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TRABAJO PRÁCTICO Nº 5
ESTUDIO DE ANEMIAS
Emilse Ledesma Achem
- 2016 -
EVALUACIÓN CLÍNICA:

¿Cuándo fue el último análisis sin anemia?
 Origen étnico
 Antecedentes personales y heredofamiliares
ESTUDIO DE
LAS ANEMIAS
 Tratamiento previo con hierro, ácido fólico,
vitamina B12.
ESTUDIOS DE LABORATORIO:
1) Hemograma. Buena observación del frotis.
2) Reticulocitos
3) Estudio del metabolismo del hierro
4) Determinaciones especiales: - Electroforesis de Hb
- ROE
Toma de
muestra
Hemograma
Reticulocitos
Frotis
Electroforesis de Hb
• Fe
• TIBC
• % Saturación
•Ferritina
ROE
RECUENTO DE
RETICULOCITOS
3 gotas de sangre
entera
+
3 gotas de Azul
Brillante de Cresilo
Reticulocitos % =
Ret. corregidos =
Incubar 37 ºC
15 minutos
Extendido
Nº Reticulocitos Contados x 100
Nº Hematíes observados
Reticulocitos Contados % x Hto pac.
Hto. Promedio Normal
RETICULOCITOS
Estudio del Metabolismo del hierro
 Determinación de la concentración de hierro sérico
• Método Colorimétrico: Fundamento
Fe3+
Fe3+
Buffer – ph 3,7
Reductor
TF
Fe2+
+
Fe2+
PBTS
Fe2+
TF
+
Fe2+
Complejo
coloreado
• Muestra
• TECNICA
H2O
•Limpieza del material
Blanco
Standard
-----
Desconocido
---------
Standard
500 ul
----
500 ul
Muestra
----
----
500 ul
2 ml
2 ml
Buffer/Reductor
PBTS
2 ml
Mezclar y leer a 560 nm
1 gota
Mezclar y leer a 560 nm contra agua
destilada
1 gota
Blanco
de
suero
1 gota
Varones: 65-175 μg/dL
Mujeres: 50-170 μg/dL
Niños (1-12 años): 35-135 μg/dL
TIBC : CAPACIDAD TOTAL DE UNIÓN DE HIERRO
A TRANSFERRINA
Fe3+
Fe3+
Fe3+
Fe3+
Fe3+
Fe3+
Fe3+
TF
TF
Fe3+
+
Fe3+
Fe3+
Fe3+
TF
Fe3+
+ Agente quelante
Fe3+
Fe3+
Fe3+
TF
TF
Fe3+
TF
Fe3+
Fe3+
TF
Fe3+
ph>7,2
Fe3+
TF
Fe3+
Fe3+
Fe3+
Fe3+
Fe3+
TF
r.p.m.
SEGUIR CON
TECNICA DE
HIERRO
SERICO
VR: 250 – 400 ug/dL
% de Saturación de la Transferrina
% Saturación =
Fe sérico ug/dL
x 100
VR: 20 – 55 %
Transferrina ug/dL
INTERPRETACIÓN
Anemia
ferropénica
A.T.C.
Fe sérico
TIBC
%
Saturación
Talasemia
Anemia
Sideroblástica
No
No
N
No
N
Estadios de la deficiencia de hierro
Estadio 1
PARÁMETROS
Hemoglobina
Fe sérico
TIBC
Ferritina
Estadio 2
Depleción de
Depleción del
los depósitos de transporte de Fe
Fe
Estadio 3
Depleción del
Fe funcional
N
N
↓
N
↓
↓
N
↑
↑
↓
↓
↓
Anemia
Ferropénica
RESISTENCIA OSMÓTICA ERITROCITARIA
Medida de la capacidad de una población de hematíes
para resistir el efecto hipotónico del medio.
Prueba
1
2
9g/L
0 % de
hemolisis
3
4
5
6
7
8
9
10
Soluciones de NaCl de concentración decreciente
11
12
0 g/L [NaCl]
100 % de
hemolisis
Para cada eritrocito la ROE depende de la relación existente entre su
superficie y el volumen. Esta prueba proporciona información sobre el
cambio de forma del eritrocito (relación superficie / volumen) a partir
de su forma normal (disco bicóncavo).
-Esferocitosis
hereditaria
-AHA
Anemias
microcíticas
hipocrómicas
ROE Normal
ROE Disminuida
ROE Aumentada
La ROE se expresa como la concentración de NaCl necesaria para
producir un 50% de hemólisis (H50).
Valores de Referencia
Hemólisis 50% inmediata: 4,0 – 4,5 g/L
Hemólisis 50% post-incubación: 4,6 – 5,9 g/L
1
2
3
1-Paciente Talasémico: disminución de la fragilidad osmótica (aumento de la
ROE) H50% = 3,4g/L. 2-Paciente Normal: H50%= 4,4 g/L. 3-Paciente con
Esferocitosis hereditaria: Aumento de la fragilidad osmótica (disminución de la
ROE) H50 %= 5,9 g/L.
ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA
• Electroforesis de hemoglobina a ph alcalino
• Electroforesis de hemoglobina a ph ácido
• Muestra: sangre entera (EDTA, heparina).
Las muestras deben ser lavadas 3 veces en solución salina
isotónica.
• Hemolizado: se puede usar una solución lisante (EDTA, KCN y
agua) o lisar por congelamiento y descongelamiento en el freezer.
• Siempre procesar, simultáneamente, una muestra control.
• Tiras de acetato de celulosa o gel de agar
•Coloración
PATRÓN ELECTROFORÉTICO A PH ALCALINO
+
-
NORMAL
b-TALASEMIA
MENOR
RASGO FALCIFORME
ENFERMEDAD SC
SANGRE NORMAL
DE CORDÓN
RASGO C
CONTROL
º
CA1
A2
S
C
D
E-O
G
F
A
º: Indica el origen
PATRÓN ELECTROFORÉTICO A PH ÁCIDO
+
NORMAL
RASGO FALCIFORME
RASGO D
ENFERMEDAD SC
ENFERMEDAD SE
SANGRE NORMAL
DE CORDÓN
RASGO C
CONTROL
C
S
º
A
D-O
E-G
F
º: Indica el origen
ELECTROFORESIS DE HB A PH ALCALINO
1
2
3
A F
A2
1-b-talasemia menor (Hb A2 aumentada)
2-b-talasemia homocigota (Hb F únicamente , Hb A y Hb A2 ausentes)
3-Normal
Hb disminuida
IPR
≥3
Regenerativas
A. Posthemorrágicas
Agudas
Intracorpusculares
A. Hemolíticas
HPN (HAM)
Fe-Tf-Ferritina
D-A-D
D-D ó N-A
(A.Ferropénica)
(ATC)
Extracorpusculares
N/A
VCM
PCD
P. Especiales
(ROE, Elect. Hb)
≤1
Arregenerativas
D (A.SideroblásticaInmunes
No Inmunes
R. de Perls)
N (A.Aplásica, por
ocupación)
A (A.Megaloblástica)
D= disminuido
A= Aumentado
N=Normal
Anemia Ferropénica
RBC: 1.66 M/µL
HGB: 3.0 g/dL
HCT: 11.0 %
MCV: 63 fL
MCH: 18.1 pg
MCHC: 28.0 g/dL
RDW: 20.0 %
RBC
50
100
150
200
Anemia Megaloblástica
RBC: 2.94 M/µL
HGB: 10.2 g/dL
HCT: 31.8 %
MCV: 108 fL
MCH: 34.7 pg
MCHC: 32.1 g/dL
RDW: 22.8 %
Hemoglobinopatía S
heterocigota
GRACIAS POR SU ATENCIÓN!

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