodici di essi (80%) hanno riferito un complete stato di
benessere al termine del ciclo terapeutico. Due (13,33%) hanno riferito un buono stato di benessere complessivo alla fine del trattamento. Un solo paziente (6,66%) non ha mostrato miglioramento. Tramite il t-test per dati grezzi sono state valutate le differenze relative all’ intensità del
dolore prima del trattamento ed alla fine delle sedute nelle fasi di riposo e della deambulazione
anche la differenza tra i dati che riguardano la forza muscolare e l’ escursione articolare prima e
dopo il trattamento. I risultati emersi dal presente studio hanno mostrato chiaramente che le
applicazioni di fango-balneoterapia applicata alla fitoterapia possono essere di valido aiuto nel
trattamento della gonartrosi, infatti si ha una netta caduta del dolore come rilevato dai valori
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ottenuti mediante l’uso della Scala Visiva Analogia (VAS). La Valutazione del proprio stato di
Benessere cosi come riportato dai pazienti e la valutazione globale effettuata dai sanitari vs lo
stato di benessere dei pazienti stessi ha confrontato peraltro i precedenti valori oggettivi. I dati
ottenuti sulla efficacia della fango balneoterapia nel facilitare l’escursione articolare e di aumentare la forza muscolare sono abbastanza incoraggianti. ¬
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3
Caracterizacion quimica y sensorial de salame
M.N. Granadé1, P.R. Quiroga2, M.G. Mestrallet2, C.G. Riveros2, R.H. Olmedo2,
N.R. Grosso2, V. Nepote1
1
ICTA-FCEFYN-UNC, IMBIV-CONICET, Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales,
UNC. Av. Velez Sarsfield 1611, CU, Córdoba, Argentina.
2
Química Biológica, FCA-UNC, IMBIV-CONICET.
[email protected]
Resumen
El objetivo del trabajo fue caracterizar química y sensorialmente muestras de salame tipo
casero. Se trabajó con muestras de salame seco elaborado a partir de carne de vaca, de cerdo,
tocino, sal, pimienta y nuez moscada, sin ningún conservante. Se determinó la composición
química general de las muestras: contenido de humedad, lípidos, proteínas, cenizas y carbohidratos totales. Sobre los lípidos extraídos de las muestras se evaluó el perfil de ácidos grasos por
cromatografía gaseosa, índice de peróxidos, índice de acidez, contenido de dienos y trienos. Se
realizó la evaluación sensorial descriptiva de las muestras de salame seco, utilizando un panel de
10 jueces entrenados. El panel de jueces determinó la intensidad de diferentes atributos sensoriales de apariencia (color de la grasa, color de la carne, brillo y presencia de huecos), olor
(característico de salame, rancio), gusto (salado, ácido), sabor (característico de salame, oxidado), textura (dureza, residuo en dientes, aceitocidad) y factor sensación (picante), en una
escala lineal no estructurada de 150mm (de 0 a 150), utilizando como referencia un salame de la
colonia de marca comercial. Los componentes predominantes en las muestras de salame seco
fueron las proteínas (43.5% en peso seco) y lípidos (45.8%). También se observaron elevados
contenido de humedad (28.1%) y de cenizas (10.2%). La composición de ácidos grasos indicó un
predominio de los ácidos grasos saturados 16:0 (26.0%) y 18:0 (32.4%) y una relación O/L 2.24. Los
lípidos presentaron índices de peróxido de 8.4 meqO2/kg, de acidez 19.34 mgKOH/g, contenido
de dienos de 1.26 y de trienos 1.70. El producto se caracterizó por elevadas intensidades de los
atributos característicos, como el olor y sabor a salame (intensidades alrededor de 82 en una
escala 0-150), gusto salado (127), picante (55) y color a carne de res (73). Otros atributos con
intensidades significativas fueron el brillo (41), dureza (50), aceitocidad (68). Estas intensidades
resultaron similares a las encontradas en el salame de la colonia utilizado de referencia. Este tipo
de salame es un producto muy consumido en Córdoba y de elevada aceptabilidad debido a sus
atributos sensoriales, es por esto que su caracterización química y sensorial resulta de importancia para la descripción de este tipo de producto. ¬
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3
Chapulines: alimento rico en proteínas
Ma.del Carmen Herrera Fuentes1, Virginia Melo Ruíz2, Jorge Rivero1, Otto Hahn1
1
UAM-I Av San Rafael Atlixco 186, Col Vicentina C.P. 09340, Iztapalapa, México D.F.
UAM-X. Calz, del Hueso 1100. Col. Villa Quietud. Coyoacán, C.P. 09460. México D.F.
[email protected], [email protected], [email protected]
2
La crisis de alimentos actual a nivel mundial crea la necesidad urgente de estudiar otras fuentes
no convencionales de nutrimentos para proteger y conservar la salud humana.
Desde épocas ancestrales, los insectos han sido una fuente de nutrientes para diversos grupos
de la población y actualmente se incorporan en la dieta cotidiana como platillos gourmet, sin
embargo, no se toma en cuenta la importancia de su valor nutrimental para la salud humana. Los
insectos inciden en la salud de forma muy variable, pero en absoluto desdeñable. El objetivo de
este trabajo es analizar el contenido de macro y micronutrientes en cinco especies de chapulines
que son insectos de gran demanda tanto en comunidades rurales como en grandes ciudades. Los
resultados de los análisis muestran un alto contenido de proteínas que va de 70 a 75 %;
aminoácidos esenciales; lípidos mono y polinsaturados de 4 a 6 %; minerales que incluyen hierro,
cobre y zinc de 2 a 3 %; fibra de 7 a 10 % y carbohidratos solubles de 6 a 18 %. La ingesta de chapulines de las diferentes especies estudiadas por su contenido de proteínas pueden contribuir a la
disminución de la desnutrición proteico-calórica (kwashiorkor), proporcionando además ácidos
grasos esenciales Omega 3 y Omega 6; contienen minerales necesarios para evitar la anemia;
fibra para una buena digestión y carbohidratos solubles como fuente de energía. En conclusión,
el consumo de 5 ó 6 chapulines diariamente representa una buena fuente de nutrimentos. ¬
348
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3
Eficiencia de la biosíntesis de Proteínas y Lípidos por Insectos
Ma. del Carmen Herrera-Fuentes1, Virginia Melo-Ruíz2, Jorge Rivero-Martínez1,
Otto Hahn-San Vicente
1
2
UAM-I - Av. San Rafael Atlixco 186, México, D.F. C.P 09340
UAM-X. - Calz. del hueso 1100, Villa Quietud, México, D.F. C.P. 04960
El nopal es una planta xerófita de la familia de las cactáceas, propia de regiones áridas y
semiáridas, suculenta, cuyas partes básales con el tiempo se vuelven leñosas; el tallo en forma de
raquetas llamados cladodios y sus hojas reducidas a espinas las hacen resistentes a la sequía. Es
una planta con alto valor nutritivo, y de gran importancia ecológica para México. El nopal es
hospedero de diversos insectos fitófagos, varios de estos son considerados plaga, como la
palomilla Lanifera cyclades D. y el picudo del nopal Metamasius spinolae V., que llevan a cabo su
ciclo de vida en los cladodios viejos, ovipositan en la superficie y las larvas recién eclosionadas
barrenan los cladodios, permaneciendo ahí hasta alcanzar la etapa adulta; sin embargo las larvas
de estos insectos son utilizadas como alimento humano por su alto contenido proteico y de
grasas. El objetivo es demostrar la eficiencia de la biosíntesis de macronutrientes provenientes
del nopal por el metabolismo de estos insectos. Se realizó un estudio longitudinal en dos nopaleras en Milpa Alta, Distrito Federal, México. Los resultados obtenidos demuestran la
concentración que hacen las larvas de L.cyclades D. y M.spinolae V. de proteínas y lípidos con
respecto a lo que aportan los cladodios, siendo aproximadamente de cinco veces más. ¬
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3
Aspectos etnobotanicos del género valeriana en la estepa
patagónica Argentina
Gratti A.1, Beeskow A.2, Fernández S.1
1
LAPRONAP (Laboratorio de Productos Naturales Patagónicos) Universidad Nacional de la Patagonia
San Juan Bosco – Km.4 – Comodoro Rivadavia – Chubut – Argentina
2
CENPAT- CONICET- Bvard Brown 2915-9120 Puerto Madryn. Argentina
[email protected]
El género Valeriana (Valerianaceae) presente en casi todo el territorio argentino, está representado en la Patagonia por veinte especies, distribuidas mayormente en el sector andinopatagónico. Valeriana carnosa Smith y Valeriana clarionifolia Phill, representantes de distribución
esteparia del género en Patagonia, son reconocidos por el poblador con el nombre común de
ñanco -lahuen o ñanku-lawén y otros nombres comunes como: yerba del aguilicho, remedio del
águila, estiércol del paisano.
Como parte de un estudio integral de evaluación ecológica y etnobotánica de las especies
esteparias del género se abordó el estudio etnofarmacológico. La información obtenida procede
de diversas fuentes:
1. encuestas semiestructuradas realizadas a conocedores y responsables de herboristerías, 2.
referencias bibliográficas y 3.consulta de bibliografía etnobotánica en general y
etnofarmacológica en general.
Los resultados revelaron el uso indistinto de ambas especies de Valeriana por los pobladores,
para el tratamiento de diferentes afecciones, incluyendo el tratamiento de afecciones digestivas,
dolores de cabeza, desórdenes nerviosos del corazón, dolores reumáticos e insomnio.
Sobre forma de preparación y de uso surge la infusión para consumo y también para el uso
externo; informándose la preparación de una infusión de esta planta a la que se añadía huesos
fósiles y piedra bezoar del guanaco, para aliviar enfermedades del estómago.
Del análisis surge que los usos de estas especies son similares al resto de Valerianáceas, principalmente sedante y anti-espasmódicas. Investigaciones realizadas sobre las especies nativas
informan la presencia de principios activos similares a la especie V. officinalis, inscripta en diversas
farmacopeas para su uso oral como tranquilizante e inductora del sueño en el humano.
La importancia de las especies esteparias del género Valeriana en la medicina tradicional local y
el amplio espectro de afecciones para las cuales se utilizan, justifica una futura evaluación
fitoquímica y farmacológica comparativos, con el propósito de identificar los correspondientes
principios activos. ¬
350
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3
Composición química y actividad antioxidante de aceites
esenciales de cuatro variedades de Orégano argentino
P.R. Quiroga1, C.G. Riveros1, M.N. Granadé2, M.F. Gayol2, V. Nepote2, J.A. Zygadlo2,
N.R. Grosso1
1
Cátedra de Química Biológica, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Córdoba
2
ICTA-FCEFYN-UNC, IMBIV-CONICET, Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales, UNC.
[email protected]
Resumen
Hasta recientemente, los aceites esenciales han sido estudiados principalmente desde un
punto de vista de la química del aroma y fragancia siendo su principal uso para aromatizar alimentos y bebidas. Actualmente, los aceites esenciales y sus componentes han ganando interés
por ser productos naturales no peligrosos para la salud humana y con propiedades funcionales
en alimentos como su actividad antioxidantes en algunos casos. El objetivo del presente trabajo
fue analizar la composición química de aceites esenciales de cuatro variedades de orégano
producidas en Argentina (Compacto, Cordobés, Criollo y Mendocino) y evaluar su actividad
antioxidante. Los aceites esenciales fueron obtenidos por hidrodestilación. La composición
química de los aceites esenciales se determinó por cromatografía gaseosa acoplada a
espectrometría de masa. La actividad antioxidante de las esencias se determinó por oxidación
acelerada de aceite de canola almacenado a 60ºC con el agregado de 0.02% p/p de esencias de
orégano. Se utilizó como control aceite de girasol sin agregados y como referencia comparativa
aceite de canola con 0.02% p/p de BHT. Sobre los aceites almacenados se determinaron índices de
peróxido, p-anisidina y dienos conjugados. Del aceite esencial de orégano de la variedad
Compacto se identificaron 13 compuestos que representaron el 99.6% del total. Hidrato de
sabineno (33%), timol (26.60%) y γ-terpineno (12.4%) fueron los principales componentes. En la
variedad Cordobés se identificaron 26 compuestos que representaron el 95.8% del total del aceite
esencial. Timol (29.7%), Hidrato de sabineno (27%) y γ-terpineno (5.1%) fueron los principales. En la
variedad Criollo se identificaron 34 compuestos que representaron el 93.3% del aceite esencial. γterpineno (18.2%), Timol (14.9%), á-terpineno (7,73%) fueron los más abundantes. Finalmente, la
variedad Mendocino presentó 22 compuestos que comprendieron el 99.4% del aceite esencial.
Hidrato de sabineno (38,2%), timol (17.1%) y limoneno (7,3%) fueron los principales. Los aceites
esenciales que presentaron mayor actividad antioxidante fueron los de las variedades: Cordobés
y Compacto. De acuerdo a la composición química se puede decir que esta mayor actividad
antioxidante se debe a que ambas variedades tienen alto contenido en sabineno y timol. A su
vez, la variedad Compacto tuvo mayor actividad antioxidante que la variedad Cordobés. Esto se
puede deber a que esta variedad tiene mayor contenido de γ-terpineno y a un posible efecto
sinérgico del monoterpeno γ-terpineno con los monoterpenos timol e hidrato de sabineno. ¬
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3
Anti-inflammatory activity of Abarema cochliacarpos in an
experimental models of ulcerative colitis
Da Silva M.S.1, Sanchez-Fidalgo S.2, Talero E.2, Cárdeno A.2, da Silva M.A.3,
Almeida A.C.A.1, Socca E.A.R.1, Villegas W.4, Souza-Brito A.R.M.1,
Catalina Alarcón de La Lastra2
1
Campinas State University-UNICAMP
2
University of Seville
3
Alfenas Federal University
4
São Paulo State University
Aim
The aim of this study was to asses the effects of the butanolic fraction of methanolic extract
(AC of the bark of Abarema cochliacarpos (gomes) barneby & grimes (mimosaceae), a brazilian
native plant known popularly as “barbatimão”, in an acute and chronic ulcerative colitis models
induced by intra-colonic administration of trinitrobenzensulfonic acid (TNBS) in wistar rats.
Methods and Results
In the acute model, AC (100 and 150 mg/kg/day) was administered by gavage 48, 24 and 1 h
prior to the induction of colitis by 10 mg TNBS and 24 h later. The animals were sacrificed 48h
after. In the chronic model, 150 mg/kg of AC was administered daily, starting 24 h after 30mg
TNBS instillation, during 14 days. Experiments followed a protocol observed by the Animal Ethics
Committee of the University of Seville. The lesions were blindly scored according to macroscopic
and histological scales. The inflammatory response was also assessed by histological analysis and
myeloperoxidase activity (MPO). Mucosal anti-inflammatory cytokine (IL-10) and inducible
enzymes expression, iNOS and COX-2, as well as JNK activation, by western-blotting, were also
determined. Phytochemical studies by mass spectrometry showed that catechins were a major
component into condensate class of tannins. The NMR characterization shows the major constituent was (+)-catechins. In the acute model, AC100 and AC150 showed a significant decrease in
colon damage score as compared to the TNBS group (279.5±50.6 mm 2 and 258.5±49.9 mm2
respectively, p<0.05). Histological analysis showed that both doses of the extract improved the
microscopic structure. In addition, the MPO activity was decreased in a dose-dependent way
(2.9±0.2 U/mg tissue, p<0.01, and 2.3±0.1U/mg tissue, p<0.001, vs TNBS group, respectively). The
COX-2 and i-NOS expression were significantly diminished, as well as the involvement of JNK
signaling, although it was signi?cant at 150mg/kg only (p < 0.05 vs TNBS group). Moreover, IL-10
levels determination, by ELISA kit, obtained no significant results. In the chronic model, daily
administration of 150 mg/kg of AC showed a significant reduction of lesion as compared to TNBS
group (p<0.001). The histological analysis showed preserved some areas of the colonic mucosa
structure. Moreover, MPO activity was significantly reduced (p<0.05) and, IL-10 cytokine production was significantly increased (p<0.01) as compared the TNBS. Finally, COX-2 and iNOS expression also were attenuated, and JNK activation was diminished.
Conclusion
These data suggest that Abarema cochliacarpos possess active substances, which exert marked
protective effects in both acute and chronic experimental colitis, and justifying, at least in part,
the popular use of this plant to treat gastrointestinal diseases.
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Financial support
(IFS). ¬
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3
Antioxidant mechanisms involved in gastroprotection of two
Lamiaceae species essential oils.
Takayama C., Luiz-Ferreira A., de-Faria F.M., Almeida A.C.A., Dunder R.J., Socca E.R.,
Salvador M.J., Souza Brito A.R.M.
Introduction
There is evidence concerning the participation of reactive oxygen species (ROS) in the etiology
and physiopathology of human diseases, such as gastric ulcer. Many natural compounds extracted from plants have demonstrated biological activities. Among these various kinds of natural
substances, essential oils from aromatic and medicinal plants have been receiving particular
attention as natural antioxidants. Hyptis spicigera Lam. (catirina) and Rosmarinus officinalis L.
(alecrim) are two species of the Lamiaceae family used in folk medicine. Rosemary is the only
commercially available spice used as antioxidant. However, data regarding this activity of the
essential oil of this plant in vivo are not available. The aerial parts of H. spicigera are used to
flavour food and for the treatment of gastrointestinal disturbances, muscular pain, skin infections, as well as wounds and insect bites. With respect to this, in the present study the chemical
analysis and the antioxidant effect of the essential oils extracted from the aerial parts of H.
spicigera (OEH) and R. officinalis (OEA) are reported in vivo.
Methods and Results
The essential oils were chemically characterized by the means of gas chromatography-mass
spectrometry (GC-MS). The OEH had three main components: alpha-pinene (50,8%), cineole
(20,3%) and beta-pinene (18,3%). OEA major compounds were cineole (28,5%), camphor (27,7%)
and alpha-pinene (21,3%). Male Unib: WH rats (n=7, 150-250g) from Central Animal House of the
State University of Campinas (CEMIB-UNICAMP; SP, Brazil) were used. The experimental protocols were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee (CEEA/IB/UNICAMP,
nº1537-1). The role of the essential oils to reduce or prevent the oxidative stress was evaluated on
rat gastric mucosa submitted to absolute ethanol-induced (p.o) gastric ulcer model (Morimoto
et. al., 1991). Both OEH and OEA provided significant (p<0,01) gastric protection at doses of 100
mg/Kg (68,2%) and 50 mg/Kg (75,8%) respectively. OEH and OEA reduced (p<0,05) myeloperoxidase (MPO) activity, a marker for free radical generation caused by polymorphonuclear neutrophil tissue infiltration, 61,3% and 58% respectively after ethanol treatment. The levels of thiobarbituric acid (TBA), as index of lipid peroxidation, were also determined. Pretreatment with both
essential oils inhibited (p<0,01) TBA reactive substances in the gastric mucosa OEH reduced
82,8% and OEA, 83,1%. Data were expressed as means ± S.E.M. and statistical significance was
determined by one-way analysis of variance followed by Tukey’s test with p<0,05 defined as
significant.
Conclusion
The present study shows the gastroprotective effect of essential oils from aerial parts of H.
spicigera and R. officinalis against lesions induced by absolute ethanol, whose mechanisms are
related to ROS generation. This protective effect can be related to OEH and OEA antioxidant
properties provided by the decrease of the MPO activity and levels of lipoperoxides.
Key-words: Essential oil, Hyptis spicigera, Rosmarinus officinalis, gastroprotection, antioxidant activity. ¬
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3
Effetti avversi di fitoterapici nel cane e nel gatto
Russo R.1, Malafronte N.2, Severino L.1
1
Dipartimento di Patologia e Sanità Animale, Sezione di Tossicologia, Facoltà di Medicina Veterinaria,
Università degli Studi di Napoli, via Delpino 1, 80137, Napoli, Italia
2
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Facoltà di Farmacia,
Università di Salerno, via Ponte Don Melillo, 84084, Fisciano (SA), Italia.
Negli ultimi anni, in Italia è aumentato notevolmente il numero di persone che richiede per sé o
per il proprio animale domestico l’utilizzo di medicine non convenzionali (MNC), tra cui in particolare l’uso di piante medicinali e di prodotti a base di erbe, per la cura di svariate patologie. Le
proprietà medicamentose delle piante utilizzate in fitoterapia sono dovute alla notevole varietà
di principi attivi che possono essere presenti nel vegetale stesso. I prodotti naturali, spesso del
tutto equivalenti sul piano terapeutico ai farmaci di sintesi, trovano largo impiego in medicina
veterinaria come antibatterici, antimicotici, antiparassitari, disinfettanti, immunostimolanti.
Tuttavia, oltre alla comprovata efficacia, per molte piante medicinali sono state segnalate reazioni avverse la cui possibile insorgenza, spesso, è completamente sconosciuta a chi fa uso di
prodotti fitoterapici; inoltre, molte persone che fanno abitualmente uso di prodotti fitoterapici
tendono ad utilizzare tali prodotti anche per i propri animali da compagnia con o senza il consenso del medico veterinario nell’erronea convinzione che naturale sia uguale a sicuro. Queste
consuetudini aumentano i rischi di possibili interazioni con farmaci di sintesi, reazioni allergiche,
ecc. Controindicazioni specifiche possono, inoltre, essere rappresentate da patologie pregresse o
in atto (ad esempio: ulcera peptica, insufficienza renale o epatica, ecc.) e da interventi chirurgici
che, potendo determinare modificazione della cinetica dei principi attivi, possono aumentare i
rischi di effetti collaterali.
Gli Autori, nel presente lavoro, descrivono alcune reazioni avverse che possono derivare dalla
somministrazione a scopo terapeutico di prodotti naturali nei piccoli animali domestici. Infine,
viene sottolineato come i proprietari degli animali devono essere informati che il ricorso alla
terapia con piante medicinali non comporta l’assenza di rischi, in particolare quando i prodotti
fitoterapici sono assunti contemporaneamente a farmaci di sintesi. L’utilizzo di tali prodotti deve
essere prescritto da un veterinario esperto in fitoterapia; la F.N.O.V.I. (Federazione Nazionale
Ordini Veterinari Italiani), nel 2005, ha stabilito che il ricorso alle MNC veterinarie va considerato a
tutti gli effetti un atto medico veterinario e, pertanto, di sola pertinenza del medico veterinario
esperto in tali discipline.
Bibliografia
1. Lans C., Turner N., Khan T., Medicinal plant treatments for fleas and ear problems of cats and dogs in British
Columbia, Canada, Parasitol. Res., 2008, 103: 889-898.
2. Lee K.W., Yamato O., Tajima M., Kuraoka M., Omae S., Maede Y., Hematologic changes associated with the
appearance of eccentrocytes after intragastric administration of garlic extract to dogs, Am. J. Vet. Res., 2000, 61:
1446-1450.
3. Means C., Selected herbal hazards, Vet. Clin. Small Anim., 2002, 32:367-382.
4. Severino L., Russo R., Autore G., Marzocco S., De Tommasi N., Use of phytotherapics in dogs and cats,
Pharmacologyonline, 2008, 2:12-21.
5. Viegi L, Pieroni A, Guarrera PM, Vangelisti R. A review of plants used in folk veterinary medicine in Italy as basis for
a databank. Journal of Ethnopharmacology, 2003, 89, 221-244. ¬
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3
Effetti avversi di piante medicinali negli animali da reddito
Severino L.1, Russo R.1, De Tommasi N.2
1
Dipartimento di Patologia e Sanità Animale, Sezione di Tossicologia, Facoltà di Medicina Veterinaria,
Università degli Studi di Napoli, via Delpino 1, 80137, Napoli, Italia
2
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Facoltà di Farmacia,
Università di Salerno, via Ponte Don Melillo, 84084, Fisciano (SA), Italia
Negli ultimi anni, in Italia è in aumento il ricorso alle medicine non convenzionali (MNC) per la
cura di svariate patologie nelle specie di interesse zootecnico. In particolare, le piante medicinali
e i prodotti a base di erbe trovano largo impiego in medicina veterinaria principalmente come
antibatterici, antimicotici, antiparassitari e disinfettanti; ad alcuni fitocomplessi (es. Echinacea
spp.) vengono inoltre attribuite proprietà immunostimolanti. Studi recenti che evidenziano
l'efficacia di piante medicinali per la profilassi di svariate patologie hanno contribuito a riconoscere la fitoterapia come una possibile alternativa ai farmaci di sintesi correntemente utilizzati
nell'allevamento intensivo ed in particolare nella zootecnia biologica dove è d'obbligo ridurre al
minimo l'utilizzo dei farmaci veterinari allopatici. Nel caso di insorgenza di patologie di varia
origine devono, infatti, essere utilizzati come farmaci di prima scelta prodotti fitoterapici (estratti
vegetali, essenze ed olii) nonché prodotti omeopatici e/o oligoelementi quali sodio, calcio,
fosforo, magnesio e zolfo che non necessitano di alcun periodo di sospensione. Tuttavia, oltre
alla comprovata efficacia, per molte piante medicinali sono state segnalate reazioni avverse la cui
possibile insorgenza, spesso, è completamente sconosciuta sia all'allevatore che al veterinario
aziendale nella convinzione che naturale sia uguale a sicuro.
Gli Autori, nel presente lavoro, descrivono alcune delle reazioni avverse che più frequentemente si verificano in seguito alla somministrazione di prodotti naturali a base di piante medicinali
negli animali allevati. Essi sottolineano come gli operatori del settore (medici veterinari, allevatori
ecc.) devono essere informati che il ricorso alla terapia mediante somministrazione di prodotti
naturali di origine vegetale non comporta la totale assenza di rischi, in particolare quando sono
assunti contemporaneamente anche farmaci di sintesi. L'utilizzo di tali prodotti deve essere
prescritto da un veterinario esperto in fitoterapia; la F.N.O.V.I. (Federazione Nazionale Ordini
Veterinari Italiani), nel 2005, ha stabilito che il ricorso alle MNC veterinarie va considerato a tutti
gli effetti un atto medico veterinario e, pertanto, di sola pertinenza del medico veterinario
esperto in tali discipline.
Bibliografia
1. Abebe W. Herbal medication: potential for adverse interactions with analgesic drugs. Journal of Clinical Pharmacy
andTherapeutics, 2002, 27, 391-401.
2. Lans C, Turner N, Khan T, Brauer G, Boepple B. Ethnoveterinary medicines used for ruminants in British Columbia,
Canada. J. Ethnobiol. Ethnomedicine, 2007, 26:3-11.
3. Poppenga R.H., Risks associated with the use of herbs and other dietary supplements, Vet. Clin. North Am. Eq.
Pract., 2001, 17:455-477.
4. Severino L., Russo R., L'impiego della medicina non convenzionale negli animali da reddito, www.zootec.it,
05/12/2007.
5. Viegi L, Pieroni A, Guarrera PM, Vangelisti R. A review of plants used in folk veterinary medicine in Italy as basis for a
databank. Journal of Ethnopharmacology, 2003, 89, 221-244. ¬
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Quinolizidine alkaloid profiles in different organs of Lupinus
aschenbornii
Edith Montes Hernández1, María Luisa Corona Rangel1, Aidee Encarnación Corona1,
Jorge Alberto Cantor del Angel1, Jesús Arnoldo Sánchez López1, Michael Wink2,
Kalina Bermúdez Torres1
1
Centro de Desarrollo de Productos Bióticos. Instituto Politécnico Nacional.
Apartado Postal 24 Yautepec, Morelos. México. C.P. 62731
2
Ruprecht-Karl-Universität Heidelberg, Heidelberg, Germany. 69120
[email protected]
The genus Lupinus, (Family Fabaceae) is widely distributed on the American continent, in North
Africa and the Mediterranean region. This genus is characterized by the presence of quinolizidine
alkaloids (QA) as part of a defense strategy against herbivores. It has been reported that
Mexican Lupinus species present specific profiles of these compounds, however the factors
which determine these profiles are mostly unknown. The QAs are constitutive, but their presence
and abundance vary during development and depend on plant organs. The aim of present work
was to evaluate the content of QA in different organs (stem, leaf, flower, pod, root and seed) of
Lupinus ascherbornii by Gas-liquid Chromatography-Mass Spectrometry (GLC-MS). QAs were
identified according to their mass fragmentation patterns, in combination with their indicative
Kovats retention index (KI). QAs found in stem were sparteine (32%), unidentified compound
with KI 2083 (n.i 2083) (21%) and lupanine (19%), followed by minor alkaloids, such as Nformylangustifoline, n.i 2476, multiflorine and n.i. 2493 (9%, 6%, 6% and 5%, respectively). QAs in
leaf were sparteine (80%) followed by n.i 1858 and n.i.1865 and angustifoline (10%, 5% and 5%,
respectively). The major QA present in flower was sparteine (73%) and minor were lupanine, n.i
2083, N- formylangustifoline, n.i 2476, multiflorine and n.i 2497 (9%,5%, 4%, 3%, 2% and 3%, respectively). In pods, two alkaloids were identified: sparteine with 96% and n.i 2484 with 4%. Root
presents only n.i 2083 (100%) and finally in seed several compounds were identified as major QAs:
N- formylangustifoline, n.i 2495, n.i. 2099, multiflorine and n.i 2869 (17%, 15%, 15%, 11%, 10%, respectively). QA profiles in organs are different, while leaf, stem, flower and pod store sparteine as
main QA, which have been reported in most of the American species. Seed contain several ester
alkaloids. It is known that esters of QA and other QAs are used during germination as nitrogen
sources, in addition to conferring a bitter taste. We conclude that the QA profile is specific and
correlates with the function of each organ. ¬
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3
Actividad antiparasitaria de Euphorbia serpyllifolia sobre el
citoesqueleto y enquistamiento de Giardia lamblia
Lourdes Hernández De Jesus1, Radeshma García González1,
Gloria de la Luz León Ávila2, Blanca Barragán Huerta3, Verónica Rodríguez López4
1
Departamento de Farmacia
Departamento de Parasitología
3
Departamento de Química Orgánica, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional.
Dirección Av. Wilfrido Massieu S/N, Unidad Profesional Adolfo López Mateos CP 07738 México D.F.
[email protected]
4
Facultad de Farmacia. Universidad Autónoma del Estado de Morelos 62209 México
2
Las enfermedades parasitarias son un problema de salud pública debido a que están bien
adaptados, son difíciles de destruir, además de que los fármacos empleados para estos casos no
son efectivos y presentan efectos colaterales. Giardia lamblia es un parásito protozoario flagelado que comúnmente es aislado en las heces de los humanos, asociado con diarrea, habita el
intestino delgado ya que coloniza el duodeno y una porción del yeyuno de los seres humanos. La
infección se inicia con la ingesta de los quistes en los alimentos, estos se desenquistan en el
intestino superior liberando los trofozoítos, la forma del parásito que prolifera en el intestino y es
responsable de los síntomas de la enfermedad como la diarrea. El mejor control de giardiasis está
dado por el uso de medicamentos como albendazol y metronidazol entre otros, cuyos principios
activos no son totalmente eficaces, registrándose cepas resistentes a estos. Una alternativa al
uso de fármacos sintéticos es el empleo de especies vegetales utilizadas en la Medicina
Tradicional contra parásitos, ya que estas elaboran metabolitos secundarios con actividad
biológica. El presente estudio tiene como objetivo observar el efecto antiparasitario que presenta el extracto metanólico de las partes aéreas de Euphorbia serpyllifolia sobre el citoesqueleto
de los trofozoitos y quistes de Giardia lamblia utilizando microscopia de barrido y confocal. Se
realizó una curva de crecimiento para observar el comportamiento que presenta Giardia lamblia
al ser expuesto el extracto y se determino su Concentración Inhibitorio CI 50 a las concentraciones
de 50, 100 y 200μg/mL, obteniendo un efecto inhibitorio del crecimiento de 136,36μg/mL con el
extracto metanólico de Euphorbia serpyllifolia. Al realizar el análisis microscópico, empleando
microscopia electrónica de barrido y confocal de Giardia lamblia se observó un daño producido
por el extracto sobre el citoesqueleto, presentando una desintegración celular, perforaciones y
malformaciones de esta, al igual que en los trofozoitos inducidos a enquistamiento, muestran la
pérdida de flagelos, así como vacuolas en la membrana y en el disco suctorio. Los resultados de
esta evaluación confirman que el extracto vegetal utilizado posee un potencial antiparasitario. ¬
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3
Evaluación genotóxica de un extracto metanólico de
Verbascum thapsus empleando el ensayo de micronúcleos en
médula ósea de ratón
Franco Escobar1, María Carola Sabini1, Silvia Zanon1, Noelia Cariddi1, Carlos Tonn2,
Liliana Sabini1
1
Dpto. Microbiología. FCEFQyN, UNRC, Río Cuarto, Cba. Argentina
2
UNSL, San Luis. Argentina
[email protected]
Verbascum thapsus (Ambay) es una planta silvestre que puede crecer en diferentes tipos de
suelos, en varias regiones y registra propiedades etnobotánicas. Este vegetal ha sido usado
desde tiempos antiguos como hierba medicinal. Se ha indicado que sus hojas y flores poseen
propiedades expectorantes, emolientes y además ha sido empleado en tratamientos de afecciones respiratorias. A pesar de los numerosos usos del ambay en la medicina folclórica, muchos de
ellos aún no han sido verificados científicamente.
El objetivo de este trabajo fue determinar la actividad genotóxica y citotóxica de un extracto
metanólico de Verbascum thapsus, usando el ensayo de micronúcleos en médula ósea de ratón.
El estudio se llevó a cabo empleando ratones BALB/c de dos meses de vida y con un peso
promedio de 20 g. Se conformaron 5 grupos de 6 individuos, cada uno con igual cantidad de
machos y hembras. Los animales recibieron, mediante inyección intraperitoneal, 0,2 ml de extracto metanólico (100, 300 y 500 mg kg -1), solución fisiológica (control negativo), o ciclofosfamida, 20 mg kg-1 (control positivo). Los animales fueron sacrificados a las 24 h y se determinó el
índice de genotoxicidad: número de eritrocitos policromáticos micronucleados en un total de
1000 eritrocitos policromáticos. Como criterio de citotoxicidad se tomó la significación estadística
de la disminución de la proporción EPC/ENC (eritrocitos policromáticos / eritrocitos
normocromáticos). La significación estadística se determinó mediante un análisis de varianza
(ANOVA) mediante la aplicación del software GraphPad Prism 5.0.
Los índices de genotoxicidad de los grupos tratados con 100, 300 y 500 mg kg -1 de extracto
metanólico, que fueron 2,17 ± 1,60; 2,00 ± 0,89; 2,00 ± 1,55 respectivamente, no mostraron
diferencias significativas respecto del grupo tratado con solución fisiológica (2,5 ± 0,55). Los
ratones tratados con ciclofosfamida mostraron un valor elevado de índice de genotoxicidad,
igual a 11,7 ± 1,75 (p < 0,001). El análisis estadístico de la proporción EPC/ENC no reveló diferencias
en ningún grupo de estudio, mostrando valores de 1,77 ± 0,12; 1,79 ± 0,23 y 1,74 ± 0,15 en los
ratones tratados con 100, 300 y 500 mg kg -1 respectivamente, y de 1,69 ± 0,14 para los ratones
tratados con solución fisiológica. En todos los grupos no se observó diferencia significativa de
toxicidad entre los sexos, tanto machos como hembras respondieron de forma similar independientemente del tratamiento.
Este estudio demuestra que el extracto metanólico de Verbascum thapsus no contiene compuestos genotóxicos ni citotóxicos ya que no produjo un aumento significativo en la frecuencia
de micronúcleos de los eritrocitos policromáticos de la médula ósea y no modificó la relación
EPC/ENC con respecto al control negativo. Los resultados obtenidos amplían los conocimientos
citogenéticos preclínicos de este producto y respaldan su empleo en la medicina natural. ¬
359
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3
Evaluación de los efectos citogenotóxicos del extracto acuoso
frío de Achyrocline satureioides por el test de Allium cepa l.
Sabini M.C.1, Bachetti R.A.1, Cariddi L.N.1, Escobar F.M.1, Sutil S.B.1, Contigiani M.S.2,
Zanon S.M.1, Sabini L.I.1
1
Dpto. Microbiología e Inmunología, UNRC. Ruta 36 Km 601. (5800). Río Cuarto, Córdoba, Argentina
2
Instituto de Virología. UNC, Enf. Gordillo Gómez S/N. (5000). Córdoba, Argentina
[email protected]
La familia Compositae (Asteraceae) incluye algunas de las plantas más antiguas y valoradas
como medicinales. Es conocido que ciertos géneros presentan compuestos tóxicos, tales como
los ácidos tánico y cianhídrico. Dentro de esta familia se destaca Achyrocline satureioides por
poseer un amplio espectro de propiedades bioactivas, tales como antioxidante, analgésica,
antiinflamatoria, antiespasmódica, sedativa, antiviral y antimicrobiana. Por todo lo expuesto, es
de primordial importancia conocer la citotoxicidad y genotoxicidad de A. satureioides. El objetivo
de este trabajo fue evaluar los cambios cualitativos y cuantitativos, macro y microscópicos
inducidos por el tratamiento con el extracto acuoso frío (EAF) de A. satureioides en células
vegetales. Se emplearon ápices de raíces de cebolla de la especie Allium cepa L. crecidas en agua
mineral, en oscuridad, con aireación y a temperatura constante de 25 ± 0,5ºC. El EAF se utilizó a
las concentraciones: 0,5; 1; 2; 3 y 4 mg/ml. Se incluyeron controles positivo (paracetamol 0,3
mg/ml) y negativo (agua mineral). Estas concentraciones fueron aplicadas por diferentes tiempos: 2 días, 5 días y, 2 días seguidos por 3 días más con agua (reversión). La significación
estadística se determinó mediante un análisis de varianza (ANOVA) mediante la aplicación del
software GraphPad Prism 5.0.
Del análisis mascroscópico se pudo observar que no hubo diferencias marcadas entre las raíces
tratadas con extracto, presentando retraso en el desarrollo radicular, con una inhibición mayor o
igual al 50%, (p<0,05). Hubo raíces con gelificación y necrosis en frecuencia variable y se observó
pigmentación en la mayoría de las raíces tratadas. A nivel microscópico, todas las concentraciones indujeron una disminución de la división celular. El análisis estadístico de los índices mitóticos
de los bulbos tratados durante 2 d (IM1) y 5 d (IM2), mostró que no hubo diferencia significativa
entre el control negativo con respecto a 0,5 y 1 mg/ml, por lo que estas concentraciones no
ejercieron toxicidad. Por el contrario, sí hubo diferencia entre el control negativo y los tratamientos con 2, 3 y 4 mg/ml. Con respecto a los valores de IM3 (reversión) no se demostró diferencia
significativa entre tratamientos, ni de estos respecto al control negativo. Por otra parte, al
comparar los valores de IM1 con IM3 para cada concentración, se pudo observar recuperación de
la división celular, indicando la capacidad de las raíces de depurar la acción tóxica del EAF. El
análisis de los índices de fases para 2 y 5 días, mostró que la división celular en las células tratadas
con 0,5 y 1 mg/ml tuvo un comportamiento igual al control negativo, en tanto que para 2, 3 y 4
mg/ml se observó modificación de las etapas del ciclo celular, observándose que todas las células
que entran en mitosis están detenidas en profase, revelando un arresto de la división celular en
profase. Los estudios de reversión demostraron recuperación de la mitosis. El aporte de esta
investigación otorga garantía de inocuidad en la aplicación de A. satureioides para combatir
patologías de origen microbiano, ayudando a definir toxicidad selectiva. ¬
360
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Estudio de las actividades antiviral y virucidal de extractos
acuosos de Baccharis articulata frente a virus Herpes suis
Torres C.V., Domínguez M.J., Carbonari J.L., Sabini M.C., Sabini L.I., Zanon S.
Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales.
Universidad Nacional de Río Cuarto. Ruta 36 Km. 601. (5800). Río Cuarto, Córdoba. Argentina.
[email protected]
La especie vegetal Baccharis articulata (nombre vulgar carqueja) es nativa del continente
americano y predominante en la región serrana de la provincia de Córdoba. La medicina tradicional otorga a este vegetal importantes propiedades terapéuticas siendo empleada para el tratamiento de problemas digestivos principalmente hepáticos, en infecciones urinarias y como
antiséptico en lesiones. Diversas investigaciones han demostrado su capacidad antibacteriana y
antifúngica. Estos antecedentes impulsaron el estudio de la acción antiviral de sus extractos
acuosos frente al virus Herpes suis tipo 1, íntimamente relacionado a Herpes simplex tipos 1 y 2. La
obtención del extracto acuoso frío (EAF) se realizó mezclando material vegetal triturado con
agua destilada e incubando a 4ºC por 48 h; para el extracto acuoso caliente (EAC) se procedió de
igual manera excepto que se incubó a 70ºC. Para evaluar la actividad antiviral de los mismos se
empleó la Máxima Concentración No Citotóxica (MCNC) que soportó el cultivo celular Vero. Se
cuantificó la capacidad de inhibir la replicación del virus durante la adsorción y penetración viral
y, posterior a estos eventos. La inhibición viral del EAF y EAC en los tratamientos durante la
adsorción y penetración viral fueron de 25,6% y 54% respectivamente; cuando los mismos fueron
incorporados post-adsorción, revelaron valores de 33% (EAF) y 6,8% (EAC). Por otra parte, los
cultivos celulares se incubaron con ambos extractos durante 2 h previo a la infección viral,
determinándose una disminución del título viral de 0% y 11% para EAF y EAC respectivamente.
Se investigó también su capacidad de inactivar el virus extracelularmente por lo que suspensiones virales se incubaron 2 h a 37ºC con cada extracto a diferentes concentraciones (MCNC 1X y
2X), antes de la infección de los cultivos. El EAF ejerció una inactivación viral del 31,46% y 97,84% a
la MCNC 1X y 2X respectivamente, mientras que para el EAC se obtuvo valores de 80% y 96% a las
mismas MCNC.
Los resultados obtenidos en este trabajo revelan que ambos extractos no ejercen una
inhibición importante durante la adsorción y penetración del virus Herpes suis a las células como
tampoco en los eventos posteriores que acontecen dentro de la célula. Tampoco inducen un
estado antiviral en el cultivo celular, que generen una refracción a la infección por el virus. Por el
contrario, ambos extractos ejercen una acción virucidal importante cuando la suspensión viral
fue tratada con concentraciones mayores a la MCNC.
Estos resultados demuestran la capacidad desinfectante de los extractos acuosos frío y
caliente de Bacccharis articulata y aportan un valioso conocimiento a las propiedades
etnofarmacológicas. ¬
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3
Antioxidant mechanisms involved in gastroprotection of two
Lamiaceae species essential oils.
Takayama C., Luiz-Ferreira A., de-Faria F.M., Almeida A.C.A., Dunder R.J.,
Socca E.R., Salvador M.J., Souza Brito A.R.M.
Introduction
There is evidence concerning the participation of reactive oxygen species (ROS) in the etiology
and physiopathology of human diseases, such as gastric ulcer. Many natural compounds extracted from plants have demonstrated biological activities. Among these various kinds of natural
substances, essential oils from aromatic and medicinal plants have been receiving particular
attention as natural antioxidants. Hyptis spicigera Lam. (catirina) and Rosmarinus officinalis L.
(alecrim) are two species of the Lamiaceae family used in folk medicine. Rosemary is the only
commercially available spice used as antioxidant. However, data regarding this activity of the
essential oil of this plant in vivo are not available. The aerial parts of H. spicigera are used to
flavour food and for the treatment of gastrointestinal disturbances, muscular pain, skin infections, as well as wounds and insect bites. With respect to this, in the present study the chemical
analysis and the antioxidant effect of the essential oils extracted from the aerial parts of H.
spicigera (OEH) and R. officinalis (OEA) are reported in vivo.
Methods and Results
The essential oils were chemically characterized by the means of gas chromatography-mass
spectrometry (GC-MS). The OEH had three main components: alpha-pinene (50,8%), cineole
(20,3%) and beta-pinene (18,3%). OEA major compounds were cineole (28,5%), camphor (27,7%)
and alpha-pinene (21,3%). Male Unib: WH rats (n=7, 150-250g) from Central Animal House of the
State University of Campinas (CEMIB-UNICAMP; SP, Brazil) were used. The experimental protocols were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee (CEEA/IB/UNICAMP,
nº1537-1). The role of the essential oils to reduce or prevent the oxidative stress was evaluated on
rat gastric mucosa submitted to absolute ethanol-induced (p.o) gastric ulcer model (Morimoto
et. al., 1991). Both OEH and OEA provided significant (p<0,01) gastric protection at doses of 100
mg/Kg (68,2%) and 50 mg/Kg (75,8%) respectively. OEH and OEA reduced (p<0,05) myeloperoxidase (MPO) activity, a marker for free radical generation caused by polymorphonuclear neutrophil tissue infiltration, 61,3% and 58% respectively after ethanol treatment. The levels of thiobarbituric acid (TBA), as index of lipid peroxidation, were also determined. Pretreatment with both
essential oils inhibited (p<0,01) TBA reactive substances in the gastric mucosa - OEH reduced
82,8% and OEA, 83,1%. Data were expressed as means ± S.E.M. and statistical significance was
determined by one-way analysis of variance followed by Tukey’s test with p<0,05 defined as
significant.
Conclusion
The present study shows the gastroprotective effect of essential oils from aerial parts of H.
spicigera and R. officinalis against lesions induced by absolute ethanol, whose mechanisms are
related to ROS generation. This protective effect can be related to OEH and OEA antioxidant
properties provided by the decrease of the MPO activity and levels of lipoperoxides.
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3
Witio web de plantas silvestres comestibles y medicinales
Coral Barrios Silva
Ingeniera Agrónoma
Profesor adjunto al ISP “Rafael María de Mendive”
Profesora de Proyectos Informáticos
Departamento de Proyectos Informáticos
Teléfono: 729295
[email protected]
Instituto Politécnico de Informática ¨ Carlos Hidalgo Díaz ¨
Teléfono: 768304
Km. 69 Carretera Central
Montequín. Pinar del Río
2010
“Año del 50 Aniversario de la Revolución”
Resumen
La lista de plantas silvestres comestibles es enorme, muchas de ellas, ahora consideradas
silvestres y malas hierbas, fueron cultivadas durante siglos para la alimentación humana y dolencias de muchos males. De los países Antillanos, la flora de la República de Cuba es la más rica en
especies, además posee un alto por ciento de especies que solo viven en nuestro territorio
(endémicas) 51,3%, sin embargo no se ha explotado todo el potencial alimentario y medicinal que
poseen.
Es por ello que pretendemos con este sitio Web brindar la posibilidad de mostrarles plantas
que han servido como alimento y medicina natural a nuestra población, muy especial, a los
antiguos nativos pobladores, a nuestros mambíes y al Ejército rebelde como fuente eficaz para la
supervivencia. El mismo recoge la mayoría de las plantas silvestres posibles a utilizar en la
alimentación humana y para la cura de algunas dolencias, por lo que no excluimos la posibilidad
que existan otras no citadas por nosotros que hallan sido utilizadas por el hombre en periodos
difíciles.
Consideramos que el momento es oportuno para fomentar la educación alimentaría adecuada
que requiere cada hombre, mujer y niño en nuestra patria y posibilitar que se conozca la utilidad
de la flora que los rodea para que se pueda obtener los mayores beneficios de ella, sin olvidar el
cuidado y la conservación de la misma, ya que nos proporciona entre sus múltiples utilidades
alimento y albergue, desarrollando una conciencia ambiental hacia lo que nos rodea.
Puesto en práctica en el Proyecto Socio-Cultural Silva, municipio San Juan y Martínez, Pinar del
Río. ¬
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Tecnología de obtención del extracto hidroalcohólico de
Plectranthus amboinicus Lour Spreng y validación del método
espectrofotométrico para la determinación de fenoles totales
en el control de calidad
Rosa Menéndez Castillo, Caridad M. García Peña, Orestes D. López Hernández,
Jorge Rodríguez Chanfrau, María L. González Sanabria
Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos. CIDEM
[email protected]
Resumen
Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng. conocido popularmente en Cuba como Orégano
francés Orégano de la tierra, perteneciente a la familia Lamiaceae, es una planta aromática nativa
del Asia Oriental e introducida en nuestro país, otras Antillas y algunos países de América
Continental, se le atribuyen diferentes propiedades terapéuticas, entre ellas expectorante y
antitusiva siendo las mismas corroboradas científicamente. El presente trabajo tuvo como
objetivos la evaluación tecnológica del extracto hidroalcohólico mediante diferentes variantes de
extracción con etanol al 30%, la validación del método analítico empleando el reactivo Tungstofosfomolibdico y como sustancia de referencia el ácido Tánico para la determinación de fenoles
totales .
La relación de extracción dinámica 1:9 (masa material vegetal: solvente) con un rendimiento de
73% fue seleccionada demostrándose que el procedimiento desarrollado a escala de laboratorio
es reproducible a nivel industrial, así como las especificaciones de calidad microbiológicas, por
otra parte se comprobó que el método analítico empleado para el control de calidad del extracto
resultó ser específico, lineal, preciso y exacto en el intervalo de las concentraciones estudiadas. ¬
364
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3
In vivo photoprotective effect of pistachio (Pistacia vera l., var.
bronte) seeds and skins
Martorana M.1, Arcoraci T.1, Rizza L.2, Bonina F.2, Bisignano C.1, Saija A.1,
Tomaino A.1
1
Department Farmaco-Biologico, Faculty of Pharmacy, University of Messina,
Vill. Annunziata, 98168 Messina
2
Department of Pharmaceutical Science, Faculty of Pharmacy, University of Catania,
Viale Andrea Doria, 95125 Catania
Inflammatory processes following acute or chronic UV-light skin irradiation are known to be
mediated by overproduction of Reactive Oxygen Species (ROS), which can react with DNA,
proteins and fatty acids, causing oxidative damage and impairment of endogenous antioxidant
systems (Campos M.B.G. et al., 2006, Photochem Photobiol., 82(3):683-688).
Topical administration of enzymatic and non-enzymatic antioxidants is an effective strategy for
protecting the skin against UV-mediated oxidative damage. Plant polyphenolic compounds have
a broad biological profile partially related to their free-radical scavenging capability, which is
responsible for their protective effect against oxidative stress conditions, including UV-induced
damage.
The aim of this study was to evaluate the in vivo photoprotective activity of two chemically
characterized extracts obtained from pistachio (Pistacia vera L., var. Bronte) seeds and skins,
where the mean active components are anthocyanins, flavonols, flavanones, flavan-3-ols, isoflavones and phenolic acids. In addition, we investigated by means of in vitro assays the metalchelating activity, the reducing power and the inhibition of tyrosinase activity of the two extracts. The photoprotection was evaluated by determining the ability of the two extracts to
reduce, when topically applied, UVB-induced skin erythema in healthy human volunteers
(Bjerring P. et al., 1993, Skin Pharmacol., 6:187-192).
The results have shown that both seed and skin extracts are able to interfere with the inflammatory processes induced by UVB light, even if in different degree. The pistachio seeds extract
shows an activity similar to that of tocopheryl acetate, used as reference substance; in fact, the
percentage of erythemal inhibition (PIE value) was 32% and 22% for pistachio seeds extract and
tocopheryl acetate, respectively. Whereas pistachio skin extract possesses the best activity
against the UVB-induced skin erythema (PIE: 65%).
These data could be explained by the high difference in reducing power between seeds and
skins extracts (EC 50: 1.48±0.11 and 0.017±0.0009 mg/ml, respectively). In the in vitro metalchelating activity assay, both extracts have shown a high ability to chelate the ferrous ions with
IC50 values of 0.20±0.01 and 0.22±0.01 mg/ml for seeds and skins extracts respectively. Only the
skins extract showed an excellent inhibition of tyrosinase activity (IC 50: 0.19±0.03 mg/ml), instead
that one of seeds extract was lower (IC 50: >3.5 mg/ml). These data demonstrate that pistachio
extracts afford good photoprotection against UVB-induced skin damage and suggest interesting
applications in both anti-photoageing and after-sun cosmetic products. ¬
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Antiproliferative activity of diterpenes from Peltodon longipes
Fronza M.1, Günther S.2, Murillo R.3, Lamy E.4, Heinzmann B.5, Laufer S.6, Merfort I.1*
1
1
Inst. Pharm. Science, Pharm. Bioinformatics, University Freiburg, Germany
3
Escuela de Quimica and CIPRONA, Universidad de Costa Rica, San José, Costa Rica
4
Dept. Environmental Health Science, University Freiburg, Germany
5
Departamento de Farmácia Industrial, Universidade Federal de Santa Maria, Brazil
6
Dept. Pharm./Medicinal Chemistry, University of Tübingen, Germany
* [email protected]
Peltodon longipes (Labiatae), also known as “baicuru amarelo” in south of Brazil, has been
used in folk medicine as an anti-inflammatory and antiseptic remedy (1). The effective compounds
responsible for these effects are still unknown. Here we report the isolation and structure elucidation of 12 diterpenes from the abietane type. 12,14-dihydroxy-11-methoxyabieta-8,11,13-trien-7one was isolated for the first time, whereas the other diterpenes have already been known.
Structure elucidation was based on 1D-( 1H and 13C) and 2D NMR experiments (COSY, HMQC,
HMBC and NOESY) as well as EIMS. Cytotoxic activity of these compounds was evaluated by MTT
against two different cancer cell lines, MIA PaCa-2 (Human Pancreatic Carcinoma Cell Line) and
MV3 (Human Melanoma Cell Line). 7á-acetoxyroyleanone, the major compound, showed the
highest cytotoxic activity with an IC 50 value of 4.7 and 7.5 μM, respectively. Moreover, studies of
7á-acetoxyroyleanone on the cell cycle resulted in an significant arrest in the S-phase after 24 h of
treatment. However, those cyclin dependent kinases that mainly regulate the cell cycle were only
slight inhibited. Interestingly, some diterpenes preferentially inhibited topoisomerase-I in the
relaxation assay and gave lower IC 50 values (2.8 and 4.7 μM) than the known classical
topoisomerase-I inhibitor camptothecin (IC 50 28 μM). Docking experiments revealed that these
diterpenes may target topoisomerase-I differentially to camptothecin. While camptothecin
stabilizes type I topoisomerase-DNA complexes, there is evidence that the diterpenes compete
with DNA for topoisomerase binding through direct interaction.
References
1. Mentz, L.A. et al. (1997) Caderno de Farmácia, 13: 25-48.
Acknowledgement
1. Financial support from the government Baden-Württemberg (Zukunftsoffensive IV) is gratefully acknowledged. ¬
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Antioxidant capacity and phenolic content of four myrtaceae
plants of the south of Brazil
Marcos José Salvador1, Nathalia L. Andreazza1, Caroline C. De Lourenço1,
Aislan C.R.F. Pascoal1, Maria Elida Alves Stefanello2
1
2
DQO/UFPR
Antioxidant compounds can be useful to prevent several degenerative diseases or as conserving in food and toiletries. Species of the Myrtaceae family are able to accumulate phenolic
substances and those are closely related to the antioxidant activity due to its capacity to scavenge free radicals, protect against lipid peroxidation and quench reactive oxygen species.
Members of this plant family are used in Brazilian folk medicine for the treatment of diseases
such as infections and inflammation. Screening for antioxidant activity of Myrtaceae has been
focused on its edible fruits (Rufino et al., 2009; Marin et al., 2008; Reynertson et al., 2008), with
only one report on leaves (Coutinho et al., 2008). Previous studies have reported the essential oil
composition for these plants (Stefanello et al., 2008; 2007; Apel et al. 2004; Limberger et al.,
2004) and identification of flavonoids in the leaves of E. pyriformis (Theoduloz, 1988). These
facts prompted us to investigate the antioxidant capacity of the leaves methanolic extracts of
four Myraceae plants collected of the south of Brazil, including Eugenia chlorophylla O. Berg. (I),
E. pyriformis Cambess (II), Myrcia laruotteana (III) and M. obtecta (Berg) Kiacrsk. (IV). The antioxidant potential was performed using the DPPH and ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity)
assays. Moreover, the total soluble phenolic content was also measured using the Folin-Ciocalteu
reagent. In an initial evaluation all the methanolic extracts I-IV have shown high levels of phenolic
compounds (30-40 mgGAE/g) as well as high antioxidant activity in both methods (1-7 mmol of
Trolox Equivalents/g of extract in ORAC and SC50 in the range of 2.20 and 30 μg/mL in the DPPH).
The highest antioxidant activity was exhibited by methanol extract of the leaves of E. pyriformis
(2.20 μg/mL), followed by extracts of M. laruotteana (4.50 μg/mL) and M. obtecta (6.66 μg/mL). In
comparison with controls, in the DPPH assay, the extract of E. pyriformis was more active than
trolox (SC50 = 2.50 μg/mL), while the extracts of M. laruotteana and M. obtecta were more actives
than quercetin (SC50 = 12.80 μg/mL). Initial HPLC-UV/DAD analysis revealed that the antioxidant
extracts investigated appears to contain flavonoids as major constituents. Findings from this
study demonstrated that the leaves methanolic extract of these Myrtaceae plants from south of
Brazil possess antioxidant/free-radical scavenging activity, which seems to be correlated to its
total phenolic content.
Financial support: CNPq, FAPESP and FAEPEX-UNICAMP ¬
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Flavonoides de Exellodendron coriaceum (Chrysobalanaceae).
Actividad Hipoglicemiante
Diana Carrasco1,*, Jeannette Méndez1, Alessandra Braca2, Marinella De Leo2,
Freddy González-Mujica3, Sandra Duque1
1
Laboratorio de Productos Naturales, Escuela de Química, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela,
Apartado Postal 47102, Caracas 1020-A, Venezuela
2
Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università di Pisa, via Bonanno 33, 56126, Pisa, Italy
3
Instituto de Medicina Experimental, Sección de Bioquímica Médica, Facultad de Medicina
Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela
Chrysobalanaceae es una familia de plantas superiores, que crece principalmente en las regiones tropicales y subtropicales y que está constituida por 17 géneros y más de 400 especies. En
Venezuela están reportados 7 géneros, cinco de los cuales han sido estudiados desde el punto de
vista químico y su actividad biológica, por nuestros grupos de investigación, desde el año 1993.
Los resultados indican que estas plantas son ricas en Flavonoides y triterpenos y además son
poseedoras de diferentes actividades biológicas, entre las que cabe destacar: antiviral, citotóxica,
antibacterial, leishmanicida, hipotensora, antioxidante e hipoglicemiante.
En el presente trabajo, presentamos es estudio de Exellodendron coriaceum (Benth.).
Reportamos el aislamiento de siete Flavonoides del extracto n-butanòlico, de las partes aéreas de
E.coreaceum. Los primeros cuatro compuestos fueron identificados como: quercetina-3-O-β-Dgalactopyranosido (1), quercetina-3-O-α-L-arabinopyranosido (2), quercetina-3-O-αLrhamnopyranosyl-(1->2)-α-L-rhamnopyranosido (3) y quercetina-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1->6)β-Dgalactopyranosido (4), mientras que los restantes, debido a la poca cantidad de muestra,
fueron caracterizados parcialmente, como derivados metoxilados y/o glicosilados de quercetina
con glucosa, galactosa o arabinosa, como restos de azúcar. Los Flavonoides 3 y 4, son reportados
por primera vez en la familia.
Todos los compuestos fueron ensayados con el método de Glucosa 6 fosfatasa. Los resultados
indican una actividad inhibitoria de la enzima, cuando se usan microsomas intactos, con un
porcentaje del 65%. De acuerdo a nuestro conocimiento, este es el primer reporte sobre la
química y actividad biológica de E. coriaceum. ¬
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3
Estrategia sintética para la obtención de 7-alquilbenzociclobutanos. aplicación metodológica para la síntesis de
1,4-dialquil-1,2,3,4-tetrahidro-naftalenos.
María Laura Orea Flores, Dino Gnecco Medina, Verónica González Márquez,
Joel Luis Terán Vázquez, Jorge Rigoberto Juárez Posadas, Eloisa Reigadas Sánchez 1
Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Edificio 194, Centro de Química del Instituto de Ciencias,
Ciudad Universitaria, Puebla, Pue.México
1
Facultad de Ciencias Químicas-BUAP
[email protected]
Objetivo del trabajo
Establecer una estrategia sintética para obtener los 7-alquil-benzociclobutanos estudiando la
influencia de las condiciones de reacción para la generación de los alcoholes: 1-fenil-2-hexanol y
3,7-dimetil-1-fenil-6-en-2-octanol a partir de la reacción de Grignard: cloruro de bencilmagnesio y
el correspondiente aldehído . Posteriormente determinar el agente ciclodeshidratante para la
generación de los correspondientes 7-alquil-benzociclobutanos. Esta metodología será aplicada
para la síntesis estereocontrolada de compuestos tipo 1,4-dialquil-1,2,3,4-tetrahidro-naftaleno,
este es el esqueleto de una serie de compuestos que presentan actividad biológica. Los 1,4dialquil-1,2,3,4-tetrahidro-naftalenos son productos naturales obtenidos de invertebrados marinos, los cuales son fuente rica de una gran familia de diterpenos. 1 La química sintética de estos
productos se ha ido extendiendo enormemente durante este tiempo.
Metodología empleada
La obtención del correspondiente alcohol se obtuvo a partir de la reacción de Grignard utilizando el cloruro de bencilmagnesio y el correspondiente aldehído (pentanal o melonal).
Posteriormente para la ciclación se probaron como agentes ciclodeshidratantes el ácido
polifosfórico y el trifluorborato de dietil-eter [BF3O(C2H5)2].
Resultados fundamentales
A pesar de la versatilidad y amplia utilidad sintética de la reacción de Grignard, muchas veces
se obtienen subproductos generados por reacciones colaterales como la condensación aldólica,
ya que los compuestos organomagnesianos pueden actuar no sólo como nucleófilos, también
como bases. En este caso, el disolvente tiene una gran influencia en nuestra reacción de
Grignard, ya que cuando se utilizó THF se obtuvo mayoritariamente el producto de aldolización
en una relación 90:10. Y cuando se llevó a cabo en éter etílico la relación fue de 1:1. Una vez
obtenido el alcohol puro, se llevó a cabo la ciclación, dando mejores rendimientos cuando se
utilizó el BF3O(C2H5)2 Esta metodología será utilizada para generar el esqueleto 1,4-dialquil-1,2,3,4tetrahidro-naftaleno.
Referencias bibliográficas:
1.- Rodríguez, A. D.; Ramírez, C. J. Nat. Prod. 2001, 64, 100.
2.3.- Haji Akber Aisa, Wei Lu, and Junchao Cai Chemistry of Natural Compounds, 2003 Vol. 39, No. 4, 404-406 .
¬
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Usos del dimetildioxirano en la epoxidación de olefinas
terpénicas obtenidas de cuatro aceites esenciales
Luz Angela Veloza Castiblanco1, Lina Marcela Orozco Arboleda2,
Juan Carlos Sepúlveda-Arias3
1
MSc., PhD. "Grupo Polifenoles” Red ALMA MATER, CENIVAM, Escuela de Química, Facultad de Tecnología,
Universidad Tecnológica de Pereira, La julita, AA 097, Pereira-Risaralda - Colombia
[email protected]
2
Profesional en Química Industrial. “Grupo Polifenoles” Red ALMA MATER, CENIVAM, Escuela de Química,
Facultad de Tecnología, Universidad Tecnológica de Pereira, La julita, AA 097, Pereira-Risaralda - Colombia
3
MD., PhD. “Grupo Infección y Cancer”, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad Tecnológica de Pereira,
La julita, AA 097, Pereira-Risaralda - Colombia
El dimetildioxirano (DMDO) es un agente oxidante ampliamente utilizado en la
oxifuncionalización de una gran variedad de sustratos orgánicos debido a la selectividad, especificidad y reactividad que presenta bajo las condiciones suaves y neutras de reacción que requiere;
es ambientalmente amigable generando acetona como único sub-producto de reacción. La
epoxidación de olefinas tanto nucleofílicas como electrofílicas se ha logrado llevar a cabo con
DMDO, se han obtenido epóxidos altamente sensibles, difíciles de sintetizar por otros métodos y
susceptibles a posteriores modificaciones químicas. Una fuente asequible, natural y renovable de
olefinas terpénicas son los aceites esenciales, productos agroindustriales importantes, empleados para la síntesis de fragancias y compuestos farmacéuticos. En medicina tradicional han sido
utilizados como antibacterianos, antioxidantes y anti-inflamatorios. Con el propósito de evaluar
en un futuro las propiedades anti-inflamatorias in vitro de los constituyentes mayoritarios de
diferentes aceites esenciales, el presente trabajo muestra el aislamiento, caracterización y
epoxidación con DMDO, de los constituyentes mayoritarios (olefinas terpénicas) de los aceites
esenciales Tagetes lucida, Cymbopogon citratus, Lippia alba, y Eucalyptus citriodora. El aislamiento
de las olefinas terpénicas se realizó por cromatografía en columna y destilación a presión reducida y las reacciones de epoxidación se realizaron con DMDO en solución de acetona. La
caracterización de las olefinas y los productos de oxidación se realizó mediante cromatografía de
gases acoplado a espectrometría de masas (CG-EM) y resonancia magnética nuclear (RMN). Para
T. lucida, C. citratus, L. alba y E. citriodora se encontraron como constituyentes mayoritarios:
estragol, citral (neral y geranial), carvona y citronelal respectivamente. La epoxidación de estos
constituyentes produjo los respectivos epóxidos con una conversión superior al 90% confirmada
por CG-EM (IE) y un rendimiento mayor al 80%. Estos resultados corroboran la alta reactividad
hacia las olefinas nucleofílicas y electrofílicas y la quimioselectividad del DMDO frente a sustratos
polifuncionales. Con este trabajo se pretende incentivar a la utilización de recursos naturales
tales como los aceites esenciales, que son una fuente importante de terpenos que pueden ser
modificados estructuralmente dando lugar a una amplia variedad de compuestos. Este es el
primer reporte que se tiene en nuestro conocimiento de la formación de los epóxidos de estragol, citral y citronelal empleando DMDO como agente de transferencia de oxígeno. ¬
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Citharexylum montevidense especie medicinal promisoria del
Río de La Plata: biotécnicas para su domesticación
Sharry S.1, Abedini W.1, Adema M.1, Basiglio Cordal M.A.1, Briones V.1, Pinciroli L.1,
Villarreal B.1, Cattaneo G., Rangel R.M.2, Forte L.3
1
Centro Experimental de Propagación Vegetativa (CeProVe).FCAyF. UNLP. CICPBA. Diag. 113 Nº 469
La Plata. Buenos Aires. Argentina
[email protected]
2
CINVESTAV, Unidad Irapuato, Guanajuato, México
[email protected]
3
FCO, UNLP. La Plata. Buenos Aires. Argentina
[email protected]
Citharexylum montevidense (Spreng.) Mold, es una especie autóctona de la flora de la Provincia
de Buenos Aires, conocida vulgarmente como “Espina de Bañado” o “Tarumá”. Se encuentra
distribuida en el Sur de Brasil, en las provincias argentinas de Buenos Aires, Entre Ríos, Misiones
y Tucumán, Paraguay y Uruguay. Prospera en ambientes serranos y ribereños, a orillas de ríos,
arroyos y cañadas y se cultiva en parques y plazas. Si bien es una especie muy valiosa por su
madera y su papel como ornamental, también tiene un uso promisorio como especie medicinal.
El fruto se utiliza como pectoral y el cocimiento de la corteza, como diurético. En los frutos de
otras especies de Citharexylum han sido aislados varios iridoid-glucósidos y lignanos 1(caudatosidos A-F (2-7), 5-deoxypulchellosido, 7-μ-O-acetato ode lamiide, lamiide, lamiidosido, duranterectosido C, 8-epiloganin y (+)-lyonirenisol-3a-O-β-D-glucopyranosido). Extractos de plantas del género
han sido usados para el tratamiento de eschistosomiasis. 2
No se han encontrado reportes sobre estudios realizados en la especie Citharexylum montevidense, por lo que se considera de interés avanzar en el conocimiento de su biología reproductiva
y análisis de principios activos.
La biotecnología vegetal es la obtención de bienes y servicios por el uso directo de plantas, sus
partes o sus productos, en sus formas naturales o modificadas; y es un grupo de técnicas, desarrolladas a través de investigación básica, que usan procesos biológicos para solucionar problemas o generar productos útiles. Dentro de las familias de técnicas más empleadas en
biotecnología vegetal se incluyen el desarrollo y uso de marcadores moleculares, la identificación
y aislamiento de genes, el cultivo de tejidos, la generación y uso de bioreactores, la
transformación genética, la ingeniería metabólica, y recientemente genómica, proteómica,
metabolómica y bioinformática. La aplicación del cultivo de tejidos y de marcadores moleculares
en el mejoramiento de plantas medicinales ha demostrado un gran potencial bajo el concepto de
desarrollo sostenible, ya que permite la multiplicación masiva de genotipos seleccionados, lo que
lleva a mantener o aumentar la producción de metabolitos secundarios. Por lo antedicho, el
objetivo del presente trabajo fue ajustar los sistemas de propagación vegetativa de “tarumá”
tanto por macropropagación como por cultivo in vitro. Además, mediante un grupo interdisciplinario (México, UNLP), se comenzó a probar el efecto de extracto de fruto. Para la
macropropagación se emplearon estacas de 1 a 10 mm de diámetro y 20 cm de longitud. Se
evaluó la capacidad de enraizamiento, el número y longitud de brotes y raíces, y la presencia de
callo frente a varias concentraciones de ácido naftalenacético (ANA) (Testigo, 25, 50, 100, y 200
ppm). Para el cultivo in vitro se utilizaron como explantos: hojas y secciones nodales de plantas
obtenidas por estacas. Como medios de cultivo se ensayaron Murashige Skoog (MS) libre de
reguladores de crecimiento o suplementado con 1ppm de ANA y 1ppm 6-Bencilaminopurina
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(BAP).
Los tratamientos Testigo y ANA 200 ppm fueron los que demostraron mejor respuesta a la
propagación vegetativa por estacas de C. montevidense, con una supervivencia del 87% y una
mayor cantidad de estaquillas enraizadas (Testigo: 10%, ANA 200 ppm: 16,6%). La formación de
callo fue de un 25 a 40% en todas las concentraciones. A su vez, las estacas de menores diámetros
presentaron menores longitudes en sus raíces, las de mayores diámetros, mayor longitud en sus
brotes mientras que las de menor edad fueron las que más enraizaron. En cuanto al cultivo in
vitro, a los 15 días de sembradas las secciones nodales se obtuvieron brotes tanto en el medio
MS completo y MS con BAP, resultando ser el medio óptimo para el crecimiento de los brotes MS
libre de reguladores de crecimiento. Tanto ANA como ANA/BAP indujeron la formación de callos
en la base de las secciones nodales. El medio de cultivo más adecuado para la formación de callos
a partir de hojas fue MS suplementado con ANA/BAP. Las plántulas obtenidas in vitro lograron
aclimatarse adecuadamente. Se concluye que la biotecnología vegetal es una herramienta
poderosa y de utilidad para ser aplicada en el estudio de plantas medicinales y aromáticas.
Existen ejemplos de la aplicación de las metodologías que, son de enorme importancia para
continuar y extender a otras especies como las especies nativas de América Latina, que
históricamente no figura como prioritarias en los programas de investigación. Las perspectivas
son enormes y las posibilidades para incorporar y explotar racionalmente estas tecnologías en
plantas medicinales y aromáticas son promisorias. Es de anotar que la biotecnología aislada no es
la solución milagrosa que permitirá la explotación económica de determinada planta o grupo de
plantas. Para el desarrollo económico de una especie medicinal o aromática será necesario
investigar mercados (probablemente el farmacéutico no sea el más adecuado), establecer
negociaciones de propiedad intelectual y generar el conocimiento para el manejo agronómico de
la especie bajo condiciones de cultivo. Como se ve, ajustar un sistema de propagación para
poner las plantas bajo cultivo, es uno de los primeros pasos en este sentido. 3
Note
1. Iridoid and lignan glycosides from Citharexylum spinosum L. Barbara Balzsa; Gbor Tthab; Helmut
Duddeckc; Hesham S. M. Soliman, Natural Product Reaserch,Vol.20. J Nat Prod. 2002 Nov;65(11):16216.Caudatosides A-F: new iridoid glucosides from Citharexylum caudatum.Ayers S, Sneden AT
2. E304 Prophylactic effect of Pulicaria crispa and Citharexylum quadrangylarjacq extracts on some liver enzymes
representingdifferent metabolic pathways in Schistosoma mansoni infectedmic Manal A. Hamed, Hanan F. Aly,
Sanaa A. Aly and Maghraby,A.S.
3. Rocha J. Biotecnología en Plantas Medicinales y Aromáticas. II Congreso Internaconal de Plantas Medicinales y
Aromaticas. ¬
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Analisi citometrica di caspasi3 citoplasmatica attiva nella
valutazione dell’apoptosi indotta dall’olio essenziale di
Verbena officinalis e dal citrale, suo principale componente, in
cellule di leucemia linfatica cronica
Laura De Martino1, Giovanni D'Arena2, Maria Marta Minervini2, Lucia Savino2,
Nicola Pio Sinisi2, Nicola Cascavilla2, Vincenzo De Feo1
2
1
Unità di Ematologia e Trapianto di cellule staminali, IRCCS Ospedale “Casa Sollievo della Sofferenza”,
San Giovanni Rotondo
Molte sostanze naturali agiscono nella prevenzione del cancro, inibendo l’attivazione dei procarcinogeni, aumentando la detossificazione delle sostanze carcinogene o impedendo la progressione della carcinogenesi (Wattenberg, 1992). Verbena officinalis L. (Verbenaceae), verbena, é una
specie eurasiatica, comune su tutto il territorio italiano. Usata in medicina popolare per migliaia
di anni, la pianta è oggi diffusa come erba medicinale ed integratore in vari Paesi. Nonostante il
suo uso diffuso non sono stati però ancora chiariti i meccanismi d’azione. L’olio essenziale di
verbena, che pure ha numerosi impieghi tradizionali, è quasi completamente costituito da isoprenoidi. Studi preliminari indicano che queste sostanze, derivate del mevalonato, ubiquitarie nel
regno delle piante, possono impedire, in maniera efficace, la proliferazione di cellule tumorali,
come quelle di carcinoma mammario (MCF7), di leucemia umana (HL-60), di adenocarcinoma del
colon (CaCo2) (Mo & Elson, 1999; Tatman & Mo, 2002). Tra i meccanismi più promettenti, in
grado di bloccare la progressione del cancro, c’è un’induzione selettiva di apoptosi nelle cellule
neoplastiche, attraverso il coinvolgimento della caspasi 3 (Dudai et al., 2005). La caspasi 3 è una
proteasi attivata durante le fasi iniziali del processo di apoptosi. Sintetizzata come proenzima
inattivo, è attivata nelle cellule che stanno andando in apoptosi da un processo di autoproteolisi
o dal clivaggio operato da un’altra proteasi. La citometria a flusso viene utilizzata per rivelare
l’espressione citoplasmatica della caspasi 3 attivata, in cellule di leucemia linfatica cronica. Studi
precedenti hanno mostrato l’efficacia dell’olio essenziale di verbena e del citrale nel trattamento
di linfociti B provenienti da pazienti affetti da leucemia linfatica cronica (De Martino et al., 2009).
In questo studio viene valutata l’espressione della caspasi 3 attivata, in cellule di leucemia
linfatica cronica trattate con olio essenziale di verbena o con il citrale. Le cellule, provenienti da 8
pazienti non sottoposti ad alcun trattamento, sono state incubate per 6 ore con olio essenziale di
verbena diluito 1 a 100 oppure con citrale 1,9 mM. Le cellule mostrano elevate livelli di apoptosi
(caspasi 3 attivata) dopo trattamento con olio essenziale di verbena (circa 98,2 %) e citrale (circa
93%). I pazienti sono stati analizzati per anomalie citogenetiche con noto impatto prognostico
nella leucemia linfatica cronica (+12, 17p13-, 13q14- e 11q22-): soltanto un paziente ha la delezione
17p13, che coinvolge il gene p53. Sono in corso studi sulla caratterizzazione molecolare del gene p
53, al fine di identificare i pazienti con mutazione del gene.
Bibliografia
1. De Martino L, D'Arena G, Minervini MM, Deaglio S., Fusco BM, Cascavilla N, De Feo V. Int. J Immunophatol.
Pharmacol. 22, 1097-1104 (2009)
2. Dudai N, Weinstein Y, Krup M, Rabinski T, Ofir R. Planta Med. 71, 482-484 (2005).
3. Mo H, Elson CE. J. Nutr. 129, 804-813 (1999).
4. Tatman D, Mo H. Cancer Lett. 175, 129-139 (2002).
5. Wattenberg LW. Cancer Res. 52, 2085s–2091s (1992). ¬
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Análisis cristalográfico de 1-hidroxi-3,6-dimetoxi-8-metil-9hxanten-9-ona (lichexantona) aislada de la especie Vismia
baccifera tirana & planch (guttiferae)
Alexis Buitrago1, Janne Rojas1, Graciela Díaz de Delgado2, Valentina Cote2
1Grupo Biomoléculas Orgánicas, Instituto de Investigaciones, Facultad de Farmacia y Bioanálisis
Universidad de Los Andes, Mérida 5101, Venezuela
[email protected]
2 Laboratorio de Cristalografía, Departamento de Química, Facultad de Ciencias
El género Vismia (Guttiferae), se distribuye principalmente en las zonas tropicales y subtropicales de América Central y Suramérica, en donde, se reportan alrededor de cincuenta especies. En
Venezuela, existen aproximadamente quince distribuidas en diferentes zonas del país. Muchas de
estas especies han sido utilizadas en la medicina popular para el tratamiento de enfermedades
en la piel, tales como: herpes, dermatitis, lepra, sífilis, sarna y eczema. Estudios fitoquímicos
realizados en diversas especies de Vismia han permitido aislar y caracterizar una variedad de
compuestos, de los cuales, se reportan: terpenos, lignanos, esteroles, flavonoides, antronas y
xantonas. En la presente investigación se realizó el análisis estructural por RMN ( 1H y 13C),
espectrometría de masas y difracción de rayos X, para una xantona aislada de las hojas de Vismia
baccifera colectada en Mérida-Venezuela. Los datos obtenidos de las técnicas espectroscópicas
antes mencionadas corresponden a una lichexantona, de formula molecular C 16H14O5, la cual,
cristaliza en su sistema monoclínico con grupo espacial P2 1/c (No 14) con parámetros de celda: a =
11,6405(5) Å; b = 7,5444(3) Å; c = 15,2341(6) Å; [°] = 102,280(1); V [Å 3] =1307,26(9); Z = 4. Según la
base de datos Cambridge Structural Database, la lichexantona (código ILUCOH) fue aislada por
primera vez de Ruprechtia tangarana, sin embargo, es la primera vez que se reporta para la
especie V. baccifera (Guttiferae). Es importante señalar que el refinamiento final convergió a
valores de R= 0.0397, wR2 = 0.1076, S= 1.04.
Palabras claves: Lichexantona, Vismia baccifera, Guttiferae, análisis de la estructura cristalina. ¬
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3
Determinación de actividad antiparasitaria y gastrointestinal
in vitro e in vivo del aceite esencial de semillas de Schinus molle
en ovinos
Cumandá Játiva1, Byron Diaz2, Jenny Vimos3, Cristian Araujo3
Escuela de Bioquímica y Farmacia de la Facultad de Ciencias,
Escuela Superior Politécnica de Chimborazo, Riobamba, Ecuador
jumandis@ yahoo.com
Resumen
Del 60% de la población de Chimborazo dedicada a actividades agropecuarias, solo el 1% utiliza
medicina ancestral como antiparasitaria, la determinación experimental in vitro e in vivo del
aceite de Schinus molle. Las pruebas in vitro se realizaron en larvas III producidas por el método
de Baerman el efecto positivo (muerte de lavas) se obtiene con el aceite esencial. Los análisis in
vivo determinan efecto positivo en concentración de 35 mg de aceite esencial por 10 kilos de
peso de animal, comprobados con la disminución de diferentes helmintos en el coproparasitario
de los animales en estudio. Un fitofármaco de fácil manejo fue elaborado como jarabe a base de
CMC en envases plásticos de 60 ml con 0,35 mg de aceite esencial, administrado a ovinos e
inclusive gestantes no produce aborto y si disminuye la carga parasitaria, el estándar utilizado fue
Ivermectina.
Introduccion
En trabajos anteriores para un proyecto control de la parasitosis en las ganaderas del Carchi se
identifico los vegetales con actividad antiparasitaria utilizada en la medicina tradicional ecuatoriana. El 60% de la población ecuatoriana rural está dedicada a la actividad agropecuaria, de ésta
el 62% está dedicado a la ganadería.
En las ganaderías del Ecuador la incidencia de parasitosis gastrointestinal ovina produce
disminución de la conversión alimentaria que se traduce en disminución de peso, incapacidad
para entrar en celo y concebir según los trabajos de campo realizados por el Ministerio de
Agricultura y Ganadería MAG y el Instituto Nacional Ecuatoriano de Censos INEC.
Según el III Censo Agropecuario en la Provincia de Chimborazo existen 1’127.468 cabezas de
ganado ovino de las cuales el 61, 25% se encuentran parasitadas es decir 690.570 con pérdidas por
muerte hasta de 5,15% que perjudican la economía de los ganaderos.
Para mejorar la salubridad del ganado ovino, la tendencia actual es utilizar productos naturales
que sean de fácil manejo y estén al alcance de las poblaciones campesinas, en el presente caso el
Schinus molle. Las pruebas in Vitro se realizan con larvas L III, las pruebas in vivo en ovejas parasitadas controlando con análisis de caga parasitaria, en los dos casos se tiene eficacia del 99,6%.
Objetivos
1. Preparar el aceite valorado tomando como metabolitos marcadores los aceites esenciales y
la rutina y la quercetina como derivados fenólicos en el destilado.
2. Determinar la dosis eficaz (DE50) del extracto valorado que tenga actividad antiparasitaria en
larvas III.
3. Probar in vivo en animales de experimentación la dosis según el peso del animal (g de
extracto por Kg peso del animal de experimentación).
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Metodologia
1. OBTENCION DE MUESTRAS DE HECES: se toman del recto los animales en fundas o guantes
plásticos, con la mano enfundada estimulando la parte superior del recto del animal, las muestras
fueron identificadas y conservadas en recipientes en refrigeración, e realizan los siguientes
análisis.
2. OBTENCIÓN DE LARVAS L III: pesar 4g de heces, mezclar con solución salina en vaso de
precipitación, homogenizar por coctelería de vasos.
Con pipeta Pasteur recoger de la parte media del vaso el homogenizado para colocar en la
cámara de Mc Master evitando las burbujas de aire, dejar reposar 5 minutos para que los huevos
se peguen a la parte superior. Leer con lente 10x los espacios en zigzag dibujados en la cámara.
El número de huevos contados se multiplican por 50 valor establecido y da huevos por gramo
de heces HPG.
3. COPROCULTIVO IN VITRO: Pesar 50 gramos de heces y 50 gramos de carbón molido homogenizar con una espátula, verter en una caja petri conteniendo papel filtro en la base, tapar la
caja y colocar en estufa a 23ºC por 15 días con humedad permanente.
Pasado el período de incubación las heces colocar en el aparato de Baerman, al día siguiente se
recolectan las primeras gota que contienen las larvas tipo L III de los parásitos.
Que se observan al estetoscopio, en caso positivo colocar una gota en un portaobjeto con
yodo para determinar el género de acuerdo a la clave morfológica bibliográfica.
4. OBTENCIÓN DEL EXTRACTO ACUOSO: Destilar con agua 13,2 kg de semillas de Schinus molle,
realizar el tamizaje fitoquímico con las reacciones de coloración de Sudan III, Benedict,
Rosentaler, Shinoda, Liberman Buchard y Dragendorff.
Resultados
1. TAMIZAJE FITOQUÍMICO: presencia de aceites esenciales con Sudan III, triterpenos con
Lieberman Buchard y Rosentaler, agrupamientos lactónicos con Baljet, compuestos fenólicos con
Benedict, flavonoides con Shinoda.
2. EXTRACTO ACUOSO: pH 3,8, densidad 1,11g/mL. rendimiento de compuestos de baja polaridad: se extrae del destilado con hexano, se concentra, pasa aire comprimido y determina el peso
que corresponde al 0,105%. La cromatografía en capa fina corrida en acetato de etilo-hexano
(3:97) y revelado con Rosentaler presenta 13 manchas bien definidas.
Del extracto acuoso libre de compuestos de baja polaridad se extrae con cloroformo, se
concentra al vacío y pesa para dar 0,04% de compuestos de mediana polaridad que corridos en
hexano acetato de etilo 97:3 y revelados con Rosentaler dan compuestos similares al subextracto
de baja polaridad.
El subextracto butanólico se obtiene por tratamiento de la fase acuosa residual de la
extracción con cloroformo, el butanol se destila pasa corriente de aire comprimido, luego pesado
el rendimiento es de 0,029%. La cromatografía e capa fina en alúmina corrida con cloroformometanol-agua (70:30:4) y revelada con sulfato e cerio da dos compuestos.
3. PARÀSITOS MÁS FRECUENTES:
1. Oesophagostonu
2. Hemonchus, Coopeira
3. Coopeira oncophora
4. Coopeira puncata
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4. ACTIVIDAD ANTIHELMÍNTICA EN LARVAS TIPO III, in vitro: Se contaron 100 lombrices tipo III
sacadas del equipo de Baerman en cuatro cajas diferentes. Añadir concentraciones de 0.25, 0.50
y 0.75 ml del hidrodestilado valorado en cajas diferentes.
Mantener el cultivo a condiciones ambientales por 24, 48 y 72 horas pasado estos tiempos
observar la mortalidad de larvas. El blanco está formado solo por el medio de cultivo con las
larvas tipo III.
5. ACTIVIDAD ANTIHELMÍNTICA in vivo: La Ivermectina es el medicamento convencional que se
subministra por vía subcutánea 1 mL por 50 kg de peso con carga parasitaria de 1183 HPG en 3
ovinos.
Para el extracto acuoso se utilizan 6 ovinos con carga parasitaria promedio de 1350 HPG.
El parásito más frecuente es el Trichostrongylus. La dosis del extracto acuoso es de 0.314 mg de
aceite esencial en 10 mL por Kg de peso del animal, administrado por vía oral.
Realizar seguimiento con análisis parasitario a partir del tercer día de administración hasta los
60 días.
Tabular los resultados obtenidos.
molle
Ivermectina
HxGr
HxGr
Días
1350
1183
1
1133
0
3
141
0
8
tratamiento
24 horas
48 horas
72 horas
50
0
15
T11
30
88
100
50
0
30
150
0
45
T12
82,6
93.2
100
166
0
60
T13
86
100
TABLA 1: Actividad antihelmintica in vivo
Eficacia de Schinus molle in vitro
TABLA 2: Actividad antihelmíntica in vitro
Conclusiones
1. La baja de la carga parasitaria in vivo del 99,6 % a los 30 dias del tratamiento en ganado ovino
comprueba que se puede utilizar el extracto acuoso de semillas de molle como antiparasitario
gastrointestinal.
2. La mejor dosis antiparasitaria se determino in vitro con larvas del tipo iii, siendo 0.75 ml de
extracto acuoso valorado frente a 1 ml de ivermectina que baja el 50% de carga parasitaria.
3. La valoracion del hidrodestilado corresponde al 0.045% de substancias de baja polaridad
representados por aceites esenciales, 0.04 % de posibles sesquiterpenos y 0.0024% de compuestos fenolicos
4. La dosis eficaz administrada in vivo al ganado ovino es de 3.14 mg de aceite esencial por kg
de pesodel ovino, que esta presente en 2.9 ml de exyracto acuoso de molle.
5. Los huevos de parásitos más frecuentes son Oesophagostonu, Coopeira puncata,
Hemonchus, Coopeira, Coopeira oncophora.
Bibliografia
1. CACERES, A. Plantas de uso medicinal. Guatemala, Universitaria, 1997. pp120-180
2. CYTED “Programa iberoamericano de ciencia y tecnología para el desarrollo UNESCO. Bogotá, 1995. pp. 16.
3. HIEPE, T. Enfermedades de las ovejas. Zaragoza. Acribia, 1974. pp. 310-315
4. OLSEN, W. parasicología animal. Barcelona. AEDA, 1980.pp28-55.
5. www.dirk.net/info/limpieza de parásitos.htm.
6. www.infomedica.com.ar/info-medica/numero 11/m molle.html. ¬
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Piante tossiche utilizzate in medicina veterinaria popolare in
Italia
Viegi L.*, Vangelisti R.
Dipartimento di Biologia, Unità di Botanica generale e sistematica
Via L. Ghini. 5 – 56126 Pisa (Italy)
* [email protected]
Le entità vegetali utilizzate in Italia per il benessere e la cura degli animali domestici, che
assommavano a 260 (Viegi et al., 2003), sono attualmente oltre 500 (Viegi et al., 2005; Bullitta et
al., 2005); comprendono funghi, felci, gimnosperme ed angiosperme. Il confronto con i dati
riportati in bibliografia etnobotanica evidenzia come sia costante la prevalenza percentuale di
Asteraceae (Fossati et al., 1999; Barbini et al., 1999), in accordo con quanto trovato nell’area
Mediterranea (Pieroni et al., 2006).
In maggioranza sono integratori alimentari, scelti sia per il ruolo positivo sulla crescita, sia per
una più semplice modalità di somministrazione; molte sono utilizzate con scopi preventivi; ma
oltre il 60 % degli usi totali delle piante sono di tipo curativo. Molte piante sono considerate per le
loro proprietà parassiticide e repellenti (es. Colchicum autumnale, Cestrum parqui, Delphinium
consolida, Euphorbia helioscopia, Helichrysum italicum e Veratrum album); molte per le loro capacità ittiotossiche (es. Anthirrinum majus, Euonymus europaeus, Teucrium chamaedrys); a molte
infine sono attribuite proprietà magiche (es. Juniperus communis, Olea europaea, Ranunculus
trilobus, Ruta angustifolia e R. graveolens).
Le specie tossiche o potenzialmente tali (oltre 200, pari al 45% del totale) sono in maggioranza
specie usate a scopo curativo (81%), che possono risultare tossiche se non opportunamente
dosate. Una buona percentuale (55%) sono integratori alimentari.
Tra quelle utilizzate per usi interni (44%) ci sono ad esempio Agrostemma githago, Dryopteris
filix-mas, Euphorbia sp. pl., Eucalyptus resinifer, Helleborus sp.pl., Ilex aquifolium, Ligustrum vulgare, Polypodium australe, P. vulgare; tra quelle utilizzate per usi esterni (55%) troviamo per
esempio Anemone hortensis, Cestrum parqui, Daphne laureola, Delphinium consolida, D. staphysagria, Dryopteris filix-mas, Euphorbia sp. pl., Helleborus sp.pl., Ruscus aculeatus.
Vengono riportati i relativi principi attivi conosciuti (Debelmas, Delaveau, 1978; Maugini, 1994;
Lorgue et al., 1999; Frohne, Pfänder, 2004). In molte specie le sostanze tossiche si distribuiscono
diversamente nelle varie parti della pianta: molte si concentrano solo in alcuni organi, per cui le
altre parti sono innocue; talvolta entrano in gioco anche il periodo vegetativo e l'età della pianta.
Spesso infatti le sostanze tossiche sono più abbondanti in alcune fasi del ciclo vitale, in genere nei
semi e negli stadi giovanili, ed in alcune fasi del ciclo vegetativo, per lo più di quello primaverile.
Talora le piante diventano tossiche quando vengono infettate da funghi (Frohne e Pfänder, 2004)
oppure in associazione con rimedi convenzionali (Wynn, Fougère, 2007).
Nelle tradizioni popolari sicuramente le piante tossiche sono considerate con prudenza, perché
la perdita di un animale costituirebbe un grave danno. Il loro uso non è da incoraggiare. Con
questo nostro lavoro intendiamo fornire informazioni, in modo che possano essere effettuati
esperimenti di validazione, che, uniti ad una corretta identificazione, permetteranno l’uso in
medicina veterinaria anche di piante potenzialmente pericolose.
Bibliografia
1. Barbini, S., Tarascio, M., Sacchetti, G., Bruni, A., 1999. Studio preliminare sull'etnofarmacologia delle comunità
378
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futuro a confronto", Genova, 9-11 aprile 1999. Informatore Bot. Ital. 31, 1-3, 181-182.
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4. Debelmas, A.M., Delaveau, P., 1978. Guide des Plantes Dangereuses, Ed. Maloine, Paris.
5. Fossati, F., Bianchi, A., Favali, M.A., 1999. Farmacopea popolare del parmense: passato e presente. Informatore Bot.
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El-Jorhi S., El-Demerdash M., El-Zayat M., Al-Shahaby O., Houmani Z., Scherazed M., 2006 - Circum-Mediterranean
cultural heritage and medicinal plant uses in traditional animal healthcare: a field survey in eight selected areas
within the RUBIA project. J. Ethnobiol. Ethnomedicine, 2: 16-28.
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12. Wynn S.G., Fougère B.J., 2007. Veterinary Herbal Medicine. Mosby, Else ¬
379
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3
Identification of cow’s milk contaminations in donkey’s milk
by real-time PCR
Russo Mt.1, Anastasi V.2, Beccari T.2, Cossignani L.2, Blasi F.2, Postorino S.3,
Simonetti M.S.2, Damiani P.2
1
Dipartimento di Scienze e Tecnologia Agro-forestali e Ambientali – Laboratorio di Chimica, qualità e sicurezza degli
Alimenti, Università Mediterranea di Reggio Calabria, Reggio Calabria, Italia
2
Dipartimento di Scienze Economico-Estimative e degli Alimenti, Sezione di Chimica Bromatologica,
Università degli Studi di Perugia, Perugia, Italia
3
Fondazione di Ricerca Mediterranea Terina - Lamezia Terme (CZ), Italia
Donkey’s milk is known since ancient Roman and Greek times because of its nutritional and
therapeutic properties but only recently it was revalued for use in the human feeding.
Donkey’s milk shows hypoallergenic and similarity with human milk, so it can be applied as
possible substitute in infants feeding in cases of cow’s milk allergy or absence of human milk. In
addition, others study reported that donkey’s milk has an effect on the osteogenesis process, as
well as in arteriosclerosis therapy, for the rehabilitation of patients with coronary heart disease
or premature senescence and in hypocholesterolemic diets.
The most important characteristics of donkey’s milk are the low content, with respect to cow’s
milk, in proteins like as β-lactoglobulin, that is the major CM allergen, and casein, levels of
lactose similar to human milk, and the large amount of lysozyme and low fat content.
In food industry donkey milk may be use to produce fermented milk drinks because of low
microbial counts, high lysozyme and lactose content, optimal growth medium for useful lactic
acid bacteria.
In Italy the amount of produced donkey’s milk is about seven thousand litre/year. Moreover
there is not yet a legislation which could regulate its production chain and the commercial
distribution of donkey’s milk is not allowed. All above facts imply that donkey’s milk is difficult to
find and it is far more expensive than cow’s milk.
Donkey’s milk adulteration with greater available and cheaper cow’s milk might be put into
practice. This fraudulent practice can compromise health in consumers who may have food
allergies and need to use donkey milk.
In this study a rapid and sensitive technique as real time PCR which permit quantification of
cow’s milk in donkey’s milk mixture has been developed. This technique has been already used
for species identification in milk, dairy products and others food particularly for identification of
GMO. In this method the mitochondrial 16S ribosomal RNA (rRNA) of cow and donkey have
been amplified using specific primers by Real-Time PCR A TaqMan fluoregenic probe was used to
monitor the amplification of the target gene. Two standard curves using different standards
were constructed in order to evaluate the best method for quantification of cow’s milk in mixture. A standard curve was constructed using purified genomic DNA target extracted from blood
and subcloned into the pBluescript plasmid. The second one was constructed by purifying DNA
from milk mixtures obtained by adding different amount of cow’s milk in donkey’s one. The
percentages of cow’ milk were determined by the combination of cow and donkey Ct value
obtained with absolute quantification based on the standard curves designed for both species.
Using this method it is possible to identified contaminations of donkey milk with cow milk ranging from 2% to 50%. The method is highly reproducible, fast and cheap.
Presentato durante i lavori del XVIII° CONGRESSO ITALO-LATINOAMERICANO DI ETNOMEDICINA Juan Tomás Roig y
Mesa (1877-1971) 14 – 18 settembre 2009 Ciudad de La Havana, Cuba
380
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3
Marcatori molecolari per la determinazione della
composizione varietale degli oli di oliva extra vergine
Russo Mt.1, Anastasi V.2, Beccari T.2, Simonetti M.S.2, Cossignani L.2, Baldoni L.3,
Postorino S.4, Damiani P.2
1
Dipartimento di Scienze e Tecnologia Agro-forestali e Ambientali – Laboratorio di Chimica, qualità e sicurezza degli
Alimenti, Università Mediterranea di Reggio Calabria, Reggio Calabria, Italia
2
Dipartimento di Scienze Economico-Estimative e degli Alimenti, Sezione di Chimica Bromatologica,
Università degli Studi di Perugia, Perugia, Italia
3
IGV-CNR, U.O.T. Perugia: diversità genetica e relazioni parentali fra entità selvatiche e cultivar del genere Olea,
Perugia, Italia
4
Fondazione di Ricerca Mediterranea Terina - Lamezia Terme (CZ), Italia
Gli oli di oliva extra vergine di altissima qualità prodotti in Italia sono sottoposti spesso a
miscelazioni o all'aggiunta di oli di minor pregio, come quelli provenienti da altri paesi o da altre
regioni e derivanti quindi da varietà diverse da quelle previste in etichetta o nei disciplinari. I
classici metodi di analisi non sono in grado di risalire alle varietà utilizzate per la preparazione
dell’olio.
Nuove metodiche basate sull'analisi del DNA sono state recentemente sviluppate per indagare
su frodi o adulterazioni alimentari di diverso tipo, grazie al fatto che il DNA è l’unica molecola in
grado di discriminare tra loro le varietà e non è influenzato dalle variazioni ambientali. Inoltre il
DNA, pur, rimanendo in tracce negli alimenti, può essere amplificato in vitro, mediante PCR o
Real-Time PCR, consentendo di identificare l’identità delle specie/varietà che hanno contribuito
alla preparazione di un alimento.
L'applicazione di metodi analitici basati sul DNA Tracking può quindi consentire di verificare la
composizione di oli d’oliva vergine, DOP e IGP, mono- o poli-varietale per stabilire l’aderenza al
disciplinare, la veridicità dell’etichetta e la presenza di adulterazioni.
L’applicazione di questo metodo prevede due fasi fondamentali: l'estrazione del DNA dalla
matrice oleosa e l’analisi molecolare per mettere in evidenza i polimorfismi del DNA estratto e
riconoscere così gli ingredienti (specie/varietà) che hanno contribuito alla preparazione dell'olio
o gli eventuali contaminanti.
Alcuni studi hanno evidenziato la possibilità di estrarre DNA dall'olio d'oliva mediante metodi
basati su detergenti e che il DNA estratto può essere amplificato mediante la tecnica di PCR. La
metodica utilizzata nei nostri laboratori per estrarre il DNA dall’olio si basa sull’ uso del detergente CTAB e ha permesso di ottenere una quantità di DNA pari a circa 5 ug/ml. Per
l'identificazione delle varietà di olivo sono stati selezionati e utilizzati un ampio pool di marcatori,
tra i quali numerosi AFLP (Amplified Fragment Lenght Polymorphisms), SSR (Simple Sequence
Repeats) e SNP (Single Nucleotide Polymorphisms). Oltre a questi marcatori è stata tuttavia
avviata l’attività di selezione di nuovi marker basati sul DNA plastidiale che possano essere
applicati ai corti frammenti di DNA estratto. La ricerca dei polimorfismi di sequenza è stata
condotta su un pool di varietà scelte tra le più rappresentative. E' stato così possibile identificare
marcatori cultivar-specifici che sono stati poi testati su un set più vasto di varietà di olivo, per
verificarne la capacità di discriminazione. I marcatori selezionati sono SNP e indel trovati nella
regione corrispondente al gene psbk (A/G), o negli spazi intergenici trnK-rps 16 (poli T 11 e 12) e
trnT-trnD (A/G) del genoma cloroplastico. Risultati preliminari sembrano indicare che i marcatori
selezionati sono in grado di discriminare 34 diverse cultivar.
Lavoro presentati durante il XVIII° CONGRESSO ITALO-LATINOAMERICANO DI ETNOMEDICINA Juan Tomás
Roig y Mesa (1877-1971) 14 – 18 settembre 2009 Ciudad de La Havana, Cuba
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Index
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Index of authors
$
Abedini, W. _______ 94, 318, 371
Acosta, M. ________ 88, 122, 307
Adema, M.________ 94, 318, 371
Alanis, B. _________ 54
Alarcón de La Lastra, C. 239, 352
Alarcón, L. ________ 104, 175, 265
Alcalde, D.P._______ 199
Alcalde, S.M. ______ 149
Alcaráz, L._________ 245
Alegranci, P._______ 159
Alfonso, M.A.______ 78
Almanza, G._______ 102
Almeida, A.C.A. ____ 59, 196, 239,
_________________ 241, 352, 354,
_________________ 362
Alvarado Hernández, D.A. 208
Alvarado, F._______ 125
Alvarado-López, A.N. 195
Alves Stefanello, M.E. 92, 313, 367
Alves, R.B. ________ 172
Alves, T.M.A. ______ 85
Alviano, C. ________ 262
Alviano, C.S._______ 163
Alviano, D.________ 262
Alviano, D.S._______ 163
Amador, M.d.C.V. __ 89
Amaro Luis, J.M. ___ 35, 112, 114
Amaro-Luis, J.M.___ 285
Anastasi V.________ 380, 381
Andrade Lacosta, A. 41
Andrade, J.M. _____ 237
Andrade, M._______ 233
Andreazza, N.L.____ 113, 367
Angioni, A.________ 14
Angélica Arrieta, R._ 227
Aparecida Esquibel, M. 73
Aparecida Resende, F. 315
Aparecida Takahashi, J. 58
Aparecida Varanda, E. 315
Aparicio, R.________ 35, 123
Aquilino Bonilla, P. _ 40
Aquino, P.G.V._____ 37
Aquino, R.________
Aquino, R.P. ______
Arambarri, A. _____
Araujo, A.R._______
Araujo, C._________
Araújo, A.R._______
Araújo-Júnior, J.X. _
Arcoraci, T. _______
Arcos-Martínez, A._
Armenteros, D.M.__
78
93
186
36
375
161
37, 124
365
308
78
Armijos, C.________ 75, 231, 233,235
ARQMO__________ 108, 260, 261,
_________________ 262, 337
Arvel, F.__________ 48
Arvelo, F._________ 274
Assafim, M._______ 96
Attianese, P.______ 38
Atzei, A.__________ 56
Avelino-Flores, C.__ 126
Avila, J. __________ 284
Aviña Verduzco, J.A. 286
Azevedo, L.G._____ 258
Azofeifa, G._______ 87
Álvarez Berber, L.__ 296
Álvarez Ramirez, M.T. 88
Álvarez Ramírez, M.T. 279, 281,
282,
_________________ 283
Álvarez, A.L. ______ 122, 306, 307
%
Bachetti, R.A. _____ 360
Bader, A._________ 127
Bahsas, A.________ 112, 114, 285
Baldoni L. ________ 381
Baldovino, S.______ 304
Barbarulo, V.______ 2
Barragán Huerta, B. 358
Barretto Cicarelli, R.M. 203
Barrientos Miranda, A.L. 207
Barrios Silva, C.____ 363
Basiglio Cordal, M.A.94, 318, 371
Bassi Quilles, M.___ 159
Bassi, M.__________ 158
Bastida, J._________ 46
Bastidas, E.________ 215
Batista, E.M._______ 244
Beccari T._________ 380, 381
Beeskow, A._______ 211, 350
Bello, J.___________ 48
Benaim, G.________ 48, 274
Benítez, G.________ 76
Benítez, N.P. ______ 81, 254
Berardi, A. ________ 144
Berhing, C.d.A._____ 162
Berkov, S._________ 46
Bermúdez Torres, K. 357
Bernardo, C_______ 229
Berrios, C._________ 128
Bertolini, S. _______ 61
Binns, F.__________ 125
Bisignano, C. ______ 365
Bisio, A. __________ 61, 129
Bizzo, H.R.________ 163
Blagojevic, P.______ 169, 170
Blanco Machado, F._ 210
Boaventura, M.A. __ 188
Boffill Cárdenas, M._ 210
Boffill, C.__________ 273
Bojorjez, D. _______ 268
Bolzani, V.d.S. _____ 36
Bolzani, V.S._______ 51, 331
Bonina, F._________ 365
Bosqueiro, J.R. ____ 116
Bou Rached, L._____ 291, 292, 293
Braca, A.__________ 103, 130, 368
Bracco, F._________ 75, 233
Bracho, I._________ 131
Bravo, A. _________ 110, 173, 174
Briones, V.________ 94, 318, 371
Bruni, P.__________ 14
Bruno, M._________ 277
Bruzual, M.________ 256
Buitrago, A._______ 304, 374
Buitrago, D._______ 132, 214
Bustos Estada, L.___ 226
Bustos, L._________ 54
385
Index
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&
Cabezas, R._______ 102
Cabieses_________ 3, 4, 6
Cabrera Suárez, H.R.89
Cabrera, B.M._____ 249, 250
Cabrera, G._______ 256
Cabrera-Vivas, B.M. 133
Cadogan, C. ______ 53
Cafaggi, S.________ 129
Cajero Juárez, M.__ 68
Cala Cala, M.______ 41
Calderón, J.S._____ 306
Camacho, E.______ 141, 238
Camacho-Ruiz, J.__ 217
Camargo, M.S.____ 314
Campaner dos Santos, L. 44, 266,
________________ 315
Campo, M. _______ 135
Campone, L.______ 78
Campos Polesi, M._ 147, 159
Campos, K.F.______ 333
Campos, R._______ 136
Campos, R.H._____ 138
Cangiano, A.M.____ 199
Cantor del Angel, J.A. 357
Canzoneri, M._____ 277
Caramantín Soriano, M.d.P. 142
Carbajal, F.M._____ 90
Carbajal, J.R.______ 90
Carballo, C.R. _____ 134
Carbonari, J.L. ____ 361
Cardile, V.________ 277
Carezzano, E._____ 178, 180
Cariddi, L.N. ______ 360
Cariddi, N.________ 359
Carli, C.B.d.A._____ 158, 159
Carmona, J._______ 128, 131, 218,
________________ 229, 248, 253,
________________ 276, 284, 294,
________________ 301, 319, 336
Carrasco, D. ______ 103, 368
Carro-Juárez, M.___ 308
Carvajal, Z. _______ 256
Cascavilla, N. _____ 373
Casero, C.________ 178, 180
Castañeda Valencia, G.M. 143
Castañeda, Y._____ 76
Castillo Alfonso, O. 210
Castro Gómez, A.J._ 101
Castro, N.G. ______ 337
Cattaneo, G._______ 371
Cavalheiro, A.J.____ 51, 331
Cavaliere, G._______ 38
Cavallaro, L._______ 136, 138
Cechinel-Filho, V.___ 73
Cegarra, J.________ 45
Celano, R._________ 78
Celis, C.___________ 278
Cerrato, L.________ 167
Cervantes-Reyes, J.A. 295
Chacón-Morales, P._ 112
Chacón-Morales, P.A. 35
Chalan, D._________ 231
Chalán, A.L._______ 235
Chalán, M.________ 235
Chamorro-Cevallos, G.225
Chapla, V.M. ______ 36
Chaves, D.S._______ 96, 329
Choquecillo Peña, F. 82
Chávez Garibay, L.R. 204
Ciangherotti, C.____ 45, 141, 214, 238
Clancy, M.V._______ 191
Codina, C._________ 46
Coelho Kaplan, M.A. 162
Coelho, T._________ 260
Colares, M.________ 184, 186
Colman, L.________ 48, 274
Colman, T.________ 291
Colín-Cruz, M.A.____ 195
Compagnone, R.___ 274
Condori Peñaloza, E.M. 143
Consolini, A.E._____ 144
Consoni, S.________ 59
Contigiani, M.S.____ 360
Corao, G.M._______ 148
Cordeiro de Matos, D. 146, 147, 159
Cordeiro de Matos, V. 146
Cordero, I.________ 148
Cordoba, O.L. _____ 149, 198, 199
Corona Rangel, M.L. 357
Corona Sánchez, L._ 296
Corona, A.E._______ 357
Correa Gómez, J.___ 281, 283
Corrêa Costa, R. ___ 153, 155
Cortez-Espinosa, N._ 91
Cossignani L.______ 380, 381
Costa, D.L.________ 124
Costa, S.S.________ 96, 329
Cote, V. __________ 374
Cova, J.A._________ 148
Cristiane Pimentel, V.
84, 275
Cruz Cruz, S._______49, 156
Cruz-López, C. _____126
Cruz-López, M.C.___264
Cuellar, A._________89
Cuesta-Rubio, O. ___135, 314
Cumandá, J._______227
Cunningham, F. ____168
Curi, C. ___________102
Curini, M. _________14
Cursino, L.M.C._____258, 259
Curvelo, J.A.d.R.____244
Cárdenas, N._______270
Cárdeno, A.________239, 352
Cóndor Cuyubamba, E.A.142
Córdoba, O.L.______151
'
D'Arena, G.________373
da Ressurreição, S. _189
da Silva, A.M.______189
da Silva, K.L._______73
Da Silva, M.A.______239, 241, 352
Da Silva, M.S.______239, 241, 352
da Silva, V.C._______100
Dal Piaz, F. ________66
Damiani P. ________380, 381
Damonte, G._______129
Davey, G. _________52
De Abreu, M.B._____130
de Almeida, A.P.____96, 329
de Carvalho Costa, J.
317
De Carvalho, J.E. ___92
De Faria, F.M.______59, 241
De Feo, V._________15, 20, 373
De Fina, M.________165
de Freitas Mendes, R.
317
de la Luz León Ávila, G. 358
de la Torre Rodríguez, Y.C.
311
De Leo, M. ________103, 368
De Lourenço, C.C. __367
De Martino, L. _____373
De Montijo, S.______190
de Moura, F._______333
de Oliveira Aragão, D.M. 317
de Oliveira Arruda, R.d.C.
84,
275
de Oliveira Morais, L.
335
de Padilla, F.C._____291
de Paula Barbosa, A. 39
de Prince, K._______50
De Sanctis. J. ______274
386
Index
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De Simone, F.______ 8, 10, 14, 165,
_________________ 167, 344
de Sousa Menezes, F.
52, 53
de Souza, M.M.____ 73
De Tommasi, N.____ 61, 66, 129, 130,
_________________ 356
de-Faria, F.M.______ 196, 354, 362
Debenedetti, S.____ 184
del Barrio, G. ______ 122, 306, 307
del Olmo, E._______ 54
del Rio, R.E._______ 68, 110, 173, 174
del Rio, R.E.N. _____ 206, 286
Delgado Valerio, P. _ 279
Delgado, N. _______ 89
Delgado-Hernández, R. 176
Deliza, R. _________ 115, 339
Demo, M._________ 178, 180
Derita, M._________ 182
Dessì, A.__________ 56
Di Bernardi, T. _____ 184, 186
Diamantino Boaventura, M.A. 58,
_________________ 85
Dias Santos, S._____ 189
Diaz, B.___________ 375
Diaz, T.___________ 294, 342
Ditzz, D.__________ 188
Dokkedal, A.L.D. ___ 116
Domínguez Mesa, M.I. 21
Domínguez, M.J.___ 361
dos Reis Moreira, J._ 316
dos Santos, L.C.____ 100
dos Santos, V.A.d.F.F.M. 203
Duarte Rocha, A.___ 58
Duarte, L.P. _______ 172, 327
Dubey, V._________ 224
Dublán Garcia, O.___ 105, 192, 193,
194, 195
Dubois, J._________ 305
Dunder, R.J._______ 59, 196, 241,
_________________ 354, 362
Duque, S._________ 103, 368
Durant, A._________ 60
Díaz de Delgado, G._ 114, 374
Díaz Martinez, M. __ 209
Díaz, C.___________ 87
Díaz, L.___________ 190
(
Echeverri, F._______ 197
Eletto, D. _________ 100
Enrici, A.__________ 199
Escarcena, R.______ 54
Escobar Daza, M.D. 199
Escobar, F.________ 359
Escobar, F.M. _____ 360
Escobar, Z. _______ 102
Espinoza-Herrera, N.A. 195
)
Fanos, V._________ 56
Felibertt, P._______ 48, 274
Fernandes, N.G. ___ 58
Fernando_________ 4, 6
Fernández, A._____ 134
Fernández, S. _____ 211, 350
Ferreira, A.K.B.____ 124
Ferreira, H.B.______ 258
Ferreira-Pereira, A._ 287
Ferrer, H._________ 301
Festa, M._________ 95
Fico, G.___________ 334
Floreano, M.B. ____ 328
Flores Garcia, A.___ 286
Flores García, A.___ 68
Flores Palacios, A.__ 296
Flores Álvarez, M.T. 88, 282
Flores, M.L._______ 149, 151, 198,
_________________ 199
Flores, Y._________ 102
Fontanari, C.______ 202
Formisano, C. _____ 277
Forte, L.__________ 371
Fraternale, D. _____ 61, 129
Frattani, F.________ 96
Freitas R.P. _______ 172
Freitas, L.B.d.O. ___ 188
Frigieri, M.________ 289
Fronza, M.________ 201, 366
Frías, A.I._________ 89
Funari, C.S. _______ 95
Furlan, M. ________ 203
Furtado Macedo, A. 73
Furtado, F.F.______ 37
Fusco-Almeida, A.M. 203
*
Gagey, D._________ 136
Galimberti, P.M.___ 334
Galindo, I. ________ 274
Gallucci, N. _______ 178, 180
Garcia Calderón, M.A. 204
Garcia Sanchez, E.__ 206
Garcia, A._________ 140
García González, R._ 358
García Hernandez, A.I. 89
García Martinez, G._ 207
García Mesa, M.____ 78, 344
García Peña, C.M. __ 364
García Pérez, T.____ 306
García Sanchez, E.__ 286
García, A._________ 278
García, F. _________ 268
García, G._________ 110, 173, 174
García, M._________ 135
García, P. _________ 125
García-Íñiguez, R. __ 217
Garduño-Siciliano, L. 264
Garibay-Escobar, A._ 111
Garrido González, M. 230
Garín Aguilar, M.E. _ 99, 207, 208
Gasparetto, A._____ 113
Gaviorno, M. ______ 67
Gayol, M.F.________ 351
Geysa Aguiar, R. ___ 146
Giacomelli, E.______ 61, 129
Giacomini, M.______ 61
Giannini, M.J.S.M.__ 203
Gilardoni, G._______ 340
Goleniowski, M.____ 65
Gomes de Oliveira, A. 42
Gomes de Queiróz, C. 335
Gomes, D._________ 189
Gonzales, E._______ 102
Gonzalez Leavaut, J.A. 15, 21, 209
Gonzalez-Mujica, F._ 130
González Coronel, M.A. 77
González García, K.L. 209
González Madariaga, Y. 210
González Márquez, V. 369
González Sanabria, M.L. 364
González Trejo, L.A. 99
González, I. _______ 115
González, M.A. ____ 250
González, V._______ 319
González-Mujica, F._ 103, 368
Gordillo Martínez, A.J. 230
Graminha, M.A.S. __ 203
Granados Guzmán, G. 310
Granadé, M.N._____ 347, 351
Gratti, A.__________ 211, 350
Grillo, L.M.________ 124
Grosso, N.R._______ 347, 351
387
Index
www.silae.net
Gualtieri, M.J._____ 66
Guamán, N._______ 235
Guamán, R._______ 235
Guerrero Luna, G.__ 219
Guerrero-Analco, J. 45
Guevara Campos, B.M. 272
Guimarães Leitão, G.16, 27
Guimarães, E.F. ___ 243
Gutiérrez Pérez, R._ 49, 70, 156, 221,
________________ 222
Guzman, R._______ 174
Guzmán-Martínez, J.C. 217
Gómez-Oliván, L. __ 226
Gómez-Oliván, L.M. 105, 192, 193,
________________ 194
Günther, S._______ 201, 366
+
Habballah, K. _____ 214
Hahn, O._________ 348
Harrisson, S.______ 215
Heinzmann, B. ____ 201, 366
Hernandez Gallegos, Z. 213
Hernandez Hernandez, J.D. 206
Hernandez, J._____ 218
Hernandez, Z._____ 68
Hernández Basave, L. 270
Hernández Camargo, L.A. 88
Hernández De Jesus, L. 216, 358
Hernández Linares, G.219
Hernández Mondragón, K.279
Hernández Navarro, D. 193
Hernández Tellez, G.49, 70, 156, 221,
________________ 222, 249
Hernández, F._____ 250
Hernández, V._____ 117
Hernández-Hernández, J.D. 217
Hernández-Navarro, M.D. 225, 226
Hernández-Pérez, J.M. 133
Herrera Fuentes, M.d.C. 251, 252,
________________ 348, 349
Herrera Ruiz, M.___ 267
Herrera, C. _______ 125
Hilario, F._________ 44
Hodgkins, T.______ 191
Huelvas, P. _______ 302
Humberto, M:M.S._ 124
Héctor Salgado, Z._ 268
,
Index____________ 3
Introduction ______ 3
Inés Silva, P._______ 231
Iorio, E.L._________ 15, 71
Iriti, M.___________ 334
Isla, M.I.__________ 263
Israel, A.__________ 45, 141, 212, 238
Jacinto Díaz, W.____ 204
Jiménez Ferrer, J.E. 267
Jiménez, J.________ 197
Jiménez-Estrada, M. 111
Jiménez-Montejo, F.E.264
Joel, L.___________ 229
Joseph Nehme, C.__ 289
José Salvador, M.__ 313
Jurado Teixeira, B. _ 143
Juárez Posadas, J.R. 369
Juárez, B.E. _______ 263
Játiva, C. _________ 375
.
Kaplan, M.A.C._____ 243, 244
Kassuya, C.A.L. ____ 92
Khouri, S._________ 113
Kouznetsov, V. ____ 48
Kritsanida, M. _____ 198
/
Laciar, A. _________ 228
Laguna, A.________ 209
Lamoru Moreira, K._ 41
Lamy, E.__________ 201, 366
Landell, M.F. ______ 258
Lapinski, T.F.______ 113
Laufer, S._________ 201, 366
Lauro, M.R. _______ 93
Leal-Costa, M.V. ___ 73
Leida, Z.__________ 343
Leite, C.Q.F._______ 50, 161, 202
Leite, S.R.A._______ 50, 161
Leitão, G._________ 260, 261, 262
Leitão, G.G. _______ 108
Leitão, S.G. _______ 108, 163, 260,
_________________ 261, 262, 337
Leon, A.__________ 68
Lima, C.H.P._______ 244
Lima, C.N._________ 134
Lima, L.A.R.S. _____ 85
Linares Reyes, C.G._ 88
Lionetti, L. ________38
Lopes, M.N. _______36
Lopes, M.T.P.______188
Lorenzo Monteagudo, G. 273
Lotti, C.___________287
Loureiro, M.C.S.____260
Lozano, M.A. ______75
Lucena, M.________302
Lucena, M.E._______247
Luiz Fabri, R._______316
Luiz-Ferreira, A.____59, 196, 241,
_________________354, 362
Lòpez Avila, H._____77
López Hernández, O.D. 364
López, A.R.________305
López-Canúl, M.____308
López-Gutiérrez, B.N. 230
0
Machado da Fonseca, V. 162
Machiste, M._______212
Magdaleno-Morales, E. 225
Maia, D.C.G._______159
Malafronte, N._____66, 355
Malagon, O._______340
Malagón, O._______75, 231, 233,
_________________235, 237
Maldonado, A.M.___45, 141, 238
Mamadou Moustapha, B. 296
Mamani, O.________102
Mannion, F. _______171
Manzo, L.P.________59
Marcano, D._______215
Marcondes-Ferreira, W. 337
Marcos González, F. 77
Marques, A.M._____243, 244
Marques, R.F.______189
Marques, R.J.______116
Marti-Mestres, G.___190
Martinez Muñoz, R.E.
206
Martinez Pacheco, M.M. 206, 213
Martinez, J.R.______251, 348
Martini, M.________163
Martiniano Nasser, A.L. 158
Martino, V.________136
Martorana, M. _____365
Martínez Estrada, F.R. 311
Martínez Pacheco, M.M. 68, 286
Martínez, I.________110, 173, 174
Martínez, N._______76, 257
Massolino, C. ______340
388
Index
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Masullo, M. _______ 44, 266
Mata, R.__________ 45
Matos Rolim, A.C. __ 146
Matos, M.G._______ 141, 238
Mattana, C. _______ 245
Meccia, G.M. ______ 247
Medeiros, I.A. _____ 37
Medina, A. ________ 190
Medina, D.G. ______ 369
Medina, R. ________ 231
Melendez, P. ______ 342, 343
Melendrez Luevano, R. 221
Mello da Silva, J. ___ 317
Melo Ruíz, V. ______ 251, 252, 348,
_________________ 349
Meléndez, M.______ 248
Meléndez, P. ______ 117, 132, 190
Meléndrez-L, R.____ 133
Mencherini, T. _____ 78, 93
Mendez, G.________ 278
Mendiondo, M.E.___ 263
Mendoza, A._______ 133
Menezes, F.d.S.____ 168, 169, 170,
_________________ 171, 191
Menéndez Castillo, R. 364
Merchan, D._______ 48
Merchán, C._______ 233
Merfort, I._________ 15, 25, 201, 366
Mestrallet, M.G.____ 347
Meza Reyes, S._____ 219
Meza, D.__________ 76
Michel, S._________ 198
Migliani de Castro, G.M. 287
Miguel Delgado, J.__ 114
Minervini, M.M.____ 373
Molina ___________ 4
Molina Torres, J. ___ 107
Molina-Salinas, G. __ 54
Molina-Torres, J.___ 91
Monier, P._________ 199
Montani, C.________ 67
Monteagudo, E.____ 273
Montes Hernández, E. 357
Montiel Smith, S.___ 219
Monzote, L._______ 135
Mora, F. __________ 117, 253, 284,
_________________ 294, 302, 342
Mora, F.D. ________ 319, 343
Mora-Escobedo, R. _ 225
Moraes, L.A.B._____ 202
Morales Gómez, E. _ 270
Morales López, E.__ 68, 213
Morales, A. _______ 132, 304
Morales-Chávez, S.D.
111
Morcef Bouzada, M.L. 316
Moreira, D.d.L. ____ 162, 163, 243
Moreira, D.L.______ 244
Morelli, S. ________ 165, 167, 344
Moreno Barbosa, G. 162
Moreno Díaz, J.____ 204
Moreno, A. _______ 249
Moreno, J.A.______ 77, 250
Morocho Zaragocín, S.V. 340
Morón Rodriguez, F.J. 89
Morón Rodríguez, F. 273
Mota da Costa, A.K. 146
Mota, R.F.________ 333
Moura, F._________ 327
Munin, E._________ 113
Murillo, E. ________ 79
Murillo, R.________ 201, 366
Murray, A.P. ______ 297, 298
Muschietti, L. _____ 136, 138
Muñiz González, I. _ 251, 348
Márquez, I._______ 135
Méndez, J.________ 103, 368
1
Napolitano, A._____ 44, 95, 100, 266
Nastos, V. ________ 165, 167, 344,
_________________ 345
Negri, R. _________ 340
Negrón, E.________ 256
Nepote, V.________ 347, 351
Neves Vieira, M.___ 337
Nicoletti, M. ______ 15, 18
Niero, R. _________ 73
Nieves, J._________ 274
Nikoloff, N._______ 94
Nobre Moraes, A.C.L. 146
Nogueira, P.P.O.___ 259
Nunez, C.V._______ 258, 259
2
Obregon, Y._______
Ocampo, E._______
Oliva, M. _________
Oliveira, A.M. _____
Oliveira, A.P.S. ____
Oliveira, D.R.______
_________________
Oliveira, M.S.______
300
102
178, 180
51, 331
314
108, 260, 261,
262, 337
328
Oliveira, T.S._______ 328
Olmedo, R.H.______ 347
Olmos Guzman, A.__ 68, 213
Oral______________ 3
Ordoñez, R._______ 263
Orea Flores, M.L.___ 369
Orozco Arboleda, L.M. 370
Orsini, G. _________ 45
Ortiz-Moreno, A.___ 225, 226
Oscar, G.__________ 22
O´Dwyer, E.C.______ 108
O´Dwyer, E.C.1_____ 261
O’Sullivan, H.______ 52
O’Sullivan, L.A.J.___ 53
3
Pacheco-Álvarez, T._ 133
Pacifico, M. _______ 44
Padilla, F.C. _______ 292, 293
Palacio, L._________ 65
Palacios, J.R. ______ 134
Palácios Abrantes, J.252, 349
Panico, V._________ 165, 167
Pardo, J.C.________ 110, 173
Parra, F.__________ 122, 306, 307
Pascoal, A.C.R.F.___ 313, 367
Passalacqua, T.G.___ 95
Pastorello, M. _____ 212
Paula, R.C. ________ 172
Pavan, F.R.________ 50, 161, 202
Paz Parente, J._____ 39
Pazos-Guarneros, D.C.264
Pellizzon, C.H._____ 241
Peralta Hinojosa, K._ 82
Pereira da Silva, B.__ 39
Pereira do Amaral, F. 266
Pereira, A.M.S._____ 203
Perez, A.M. _______ 87
Perez, L.__________ 301
Pesca, M.S.________ 66
Peña Morán, O.____ 296
Peña Rosas, U._____ 222
Peña Rosas, U.A.___ 49, 70, 156, 221
Peña, A. __________ 104, 123, 175,
_________________ 265
Peña, D.__________ 123
Pfenning, L.H. _____ 58
Piacente, S. _______ 44, 95, 100, 266
Piccinelli, A._______ 78, 135
Piccinelli, A.L.______ 287, 344
Picerno, P.________ 78, 93
389
Index
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Pimenta, L.P.S.____ 85
Pimentel, A. ______ 48, 274
Pinciroli, L. _______ 371
Pineda, L. ________ 276
Pinedo, V.R. ______ 90
Pinheiro Barreto, L.d.F. 146
Pino Benítez, N.___ 255
Pintado, M._______ 189
Pinto Vitorino, G.__ 199
Pirisi, F.M.________ 14
Pivetti, S._________ 61
Pizza, C.__________ 95, 100
Plenary__________ 3
Portilla-Mancilla, I.D.195
Portillo, R.________ 249
Porto, P.C.C.______ 337
Posters__________ 3
Postorino S.______ 380, 381
Poveda, L.________ 125
Prado Alcalá, R.A. _ 207
Prado González, O.R.
255
Prince, K.A._______ 161
Program_________ 3
Pérez Escandón, B.E.
230, 290
Pérez Gutierrez, S._ 270
Pérez Gutiérrez, M.S.
269
Pérez Gutiérrez, S._ 267, 268, 271
Pérez Hernández, C. 251, 348
Pérez Machín, M.__ 273
Pérez Meseguer, J. 310
Pérez, A._________ 339
Pérez-Escandón, B.E.
223
Pérez-López, L.A.__ 272
Pérez-Meseguer, J. 54
Pérez-Vallejo, M.M. 217
4
Quaglio Bellozi, P.M. 317
Quaresma, C.H. ___ 162
Quesada La Rosa, D. 210
Quesada, S._______ 87
Quintero, A.______ 291
Quintero-Salazar, B. 105, 192, 194
Quiroga, P.R. _____ 347, 351
Quiroz Bravo, M. __ 216
Quizhpe, M.A. ____ 231
Quiñones, W._____ 197
5
Rabbitt, K. _______ 170
Rabello, A.L.T. ____ 85
Radulovic, N.______ 169, 170
Rahayu, I._________ 169
Ramirez Lopez, C.__ 286
Ramirez Lopez, C.B. 206
Ramirez, E.________ 249
Ramirez, G. _______ 254
Ramirez, J.C.______ 249
Ramirez, J.S. ______ 305
Ramos Corrales, P._ 184
Ramos López, M.A._ 269
Ramos, J.G._______ 268
Ramos, S._________ 247
Ramírez Chavez, E._ 107
Ramírez, J.C.______ 133
Ramírez, R. _______ 284, 319
Ramírez-Chávez, E._ 91
Ramírez-González, I. 285
Rangel, R.M. ______ 371
Rascón-Valenzuela, L.A. 111
Rastrelli, L.________ 2, 14, 78, 135,
_________________ 165, 167, 287,
_________________ 344
Raya Gonzales, D.__ 68
Raya Gonzalez, D.__ 286
Reigadas Sánchez, E. 369
Reis de Sá, L.F. ____ 287
Resende, F. _______ 289
Resende, F.A. _____ 288, 314
Retta, D.__________ 136
Reyes Silva, J.A.____ 290
Reyes, L. _________ 303
Reyes, S.M. _______ 305
Reyes-Leyva, J. ____ 126
Ribeiro, E.A.N._____ 37, 124
Ribeiro, L.C.d.A. ___ 147, 159
Ricci, D. __________ 61, 129
Rigano, D. ________ 277
Rinaldo, D.________ 95
Rincón, A.M. ______ 291, 292, 293
Rios, N.___________ 294, 342
Rios, N.N._________ 294
Riva, D.___________ 92
Rivas Galindo, V.M._ 272
Rivas-Vilchis, J.F.___ 295
Rivero Martinez, J._ 252, 349
Rivero, J. _________ 348, 349
Riveros, C.G. ______ 347, 351
Rizza, L.__________ 365
Robledo, D._______ 255
Robles, J._________ 140
Robles-Zepeda, R.E. 111
Rodrigo, G.________102
Rodrigues, C.M.____100
Rodrigues, S.B.V.___172
Rodriguez Aguirre, O.E. 98
Rodriguez, E.______22
Rodriguez, S.A. ____297, 298
Rodríguez Chanfrau, J. 364
Rodríguez Hernández, C. 269
Rodríguez López, T._ 296
Rodríguez López, V._ 296, 358
Rodríguez, M.______215
Rodríguez-Landa, J.F. 308
Rodríguez-Ortega, M. 256
Rodríguez-Villanueva, C. 35, 112, 114
Rojas, H.__________48, 274
Rojas, J. __________123, 299, 304,
_________________374
Rojas, L. __________128, 131, 132,
_________________218, 248, 253,
_________________276, 284, 294,
_________________300, 301, 303,
_________________304, 336, 342
Rojas, L.B._________35, 229, 247,
_________________299, 302, 319,
_________________343
Rojas, Y. __________319
Romanha, A.J. _____85
Romero Castillo, C.A. 105, 192, 194
Romero Origel, C.M. 271
Romussi, G.________61, 129
Román, L.U._______206
Román-Marín, L.U.__217
Román-Ramos, R. __295
Ron Echeverria, O.A.213
Roque, A._________122, 306, 307
Rosella, M.________184, 186
Rosquete-Porcar, C._ 332
Rosselli, S. ________277
Rossi, E.A._________159
Rovira Álvarez, I.___208
Ruiz Belmán, A. ____216
Ruiz Tagle, A.______49, 156
Russo, A.__________277
Russo, L.__________165, 167, 345
Russo Mt._________380, 381
Russo, R.__________355, 356
Ruth Meléndrez, L. _77, 249, 250
Ríos-Chávez, P._____91
6
Saad, J.R. _________228
390
Index
www.silae.net
Saavedra, M. ______ 102, 308
Sabini, C.__________ 245
Sabini, L.__________ 245, 359
Sabini, L.I._________ 360, 361
Sabini, M.C. _______ 359, 360, 361
Saca, M.A. ________ 231
Said-Fernández, S.__ 54
Saija, A.___________ 365
Salazar Aranda, R.__ 272, 310, 311
Salazar-Bookaman, M. 45, 214
Salcedo, L.________ 102
Saldanha, L.L.______ 116
Sales Júnior, P.A.___ 85
Salgado García, R.__ 68
Salgueiro Lage, C.L._ 73
Salinas Sánchez, D.O.
267
Salinas, D._________ 102
Salis, A.___________ 129
Sallum, W.S.T. _____ 327, 333
Salvador, M.J. _____ 92, 113, 354,
_________________ 362, 367
Salvati, B._________ 167
San Feliciano, A. ___ 54
San Martin, A. _____ 102
Sanchez-Fidalgo, S._ 239, 352
Sandoval Ramírez, J.
219
Sansone, F.________ 78, 93
Santamaría González, G.O.
193
Santoro de Camargo, M. 315
Santos, A.C.B. _____ 161
Santos, A.G._______ 51, 331
Santos, E.P. _______ 92
Santos, G.C._______ 58
Sant’Ana, A.E.G.____ 37, 124
Saranz Camargo, E._ 42
Sariego, I._________ 135
Sato, D.N._________ 50
Sato, L.S. _________ 202
Satorres, S.________ 245
Saura-Calixto, F.D.__ 16, 28
Savino, L._________ 373
Scarpa, G.F. _______ 67
Schwartz Tavarez, E.
73
Scio, E. ___________ 316, 317
Scior, T. __________ 110, 173, 174
Segnini, S. ________ 284
Segura Cobos, D.___ 208
Segura, L._________ 140
Senatore, F._______ 277
Sepúlveda-Arias, J.C.
370
Sequeda, G._______ 278
Serrano Vega, J.R. _ 271
Severino, L._______ 15, 355, 356
Sharry, S._________ 94, 318, 371
Silva Barreto, A.L.__ 244
Silva Darcourt, H.E._ 320
Silva Nogueira, M. _ 316
Silva, B. __________ 253, 319
Silva, D.H.S._______ 36, 95
Silva, F.C._________ 327
Silva, G.D.F._______ 172, 327
Silva, G.H. ________ 161
Silva, I.___________ 259
Silva, J.A._________ 141, 238
Silva, L. __________ 299
Silva, M.A.________ 196
Silva, P.E.A._______ 260
Simonetti M.S. ____ 380, 381
Sinisi, N.P.________ 373
Siqueira de Oliveira, A.P. 315
Smith, S.M._______ 305
Soares, C.P._______ 51, 331
Soares, R.M.d.A.___ 244
Socca, E.A.R.______ 59, 196, 239,
_________________ 352
Socca, E.R.________ 354, 362
Sojo, F.___________ 48, 274
Sordi, R.__________ 161
Soriente, I.________ 38
Sosa, A.__________ 245
Sosa-Moreno, A.___ 332
Soto Hernández, M. 207
Soto, L. __________ 76
Souza Brito, A.R.M. 354, 362
Souza Ferreira, L.__ 147, 159
Souza-Brito, A.R. __ 59
Souza-Brito, A.R.M. 239, 241, 352
Souza-Brito, A.R.M.S.
196
Spegazzini, E._____ 184, 186
Spengler, I._______ 306
Suarez, A. ________ 212
Suarez, A.I. _______ 274
Sueiro Oyarzun, M.L.
273
Sutil, S.B._________ 360
Sánchez Alvarez, C. 210
Sánchez López, J.A. 357
Sülsen, V._________ 136, 138
7
Tafolla Venegas, D._ 281, 283
Taira, C.A. ________ 149
Takahashi, J.A. ____ 327, 328, 333
Takayama, C.______ 59, 196, 241,
_________________ 354, 362
Talero, E. _________ 239, 352
Tansini, A._________ 159
Tarantino, R. ______ 214
Tefera, M. ________ 106
Temraz, A.________ 130
Tene Saca, M.A.____ 231
Tenório, E.P. ______ 37
Terán Vázquez, J.L._ 369
Tessis, A.C.________ 287
Tillequin, F.________ 198
Toledo, I.B.________ 198
Tomaino, A._______ 365
Tomè, F.__________ 334
Tonn, C. __________ 359
Torras-Claveria, L.__ 46
Torrenegra, R._____ 14, 15, 22, 98,
_________________ 278
Torres, C.V. _______ 361
Tovar Hernández, J.C. 223, 230
8
Uhrich, A.V. _______ 151, 199
Usubillaga, A.______ 45, 104, 123,
_________________ 128, 131, 148,
_________________ 175, 218, 247,
_________________ 248, 265, 276,
_________________ 284, 300, 301,
_________________ 303, 336
Uzan, V. __________ 289
9
Vaca Ruiz, M.L. ____ 228
Vainstein, M.H. ____ 258
Valdés Iglesias, O.__ 209
Valencia Del Toro, G.99, 207, 208
Valente Santos, C.__ 189
Valenzuela, E. _____ 102
Valido, A. _________ 210
Valiente, M.A.A.____ 344
Valverde Macedo, E. 335
Vangelisti, R. ______ 378
Varanda, E.A.______ 51, 288, 289,
_________________ 314, 331
Varela, M._________ 212
Vargas, N._________ 252
Vargas, Y._________ 336
Varotti, F.P. _______ 172
Vassallo, A.________ 165
Vazquez Cala, K. ___ 41
391
Index
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Velasco, J.________ 294, 342
Veloza Castiblanco, L.A. 370
Velozo, L.S.M. ____ 243, 244
Velázquez-Contreras, C.A. 111
Vera Hernández, O.E. 194
Vera, N.__________ 182
Verdecía Machado, B. 210
Vian, L. __________ 190
Vidari, G._________ 75, 231, 233,
________________ 235, 237, 340
Viegi, L.__________ 378
Vieira Lima, I.d.A.__ 317
Vieira-Filho, S.A.___ 327
Viladomat, F. _____ 46
Vilegas, W. _______ 44, 100, 158,
________________ 196, 241, 266,
________________ 288, 289, 315
Villarreal, B. ______ 94, 318, 371
Villasmil, T._______ 123
Villavicencio Nieto, M.A.223, 230,
________________ 290
Villegas, W._______ 50, 239, 314,
________________ 352
Vimos, J._________ 375
Violato, N.M. _____ 116
Vishwakarma, K. __ 224
Visintini Jaime, M.F. 138
Vit, P.____________ 115, 339
Vita Finzi, P. ______ 231, 233, 235,
________________ 340
Vita-Finzi, P. ______ 14, 75
Vitalini, S. ________ 334
Volonté, M.G._____ 144
Vázquez Bravo, J.__ 70, 222
=
Zacchino, S._______ 182
Zacharaki, A.______ 46
Zamilpa Alvarez, A._ 267
Zamora, M. _______ 250
Zampini, I.C._______ 263
Zamudio Quintana, D. 193
Zamuner, S.R. _____ 113
Zanardi, L.M.______ 36
Zani, C.L. _________ 85
Zanon, S._________ 359, 361
Zanon, S.M._______ 360
Zapata, S._________ 197
Zavala Sánchez, M.A. 269, 270, 271
Zeppone Carlos, I.__ 147, 158, 159
Zingali, R.B._______ 96, 329
Zygadlo, J.________ 178
Zygadlo, J.A. ______ 351
§
:
Waksman de Torres, N. 272, 310, 311
Waksman, N. _____ 54
Wardell, J.________ 328
Wardell, S.M.S.V.__ 328
Winiewski-Jr, A.___ 92
Wink, M._________ 357
;
Xochipa, L. _______ 250
<
Young, M.C.M.____ 95
Yánez Colmenares, C.A. 342
Yánez, C._________ 294
392
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XIX° SILAE Congress “Fernando Cabieses Molina”

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