Seraclone Anti

[UK]
®
Seraclone Anti-s (MNS4)
For the determination of red cell antigen s (MNS4)
[REF]
808 068
2 ml
[PRES] Preservative: < 0.1 % NaN3
[ACT]
Activity / Min.titer
[IVD] Diagnostic reagent for in vitro use only
To be used by trained laboratory personnel only. The [ACT] is printed on the label.
Symbols are used according to regulation EN 980. Symbols not contained in
regulation EN 980 are described.
Test purpose
Seraclone® Anti-s (MNS4) is used to determine the red cell antigen s.
Test principle
The test principle is a hemagglutination test to determine the respective red cell
antigens. The blood type s is defined by presence or absence of the s antigen on
red cells. The antigen s reacts specifically with the corresponding antibody in
Seraclone® Anti-s (MNS4). A positive reaction is visible by agglutination. The
reagent can be used in tube testing.
Reagent
As reactive component Seraclone® Anti-s (MNS4) contains a human monoclonal
antibody of the immunoglobulin class IgG. It derives from cell culture supernatant and
demonstrates the consistent specificity and reproducibility characteristic for
monoclonal antibodies.
Seraclone® Anti-s (MNS4)
clone P3YAN3
Performance characteristics and limitations of the method
In case of negative results in an indirect antiglobulin-test, a repetition with antibody
coated reagent cells should be carried out. Failure of this control can occur due to
either errors in the test procedure or a decrease of the reagent’s reactivity. In case of
questionable results of unknown origin our Bio-Rad Service will assist you (phone:
+49-6103-3130-611).
Shelf life
After opening the reagent the product can be stored until its expiry date under proper
storage conditions (2...8°C). The expiry date is printed on the label. Do not use
damaged vials.
Warning and precautions
Turbidity or other visible changes may indicate a bacterial contamination. In this case
the reagent must be discarded. The cause for this change must be examined by the
manufacturer.
All manual techniques are to be performed according to the manufacturer’s
instructions. If not, it is the sole responsibility of the user. Used tests must be
discarded as hazardous material. Waste management according to national
guidelines. Because of biotechnological manufacturing of human monoclonal
antibodies a contamination with infectious agents can be considered impossible.
Nevertheless, all test reagents of biological origin must be regarded as potential
transmitters of hepatitis, HIV or other infectious agents. Appropriate safety
precautions are recommended. Internal quality controls according to national
guidelines, e.g. (1), are recommended at regular intervals. As a minimum a positive
and a negative control should be used.
References
(1) Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung
von Blutprodukten (Hämotherapie), Gesamtnovelle 2005, Deutscher Ärzte-Verlag
Köln
(2) Technical Manual, 15th edition, Section 1, American Association of Blood Banks
Key: Underline = Addition or significant change ◄= Deletion of text
Material required but not supplied
• Pipettes (drop volume 40-50μl)
• Distilled water
• Isotonic saline solution
• Anti-Human-Globulin (e.g. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804115 and 804130)
• MLB 2 ([REF], 805205, 805200)
• IgG-coated reagent red cells (e.g. Coombscell-E [REF] 816030)
• Glass tubes
• Laboratory centrifuge
Sample material
Blood samples are taken according to common extraction procedures. Fresh, nonhemolytic samples (clotted blood, EDTA, or citrate blood) should be used. If needed
prepare a red cell suspension from a centrifuged blood sample (e.g. 2 min. at 800 1000 x g) in isotonic saline solution as suspension medium. We recommend to wash
the red cells to be tested prior to preparing the cell suspension at least 2 times or
until the supernatant is clear. Strongly lipemic, icteric or microbially contaminated
samples may lead to false results.
Test procedure
Tube test
1. Prepare a 3 – 5 % suspension of the red cells in isotonic saline.
2. In an appropriately marked tube mix 1 drop reagent and 1 drop of red cell
suspension.
3. Incubate for 30 minutes at 37°C.
4. Wash red cells three times with isotonic saline solution. Decant supernatant
completely.
5. Add 2 drops of anti-human-globulin to the packed red cells and mix.
6. Centrifugate for 20 seconds at 800 - 1000 x g.
7. Gently dislodge cell button and observe for agglutination.
Tube test, LISS method
1. Suspend red cells to be tested 3–5 % in isotonic saline solution
2. In a properly marked tube mix 1 drop reagent, 1 drop red cell suspension and 2
drops MLB 2.
3. Incubate for 10 minutes at 37°C .
4. Wash red cells 3 times in isotonic saline solution. Completely decant
supernatant.
5. Add 2 drops Anti-Human-Globulin and mix.
6. Centrifuge for 20 seconds at 800 - 1000 x g.
7. Gently dislodge the cell button and observe for agglutination.
A positive and a negative control should be performed in parallel (1).
Interpretation of results
Evaluation of the reaction
(2):
Reaction strength
4+
3+
2+
1+
+/-
strength is carried out according to the Technical Manual
Agglutination
One single agglutinate. No free red cells.
Strong reaction. Some large agglutinates.
Medium-size agglutinates, no free red cells.
Numerous small agglutinates against a background
of free red cells.
Just a few macroscopically detectable agglutinates
within red cell suspension. Numerous
microscopically detectable agglutinates.
Homogenous red cell suspension without
detectable agglutinates.
[DE]
Seraclone® Anti-s (MNS4)
Zum Nachweis des erythrozytären Antigens s (MNS4)
[REF]
808 068
2 ml
[PRES] Konserviert mit : < 0,1 % NaN3
[ACT]
Aktivität / Mindesttiter
[IVD] Reagenz zur In-vitro-Diagnostik
Nur für die Verwendung durch geschultes Laborpersonal. Der [ACT] ist dem Etikett
zu entnehmen. Symbole werden entsprechend der Norm EN 980 verwendet. In EN
980 nicht enthaltene Symbole sind im weiteren Text erklärt.
Verwendungszweck
Seraclone® Anti-s (MNS4) wird zum Nachweis des Blutgruppenmerkmals s
eingesetzt.
Testprinzip
Das Testprinzip ist ein Hämagglutinationstest zum Nachweis des entsprechenden
Erythrozyten-Antigens. Die Blutgruppe s wird durch das Vorhandensein oder
Fehlen des Merkmals s auf den Erythrozyten definiert. Das Antigen s reagiert
spezifisch mit dem korrespondierenden Antikörper in Seraclone® Anti-s (MNS4).
Eine positive Reaktion wird durch eine Agglutination sichtbar. Das Reagenz kann
im Röhrchentest verwendet werden.
Reagenz
Seraclone® Anti-s (MNS4) enthält als reaktiven Bestandteil monoklonale Antikörper
der Immunglobulinklasse IgG humanen Ursprungs. Sie werden aus
Zellkulturüberstand gewonnen und weisen für monoklonale Antikörper
charakteristische konstante Spezifität und Reproduzierbarkeit auf.
Seraclone® Anti-s (MNS4)
Klon P3YAN3
Zusätzlich benötigte Reagenzien und Materialen
• Pipetten (Tropfenvolumen 40-50μl)
• Aqua dest.
• Isotone Kochsalzlösung
• Anti-Human-Globulin (z. B. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804115 und 804130)
• MLB 2 ([REF], 805 205, 805 200)
• IgG-sensibilisierte Erythrozyten (z. B. Coombscell-E [REF] 816 030)
• Glasröhrchen
• Laborzentrifuge
Probenmaterial
Blutproben werden nach allgemeingültigen Entnahmeverfahren gewonnen. Es
sollten frische, nicht hämolytische Proben (Nativ-, EDTA- oder Citratblut)
verwendet werden. Wird für die Durchführung der Methode eine
Erythrozytensuspension benötigt, wird diese aus den Erythrozyten der
abzentrifugierten Blutprobe (z.B. 2 Min. bei 800 - 1000 x g) mit isotoner
Kochsalzlösung als Suspensionsmedium erstellt. Wir empfehlen, die zu
untersuchenden Erythrozyten vor Herstellung der Zellsuspension mindestens 2 mal
zu waschen; ggf. so lange, bis der Überstand klar ist. Stark lipämische, ikterische
oder mikrobiell kontaminierte Proben können zu unzuverlässigen Testergebnissen
führen.
|
186988/03 – 08/2012
Testdurchführung
Röhrchentest
1. Die zu untersuchenden Erythrozyten 3 bis 5%ig in isotoner Kochsalzlösung
suspendieren.
2. In einem entsprechend beschrifteten Röhrchen je 1 Tropfen Reagenz und 1
Tropfen der Erythrozytensuspension vorlegen.
3. 30 Minuten bei 37°C inkubieren.
4. Die Erythrozyten 3 mal mit isotoner Kochsalzlösung waschen. Den Überstand
vollständig dekantieren.
5. Dem Sediment 2 Tropfen Anti-Human-Globulin zufügen und mischen.
6. 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugieren.
7. Unter leichtem Aufschütteln auf Agglutination prüfen.
Röhrchentest, LISS Methode
1. Die zu untersuchenden Erythrozyten 3 bis 5%ig in isotoner Kochsalzlösung
suspendieren.
2. In einem entsprechend beschrifteten Röhrchen je 1 Tropfen Reagenz, 1 Tropfen
der Erythrozytensuspension und 2 Tropfen MLB 2 vorlegen.
3. 10 Minuten bei 37°C inkubieren.
4. Die Erythrozyten 3 mal mit isotoner Kochsalzlösung waschen. Den Überstand
vollständig dekantieren.
5. Dem Sediment 2 Tropfen Anti-Human-Globulin zufügen und mischen.
6. 20 Sekunden bei 800 - 1000 x g zentrifugieren.
7. Unter leichtem Aufschütteln auf Agglutination prüfen.
Eine positive und eine negative Kontrolle sollten bei allen Untersuchungen
mitgeführt werden (1).
Interpretation der Ergebnisse
Die Bewertung der Reaktionsstärken erfolgt analog den Vorgaben des Technical
Manual (2):
Reaktionsstärke
Agglutinationsbild
4+
Ein einziges Agglutinat. Keine freien Erythrozyten.
3+
Starke Reaktion. Einige große Agglutinate.
2+
Mittelgroße Agglutinate, keine freien Erythrozyten.
1+
Viele kleine Agglutinate innerhalb eines Hintergrunds freier
Erythrozyten.
+/Wenige makroskopisch erkennbare Agglutinate innerhalb
der Erythrozytensuspension. Zahlreiche mikroskopisch
erkennbare Agglutinate.
Homogene Erythrozytensuspension ohne erkennbare
Agglutinate.
Leistungsmerkmale und Grenzen der Methode
Negative Ergebnisse im indirekten Antihumanglobulin-Test sollten mit
antikörperbeladenen Testerythrozyten überprüft werden. Ein negatives Ergebnis
dieser Kontrolle lässt auf einen Fehler in der Testdurchführung oder auf einen
Reaktivitätsverlust des Reagenzes schließen.
Bei zweifelhaften Ergebnissen unklarer Ursache steht der Bio-Rad-Service (Tel.
06103-3130-611) für Rückfragen zur Verfügung.
Haltbarkeit
Nach Öffnung des Reagenzes ist das Produkt bei sachgemäßer Lagerung (2...8°C)
bis zum Ende der angegebenen Laufzeit haltbar. Die Laufzeit ist dem
Reagenzienetikett zu entnehmen. Bei beschädigten Fläschchen darf das Produkt
nicht mehr verwendet werden.
Warnhinweis und Vorsichtsmaßregeln
Eine Trübung oder andere sichtbare Veränderungen des Produktes können ein
Hinweis auf bakterielle Verunreinigung sein. In diesem Fall darf das Produkt nicht
eingesetzt werden, da die Ursache der Veränderung durch den Hersteller geklärt
werden muss.
Alle Techniken sind nach den Vorgaben des Herstellers anzuwenden. Jede
Abweichung von den Vorgaben des Herstellers liegt in der Verantwortung des
Anwenders. Abgearbeitete Tests müssen als Abfall der Gruppe B wie beschrieben
im „Merkblatt über die Vermeidung und die Entsorgung von Abfällen aus öffentlichen
und privaten Einrichtungen des Gesundheitsdienstes“ und der „Richtlinie für
Krankenhaushygiene und Infektionsprävention“, entsorgt werden. Durch die
biotechnologische Herstellung der humanen monoklonalen Antikörper ist das Risiko
einer Kontamination durch infektiöse Krankheitserreger nahezu ausgeschlossen.
Dennoch sollten alle Testreagenzien biologischen Ursprungs als potentielle
Überträger von Hepatitis, HIV oder anderen infektiösen Krankheitserregern
behandelt werden. Angemessene Sicherheitsvorkehrungen werden empfohlen.
Regelmäßige interne Qualitätskontrollen sollten gemäß den jeweiligen nationalen
Richtlinien (1), durchgeführt werden. Minimum eine positive und eine negative
Kontrolle sollten mitgeführt werden.
Literatur
(1) Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung
von Blutprodukten (Hämotherapie), Gesamtnovelle 2005, Deutscher Ärzte-Verlag
Köln
(2) Technical Manual, 15th edition, Sect. 1, American Association of Blood Banks
Schlüssel: Unterstrichen = Zusatz oder wichtige Änderung ◄= Entfernter Text
[FR]
Seraclone® Anti-s (MNS4)
Pour l´identification de l´antigène érythrocytaire s (MNS4)
[REF]
808 068
Application
Seraclone® Anti-s (MNS4) est utilisé pour le dépistage des caractéristiques de groupe
sanguin s.
Principe du test
Le principe du test est basé sur l´hémagglutination qui décèle l´antigène
correspondant des érythrocytes. Le groupe sanguin s est défini par la présence ou
l´absence des caractéristiques s sur les érythrocytes. L´antigène s réagit de façon
spécifique aux anticorps correspondants de Seraclone® Anti-s (MNS4).
L´agglutination met en évidence une réaction positive. Le réactif peut être utilisé pour
le test en tube.
Réactif
Le composant actif du réactif est issu de la culture in-vitro d’une lignée d’hybridome
humain qui secrète un anti s IgG. Ils présentent la spécificité et la reproductibilité
constante caractéristique des anticorps monoclonaux.
Seraclone® Anti-s (MNS4)
clone P3YAN3
Réactifs supplémentaires et ustensiles nécessaires
• Pipettes (volume par goutte 40-50µl)
• Eau destillée
• Solution saline isotonique
• Antiglobuline humaine (par ex. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804115 et
804130)
• MLB 2 ([REF] 805 205, 805 200)
• Erythrocytes de test sensibilisés à l´IgG Coombscell-E ([REF] 816 030)
• Tubes de verre
• Centrifugeuse de laboratoire
Echantillons
Les échantillons sanguins sont prélevés selon des méthodes généralement
reconnues. Utiliser des échantillons frais, non hémolytiques (sang natif, EDTA ou
citraté). Dans la mesure où la conduite du mode opératoire nécessite une suspension
d´érythrocytes, celle-ci est confectionnée à partir des érythrocytes de l'échantillon de
sang centrifugé (par ex. 2 min. à 800 - 1000 x g) avec une solution saline isotonique
comme milieu de suspension. Avant de préparer la suspension cellulaire, il est
conseillé de laver les érythrocytes de test à 2 reprises, voire autant de fois qu'il sera
nécessaire pour obtenir la limpidité du surnageant. Les échantillons fortement
lipémiques, ictériques ou présentant une contamination microbienne peuvent conduire
à des résultats de tests non fiables.
Mode opératoire
Test en tube
1. Mettre en suspension les érythrocytes à examiner dans une solution saline
isotonique de 3 à 5%.
2. Mélanger respectivement dans une tube adéquatement marquée 1 goutte de
réactif et 1 goutte de suspension d´érythrocytes.
3. Incuber pendant 30 minutes à 37°C.
4. Laver les érythrocytes 3 fois avec une solution saline isotonique. Décanter
ensuite intégralement le surnageant.
5. Ajouter au sédiment 2 gouttes d´antiglobuline humaine et mélanger.
6. Centrifuger pendant 20 sec à 800 - 1000 x g.
7. Observer l´agglutination en agitant doucement.
Test en tube, methode en LISS
1. Mettre en suspension les érythrocytes à examiner dans une solution saline
isotonique de 3 à 5%.
2. Mélanger respectivement dans une tube adéquatement marqué 1 goutte de
réactif, 1 goutte de suspension d´érythrocytes et 2 gouttes de MLB2 .
3. Incuber pendant 10 minutes à 37°C.
4. Laver les érythrocytes 3 fois avec une solution saline isotonique. Décanter
ensuite intégralement le surnageant.
5. Ajouter au sédiment 2 gouttes d´antiglobuline humaine et mélanger.
6. Centrifuger pendant 20 sec à 800 - 1000 x g.
7. Observer l´agglutination en agitant doucement.
Il convient d´inclure à chaque test un contrôle positif et négatif (1).
Interprétation des résultats
L´évaluation des forces de réaction s´opère conformément aux dispositions du
Technical Manual (2):
Force de
Agglutination
réaction
4+
Un agglutinat unique. Aucun érythrocyte libre.
3+
Réaction forte. Quelques agglutinats de grande dimension.
2+
Agglutinats de moyenne dimension, aucun érythrocyte
libre.
1+
Nombreux agglutinats de faible dimension sur un fond
d´érythrocytes libres.
+/Peu d´agglutinats macroscopiquement reconnaissables à
l´intérieur de la suspension d´érythrocytes. Nombreux
agglutinats reconnaissables au microscope.
Suspension d´érythrocytes homogène sans agglutinats
reconnaissables.
2 ml
[PRES] Conservé avec: < 0,1 % de NaN3
[ACT]
[IVD] Réactif pour usage diagnostique in vitro
Ne doit être utilisé que par le personnel de laboratoire formé à cet effet. Le [ACT]
figure sur l´étiquette. Les symboles utilisés sont conformes à la norme EN 980. Les
symboles non visés dans la norme EN 980 sont expliqués dans le texte.
Activité / Titre minimum
MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH
Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany
Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724
www.bio-rad.com, [email protected]
Performances et limites de méthodes
Il convient de vérifier à l´aide de cellules de test chargées d´anticorps les résultats
négatifs du test indirect à l´antiglobuline humaine. Si ce contrôle donne un résultat
|
186988/03 – 08/2012
négatif, ceci peut être dû à une erreur dans le mode opératoire ou bien à une perte
de réactivité du réactif. En cas de résultats douteux dont la cause ne serait pas
évidente, veuillez consulter le Bio-Rad-Service (Tél. +49-6103-3130-611) qui se tient
à votre disposition.
Stabilité
Une fois le flacon ouvert, le réactif peut être conservé dans des conditions
adéquates (2...8°C) jusqu´à la date de péremption indiquée. La durée de
stabilité figure sur l´étiquette du réactif. Si le flacon est endommagé, le produit
ne doit plus être utilisé.
Avertissements et précautions
Tout aspect turbide ou d'autres changements visibles du produit peuvent
indiquer une contamination bactérienne. Dans ce cas, ne pas utiliser le produit,
car le fabricant est dans l´obligation d´éclaircir la cause du changement de celuici.
Toutes les techniques doivent être appliquées conformément aux instructions du
fabricant. Toute dérogation aux instructions du fabricant relève de la responsabilité
de l´utilisateur. Les matériaux de tests utilisés doivent être évacués en application
des directives nationales respectives. Grâce à la production des anticorps
monoclonaux humains par des procédés biotechnologiques, le risque de
contamination par germes pathogènes infectieux est pratiquement exclu.
Cependant, tous les réactifs de test d´origine biologique doivent être considérés
comme étant potentiellement porteurs des virus de l´hépatite, du HIV ou d´autres
germes pathogènes. Il est conseillé de prendre les mesures de sécurité adéquates.
Il est recommandé d´effectuer en interne, au minimum un contrôle positif et un
contrôle négatif conformément aux directives nationales, par ex. (1).
Bibliographie
(1) Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung
von Blutprodukten (Hämotherapie), Gesamtnovelle 2005, Deutscher Ärzte-Verlag
Köln
(2) Technical Manual, 15th ed., Sect. 1, American Assoc. of Blood Banks
Clé : Souligner = Addition ou modification significative ◄= Effacement du texte
[ES]
®
Seraclone Anti-s (MNS4)
Para la detección del antígeno eritrocitario s (MNS4)
[REF]
808 068
2 ml
[PRES] Conservación: < 0,1 % de NaN3
[ACT]
Actividad / titulo minimo
[IVD] Reactivo para uso diagnóstico in vitro
Para ser utilizado exclusivamente por personal cualificado de laboratorio. El [ACT]
viene indicado en la etiqueta. Los símbolos se emplean de acuerdo con la norma EN
980. Los símbolos no contenidos en la norma EN 980 son explicados en el presente
texto.
Finalidad prevista
Seraclone® Anti-s (MNS4) se emplea para la detección de la propiedad del grupo
sanguíneo s.
Principio del test
El test se basa en el principio del test de hemaglutinación para la detección del
correspondiente antígeno eritrocitario. El grupo sanguíneo s es definido por la
presencia o ausencia de la propiedad s sobre los eritrocitos. El antígeno s reacciona
de manera específica con el correspondiente anticuerpo contenido en Seraclone®
Anti-s (MNS4). La reacción positiva es visible si se produce una aglutinación. Este
reactivo puede ser utilizado para el test en tubo de ensayo.
Reactivo
Seraclone® Anti-s (MNS4) contiene como componente reactivo anticuerpos
monoclonales de la clase de inmunoglobulina IgG de origen humano. Los
anticuerpos proceden del sobrenadante del cultivo celular y presentan
la
especificidad y reproducibilidad características de los anticuerpos monoclonales.
Seraclone® Anti-s (MNS4)
clon P3YAN3
Reactivos y materiales necesarios que no se suministran
• Pipetas (volumen de dispensación: 40-50μl)
• Agua destilada
• Solución salina isotónica
• Antiglobulina humana (p.ej. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804115 y 804130)
• MLB 2 ([REF], 805 205, 805 200)
• Eritrocitos de ensayo sensibilizados con IgG Coombscell-E ([REF] 816 030)
• Tubos de ensayo de vidrio
•
Centrifugadora de laboratorio
Muestras
Las muestras de sangre se obtendrán según los métodos generalmente válidos. Se
deben utilizar muestras frescas, que no presenten hemólisis (sangre nativa, con
EDTA o con citrato). Si para la ejecución del análisis se requiere una suspensión
eritrocitaria, ésta se preparará de los eritrocitos de la muestra de sangre centrifugada
(p. ej. 2 min. a 800 - 1000 x g) con solución salina isotónica como medio de
suspensión. Antes de preparar la suspensión celular, se recomienda lavar los
eritrocitos a analizar por lo menos 2 veces o hasta obtener un sobrenadante limpio.
Las
muestras
extremadamente
lipémicas,
ictéricas
o
contaminadas
microbiológicamente pueden dar lugar a resultados poco fiables.
Procedimiento
Test en tubo de ensayo
1. Suspender los eritrocitos que de desean analizar al 3-5% en solución salina
isotónica.
2. En un tubo adecuadamente rotulado verter 1 gota de reactivo y 1 gota de la
suspensión eritrocitaria.
3. Incubar durante 30 minutos a 37°C.
4. Lavar los eritrocitos 3 veces con solución salina isotónica. Decantar el
sobrenadante completamente.
5. Añadir 2 gotas de antiglobulina humana al sedimento y mezclar.
6. Centrifugar 20 segundos a 800 - 1000 x g.
7. Verificar la aglutinación agitando suavemente.
Test en tubo de ensayo con LISS
1. Suspender los eritrocitos que de desean analizar al 3-5% en solución salina
isotónica.
2. En un tubo adecuadamente rotulado verter 1 gota de reactivo, 1 gota de la
suspensión eritrocitaria y 2 gotas de MLB 2.
3. Incubar durante 10 minutos a 37°C.
4. Lavar los eritrocitos 3 veces con solución salina isotónica. Decantar el
sobrenadante completamente.
5. Añadir 2 gotas de antiglobulina humana al sedimento y mezclar.
6. Centrifugar 20 segundos a 800 - 1000 x g.
7. Verificar la aglutinación agitando suavemente.
Para todos los análisis se deberá efectuar paralelamente un control negativo y uno
positivo (1).
Interpretación de los resultados
La intensidad de reacción se evaluará de acuerdo con lo dispuesto en el Technical
Manual (2):
Intensidad de
Aglutinación
reacción
4+
Un solo aglutinado. Ausencia de eritrocitos libres.
3+
Fuerte reacción. Varios aglutinados grandes.
2+
Aglutinados medianos; ausencia de eritrocitos libres.
1+
Numerosos aglutinados pequeños sobre un fondo de
eritrocitos libres.
+/Unos pocos aglutinados visibles macroscópicamente en el
interior de la suspensión de eritrocitos. Numerosos
aglutinados visibles microscópicamente.
Suspensión eritrocitaria homogénea, sin aglutinados
perceptibles.
Características de funcionamiento y limitaciones del método
Los resultados negativos en el test indirecto de antiglobulina humana deben ser
verificados con células de ensayo cubiertas de anticuerpos. Un resultado negativo en
este control puede ser debido a un error en la ejecución del test o a una disminución
de la reactividad del reactivo.
En caso de resultados dudosos de causa desconocido póngase en contacto con
nuestro servicio Bio-Rad de atención al cliente (Tel. +49-6103-3130-611).
Estabilidad
Una vez abierto el reactivo, el producto puede ser conservado en condiciones
adecuadas (2...8°C) hasta la fecha de caducidad que se indica. La fecha de
caducidad viene indicada en la etiqueta del reactivo. No utilizar el producto si el vial
está dañado.
Advertencias y precauciones
Un enturbiamiento u otra alteración visible del producto puede ser indicio de
contaminación bacterial. En este caso no se debe utilizar el reactivo, ya que la
causa del alteración debe ser esclarecida por el fabricante.
Todas las técnicas se han de realizar de acuerdo con las instrucciones del
fabricante. El usuario es responsable de cualquier divergencia con respecto a tales
instrucciones. El material de ensayo ya usado debe ser eliminado de acuerdo con
las normativas nacionales relativas a la eliminación de residuos infecciosos. Gracias
a la producción biotecnológica de los anticuerpos monoclonales humanos, el riesgo
de contaminación por agentes infecciosos queda prácticamente descartado. No
obstante, todos los reactivos de ensayo de origen biológico deberán ser
considerados como potenciales portadores de hepatitis, HIV u otros agentes
patógenos infecciosos. Se recomienda adoptar las precauciones adecuadas. Se
deberán efectuar controles internos de calidad regularmente en conformidad con las
normas nacionales vigentes, p.ej. (1). Para todos los análisis se deberá efectuar
paralelamente como minimo un control negativo y un control positivo.
Referencias
(1) Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung
von Blutprodukten (Hämotherapie), Gesamtnovelle 2005, Deutscher Ärzte-Verlag
Köln
(2) Technical Manual, 15th ed., Sect. 1, American Association of Blood Banks
Clave: Subrayado = Adición o cambio significativo ◄= Texto borrado
[IT]
®
Seraclone Anti-s (MNS4)
Per l'identificazione dell’antigene eritrocitario s (MNS4)
[REF]
808 068
2 ml
[PRES] Conservato con : < 0,1 % de NaN3
[ACT]
Attività / titolo minimo
[IVD] Reagente per uso diagnostico in vitro
MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH
Industriestr. 1, D-63303 Dreieich, Germany
Tel.: +49-6103-3130-0, Fax: +49-6103-3130-724
www.bio-rad.com, [email protected]
|
186988/03 – 08/2012
Da utilizzare solo da parte di personale di laboratorio esperto ed addestrato. Il [ACT]
è riportato sull'etichetta. I simboli vengono utilizzati secondo la normativa EN 980. I
simboli non riportati nella normativa EN 980 sono descritti nel testo.
Finalità d'uso
Seraclone® Anti-s (MNS4) viene impiegato per la rilevazione dell’antigene eritrocitario
s.
Principio del test
Il test si basa sul principio di emoagglutinazione per individuare l'antigene eritrocitario
corrispondente. Il gruppo sanguigno s si definisce tramite la presenza o l'assenza
dell’antigene s sugli eritrociti. L'antigene s reagisce in modo specifico con l'anticorpo
corrispondente in Seraclone® Anti-s (MNS4). La reazione positiva è visibile se
avviene l'agglutinazione. Il reagente viene utilizzato per test in provetta.
Reagente
Seraclone® Anti-s (MNS4) contiene come componente reattivo anticorpi monoclonali
di classe immunoglobulinica IgG di origine umana. Deriva dal surnatante di colture
cellulari e presenta la specificità e la riproducibilità costanti caratteristiche degli
anticorpi monclonali.
Seraclone® Anti-s (MNS4)
clone P3YAN3
Reagenti supplementari e materiali necessari
•
Pipette (volume di dispensazione: 40-50 μl)
•
Acqua distillata
•
Soluzione salina isotonica
•
Antiglobuline umane (ad es. Anti-Human-Globulin Color [REF] 804115 e
804130)
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MLB 2 ([REF] 805 205, 805 200)
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Eritrociti IgG-sensibilizzati (ad es. Coombscell-E [REF] 816 030)
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Provette in vetro
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Centrifuga da laboratorio
Stabilità
Una volta aperto il flacone, il prodotto può essere conservato in condizioni
appropriate (2...8°C) fino alla data di scadenza indicata. La data di scadenza è
riportata sull'etichetta del reagente. Se i flaconi dovessero risultare danneggiati, il
prodotto non va più utilizzato.
Avvertenze e precauzioni
L’eventuale presenza di torbidità o altri cambiamenti visibili nel prodotto possono
essere indice di contaminazione batterica. In tal caso il prodotto non va utilizzato in
quanto spetta al produttore chiarire la causa della cambiamenti.
Tutte le tecniche vanno impiegate secondo le istruzioni del produttore. L’utilizzatore
è responsabile di qualsiasi deviazione da tali istruzioni. I materiali dei test utilizzati
vanno smaltiti conformemente alle rispettive normative nazionali vigenti. Grazie alla
produzione biotecnologica degli anticorpi monoclonali umani, il rischio di
contaminazione con agenti patogeni infettivi può essere quasi escluso. Tuttavia, tutti
i reagenti di origine biologica devono essere considerati come potenziali portatori di
epatite, HIV o altri agenti patogeni infettivi. Si consigliano adeguate misure
precauzionali. Controlli di qualità interni vanno condotti regolarmente in conformità
alle rispettive normative vigenti, ad es. (1). Dovrebbero essere utilizzati almeno un
controllo positivo e uno negativo.
Bibliografia
(1) Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung
von Blutprodukten (Hämotherapie), Gesamtnovelle 2005, Deutscher Ärzte-Verlag
Köln
(2) Technical Manual, 15th ed., Sect. 1, American Association of Blood Banks
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Materiale in esame
I campioni di sangue vanno prelevati secondo le procedure generalmente valide.
Devono essere impiegati campioni freschi, che non presentino emolisi (sangue
nativo, con EDTA o citrato). Se per il procedimento è necessaria una sospensione
eritrocitaria, questa viene preparata dagli eritrociti del campione di sangue
centrifugato (ad es. 2 minuti a 800 - 1000 x g) con soluzione salina isotonica quale
mezzo di sospensione. Si raccomanda di lavare gli eritrociti in esame prima della
preparazione della sospensione cellulare per almeno due volte o fino ad ottenere un
surnatante limpido. Campioni fortemente lipemici, itterici o con contaminazione
microbica possono dare risultati falsati.
Esecuzione del test
Test in provetta
1. Gli eritrociti in esame vanno sospesi al 3-5% in soluzione salina isotonica.
2. Dispensare in una provetta opportunamente contrassegnata 1 goccia di
reagente e 1 goccia di sospensione eritrocitaria.
3. Incubare per 30 minuti ad una temperatura di 37°C.
4. Lavare gli eritrociti 3 volte con soluzione salina isotonica. Decantare
completamente il surnatante.
5. Aggiungere 2 gocce di antiglobuline umane al sedimento e miscelare.
6. Centrifugare per 20 secondi a 800 - 1000 x g.
7. Verificare l'agglutinazione scuotendo leggermente.
Test in provetta, metodo in LISS
1. Gli eritrociti in esame vanno sospesi al 3-5% in soluzione salina isotonica.
2. Dispensare in una provetta opportunamente contrassegnata 1 goccia di
reagente, 1 goccia di sospensione eritrocitaria e 2 gocce di MLB 2.
3. Incubare per 10 minuti ad una temperatura di 37°C.
4. Lavare gli eritrociti 3 volte con soluzione salina isotonica. Decantare
completamente il surnatante.
5. Aggiungere 2 gocce di antiglobuline umane al sedimento e miscelare.
6. Centrifugare per 20 secondi a 800 - 1000 x g.
7. Verificare l'agglutinazione scuotendo leggermente.
Per ciascuna analisi vanno effettuati un controllo positivo e un controllo negativo (1).
Interpretazione dei risultati
La valutazione della forza di reazione viene eseguita secondo le istruzioni riportate
nel Technical Manual (2):
Forza di
Agglutinazione
reazione
4+
Un unico agglutinato. Nessun eritrocita libero.
3+
Reazione forte. Alcuni agglutinati di grandi dimensioni.
2+
Agglutinati di dimensioni intermedie; nessun eritrocita libero.
1+
Numerosi agglutinati di piccole dimensioni su uno sfondo di
eritrociti liberi.
+/Pochi agglutinati rilevabili macroscopicamente all'interno
della sospensione di eritrociti. Numerosi agglutinati
riconoscibili al microscopio.
Sospensione eritrocitaria omogenea, senza agglutinati
riconoscibili.
Caratteristiche delle prestazioni e limiti del metodo
Risultati negativi nel test di Coombs indiretto vanno verificati eseguendo un test con
emazie rivestite di anticorpi. Un risultato negativo in questo controllo può essere
dovuto ad un errore nell'esecuzione del test o ad una diminuzione di reattività del
reagente.
In caso di risultati dubbi con causa ignota è possibile contattare l'assistenza Bio-Rad
(Tel. +49-6103-3130-611) per chiarimenti.
MBio-Rad Medical Diagnostics GmbH
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186988/03 – 08/2012